ZUSCHRIFTEN
Selektive Wechselwirkung der Dipeptide L-Phe-D-Pro und
D-Phe-L-Pro mit fl-Cyclodextrin ** Milana Maletic*, H e l m a
Wennemers*, D. Quent in McDonald , Ronald Breslow und W. Clark
Still
Im Laufe der letzten drei Jahrzehnte haben sich Cyclodextrin-
EinschluBkomplexe zu Grundpfeilern der Wirt-Gast-Chemie
entwickelt[']. Wie bei der Wechselwirkung von Enzymen mit ihren
Substraten und von Antikorpern mit den zugehorigen Antigenen
bestimmen hauptsachlich hydrophobe Effekte die Bindung von
Molekiilen an Cyclodextrine[21. Zahlreiche biolo- gisch wichtige
Molekiile bilden stabile EinschluBkomplexe mit Cyclodextrinen in
Wasser, darunter die hydrophoben Amino- sauren Phenylalanin,
Tyrosin and Tryptophan. Ihre Cyclodex- trinkomplexe wurden unter
anderem als Enzymmodelle r31, zum Studium der
Wirkstoff-Freiset~ung[~] und zur Trennung von Peptiden[']
eingesetzt. Wahrend die Wechselwirkung von Cy- clodextrinen mit
einzelnen hydrophoben Aminosauren weit- gehend verstanden ist,
herrscht iiber ihre Wechselwirkung mit kleinen Peptidfragmenten
noch immer Unklarheit. Hier be- schreiben wir Untersuchungen zur
Wechselwirkung von J-Cy- clodextrin rnit Di- und Tripeptiden mit
Hilfe eines kombinatori- schen Ansatzes.
Die kombinatorische Chemie hat sich in den letzten Jahren zu
einem wichtigen Werkzeug bei der Suche nach geeigneten Sub- straten
fur einen gegebenen Rezeptor, und umgekehrt, entwik- keltL6]. Es
ist darnit moglich geworden, auch sehr kleine Unter- schiede in der
Wechselwirkung zwischen Wirt und Gast, insbesondere
unterschiedliche Bindungsselektivitaten, nachzu- weisen, die weder
mit konventionellen Methoden detektiert noch durch Molecular
Modeling vorausgesagt werden konnten['].
Die orangefarbenen Nickelsalophen-Komplexe 1 und 2 mit zwei bzw.
einem Cyclodextrinsubstituenten wurden rnit einer
[*I M. Maletic, DiplLChern. H. Wennemers, Dr. D. Q. McDonald,
Prof. R. Breslow, Prof. W C. Still Department or Chemistry.
Columbia University New York, NY 10027 (USA) Telefdx: Int. +
212,'854-5429 E-mail: clark(ir still3.chem.colurnhia edu
[**I Diese Arbeit wurde vun der National Science Foundation
(Grant CHE 9544253) (WCS). den National Institutes or Health und
dem Office of Naval Research (RB) gefordert. H W dankt dem Fonds
der Chemischen Indu- strie fur em Kekule-Stipendium. M M und HW
haben zu gleichen Teilen zu der VOI liegenden Arbcit
heigetragen.
Tripeptidbibliothek auf hydrophilem Polyethylenglycol-Poly-
styrol-Pfropfcopolymer (TentaGel)"' in Wasser aquilibriert. Die
Bibliothek hatte die allgemeine Struktur AA3-AA2-AAl-
NH(CH,),-TentaGel und wurde mittels kodierter kombinatori- scher
Synthese hergestellt[']. An jeder der drei Positionen wurden 29
verschiedene Aminosauren verwendet, so daB die Bibliothek maximal
293 (24 389) verschiedene Tripeptide enthielt['O].
Der Bis(cyc1odextrinrezeptor) 1 zeigte in Wasser bei pH 7 eine
bemerkenswert hohe Bindungsselektivitat: Nur etwa ein Harz-
kugelchen unter zweihundert hatte nach 24stiindiger Aquilibrie-
rung bei einer Rezeptorkonzentration von ca. 2 mM die orange Farbe
des Rezeptors angenommen. Analoge Beobachtungen wurden rnit dem
Mono(cyc1odextrinrezeptor) 2 gemacht (Abb. I ) , was darauf
hindeutet, daB einr p-Cyclodextrineinheit fur die beobachtete
Wechselwirkung ausreicht. Die Zugabe des kompetitiven Inhibitors
Natrium-4-tert-butylbenzoat fiihrte bei beiden Experimenten zur
vollstandigen Entfarbung der Harzkii- gelchen. Dies spricht dafiir,
daD die Peptide in erster Linie an p-Cyclodextrin binden.
