Upload
trancong
View
255
Download
3
Embed Size (px)
Citation preview
UJI STABILITAS BETAMETASON DIPROPIONAT DAN
KLOTRIMAZOL PADA SEDIAAN KRIM DENGAN MENGGUNAKAN
KCKT ( KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI)
SKRIPSI
Sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar
sarjana Farmasi pada Program Studi Farmasi
NUNING WAHYUNI
1008010027
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO
PURWOKERTO
2014
2
UJI STABILITAS BETAMETASON DIPROPIONAT DAN
KLOTRIMAZOL PADA SEDIAAN KRIM DENGAN MENGGUNAKAN
KCKT ( KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI)
Skripsi
Sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar
sarjana Farmasi pada Program Studi Farmasi
NUNING WAHYUNI
1008010027
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO
PURWOKERTO
2014
i
3
ii
Uji Stabilitas Betametason Dipropionat…, Nuning Wahyuni, Fakultas Farmasi UMP, 2014
4
iii
Uji Stabilitas Betametason Dipropionat…, Nuning Wahyuni, Fakultas Farmasi UMP, 2014
5
iv
Uji Stabilitas Betametason Dipropionat…, Nuning Wahyuni, Fakultas Farmasi UMP, 2014
6
INTISARI
NUNING WAHYUNI. Uji Stabilitas Betametason Dipropionat dan Klotrimazol Pada
Sediaan Krim Dengan Menggunakan Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT).
Dibawah bimbingan WIRANTI SRI RAHAYU dan ASMIYENTI DJALIASRIN
DJALIL
Latar Belakang: Betametason dipropionat merupakan glukokortikoid yang pada cincin
C-17 dapat mengalami degradasi seperti hidolisis, oksidasi dan fotolisis, begitu juga pada
klotrimazol dapat mengalami degradasi karena proses hidrolisis yang ditandai dengan
berubahnya grup imidazol menjadi 2-chlorotritanol. Oleh karena itu perlu dilakukan
penetapan kadar untuk mengetahui stabilitas kadar obat.
Tujuan Penelitian: Mengetahui metode validasi penentuan kadar betametason
dipropionat dan klotrimazol dalam sediaan krim menggunakan KCKT dan
mengetahui pengaruh suhu dan lama penyimpanan terhadap kadar krim
betametason dipropionat dan klotrimazol
Metode Penelitian: . Validasi metode analisis meliputi liniearitas, batas deteksi, batas
kuantitasi, keseksamaan, kecermatan, serta dilakukan penetapan kadar krim yag
mengandung beetametason dipropionat dan klotrimazol. Pada penelitian ini menggunakan
sistem KCKT fase terbalik dengan fase gerak metanol: dapar asetat: asetonitril pH 6,8
(33: 27: 40), coloum liquid chromatography-octadecyl cylane, detektor UV-Vis pada
panjang gelombang 254 nm. Bahan penelitian sampel krim Heltiskin (PT. Konimex),
baku betametason dipropionat (PT. Mervin), baku klotrimazol (PT. Konimex),
metanol pro KCKT, amonium asetat p.a, asetonitril pro KCKT, akuabidest.
Hasil: Hasil uji linearitas menunjukan nilai koefesien korelasi = 0,9990 (r hitung > r tabel
0,811), batas deteksi = 2,412 µg/mL, batas kuantitasi = 8,040 µg/mL, keseksamaan
dengan larutan standar betametason dipropionat konsentrasi 8 µg/mL koefesien variasi =
3,8651 % (≤ 5%), hasil uji kecermatan untuk penambahan betametason dipropionat
64µg/mL sebesar 102,036 %, dan hasil penetapan kadar krim betametason dipropionat
berada 59,6875%-99,375%. Sedangkan pada klotrimazol hasil uji linearitas menunjukan
nilai koefesien korelasi = 0,9976 (r hitung > r tabel 0,811), batas deteksi = 0,0539 µg/mL,
v
Uji Stabilitas Betametason Dipropionat…, Nuning Wahyuni, Fakultas Farmasi UMP, 2014
7
batas kuantitasi = 0,1798 µg/mL, keseksamaan dengan larutan standar klotrimazol
konsentrasi 250 µg/mL koefesien variasi = 3,333 % (≤ 5%), hasil uji kecermatan untuk
penambahan klotrimazol 1000 µg/mL sebesar 111,261%, dan hasil penetapan kadar krim
klotrimazol berada 42,39%-98,97%.
