HASIL DAN PEMBAHASAN
Tabel 1 Hasil pengamatan uji molisch
Larutan
Hasil
Keterangan
A
+
bening menjadi ungu
B
+
bening menjadi ungu
C
+
bening menjadi ungu
D
+
bening menjadi ungu
E
+
bening menjadi ungu
F
+
bening menjadi ungu
Ket: (+) ada karbohidrat
(-) Tidak ada karbohidrat
Gambar 1 Hasil uji molisch
Uji molisch, merupakan uji untuk memeriksa atau mengetahui
pembentukan furfural pada beberapa jenis karbohidrat. Pentosa
hampir secara kuantitatif terdehidrasi menjadi furfural, sedangkan
dengan dehidrasi heksosa heksosa manghasilkan hidroksi metal
furfural. Pereaksi molisch terdiri atas larutan naftol dalam
alkohol. Apabila pereaksi ini ditambahkan pada larutan glukosa
misalnya ditambahkan H2SO4 pekat hati-hati, akan terbentuk dua
lapisan zat cair. Pada batas antara kedua lapisan itu akan terjadi
warna ungu karena terjadi reaksi pondensasi antara furfural dengan
naftol (Poedjiadi 1994).
Seperti yang terlihat pada gambar 1, hasil uji molisch pada
semua sampel adalah positif. Hal ini menunjukkan bahwa semua sampel
mengandung karbohidrat. Furfural pada setiap sampel bereaksi dengan
naftol pada pereaksi molisch yang menghasilkan cincin ungu diantara
dua fase yang terbentuk
Tabel 2 Hasil pengamatan uji benedict
Larutan
Hasil
Keterangan
A
+
biru menjadi hijau
B
+
biru menjadi hijau
C
+
biru menjadi hijau
D
+
biru menjadi hijau
E
+
biru menjadi hijau
F
-
biru menjadi biru
Ket: (+) ada gula pereduksi
(-) tidak ada gula pereduksi
Gambar 2 Hasil uji benedict
Metode yang sering digunakan dalam analisa kadar gula suatu
sampel, biasanya menggunakan reagen Benedict. Reagen Benedict
mengandung ion Cu2+ yang akan direduksi oleh gula menjadi ion Cu+
melalui proses pemanasan sehingga menghasilkan endapan coklat atau
merah bata (Indarti 2011).
Urutan pembentukan warna dari biru menjadi hijau menjadi kuning
menjadi kemerahan dan akhirnya terbentuk endapan merah bata.
Endapan yang terjadi menunjukkan konsentrasi gula pereduksi cukup
tinggi (Sumardjo 2008). Pengujian terhadap semua sampel
menghasilkan warna hijau kecuali pada sampel F yang tidak berubah.
Hal ini membuktikan bahwa semua sampel mengandung gula pereduksi
kecuali sampel F. Kadar gula pereduksi pada sampel A sampai E
tergolong rendah karena warna yang ditimbulkan adalah hijau dan
belum terbentuk endapan merah.
Tabel 3 Hasil pengamatan uji barfoed
Larutan
Hasil
Keterangan
A
-
biru menjadi biru
B
-
biru menjadi biru
C
-
biru menjadi biru
D
-
biru menjadi biru
E
+
biru menjadi hijau
F
-
biru menjadi biru
Ket: (+) monosakarida
(-) disakarida
Gambar 3 Hasil uji barfoed sebelum Gambar 4 Hasil uji barfoed
setelah
ditambahkan fosfomolibdat ditambahkan fosfomolibdat
Berbeda dengan pereaksi lain, pereaksi barfoed bersifat asam.
Pereaksi ini dibuat dengan melarutkan Kristal kupri sulfat netral
dalam air. Setelah disaring, ditambahkan asam asetat glasial.
Pemanasan karbohidrat pereduksi dengan pereaksi barfoed akan
menghasilkan endapan kuprooksida. Pada konsentrasi dan kondisi yang
sama, disakarida memberikan endapan lebih lambat daripada
monosakarida. Endapan jingga kemerahan menunjukkan uji posotif
monosakarida (Sumardjo 2008).
