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UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE ODONTOLOGÍA
CARRERA DE ODONTOLOGÍA
“SELLADO DE TÚBULOS DENTINARIOS CON UN GEL DESENSIBILIZANTE CON
NANOPARTÍCULAS DE HIDROXIAPATITA. ESTUDIO IN-VITRO”
Proyecto de Investigación presentado como requisito parcial para aprobar el trabajo de
titulación, para optar por el Título de:
ODONTÓLOGA
AUTORA: MARITZA GABRIELA GÓMEZ BEDOYA
TUTORA: KARINA PATRICIA FARFÁN MERA
Quito, Julio del 2018
I
DERECHOS DE AUTOR
Yo, Maritza Gabriela Gómez Bedoya, en calidad de autora del proyecto de
investigación: “Sellado De Túbulos Dentinarios Con un gel desensibilizante Con
Nanopartículas De Hidroxiapatita. Estudio In – Vitro”, autorizo a la Universidad
Central del Ecuador a hacer uso del contenido total o parcial que me pertenecen, con fines
estrictamente académicos o de investigación.
Los derechos que como autora me corresponde, con excepción de la presente
autorización, seguirán vigentes a mi favor, de conformidad con lo establecido en los
artículos 5, 6, 8; 19 y demás pertinentes de la Ley de Propiedad Intelectual y su
Reglamento.
También, autorizó a la Universidad Central del Ecuador realizar la digitalización y
publicación de este trabajo de investigación en el repositorio virtual, de conformidad a lo
dispuesto en el Art. 144 de la Ley Orgánica de Educación Superior.
Firma:
________________________________
Maritza Gabriela Gómez Bedoya
C.I. 1720985108
II
UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE ODONTOLOGIA
INFORME FINAL DE APROBACION DE TESIS
Yo, Dra. Karina Patricia Farfán Mera con C.C. 13067234-7, presentado por el(a) Srita.
Maritza Gabriela Gómez Bedoya , para optar por el título de Odontoólogo, cuyo título
es: “SELLADO DE TÚBULOS DENTINARIOS CON UN GEL DESENSIBILIZANTE
CON NANOPARTÍCULAS DE HIDROXIAPATITA ESTUDIO IN-VITRO
Considero que dicho trabajo reúne los requisitos y méritos suficientes para ser sometido
a la presentación público y evaluación por parte del jurado examinador que se designe.
En la ciudad de Quito, a los 4 días del mes de Mayo 2018
………………………………………………..
Dra. Karina Farfán
Ciudad Universitaria – Telefax: 321.50.82 ext. 213 – Casilla17-03-76 – E-mail: [email protected]
III
APROBACIÓN DE LA PRESENTACIÓN ORAL/TRIBUNAL
El tribunal constituido por Dra. Eliana Balseca, Dr. Eduardo Cepeda. Luego de receptar
la presentación oral del trabajo de titulación previo a la obtención del título de Odontólogo
presentado por la Srta. Maritza Gabriela Gómez Bedoya
Con el título:
Sellado de túbulos dentinarios con un gel desensibilizante con nanopartículas de
hidroxiapatita. Estudio In-Vitro
Emite el siguiente veredicto:
Fecha: 04-07-2018
Para constancia de lo actuado firman:
Nombre/Apellido Calificación Firma
Presidente: Dra. Eliana Balseca ____________________________
Vocal 1: Dr. Eduardo Cepeda ____________________________
IV
DEDICATORIA
Dedicada a:
Mi mami ESTRELLA IRALDA por no solo haber guiado mi camino desde pequeña
sino también por brindarme todo su apoyo, su amor, ser el motor de mi vida y sobre
todo por siempre confiar en mí.
A mi papi MARIO ALCIDES, por inculcarme que todo sacrificio tiene su recompensa,
así también que uno puede conseguir todo lo que se proponga pero trabajando duro.
A mi Hermana EVELYN, por ser la niña de mis ojos quien siempre estuvo a mi lado en
este largo camino y por confiar en mí.
A mi Hermana DIANA, a mi cuñado GUIDO a mis sobrinos DANNY Y AARON, por ser
una familia unida y bendecida, quienes siempre confiaron en mí y por brindarme
siempre su apoyo.
A mi Tía-Abuela LUZMILA por ser como una segunda madre por darme siempre sus
palabras de apoyo.
A mi Dr. Roberto por haberme brindado la oportunidad de superarme
profesionalmente, por sus enseñanzas, por sus consejos y sus jaladas de oreja.
A mis amigas Karen, Mary, Jessy, Ale, Verito, Gaby, Brenda, May por estar siempre a
mi lado en las buenas y en las malas, cada una de ustedes son participes de este logro.
Gracias a ustedes por su apoyo que me ayudo para hoy cumplir una meta más en mi
vida los amo.
MARITZA GABRIELA GÓMEZ BEDOYA
V
AGRADECIMIENTO
A DIOS por darme la sabiduría para cumplir este sueño, por brindarme salud y por
haberme puesto en el camino a las personas correctas ya que cada una de ellas fueron
parte importantes para poder lograrlo.
A mis padres por darme la oportunidad de superarme profesionalmente porque si su
apoyo y amor no lo hubiera logrado, gracias papis por siempre confiar en mí.
A mis hermanas, a mi cuñado a mis sobrinos que día a día me demuestran su amor, su
apoyo incondicional y me han ayudado para cumplir esta gran meta que estoy segura
disfrutaran de esta felicidad así como yo.
A mi Tutora KARINA FARFÁN por haberme guiado y apoyado en este trabajo de
investigación permitiéndome lograr mi gran sueño de ser Odontóloga.
A la Facultad de Odontología de la Universidad Central del Ecuador por abrirme sus
puertas y permitirme tener una educación de excelencia.
A la Facultad de Ciencias Químicas de la Universidad Central del Ecuador por abrirme
las puertas de los laboratorios de Energías Renovables y Nanoestructuras para la
realización adecuada de este proyecto de titulación.