Kesimpulan: Metode kromatografi cair kinerja tinggi adalah valid untuk menetapkan
kadar betametason dipropionat dan klotrimazol pada sediaan krim. Krim yang di simpan
pada oven dan dipaparkan matahari menurun kadarnya lebih tinggi dibandingkan dengan
krim yang disimpan pada suhu kamar dan dingin. Semakin lama penyimpanan krim maka
semakin menurun kladar obatnya
Kata kunci: betametason dipropionat ,klotrimazol, krim, validasi metode, kromatografi
cair kinerja tinggi, suhu, lama penyimpanan
vi
Uji Stabilitas Betametason Dipropionat…, Nuning Wahyuni, Fakultas Farmasi UMP, 2014
8
ABSTRACT
NUNING WAHYUNI. The Stability Test Betamethasone Dipropionat and Clotrimazole
in cream preparations with High Performance Liquid Chromatography (HPLC).
Under guidance WIRANTI SRI RAHAYU and ASMIYENTI DJALIASRIN DJALIL
The Background: Betamethasone is glucocorticoid that C ring 17 may be degraded such
as hydrolysis, oxidation. So also on clotrimazole can be degraded due to hydrolysis
process characaterized by changes in imidazole group into 2- chlorotritanol. Therefore, it
is necessary to know the stability assay of drug levels.
The Aim of Research: to know the method of assay validation betamethasone
dipropionate and clotrimazole in cream with High Performance Liquid Chromatography
(HPLC) and to know effect of temperature and storage time on the content of cream
betamethasone and clotrimazole.
The Method of Research: . This research used HPLC with reverse phase and mobile
phase is a methanol: buffer acetate: acetonitril pH 6.8 (33:27:40), coloum liquid
chromatography-octadecylcyclane, detector UV-Vis with 254 nm. The materials research
used sample cream Heltiskin (PT. Konimex), standart betamethasone dipropionat (PT.
Mervin), standart clotrimazole (PT. Konimex), methanol grade HPLC, amonium asetat
p.a, asetonitril grade HPLC, aquabidest.
The Result: The result of linierity test showed that the score of coefficient correlation =
0.9990 (t table < r count 0.811), limit of detection = 2.412µg/mL, limit of quantity =
8.040 µg/mL, the precision with betamethasone dipropionate standar with concentrate 8
µg/mL coefficient correlation = 3.8651% (≤ 5%), the result of accuracy for adding
bethamethasone dipropionate 64 µg/mL to recovery 102.036%, and the result of assay
betamethasone cream in range of 59.6875-99.375%. Whereas the clotrimazole of linierity
test showed that the score of coefficient correlation = 0.9976 (t table<r count 0.811), limit
of detection = 0.0539µg/mL, limit of quantity = 0.1798 µg/mL, the precision with
clotrimazole standar with concentrate 250 µg/mL coefficient correlation = 3.333% (≤
vii
Uji Stabilitas Betametason Dipropionat…, Nuning Wahyuni, Fakultas Farmasi UMP, 2014
9
5%), the result of accuracy for adding clotrimazole 1000 µg/mL to recovery 111.261%,
and the result of assay betamethasone cream in range of 42.39-98.97%.
Conclusions: The method of high performance liquid chromatography was valid to assay
validation betamethasone dipropionate and clotrimazole in cream with High Performance
Liquid Chromatography. Cream in oven and keep the sun presented decreased levels
higher than room temperature and cold storage. The Longer storage of cream then
progressively decreasing levels of his medication.
Key words: betamethasone dipropionate, clotrimazole, cream, validation method, high
performance liquid chromatography, temperature, storage duration
viii
Uji Stabilitas Betametason Dipropionat…, Nuning Wahyuni, Fakultas Farmasi UMP, 2014
10
MOTTO
“berdoa, berusaha, ikhtiar dan yakin kepada Alloh
SWT. Karena sesungguhnya Alloh tidak akan
mengubah nasib suatu kaum kecuali kaum itu
sendiri yang mengubahnya”.