Percobaan menunjukkan hasil positif hanya pada larutan E. Hal
ini membuktikan bahwa larutan E adalah monosakarida. Larutan A yang
seharusnya juga menghasilkan hasil positif karena larutan tersebut
juga monosakarida, tetapi justru menghasilkan hasil negatif. Hal
tersebut dapat terjadi karena sampel yang digunakan terkontaminasi
atau sudah rusak sehingga tidak terdeteksi dengan uji barfoed.
Tabel 4 Hasil pengamatan uji fermentasi
Larutan
Panjang (cm)
(+) NaOH 10%
0
5
10
15
20
A
0
1.4
2.8
3.6
4.2
+
B
0
0.8
2.6
4.4
5.6
+
C
0
0.7
2
3.7
4.8
+
D
0
1,3
2
2,5
2,9
+
E
0
0.9
2.8
4.2
4.9
+
F
0
0,1
0,3
1,3
1,7
+
Ket: (+) tidak ada isapan
(-) Ada isapan
Fermentasi adalah proses penguraian unsur organik kompleks
terutama karbohidrat untuk menghasilkan energi melalui reaksi enzim
yang dihasilkan oleh mikroorganisme, yang biasanya terjadi dalam
keadaan anaerob dan diiringi dengan pembebasan gas (Sungguh 1993).
Menurut jenis mediumnya proses fermentasi dibagi menjadi dua yaitu
fermentasi medium padat dan fermentasi medium cair. Fermentasi
medium padat adalah fermentasi yang menggunakan medium tidak larut
tapi cukup mengandung air. Fermentasi medium cair adalah proses
fermentasi yang substratnya larut di dalam fase cair (Hardjo 1989).
Penambahan NaOH setelah beberapa menit fermentasi digunakan untuk
membuktikan terbentuknya gas CO2 yang bersifat asam.
Uji fermentasi yang dilakukan selama 20 menit dengan pengamatan
tiap 5 menit menunjukkan hasil yang variatif tetapi semua sampel
menghasilkan gelembung udara. Hal ini membuktikan bahwa semua
sampel mengandung gula yang dihidrolisis oleh ragi membentuk gas
CO2. Penambahan NaOH kepada semua sampel menunjukkan hasil positif
yang membuktikan bahwa gas yang dihasilkan adalah gas CO2.
Tabel 5 Hasil pengamatan uji selliwanoff
Larutan
Hasil
Keterangan
A
-
bening menjadi bening
B
-
bening menjadi bening
C
-
bening menjadi bening
D
-
bening menjadi bening
E
+
bening menjadi merah ceri
F
-
bening menjadi bening
Ket: (+) terdapat gugus ketosa
(-) tidak terdapat gugus ketosa
Gambar 5 Hasil uji selliwanoff
Uji seliwanoff digunakan untuk menunjukkan adanya ketoheksosa
seperti fruktosa. Pereaksi seliwanoff adalah resorsinol dalam asam
klorida encer. Pendididhan fruktosa dengan pereaksi seliwanoff
menghasilkan larutan berwarna merah ceri. Ada dua tahap reaksi
dalam pendidihan fruktosa dan pereaksi seliwanoff, yaitu dehidrasi
fruktosa oleh HCl membentuk hidroksimetilfurfural dan kondensasi
hidroksimetilfurfural dengan resorsinol membentuk senyawa merah
ceri (Sumardjo 2008).
Semua sampel yang diuji seliwanoff menghasilkan hasil negatif
kecuali sampel E. Hal ini membuktikan bahwa sampel E mengandung
ketosa dan monosakarida. Dapat ditebak bahwa sampel E adalah
fruktosa setelah mengamati hasil-hasil pengujian sebelumnya. Sampel
lain tidak menunjukkan hasil positif ketosa karena monosakaridanya
adalah aldosa walaupun sampel tersebut disakarida atau
polisakarida.