Gracias infinitas
VI
ÍNDICE DE CONTENIDOS
DERECHOS DE AUTOR ………………………….………..……………………......….I
APROBACIÓN DEL TUTOR DEL TRABAJO DE TITULACIÓN ……………………………..….….II
DEDICATORIA……………………………………………….…………………III
INDICE DE CONTENIDOS …………………………………………….………IV
LISTA DE TABLAS ……………………………………………….………….VIII
LISTA DE GRÁFICAS ……………………………………………………….....IX
LISTA DE FIGURAS………………………………………………………….....X
LISTA DE ANEXOS …………………………………………………….....….XI
RESUMEN ……………………………………………………………………....XII
INTRODUCCION ………………………………………………………………….1
CAPITULO I
1. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA ……………………………………….....3
1.1. PROBLEMA…………………………………………………………………..3
1.2. JUSTIFICACION …………………………………………………………….3
1.3. OBJETIVOS ……………………………………………………………….....4
1.3.1. OBJETIVO GENERAL…………………………………….….4
1.3.2. OBJETIVOS ESPECÍFICOS…………………………………..4
1.4. HIPÓTESIS …………………………………………………………………..4
CAPITULO II
2. REVISION DE LA LITERATURA (MARCO TÉORICO) ………………..………………….5
2.1. ESTRUCTURA DENTARIA…………………………………………………5
2.1.1. ESTRUCTURA MORFOLÓGICA DEL DIENTE ……………………6
2.1.2. ESTRUCTURA DE LOS TEJIDOS DENTARIOS …………………...6
2.1.2.1. ESMALTE ……………………………………………………..7
2.1.2.2. DENTINA ……………………………………………………...7
VII
2.1.2.2.1. ESTRUCTURA HISTOLÓGICA DE LA DENTINA..11
2.1.2.2.1.1. TÚBULOS DENTINARIOS ………………....11
2.1.2.3. CEMENTO…………………………………………………….13
2.1.2.4. PULPA ……………………………………………………..…13
2.2. HIPERSENSIBILIDAD DENTINARIA …………………………………...14
2.2.1. DEFINICIÓN …………………………………………………………14
2.2.1.1. INCIDENCIA ………………………………………………....14
2.2.1.2. ETIOPATOGENIA …………………………………………...15
2.2.1.3. MECANISMO DE LA HIPERSENSIBILIDAD
DENTINARIA……......................................................................... 17
2.2.2. DIAGNOSTICO ……………………………………………………...18
2.2.3. TRATAMIENTO ……………………………………………………..18
2.2.3.1. TRATAMIENTOS PREVENTIVOS ………………………....18
2.2.3.2. TRATAMIENTO DE USO PROFESIONAL ……………...…18
2.2.3.3. TRAMIENTOS DE USO DOMESTICO ……………………..19
2.3. HIDROXIAPATITA…………………………………………………………20
2.3.1. COMPOSICIÓN QUÍMICA ………………………………….………20
2.3.2. FUENTES DE HIDROXIAPATITA…………………………………20
2.3.2.1. ORIGEN NATURAL …………………………………………21
2.3.2.2. ORIGEN SINTÉTICO ………………………………………..21
2.3.3. SÍNTESIS DE HIDROXIAPATITA ………………………………...21
2.3.3.1. SÍNTESIS QUÍMICA HÚMEDA ………………………...…..22
2.3.3.2. SÍNTESIS QUÍMICA SECA……………………………….…24
2.3.3.3. SÍNTESIS A PARTIR DE UNA FUENTE NATURAL…...…25
2.3.4. PROPIEDADES ……………………………………………...………26
2.3.5. APLICACIONES DE LA HIDROXIAPATITA……………...………26
2.4. NANOTECNOLOGÍA ……………………………………………………....27
2.4.1. NANOTECNOLOGÍA APLICADA A LA ODONTOLOGÍA………29
2.4.1.1. AREAS DE APLICACIÓN DE LA NANOTECNOLOGIA...29
2.5. MICROSCÓPIO DE FUERZAS ATÓMICAS (AFM) ……………………...31
CAPITULO III
3. MATERIALES Y METODOS……………………………………………………32
3.1. DISEÑO DE LA INVESTIGACIÓN …………………………………..…..……....32
3.2. POBLACIÓN DE ESTUDIO Y MUESTRA …………………………………...32
VIII
3.2.1. MUESTREO POR CONVENIENCIA…….…………………..32
3.2.2. SELECCIÓN Y TAMAÑO DE MUESTRA……………...…..33
3.3. CRITERIOS DE INCLUSIÓN ……………………………………………....33
3.4. CRITERIOS DE EXCLUSIÓN ………………………………………...……33
3.5. VARIABLES…………………………………………………………………34
3.5.1. DEFINICIÓN OPERACIONAL DE LAS VARIABLES ……34
3.5.2. VARIABLE DEPENDIENTE ………………………………..34
3.5.3. VARIABLE INDEPENDIENTE …………………………….34
3.5.4. OPERACIONALIZACION DE VARIABLES ………………35
3.6. METODOLOGIA
3.6.1. MANEJO Y MÉTODOS DE RECOLECCIÓN DE DATOS…36
3.7. PROTOCOLO DE ELIMINACIÓN DE LAS PIEZAS DENTARIAS ……..46
3.8. ANALISIS ESTADISTICO ……………………………………………...….47
CAPITULO IV
4. ANALISIS DE RESULTADOS ………………………………….........................48
4.1.1. NANOPARTÍCULAS DE HIDROXIAPATITA……...………48
4.1.2. ANALISIS DE DIÁMETRO DE TÚBULOS
DENTINARIOS ……………………………………………….48
4.1.3. INFLUENCIA DE LA CONCENTRACION DE nHAp %
EN LA OCLUSIÓN DE TÚBULOS DENTINARIOS ………..……50
4.2. DISCUSION…………………………………………………………………54
CAPITULO V
5. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
5.1. CONCLUSIONES ……………………………………………………….…..56
5.2. RECOMENDACIONES …………………………………………………….56
6. BIBLIOGRAFIA …………………………………………………………………58
IX
LISTA DE TABLAS
TABLA 1. OPERACIONALIZACIÓN DE VARIABLES …………………………35
TABLA 2. MEDIA, DESVIACIÓN ESTÁNDAR Y TEST ANOVA ……………...51
TABLA 3. MEDIA Y TEST ANOVA ……………...………………………..……...51
TABLA 4. MEDIAS MÉTODO TUKEY………………………………….……… ..52
X
LISTA DE GRÁFICAS
GRÁFICA 1. TAMAÑO DE NANOPARTÍCULAS (EQUIPO SZ – 100 DYNAMIC
LIGHT SCATTERING (DLS) SYSTEM) ………………………………………..…48
GRÁFICA 2.. DIAGRAMA DE PARETO: SE OBSERVA LOS FACTORES QUE
AFECTAN A LOS TÚBULOS DENTINARIOS………………………………….…49
GRAFICA 3. COMPARACIÓN DE MEDIAS: SE OBSERVA LA RUGOSIDAD DE
LOS TÚBULOS DENTINARIOS CON EL ATAQUE DEL ÁCIDO
ORTOFOSFÓRICO……………………………………………………………….…..49
GRAFICA 4. PORCENTAJE DE OCLUSIÓN DE TÚBULOS DENTINARIOS…...53
XI
LISTA DE FIGURAS
FIGURA. 1. ESQUEMA DE TEJIDOS DENTALES Y PERIODONTALE…….......6
FIGURA. 2. VISTA AL MICROSCOPIO DE FUERZA ATÓMICA ESMALTE
DENTAL........................................................................................................................8
FIGURA. 3.DETALLE DE LA CORONA DE LA PIEZA DENTARIA. ..................10
FIGURA. 4. TÚBULOS DENTINARIOS ..................................................................12
