AISLAMIENTO DE COMPUESTOS BIOACTIVOS DE Lippia Graveolens
AISLAMIENTO DE COMPUESTOS BIOACTIVOS DE Lippia GraveolensMendoza
Das S. y Mora Mora M.E.
Facultad de Ciencias Qumicas/ Centro de Investigacin y Estudios
de Posgrado
Universidad Autnoma de Quertaro
RESUMEN
Un extracto butanlico del organo (lippia graveolens) proveniente
de Puebla se analiz por medio de cromatoplacas, con la finalidad de
saber si se podan separar los compuestos de dicho extracto. Cabe
mencionar que el extracto ya ha sido objeto de estudio y se demostr
que este posee propiedades antioxidantes y antimicrobianas, de ah
la intencin de tratar de separar los compuestos responsables de
estas propiedades.
Mediante los anlisis practicados al extracto en cromatoplacas se
determin un sistema de disolventes en el cual s poda haber
separacin de compuestos, por lo que se procedi a usar el
cromatgrafo de lquidos para as obtener compuestos puros.
En el cromatgrafo de lquidos a su vez se probaron distintos
sistemas de disolventes para encontrar el ms apropiado para la
separacin, esto se hizo en columnas analticas. Una vez determinadas
las condiciones ideales de separacin y probado la obtencin de
compuestos puros, se procedi a utilizar una columna preparativa
para obtener la mayor cantidad del compuesto puro.
Los cromatogramas muestran el aislamiento de compuestos puros
(dos), por lo que se cumpli con el objetivo.
INTRODUCCIN
Organo es el nombre comn para ms de sesenta especies de plantas
con aroma y sabor caractersticos. La mayora pertenece a las
familias Lamiaceae, gnero Origanum y Verbenaceae gnero Lippia. El
organo europeo corresponde a Origanum sp. y el mexicano a Lippia
sp. Dentro de los organos comercialmente ms conocidos se encuentran
el O. vulgare (organo griego), O. Onites (organo turco) L.
graveolens y L.berlandieri (organo mexicano) (Kintzios, 2002).
Lippia graveolens es la especie de organo ms comercializada en
Mxico, desde la antigedad Lippia graveolens se ha utilizado como
condimento y hierba curativa y sigue dicho patrn en la
actualidad.
En cuanto a estudios taxonmicos sobre el organo, los trabajos
que se han llevado a cabo han sido en su mayora sobre el recurso
silvestre, casi todos relacionados con aspectos de inventario,
rendimiento de hoja seca, as como modelos para cuantificar y
predecir la produccin (Vzquez, 1991)
Se ha determinado que los flavonoides (compuestos fenlicos) son
los compuestos que ms abundan en Lippia graveolens (Martnez, 2004).
Un punto de inters en los compuestos fenlicos es su propiedad de
evitar o retardar la oxidacin lipdica (unin del oxgeno a los lpidos
formando radicales libres que provocan alteraciones qumicas). La
oxidacin de lpidos puede jugar un papel importante in vivo ya que
interviene en enfermedades del corazn, arteriosclerosis, cncer y en
el proceso de envejecimiento (Jadhav y col., 1996).
Considerando que en los ltimos aos el organo europeo ha
desplazado al organo mexicano en el mercado internacional, un
estudio sistemtico y multidisciplinario de Lippia graveolens podra
conferirle un valor agregado, adems de abrir la posibilidad de
comercializar no slo las hojas o el aceite esencial sino tambin
productos derivados de los extractos polares.
DESARROLLO EXPERIMENTAL
Cromatografa en capa fina
Con capilares se tom una pequea muestra del extracto de Lippia
graveolens y se aplic en la cromatoplaca. La cromatoplaca se coloc
dentro de una cmara de vidrio a la cual se le adicionaron
previamente una mezcla de solventes dependiendo de las
caractersticas polares de la muestra (el solvente no deba tocar los
puntos de aplicacin para evitar disolucin de la muestra),
posteriormente la placa se eluy, se retiro y se sec. Despus se
revel con luz ultravioleta y sulfato crico (al revelar con sulfato
crico se requiere calentamiento de la cromatoplaca en una
parrilla).
