Upload
others
View
10
Download
0
Embed Size (px)
Citation preview
i
UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOLIK DAUN
MANGGA (Mangifera indica L.) VARIETAS ARUMANIS TERHADAP
RADIKAL DPPH (1,1 dyphenyl-2-pikrilhidrazil)
KARYA TULIS ILMIAH
Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat memperoleh
Gelar Ahli Madya Farmasi
Progam Studi D-III Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universitas Setia Budi
Oleh :
Intan Dewi Utami
19161220B
FAKULTAS FARMASI
PROGRAM STUDI D-III FARMASI
UNIVERSITAS SETIA BUDI
SURAKARTA
2019
ii
PENGESAHAN KARYA TULIS ILMIAH
Berjudul
UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOLIK DAUN
MANGGA (Mangifera indica L.) VARIETAS ARUMANIS TERHADAP
RADIKAL DPPH (1,1 dyphenyl-2-pikrilhidrazil)
Oleh :
Intan Dewi Utami
19161220B
Dipertahankan dihadapan panitia Penguji Karya Tulis Ilmiah Fakultas Farmasi
Universitas Setia Budi
Pada tanggal : 12 Juli 2019
Mengetahui,
Fakultas Farmasi
Universitas Setia Budi
Pembimbing, Dekan,
Fitri Kurniasari, M.Farm., Apt Prof. Dr. R.A. Oetari, SU., MM., Apt
Penguji:
1. Taufik Turahman, M.Farm., Apt 1. ....................
2. Nuraini Harmastuti, M.Si 2. ....................
3. Fitri Kurniasari, M.Farm., Apt 3. ...................
iii
PERNYATAAN
Saya menyatakan bahwa tugas akhir ini adalah hasil pekerjaan saya sendiri
dan tidak terdapat karya yang pernah diajukan untuk memperoleh gelar Ahli
Madya di suatu perguruan tinggi dan sepanjang pengetahuan saya tidak terdapat
karya atau pendapat yang pernah ditulis atau diterbitkan oleh orang lain, kecuali
yang secara tertulis diacu dalam naskah ini dan disebutkan dalam daftar pustaka.
Apabila tugas akhir ini merupakan jiplakan dari penelitian atau karya
ilmiah/skripsi orang lain, maka saya siap menerima sanksi, baik secara akademis
maupun secara hukum.
Surakarta, Juli 2019
Intan Dewi Utami
iv
HALAMAN PERSEMBAHAN
Dengan hormat dan kerendahan hati penulis mempersembahkan karya tulis ini
kepada :
Tuhan Yang Maha Esa yang sudah memberikan berkat dan rahmat-Nya.
Keluargaku tercinta, Bapak, Mamah, Mas Danang, Mas Joni sebagai
wujud rasa hormat, terima kasih, dan pertanggung jawaban.
Para sahabatku, teman hidupku. Terimakasih untuk semua waktu, bantuan,
nasehat, dukungan yang sudah kalian berikan.
Segenap teman-teman D-III Farmasi Universitas Setia Budi Surakarta
angkatan 2016.
Agama, almamater, bangsa dan negara.
v
KATA PENGANTAR
Puji dan syukur penulis panjatkan kehadirat Tuhan Yang Maha Esa karena
atas rahmat dan anugrah-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan Karya Tulis
Ilmiah yang berjudul “UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK
ETANOLIK DAUN MANGGA (Mangifera indica L.) VARIETAS ARUMANIS
TERHADAP RADIKAL DPPH (1,1 dyphenyl-2-pikrilhidrazil)” dengan baik.
Karya Tulis Ilmiah ini disusun sebagai salah satu syarat untuk memenuhi
persyaratan guna mencapai Ahli Madya Farmasi dalam ilmu farmasi dari Fakultas
Farmasi Universitas Setia Budi Surakarta dengan harapan dapat bermanfaat
bagi pembaca dan dapat memberikan sumbangan bagi ilmu farmasi.
