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Separación de proteínas por diálisis
La diálisis suele utilizarse como técnica para separar las proteínas de las moléculas debajo peso molecular que proceden de un extracto de un tejido o de un extracto celular.
Procedimiento
Una vez obtenido un homogeneizado de células o tejidos, este se retiene en un sacoconstruido con un material cuyos poros son ultramicroscópicos, como, por ejemplo, elcelofán. Posteriormente, el saco se suspende en agua destilada, las moléculas pequeñasque hay en el extracto, tales como las sales minerales, atravesarán los poros, pero lasproteínas quedarán retenidas.
Técnicas
Moléculaspequeñas
Las moléculas pequeñasse difundirán fuera delsaco ya que tienden a
desplazarse hacia las zonasde menor concentración.
Las proteínas tienenimpedido el paso por el
tamaño del poro.
El agua se sustituyevarias veces para que lossolutos pequeños puedanseguir difundiéndose fuera
del saco.
La concentraciónde moléculas de solutopequeñas en el interiordel saco llega a ser
despreciable.
Saco dediálisis
Proteínas
Aguadestilada
Soluciónconcentrada
El agua sesustituye varias
veces
Tras la separación de las moléculas pequeñas, en el interior del saco queda una mezclade proteínas que pueden separarse según su tamaño. Para ello, se utilizan dos técnicas:la cromatografía y la electroforesis.
De esta forma, se dispone de la suficiente cantidad de proteína pura de la que se puededeterminar su composición aminoácida y su secuencia.
La diálisis
La diálisis es un fenómeno que permite que las moléculas grandes (como las proteínas oel almidón) y las moléculas pequeñas (como los aminoácidos, la glucosa o las sales mine-rales) de una disolución puedan separarse por difusión selectiva a través de una membra-na semipermeable. Esta membrana, llamada dializadora, presenta un tamaño de poroque permite el paso de las sustancias pequeñas, pero no el de las moléculas grandes.
Técnicas
Membrana semipermeable quepermite el paso de moléculas pequeñas,
pero no de solutos grandes comolas proteínas
Moléculas grandes queno pueden atravesar la
membrana
Moléculas pequeñasque pueden atravesar
la membrana