FIGURA. 5. DIAGRAMA DE TÚBULO DENTINARIO (CORTE
TRANSVERSAL).........................................................................................................13
FIGURA. 6 ESTRUCTURA DE LA HIDROXIAPATITA ........................................20
FIGURA. 7 SÍNTESIS DE HA POR PRECIPITACIÓN.............................................23
FIGURA. 8 SÍNTESIS DE HA COMO MATERIAL BIOCOMPATIBLE A PARTIR
DE CÁSCARA DE HUEVO........................................................................................25
FIGURA. 9 SÍNTESIS DE HA A PARTIR DE CÁSCARA HUEVO........................26
FIGURA. 10 SÍNTESIS DE NANOPARTÍCULAS .................................................. 28
FIGURA. 11 SÍNTESIS DE NANOPARTÍCULAS....................................................28
FIGURA. 12 RECOLECCIÓN Y CONSERVACIÓN DE
LAS PIEZAS DENTARIA…………………………………………………………..37
FIGURA. 13 SÍNTESIS DEL POLVO DE CÁSCARA DE HUEVO..........................38
FIGURA 14 SÍNTESIS DE LA NANOPARTÍCULA DE HIDROXIAPATITA........39
FIGURA. 15 SÍNTESIS DE LA NANOPARTÍCULA DE HIDROXIAPATITA...... 40
FIGURA 16 SÍNTESIS DE LA NANOPARTÍCULA DE HIDROXIAPATITA….....40
FIGURA. 17 SÍNTESIS DE LA NANOPARTÍCULA DE HIDROXIAPATITa…….41
FIGURA. 18 CORTE DE PIEZAS DENTARIAS PARA RECIBIR LA APLICACIÓN
DEL GEL DESENSIBILIZANTE ……………………………………………………43
FIGURA.19 PREPARACION DEL GEL DESENSIBILIZANTE CON
NANOPARTICULAS DE HIDROXIAPATITA..........................................................44
FIGURA 20 APLICACIÓN DEL GEL DESENSIBILIZANTE EN LOS DISCOS DE
DENTINA…………………………………………………………………………..…45
XII
LISTA DE ANEXOS
ANEXO 1. APROBACIÓN DEL SUBCOMITÉ DE ÉTICA DE INVESTIGACIÓN
EN SERES HUMANOS…………………………………………………….………...61
ANEXO 2.ACEPTACIÓN DE TUTORÍA DRA. KARINA FARFÁN………......…62
ANEXO 3. OFICIO PARA LA FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS……..….63
ANEXO 4. OFICIO PARA LA OBTENCIÓN DE LAS PIEZAS DENTALES CON SU
CORRESPONDIENTE CONSENTIMIENTO INFORMADO…………………..………64
ANEXO 5. CERTIFICADO DE DONACIÓN DE PIEZAS DENTARIAS……………..65
ANEXO 6. OFICIO MANEJO DE DESECHOS……………..…………………………….66
ANEXO 7. FORMULARIO DE CONSENTIMIENTO INFORMADO PACIENTE……67
ANEXO 8. ACUERDO DE CONFIDENCIALIDAD………………………………………68
ANEXO 9 CERTIFICADO DE SISTEMA ANTIPLAGIO URKUND……………...69
ANEXO 10 ABSTRACT……………………………………………………………..70
ANEXO 11. TABLA DE RESULTADOS DE MEDICIONES OBTENIDAS CON Y
SIN ÁCIDO ORTOFOSFÓRICO AL 37% ………………………….…….…….…...71
ANEXO 12. IMÁGENES EN AFM DE DISCOS CON Y SIN ÁCIDO
ORTOFOSFÓRICO 37%...............................................................................................72
ANEXO 13. IMÁGENES AFM DISCOS ANTES Y DESPUÉS DE LA APLICACIÓN
DEL GEL DESENSIBILIZANTE CON NANO PARTÍCULAS DE HIDROXIHAPATITA
……………………………………………………………………………………………………73
XIII
TEMA: “SELLADO DE TÚBULOS DENTINARIOS CON UN GEL DESENSIBILIZANTE CON
NANOPARTÍCULAS DE HIDROXIAPATITA. ESTUDIO IN-VITRO”
AUTOR: Maritza Gabriela Gómez Bedoya
TUTORA: Karina Patricia Farfán Mera
RESUMEN
Esta investigación busca ser un aporte a la literatura odontológica sobre el uso de
hidroxiapatita en el tratamiento de la Hipersensibilidad dental, evaluando mediante el uso
de Microscopia de Fuerza Atómica el efecto del sellado de túbulos dentinarios con un
gel desensibilizante dopada con nanopartículas de hidroxiapatita (nHAP). La síntesis de
nHAP se realizó apartir de la cáscara de huevo , mismas que se añadieron a un gel
desensibilizante comercial (UltraEZ) con 0, 1, 2, 3% p/p de nHAP. Se utilizarón 24
muestras de terceros molares expuesta la dentina, que fuerón sometidos a grabado ácido
con ácido ortofosfórico 37% para la exposición de los túbulos dentinarios, a los cuales se
aplicó el gel desensibilizante. En donde se utilizó un grupo control (A), a los cuales se les
aplicó el gel desensibilizante (UltraEZ). Al grupo (B), se le aplicaron el gel
desensibilizante con nanoparticulas de hidroxiapatita al 1% p/p nHAP. Al grupo (C), se
le aplicó el gel desensibilizante con nanopartículas de hidroxiapatita al 2% p/p nHAP. Al
grupo (D), se le aplicó el gel desensibilizante con nanopartículas de hidroxiapatita al 3%
p/p nHAP. Se aplicó el gel 1 vez al día durante 60 minutos por 7 días, las muestras
durante todo el procedimiento fueron conservadas en saliva artificial. Con ayuda de
Microscopio de Fuerza Atómica (AFM) se determinó el diámetro de los túbulos
dentinarios antes, después del grabado ácido y al término de los 7 días. El análisis del
polvo de nHAp con el DLS mostro que la nanopartícula tuvo un tamaño de 420nm,
mediante, una prueba de Pareto pudimos ver que la aplicación del ácido ortofosfórico
tiene una acción positiva para aumentar el diámetro de los túbulos dentinarios obteniendo
una rugosidad de (117,354± 003) μm. Mediante ANOVA se demostró que hay diferencia
significativa de (p=0,001) entre túbulos dentinarios antes y después de la aplicación del
gel desensibilizante, el gel desensibilizante con 0% de nHAp tuvo un valor de
significancia de (p= 0,731), mientras que los gel con las concentraciones de 1,2,3% de
nHAp tuvo un valor significativo de (p=0,000).