Abh. 1. Ergebnis eines typischen Experiments zur Bindung von
Rezeptor 2 an die eingesetzte Tripeptidbibliothek.
Die Sequenzen der Tripeptide auf den farbigen Harzkiigel- chen
wurden durch Gaschromatographie niit Elektronenein- fangdetektor
ent~chliisselt['~. Dabei ergab sich eine bemerkens- werte
Selektivitat: Alle durch den Rezeptor 1 gefarbten Harzkugelchen und
die meisten der durch den Rezeptor 2 ge- farbten Kiigelchen
enthielten entweder das Dipeptidsegment L- Phe-D-Pro oder das
Dipeptidsegment D-Phe-L-Pro (Tabelle 1). Weder ein anderes
Phenylalanin enthal-tendes Tripeptid noch die diastereomeren,
homochiralen Dipeptide L-Phe-L-Pro und D-Phe-D-Pro wurden
selektiert.
U m die Ursache dieser hochselektiven Wechselwirkung auf-
zuklaren, wurden die beiden Dipeptide 3 und 4 synthetisiert und
TFA H,N-L-Phe-o-Pro-CONHCH, 3
TFA H,N-L-Phe-L-Pro-CONHCH, 4
Tabelle 1. Sequenzen. die von deli Rezeptoren 1 und 2 in der
hier untersuchten Tripeptidbibliothek selektiert wurden [a].
~ ~ ~
AA3 AA2 AA1 Haufigkeit dea Auftretens ["/"I mit 1 2
L-Phe D-Pro X 36 46 X L-Phe u-Pro 16 8 u-Phe r-Pro X 28 31 X
o-Phe L-Pro 20 0
[a] X steht fur die jeweils beliebige dritte Arninosiure des
Tripeptids
0044-X24Y/96'1OX13-15Y4 S 15.00+ .Xi0 A n g m . C'lten?. 1996.
/OX, N r . 13,14
ZUSCHRIFTEN die Bindungsenergien ihrer Komplexe rnit
P-Cyclodextrin in Wasser mittels NMR-Titration bestimmt. Dabei
wurde jeweils rnit einer konstanten Dipeptidkonzentration von 2.0
mM und rnit acht unterschiedlichen P-Cyclodextrinkonzentrationen
von 0- 13 mM in D,O gearbeitet. An die MeRwerte wurden Kurven rnit
dem Software-Paket KaleidaGraph unter Verwendung des
Standarditerationsverfahrens angepaDt["].
Im 'H-NMR-Spektrum von L-Phe-D-Pro ist hauptsachlich (> 95
YO) ein Konformer, das s-trans-Konforrner["], sichtbar. Bei der
Zugabe von P-Cyclodextrin andern sich die chemischen Verschiebungen
zahlreicher Protonen signifikant, und als Bin- dungskonstante wurde
180&20 M-' ermittelt (AG = - 3.0 & 0.1 kcal mol- ').
Wahrend der Titration wurden fur die drei Pro- linprotonen (H3',
H4', H5'), die sich auf einer Seite des Pyrroli- dinrings befinden,
groRe Hochfeldverschiebungen beobachtet, wihrend sich die Lage der
iibrigen drei Protonen (H3, H4, H5) auf der anderen Seite des
Prolinrings nicht mel3bar veranderte. Diese Beobachtungen sind rnit
einem Bindungsmodus verein- bar, bei dem der Phenylring des
Phenylalanins vollstandig in dem hydrophoben 8-Cyclodextrinhohl-
raum eingeschlossen ist und eine Seite des Prolins diesen Hohlraum
als ,,Kappe" ab- schliel3t. Alle hydrophilen funktionellen Gruppen
des Dipeptids sind in dieser Bin- dungsgeometrie dem Wasser
zugewandt (siehe Abb. 2). Zu der hohen Stabilitat des
P-Cyclodextrin-Dipeptid-Komplexes tra- gen daher sowohl die
EinschlieBung des Phenylrings in den Hohlraum als auch die
hydrophobe Wechselwirkung zwischen dem Pyrrolidinring und dem
Cyclodextrin bei. Die Bindungskonstante fur das s-cis-Kon- former
konnte wegen dessen geringen An-
tionsanalysen rnit dem Programm MacroModel 5.0 durchge- fuhrt.
