Upload
hoangkien
View
226
Download
0
Embed Size (px)
Citation preview
06/01/2015 1
Program major de testare:
longevitate
Cartografierea efectelor pe termen lung asupra
sănătății:
Testarea celor mai promitatoare terapii impotriva
imbatranirii si a bolilor asociate pe scară largă la
șoareci în vârstă.
Longevitate : revolutia
• Descoperire revoluționară în 1980: 8 moduri de a extinde durata de viata a acestora [1]
• În 1993, o mutație a dublat durata de viata, in mare vitalitate [2]
• În 2003 mii de teste efectuate; aproximativ 10% prelungesc durata de viață. [3]
• În 2008, o mutație înmulțeste durata de viata de aproape 10 ori
06/01/2015 2
O revoluție s-a întâmplat în
nematozi ( C. elegans )
Nematozii si soareci nu
imbatranesc in acelasi fel
• Nematozii au un număr fix de celule: prelungirea duratei de viata a celulei este cu siguranță cheia • Șoarecii sunt mamifere și regenerare a țesuturilor este cu siguranță cheie
• Revoluția se apropie de soareci, dar câteva teste sunt efectuate. • Tratamentele de extindere a vietii la soareci cunoscute până acum functioneaza si la oameni (aspirină, metformin, metoprolol, rapamicină) • Modele genetice de extindere a vietii la soareci au fost găsite în familii umane procesul de îmbătrânire (Larron-pitici, FOXO-3A,-Akt 1)
Să efectuam mai multe teste de longevitate in paralel la soareci, in moduri care pot fi transpuse la om .
Major Mouse Testing Program
Revoluția longevitatii a
ajuns la șoareci și este
promițătoare pentru oameni
PAST
NOW
Prezentare generală,program de testare
06/01/2015 Major Mouse Testing Program 3
Locuri de muncă
Am comunicat cu un număr de cercetători și am identificat un grup de laboratoare
cu condiții cheie pentru animale și
experiență în teste durata de viata si
medicina regenerativa.
Aplicarea în studiile de
longevitate umana
Dacă vom începe programul nostru de testare în acest an
ne așteptăm să vedem impactul concret în mai puțin
de 10 ani.
Cronologie
Un set de teste de durata de viata va începe cu animale pre-imbatranite și
durează timp de 18 luni
Un alt set de teste are nevoie de creerea unei linii de soareci și va dura 38 luni
Rezultatele vor fi triplu verificate și reglate în moduri care pot fi transpuse la om. Cea mai importantă parte a rezultatelor va veni
în 5 ani după începerea testelor.
Buget
Costul estimat pentru 1000 teste diferite este de € 20 de
milioane.
Există, de asemenea, o corelație directă între
finanțare, numărul de teste și program.
Rezultatele așteptate
Pe baza experienței anterioare ne așteptăm la 100 rezultate pozitive din 1000 teste:
În nematozi, 10% din teste au fost pozitive (multe teste au fost efectuate)
La șoareci, ~ 10% (greu de estimat, s-au facut cateva teste; ITP + Spindler)
Beneficii:
1. Rezultatele trebuie să ofere o imagine de ansamblu cu privire la ceea ce prelungește viața.
2. Sperăm să obținem extensii de viață majore.
3. Sperăm că unele se aplică la oameni.
Ce să testam : intervenții sursă
06/01/2015 Major Mouse Testing Program 4
Primary sources
Observare Baza de date Durată de viață : 3359 extensii de viață raportate la rozătoare (114), nematode (2400), alte
Rezultatele la rozătoare sunt adesea neclare, dar promițătoare; confirmări suplimentare trebuie să se facă la soareci.
http://lifespandb.sageweb.org
Longevitatea BD: peste 1000 de intervenții
Baza de date enumeră gene umane, care sunt corelate statistic cu longevitatea; pentru multei o cauzalitate ar putea fi testata pe șoareci.
http://longevitydb.org/browse
Secondary sources
Diverse alte surse
Diferite baze de date similare au fost găsite. Sunt analizate numeroase forumuri relevante și liste de discuții. A început să circule o hârtie de cercetare a imbatranirii pentru a lista idei.