Penulis menyadari bahwa penyusunan Karya Tulis Ilmiah ini tidak lepas
dari bantuan dari berbagai pihak, baik dukungan moral maupun material, oleh
karena itu pada kesempatan kali ini penulis ingin menyampaikan rasa terimakasih
yang tulus kepada yang terhormat :
1. Dr. Ir. Joni Taringan, MBA, selaku Rektor Universitas Setia Budi
2. Prof. Dr. R.A. Oetari, SU, MM., M.Sc, Apt., selaku Dekan Fakultas
Farmasi Universitas Setia Budi
3. Vivin Noviyanti, M.Si., Apt., selaku Ketua Program D-III Farmasi
Universitas Setia Budi
4. Fitri Kurniasari, M.Farm., Apt., selaku dosen pembimbing yang telah
memberikan bimbingan, nasehat, dan motivasi sehingga penulis dapat
menyelesaikan Karya Tulis Ilmiah ini.
5. Orang tua penulis yang telah memberikan dukungan moral maupun
materil.
6. Penguji diantaranya penguji Karya Tulis Ilmiah, penulis mengucapkan
terima kasih atas masukan, kritik, dan saran dalam penyusunan karya tulis
ini.
vi
7. Segenap dosen, karyawan, staf laboratorium, dan staf perpustakaan
Fakultas Farmasi Universitas Setia Budi yang telah banyak membantu
bagi kelancaran pelaksanaan Karya Tulis Ilmiah ini.
8. Semua pihak yang tidak sempat kami sebutkan satu per satu yang telah
membantu kelancaran penyusunan laporan ini.
Penulis sangat menyadari tidak ada manusia yang sempurna begitu pula
dalam penyusunan Karya Tulis Ilmiah ini, maka dari itu penulis menerima kritik
dan saran dengan senang hati. Akhir kata semoga karya tulis ini bermanfaat bagi
siapapun yang membacanya.
Surakarta, Juli 2019
Intan Dewi Utami
vii
DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL ................................................................................................ i
HALAMAN PENGESAHAN ................................................................................. ii
HALAMAN PERNYATAAN ................................................................................ ii
HALAMAN PERSEMBAHAN............................................................................. iv
KATA PENGANTAR ............................................................................................ v
DAFTAR ISI ......................................................................................................... vii
DAFTAR GAMBAR .............................................................................................. x
DAFTAR TABEL .................................................................................................. xi
DAFTAR LAMPIRAN ......................................................................................... xii
INTISARI ............................................................................................................. xiii
ABSTRACT ......................................................................................................... xiv
BAB I PENDAHULUAN ....................................................................................... 1
A. Latar Belakang Masalah ................................................................................. 1
B. Perumusan Masalah ........................................................................................ 3
C. Tujuan Penelitian ............................................................................................ 3
D. Kegunaan Penelitian ....................................................................................... 3
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ............................................................................. 5
A. Tanaman Daun Buah ...................................................................................... 5
1. Sistematika Tanaman ........................................................................ 5
2. Deskripsi Tanaman ........................................................................... 5
3. Nama Lain......................................................................................... 6
4. Manfaat ............................................................................................. 6
5. Kandungan Kimia ............................................................................. 7
B. Golongan Senyawa Metabolit Sekunder dalam Tanaman Mangga
(Mangifera indica L.) .......................................................................................... 7
1. Flavanoid .......................................................................................... 7
2. Saponin ............................................................................................. 7
3. Alkaloid ............................................................................................ 8
4. Tannin ............................................................................................... 8
viii
5. Triterpenoid ...................................................................................... 8
6. Steroid ............................................................................................... 9
7. Fenolik .............................................................................................. 9
C. Mangiferin .................................................................................................... 10
D. Simplisia ....................................................................................................... 10
1. Pengertian Simplisia ....................................................................... 10
2. Pengumpulan Simplisia .................................................................. 10
3. Pencucian dan Pengeringan Simplisia ............................................ 11
4. Pemilihan Simplisia ........................................................................ 11
E. Penyarian ...................................................................................................... 12
1. Pengertian Ekstraksi ....................................................................... 12
2. Metode Maserasi ............................................................................. 12
3. Pelarut ............................................................................................. 12
F. Radikal Bebas ............................................................................................... 13
G. Antioksidan .................................................................................................. 14