(terjemahan QS. Ar-Rad : 11).
ix
Uji Stabilitas Betametason Dipropionat…, Nuning Wahyuni, Fakultas Farmasi UMP, 2014
11
HALAMAN PERSEMBAHAN
syukur alhamdulillah kupanjatkan kehadirat Alloh
SWT yang telah melimpahkan rahmat dan hidayahnya
kepadaku yang memberi kemudahan dalam setiap
langkahku
skripsi ini ku persembahakan teruntuk:
bapak dan ibu yang senantiasa mencurahkan kasih
sayang dan untaian doa yang tiada henti.
Kakakku tersayang yang selalu memberikanku
motivasi dan doanya selama ini
serta semua teman- teman seperjuanganku..
x
Uji Stabilitas Betametason Dipropionat…, Nuning Wahyuni, Fakultas Farmasi UMP, 2014
12
PRAKATA
Puji syukur kehadirat Allah SWT yang telah melimpahkan rahmat serta
hidayahnya sehingga penulis dapat menyelesaikan penulisan skripsi yang berjudul
“Uji stabilitas betametason dan klotrimazole pada sediaan krim dengan
menggunakan KCKT ( Kromatogrfi Cair Kinerja Tinggi)”. Skripsi ini disusun
sebagai salah satu syarat untuk mencapai gelar Sarjana Farmasi di Fakultas
Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto.
Penulis sepenuhnya menyadari bahwasanya terselesaikannya skripsi ini
tidak terlepas dari bantuan berbagai pihak. Oleh karena itu penulis ingin
mengucapkan rasa terimakasih kepada :
1. Dr. Syamsuhadi Irsyad, S.H., M.H., selaku Rektor Universitas
Muhammadiyah Purwokerto.
2. Dr. Nunuk Aries Nurlita, M.Si., Apt selaku Dekan Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Purwokerto.
3. Wiranti Sri Rahayu,M.Si, Apt., selaku Pembimbing I yang telah memberikan
bimbingan, saran dan petunjuk dalam penyusunan skripsi.
4. Dr. Asmiyenti Djaliasrin Djalil, M.Si., selaku Pembimbing II yang telah
memberikan bimbingan, saran dan petunjuk dalam penyusunan skripsi.
5. Seluruh Dosen dan Staf Karyawan Fakultas Farmasi Universitas
Muhammadiyah Purwokerto.
6. Nely, Qory, Wulan, teman baikku.
7. Novi, Ayu, Kurnia, Visnu, Fenny, Tika teman satu bimbingan yang telah
banyak membantu terselesaikanya skripsi ini
8. Teman-teman Farmasi Klinik dan Farmasi Angkatan 2010 yang telah sama-
sama berjuang untuk mencapai cita-cita.
9. Teman- teman meteor kost Milani, Ayu, Lia, Kiki, Vera, Maya, Wilin yang
selalu memberi semangat
xi
Uji Stabilitas Betametason Dipropionat…, Nuning Wahyuni, Fakultas Farmasi UMP, 2014
13
10. Semua pihak yang telah membantu selama penulis melaksanakan penelitian
dan penulisan skripsi ini hingga selesai yang tidak dapat disebutkan satu
persatu.
Penulis menyadari bahwa skripsi ini masih jauh dari kesempurnaan oleh
karena itu saran dan kritik yang membangun sangat diharapkan demi
penyempurnaannya. Semoga penelitian ini dapat bermanfaat bagi penulis
khususnya dan pembaca umumnya.
Purwokerto, 20 Agustus 2014
Yang menyatakan,
Nuning Wahyuni
xii
Uji Stabilitas Betametason Dipropionat…, Nuning Wahyuni, Fakultas Farmasi UMP, 2014
14
RIWAYAT HIDUP
A. IDENTITAS
N a m a : Nuning Wahyuni
NIM : 1008010027
Tempat / Tanggal Lahir : Cirebon / 10 februari 1992
A g a m a : Islam
Jenis Kelamin : Perempuan
A l a m a t : Jl. Syeh datul kahfi No 3 RT 08/02 , Kec.
