11
i UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI DAUN PUTRI MALU (Mimosa pudica Linn.) DAN IDENTIFIKASI SENYAWA MENGGUNAKAN MS/MS SKRIPSI Diajukan sebagai salah satu syarat Untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi PRASETYO HADI MULIA 1108010012 PROGRAM STUDI FARMASI FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO 2017

UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI DAUN PUTRI MALU (Mimosa …repository.ump.ac.id/4769/1/Prasetyo Hadi Mulia_JUDUL.pdf · UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI DAUN PUTRI MALU (Mimosa pudica L. inn.)

  • Upload
    vobao

  • View
    242

  • Download
    0

Embed Size (px)

Citation preview

Page 1: UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI DAUN PUTRI MALU (Mimosa …repository.ump.ac.id/4769/1/Prasetyo Hadi Mulia_JUDUL.pdf · UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI DAUN PUTRI MALU (Mimosa pudica L. inn.)

i

UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI DAUN PUTRI MALU (Mimosa pudica Linn.)

DAN IDENTIFIKASI SENYAWA MENGGUNAKAN MS/MS

SKRIPSI

Diajukan sebagai salah satu syarat

Untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi

PRASETYO HADI MULIA

1108010012

PROGRAM STUDI FARMASI

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO

2017

Page 2: UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI DAUN PUTRI MALU (Mimosa …repository.ump.ac.id/4769/1/Prasetyo Hadi Mulia_JUDUL.pdf · UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI DAUN PUTRI MALU (Mimosa pudica L. inn.)

ii

Uji Aktivitas Antibakteri..., Prasetyo Hadi Mulia, Fakultas Farmasi UMP, 2017

Page 3: UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI DAUN PUTRI MALU (Mimosa …repository.ump.ac.id/4769/1/Prasetyo Hadi Mulia_JUDUL.pdf · UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI DAUN PUTRI MALU (Mimosa pudica L. inn.)

iii

Uji Aktivitas Antibakteri..., Prasetyo Hadi Mulia, Fakultas Farmasi UMP, 2017

Page 4: UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI DAUN PUTRI MALU (Mimosa …repository.ump.ac.id/4769/1/Prasetyo Hadi Mulia_JUDUL.pdf · UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI DAUN PUTRI MALU (Mimosa pudica L. inn.)

iv

Uji Aktivitas Antibakteri..., Prasetyo Hadi Mulia, Fakultas Farmasi UMP, 2017

Page 5: UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI DAUN PUTRI MALU (Mimosa …repository.ump.ac.id/4769/1/Prasetyo Hadi Mulia_JUDUL.pdf · UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI DAUN PUTRI MALU (Mimosa pudica L. inn.)

v

UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI DAUN PUTRI MALU (Mimosa pudica Linn.)

DAN IDENTIFIKASI SENYAWA MENGGUNAKAN MS/MS

Prasetyo Hadi, Asmiyenti Djaliasrin Djalil, Retno Wahyuningrum

ABSTRAK

Beberapa penelitian menyebutkan bahwa daun putri malu memiliki khasiat dalam bidang

kesehatan, salah satunya yaitu memiliki aktivitas antibakteri. Pada penelitian kali ini

dilakukan pengujian aktivitas antibakteri ekstrak metanol daun putri malu pada bakteri Gram

negatif yaitu Pseudomonas aeruginosa dan bakteri Gram positif yaitu Basillus subtilis.

Dalam penelitian ini juga dilakukan identifikasi senyawa yang memiliki aktivitas antibakteri

paling aktif pada ekstrak metanol daun putri malu menggunakan MS/MS. Pada pengujian

aktivitas antibakteri terhadap ekstrak metanol, fraksi n heksana, fraksi etil asetat, dan fraksi

metanol-air. Yang memiliki aktivitas antibakteri paling aktif, yaitu fraksi metanol-air. Fraksi

metanol-air kemudian dilakukan pemisahan dengan menggunakan KLT preparatif

menggunakan pelarut etil asetat:kloforom (8:2). Pemisahan ini mendapat 7 isolat yang

kemudian dilanjutkan penelitian menggunakan MS/MS. Hasil yang didapat pada penelitian

MS/MS adalah m/z base peak tiap isolat dari pecahan fragmen paling dominan setiap

isolatnya yaitu m/z 65,10.