Grup Facebook: peste 300 de postari în prezent
Fiecare mesaj este o interventie potențiala de extinderea vietii pentru a fi testate la soareci.
https://www.facebook.com/groups/gerontodrugs
Numărul total al intervențiilor este imens. Analiza este în curs de a stabili prioritățile.
Ce să testam:tip de interventii
06/01/2015 Major Mouse Testing Program 5
Pentru variantele gasite in populatiile umane care sunt deja considerate ca favoriza o viață lungă si sănătoasă la oameni și care pot fi transpuse într-o terapie genica la soareci in varsta. Concept: dacă șoarecii traiesc mai mult și sănătos, se pare că într-adevăr varianta imbunatateste sanatatea la oameni și că o astfel de terapie genica ar fi eficientă la om de asemenea.
Variante genetice umane
De obicei in vivo și in vitro rezultatele de la șoareci, șobolani, nematozi sau muste de fructe au nevoie de confirmari robuste de durata de viata si sanatate .
Rezultatele cercetării fundamentale
Pentru tratamentele luate de populațiile umane, care sunt deja considerate ca favoriza o viață lungă si sănătoasă la om. Concept: dacă șoarecii traiesc mai mult și sănătos, se pare că într-adevăr, medicamentele imbunatatesc sanatatea la oameni.
Tratamente medicamentoase umane
terapii genetice la șoarece
diverse terapii la soareci
Baze de date Interventii
Program ansamblu
06/01/2015 6
Faza II 2 luni
Faza III 14 luni
Major Mouse Testing Program
1.5 m€ = 130 terapii ≈9 rezultate pozitive
11 m€ = 1300 terapii ≈90 rezultate pozitive
Faza IV 18 luni
Preparare
Echipamente
Testare 130
pana la 300
terapii
Confirmarea si
optimizarea
rezultatelor
Protocol
initiere la
oameni
Faza V 18 luni
38 luni
Faza I 1 an
Constituirea
echipelor, strângere
de fonduri
Numărul _ intervențiilor de testare depinde de finanțare
TESTELE ÎNCEP CU ȘOARECI DEJA IN VARSTA
2 luni 18 luni
Preparare
echipamente Testare 130
pana la 300
terapii
Confirmare si
optimizarea
rezultatelor
18 luni
TESTS STARTING WITH SETTING A MOUSE LINE
Protocol
initiere la
oameni
TODO: update budget
Faza III schema
06/01/2015 Major Mouse Testing Program 7
6 luni
Nastere 18 luni :
Inceputul
tratamentului
32 luni:
Deci, a extins durata de viata,
comparativ cu grupul mare de
control care a trăit în paralel?
Decizii pentru pasul urmator
14 luni
30 masculi
30 femele
Pentru cele mai bune rezultate pozitive ale
fazei III, fazei IV: validarea și reglarea la șoareci și șobolani în alte laboratoare +
studiu _ diverse efecte asupra
sănătății
Faza III a: pornind de la soareci tineri
Pentru majoritatea terapiilor,genetice si altele.
Faza III b:test real
Toate: medicamente,
gene, altele
18 luni
prep
arare
?