Werulor
B. RIWAYAT PENDIDIKAN
1. TK Sabilul Khaerot : Lulus tahun 1998
2. SD N 1 Werulor : Lulus tahun 2004
3. SMP Negri 4 Cirebon : Lulus tahun 2007
4. SMK Farmasi Muhammadyah Cirebon : Lulus tahun 2010
5. Fakultas Farmasi UMP : Lulus tahun 2014
C. KEGIATAN ILMIAH MAHASISWA
a. Kejuaran Kegiatan Ilmiah intra-perguruan tinggi
-
D. Organisasi yang pernah diikuti
1. BEM Fak.Farmasi Sebagai Anggota Tahun 2011
xiii
Uji Stabilitas Betametason Dipropionat…, Nuning Wahyuni, Fakultas Farmasi UMP, 2014
15
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL ................................................................................. i
HALAMAN PERSETUJUAN .................................................................
HALAMAN PENGESAHAN ....................................................................
ii
iii
HALAMAN PERNYATAAN ................................................................... iv
INTISARI ................................................................................................... v
ABSTRACT ................................................................................................ vii
MOTTO ..................................................................................................... ix
HALAMAN PERSEMBAHAN ................................................................ x
PRAKATA .................................................................................................. xi
RIWAYAT HIDUP .................................................................................... xiii
DAFTAR ISI .............................................................................................. xiv
DAFTAR TABEL ...................................................................................... xvii
DAFTAR GAMBAR .................................................................................. xviii
DAFTAR LAMPIRAN xix
BAB I PENDAHULUAN ....................................................................... 1
A. Latar Belakang ....................................................................... 2
B. Rumusan Masalah ................................................................... 2
C. Tujuan Penelitian .................................................................... 2
D. Manfaat Penelitian .................................................................. 2
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ............................................................. 4
A. Krim ........................................................................................ 4
B. Stabilitas .................................................................................. 4
C. Betametason Dipropionat ....................................................... 5
D. Klotrimazol ............................................................................
E. Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT) ...........................
F. Validasi Metode .......................................................................
1. Kecermatan ......................................................................
2. Keseksamaan ...................................................................
6
7
10
10
11
xiv Uji Stabilitas Betametason Dipropionat…, Nuning Wahyuni, Fakultas Farmasi UMP, 2014
16
3. Selektivitas .......................................................................
4. Linearitas .........................................................................
5. LOD (batas deteksi) dan LOQ (batas kuantifikasi) ........
11
11
11
BAB III METODE PENELITIAN .......................................................... 13
A. Jenis danRancangan Penelitian ...............................................
B. Variabel Penelitian ..................................................................
13
13
C. Definisi Variabel Operasional ................................................ 12
D. Waktu dan Tempat Penelitian ................................................. 14
E. Bahan dan Alat ........................................................................ 14
F. Cara penelitian ........................................................................
1. Pengaturan Suhu dan Lama Penyimpanan Obat ..............
2. Analisis kuantitatif ...........................................................
a. Pembuatan Dapar Asetat pH 6,8 ...............................
b. Pembuatan Fase Gerak .............................................
c. Preparasi Larutan Stok Betametason Dipropionat 64
ppm dan Klotrimazol 1000 ppm ...............................
d. Pembuatan Seri konsentrasi ......................................
e. Sistem KCKT ...........................................................
f. Validasi .....................................................................
1) Ketelitian ...........................................................
2) Linearitas ...........................................................
3) Batas deteksi dan batas kuantitasi .....................
4) Ketepatan (akurasi) ...........................................
g. Penetapan Kadar .......................................................
3. Analisis Hasil ...................................................................
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ..................................................
A. Pembuatan Fase Gerak ........................................................
B. Kondisi KCKT......................................................................
C. Hasil Validasi metode penetapan kadar betametason
dipropionat dan klotrimazol secara KCKT ...........................
15
15
15
15
15
15
15
16
16
16
16
16
17
17
17
18
18
18
19
xv
Uji Stabilitas Betametason Dipropionat…, Nuning Wahyuni, Fakultas Farmasi UMP, 2014
17
1. Linearitas (linearity) .....................................................
2. Batas deteksi dan batas kuantitasi .................................
3. Uji keseksamaan ............................................................
4. Uji kecermatan ..............................................................
D. Hasil penetapan kadar betametason dipropionat dan
klotrimazol dalam krim ........................................................
