Reporte 1metodos Generales de Bacterologia

7/25/2019 Reporte 1metodos Generales de Bacterologia

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Universidad Autnoma de Nayarit

Unidad Acadmica de Ciencias Qumico Biolgicas yFarmacuticas

Q.F.B.

Bacteriologa Clnica

Prctica No. 1

todos !enerales de Bacteriologa

Docente:Q.F.B Dora Liliana Luna Vzquez

Equipo No. 4Integrantes:

Arroo Lira Arlette !ua"alupe.

#u$io %rtiz &argarita.

'nc(ez !onzlez Brigette.

"# $emestre %Clnicos&

Tepic Nay. 21/Febrero/2008


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'($U)*A+,$.

%B'E#VA)I%NE'.

&e"ios Inocula"os.


Agar 'angre Agar &ac)on*e

Agar 'a$orau" Agar 'al+&anitol


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,a$la "e resulta"os "e tinci-n gra

Agar -magen ,servaciones

acCon/ey

Los resulta"os o$ser/a"os 0ueron$acilos gra positi/os

$angre

Los resulta"os "e la o$ser/aci-n alicroscopio 0ueron cocos granegati/os

,a$la "e resulta"os "e prue$as $ioqu1icas

Pruea -magen ,servaciones

0)-!('

Apareci- un /ire color aarillo en el0on"o "el tu$o 23A56 lo que nosin"ica que 0ue lactosa negati/o glucosa positi/o7 a"es "e (a$erpro"ucci-n "e aci"o sul08rico.

'Al agregar el ro9o "e etilo ca$ioa una coloraci-n ro9a "an"o por lo

tanto un resulta"o positi/o a #&

P

Al agregar el al0a na0tol 3%apareci- una coloraci-n /er"e por lotanto "an"o un resulta"o negati/o aV;

C-*'A*, +($-,N$

La re/isi-n a


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)-A

Dio negati/a a LIA>a que el tu$o no tu$o ning8n /ire"e color solo la presencia "e unpoco "e precipita"o negro.2resulta"o espera"o pico "e 0lauta

ro9o5

U'(Au$o un ca$io "e /ire en el tu$oa rosa e?icano6 lo cual nos in"icaque es positi/a.

FA+

Al agregar el Fe)l@ la super0icie "elpico too una coloraci-n /er"e locual nos in"ica un resulta"opositi/o "e la 0enilalanina"esainasa

,a$la "e resulta"os "e la DNAsa la sensi$ili"a" a anti$i-ticos.

Pruea -magen ,servaciones

+NAsa ;ositi/a

$ensiilidad aAntiiticos

;olii?ina #esistentealo enor

No/o$iocina 'ensi$le.alo aor



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+-$CU$-2N)on $ase en el anlisis "e resulta"os consi"eraos que las uestras pro$leacorrespon"en a S. aureus 2tu$o 45 P. mirabilis 2tu$o 56 a continuaci-n se"iscute el porque:

S. aureus3tuo 45.)onsi"eraos que el icroorganiso pro$lea "el tu$o 4 es S. aureus "e$i"o aque:

En el e"io Agar sangre se o$ser/aron colonias re"on"as6 pequeCas6con/e?as6 a"es "e un (alo que nos in"ico +(e-lisis.

En el e"io Agar sal anitol se o$ser/o 0erentaci-n "el anitol e"ianteel ca$io "e color "e ro9o a aarillo6 caracter1stica "istinti/a "e S. aureus. En el e"io Agar &)3 no se o$ser/o creciiento6 "e$i"o a que este e"ioin(i$e el creciiento "e organisos gra 25 en especial esta0ilococos enterococos6 por la acci-n "e las sales $iliares en co$inaci-n con el cristal/ioleta.

Al realizar la tinci-n !ra a partir "e una colonia caracter1stica o$teni"a "elAgar sangre se o$ser/aron cocos gra 25.

