SKRIPSI

MUHAMMAD ERFAN

UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI FRAKSI

ETANOL BUNGA Impatiens balsamina L.

TERHADAP BAKTERI Staphylococcus aureus

DENGAN METODE DIFUSI CAKRAM

PROGRAM STUDI FARMASI

FAKULTAS ILMU KESEHATAN

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG

2017

iii

iv

KATA PENGANTAR

Assalamu’alaikum wr.wb.

Alhamdulillahirobbil’alamin, Segala puji bagi Allah SWT, Rabb semesta alam,

yang menghidupkan dan mematikan. Rabb yang telah memberikan berjuta nikmat

sehat, waktu, kemudahan, dan kesabaran sehingga penulis dapat menyelesaikan

skripsi yang berjudul “Uji Aktivitas Antibakteri Fraksi Etanol Bunga Impatiens

balsamina L. Terhadap Bakteri Staphylococcus aureus dengan Metode Difusi

Cakram” untuk mencapai gelar Sarjana Farmasi pada Program Studi Farmasi

Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Muhammadiyah Malang. Dalam penyusunan

skripsi ini penulis tidak terlepas dari peranan pembimbing dan bantuan seluruh

pihak. Oleh karena itu, dengan segala kerendahan hati, penulis ingin

mengucapkan banyak terima kasih kepada:

1. Ibu Siti Rofida, S. Si., M. Farm., Apt selaku dosen pembimbing I yang dengan

penuh kesabaran memberikan masukan, arahan, motivasi, dukungan serta

bimbingan kepada penulis dalam menyelesaikan skripsi ini.

2. Bapak Ahmad Shobrun Jamil, S. Si., M. P. Selaku dosen pembimbing II yang

telah memberikan masukan, arahan, dukungan serta bimbingan kepada penulis

agar dapat menyelesaikan skripsi ini.

3. Ibu Engrid Juni Astuti, M.Farm., Apt. selaku dosen penguji I yang telah banyaj

membantu dan memberikan masukan dan saran saran sehingga

terselesaikannya skripsi ini.

4. Ibu Dra. Uswatun Chasanah, M.Kes., Apt. selaku dosen penguji II yang telah

banyak membantu dan memberikan masukan, solusi, dan saran saran sehingga

terselesaikannya skripsi ini.

5. Bapak Yoyok Bekti Prasetyo, M.Kep., Sp. Kom selaku Dekan Fakultas ilmu

kesehatan Universitas Muhammadiyah Malang yang telah memberikan

kesempatan penulis belajar di Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas

Muhammadiyah Malang.

6. Ibu Dian Ermawati, S. Farm., M.Farm., Apt selaku Ketua Program Studi

Farmasi Universitas Muhammadiyah Malang yang telah memberikan motivasi

dan kesempatan penulis belajar di Program Studi Farmasi Universitas

Muhammadiyah Malang.

v

x

DAFTAR ISI

Halaman

HALAMAN JUDUL .............................................................................................. i

Lembar Pengesahan .............................................................................................. ii

Lembar Pengujian ................................................................................................ iii

KATA PENGANTAR .......................................................................................... iv

RINGKASAN ....................................................................................................... vi

ABSTRACT ........................................................................................................ viii

ABSTRAK ............................................................................................................ ix

DAFTAR ISI ........................................................................................................... x

DAFTAR TABEL .............................................................................................. xiv

DAFTAR GAMBAR ............................................................................................ xv

DAFTAR LAMPIRAN ..................................................................................... xvii

DAFTAR SINGKATAN .................................................................................. xviii

