Embed Size (px)
Citation preview
UNIVERSIDAD DE ORIENTE
NÚCLEO DE SUCRE
ESCUELA DE CIENCIAS
DEPARTAMENTO DE BIOANÁLISIS
PROFESORA :
María Zulay Sulbaran
Cumaná, Mayo de 2011
BACHILLER:
Mena, Yanirin
INTRODUCCION
La gripe A H1N1 o H1N1 humana es un subtipo de Influenzavirus tipo A, del virus de la gripe, perteneciente a la familia de los Orthomyxoviridae, del griego orto (derecho) mixo (mucinas). De acuerdo a su estructura genómica este se clasifica en tres tipos:
Influenza A Influenza B Influenza C
Siendo el Virus de la Influenza tipo A el causante de grandes pandemias a nivel mundial debido a su gran variabilidad antigénica con lo que consigue eludir al sistema inmunológico de su huésped. Tienen la capacidad de infectar al hombre, cerdos, aves, caballos y mamíferos marinos
Todos los Influenzavirus tipo A están categorizados de acuerdo con las dos proteínas que se encuentran en la superficie del virus: Hemaglutininas (H) y Neuraminidasa (N). Todos los virus de influenza contienen hemaglutininas y neuraminidasa, pero la estructura de las proteínas difiere de cepa a cepa debido a una rápida mutación genética en el genoma viral.
Hay 16 subtipos "H" y 9 subtipos "N" conocidos en aves, pero sólo 3 "H" y 2 "N" se encuentran por lo general en humanos.
La envoltura lípidica del virus incluye la cápside que a su vez alberga el contenido genético que está formado por 8 segmentos de ARN de cadena simple, que codifican a cada uno de los componentes necesarios para la formación de un nuevo virus. Por otra parte la proteína M2 permite la liberación del material genético al citoplasma de las células del huésped para su posterior replicación.
Fué aislado por primera vez en el año 1933, a través de secreciones respiratorias de casos humano por lo que se le denomino con el nombre de Virus Influenza A. Desde entonces es quizás el virus humano mejor estudiado.
La Hemoaglutición e Inhibición de la Hemoaglutición es una técnica que se basa en la perdida de la capacidad hemoaglutinante de los virus al formarse el complejo Ag-Ac (suero del paciente) con los glóbulos rojos, los que se unen y se sedimentan formando un botón de precipitado lo cual es indicativo de una prueba POSITVA para dicha patología
Si duda alguna la alta sensibilidad, especificidad, costo minino al igual de la rapidez en el procesamiento muestras al mismo tiempo es lo que hace que es hoy en día estas prueba serológica sea la más utilizada para determinar la presencia de las patologías causadas por el virus de la influenza.
HISTORIA DEL VIRUS LA INFLUENZA A H1N1
La gripe porcina ha sido reportada como causante de zoonosis múltiples veces en seres humanos, siendo usualmente éstas de distribución bastante limitada. La pandemia de 1918 en seres humanos se asoció inicialmente con el H1N1,[12] reflejando la posible zoonosis del patógeno, ya fuera del cerdo a humanos o viceversa. La evidencia disponible de ese tiempo no es suficiente para resolver tal interrogante, ya que se creía originalmente que la cepa evolucionó de una mezcla de virus de la gripe porcina (al que los humanos son más susceptibles) y de la gripe aviar, en donde las dos cepas se combinaron en un cerdo infectado por ambas al mismo tiempo. En análisis posteriores en muestras de tejidos recuperados de ese año revelaron que se trataba de la mutación de un virus de gripe aviaria y que posiblemente no hubo tal combinación con virus de gripe porcina. Dicha pandemia de gripe española infectó un tercio de la población mundial (o aproximadamente 500 millones de personas en ese tiempo), y causó alrededor de 50 millones de muertes.