PALABRAS CLAVES: NANOPARTICULAS DE HIDROXIAPATITA, SENSIBILIDAD
DENTINARIA, SELLADO DE TUBULOS DENTINARIOS.
XIV
TITLE: Sealing of Dentin Tubules with a Desensitizing Gel with Hydroxyapatite
Nanoparticles. In Vitro Study.
Author: Maritza Gabriela Gómez Bedoya
Tutor: Karina Patricia Farfán Mera
ABSTRACT
The purpose of this research is to contribute to the odontology literature on the use of
hydroxyapatite in the treatment for dental hypersensitivity, using the atomic force
microscope to assess the sealing effect over the dentin tubules of a desensitizing gel with
hydroxyapatite nanoparticles (nHAP). The synthesis of the nHAP was made through the
egg shell, which was added to a commercial desensitizing gel (UltraEZ) at 0, 1, 2, 3% p/p
of nHAP. 24 samples of third molars with exposed dentin were used, which were
subjected to acid-etching with orthophosphoric acid at 37% for the exposition of the
dentin tubules, to which we applied desensitizing gel. There was a control group (A),
which received desensitizing gel (UltraEZ). Group (B) was applied desensitizing gel with
hydroxyapatite nanoparticles at 1% p/p nHAP. Group (C) was applied desensitizing gel
with hydroxyapatite nanoparticles at 2% p/p nHAP. Group (D) was applied desensitizing
gel with hydroxyapatite nanoparticles at 3% p/p nHAP. The gel was applied once a day
for 60 minutes, durig 7 days. The samples were always kept in artificial saliva. The
Atomic Force Microscope (AFM) helped determine the roughness of the dentin tubules
before and after the acid-etching, and after the 7 days. For the statistical analysis we took
the data about the roughness of the dentin tubules that were evident in each one of the
images scanned by the AFM, with a scanning are of 10μmx10μm.
KEY WORDS: Hydroxyapatite Nanoparticles/ Dentin Sensitivity/ Sealing of the Dentin
Tubules.
1
INTRODUCCIÓN
La hipersensibilidad dental es una de las condiciones clínicas frecuentes en los pacientes,
está caracterizada por una sensación dolorosa ante estímulos térmicos, químicos, físicos,
osmóticos, táctiles, debido a la activación de nociceptores pulpares generando una dentina
hipersensible. La prevalencia de dicha condición dolorosa ha sido muy controversial en
cuanto a la edad y al sexo (1). Estudios anteriores demuestran que la prevalencia de la
hipersensibilidad dentinaria varía entre el 8% y 57% de la población en general,
afectando 1 de cada 7 individuos entre los 18 y 40 años de edad y solo 3,8% de los
individuos que lo padecen no buscan atención odontológica. (2)
Existen varias soluciones para esta problemática, entre estas encontramos un campo poco
explorado en odontología que es la nanotecnología, la cual se basa la aplicación de nano-
particulas en las composiciones de los diferentes materiales odontológicos los cuales
son de gran ayuda ya que por el tamaño nanometrico nos permiten llegar a lugares
imposibles de alcanzar, así también la nanotecnología es capaz de utilizar matriales
biológicos propios del diente que podían de forma precisa y selectiva sellar los túbulos
dentinarios dando así al paciente una solución con mayor efectividad a la
hipersensibilidad dentinaria.
“Con el desarrollo de la nanotecnología, se han abierto nuevas oportunidades para obtener
nanopartículas de hidroxiapatita. Estas nanopartículas de hidroxiapatita presentan una
superficie nanoestructurada, lo que les permite unirse a la apatita del esmalte y la dentina
como un recubrimiento biomimético (nuevas tecnologías que se basan en la naturaleza
para su inspiración)” (3) que ayuda a la eliminación de la hipersensibilidad dental por
sellado de los túbulos dentinarios.
Al aplicar a un gel desensibilizante esta nueva tecnología, como “la nanopartícula de
hidroxiapatita siendo un elemento natural del propio diente estas se integran y
remineralizan la superficie de la dentina, ocluyendo los túbulos dentinarios, reduciendo
progresivamente el número de túbulos dentinarios permeables, impidiendo la transmisión
de estímulos a las terminaciones nerviosas que se encuentran en la pulpa, lo cual ayuda a
2
la disminución del dolor. Por todo lo anterior, las nanopartículas de hidroxiapatita resultan
muy eficaces en el tratamiento de la hipersensibilidad dentinaria”. (3)
El propósito de esta investigación es evaluar el efecto del sellado de túbulos detinarios de
un gel desensibilizante con nanopartículas de hidroxiapatita obtenida a partir de cáscaras
de huevo in vitro valorado en el Microscopia de Fuerzas Atómicas con la finalidad de
dar solución a la población afectada con sensibilidad dentaria.