BAB I PENDAHULUAN ....................................................................................... 1

1.1 Latar Belakang .............................................................................................. 1

1.2 Rumusan Masalah ......................................................................................... 4

1.3 Tujuan Penelitian ........................................................................................... 4

1.4 Manfaat Penelitian ......................................................................................... 4

1.4.1 Bagi Pengetahuan .................................................................................. 4

1.4.2 Bagi Institusi Pendidikan ....................................................................... 5

1.4.3 Bagi Peneliti........................................................................................... 5

BAB II TINJAUAN PUSTAKA ............................................................................ 6

2.1 Tinjauan Tentang Pacar Air (Impatiens balsamina Linn) ............................. 6

2.1.1 Klasifikasi .............................................................................................. 6

2.1.2 Sinonim .................................................................................................. 7

2.1.3 Nama Daerah ......................................................................................... 7

2.1.4 Morfologi ............................................................................................... 7

2.1.5 Habitat dan Distribusi Geografis ........................................................... 8

2.1.6 Manfaat Tanaman Pacar Air .................................................................. 8

2.1.7 Kandungan Senyawa Pacar Air ............................................................. 8

2.2 Tinjauan Umum Staphylococcus aureus ....................................................... 9

xi

2.2.1 Taksonomi ............................................................................................. 9

2.2.2 Morfologi dan Sifat................................................................................ 9

2.2.3 Enzim dan Toksin ................................................................................ 10

2.2.4 Patogenesis dan Patologi ..................................................................... 12

2.3 Terapi Staphylococcus aureus ..................................................................... 13

2.4 Tinjauan Umum Infeksi ............................................................................... 13

2.5 Mekanisme Kerja Eritromisin ..................................................................... 13

2.6 Tinjauan Tentang Ekstrak ........................................................................... 14

2.7 Tinjauan Tentang Metode Ekstraksi ............................................................ 15

2.7.1 Pengertian Ekstraksi ............................................................................ 15

2.7.2 Pembuatan Serbuk Simplisia dan Klasifikasinya ................................ 15

2.7.3 Maserasi dan Remaserasi ..................................................................... 15

2.7.4 Maserasi Kinetik .................................................................................. 15

2.7.5 Metode Ekstraksi Berkesinambungan ................................................. 16

2.8 Tinjauan Pelarut .......................................................................................... 16

2.8.1 Etanol ................................................................................................... 17

2.9 Tinjauan Tentang Uji Kepekaan Terhadap Antimikroba Secara In Vitro ... 17

2.10 Tinjauan Tentang Metode Difusi Cakram ................................................. 17

2.11 Tinjauan Kromatografi Lapis Tipis ........................................................... 18

2.11.1 Fase Gerak ......................................................................................... 19

2.11.2 Fase Diam .......................................................................................... 19

BAB III KERANGKA KONSEPTUAL ............................................................. 20

3.1 Bagan Kerangka Konseptual ....................................................................... 20

3.2 Uraian Kerangka Konseptual ...................................................................... 21

BAB IV METODE PENELITIAN ..................................................................... 23

4.1 Lokasi Penelitian ......................................................................................... 23

4.2 Alat Penelitian ............................................................................................. 23

4.2.1 Alat Pembuatan Serbuk Simplisia ....................................................... 23

4.2.2 Proses Ekstraksi ................................................................................... 23

4.2.3 Pemisahan Senyawa dengan KLT ....................................................... 23

4.2.4 Pengujian Difusi Cakram ..................................................................... 23

4.3 Bahan Penelitian .......................................................................................... 24

xii

4.3.1 Bahan Uji ............................................................................................. 24

4.3.2 Proses Fraksinasi ................................................................................. 24

4.3.3 Pengujian Difusi Cakram ..................................................................... 24

4.3.4 Identifikasi Senyawa Dengan KLT ..................................................... 24

4.3.5 Sampel Bakteri..................................................................................... 24

4.4 Variabel Penelitian ...................................................................................... 24

4.4.1 Variabel Bebas ..................................................................................... 24

4.4.2 Variabel Terikat ................................................................................... 24

4.5 Penyiapan Sterilisasi Alat Dan Bahan ......................................................... 25

4.5.1 Sterilisasi Kering ................................................................................. 25

4.5.2 Sterilisasi Basah ................................................................................... 25

4.6 Metode Penelitian ........................................................................................ 25

4.6.1 Rancangan Penelitian........................................................................... 25

4.6.2 Kerangka Operasional ......................................................................... 26

4.6.3 Prosedur Kerja ..................................................................................... 27

4.7 Analisis Data ............................................................................................... 34

BAB V HASIL PENELITIAN ............................................................................ 35

5.1 Hasil Determinasi Bunga Pacar Air (Impatiens balsamina L.) ................... 35

5.2 Hasil Serbuk Simplisia Bunga Impatiens balsamina L. .............................. 35

5.3 Hasil Fraksinasi ........................................................................................... 36

5.3.1 Uji Organoleptis Dari Fraksi Etanol Bunga I.balsamina L. ................ 36

5.3.2 Hasil Fraksi Etanol Bunga Impatiens balsamina L. ............................ 36

5.4 Hasil Optimasi Berbagai Pelarut dengan Uji KLT Fraksi Etanol Bunga

Impatiens balsamina L. ................................................................................ 37