E. Analisis Data ........................................................................
F. Keterbatasan Penelitian ........................................................
19
22
22
24
26
30
32
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN .................................................... 32
A. Kesimpulan ............................................................................ 32
B. Saran ...................................................................................... 32
DAFTAR PUSTAKA ................................................................................ 33
LAMPIRAN ................................................................................................ 35
xvi
Uji Stabilitas Betametason Dipropionat…, Nuning Wahyuni, Fakultas Farmasi UMP, 2014
18
DAFTAR TABEL
Tabel JudulTabel Halaman
1. Hubungan konsentrasi standar dengan betametason dipropionat
dengan luas area ...................................................................................
2. Hubungan konsentrasi standar dengan klotrimazol dengan luas
area .......................................................................................................
3. Hasil uji presisi betametason dipropionat konsentrasi 8 ppm ..............
4. Hasil uji presisi klotrimazol konsentrasi 125 ppm ...............................
5. Hasil perhitungan uji perolehan kembali betametason dipropionat .....
6. Hasil perhitungan uji perolehan kembali klotrimazol ..........................
7. Hasil uji penetapan kadar betametason dipropionat ............................
8. Hasil uji penetapan kadar klotrimazol .................................................
9. Pengaruh suhu terhadap kadar betametason dipropionat .....................
10. Pengaruh suhu terhadap kadar klotrimazol ..........................................
11. Pengaruh lama penyimpanan terhadap kadar betametason
dipropionat ...........................................................................................
12. Pengaruh lama penyimpanan terhadap kadar klotrimazol ...................
20
20
23
23
25
25
27
27
30
30
31
31
xvii
Uji Stabilitas Betametason Dipropionat…, Nuning Wahyuni, Fakultas Farmasi UMP, 2014
19
DAFTAR GAMBAR
Gambar Judul Gambar Halaman
1. Struktur kimia betametason dipropionat ...................................................
2. Jalur degradasi betametason dipropionat ..................................................
3. Struktur kimia klotrimazol ........................................................................
5. Komponen KCKT .....................................................................................
6. Kromatogram larutan standar betametason dipropionat 4 ppm dan
klotrimazol 62,5 ppm ................................................................................
7. Kurva hubungan antara konsentrasi dengan luas area betametason
dipropionat ................................................................................................
8. Kurva hubungan antara konsentrasi dengan luas area klotrimazol ..........
9. Kromatogram tanpa baku dan baku standar betametason dipropionat
64 ppm dan klotrimazol 1000 ppm ...........................................................
10. Kurva hubungan kadar betametason dipropionat dengan suhu dan
lama penyimpanan ....................................................................................
11. Kurva hubungan kadar klotrimazol dengan suhu dan lama
penyimpanan .............................................................................................
12. Kadar betametason dipropionat yang dipaparkan matahari dan oven ......
13. Kadar klotrimazol yang dipaparkan matahari dan oven ...........................
5
6
7
8
20
21
21
25
28
28
28
29
xviii
Uji Stabilitas Betametason Dipropionat…, Nuning Wahyuni, Fakultas Farmasi UMP, 2014
20
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Kromatogram Uji Kurva Baku Standar Betametason
Dipropionat dan Klotrimazol ...............................................
Lampiran 2. Perhitungan LOD dan LOQ .................................................
Lampiran 3. Kromatogram Uji Presisi Standar Betametason Dipropionat
dan Klotrimazol ...................................................................
Lampiran 4. Perhitungan Hasil Uji Presisi Standar Betametason
Dipropionat dan klotrimazol………………………………
Lampiran 5. Kromatogram Uji Recovery ................................................
Lampiran 6. Data Perhitungan Perolehan Kembali(recovery) .................
Lampiran 7. Kromatogram penetapan kadar betametason dipropionat dan
klotrimazol ...........................................................................
Lampiran 8. Data Perhitungan Penetapan Kadar .....................................
Lampiran 9. Data analisis Data ................................................................
37
40
42
45
47
50
54
72
74
xix
Uji Stabilitas Betametason Dipropionat…, Nuning Wahyuni, Fakultas Farmasi UMP, 2014