3
CAPITULO I
1. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
1.1. PLOBLEMA
La hipersensibilidad dentinaria es un motivo de consulta frecuente por parte de los
pacientes en el consultorio, que la define la “International Association For Study of Pain
(I.A.S.P)” como el dolor fugaz y agudo que se presenta en la dentina que se encuentra
expuesta por acción ante estímulos químicos, táctiles que no son posibles de explicar y se
manifiesta con una incidencia que se encuentra en el 27% entre 16 y 24 años, 33% entre
25 y 34 años, 35% entre 55 a 44 años, 27% entre 45 a 54 años, 13% de 55 años en adelante;
su frecuencia en la población elevada, se estima que uno de cada tres personas adultas la
padecen, en un promedio de edad de 18 años a 35 años. (4)
Existe una amplia gama de opciones terapéuticas entre las que se encuentran los geles y
cremas dentales con diversos principios activos como fluoruros (4), sales como el nitrato
de potasio, y citrato de potasio, las cuales se difunden a través de los túbulos dentinarios,
hasta las terminaciones nerviosas y reducen la excitabilidad neuronal. Por ende y
actualmente en el país no se han realizado estudios ni materiales que utilicen
nanopartículas de Hidroxiapatita en el tratamiento de la hipersensibilidad dentaria es de
suma importancia e interés de realizar prácticas que permitan la implementación de
nanopartículas de hidroxiapatita como un material que ayuden a los tratamientos de
hipersensibilidad dentinaria.
¿Cuál es efecto de un gel desensibilizante dopado con nano partículas de hidroxiapatita
como sellante de túbulos dentinarios?
1.2. JUSTIFICCION
Con el objeto de tener mayor conocimiento sobre los avances tecnológicos en la
nanotecnología aplicada a la odontología los múltiples ensayos de laboratorios que
muestran que la HAP endura el esmalte dental más efectivamente que los fluoruros. Los
geles desensibilizantes con fluoruro sólo incrementan la resistencia del esmalte a los
4
ácidos. Pero un gel desensibilizante con Hidroxiapatita HAP consigue algo más. Si se
usan regularmente, permiten que se forme una capa protectora y remineralizada de
dentina que ayuda a la oclusión de los túbulos destinarios.
Debido a la falta de conocimiento sobre este tema en el país sobre todo en el área
odontológica el presente trabajo de investigación se enfoca en aportar con evidencia
científica acerca de la eficacia de las nano-partículas de HAP para la sensibilidad dentaria
y de esta manera brindar mayor conocimiento y mejorar las estrategias de los
profesionales en odontología en la consulta pública y privada al momento de encontrarse
frente a estas circunstancias.
1.3. OBJETIVOS
1.3.1. OBJETIVO GENERAL
Evaluar el efecto sellante de túbulos dentinarios con un gel desensibilizante con
nanopartículas de hidroxiapatita
1.3.2. OBJETIVOS ESPECIFICOS
. Elaborar nanopartículas de hidroxiapatita.
Unir el gel desensibilizante con nanopartículas de hidroxiapatita a diferentes
concentraciones.
Determinar el diámetro de túbulos dentinarios en piezas dentales mediante
microscopía de Fuerzas Atómicas (AFM).
Valorar el efecto sellante de túbulos dentinarios con el gel desensibilizaste con
nano-partículas de hidroxiapatita
1.4. HIPOTESIS
Hi: La obliteración de túbulos dentinarios es mayor con el uso del gel desensibilizante
con nano-partículas de hidroxiapatita.
Ho: La obliteración de túbulos dentinarios es menor o igual con el uso del gel
desensibilizante con nano-partículas de hidroxiapatita.
5
CAPITULO II
2. REVISION DE LA LITERATURA
2.1. ESTRUCTURA DENTARIA
En el sistema estomatológico se encuentra el principal elemento funcional que es el
diente, el cual se caracteriza por su color blanco y por su dureza, es decir, se trata de
cuerpos más bien sólidos que están conformados por calcio y por fósforo. Se encuentran
implantados en los huesos maxilares de la mandíbula, en la boca. (5)
2.1.1. ESTRUCTURA MORFOLÓGICA DEL DIENTE
El diente es una estructura morfológicamente diferente entre sí pero que al mismo tiempo
tiene características constantes por lo que se divide en tres partes: Corona, Cuello y Raíz.
(5)
Corona dental: Esta es la parte visible de la cavida bucal, que queda expuesta, está
cubierta por el esmalte y es de color blanco. (6)
Cuello del diente: Es también llamada zona cervical, es la parte de la pieza dental que
se encarga de unir la corona del mismo con la raíz, y se encuentra en la encía marginal.
(6)
Raíz dental: Esta parte está escondida cuando el diente está sano, ya que se encuentra
dentro del hueso maxilar. En el interior podemos encontrar el conducto radicular y la
pulpa dental, unos tejidos que se pueden ver afectados cuando aparece una caries muy
profunda. (7)
6
2.1.2. ESTRUCTURA DE LOS TEJIDOS DENTARIOS
Además de las partes más básicas del diente que comentábamos, también encontramos
otras partes importantes que conforman la pieza dental, hablemos de los diferentes tejidos.