A mediados de siglo, en 1957, una pandemia de Gripe asiática infectó a más de 45 millones de personas en Norteamérica, ocasionando la muerte de 70.000 personas. En total causó casi 2 millones de muertes a nivel mundial. [15] Once años más tarde, desde 1968 a 1969, la pandemia de Gripe de Hong Kong afectó a más de 50 millones de personas causando unas 33.000 muertes. La CIA habría organizado la introducción del virus de la gripe porcina en Cuba en 1970, como parte de una estrategia terrorista llevada adelante contra ese país, siendo éste en aquel entonces el único ejemplo comprobado de la utilización de un arma biológica por parte de una superpotencia
Durante el año 2009-2010 se presento en México el primer brote de la Gripe A/H1N1 expandiéndose luego en todo el mundo dando origen a una pandemia.
En el 2011 en Venezuela se presento un brote en el estado Mérida el cual luego se extendería a los estados del área central de nuestro país causando la muerte de varias personas.
Virus A /H1N1
Todos los virus de la influenza del tipo A, incluidos los que regularmente causan epidemias estacionales en el hombre, son genéticamente lábiles y están bien adaptados para eludir las defensas del huésped.
Son efericos pleomorficos (gran variabilidad de formas) aunque generalmente son esféricos, vistos a microscopia electrónica con preparaciones teñidas negativamente, tienen un tamaño de 80 a 120 nm. A veces pueden adoptar formas alargadas de hasta 400nm.
Esta compuestas por una envoltura cubierta de proyecciones que recubre una estructura proteica (nucleocápside). La envoltura presenta dos capas, una externa de naturaleza lípidica, derivada de la membrana citoplasmática de las células del huésped y una capa interna, constituida por una proteína de información viral, de bajo peso molecular corresponde al 33% de todas las proteínas del virión, proteína matriz o M2.
En la envoltura lípidica se inserta radialmente a modo de proyecciones o espículas, las dos glicoproteínas del virus la Hemaglutininas (ha) en forma alargada, se divide en dos: HA2 se une a la capa lípidica de la envoltura y por la extremidad la HA1 que se une a los receptores mucoproteicos de los glóbulos rojos y de las células del epitelio respiratorio, son responsables de los fenómenos de la hemoaglutinación.
La Neuraminidasa, destruye los receptores celulares produciendo el fenómeno de la elución o separación de los glóbulos rojos y las células infectadas. Son diana del tratamiento farmacéutico. El genoma está compuesto por 8 segmentos de ARN lineal de cadena simple.
La gran variabilidad antigénica del virus de la influenza hace que la infección, por este, se desarrolle generalmente en forma de brotes epidémicos y pandemias con una gran morbilidad.
MODO DE TRANSMISIÓN
Los virus se diseminan al aire cuando un enfermo habla, tose o estornuda; otras personas se
pueden infectar al respirar el aire contaminado con los virus o cuando la persona toca algún
objeto contaminado con los virus y posteriormente se toca la boca o nariz. Las personas
contagiadas pueden diseminar virus desde uno o días antes de sentirse enfermos y siguen
excretando virus hasta por 7 días después. En el caso de los niños pueden transmitir los
virus incluso por varios días más.
PATOGENIA
El virus de la influenza se propaga de una persona a otra por gotitas de secreciones
respiratorias llevadas por el aire, o por contacto con manos o superficies contaminadas.
Unas pocas células del epitelio respiratorio se infectan si las partículas virales depositadas
no son removidas por el reflejo de la tos y escapan a la neutralización por algún anticuerpo
IgA específico preexistente o a la inactivación por los inhibidores inespecíficos a las
secreciones mucosas.
Los virus de influenza infectan a las células del tracto respiratorio, se enlazan mediante
hemaglutininas en residuos de azúcares de ácido siálico en las superficies de las células
epiteliales; típicamente en la nariz, garganta y pulmones de mamíferos o en el intestino de
las aves. Los viriones se reproducen con rapidez y se propagan a las células adyacentes
donde se repite el ciclo de la replicación. La NA viral disminuye la viscosidad de la
película de moco de las vías respiratorias dejando expuestos a los receptores de las
superficies celulares y promueve a la propagación de líquidos que contiene virus a las
porciones más inferiores de la vía. En poco tiempo muchas células de las vías respiratorias
están infectadas y finalmente mueren. Las células mueren en parte por los efectos directos
de los virus en las mismas, y también por parte a los interferones. La muerte celular tardía
también pueden deberse a las células citotóxicas. En el control a la infección por el virus
de la influenza la participación de la inmunidad celular es más importante que la
inmunidad humoral. En la primera fase de la infección, las células T participan en el
control de las células infectadas permitiendo así la depuración de estas, conjuntamente con
el virus.