Organizare generala
8
Donatori
Echipa
Longevity Santé
Producatori soareci Facilități
Fonduri
Soareci
Rezultate
Major Mouse Testing Program 06/01/2015
Lista de sarcini actuala
06/01/2015 Major Mouse Testing Program
9
Identificarea și sortarea potențialelor intervenții Identificarea
surselor de finantare
Localizare laboratoare potrivite pentru muncă și
discutare termeni și condiții
Se calculează costurile de experimente (echipament &
personal)
Contactați potențialii investitori. Acorduri generale
Primirea sumei necesare pentru începerea proiectului
Rafinarea metodologie de
testare cu laboratoarele
Fonduri Negocieri detaliate
Astazi
Viitor
Work in progress…
Work in progress…
Work in progress…
Echipe si laboratoare
Laboratoare echipate cu cele mai bune facilitati pentru animale (cuști cu filtre individuale și ventilație) și de specialitate in medicina regenerativa si in cercetarea împotriva proceselor de îmbătrânire
•Arlan Richardson
– 40 ani de experiență în teste pe rozătoare pe termen
lung(compuși și terapii genetice)
–Laborator USA (Oklahoma)
•Alexandra Stolzing
– Medicina regenerativa si imbatranirea celulelor stem
– Centrul translational pentru medicina regenerativa
Leipzig University (Leipzig)
•Jean-Marc Lemaitre
– Medicina regenerativă pe celule de șoarece și umane
– (terapie genică si celule stem)
–Inserm in France (Montpellier)
06/01/2015 Major Mouse Testing Program 10
Echipa de voluntari
06/01/2015 Major Mouse Testing Program 11
Principalele persoane active :
Edouard Debonneuil, Rached Messaoudi, Valentin Socolov, Martin Dinov, Daniel
Krochmal, Maciej Michalak, Nicoleta Reinald
Temporar ajutati de: (Steve Coles), Johnny Adams, Daria Khaltourina, Matthew Scholtz, Didier Coeurnelle, Anton Kulaga, Paul Spiegel, Liz
Parrish, Alexandru Chircu, Alexandre Blanc, Dmitri Borisogliebsky… și multi alti cercetători și voluntari
on-line.
Mulțumiri speciale pentru echipele de voluntari:
▲Longévité & Santé,săptămânal pentru a
organiza proiectul : La Paillasse, Paris.
◄helpers from various countries and for various occasions
Va multumim pentru atentia acordata !
•Doriți să ajutati,
– Contact [email protected] propuneri ajutor specific
–Donatii at xxx
•At American Longevity Alliance if you are in the USA
•Ajutor specific : – Dacă sunteți specialist in testarea duratei de viata si sanatate la soareci , tehnica
terapie genică, sau încorporare medicamente, etc., va rugam sa nu ezitati sa ne dati feedback-ul și numele dumneavoastra
– Dacă știți unele surse potențiale de finanțare care credeți că ar putea corespundesau sunt interesați de petrecerea timpului în scris subvenții (ca și noi pe o bază fără scop lucrativ), vă rugăm să nu ezitați să ne sugerati
– Dacă sunteți interesat în prezentarea proiectului la o conferință sau în traducerea diapozitivelor într-o altă limbă vă rugăm să ne contactați.
06/01/2015 Major Mouse Testing Program 12
Apendice
•Listă de terapii pentru a fi testate la soareci
•Tehnici de terapie cu o genă
•Alte
06/01/2015 Edouard Debonneuil -- Mouse Lifespan
Fast Track project 13
Privire de ansamblu intervenții detaliate
•Details on interventions – a number of slides
06/01/2015 Major Mouse Testing Program 15
Astazi sunt mai putin de 10 teste reale pe an. Obiectivul nostru: 1000 teste in mai putin de 5 ani
•În nematozi_ 10% din mii de teste au fost pozitive
•La soareci_ de asemenea, aproximativ 10% [5/67 de Spindler.S _ 5/15 teste de ITP_ 1-2 în comun]:
•Other results being checked in rodents (fullerenes)
06/01/2015 Major Mouse Testing Program 16
Everolimus:in curs de testare pe vârstnici
(consolidarea vaccinului împotriva gripei)
Metformina: scăderea mortalității confirmat la
om
•Intervențiile programului de testare_ Statele Unite ale Americii: - NDGA (masculi_ + 10% duratei de viata si sanatate) •- Rapamicină (bărbați_ femei și_ + 10-25%) - acarboza (masculi_ + 22%) •- Aspirina (masculi_ + 10%) - α-Estradiol (masculi_ + 10%)
Aspirina: mortalitate mai scăzută confirmat la om (80 mg / zi_ ≥5 ani)
Rezultate asteptate
06/01/2015 Major Mouse Testing Program
17
Descoperirile la soareci au un potențial enorm _ duc la progrese in domeniul sanatatii pe termen lung la om
Declanșarea unei schimbari de mentalitate la toate nivelurile societății Biologie aplicată de longevitate este viitorul", având în vedere numeroasele terapii care previn inverseaza
/opresc procesele de îmbătrânire Putem obține extensii de viață de câteva ori la șoareci?