Formados por 3 tipos de tejidos duros; esmalte, dentina, cemento y un tejido blando en
el centro: pulpa dentaria.Figura(1)
Figura. 1. Esquema de tejidos periodontales y dentales
Fuente: Embriología e Ingeniería tisular bucodental María Elsa Gómez de Ferraris
2009
2.1.2.1. ESMALTE
El esmalte no es considerado un tejido, ya que no posee células dentro de las sustancias
mineralizadas, sino más bien es un casco que da protección al resto de los tejidos que
conforma el diente, es llamado también sustancia adamantina. (8) Es la sustancia más
dura del cuerpo humano, constituido por millones de unidades estructurales básicas del
esmalte llamadas prismas, las cuales son producidas por células de origen ectodérmico
llamadas ameloblastos, formando un epitelio cilíndrico simple el cual secreta sustancias
inorgánicas y poco material orgánico sin contenido colagenoso. (8)
El esmalte está formado por un 96% de sales minerales que forman cristales de
hidroxiapatita, el cual esta densamente empaquetados siendo colocados uno de bajo del
otro por aposición, dando origen a los prismas como unidades básicas, al finalizar su
formación, los ameloblastos forman una capa selladora sin presencia de prismas sino solo
cristales a prismáticos. (8)
7
Los ameloblastos desaparecen durante la erupción dentaria convirtiéndose en un material
altamente mineralizado sin vasos sanguíneos ni terminaciones nerviosas. (9) El esmalte
sufre desgastes al entrar en contacto con agentes químicos, físicos o biológicos, sin poder
regenerar, pero pueden remineralizarse con sales afines. (8)
Durante la erupción dentaria el esmalte presenta una película primaria, denominada la
vaina o cutícula de Nasmyth, la cual desaparece al entrar en contacto con la oclusión,
luego aparece una película secundaria dada por la saliva formando una placa dental con
gérmenes habituales, la mala higiene puede producir el aparecimiento de una placa
bacteriana por microorganismos patógenos que producen la caries. (8)
El esmalte puede ser evaluado clínicamente, ya que es visible y representa toda la
superficie de la corona del diente, su mayor espesor lo encontramos cara incisal, mesial
y cúspides, la cual disminuye conforme se aproxima a la región cervical, también es más
gruesa en la cara vestibular y menos en la cara lingual. (8)
PROPIEDADES FÍSICAS DEL ESMALTE
El esmalte es considerada la estructura más dura del cuerpo humano, En la escala de Mohs
de 1 a 10 el esmalte tiene una dureza de 5, la dureza decrece conforme se aproxima a la
dentina, esto depende de la dirección que tengan los prismas, siendo más resistente al
tener una dirección paralela con la fuerza de trituración, y menos resistente si su dirección
es perpendicular. (9)
La elasticidad es escasa en este material, por presentar poco material orgánico y agua,
depende de la dentina como tejido de soporte y compresión, de lo contrario sufriría
fractura. El esmalte por su contenido mineral es traslucido, por lo que su color depende
de la dentina y el tejido pulpar. Se aprecia de color blanco amarillento a blanco grisáceo,
a mejor mineralización más brillante y traslucido, a menor mineralización más opaco y
poco traslucido. Es fácil de evaluar a través de rayos X. (9) (Figura2)
8
Figura. 2. Vista al Microscopio de Fuerza Atómica Esmalte Dental
a) Dentina, b) unión dentina – esmalte, c) esmalte dental.
Dentro de las propiedades físicas del esmalte están:
Dureza: resistencia superficial la cual corresponde a cinco en la escala de Mohs y que
equivale a la apatita, ésta provoca la resistencia al rayado o a presentar deformaciones
provocadas por la presión. (9)
Elasticidad: al tener poca cantidad de agua y sustancia orgánica presenta una elasticidad
escasa por lo tanto es un tejido frágil que puede llegar a fracturarse fácilmente, esta
elasticidad se encuentra de mayor forma en el cuello debido a mayor cantidad de sustancia
orgánica (9)
Transparencia y Color: depende principalmente de las estructuras más profundas como
la dentina, es traslúcido y el color tiene variaciones entre blanco amarillento y blanco
grisáceo el mismo que depende del color de la dentina, la transparencia se debe
principalmente a variaciones en el grado de calcificación del esmalte es decir que si se
presenta mayor mineralización existe mayor traslucidez. (9)
Permeabilidad: se encuentra escasa y este puede actuar como una membrana
semipermeable lo cual permite que el agua y algunos iones que se encuentran presentes
en la cavidad bucal tengan una fácil difusión, además los iones flúor pueden sustituir a 9
los grupos hidroxilos de la apatita y lo pueden hacer menos solubles a los ácidos y por
ende hace más resistente a la superficie del esmalte al ataque de caries se ve como una
capa blanca. (9)
9
Radiopacidad: debido a que el esmalte dental tiene el mayor grado de mineralización
tiene una mayor radiopacidad, por esta razón en radiografías dentales. (9)
COMPOSICIÓN QUÍMICA
Se encuentra formado por:
Matriz Orgánica: constituye el 1 – 2% del componente orgánico y se encuentra integrado
por proteínas y polisacáridos. (9)
Matriz Inorgánica: se encuentra constituyendo el 96% de material inorgánico la cual se
encuentra formado principalmente por sales de fosfato (PO43−) y calcio (Ca) formando
cristales de hidroxiapatita, además de oligoelementos como magnesio, cobre, flúor, entre
otros.
Agua: es el tercer componente y se encuentra constituyendo el 3% de la composición
química del esmalte y es la capa de hidratación, este porcentaje de agua disminuye
progresivamente con la edad. (9)
2.1.2.2. DENTINA
La dentina es un tejido intermedio que forma la mayor parte del diente, calcificado
semejante al hueso. Se encuentra por dentro del esmalte en la porción coronario y del
cemento en la porción radicular. (10)
La dentina es más dura que el hueso pero más blanda que el esmalte, contiene gran
cantidad de túbulos en su interior alberga unas fibras nerviosas capaces de transferir
sensaciones de dolor que se hace por medio de las fibrillas de tomes. La dentina en
condiciones normales no se encuentra en contacto con el exterior salvo que el diente
presente una anomalía en el esmalte. (10)
El espesor de la dentina es variable según la pieza dentaria, en incisivos inferiores va
desde 1 a 1,5 mm, mientras que en caninos y molares es de 3mm Se encuentra formada
10
principalmente por dos componentes que son: la matriz mineralizada y los túbulos
dentinarios los mismos que se encuentran en lodo el espesor de la dentina. Figura (3) (10)
Figura. 3 Detalle de la Corona de la pieza Dentaria.