1. Definisi............................................................................................ 14
2. Mekanisme Antioksidan ................................................................. 14
3. Jenis Antioksidan ............................................................................ 15
H. Metode DPPH .............................................................................................. 15
I. Spektrofotometri UV-Vis ............................................................................. 16
J. Rutin ............................................................................................................. 17
K. Landasan Teori ............................................................................................. 17
L. Hipotesis ...................................................................................................... 19
BAB III METODE PENELITIAN........................................................................ 20
A. Populasi dan Sampel .................................................................................... 20
B. Variabel Penelitian....................................................................................... 20
1. Identifikasi variabel utama.............................................................. 20
2. Klasifikasi variabel utama .............................................................. 20
3. Definisi operasional variabel utama ............................................... 20
C. Bahan dan Alat ............................................................................................ 21
D. Jalannya Penelitian ...................................................................................... 21
ix
1. Determinasi tanaman ...................................................................... 21
2. Persiapan bahan .............................................................................. 21
3. Pembuatan serbuk ........................................................................... 22
4. Penetapan kadar kelembaban serbuk daun mangga ........................ 22
5. Pembuatan ekstrak etanol daun mangga ......................................... 22
6. Penetapan kadar kelembaban ekstrak daun mangga ....................... 23
7. Identifikasi kandungan kimia.......................................................... 23
8. Pembuatan larutan DPPH ............................................................... 24
9. Penetapan panjang gelombang maksimal DPPH ............................ 24
10. Penentuan operating time DPPH .................................................... 24
11. Uji aktivitas antioksidan ................................................................. 24
E. Analisa Data ................................................................................................ 25
F. Skema Jalannya Penelitian .......................................................................... 26
BAB IV HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN ...................................... 27
A. Daun Mangga (Mangifera indica L.) Varietas Arumanis .......................... 27
1. Hasil identifikasi tanaman .............................................................. 27
2. Hasil pengumpulan bahan dan pembuatan serbuk ......................... 27
3. Hasil pembuatan ekstrak etanol daun mangga ................................ 28
4. Hasil uji susut pengeringan ............................................................. 29
5. Hasil identifikasi kandungan kimia ekstrak etanol daun mangga... 29
6. Hasil pembuatan larutan induk DPPH 0,4 mM .............................. 31
7. Hasil penentuan panjang gelombang maksimum DPPH ................ 31
8. Hasil penentuan operating time ...................................................... 31
9. Hasil pengujian aktivitas antioksidan ............................................. 32
BAB V PENUTUP ................................................................................................ 35
A. KESIMPULAN ........................................................................................... 35
B. SARAN ........................................................................................................ 35
DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................... 36
LAMPIRAN .......................................................................................................... 41
x
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 1. Reduksi DPPH dari senyawa antioksidan .......................................... 16
Gambar 2. Struktur Kimia Rutin .......................................................................... 17
Gambar 3. Skema jalannya penelitian .................................................................. 26
Gambar 4. Grafik %inhibisi ekstrak etanolik daun mangga ................................ 34
Gambar 5. Grafik % inhibisi rutin ........................................................................ 34
Gambar 6. Grafik aktivitas antioksidan (nilai IC50) larutan uji ...........................
34
xi
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 1. Hasil pengumpulan bahan dan pembuatan serbuk daun mangga ...........27
Tabel 2. Hasil rendemen ekstrak terhadap serbuk daun mangga ......................... 28
Tabel 3. Hasil uji susut pengeringan serbuk dan ekstrak daun mangga ............... 29
Tabel 4. Hasil identifikasi kandungan kimia ekstrak etanol daun mangga .......... 29
Tabel 5. Hasil aktivitas antioksidan larutan uji .................................................... 33
xii
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1. Determinasi Daun Mangga varietas Arumanis .............................. 41
Lampiran 2. Gambar Simplisia, Serbuk, dan Ekstrak ........................................ 42
Lampiran 3. Gambar Alat yang Digunakan ....................................................... 43
Lampiran 4. Hasil Uji Tabung ........................................................................... 44
Lampiran 5. Hasil Rendemen ............................................................................ 45
Lampiran 6. Data Penimbangan dan Pembuatan Larutan Induk DPPH ............ 46
Lampiran 7. Perhitungan dan Pembuatan Seri Konsentrasi dari Larutan Induk
Ekstrak Daun Mangga ..................................................................