1
Un nou domeniu pe termen lung pentru sanatate, industria farmaceutică
Descoperirea unor noi aplicații ale medicamentelor existente privind îmbătrânirea umana _ sănătatea pe termen lung
2
O ruptură in știința pentru prelungirea duratei de viață
Ghid de cercetare longevitate prin ceea ce extinde durata de viata si sanatate intr-adevar. Evidențierea mecanismelor care stau la baza.
În legătură cu statisticile la om_ speram ca unele rezultate sa poata fi aplicate, probabil, în mai putin de
cinci ani.
3
Referinte
06/01/2015 Major Mouse Testing Program
18
[1] Klass MR (1983). "A method for the
isolation of longevity mutants in the
nematode Caenorhabditis elegans and
initial results". MECHANISMS OF
AGEING AND DEVELOPMENT 22 (3-
4): 279–286. PMID 6632998
[2] Kenyon C, Chang J, Gensch E,
Rudner A, Tabtiang R (1993). "A
C. elegans mutant that lives twice
as long as wild type". Nature
(journal) 366 (6454): 461–
464. PMID 8247153
[4] Ayyadevara S, Alla R, Thaden
JJ, Shmookler Reis RJ (2008).
"Remarkable longevity and stress
resistance of nematode PI3K-null
mutants". AGING CELL 7 (1): 13–
22. PMID 17996009
C elegans revoluție longevitate
Soarece viitoarea revoluție in longevitate
Martin-Montalvo A, Mercken EM, Mitchell SJ,
Palacios HH, Mote PL, Scheibye-Knudsen M,
Gomes AP, Ward TM, Minor RK, Blouin MJ,
Schwab M, Pollak M, Zhang Y, Yu Y, Becker
KG, Bohr VA, Ingram DK, Sinclair DA, Wolf
NS, Spindler SR, Bernier M, de Cabo R (2013).
Metformin improves healthspan and lifespan in
mice. NAT COMMUN. 4:2192. PMID 23900241
Spindler SR, Mote PL, Li R,
Dhahbi JM, Yamakawa A, Flegal
JM, Jeske DR, Li R, Lublin AL
(2013). β1-Adrenergic receptor
blockade extends the life span of
Drosophila and long-lived mice.
AGE. PMID 23314750
Harrison, D. E., Strong, R., Sharp, Z. D.,
Nelson, J. F., Astle, C. M., Flurkey, K.,
Nadon, N. L., Wilkinson, J. E., Frenkel, K.,
Carter, C. S., Pahor, M., Javors, M. A.,
Fernandez, E. and Miller, R. A. (2009)
Rapamycin fed late in life extends lifespan
in genetically heterogeneous mice.
NATURE 460:392-395. PMID 19587680
Bartke A, Brown-
Borg H (2004). Life
extension in the dwarf
mouse. CURR TOP
DEV BIOL. 63:189-
225. PMID 15536017
[3] Lee SS, Lee RY, Fraser
AG, Kamath RS, Ahringer
J, Ruvkun G (2003). A
systematic RNAi screen
identifies a critical role for
mitochondria in C. elegans
longevity. NAT GENET.