Kata kunci: Aktivitas antibakteri, daun putri malu, identifikasi senyawa dengan MS/MS

Uji Aktivitas Antibakteri..., Prasetyo Hadi Mulia, Fakultas Farmasi UMP, 2017

Page 6: UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI DAUN PUTRI MALU (Mimosa …repository.ump.ac.id/4769/1/Prasetyo Hadi Mulia_JUDUL.pdf · UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI DAUN PUTRI MALU (Mimosa pudica L. inn.)

vi

ANTIBACTERIAL ACTIVITY OF Mimosa pudica Linn. LEAVES AND COMPOUNDS

IDENTIFICATION WITH MS/MS

Prasetyo Hadi, Asmiyenti Djaliasrin Djalil, Retno Wahyuningrum,

ABSTRACT

Some research say that leaves of the Mimosa pudica has health benefit, one of which is

having antibacterial activity. In this research, the antibacterial activity of methanolic extract

the Mimosa pudica leaves makes orchid parent in Gram negative bacteria, Pseudomonas

aeruginosa and Gram positive bacteria, Basillus subtilis. In this study also conducted

identification of compounds that have the most aktive antibacterial activity on extract

methanolic Mimosa pudica using MS/MS. In testing of antibacterial activity to methanolic

extract, n-hexane fraction, ethyl acetate fraction, and methanol-water fraction. Which has the

most active antibacterial activity is methanol-water fraction. The methanol-water fraction was

then separated using preparative KLT using the solvent ethyl acetate : chloroform (8:2). This

separation got 7 isolates which then continued research using MS/MS. The results obtained in

the MS/MS study were m/z base peak of each isolate of the most dominant fragment

fragments of each isolate of m/z 65,10.

Keywords: Antibacterial activity, Mimosa pudica leaves, Compounds identification with

MS/MS

Uji Aktivitas Antibakteri..., Prasetyo Hadi Mulia, Fakultas Farmasi UMP, 2017

Page 7: UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI DAUN PUTRI MALU (Mimosa …repository.ump.ac.id/4769/1/Prasetyo Hadi Mulia_JUDUL.pdf · UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI DAUN PUTRI MALU (Mimosa pudica L. inn.)

vii

KATA PENGANTAR

Puji syukur kepada Tuhan Yang Maha Esa, karena atas berkah dan rahmat-Nya, dapat

menyelesaikan skripsi ini dengan judul Aktivitas Antibakteri Daun Putri Malu (Mimosa

pudica linn) Dan Identifikasi Senyawa menggunakan LC-MS/MS. Penulisan skripsi ini

dilakukan dalam rangka memnuhi salah satu syarat untuk mencapai gelar Sarjana Farmasi

pada Program Studi S1 Farmasi Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto.

Penulis menyadari bahwa tanpa bantuan dan bimbingan dari berbagai pihak, dari

masa perkuliahan sampai pada penyusunan skripsi ini, sangatlah sulit untuk menyelesaikan

skripsi ini. Oleh karena itu, pada kesempatan ini, penulis mengucapkan terimakasih kepada

yang terhormat:

1) Dr. H. Syamsuhadi Irsyad, S.H., M.H., selaku Rektor Universitas

Muhammadiyah Purwokerto;

2) Dr. Agus Siswanto. M.Si., Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi yang telah

berbagi informasi dan bimbingan tentang tata laksana penyusunan skripsi;

3) Wahyu Utaminingrum, M.Sc., Apt., selaku Ketua Program Studi S1 Farmasi

yang telah membimbing dalam penyusunan skripsi;

4) Dr. Asmiyenti Djaliasrin Djalil, M.Si., serta Retno Wahyuningrum, M.Si.,

Apt., yang telah membimbing saya selama saya mengerjakan skripsi ini dari

awal hingga akhir. Membimbing disaat melakukan penelitian maupun

penulisan skripsi.

5) Dwi Hartanti, M.Farm., Apt., yang telah memberikan pertanyaan serta

masukan dalam ujian skripsi sehingga saya dapat melewati ujian kelayakan

sebagai sarjana Farmasi

6) Zainur Rahman Hakim, M.Farm, Apt., yang telah menyempatkan waktu dalam

memberikan ujian skripsi serta memberikan pertanyaan dan masukan dalam

penulisan skripsi sehingga saya dapat melewati ujian kelayakan sebagai

sarjana Farmasi.

7) Bapak dan Ibu dosen yang telah membimbing selama perkuliahan S1 Farmasi

8) Bapak dan Ibu yang selalu mendukung dan mendoakan saya

9) Teman-teman S1 Farmasi yang telah menemani selama perkuliahan S1

Farmasi

Uji Aktivitas Antibakteri..., Prasetyo Hadi Mulia, Fakultas Farmasi UMP, 2017

Page 8: UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI DAUN PUTRI MALU (Mimosa …repository.ump.ac.id/4769/1/Prasetyo Hadi Mulia_JUDUL.pdf · UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI DAUN PUTRI MALU (Mimosa pudica L. inn.)

viii

Akhir kata, semoga Allah memberikan balasan atas segala kebaikan semua pihak

yang telah membantu. Semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi pengemban ilmu. Amin.