Fur die Rechnungen wurden das United-atom-AMBER*- Kraftfeld[13] und
das GB/SA-Modell fur Wa~se r"~] verwendet. Die Konformationssuchen
wurden in Blocken von 5000 Schrit- ten nach der MCMM-Methode r1 51
durchgefuhrt, bis keine wei- teren energiearmen Strukturen ( < 3
kcal m o l ~ ' energiereicher als das globale Minimum) in einem
Block gefunden werden konn- ten (insgesamt 15 000 Schritte pro
Komplex). Die Konforma- tionssuche umfaRte alle frei drehbaren
Bindungen des Peptids sowie Rotationen und Translationen des
Peptids relativ zum 8-Cyclodextrinmolekul. Die Startgeometrie des
8-Cyclodextrin- molekuls wurde aus der Kristallstrukturanalyse
ubernommen['61.
Die Konformationssuchen ergaben energiearme Strukturen, die den
durch die NMR-Untersuchungen nahegelegten Bin- dungsmodus stutzen.
In den energiearmsten Strukturen des Komplexes aus L-Phe-D-Pro und
P-Cyclodextrin sind der Phe- nyl- und der Pyrrolidinring in enger
Nachbarschaft und bilden einen ,,hydrophoben Stopsel", der stark
mit dem P-Cyclodex- trinhohlraum wechselwirkt (Abb. 2).
teils (< 5 O h ) nicht bestimmt werden. Abb. 2. Stereobild
der rnit dem Programm MacroModel 5.0 errechneten energiearmsten
Struktur des Kom- Das lH-NMR-Spektrum L-phe-L- pkXeS aUS
L-Phe-D-Pro und fl-Cyclodextrin.
Pro zeigt das Vorliegen zweier Konformere in einem Verhaltnis
von 5 : 1 zugunsten des s-trans-Konformers an['z1. Anders als beim
D-L-Heteroisomer bindet bei L-Phe-L-Pro das s-trans-Konformer nur
rnit geringer Affinitat an 8-Cyclodextrin. Dagegen verandert sich
die chemi- sche Verschiebung einiger Protonen des s-cis-Konformers
bei Zugabe von P-Cyclodextrin erheblich; eine quantitative Aus-
wertung ergibt eine Bindungskonstante von 120f 5 M-' (AG = -
2.80f0.1 kcalmol- '). Die ermittelte Bindungskon- stante ist rnit
der Abnahme des s-trans: s-cis-Verhaltnisses von 5 : 1 auf 3 : I im
Laufe der Titration in Einklang. Die Art der Bindung im Komplex aus
dem s-cis-Konformer von 4 und P-Cy- clodextrin scheint analog zu
der im Komplex aus dem s-trans- Konformer von 3 und P-Cyclodextrin
zu sein : Alle hydrophilen funktionellen Gruppen des Peptids
befinden sich in waDriger Umgebung, wahrend der hydrophobe Phenyl-
und der Pyrroli- dinring den 8-Cyclodextrinhohlraum ausfullen und
abschlie- Oen. Dagegen bindet das s-trans-Konformer von 4 nur
schwach an P-Cyclodextrin, da einige seiner hydrophilen
funktionellen Gruppen dem hydrophoben 8-Cyclodextrinhohlraum nicht
ausweichen konnen. Die Bindungskonstante des s-trans-Kon- formers
wurde zu 20 f 5 M-' (Sattigung ca. 20%) abgeschatzt, was der fur
die Bindung von Phenylalanin an 8-Cyclodextrin entspricht 14].
Da das starker bindende Konformer von 4 nur zu ca. 21 %
vorliegt, ist es nicht iiberraschend, daD Harzkiigelchen mit der
Peptidsequenz L-Phe-L-Pro bei den Bindungsstudien an der Fest-
phase nie die orange Farbe der Rezeptoren angenommen haben.
Um die Strukturen der P-Cyclodextrin-Dipeptid-Komplexe
eingehender zu untersuchen, wurden griindliche Konforma-
Die Konformationssuche fur den Komplex aus L-Phe-L-Pro und
P-Cyclodextrin ergab ahnliche Strukturen fur das s-cis- Konformer,
allerdings wurden zusatzliche energiearme Struktu- ren gefunden,
bei denen der Phenylring vollstandig in den Hohl- raum
eingeschlossen ist, wahrend der hydrophobe Prolinring zum Teil dem
Losungsmittel ausgesetzt ist.
