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PRUEBAS SEROLOGICAS
DR. HECTOR A. FERNANDEZ ALCARAZDR. HECTOR A. FERNANDEZ ALCARAZ
PEDIATRIA ESPECIALIZADAPEDIATRIA ESPECIALIZADA
PRUEBAS SEROLOGICAS DE ACTUALIDAD:
E.L.I.S.A.
WESTERN BLOT.
R.I.A.
INMUNOFLUORESCENCIA
E.L.I.S.A.Antígenos sobre unaplaca de plástico.
Placa de plástico.
Unión Ag-Ac-Anti-Ac/UNIDO A ENZIMA
Enzima
Anticuerpos del paciente
Anti-inmunoglobulinas ligadas a enzimas
Sustrato
INMUNOLOGIA
WESTERN BLOT o MANCHA DEL OESTE.- Las muestras de antígeno se someten a una electroforesisen un gel de poliacrilamida, las moléculas resueltas se transfieren electroforéticamente a una membranade nitrocelulosa. La mancha se trata con un anticuerpo específico, se lava y se agrega el conjugado radiomarcadopara detectar los anticuerpos unidos a la mancha. Las bandas se visualizan mediante autorradiografía.
GEL DE SEPARACION TANQUE DE MANCHADO
Transferir pépt idos a lalámina de Nitrocelulosa
(-)
(+)
Pépti dos separados
Antígenos
Añadir anticuerpo, lavaragregar conjugado
radiomarcado
Se revela y sefija y se visualizan
las bandasde antígenos.
(-)
(+)
AUTORRADIOGRAFÍA
INMUNOLOGIA
INMUNOFLUORESCENCIA DIRECTA.- Los antígenos de IgG (rojos), están pegadosal tejido renal, los anti antiguerpos IgG de color verde se marcan con fluoresceina(color amarillo), estos se pegan a los antígenos y la reacción positiva se observa en microscopía de lus U.V.
INMUNOFLUORESCENCIA DIRECTA
Tejido renalcon depósitosde IgG.
Tejido renalcon depósitosde IgG.
IgG
IgG
IgG
IgGAdición de Anti-IgG
marcada con fluoresceina.
Tejido renal con depósitosde IgG del mismo paciente
Fluorescencia positivaal microscopio.
R.I.A.Antígenos sobre unaplaca de plástico.
Placa de plástico.
Anticuerpos del paciente
Anti-Anticuerpos marcadosradioactivamente
Unión Ag-Ac-Anti-Ac/radioactivo
INMUNOLOGIA
R.I.A. (RADIOINMUNO ENSAYO).- El antígenoazul está pegado a una placa de plástico, losanticuerpos de color azul verde, se tratan con radioactividad y se detectan en contador de radiación
GRACIAS