Purwokerto, 5 Juni 2017

Penulis,

Prasetyo Hadi Mulia

1108010012

Uji Aktivitas Antibakteri..., Prasetyo Hadi Mulia, Fakultas Farmasi UMP, 2017

Page 9: UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI DAUN PUTRI MALU (Mimosa …repository.ump.ac.id/4769/1/Prasetyo Hadi Mulia_JUDUL.pdf · UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI DAUN PUTRI MALU (Mimosa pudica L. inn.)

ix

DAFTAR ISI

Halaman

HALAMAN JUDUL ....................................................................................................... i

SURAT PENGESAHAN ................................................................................................ ii

HALAMAN PERNYATAAN ........................................................................................ iii

ABSTRAK ....................................................................................................................... iv

KATA PENGANTAR ..................................................................................................... vi

DAFTAR ISI ................................................................................................................... viii

BAB I PENDAHULUAN .............................................................................................. 1

A. Latar Belakang ............................................................................................... 1

B. Perumusan Masalah ....................................................................................... 2

C. Tujuan Penelitian ........................................................................................... 2

D. Manfaat Penelitian ......................................................................................... 2

BAB II TINJAUAN PUSTAKA .................................................................................... 3

I. Hasil Penelitian Terdahulu ............................................................................. 3

II. Landasan Teori ............................................................................................... 3

A. Sistematika Tumbuhan ............................................................................. 3

- Deskripsi Tanaman ............................................................................. 4

- Kandungan dan Manfaat Tanaman ..................................................... 5

B. Bakteri ....................................................................................................... 5

C. Metode Isolasi Senyawa ........................................................................... 6

- Ekstrak ................................................................................................ 6

- Ekstraksi ............................................................................................. 6

- Kromatografi Lapis Tipis ................................................................... 7

D. Antibakteri ................................................................................................ 8

E. LC-MS/MS ............................................................................................... 9

III. Kerangka Konsep ........................................................................................... 12

IV. Hipotesis ........................................................................................................ 12

Uji Aktivitas Antibakteri..., Prasetyo Hadi Mulia, Fakultas Farmasi UMP, 2017

Page 10: UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI DAUN PUTRI MALU (Mimosa …repository.ump.ac.id/4769/1/Prasetyo Hadi Mulia_JUDUL.pdf · UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI DAUN PUTRI MALU (Mimosa pudica L. inn.)

x

BAB III METODE PENELITIAN ................................................................................. 13

1. Rancangan Penelitian ..................................................................................... 13

2. Variabel Penelitian ......................................................................................... 13

3. Sampel ............................................................................................................ 13

4. Subjek Uji ....................................................................................................... 13

5. Alat dan Bahan ............................................................................................... 13

6. Cara Penelitian ................................................................................................ 14

- Determinasi Tumbuhan ............................................................................ 14

- Pembuatan Simplisia dan Serbuk Daun ................................................... 14

- Pembuatan Ekstrak Daun Putri Malu ....................................................... 15

- Ekstraksi Cair-Cair ................................................................................... 15

- Sterilisasi Alat .......................................................................................... 15

- Pembuatan Media ..................................................................................... 16

- Kultur Bakteri ........................................................................................... 16

- Pembuatan Larutan Inokulum .................................................................. 16

- Pengukuran Daya Hambat dengan Metode Kirby Bauer ........................ 16

- Pemisahan Kandungan Senyawa dengan KLT Preparatif ....................... 17

- Identifikasi Senyawa dengan LC-MS/MS ............................................... 17

7. Analisis Hasil .................................................................................................. 18

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ........................................................................ 19

A. Pengambilan dan Determinasi Tumbuhan ...................................................... 19

B. Pembuatan Simplisia ....................................................................................... 19

C. Pembuatan Ekstrak Metanol Daun Putri Malu ................................................ 20

D. Fraksinasi Ekstrak Daun Putri Malu ................................................................ 21

E. Uji Aktivitas Antibakteri ................................................................................. 22

- Tabel diameter zona hambat P. aeruginosa ........................................ 23

- Tabel diameter zoba hambat B. subtilis ............................................... 23

F. Kromatografi Lapis Tipis Preparatif ................................................................ 24

G. LC-MS/MS ...................................................................................................... 25

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN .......................................................................... 26

A. Kesimpulan ...................................................................................................... 27

Uji Aktivitas Antibakteri..., Prasetyo Hadi Mulia, Fakultas Farmasi UMP, 2017

Page 11: UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI DAUN PUTRI MALU (Mimosa …repository.ump.ac.id/4769/1/Prasetyo Hadi Mulia_JUDUL.pdf · UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI DAUN PUTRI MALU (Mimosa pudica L. inn.)

xi

B. Saran ................................................................................................................. 27

DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................................ 28

LAMPIRAN ....................................................................................................................... 30

a. Hasil Determinasi Daun Putri Malu ........................................................................ 31

b. Hasil Simplisia dan Penyerbukan Daun Putri Malu ................................................ 32

c. Ekstrak Metanol Daun Putri Malu .......................................................................... 33

d. Fraksinasi Ekstrak Daun Putri Malu ........................................................................ 34

e. Hasil Uji Aktivitas Antibakteri ................................................................................ 35

f. Hasil KLT Preparatif ................................................................................................. 36

g. Data Hasil MS/MS .................................................................................................... 37

h. Data Spektrum dan Hasil MS/MS ............................................................................. 41

Uji Aktivitas Antibakteri..., Prasetyo Hadi Mulia, Fakultas Farmasi UMP, 2017