A"es "e que en la prue$a "e resistencia a anti$i-tico presentosensi$ili"a" a No/o$iocina resistencia a polii?ina.

En la prue$a "e la DNAsa o$tu/ios un resulta"o negati/o6 posi$leente

por ca"uci"a" "el e"io6 sin e$argo el resulta"o espera"o era DNAsa positi/o.;or 8ltio6 en Agar 'a$ourau"6 ta$i=n creci- por la utilizaci-n "e peptona "igesti/o pancretico 2$ases nutrientes "el e"io57 pese a que este e"io esrecoen"a"o para el culti/o creciiento "e (ongos. El creciiento 0ue 0acti$lea que para que "ic(o e"io sea selecti/o para (ongos so$re $acterias se le "e$eaCa"ir cloran0enicol 26G gL5 ciclo(e?ii"a 26G gL5.

P. mirabilis3tuo 65.)onsi"eraos que el icroorganiso pro$lea "el tu$o es P. mirabilis "e$i"o aque:

'e se$r- 8nicaente en Agar &)3 la uestra "el tu$o 4 en con9unto conla uestra "el tu$o 7 o$ser/n"ose creciiento "e colonias gran"es6 re"on"as6planas6 creosas con un olor 0ecaloi"e intenso. Este e"io esta "iseCa"oespec10icaente para aislaiento "e organisos pertenecientes a la 0ailiaEnterobacteriaceae0ora"a por $acilos !ra 2+5. > al realizar la tinci-n !ra se"eostr- la presencia 8nicaente "e $acilos gra 2+5.



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Las colonias utiliza"as para las prue$as $ioqu1icas se toaron "el Agar &)3. Alo$ser/ar las reacciones "e las prue$as $ioqu1icas utiliza"as en esta practica coparar con la $i$liogra01a encontraos que P. mirabilis pro"uce los siguientesresulta"os en:

C-*'A*,. ;rue$a utiliza"a para la i"enti0icaci-n "e la 0ailiaEnterobacteriaceae "e icroorganisos gra 2+5. En el cual se o$ser/o un /ira9eazul6 el cual in"ica que la prue$a es positi/a.

)-A. ;ro"uce un color anaran9a"o en to"o el e"io6 "e$i"o a la"esainaci-n "e la lisina7 este pro"ucto "e color naran9a se co$ina con elin"ica"or "e p p8rpura "e $roocresol para pro"ucir un color ro9o caracter1sticoen el pico "e 0lauta. Lo cual in"ica "esainaci-n positi/a "e la lisina6 propie"a"caracter1stica "e Proteus y Providencia.

U'(A$A. El in"ica"or "el ion (i"rogeno ro9o "e 0enol "euestra lapro"ucci-n "e ureasa por el genero Proteus6 esta acti/i"a" enzitica se utilizapara "i0erenciar los icroorganisos Proteus "e otros ie$ros "e la 0ailiaEnterobacteriaceae. El resulta"o positi/o se e/i"encio por el /ira9e a rosae?icano.

0)-!)('. Los sustratos eta$oliza"os en esta prue$a periten"i0erenciar g=neros o especies "e la 0ailia Enterobacteriaceae. 'e o$ser/oprecipitaci-n "e


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'7P.#o9o "e etilo 2#&5: "eterina la capaci"a" "e un icroorganiso para pro"ucir antener esta$les los pro"uctos 0inales ci"os a partir "e la 0erentaci-n "e laglucosa. Esta prue$a aporta caracter1sticas /aliosas para la i"enti0icaci-n "eespecies que pro"ucen ci"os 0uertes a partir "e glucosa. ,o"os los ie$ros "e

las Enterobacteriaceae, son por "e0inici-n6 0erenta"ores "e la glucosa6 a queP. mirabilis pertenece a las Enterobacteriaceae nuestro resulta"o positi/o escongruente con lo propuesto en la $i$liogra01a.Voges+;ros*auer: esta prue$a "eterina la capaci"a" "e algunosicroorganisos para pro"ucir un pro"ucto 0inal neutro6 aceto1na6 a partir "e la0erentaci-n "e la glucosa. > puesto que la prue$a "e ro9o "e etilo 2pro"ucci-n"e ci"os5 resulto positi/a6 nuestro resulta"o negati/o en V; es congruente6 aque "e$i"o a que se inoculo en el iso tu$o s-lo se reparti- en "os porcionespara realizar estas prue$as in"epen"ienteente6 no po"eos tener a$osresulta"os positi/os.