Purificacin de los principios activos
La separacin de los constituyentes individuales de las
fracciones activas se realizar utilizando cromatografa de lquidos
de alta eficiencia (HPLC). El primer paso ser un ensayo con
columnas analticas y una vez encontradas las condiciones ideales se
utilizarn columnas preparativas para aislar los compuestos
obtenidos.
La pureza de los compuestos se verificar mediante cromatografa
en capa fina.
DISCUSIN DE RESULTADOS
En anlisis cromatogrfico se observan tres elementos, el primero
la fraccin butanlica del extracto de organo (F4), donde se ve la
existencia de dos compuestos dentro de esa fraccin, tambin se ve el
pico nueve (P9), una sola mancha, lo que indica un compuesto puro,
y por ltimo, el pico diez (P10) el otro compuesto puro que se logr
obtener (figura 1).
Figura 1
El cromatograma (figura 2) muestra claramente la separacin de
dos picos(los dos ms grandes), de los cuales el de mayor longitud
(pico 9) tuvo un tiempo de retencin de 22.3 minutos, mientras que
el pico 10 tuvo un tiempo de retencin de 23.7 minutos, el hecho de
que se distingan dos picos bien definidos indica que se lograron
separar dos compuestos puros, cada uno se recolect en un matraz
erlenmeyer distinto.
Figura 2
CONCLUSIONES
A travs de varios ensayos por intentar separar uno o ms
compuestos puros del extracto butanlico de Lippia graveolens
(organo), se lograron obtener dos, dicho resultado se verific con
dos tcnicas apropiadas en la distincin de compuestos puros de
impuros, las cuales fueron cromatografa en capa fina y cromatografa
de lquidos, por lo que la veracidad en la obtencin de dos
compuestos puros se respalda en los anlisis de las dos tcnicas
cromatogrficas.
Con el aislamiento de compuestos bioactivos se brinda la
oportunidad para que sea identificada la estructura de estos, el
hecho de conocer su estructura permite compararla con la de
compuestos ya conocidos que poseen propiedades antioxidantes y
antimicrobianas. Una vez realizados dichos ensayos y obtenido
resultados positivos se tendrn dos puntos importantes: el primero
la obtencin de dos estructuras (con propiedades antioxidantes y
antimicrobianas) que permitan compararlas con las ya conocidas y en
caso de ser distintas se abrir un nuevo punto de investigacin, y el
segundo ser conferirle un valor agregado al organo, con la
finalidad de lograr un mayor consumo y por lo tanto una mayor
comercializacin.
BIBLIOGRAFA
Jadhav, S.; Nimbalkar S.S.; Kulkarni A.D.; Madhavi D.L.. In Food
Antioxidants. 1a edicin. Ed. Dekker. New York: 5-10. 1996
Kintzios S.E.. Profile of the multifaceted prince of the herbs.
1a edicin Ed. Spiridon. USA: 2-8. 2002
Martinez Rocha, A.. Determinacin de compuestos fenlicos y
actividad antioxidante de Lippia graveolens (verbenaceae)
procedentes de los estados de Quertaro, Puebla y Guanajuato.
Universidad Autnoma de Quertaro. Tesis para obtener el ttulo de
Licenciado en Biologa. 2004
Vzquez, Cota J.. Propagacin vegetativa de organo por medio de
enraizamiento de estacas. Estado actual del conocimiento sobre el
Organo en Mxico.Documento Presentado en la Primera Reunin Nacional
sobre Organo. INIFAP-CIFAP-B.C.S. Academia Nacional de Ciencias
Forestales. Ed. Melndez. Bermejillo, Dgo.,.. Mxico: 41-42.1991