47
Lampiran 8. Perhitungan dan Pembuatan Seri Konsentrasi dari Larutan Induk
Rutin .............................................................................................
50
Lampiran 9. Perhitungan Nilai IC50 Ekstrak Daun Mangga dan Rutin ............. 53
Lampiran 10. Data Statistik ............................................................................... 56
Lampiran 11. Operating Time ........................................................................... 57
Lampiran 12. Panjang Gelombang DPPH ......................................................... 60
xiii
INTISARI
UTAMI, I., 2019, UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK
ETANOLIK DAUN MANGGA (Mangifera indica L.) VARIETAS
ARUMANIS TERHADAP RADIKAL DPPH (1,1 dyphenyl-2-pikrilhidrazil),
KARYA TULIS ILMIAH, FAKULTAS FARMASI. UNIVERSITAS SETIA
BUDI, SURAKARTA
Daun Mangifera indica terdapat senyawa mangiferin yang merupakan
senyawa flavonoid utama pada genus Mangifera. Mangiferin diketahui memiliki
banyak fungsi termasuk sebagai antioksidan yang berperan dalam pencegahan
penyakit degeneratif.
Ekstrak daun mangga diperoleh dengan metode maserasi menggunakan
etanol 70% karena sifat etanol lebih aman dibandingkan metanol yang memiliki
sifat toksik (Tiwari, 2011). Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas
antioksidan dari ekstrak etanolik daun mangga (Mangifera indica L.)
menggunakan metode DPPH (1,1 dyphenyl-2-pikrilhidrazil) dengan rutin sebagai
pembanding.
Data diolah dengan menggunakan persamaan regesi linier untuk
memperoleh nilai IC50 (50% konsentrasi yang efektif untuk menangkap radikal
DPPH). Nilai IC50 ekstrak etanolik daun mangga (Mangifera indica L.) varietas
Arumanis memiliki kandungan aktivitas antioksidan melalui metode DPPH
sebesar 13,6718±0,003 ppm termasuk ke dalam antioksidan kuat. Hasil ini masih
dibawah penelitian yang dilakukan oleh Pamungkas (2017) tentang aktivitas
antioksidan ekstrak metanolik daun mangga gadung (arumanis) yang memiliki
IC50 sebesar 3,263±0,009 ppm.
Kata kunci : Ekstrak Daun Mangga, IC50, DPPH
xiv
ABSTRACT
UTAMI, I., 2019, TEST OF ANTIOXIDANT ACTIVITIES OF MANGO
LEAF ETHANOLIC EXTRACTS (Mangifera indica L.) ARUMANIC
VARIETIES ON DPAD RADICAL (1.1 dyphenyl-2-pikrilhidrazil),
SCIENTIFIC WRITING WORKS, FACULTY OF PHARMACY. SETIA
BUDI UNIVERSITY, SURAKARTA
Mangifera indica leaves contain mangiferin compounds which are the
main flavonoid compounds in the genus Mangifera. Mangiferin is known to have
many functions including as an antioxidant which plays a role in preventing
degenerative diseases.
Mango leaf extract was obtained by maceration using 70% ethanol
solvent because the nature of ethanol is safer than methanol which has toxic
properties (Tiwari, 2011). This study aims to determine the antioxidant activity of
ethanolic extract of mango leaves (Mangifera indica L.) using the DPPH (1,1
dyphenyl-2-pikrilhidrazil) method with routine as a comparison.
Data is processed using linear regression equations to obtain IC50 values
(50% effective concentration to capture DPPH radicals). The IC50 value of the
Arumanis variety of mangoes (Mangifera indica L.) leaves has antioxidant
activity through the DPPH method of 13.6718 ± 0.003 ppm, including the strong
antioxidants. These results are still under the research conducted by Pamungkas
(2017) about the antioxidant activity of the methanolic extract of the leaves of the
gadung (arumanis) mango which has an IC50 of 3.263 ± 0.009 ppm.