a) Esmalte b) CAD c) dentina coronaria
Fuente: Ferraris 2009
Propiedades Físicas de la dentina
Dentro de las propiedades físicas tenemos:
Color: es de color blanco amarillento y es variable de una persona a otra y es el que
da el color generalmente al diente ya que el esmalte es de color traslúcido, además
depende también del grado de mineralización, de la vitalidad pulpar, la edad y los
pigmentos mismos que puden tener un origen endógeno o exógeno. (10)
Translucidez: es menos traslúcido que el esmalte ya que tiene menor grado de
mineralización. (10)
Dureza: se encuentra principalmente determinada por la mineralización que presenta,
aunque es menor que el esmalte es mayor que el hueso y el cemento. (10)
Radiopacidad: es menor que la del esmalte debido al contenido mineral, de esta
manera se ve más oscura en las radiografías. (10)
11
Elasticidad: esta es variable debido al contenido de sustancia orgánica y agua que
tiene presente, por este motivo es de gran importancia funcional. (10)
Permeabilidad: presenta mayor permeabilidad que el esmalte debido a que presenta
los túbulos dentinarios mismos que permiten el paso de elementos que atraviesan con
facilidad. Por este motivo la permeabilidad de la dentina es la propiedad con mayor
importancia en la práctica odontológica. (10)
Composición Química de la Dentina
Se encuentra conformada principalmente por:
Matriz Orgánica: esta constituye el 18% de su composición y se encuentra
constituida principalmente por fibras de colágeno tipo I y en menor cantidad por
proteínas, lípidos y polisacáridos. (10)
Matriz Inorgánica: constituye el 70% de su composición y se encuentra formado
principalmnte por cristales de hidroxiapatita que a diferencia de los que se encuentran
en el esmalte son más pequeños y delgados, además presenta calcio que es un
reservorio para la formación de cristales de hidroxiapatita. (11)
Agua: representa el 12% de la composición total de la dentina. (12)
2.1.2.2.1. ESTRUCTURA HISTOLOGICA DE LA DENTINA
Está constituida por los túbulos dentinarios y la matriz extracelular que es de naturaleza
tubular, por lo tanto, es permeable.
2.1.2.2.1.1. TUBULOS DENTINARIOS
Se presentan como estructuras cilíndricas que se encuentran en toda la extensión de la
dentina, tiene prolongaciones de dentinoblastos, fibras colágenas, fibras nerviosas que
son procedentes de la pulpa y por lo tanto son los que proporcionan la vitalidad de la
dentina, presentan una longitud de aproximadamente 1,5 a 2mm y se presentan en forma
de S itálica y va desde el límite del esmalte hacia la pulpa, en donde existen
12
aproximadamente entre 45.000 a 65.000 por mm2, mientras en la parte más externa de la
dentina se encuentra en número de 15.000 a 20.000 por mm2. (9)
Presentan un diámetro que varía, son más anchos en la parte más próxima a la pulpa en
donde tienen un diámetro de 2,5 μm hasta 5 μm, y más estrechos más hacia la periferia
en donde tienen un promedio de 1.0 μm. (9) Figura(4)
Figura. 4 Túbulos Dentinarios
A. Pared dentinaria del conducto radicular, B. Ampliación del área central de la
fotografía A. C. Esquema de la desidad tamaño de los túbulos dentinarios en la dentina
superficial y profunda
Fuente: Mooney 2007 y D.H. Pashley 1996
La pared de los túbulos dentinarios se encuentran constituida por dentina intratubular la
misma que es muy mineralizada, además se puede observar en un corte transversal tres
zonas:
Zona hipomineralizada externa que se encuentra en la parte más externa de la dentina
intratubular, la zona hipermineralizada que es de mayor espesor, se encuentra en la parte
media y presenta mayor mineralización que la dentina intratubular, por último, presenta
la zona hipomineralizada interna que es la que puede obliterar el conducto. (Fig. 5) (13)
(14).
13
Figura. 5 Diagrama de túbulo dentinario (Corte Transversal)
Fuente: Ferraris 2009
2.1.2.3. CEMENTO
El cemento es duro y tiene alguna semejanza con el hueso, excepto que es avascular.(15)
Cubre las raíces de los dientes y se halla firmemente unido a la dentina radicular.
Aproximadamente, el 50% del cemento está mineralizado por cristales de hidroxiapatita
y la matriz orgánica es principalmente colágeno. Hay dos tipos de cemento. El adosado a
la dentina de la raíz y que la cubre desde el margen cervical al ápice de la raíz, es acelular
por lo que se le llama cemento acelular. Este tipo de cemento se halla a menudo cubierto
por cemento celular, donde las células que lo formaron, los cementoblastos, han quedado
atrapados en lagunas de su propia matriz, muy similar al modo en que los osteocitos
ocupan sus lagunas en el hueso. (14)
2.1.2.4. PULPA
Se encuentra en el centro de la pieza dentaria y se encuentra formada por tejido conectivo,
además por 25% de sustancia orgánica y 75% de agua, se encuentra cubierta por la dentina
y se comunica con el ligamento periodontal a través del foramen apical por donde pasan
vasos sanguíneos y nervios que se encuentran en relación con odontoblastos y sus
proyecciones hacia los túbulos dentinarios, por tal razón cuando se encuentran
desprotegidos los mismos se produce una sensación dolorosa que es conocida como
Hipersensibilidad Dentaria (HD).( (14)
14
2.2. HIPERSENSIBILIDAD DENTINARIA
2.2.1. Definición
Según International Association for the Study of Pain (I.A.S.P.) quien define a la
hipersensibilidad dentaria como el dolor que se presenta por una dentina que se encuentra
expuesta, que es provocado y reacciona a estímulos químicos, táctiles, térmico u osmótico
mismo que no puede ser relacionado con alguna patología dentaria. (15)
Es causada por que los túbulos dentinarios se encuentran expuestos y comunican a la
pulpa con la cavidad oral, debido a que el tamaño de los túbulos dentinarios es mayor lo
que se manifiesta con la presencia de dolor que puede ser agudo el que es transmitido
hacia el sistema nervioso central. (15)
Con relación a la terminología usada para mencionar a esta patología existen varias como
hipersensibilidad dental, sensibilidad dental, hiperestesia dentaria, hipersensibilidad
dentinaria, de todos el más aceptado ha sido hipersensibilidad dentinaria HD la cual ha
sido utilizada en varias investigaciones. (16)
2.2.1.1. Incidencia
Según un amplio estudio realizado en la Universidad de Bristol (Reino Unido), el 50%
de la población estudiada, aproximadamente, padece o ha padecido hipersensibilidad
dental, aunque tan sólo el 5-10% solicita ayuda profesional. Suele aparecer entre los 25 y
los 45 años, aunque también se presenta en dientes permanentes jóvenes. Existen