PMID 12447374
Un exemplu: transpunerea rs9330200 la soareci
rs9330200 este o variantă a unei gene la om care codifică proteina tubulinei beta4b. Varianta corespunde cu un "T la un loc. Acesta a fost găsit în Framingham Heart Study_ la cetățeni americani_ ca cei cu doua copii ale genei T au riscuri cardiovasculare mai mici_ riscurile de cancer si mai mici și riscuri de deces prematur mai mici decat la altii _ intr-un mod foarte foarte foarte ... foarte semnificativ statistic (p_value = 6E-53)
referință: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3592948/
Șoarecii de laborator au aceeași genă! (ortolog), indicând că aceasta are aceeași funcție la soareci. Firește că au o C_ nu un "T. De aceea_ dorim să oferim același varianta: intr-un mod foarte concret_ parte a genei la soareci de laborator este "GCCGCATGTCTATGAAGGAGGTGGACGAACAGATGCTTAATGTCCAAAACA"_ scopul este să-l înlocuiască în GCCGCATGTCTATGAAGGAGGTGGATGAACAGATGCTTAATGTCCAAAACA folosind tehnologii CRISPR în cazul în care ii face sa traiasca mai mult ... (imbunatateste sanatatea lor. _ etc), atunci este confirmare probabil că funcționează la oameni ...
Scopul este de a testa rs933020200, precum și multi alti candidați (avem mai mult de 1400!). Ce va veni originar din statisticile la om _ este confirmată in testarea durata de viata si sanatate soareci ar trebui să aibă șanse bune sa functioneze la _ om destul de probabil_ în cazul în care proiectul nu este oprit particular,
_ In 5 ani de acum unele persoane (intai probabil pacienții și batranii ) vor începe să faca terapie genică _ vor fi monitorizate pentru a verifica dacă este bine pentru sanatatea lor_
_ potențial în 10 ani va deveni frecvent să facem aceste terapii genetice _ pentru a trai mai mult sănătos
06/01/2015 Major Mouse Testing Program 20
Terapia genică la bătrânețe: Privire de ansamblu
•La Șoareci in varsta bază non-transgenica (18 lună) •Schimbarea ADN-ul lor •Prin injectarea unui virus adeno-asociat (AAV) conținând gena_ la vârsta de 18 luni •Eficacitate scăzută (trebuie să găsească drumul în celulele _ în nucleul). •Transpunerea scăzut la om (aceasta este "virus" și schimba "definitiv") •Exprimând Temporar un mesaj genetic •Prin injecție bilunar de lyposomes care conțin minicercuri_ incepand de la varsta de 18 luni •Totusi eficacitate scăzută (trebuie să găsească drumul în celulele) •Transpunerea ridicat la om (lyposomes_ schimbarea temporară) •terapii la gena care ar trebui să vizeze țesuturi specifice (celule sanguine_ ficat ...) •Posibilități de a fi mult mai eficient
•Bazat pe o linie șoarece transgenic 06/01/2015 Major Mouse Testing Program 21
Schimbare ADN la varsta de 18 luni
•Prin doar o singură injecție de asociate adeno-Virus ('AAV')
•Aceste virusuri încorporeaza o parte a ADN-ului în ADN-ul recepient pe care il infecta.
•Unele dintre acestea au fost selectate pentru a fi utilizate științific în ultimele decenii să se aplice la diferite organe: AAV1_ AAV2..AAV9
•Eficiența este scăzută (acestea trebuie să intre în celulă _ nucleul)
•În timp ce vorbim despre viruși și modificări genetice definitive_ traducerea la oamenii nu pare să se dezvolte usor _ perspectivă pe termen scurt
06/01/2015 Major Mouse Testing Program 22
TODO: update in English based on wikipedia/other
Exprimare temporala a unui mesaj genetic
•Minicercuri purtate de vectori liposomali
–Dfdf
•dfdfd
06/01/2015 Major Mouse Testing Program 23
TODO: update in English based on wikipedia/other
Linie de soareci sensibila la medicamente
06/01/2015 Major Mouse Testing Program 24
TODO: update in English based on
http://www.clontech.com/US/Products/Inducible_Systems/Protein