Tabel 6 Hasil pengamatan uji osazon
Larutan
Gambar
Literatur
Laktosa
Fruktosa
Glukosa
Maltosa
Sukrosa
Osazon adalah Kristal berwarna kuning yang tidak mudah larut
dalam air dan akan terbentuk jika monosakarida atau disakarida
pereduksi dipanaskan dengan fenilhidrazin. Tahap reaksi pembentukan
aldosazon sedikit berbeda dengan tahap reaksi pembentukan
ketosazon. Tiap jenis karbohidrat mempunyai bentuk Kristal osazon
yang spesifik dan juga titik cair dan kecepatan pembentukan yang
berbeda (Vaidya 1994). Berdasarkan hal tersebut, uji osazon dapat
digunakan untuk membedakan beberapa jenis karbohidrat.
Fruktosa yang merupakan monosakarida dengan gugus keton
membentuk ketosazon seperti yang tampak pada gambar. Laktosa,
glukosa, maltosa, dan sukrosa membentuk aldosazon karena memiliki
gugus aldosa.
Tabel 7 Hasil pengamatan uji iod
Larutan
Hasil
Keterangan
Pati
+
Biru tua
Gum arab
-
Kuning
Agar-agar
+
Bening
Ket: (+) karbohidrat
(-) bukan karbohidrat
Gambar 6 Hasil uji iod pati, gum arab, dan agar-agar
Pati terdiri atas dua komponen yang dapat dipisahkan yaitu
amilosa dan amilopektin (Harborne 1987). Perbandingan amilosa dan
amilopektin secara umum adalah 20% dan 80% dari jumlah pati total.
Kedua jenis pati ini mudah
dibedakan berdasarkan reaksinya terhadap iodium, yaitu amilosa
berwarna biru dan amilopektin berwarna kemerahan (Hartati
2003).
Ketiga contoh yang digunakan adalah pati, gum arab, dan
agar-agar. Sampel tersebut memberikan hasil yang berbeda saat
dilakukan pengujian iod. Pati dan agar-agar menunjukkan hasil
positif berupa warna biru setelah ditetesi iod. Hal ini membuktikan
bahwa pati dan agar-agar mengandung amilosa. Gum arab menghasilkan
warna kuning saat ditetesi iod. Hal ini menunjukkan bahwa gum arab
tidak mengandung amilosa.
Kesimpulan1. Reaksi MolischDapat disimpulkan bahwa glukosa,
fruktosa, laktosa, sukrosa, maltosa, dan galaktosa mengandung
karbohidrat. Sedangkan aquades tidak mengandung karbohidrat karena
tidak terbentuk cincin pada perbatasan dua cairan.2. Reaksi
BenedictLarutan yang memngandung gugus aldehid atau keton adalah
glukosa, fruktosa, maltosa, dan galaktosa yang teridentifikasi
terjadinya endapan. Sedangkan yang tidak mengandung gugus aldehid
atau keton adalah laktosa, sukrosa, dan aquadest karena tidak
terjadi endapan.3. Reaksi FehlingPada reaksi Fehling, larutan yang
mengandung gugus pereduksi adalah yang teridentifikasi perubahan
warnanya menjadi merah bata, yaitu glukosa, fruktosa, laktosa,
maltosa, dan galaktosa. Sedangkan pada sukrosa dan aquadest tidak
terjadi perubahan warna karen tidak mampu mereduksi Fehling.4.
Reaksi SeliwanoffLarutan yang termasuk glukosa terdapat pada tabung
2 karena tidak mengalami perubahan warna menjadi merah. Sedangkan
larutan pada tabung 1 terbukti mengandung fruktosa karena mengalami
perubahan warna menjadi merah saat direaksikan dengan reagen
Seliwanoff.
LAMPIRAN
DAFTAR PUSTAKASumardjo, Damin. Pengantar Kimia Buku Panduan
Kuliah Mahasiswa Kedokteran dan Program Strata I Fakultas
Bioeksata. Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran EGC; 2006.Sunarya,
Yayan & Setiabudi Agus. Mudah dan Aktif Belajar Kimia. Bandung:
Setia Purna Inves; 2007.Poedjiadi A, Supriyanti FT. Dasar-Dasar
Biokimia. Jakarta Universitas Indonesia Press; 1994