Keywords: Mango Leaf Extract, IC50, DPPH
1
BAB I
PENDAHULUAN
A. Latar Belakang Masalah
Akhir-akhir ini penggunaan senyawa antioksidan berkembang dengan
pesat baik untuk makanan maupun pengobatan. Penggunaan sebagai obat makin
berkembang seiring dengan makin bertambahnya pengetahuan tentang aktivitas
radikal bebas terhadap beberapa penyakit degeneratif seperti penyakit jantung dan
kanker (Boer, 2000). Tubuh secara alami memiliki sistem pertahanan terhadap
radikal bebas, yaitu antioksidan endogen intrasel yang terdiri atas enzim-enzim
yang disintesis oleh tubuh seperti superoksida dismutase (SOD), katalase dan
glutation peroksidase (Sanmugapriya dan Venkataraman, 2006).
Radikal bebas dapat terbentuk melalui dua cara, yaitu : (1) secara endogen,
sebagai respon normal dari rantai peristiwa biokimia dalam tubuh, dalam sel
(intrasel) maupun ekstrasel, dan (2) secara eksogen, radikal bebas didapat dari
polutan lingkungan, asap rokok, obat-obatan, dan radiasi ionisasi atau sinar ultra
violet (Supari, 1996; Langseth, 2000).
Radikal bebas dapat dinetralisir dengan antioksidan. Tubuh manusia
menghasilkan senyawa antioksidan, tetapi jumlahnya sering kali tidak cukup
untuk menetralkan radikal bebas yang masuk ke dalam tubuh, sehingga jika
terjadi paparan radikal berlebih maka tubuh membutuhkan antioksidan dari luar
tubuh (Kuncahyo, 2007). Antioksidan sintetik seperti BHA (butil hidroksi anisol),
BHT (butil hidroksi toluen), PG (propil galat), dan TBHQ (tert-butil hidrokuinon)
memiliki efek yang berbahaya karena dapat meningkatkan terjadinya
karsinogenesis (Amarowicz et al, 2000). Oleh karena itu, aplikasi penggunannya
sangat dibatasi dan ada kecenderungan untuk menggantikannya dengan
antioksidan alami. Antioksidan sintetik juga menunjukkan kelarutan yang rendah
dan aktivitas antioksidan yang sedang (Pourmorad dkk., 2006).
Pengembangan antioksidan alami dimaksudkan untuk tujuan pengobatan
preventif dan untuk industri makanan. Antioksidan alami selain dapat melindungi
tubuh dari serangan radikal bebas juga mampu memperlambat terjadinya penyakit
2
kronik yang disebabkan penurunan senyawa oksigen reaktif terutama radikal
hidroksil dan radikal superoksida. Antioksidan alami juga berfungsi menghambat
oksidasi lipid yang menyebabkan ketengikan dan kerusakan pada makanan
(Halliwell & Gutteridge, 1999; Rohdiana, 2001). Antioksidan dari luar dapat
berasal dari buah-buahan dan sayur-sayuran (Agarwal, 2005).
Mangga (Mangifera indica L.) merupakan salah satu tanaman asli dari
Asia Tenggara, dan telah tersebar luas di daerah tropis dan subtropis di dunia
(Mukherjee & Litz, 2009). Senyawa aktif pada buah mangga telah diteliti
memiliki fungsi aktivitas antioksidan pada bagian kulit, daging, dan biji mangga
(Kuganesan et al, 2017). Kulit mangga merupakan sumber yang baik dari
fitonutrien dan nutrasetikal seperti polifenol, karotenoid dan antosianin, dimana
senyawa ini pada ekstrak kulit mangga dapat melindungi terhadap adanya
kerusakan oksidatif (Ajila and Rao, 2008). Bagian daun Mangifera indica terdapat
senyawa mangiferin yang merupakan senyawa flavonoid utama pada genus
Mangifera (Jutiviboonsuk & Sardsaengjun, 2010). Mangiferin diketahui memiliki
banyak fungsi termasuk sebagai antioksidan. Berdasarkan penelitian yang
dilakukan oleh Barreto et al. (2008), mangiferin memiliki aktivitas antioksidan
tinggi yang ditunjukkan pada keempat hasil uji aktivitas antioksidan secara in
vitro (hypoxanthine/xanthine oxidase, DPPH, FRAP, dan ORAC).