C,NC)U$-2N($

)on $ase en el anlisis "e resulta"os la $i$liogra01a consulta"a concluios quelos icroorganisos presentes en las uestras correspon"en a S. aureus P.mirabilis

A"es6 pu"ios rea0irar que conocer los 0un"aentos "e los e"ios "eculti/o6 la tinci-n !ra las prue$as $ioqu1icas nos au"an a la correctai"enti0icaci-n caracterizaci-n "e icroorganisos presentes en una uestrapro$lea.Estos icroorganisos tienen iportancia cl1nica a que S. aureus es una$acteria que se encuentra en la piel 0osas nasales "e las personas sanas6 causagran /arie"a" "e in0ecciones6 "es"e in0ecciones enores "e la piel a$scesoscutneos (asta en0ere"a"es que pue"en poner en peligro la /i"a cooneuon1a6 eningitis6 en"ocar"itis6 s1n"roe "el s(oc* to?ico 2'',5 sepsis. P.mirabilises un pat-genosresponsa$les "e uc(as in0ecciones "el tracto urinario6pro"ucien"o las in0ecciones "e tipo oportunista.

CU($*-,NA'-,

1.8 e9:lica el ;undamento de los medios em:leados en esta :rctica.

A!A' $A) AN-*,)'e trata "e un e"io altaente selecti/o "e$i"o a su altaconcentraci-n salina. Los esta0ilococos coagulasa positi/a (i"rolizan el anitolaci"i0ican"o el e"io7 las colonias aparecen ro"ea"as "e una zona aarilla$rillante. Los esta0ilococos coagulasa negati/os6 presentan colonias ro"ea"as "euna zona ro9a o p8rpura. Las colonias sospec(osas6 se repicarn en un e"io sine?ceso "e cloruro "e so"io para e0ectuarles6 posteriorente6 la prue$a "e lacoagulasa.

http://es.wikipedia.org/wiki/Pat%C3%B3genohttp://es.wikipedia.org/wiki/Aparato_urinariohttp://es.wikipedia.org/wiki/Pat%C3%B3genohttp://es.wikipedia.org/wiki/Aparato_urinario


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En el e"io "e culti/o6 el e?tracto "e carne la pluripeptona6 constituen la 0uente"e car$ono6 nitr-geno6 /itainas inerales6 el anitol es el (i"rato "e car$ono0erenta$le6 el cloruro "e so"io 2que se encuentra en alta concentraci-n5 es elagente selecti/o que in(i$e el "esarrollo "e la 0lora acopaCante6 el ro9o 0enol esel in"ica"or "e p. Las $acterias que crecen en un e"io con alta concentraci-n

"e sal 0erentan el anitol6 pro"ucen ci"os6 con lo que se o"i0ica el p "ele"io /ira el in"ica"or "e p "el color ro9o al aarillo. Los esta0ilococos crecenen altas concentraciones "e sal6 pue"en o no 0erentar el anitol. Losesta0ilococos coagulasa positi/a 0erentan el anitol se /isualizan coocolonias aarillas ro"ea"as "e una zona "el iso color. Los esta0ilococos queno 0erentan el anitol6 se /isualizan coo colonias ro9as6 ro"ea"as "e una zona"el iso color o p8rpura.