La respuesta por anticuerpos específicos es usualmente insignificante hasta después que el
virus ha sido depurado por completo de la economía del individuo. El período de
incubación, desde el momento de la exposición al virus hasta el inicio de la enfermedad es
de 1 a 4 días aproximadamente ya que depende de la dosis viral y del estado inmunitario
del huésped.
RESPUESTA INMUNITARIA
La respuesta inmunitaria del hospedero al virus está dada en primera instancia por la
inmunidad celular específica temprana, con la proliferación de los linfocitos T citotóxicos
que reconocen a las células infectada ya que ésta expresa los determinantes antigénicos del
virus, en el contexto del complejo mayor de histocompatibilidad. Los síntomas distales al
aparato respiratorio (como fiebre, cefalea, astenia pérdida del apetito) tiene su origen en las
enormes cantidades de citoquinas y quemoquinas (como interferones o factor de necrosis
tumoral) producidas y liberadas por las células infectadas.
En segunda instancia pero no menos importante se encuentra la inmunidad humoral que
permita la producción de anticuerpos específicos aproximadamente para la segunda semana
del proceso infeccioso.
La inmunidad a la influenza es duradera y especificada de subtipo. Los anticuerpos contra
la NA y la HA son importantes en la inmunidad a la influenza, en tanto que los anticuerpos
a otras proteína codificadas por el virus no son protectores. La resistencia al desarrollo de la
infección se relaciona con los anticuerpos con la HA, en tanto que la menos gravedad de
la enfermedad y la menor capacidad para transmitir el virus a los contacto se vincula con
los anticuerpos dirigidos a la NA.
SINTOMATOLOGÍA
ADULTOS
a. Fiebre alta ( mayor de 39°C)
b. Fatiga
c. Cefalea
d. Dolor de garganta
e. Tos
f. Rinorrea
g. Congestión nasal
h. Mialgia
NIÑOS
a. Vómitos
b. Diarrea
c. Nauseas
GRUPOS MÁS VULNERALBLES
o Niños de 6 a 23 meses de edad
o Niños mayores de 2 años
o Adolecentes y adultos inmunocomprometidos
o Problemas respiratorios y cardíacos
o Embarazadas de alto riesgo
o Adultos mayores
HEMOGLUTINACIÓN E INHIBICIÓN DE LA
HEMOGLUTINACIÓN
La Hemoaglutinación e Inhibición de la Hemoaglutinación es una técnica que se basa en la
perdida de la capacidad hemoaglutinante de los virus al formarse el complejo Ag-Ac (suero
del paciente) con los glóbulos rojos, los que se unen y se sedimentan formando un botón de
precipitado lo cual es indicativo de una prueba POSITVA para dicha patología. En ausencia
de anticuerpos específicos se expresa la capacidad hemoaglutinante del virus, lo que se
visualiza por la formación de una malla de aglutinación en el pocillo donde se realiza la
prueba.
FUNDAMENTO DE LA TÉCNICA
+positivo
Inhibición a la Hemoaglutinación
MATERIALES EMPLEADOS EN LA TÉCNICA
1. Virus: virus parainfluenza de Bovino
2. Diluyentes: PBS pH 7,2 o 7,4
3. Glóbulos rojos de origen Bovino
4. Policubetas de fondo de U
5. Microdiluidores
6. Pipetas, papel sellador
7. Sueros problemas inactivados (control positivo y control negativo)
METODO
1. Se coloca una gota de PBS en cada pocillo de la policubeta, excepto en el primer
pocillo de la primera columna,
2. Se coloca el suero tratado y diluido 1/5 en cada pocillo, utilizando una pipeta para
cada suero. Se agrega una gota al pocillo 2 y al último.
3. Se procede a diluir en porciones constantes con los microdiluidores, desde el pocillo
número 2 hasta el último.