Zusammenfassend 1aDt sich feststellen, daD mit Hilfe der
kombinatorischen Chemie eine bemerkenswert selektive Wech-
selwirkung von /l-Cyclodextrin rnit den enantiomeren Dipepti- den
L-Phe-D-Pro und D-Phe-L-Pro entdeckt wurde. Weiterhin konnte aus
NMR-spektroskopischen Studien ein Bindungsmo- dell fur den
P-Cyclodextrin-Dipeptid-Komplex abgeleitet wer- den. Die gefundene
Bindungsselektivitlt konnte zum Design neuer
P-Cyclodextrinkatalysatoren genutzt werden, die in der Lage sind,
Peptide sequenzspezifisch zu spalten.
Experimen telles : 3: D-Pro-NHCH, (90 mg, 0.70 mmol) und
N-Boc-L-Phe (186 mg, 0.70 mmol) wur- den in 3 mL CH,Cl, gelost und
mit Hilfe yon EDC (372 mg, 1.40 mmol) gekuppelt. Das
N-Boc-geschiitzte Dipeptid wurde durch Flash-Chromatographie an 30
g Kie- selgel (CH,CI,:Aceton 5:1, dann 2: 1) und anschlieDende
Kristallisation aus Et,O/ Hexan gereinigt. 1 mL TFA wurde zu einer
Losung des N-Boc-geschiitzten Dipep- tids (200mg, 0.32mmol) in 4mL
CH,CI, gegeben. Nach 1.5 h wurden alle tliichtigen Bestandteile
unter reduziertem Druck entfernt und 210 mg (80%)
TFA.L-Phe-o-Pro-NHCH, als farbloser Feststoff isoliert.
(TFA.L-Phe-L-Pro- NHCH, 4 wurde analog hergestellt.) 3: TFA.
L-Phe-o-Pro-NHCH, (tram-Konformer): 'H-NMR (500 MHz. D,O, 2 5 T ,
CH,CN): 6 =1.40 (m, 1 H; Pro-H4), 1.68 (m, 2H; Pro-H3 und Pro-H4),
1.90 (m, 1 H; Pro-H3'), 2.60 (m. 1 H; Pro-IW), 2.61 (s. 3H; CH,),
3.02 (dd. J = 1 3 . 4 . 9 . 0 H z , l H ; P h e - / ~ H ) , 3 . 1 1
( d d . J = 1 3 . 4 , 6 . 3 H z , l H ; P h e - ~ H ' ) . 3 . 3 8 (
m ,
Angew. Chem. 1996, 108, Nr. 13/14 c; VCH
I~i.rl~i~.sg~',seNs~~liu~ mhH, 0-69451 Weinheim, 1996
0044-824YiY6/10813-159.~ $ l5.U0+.25/0 1595
ZUSCHRIFTEN 1 H ; Pro-HS), 4.14 (dd, J = 4.6, 8.3 Hz, 1 H;
Pro-zH), 4.41 (dd. J = 6.3, 9.0 Hz, 1 H; Phe-aH), 7.21 (m. 2 H ;
arom.), 7.32 (m. 3 H ; arom.); "C-NMR (75.4 MHz, CD,OD, 25C): 6 =
25.24, 26.35, 30.78, 38.29, 48.45, 54.19, 61.65, 129.05, 130.07,
130.24, 130.37, 130.61, 135.44, 168.53, 174.55; hochaufgelostes MS:
ber. fur C,,H,,N,O, ( M ' ) : m/:: 275.1534; gef.: 275.1644. 4:
TFA.1.-Phe-L-Pro-NHCH,: 'H-NMR (500 MHz. D,O, 25 "C, CH,CN): truns-
Konformer: 6 = 1.77 (m, 1 H; Pro-H3'), 1.85 (m, 2H; Pro-H4 und
Pro-H4), 2.13 (m, 1 H; Pro-H3). 2.64 (s. 3H; CH,), 2.99 (dd. J =
14.5,7.5 Hz, 1 H; Phe-BH), 3.21 (dd, J = 14.L6.2 Hz, 1 H; Phe-BH),
3.25 (m, 1 H; Pro-HS'), 3.61 (m, 1 H, Pro-HS), 4.27 (dd, J = 6.3,
8.1 Hz, 1 H; Pro-aH), 4.43 (pseudo-t, J =7.3 Hz, 1 H; Phe-aH), 7.24
(m. 2 H ; arom.), 7.30 (m. 3H; arom.); cis-Konformer: 6 =1.56 (m, 3
H ; Pro- H3, Pro-H3' und Pro-H4), 1.70 (m. 1H; Pro-H4), 2.60 (s,
3H; CH,), 2.90 (dd, J = 13.2, 9.8 Hz, 1 H; Phe-BH), 3.05 (dd, J =
13.2. 5.4 Hz, 1 H; Phe-BH'), 3.29 (m. 1H; Pro-aH), 3.33 (m- 1H;
Pro-HS), 3.42 (m. 1 H; Pro-HS'), 3.80 (dd, J = 9.8. 5.4Hz, 1H;
Phe-aH), 7.13 (m, 2 H ; arom.), 7.27 (m, 3H; arom.); "C-NMR (75.4
MHz, CD,OD, 25C): 6 = 23.08, 26.00, 26.36, 26.66, 30.45, 32.62.