A!A' AcC,N0(


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La pare" celular "e las $acterias grapositi/as granegati/as es perea$le al/ioleta cristal. 'in e$argo6 la "e las prieras no lo es al cople9o "e o"o colorante 0ora"o en el interior "e la c=lula. Los resulta"os e?perientaleso$teni"os con una "i0usi-n celular e?enta "e prote1nas6 la escasa solu$ili"a" "elcople9o "e o"o /ioleta cristal en alco(ol acetona6 parecen sustentar la

opini-n "e que la reacci-n grapositi/a consiste esencialente en la 0oraci-n6"entro "e la c=lula6 "e una canti"a" aprecia$le "e cople9o "e o"o colorante"i01cil "e eliinar con el "isol/ente. La pare" celular "e las $acteriasgrapositi/as6 a "i0erencia "e la "e las granegati/as6 ser1a prcticaenteiperea$le al /ioleta cristal. Los icroorganisos aparecern teCi"os "espu=s"e tratarlos con /ioleta cristal6 por ser a$sor$i"o el colorante en la super0iciee?terna "e la pare" celular6 el "isol/ente eliinar sin "i0iculta" el cople9o0ora"o "espu=s "el trataiento con o"o.

>.8(9:lica el ;undamento de las :rueas io?umicas em:leadas

0)-!)(')ontiene sul0ato 0erroso coo in"ica"or "e la 0oraci-n "e


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El gas incoloro


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Los pro"uctos o$teni"os "el eta$oliso "el citrato "epen"en "el p "el e"io.'i el p auenta6 se pro"ucen as acetato 0orato6 con una "isinuci-n "e lapro"ucci-n "e lactato )%


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#eacci-n Interpretaci-n

Entur$iaiento "elAgar.

a o/ili"a"

Agar transparente "e+sarrollo solo en pica"a

No (a o/ili"a"

Azul 2alcalino5 Descar$o?ila ornitina

)oloraci-n Aarilla 2ci"o5 No "escar$o?ila

#o9o 2anillos5 In"ol 25

Aarillo 2anillos5 In"ol 2 + 5

-N+,)El tript-0ano es un ainoci"o constituente "e uc(as peptonas6 particularente "e la tripte1na6 que pue"e ser o?i"a"o por algunas $acterias para

0orar in"ol. En el proceso inter/iene un con9unto "e enzias llaa"astripto0anasa. El in"ol pro"uci"o se co$ina con el al"e(i"o "el reacti/o "e 3o/acso "e Erlic(6 para originar un copuesto "e color ro9o. Las cepas -/iles pue"enapreciarse en este e"io6 por la tur$i"ez que pro"ucen alre"e"or "e la punci-n "esie$ra6 ientras que aquellas cepas pro"uctoras "e sul0(1"rico se "istinguen porla 0oraci-n "e un precipita"o negro "e sul0uro "e (ierro a partir "el tiosul0atosiepre que el e"io se antenga a un p aor a M.


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U'(ADeterinar la capaci"a" "e un icroorganiso "e (i"rolizar la urea en "osol=culas "e aoniaco por la acci-n "e la enzia ureasa6 conla resultantealcalini"a".El sustrato urea 6 una "iaina "el aci"o car$-nico6 a enu"o se

"esigna coo una car$ai"a. ,o"as las ai"as son (i"roliza"as con la0acili"a". La urea es (i"roliza"a por una enzia espec10ica6 la ureasa 2o ureaai"o(i"rolasa56 para "ar "os ol=culas "e aoniaco. En solucion 6 laurea se(i"roliza car$ono "e aonio coo pro"ucto 0inal.La ureasa es una iportanteenzia icro$iana relaciona"a con la "escoposici-n "e los copuestosorgnicos. El p optio para la acti/i"a" "e la ureasa es "e M.

