Upload
vobao
View
242
Download
0
Embed Size (px)
Citation preview
i
UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI DAUN PUTRI MALU (Mimosa pudica Linn.)
DAN IDENTIFIKASI SENYAWA MENGGUNAKAN MS/MS
SKRIPSI
Diajukan sebagai salah satu syarat
Untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi
PRASETYO HADI MULIA
1108010012
PROGRAM STUDI FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO
2017
ii
Uji Aktivitas Antibakteri..., Prasetyo Hadi Mulia, Fakultas Farmasi UMP, 2017
iii
Uji Aktivitas Antibakteri..., Prasetyo Hadi Mulia, Fakultas Farmasi UMP, 2017
iv
Uji Aktivitas Antibakteri..., Prasetyo Hadi Mulia, Fakultas Farmasi UMP, 2017
v
UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI DAUN PUTRI MALU (Mimosa pudica Linn.)
DAN IDENTIFIKASI SENYAWA MENGGUNAKAN MS/MS
Prasetyo Hadi, Asmiyenti Djaliasrin Djalil, Retno Wahyuningrum
ABSTRAK
Beberapa penelitian menyebutkan bahwa daun putri malu memiliki khasiat dalam bidang
kesehatan, salah satunya yaitu memiliki aktivitas antibakteri. Pada penelitian kali ini
dilakukan pengujian aktivitas antibakteri ekstrak metanol daun putri malu pada bakteri Gram
negatif yaitu Pseudomonas aeruginosa dan bakteri Gram positif yaitu Basillus subtilis.
Dalam penelitian ini juga dilakukan identifikasi senyawa yang memiliki aktivitas antibakteri
paling aktif pada ekstrak metanol daun putri malu menggunakan MS/MS. Pada pengujian
aktivitas antibakteri terhadap ekstrak metanol, fraksi n heksana, fraksi etil asetat, dan fraksi
metanol-air. Yang memiliki aktivitas antibakteri paling aktif, yaitu fraksi metanol-air. Fraksi
metanol-air kemudian dilakukan pemisahan dengan menggunakan KLT preparatif
menggunakan pelarut etil asetat:kloforom (8:2). Pemisahan ini mendapat 7 isolat yang
kemudian dilanjutkan penelitian menggunakan MS/MS. Hasil yang didapat pada penelitian
MS/MS adalah m/z base peak tiap isolat dari pecahan fragmen paling dominan setiap
isolatnya yaitu m/z 65,10.
Kata kunci: Aktivitas antibakteri, daun putri malu, identifikasi senyawa dengan MS/MS
Uji Aktivitas Antibakteri..., Prasetyo Hadi Mulia, Fakultas Farmasi UMP, 2017
vi
ANTIBACTERIAL ACTIVITY OF Mimosa pudica Linn. LEAVES AND COMPOUNDS
IDENTIFICATION WITH MS/MS
Prasetyo Hadi, Asmiyenti Djaliasrin Djalil, Retno Wahyuningrum,
ABSTRACT
Some research say that leaves of the Mimosa pudica has health benefit, one of which is
having antibacterial activity. In this research, the antibacterial activity of methanolic extract
the Mimosa pudica leaves makes orchid parent in Gram negative bacteria, Pseudomonas
aeruginosa and Gram positive bacteria, Basillus subtilis. In this study also conducted
identification of compounds that have the most aktive antibacterial activity on extract
methanolic Mimosa pudica using MS/MS. In testing of antibacterial activity to methanolic
extract, n-hexane fraction, ethyl acetate fraction, and methanol-water fraction. Which has the
most active antibacterial activity is methanol-water fraction. The methanol-water fraction was
then separated using preparative KLT using the solvent ethyl acetate : chloroform (8:2). This
separation got 7 isolates which then continued research using MS/MS. The results obtained in
the MS/MS study were m/z base peak of each isolate of the most dominant fragment
fragments of each isolate of m/z 65,10.