37.70. 38.90, 54.41, 61.38, 61.85, 128.89, 129.11, 130.13, 130.51,
130.81, 135.36, 135.43, 168.65, 174.15; hochaufgelostes MS: ber.
fur C,,H,,N,O, ( M ' ) : mjz: 275.1534: gef.: 275.1633. 1 wurde
nach bekannten Vorschriften synthetisiert [17]: 'H-NMR (400 MHz.
[D,]DMSO, 25C): 6 = 8.98 (s, 2 H ; CH), 8.09 (m, 2 H ; CH), 7.74
(s, 2 H ; CH). 7.39 (m, 4H; CH), 6.87 (d. J = 8.8 Hz, 2H; CH), 5.74
(m. 28H; OH), 4.82 (m,
14H;CH),4.48(m,lZH;OH),3.65(m,56H;4CH,2CH,),3.30(m,28H;CH). "C-NMR
(75.4 MHz, [DJDMSO, 25'C): 6 =164.6, 156.2, 142.2, 139.3, 137.3.
128.0, 121.7, 120.7, 120.5,116.3,102.5,102.0.101.7,84.9,81.6,81.4,
73.1,72.9,72.4. 72.1, 70.1, 60.0, 59.6. FAB-MS: ber. fur
C,,,H,,,N,O,,S,Ni ( [ M + HI'): mjz: 2671.7; gef.: 2672: UV/Vis
(H,O): I.,,, ( c ) = 374 (20000), 273 (55000) nm.
Eingegangen am 22. Januar 1996 [Z8743]
Stichworte: Cyclodextrine * Kombinatorische Chemie * Mole-
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1982.
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Reader, G. Asouline, R. Kobayashi, M. Wigler, W. C. Still, Proc.
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o-Phe, L-Phe, D-Pro, L-Pro, D-Ser, L-Ser. D-Thr, 1.-Thr, D - A s ~
, L -As~ . D-GIu, L-GIu, D-Asn. L-Asn. D-Gln, L-Gln, D-His, L-His,
u-Lys, L-LYS, o-Arg, L-Arg. Tyrosin und Trypto- phan waren nicht in
der Bibliothek enthalten.
[Ill K. A. Connors. Binding Constunrs: The Mrusuremenl of
Moleculur Complex Stabilit.v, Wiley, New York, 1987; KaleidaGraph
von Abelbeck Software.
[12] NOE-Experimente bestitigten die Identitit der s-truns- und
s-cis-Konformere beider Dipeptide. Das s-trans-Konformer zeigt
einen starken NOE zwischen dem Phe-aH und dem Pro-H4. das
s-cD-Konformer einen zwischen dem Phe- zH und dem Pro-aH. Die
Zuordnung aller Signale erfolgte mit Hilfe von '
H,'H-COSY-Experimenten.
[13] D. Q. McDonald, W. C . Still, Terruhedron Lett.
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Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 1978, 17, 694-695.
Sequenzspezifische DNA-Erkennung durch einen in der groBen und
der kleinen Furche bindenden Liganden** Jason W. Szewczyk, Eldon E.
Baird und Peter B. Dervan"
Oligonucleotid-vermittelte Tripelheli~bildung['~ sowie DNA-
Komplexierung durch Pyrrol/Imidazol-Polyamide[21 sind zwei
nichtbiologische Ansatze zur sequenzspezifischen Erkennung von
doppelstrangiger DNA. Die Erkennung der groljen DNA- Furche wird
durch Pyrimidin-Oligonucleotide vermittelt, die parallel zum
Watson-Crick-Purin-Strang binden"]. Die Spezifi- tat wird durch die
Bindung von Thymin (T) an Adenin-Thymin- Basenpaare (T .