5.4.1 Identifikasi Senyawa Alkaloid dengan KLT ....................................... 37

5.4.2 Identifikasi Senyawa Terpenoid dengan KLT ..................................... 38

5.4.3 Identifikasi Senyawa Flavonoid dengan KLT ..................................... 39

5.4.4 Identifikasi Senyawa Polifenol dengan KLT ....................................... 40

5.4.5 Identifikasi Senyawa Antrakuinon dengan KLT ................................. 40

5.4.6 Hasil Pengukuran Nilai Rf dari Kromatografi Lapis Tipis .................. 41

5.5 Hasil Identifikasi Bakteri Staphylococcus aureus Secara Pewarnaan dan

Morfologi ...................................................................................................... 42

xiii

5.6 Hasil Uji Antibakteri Fraksi etanol Bunga Impatiens balsamina L. dengan

Metode Difusi Cakam terhadap Bakteri Staphylococcus aureus .................. 42

BAB VI PEMBAHASAN ..................................................................................... 45

BAB VII KESIMPULAN DAN SARAN ............................................................ 53

7.1 Kesimpulan .................................................................................................. 53

7.2 Saran ............................................................................................................ 53

DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................... 54

LAMPIRAN-LAMPIRAN .................................................................................. 59

xvii

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran Halaman

1. Daftar Riwayat Hidup .......................................................................................... 59

2. Surat Pernyataan................................................................................................... 60

3. Surat Determinasi Tanaman ................................................................................. 61

4. Sertifikasi Bakteri................................................................................................. 62

5. Laporan Hasil Uji ................................................................................................. 63

6. Biaya Penggunaan Bahan Dan Alat Laboratorium .............................................. 64

7. Perhitungan .......................................................................................................... 66

8. Bagan Kerja Penelitian ......................................................................................... 67

9. Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Menggunakan Metode Difusi Cakram............... 73

10. Tabel Data Hasil Penelitian ................................................................................ 74

11. Gambar Alat dan Bahan Penelitian .................................................................... 75

54

DAFTAR PUSTAKA

Abarna, V., Jayavarthinni, M., Sindhanai, V., Bhaskaran, K., Sethumadhavan, K.,

2017. Bacteriophage Typing of Methicillin Resistant Staphylococcus

Aureus and Changing Trend in their Antibiotic Profile. Annals of

International Medical and Dental Research, Vol. 3 No. 1, pp. 1-5.

Arista, M., 2013. Aktivitas Antioksidan Esktrak Etanol 80 % dan 96 % Daun

Katuk (Sauropus androgynus (L.) Merr.). Jurnal Ilmiah Mahasiswa

Universitas Surabaya. Vol. 2 No. 2, p. 1-14.

Adfa, M., 2007. Senyawa Antibakteri dari Daun Pacar Air (Impatiens balsamina

Linn.). Jurnal Gradien.,Vol.4 No.1, hal. 318-322.

Ansel, H.C., 2005. Pengantar Bentuk Sediaan Farmasi. Edisi 4, UI Press,

Jakarta, hal 96,147.

Banerjee, S. N., Emori, T.G., Culver, D. H., Gaynes, R. P., Jarvis, W. R., Horan,

T., Edwards, J. R., Tolson, J., Henderson, T., and Martone, W. J., 1991.

Secular Trends in Nosocomial Primary Bloodstream Infections in the United

States, 1980-1989. National Nosocomial Infections Surveillance System.

The American Journal of Medicine., Vo.91 No.3B, pp. 86s-89s.

Brooks, G.F., Carroll, K.C., Butel, J.S., Morse, S.A., Mietzner, T.A., 2013.

Jawetz, Melnick, & Adelberg’s Medical Microbiology. 26th Edition.