Keywords: Antibacterial activity, Mimosa pudica leaves, Compounds identification with
MS/MS
Uji Aktivitas Antibakteri..., Prasetyo Hadi Mulia, Fakultas Farmasi UMP, 2017
vii
KATA PENGANTAR
Puji syukur kepada Tuhan Yang Maha Esa, karena atas berkah dan rahmat-Nya, dapat
menyelesaikan skripsi ini dengan judul Aktivitas Antibakteri Daun Putri Malu (Mimosa
pudica linn) Dan Identifikasi Senyawa menggunakan LC-MS/MS. Penulisan skripsi ini
dilakukan dalam rangka memnuhi salah satu syarat untuk mencapai gelar Sarjana Farmasi
pada Program Studi S1 Farmasi Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto.
Penulis menyadari bahwa tanpa bantuan dan bimbingan dari berbagai pihak, dari
masa perkuliahan sampai pada penyusunan skripsi ini, sangatlah sulit untuk menyelesaikan
skripsi ini. Oleh karena itu, pada kesempatan ini, penulis mengucapkan terimakasih kepada
yang terhormat:
1) Dr. H. Syamsuhadi Irsyad, S.H., M.H., selaku Rektor Universitas
Muhammadiyah Purwokerto;
2) Dr. Agus Siswanto. M.Si., Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi yang telah
berbagi informasi dan bimbingan tentang tata laksana penyusunan skripsi;
3) Wahyu Utaminingrum, M.Sc., Apt., selaku Ketua Program Studi S1 Farmasi
yang telah membimbing dalam penyusunan skripsi;
4) Dr. Asmiyenti Djaliasrin Djalil, M.Si., serta Retno Wahyuningrum, M.Si.,
Apt., yang telah membimbing saya selama saya mengerjakan skripsi ini dari
awal hingga akhir. Membimbing disaat melakukan penelitian maupun
penulisan skripsi.
5) Dwi Hartanti, M.Farm., Apt., yang telah memberikan pertanyaan serta
masukan dalam ujian skripsi sehingga saya dapat melewati ujian kelayakan
sebagai sarjana Farmasi
6) Zainur Rahman Hakim, M.Farm, Apt., yang telah menyempatkan waktu dalam
memberikan ujian skripsi serta memberikan pertanyaan dan masukan dalam
penulisan skripsi sehingga saya dapat melewati ujian kelayakan sebagai
sarjana Farmasi.
7) Bapak dan Ibu dosen yang telah membimbing selama perkuliahan S1 Farmasi
8) Bapak dan Ibu yang selalu mendukung dan mendoakan saya
9) Teman-teman S1 Farmasi yang telah menemani selama perkuliahan S1
Farmasi
Uji Aktivitas Antibakteri..., Prasetyo Hadi Mulia, Fakultas Farmasi UMP, 2017
viii
Akhir kata, semoga Allah memberikan balasan atas segala kebaikan semua pihak
yang telah membantu. Semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi pengemban ilmu. Amin.