AT-Basentripletts) sowie durch die Bindung von protoniertem Cytosin
(C') an Guanin-Cytosin-Basenpaare (C' . GC-Basentripletts)
erreicht"]. Zur Erkennung der kleinen DNA-Furche dienen Polyamide
aus N-Methylimidazol- (Im) und N-Methylpyrrol-Aminosauren (Py),
wobei die DNA-Se- quenzspezifitat durch die lineare Sequenz der
Pyrrol- und Imi- dazol-Aminosauren bestimmt ~ i r d [ ' - ~ ] : Die
antiparallele Paa- rung von Imidazol- und
Pyrrolcarboxamid-Einheiten ermog- licht die Erkennung von
GC-Basenpaaren, wahrend umgekehrt angeordnete Pyrrolcarboxamid- und
Imidazol-Einheiten CG- Basenpaare erkennen[']. Die durch
Kombination von zwei Pyr- rol-Einheiten vermittelte Erkennung ist
teilweise degeneriert, sie erlaubt die Bindung von TA- und von
AT-BasenpaarenI2> 31. Ein
Pyrrol/Imidazol-Polyamid-,,Haamadel"-Ligand mit ?-Amino-
buttersaure (y) als ,,Turn"-Einheit ist ein vielseitiges Bindungs-
motiv zur hochaffinen Erkennung einer Vielfalt von DNA-Se- quenzen
in der kleinen DNA-Furche[']. Eine Schliisselfrage in bezug auf die
beschriebenen Strategien zur Erkennung der groI3en und der kleinen
DNA-Furche ist, ob beide Bindungsmo- tive in einem Molekiil
kombiniert werden konnen, ohne daI3 die Sequenzspezifitat der
jeweiligen Erkennungsdomanen verloren geht.
Wir berichten hier iiber ein ,,Haamadel"-Polyamid, das mit einem
Nucleotid-Undecamer verkniipft wurde. Dieses Konjugat bindet bei
subnanomolaren Konzentrationen spezifisch und gleichzeitig an die
groI3e und die kleine DNA-Furche. Die Ver- kniipfung des
Pyrimidin-Oligonucleotids 5'-TTTTTTMeCMeC- TTT-3' iiber einen
Linker aus zwolf Atomen in der Kette mit dem Polyamid
ImPyPyyImPyPyP (p = P-Alanin) ermoglicht die Erkennung eines 16
Basenpaare langen Segmentes einer DNA- Doppelhelix. Hierbei wird
jeweils spezifisch ein Pyrrol/Imida- zol-Polyamid-DNA-Komplex in
der kleinen Furche sowie eine Tripelhelix in der groDen Furche
gebildet (Abb. 1) und durch 10 Wasserstoffbriickenbindungen zur
Erkennung von 5 Basenpaa- ren in der kleinen Furche (5'-TGACA-3')
bzw. 22 Wasserstoff- briickenbindungen zur Erkennung von 11
Basenpaaren in der groljen Furche (5'-AAAAAAGGAAA-3')
stabilisiert.
Das am C-Terminus rnit einer freien Aminogruppe versehene
Polyamid ImPyPyyImPyPyP wurde durch Festphasensynthe- seL6. 'I
hergestellt. Umsetzung mit Essigsaureanhydrid liefert das Polyamid
1, das als Standard dient. Reaktion der freien Amino- gruppe von
ImPyPyyImPyPyP rnit festphasengebundenem N-
[*I Prof. P. B. Dervan, J. W Szewczyk, E. E. Baird Arnold and
Mabel Beckman Laboratories of Chemical Synthesis California
Institute of Technology Pasadena, CA 91125 (USA) Telefax: Int. +
818/683-8753
[**I Wir danken den National Institutes of Health fur die
Unterstutzung (GM- 27681) sowie dem Howard Hughes Medical Institute
fur ein Doktorandensti- pendium (E. E. B.).
1596 ( , VCH Vrrlu,~.sgc.srll.schuft mhH, 0-69451 Wrinhrin?,
lYY6 0044-H24Y/Y6/iU813-1596 $ 15.00+ .25/0 Angrn. Chem. 1996, 108,
Nr. 13/14