United States: The McGraw-Hill Companies p.199-205 ; 395-396.

Budiana,M.S.A., Kojong,N,S., Silvia,D,W., 2015. Uji Aktivitas Antibakteri

Ekstrak Etanol Bunga Dan Biji Tanaman Pacar Air (Impatiens

Balsamina L.) Terhadap Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus Aureus,

Pseudomonas Aeruginosa Dan Escherichia Coli Secara In-Vitro. Jurnal

Ilmiah Farmasi. 4 (4): 214-223.

Cappucino, J.G., Sherman, N., 2014. Microbiology : a laboratory manual. 10th

ed. United States of America: pearson Education Inc. 75-79.

Cowan, M.M., 1999. Plant Product as Antimicrobial Agents. Clinical

Microbiology Reviews., Vol 12 No.4 hal 564-582.

Crane, S.J., Uslan, D.Z., and Baddour, L.M., 2007. Bloodstream Infections in a

Geriatric Cohort: A Population-Based Study. The American Journal of

Medicine. Vol. 120 No. 12, pp. 1078–1083.

Daglia, M., 2012. Polyphenols as antimicrobial agents. Current Opinion in

Biotechnology. Vol.23 p.174-181.

Dalimartha, S. 2003. Atlas Tumbuhan Obat Indonesia-jilid 3. Jakarta: Trubus

Agriwidya, hal 85-86.

Darsana, G.O., Besung, N.K., Mahatmi, H., 2012. Potensi Daun Binahong

(Anredera Cordifolia (Tenore) Steenis) dalam Menghambat Pertumbuhan

55

Bakteri Escherichia coli secara in Vitro. Indonesia Medicus Veterinus.

Vo. 1 No. 3, p. 337-351.

Dave, H. dan Ledwani L., 2012. A review on anthraquinones isolated from Cassia

species and their applications. Indian Journal of Natural Products and

Resources. Vol. 3 (3), pp. 291-319.

Depkes RI., 1989, Materia Medika Indonesia, Jilid V, Departemen Kesehatan

Republik Indonesia. Jakarta: Depkes RI, hal.528.

Depkes RI., 1995. Farmakope Indonesia. Edisi ke-4, Jakarta : Departemen

Kesehatan Republik Indonesia, hal 7:65.

Depkes RI. 2000. Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat.

Cetakan pertama. Jakarta : Direktorat Jendral Pengawas Obat dan Makanan,

hal 9-12.

Departemen Kesehatan RI., 2008. Farmakope Herbal Indonesia Jilid I.

Departemen Kesehatan Republik Indonesia.

Departemen Kesehatan RI., 2009. Farmakope Herbal Indonesia Edisi I.

Departemen Kesehatan Republik Indonesia.

Dewoto, H.R., 2007. Pengembangan Obat Tradisional Indonesia Menjadi

Fitofarmaka. Majalah Kedokteran Indonesia Vol. 57. No.7, hal. 205.

Dzen, S.M., Roekistiningsi, S.S., Winarsih, S., Sumarno., Islam, S., Noorhamdani,

A.S., Murwani, S., dan Santosaningsih, D., 2003. Bakteriologi Medik.

Malang: Bayumedia Publishing, hal 131-139.

Fauzana, D.L., 2010. Perbandingan Metode Maserasi, Remaserasi, Perkolasi Dan

Reperkolasi Terhadap Rendemen Ekstrak Temulawak (Curcuma

Xanthorrhiza Roxb.). Bogor : Skripsi Sarjana Teknologi Pertanian.

Foster, T., 1996. Staphylococcus. Medical microbiology 4th edition, Galveston:

University of Texas Medical Branch. Chapter 12.

Gaby, M.N., 2007. Bioaktivitas Ekstrak Metanol Daun Pacar Air Impatiens

Balsamina L. Terhadap Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus aureus Dan

Pseudomonas aeruginosa Penyebab Cantengan. hal. 2.

Hafsan et al. 2015. Penuntun Praktikum Mikrobiologi. Laboratorium

Mikrobiologi Fakultas Sains Dan Teknologi. Universitas Islam Negeri

Alauddin Makassar. Makassar.