4. Agregar la suspensión del virus con la pipeta. Una gota para cada pocillo excepto el
último (control de inhibidores de la hemoaglutinación, sueros problemas)
5. Dejar 1 hora a temperatura ambiente para permitir la formación del complejo Ag-
Ac
6. Agregar una gota de la suspensión de glóbulos rojos (1/120) en cada pocillo,
incluyendo los sueros controles.
7. Mezclar suavemente, dejar a 4|°C por 4horas.
8. Lectura: no debe observarse hemoaglutinación en los controles. La titulación de
virus debe corresponder a 8 UIHA/0,025ml.
INTERPRETACIÓN: se toma como punto final de la actividad del suero la máxima
dilución en el fenómeno de la hemoaglutinación ha sido inhibida. El resultado final se
expresa en unidades inhibitorias de la hemoaglutinación (UIHA).
La reciproca de la dilución del punto final multiplicada por las UIHA del virus (8
UIHA/0,025ml) nos dará el numero de dosis inhibitorias hemoaglutinantes del suero por
unidad de volumen.
La presencia de reacciones IHA de diluciones:
a) 1/10 (40 o 80 UIHA) son consideradas negativas a la prueba
b) 1/10 a 1/40 (80 o 320 UIHA) indica un exposición al virus
c) 1/80 (mayor a 640 UIHA) es indicativo de una infección por el virus de la influenza
A/H1N1.
POSITIVO NEGATIVO
VENTAJAS DE LA TÉCNICA
o Altamente sensibles y especificas
o Rapidez
o Costo mínimo, lo cual permite de que sea de gran utilidad en todos
laboratorios clínicos
TRATAMIENTO PARA EL VIRUS INFLUENZA
o Amantadina
o Rimantadina
o Oseltamivir (Tamiflu)
o Zanamivir
o Vacunas
MEDIDAS PREVENTIVAS
o Lavarse las manos frecuentemente con agua caliente y jabón o utilizar un
limpiador de manos a base de alcohol.
o Evite tocarse los ojos, la nariz y la boca tanto como sea posible.
o Manténgase alejado de personas enfermas.
o Dormir suficiente, hacer ejercicio, controlar el estrés, tomar muchos
líquidos.
o Evitar exposición a contaminantes ambientales.
o No fumar en lugares cerrados o cerca de niños, ancianos y personas
enfermas.
CONCLUCIÓN
La tendencia de los virus de la influenza a experimentar cambios antigénicos frecuentes y
permanentes obliga a vigilar constantemente la situación mundial de la enfermedad y a
introducir cada año ajustes en la composición de las vacunas. Ambas actividades son una
piedra angular del Programa Mundial de la OMS contra la Influenza desde sus inicios en
1947.
Sin duda alguna el hecho de que el virus de la influenza sea muy inestable y mute cada
año, trae como consecuencia que no existan tratamientos preventivos fiables que
permitan evitar grandes brotes a nivel mundial, como fue el caso del virus de la Influenza
A/H1N1 en estos últimos años causando así la muerte de miles de personar en varios
países del mundo.
Las medidas preventivas resultan de gran importancia en este tipo de patologías ya que el
virus se diseminan en el aire cuando un enfermo habla, tose o estornuda; otras personas
se pueden infectar al respirar el aire contaminado con los virus o cuando la persona toca
algún objeto contaminado con los virus y posteriormente se toca la boca o nariz. Es en
este punto en donde los análisis de laboratorios resultan de mucha ayuda ya permite
identificar la presencia de este virus en el individuo. Entre la técnica as utiliza esta la
Hemoaglutinación e Inhibición de la Hemoaglutinación, la cual está basada en la perdida
de la capacidad hemoaglutinante de los virus al formarse el complejo Ag-Ac (suero del
paciente) con los glóbulos rojos, los que se unen y se sedimentan formando un botón de
precipitado lo cual es indicativo de una prueba POSITVA para dicha patología. En
ausencia de anticuerpos específicos se expresa la capacidad hemoaglutinante del virus, lo
que se visualiza por la formación de una malla de aglutinación en el pocillo donde se
realiza la prueba.
Otras técnicas también utilizadas para la identificación de la influenza A/H1N1 tenemos:
o ELIZA
o Hemoabsorción