Purwokerto, 5 Juni 2017
Penulis,
Prasetyo Hadi Mulia
1108010012
Uji Aktivitas Antibakteri..., Prasetyo Hadi Mulia, Fakultas Farmasi UMP, 2017
ix
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL ....................................................................................................... i
SURAT PENGESAHAN ................................................................................................ ii
HALAMAN PERNYATAAN ........................................................................................ iii
ABSTRAK ....................................................................................................................... iv
KATA PENGANTAR ..................................................................................................... vi
DAFTAR ISI ................................................................................................................... viii
BAB I PENDAHULUAN .............................................................................................. 1
A. Latar Belakang ............................................................................................... 1
B. Perumusan Masalah ....................................................................................... 2
C. Tujuan Penelitian ........................................................................................... 2
D. Manfaat Penelitian ......................................................................................... 2
BAB II TINJAUAN PUSTAKA .................................................................................... 3
I. Hasil Penelitian Terdahulu ............................................................................. 3
II. Landasan Teori ............................................................................................... 3
A. Sistematika Tumbuhan ............................................................................. 3
- Deskripsi Tanaman ............................................................................. 4
- Kandungan dan Manfaat Tanaman ..................................................... 5
B. Bakteri ....................................................................................................... 5
C. Metode Isolasi Senyawa ........................................................................... 6
- Ekstrak ................................................................................................ 6
- Ekstraksi ............................................................................................. 6
- Kromatografi Lapis Tipis ................................................................... 7
D. Antibakteri ................................................................................................ 8
E. LC-MS/MS ............................................................................................... 9
III. Kerangka Konsep ........................................................................................... 12
IV. Hipotesis ........................................................................................................ 12
Uji Aktivitas Antibakteri..., Prasetyo Hadi Mulia, Fakultas Farmasi UMP, 2017
x
BAB III METODE PENELITIAN ................................................................................. 13
1. Rancangan Penelitian ..................................................................................... 13
2. Variabel Penelitian ......................................................................................... 13
3. Sampel ............................................................................................................ 13
4. Subjek Uji ....................................................................................................... 13
5. Alat dan Bahan ............................................................................................... 13
6. Cara Penelitian ................................................................................................ 14
- Determinasi Tumbuhan ............................................................................ 14
- Pembuatan Simplisia dan Serbuk Daun ................................................... 14
- Pembuatan Ekstrak Daun Putri Malu ....................................................... 15
- Ekstraksi Cair-Cair ................................................................................... 15
- Sterilisasi Alat .......................................................................................... 15
- Pembuatan Media ..................................................................................... 16
- Kultur Bakteri ........................................................................................... 16
- Pembuatan Larutan Inokulum .................................................................. 16
- Pengukuran Daya Hambat dengan Metode Kirby Bauer ........................ 16
- Pemisahan Kandungan Senyawa dengan KLT Preparatif ....................... 17
- Identifikasi Senyawa dengan LC-MS/MS ............................................... 17
7. Analisis Hasil .................................................................................................. 18
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ........................................................................ 19
A. Pengambilan dan Determinasi Tumbuhan ...................................................... 19
B. Pembuatan Simplisia ....................................................................................... 19
C. Pembuatan Ekstrak Metanol Daun Putri Malu ................................................ 20
D. Fraksinasi Ekstrak Daun Putri Malu ................................................................ 21
E. Uji Aktivitas Antibakteri ................................................................................. 22
- Tabel diameter zona hambat P. aeruginosa ........................................ 23
- Tabel diameter zoba hambat B. subtilis ............................................... 23
F. Kromatografi Lapis Tipis Preparatif ................................................................ 24
G. LC-MS/MS ...................................................................................................... 25
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN .......................................................................... 26
A. Kesimpulan ...................................................................................................... 27
Uji Aktivitas Antibakteri..., Prasetyo Hadi Mulia, Fakultas Farmasi UMP, 2017
xi
B. Saran ................................................................................................................. 27
DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................................ 28
LAMPIRAN ....................................................................................................................... 30
a. Hasil Determinasi Daun Putri Malu ........................................................................ 31
b. Hasil Simplisia dan Penyerbukan Daun Putri Malu ................................................ 32
c. Ekstrak Metanol Daun Putri Malu .......................................................................... 33
d. Fraksinasi Ekstrak Daun Putri Malu ........................................................................ 34
e. Hasil Uji Aktivitas Antibakteri ................................................................................ 35
f. Hasil KLT Preparatif ................................................................................................. 36
g. Data Hasil MS/MS .................................................................................................... 37
h. Data Spektrum dan Hasil MS/MS ............................................................................. 41
Uji Aktivitas Antibakteri..., Prasetyo Hadi Mulia, Fakultas Farmasi UMP, 2017