Handayani, D., Deapati, M., Marlina., Meilan., 2009. Skrining Aktivitas

Antibakteri Beberapa Biota Laut dari Perairan Pantai Painan, Sumatera

Barat. Fakultas Farmasi Universitas Andalas Madang.

Handayani, N., Fitriana, A., Handayani, D,S., 2013. Identifikasi dan uji aktivitas

antibakteri fraksi teraktif daun pacar kuku (lawsonia inermis linn.) Terhadap

56

staphylococcus aureus dan escherischia coli. Jurnal Ilmiah Kimia

Molekul by Department of Chemistry, Faculty of Mathematics and Natural

Sciences, Universitas Jenderal Soedirman, Purwokerto, Indonesia., Vol 8,

No 2, p. 181-182.

Harborne, J.B., 1987. Metode Fitokimia, Penuntun Cara Modern Menganalisis

Tumbuhan, Edisi ke-2, Bandung : ITB Press.

Hariana, A., 2013. 262 Tumbuhan Obat Dan Khasiatnya. Jakarta: Penebar

Swadaya, hal 257.

Ibrahim, A., Kuncoro, H., 2012. Identifikasi Metabolit Sekunder Dan Aktivitas

Antibakteri Ekstrak Daun Sungkai (Peronema canescens Jack.) Terhadap

Beberapa Bakteri Patogen. J. Trop. Pharm. Chem., Vol 2. No. 1, p. 8-14.

Ishiguro, K., dan Oku, H., 1997. “Antipruritic Effect of Flavonol and 1,4

naphthoquinone Derivatives from Impatiens Balsamina L.. Phytotherapy

Research. Vol 11 No.5, pp. 343–347.

Khasanah, E.N., 2015. Aktivitas Antimikroba Ekstrak N-Heksan Daun Jatropha

gossypifolia Linn Terhadap Staphylococcus aureus Dengan Metode

Bioautografi. Malang: Skripsi Program Sarjana.

Kemenkes RI., 2011. Peraturan Menteri Kesehatan Republik Indonesia

Nomor 2406/Menkes/Per/XII/2011. Tentang Pedoman Umum Penggunaan

Antibiotik. Jakarta, hal.4.

Kemenkes RI., 2015. Pemahaman Masyarakat Akan Penggunaan Obat Masih

Rendah. Kementerian Kesehatan Republik Indonesia,

http://www.depkes.go.id/article/print/15112700005/pemahaman-

masyarakat-akan-penggunaan-obat-masih-rendah.html. Diakses pada

tanggal 25 November 2016.

Kusuma, G.A., Longdong, S.N.J., dan Tumbol, R.A., 2014. Uji Daya Hambat

dari Ekstrak Tanaman Pacar Air (Impatiens balsamina L.) Terhadap

Pertumbuhan Bakteri Aeromonas hydrophilia. Jurnal Ilmiah Platax., Vol.2

No.2, pp.40–47.

Lay, B. W 1994. Analisis Mikroba di Laboratorium. Jakarta: PT.Raja Grafindo

Persada.

Mauchaza, K., Madzimbamuto, F.D., dan Waner, S., 2016. Methicillin-Resistant

Staphylococcus aureus in Zimbabwe. Ghana Medical Journal., Vol. 50

No.2, pp.68.

McFarland J. 1907. Nephelometer: an instrument for estimating the number

of bacteria in suspension. J Am Med Assoc. Vol. 14 . 1176-1178.

Miller, L.G., and Kaplan, S.L., 2009. Staphylococcus aureus: A Community

Pathogen. Infectious Disease Clinics of North America., Vol.23 No. 1,

pp.35–52.

57

Mohammed, H., 2009. Natural and Synthetic Flavonoid Derivatives with Potential

Antioidant and Anticancer Activities. Saarbrücken.

Naber, C.K., 2009. Staphylococcus Aureus Bacteremia: Epidemiology,

Pathophysiology, and Management Strategies. Suplement article., Vol.48

No.4, pp. S231–S237.

Narwal, S. S., 2009. In: Sampietro, D. A., Catalan, C. A. N., Vattuone, M. A.

(Eds). Isolation, Identification and Characterization of

Allelochemicals/Natural Products. USA: Science Publishers, p. 106, 111-

114.