FA+

Esta prue$a "eterina la capaci"a" "e un organiso para "esainar elainoci"o 0enilalanina en ci"o 0enilpir8/ico por su acti/i"a" enzitica "e0enilalanina "esainasa6 con la consiguiente aci"ez resultante. Esta acti/i"a"enzitica es caracter1stica "e to"as las especies "el g=nero ;roteus "el grupo;ro/i"encia por lo que se usa para separar a$os g=neros "e otrasentero$acteriasEl ainoci"o 0enilalanina su0re la "esainaci-n o?i"ati/a cataliza"a por unainoci"o o?i"asa6 una 0la/oprote1na6 para pro"ucir el ci"o cet-nico6 ci"o0enilpiru/ico. La "esainaci-n o?i"ati/a "a coo resulta"o la e?tracci-n "el grupoaino "el ainoci"o para 0orar un "o$le enlace al0a+cetoaci"o li$re "e N @.En un principio6 es e?tra1"o el "an"o un ainoci"o el se co$ina con el)%


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s1ntesis "e la pare" $acteriana. Este 0raco se utiliza u poco "e$i"o que suuso est asocia"o a una alta inci"encia "e reacciones a"/ersas a que0recuenteente eergen cepas resistentes.

P,)--E-NA

La polii?ina B es un anti$i-tico polipept1"ico pro"uci"o por una cepa "eBacilluspolymyxa. 'u espectro "e acti/i"a" se liita a las $acterias gra+negati/as. o"1a6 la polii?ina B se utiliza"a raras /eces "e$i"o a su potencial ne0roto?ici"a"o neuroto?ici"a". ;rcticaente s-lo se utiliza por /1a o0tlica6 -tica o t-pica enco$inaci-n con otros anti$i-ticos 2$acitracina6 clin"aicina o neoicina5 o conantiin0laatorios 2(i"rocortisona5ecanismo de accinDla polii?ina B se 0i9a a los 0os0ol1pi"os "e las e$ranas"e las c=lulas $acterianas gra+negati/as. Esta uni-n "estrue las e$ranas$acterianas e"iante un e0ecto "etergente6 auentan"o la perea$ili"a" "e lae$rana lo que se tra"uce en la uerte celular. La polii?ina B es $acterici"a0rente a la aor parte "e los g=renes gra+negati/os aunque algunos ;roteus 'erratia pue"en ser resistentes. Los icroorganisos generalente suscepti$lesa la polii?ina B son lasPseudomonas aeruginosa, Escherichia coli, Haemophilusinluen!ae, Enterobacter aerogenes6 "lebsiella pneumoniae. La acti/i"a" in /i/o"e la polii?ina 0rente a laPseudomonas aeruginosaes re"uci"a por la presencia"e iones "i/alentes que inter0ieren con la uni-n "el anti$i-tico a la e$rana$acteriana

4.8en la tcnica em:leada :ara la siemra en caa :ara aislamiento decoloniasG HPor ?u es im:ortante ?uemar el asa entre cada estriacinI

La sie$ra por estr1a es6 en general6 el =to"o s 8til "e se$rar en placa. Elasa "e culti/o se esteriliza e intro"uce en una suspensi-n6 con/enienteente"ilui"a6 "e organisos se utiliza luego para (acer una serie "e estr1as paralelas6so$re una placa "e agar pre/iaente soli"i0ica"o. El inocul- se /a "iluen"oprogresi/aente con ca"a estr1a sucesi/a6 "e tal anera que si las estr1asiniciales proporcionan un creciiento con0luente6 a lo largo "e las 8ltias estr1asse /an "esarrollan"o colonias $ien aisla"as. As1 la iportancia "e esterilizar el asa en ca"a estriaci-n estri$a en el(ec(o "e conseguir que en las 8ltias estr1as se "esarrollen colonias $ienaisla"as.

J.8 H(n casos se em:lea la siemra masivaI;ara tener un creciiento a$un"ante "e icroorganisos realizar las prue$as"e sensi$ili"a" a anti$i-ticos6 a que este =to"o "e sie$ra perite o$ser/arclaraente la 0oraci-n "e (alos.

B-B)-,!'AF-A



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