Salah satu metode yang digunakan untuk uji aktivitas antioksidan adalah
metode 1,1-difenil-2-pikrilhidrazil (DPPH). Interaksi antioksidan dengan DPPH
baik secara transfer elektron atau radikal hidrogen pada DPPH, akan menetralkan
karakter radikal bebas dari DPPH dan membentuk DPPH tereduksi. Jika semua
elektron pada radikal bebas DPPH menjadi berpasangan, maka warna larutan
berubah dari ungu tua menjadi kuning terang dan absorbansi pada panjang
gelombang 517 nm akan hilang (Rohman et al., 2010).
Beberapa penelitian tentang aktivitas antioksidan dengan metode DPPH
(1,1 dyphenyl-2-pikrilhidrazil) yakni pada ekstrak etanolik daun Mangivera indica
L. varietas gedong oleh Rahmiyani et al (2016) memiliki aktivitas IC50 sebesar
94,95 ppm tergolong antioksidan kuat. Penelitian lain tentang aktivitas
antioksidan ekstrak metanolik daun mangga gadung (arumanis) memiliki IC50
3
sebesar 3,263±0,009 ppm termasuk antioksidan kuat (Pamungkas, 2017).
Penelitian tentang ekstrak etanolik daun Mangifera indica L. varietas arumanis
sebagai antioksidan terhadap radikal bebas melalui metode DPPH (1,1 dyphenyl-
2-pikrilhidrazil) belum pernah diteliti sebelumnya, sehingga peneliti tertarik untuk
melakukan penelitian dan membandingkan aktivitas antioksidan ekstrak etanolik
terhadap ekstrak metanolik dari daun Mangifera indica L. varietas arumanis.
Penelitian ini didasarkan atas sifat etanol yang digunakan lebih aman
dibandingkan metanol yang memiliki sifat toksik (Tiwari et al, 2011), sehingga
diharapkan berguna sebagai alternatif bahan antioksidan yang mampu
menghambat radikal bebas sehingga kedepannya dapat dikembangkan
penggunaannya terhadap penyakit yang berkaitan radikal bebas.
B. Perumusan Masalah
1. Apakah ekstrak etanolik daun mangga (Mangifera indica L.) varietas
Arumanis memiliki kandungan aktivitas antioksidan melalui metode DPPH
(1,1 dyphenyl-2-pikrilhidrazil)?
2. Berapakah nilai IC50 dari ekstrak etanolik daun mangga (Mangifera indica L.)
varietas Arumanis?
C. Tujuan Penelitian
1. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui ekstrak etanolik daun mangga
(Mangifera indica L.) varietas Arumanis memiliki kandungan aktivitas
antioksidan melalui metode DPPH (1,1 dyphenyl-2-pikrilhidrazil).
2. Untuk mengetahui nilai IC50 dari ekstrak etanolik daun mangga (Mangifera
indica L.) varietas Arumanis.
D. Kegunaan Penelitian
Penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi kepada masyarakat
mengenai aktivitas antioksidan daun mangga arumanis (Mangifera indica L. var.
arumanis) sehingga dapat dimanfaatkan untuk memelihara kesehatan. Penelitian
ini juga diharapkan bermanfaat bagi perkembangan ilmu pengetahuan khususnya
4
ilmu kefarmasian tentang kandungan antioksidan daun mangga arumanis
(Mangifera indica L. var. arumanis). Penggunaan pelarut etanol dalam penelitian
ini memiliki sifat lebih aman dibanding metanol sehingga diharapkan berguna
sebagai alternatif bahan antioksidan yang mampu menghambat radikal bebas dan
kedepannya dapat dikembangkan penggunaannya terhadap penyakit yang
berkaitan radikal bebas.