OBJETIVO
LABORATORIO DE ANALISIS CLINICO- MICROBIOLOGICO
FACULTAD DE BIOQUIMICA Y FARMACIA - UMSS
CODIGO
PROCEDIMIENTO OPERATIVO ESTANDARIZADO
POE-PARASITOLOGIA- 2010
VERSION
AREA: Parasitologia
1
Examen Parasitologico por Concentracion Mtodo por Flotacion
tcnica de Willis
Nmero de pginas: 6
OBJETIVO
Determinar la presencia de parsitos en heces, en sus diferentes
estadios , mediante la separacin de quistes de protozoos y huevos
de ciertos helmintos del exceso de residuos mediante el uso de
soluciones con elevada gravedad especfica.
ALCANCE
rea Parasitologia.
RESPONSABLES: Personal operativo de area; Auxiliar de
Laboratorio; Responsable Laboratorio
DEFINICIONES
Estos mtodos se realizan debido a la posible existencia de
multiparasitismos en el paciente, cualquiera que sea el resultado
obtenido tras el examen directo en fresco, ms si este resultado ha
sido negativo, debe repetirse el estudio fecal al microscopio tras
someter la muestra a un procedimiento de concentracin
parasitaria..
FUNDAMENTO
Las tcnicas de flotacin permiten la separacin de quistes de
protozoos y huevos de ciertos helmintos del exceso de residuos
mediante el uso de soluciones con elevada gravedad especfica.
Los elementos parasitarios son recuperados de la capa
superficial y los residuos
se mantienen en el fondo del tubo. Con estas tcnicas los
preparados son ms limpios que los obtenidos por sedimentacin.
Sin embargo, algunos huevos (como los oprculados, o los densos
como los estriles de Ascaris lumbricoides) no se concentran bien en
las flotaciones; en estos casos se recomienda el uso de tcnicas de
sedimentacin.
De todas maneras, en las flotaciones se observa tambin el fondo
del tubo para asegurar la recuperacin de todos los posibles
organismos .
Con el fin de maximizar la eficacia en la deteccin de parsitos
intestinales se recomienda el uso de ambos mtodos diagnsticos de
manera conjunta.
MUESTRA REQUERIDA
CONDICIONES DEL PACIEN TE
No es necesario que el paciente se encuentre en ayunas.
El paciente no debe estar consumiendo ningn tipo de medicamento
a base de carbn, sales de bario, magnesio, bismuto y purgantes
oleosos para la realizacin de esta prueba.
Tipo
Heces fecales
Cantidad
1 a 2 gr de materia fecal.
Recoleccin
Las heces deben recogerse en frascos de cierre hermtico, limpios
y secos, impidiendo la contaminacin con orina, y deben ser
remitidas en su totalidad al laboratorio. No se reciben muestras
contenidas en envases de carton u otro material que absorbe lquidos
.
Conservacin de la Muestra
La muestra debe ser remitida al Laboratorio lo antes posible ya
que no es aconsejable una conservacin
Sustancias interferentes
Medicamento a base de carbn, sales de bario, magnesio, bismuto y
purgantes oleosos .
REACTIVOS
Reactivos provistos
Agua
Lugol (opcional)
Solucin sobresaturada de cloruro sdico.
Preparacion de la Solucin de NaCl:
En un recipiente de 1 litro, se vierte agua hasta la mitad, y se
agrega suficiente cloruro de sodio (sal) para que se haga una
solucin sobresaturada, es decir, que quede exceso de sal sin
disolver en el fondo del recipiente.
El sobrenadante es el que se deber utilizar.
Para acelerar la disolucin, se puede calentar el recipiente y se
deja enfriar; el exceso de sal cristalizara.
MATERIAL REQUERIDO
Abate lenguas o aplicador de madera
Frascos de vidrio de aproximadamente 50 ml.
Portaobjetos de 75 x 25 mm.
Cubreobjetos de 22 x 40 mm.
Pipeta serolgica
Cloruro de sodio comercial (sal de cocina)
Guardapolvo
Guantes
Barbijo
Gorro (opcional)
EQUIPOS
Microscopio
Limitaciones
* No indicado en la bsqueda de huevos pesados ni de larvas.
* Como no se filtra la materia fecal, las preparaciones pueden
quedar muy sucias
PROCEDIMIENTO
1. Tomar de 2 a 3 gramos de materia fecal.
2. Colocar la muestra en un recipiente de vidrio y aadir unos 5
ml. de salmuera, homogeneizando con el abate lenguas.
3. Se va aadiendo mas salmuera y se sigue agitando con el abate
lenguas, hasta que llegue hasta el tope del frasco.
4. Se coloca un cubreobjetos limpio sobre la boca del
recipiente, de tal manera que quede en contacto con la
suspensin.
5. Dejarlo reposar de 5 a 10 minutos.
6. En ese lapso, los huevos de helmintos, cuyo peso especfico es
menor que el de la solucin, flotarn y quedarn adheridos a la cara
del cubreobjetos en contacto con la mezcla.
7. Se toma el cubreobjetos y se coloca sobre un
portaobjetos.
8. Si se desea se le puede poner una gota de lugol.
9. Se observa en el microscopio con objetivo 10x y 40x.
Precauciones
Se debe tener cuidado al colocar el cubreobjetos en la boca del
recipiente para que no queden burbujas, porque esto dificultara la
observacin.
El carcter infectante de la materia fecal deber tomarse en
consideracin para tomar las medidas de seguridad
correspondientes.
Observaciones
Al llevar a cabo el mtodo de Willis, se debe realizar con
cuidado especial para no derramar la solucin, no dejar burbujas en
el cubreobjetos, entre otras, para que de este modo la observacin
no se dificulte.
INTREPRETACION DE RESULTADOS
En caso de encontrar algn parasito durante la realizacin de esta
prueba se deber anotar en la hoja de resultados el nombre del
parasito as como su estadio evolutivo (trofozoto o quiste en el
caso de los protozoos y huevo o larva en caso de helmintos)
REPORTE DE RESULTADOS
PACIENTE: EDAD:
MUESTRA: EXAMEN SOLICITADO:
FECHA:
------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
RESULTADOS
Examen Coproparasitologico por Concentracin
Metodo de Willis :
ANEXOS
DIAGRAMA DE FLUJO
USO O APLICACIN DEL POE
Toda persona ( estudiante de internado, auxiliar de docencia ,
etc.) que trabaje en el rea de Parasitologia del Laboratorio
Asistencial:
Debe consultar el POE correspondiente , antes de iniciar su
trabajo. Cualquier consulta debe ser realizada al responsable del
Laboratorio o al auxiliar.
Puede contar con fotocopias de los POEs que necesite par su
trabajo. Las fotocopias deben estar validas mediante firma del
Responsable de Laboratorio.
Debe monitorizar la constante y oportuna actualizacin del
POE.
Los POEs podrn ser consultados en el archivador correspondiente,
solicitar autorizacin al responsable de Laboratorio.
REDACCION
RONALD IPORRE CESPEDES
REVISADO POR: Dra. Ftima Funes Responsable Laboratorio
APROBACION
AREA
FIRMA
FECHA
Parasitologia
Cochabamba- Diciembre- 2010
REVICIONES