Panichayupakaranant, p., 2001. Naphtoquinone Formation In Impatiens

Balsamina Cell Cultures. Pharmaceutical Biology., Vol. 39 No. 1, pp. 1-4.

Petti, C.A., and Fowler, V.G., 2002. Staphylococcus Aureus Bacteremia and

Endocarditis. Infectious Disease Clinics of North America., Vol. 16 No. 2,

pp.413–435.

Putra, I.N.K., 2010. Aktivitas Antibakteri Ekstrak Kulit Buah Manggis (Garcinia

mangostana L.) serta Kandungan Senyawa Aktifnya. J.Teknol. dan

Industri

Pangan. Vol. 21 No. 1, p. 1-5.

Rowe, R.C., Sherkey, P.J., dan Owen S.C. 2006. Handbook of Pharmaceutical

Excipients, Fitfth edition. London: Royal Pharmaceutical Society of Great

Britain, pp. 18.

Salni, Marisa, H., Mukti R.W., 2011. Isolasi Senyawa Antibakteri dari Daun

Jengkol (Pithecoobium lobatum Benth) dan Penentuan Nilai KHM-nya.

Jurnal Penelitian Sains. Vol. 14 No.2, p. 121-126.

Soleha, T.U. 2015. Uji Kepekaan Terhadap Antibiotik. Juke Unila, Vol. 5 No.9,

pp.121-122.

Siregar, A. F., Sabdono, A., Pringgenies, D., 2012. Potensi Antibakteri Ekstrak

Rumput Laut Terhadap Bakteri Penyakit Kulit Pseudomonas aeruginosa,

Staphylococcus epidermidis, dan Micrococcus luteus. Journal Of Marine

Research. Vol. 1 No. 2, p. 152-160.

Spink, W.W., and Hall, W.H., 1945. Penicillin Therapy At The University Of

Minnesota Hospitals: 1942-1944. Annals of Internal Medicine., Vol. 22

No.4, pp. 510–525.

Stahl, E. 1985. Analisis Obat Secara Kromatografi dan Mikroskopi. Bandung:

ITB.

Steenis, C.G.G.J., D Den Hoed, S Bloembergen, dan P.J Eyma. 2008. Flora

Untuk Sekolah Di Indonesia. cetakan ke-12, Jakarta: Pradnya Paramita,

hal 258-59.

58

Stefanović, O., Radojević, I., Vasić., S., Čomić, L.,2012. Antibacterial Activity

of Naturally Occurring Compounds from Selected Plants. Intech. hal 3.

Tjay, Tan Hoan, dan Kirana Rahardja. 2007. Obat-Obat Penting Khasiat,

Penggunaan, Dan Efek-efek sampingnya. Edisi keenam. Jakarta: PT. Elex

Media Komputindo, hal 65.

Tjitrosoepomo, G. 1993. Taksonomi Tumbuhan (Spermatophyta), Cetakan ke-4.

Yogyakarta: Gajahmada University press.

Todar, K., 2012. Staphylococcus aureus and Staphylococcal Disease. Todar's

Online Textbook of Bacteriology,

http://textbookofbacteriology.net/staph.html, Diakses pada 20 oktober 2016.

Tunjung, W.A.S., 2013. Obat Tradisional (Herbal) dan Metabolit Sekunder.

Majalah1000guru. Vol. 1 No. 4, Hal 6 – 10.

U.S. National Library of Medicine, 2016. Infectious Diseases, (NIH) National

Institute of Allergy and Infectious Diseases,

https://medlineplus.gov/infectiousdiseases.html. Diakses tanggal 17

September 2016.

Wisplinghoff, H., Bischoff, T., Tallent S.M., Seifert, H., Wenzel, R.P., and

Edmond, M.B., 2004. Nosocomial Bloodstream Infections in US Hospitals:

Analysis of 24,179 Cases from a Prospective Nationwide Surveillance

Study. Infectious Disease Clinics of North America.,Vol. 39 No. 3,

pp.309–317.

Woolley, J.G., 2001. Plant Alkaloids. ENCYCLOPEDIA OF LIFE SCIENCES

Nature Publishing Group., hal 1-2.