determinados grupos de mayor riesgo: cepillado vigoroso de los dientes, recesión
gingival, tratamiento periodontal, trastornos de la conducta alimentaria, xerostomía,
maloclusiones severas que provocan problemas periodontales o exposiciones anormales
de los cuellos dentales. Los dientes más afectados son los premolares y los caninos, y la
zona cervical es la más afectada por la exposición dentinal. (16)
15
2.2.1.2. Etiopatogenia
La dentina expuesta reacciona al dolor intenso el cual al ser sometido a exploración con
aire caliente o frío, agua caliente o fría, a dulces, ácidos o salados, además varios fármacos
como la acetilcolina o el cloruro de potasio provocan dolor cuando son aplicados sobre la
dentina y, aunque no toda dentina expuesta es sensible para que se presente la HD se debe
tener la apertura y exposición de los túbulos dentinarios que presentan apertura y aumento
del diámetro de los mismos lo que produce el aumento de la conductancia hidráulica
presente en la dentina y de esta manera se produce el dolor
(17)
Dentro de los factores causantes de HD podemos nombrar:
Exposición de la dentina a la cavidad oral
Túbulos dentinarios permeables
Estímulos sobre la dentina capaces de provocar dolor
Factores que provocan la exposición de la dentina
Dentro de estos factores podemos nombrar (18) :
Defectos en el desarrollo en que el esmalte y el cemento no tienen contacto por lo
que provocan que exista una dentina descubierta. (18)
Abrasión la cuál es producida por un desgaste en la superficie que hace que exista
perdida del esmalte, el mismo que es producido por el uso frecuente de productos
abrasivos que tienen contacto directo con la pieza dentaria como, pipas, piercings
o una mala técnica de cepillado dental. (18)
Erosión la misma que es provocada por la exposición del esmalte a ácidos los que
pueden ser intrínsecos como los jugos gástricos en pacientes con vómito repetido,
16
bulimia o anorexia, o extrínsecos como los que se presentan al ingerir alimentos
cítricos, vinagre, gaseosas, vinos, vitamina C. (18)
Abfracción que se debe a una oclusión traumática en donde el producto es el
desgaste a nivel cervical lo cual representa como producto final una dentina
expuesta. (18)
Atricción en la que se produce un desgaste a nivel oclusal dejando como resultado
una dentina expuesta. (18)
Recesión gingival provoca la exposición de la raíz de la pieza dentaria en la que
existe una exposición extensa de los túbulos dentinarios. (18)
Túbulos dentinarios permeables
La capa de barrillo dentinario que es producido por el cepillado dental y, que provoca el
taponamiento en la entrada de los túbulos, al actuar sustancias ácidas externas o internas,
se evita que haya la formación de barrillo de tal forma que persiste la presencia de túbulos
dentinarios permeables. (19) (20)
Estímulos sobre la dentina capaces de provocar dolor
Los estímulos capaces de provocar dolor están estímulos fríos o calientes, táctiles,
químicos u osmóticos. (17)
2.2.1.3. Mecanismos de la hipersensibilidad dentinaria
En la actualidad hay teorías propuestas por varios autores los que mencionan tres
mecanismos de la Hipersensibilidad Dentinaria :
17
TEORIA NERVIOSA
También llamada teoría de la inervación directa la cual menciona que existen fibras
pertenecientes al plexo de Raschkow que se encuentran dentro de los túbulos dentinarios,
los que penetran en la dentina y van hacia la unión entre la dentina y el esmalte en una
distancia de 100μm, el número de fibras que se presentan en la dentina es variable y se
presentan en mayor cantidad en los cuernos pulpares. Estas terminaciones nerviosas
estimulan directamente la pulpa a través del agujero apical la cual se extiende hacia la
capa subodontolblástica y se ramifica en la capa odontoblástica (21) (22) (23)
TEORÍA ODONTOBLÁSTICA
Llamada también teoría del transductor odontoblástica en donde los odontoblastos son
células receptoras, las mismas que son las encargadas de transmitir el impulso nervioso a
las uniones sinápticas localizadas en el borde de la pulpa y la dentina y que son las
encargadas de producir la sensación de dolor, por lo tanto, los odontoblastos participan
directamente en la producción de la sensibilidad dentinaria. (21) (24)
TEORÍA HIDRODINÁMICA
En 1964 Brännström (25) propuso esta teoría y actualmente es el mecanismo más
aceptado en lo que se encuentra relacionado con la hipersensibilidad en donde se afirma
que cada túbulo dentinario se encuentra lleno de líquido y cuando estos tienen mayor
diámetro los estímulos externos provocan que haya un desplazamiento de fluido tubular
el cual estimula las terminaciones nerviosas de la zona pulpar y de esta manera se provoca
el impulso doloroso.
En imágenes obtenidas por microscopía electrónica de barrido de la superficie de la
dentina se puede notar la presencia de los túbulos dentinarios abiertos, por lo que el
aumento en el diámetro de los túbulos dentinarios hará que el dolor sea más intenso. (23)
(25)
18
2.2.2. DIAGNOSTICO
Se basa en la historia clínica detallada y en una correcta exploración. Habrá que descartar
otras causas de dolor dental, como pulpitis, caries, fracturas o fisuras dentales, dolor
asociado a restauraciones realizadas recientemente y tratamientos blanqueadores, así
como registrar los hábitos dietéticos e higiénicos del paciente, hábitos disfuncionales
como apretamiento o bruxismo, trastornos de la conducta alimentaria, regurgitación
gástrica o factores profesionales relacionados con el contacto con agentes erosivos o
abrasivos. (25)
Un método clínico sencillo para identificar la sensibilidad dental es aplicar aire a presión
o pasar un explorador en sentido mesio-distal por la zona donde el paciente refiere la
sensibilidad. La severidad del dolor puede cuantificarse mediante una escala categórica
(leve, moderado o severo) o utilizando una escala visual. (25)
2.2.3. TRATAMIENTO
Existen varias opciones en cuanto al tratamiento de la hipersensibilidad dentinaria, entre
ellos tenemos:
2.2.3.1. TRATAMIENTOS PREVENTIVOS
Dentro del tratamiento se encuentra una correcta higiene oral en donde existe una técnica
de cepillado adecuada con el uso de un cepillo de cerdas suaves, además debe existir bajo
consumo de alimentos ácidos ya que estos provocan una desmineralización del esmalte y
la dentina. (26)
2.2.3.2. TRATAMIENTOS DE USO PROFESIONAL
En cuanto al tratamiento odontológico usado profesionalmente existen varios productos
usados entre ellos:
19
Se encuentran los que provocan una despolarización nerviosa como el nitrato de
potasio, citrato de potasio, propóleo en donde se proporciona un alivio a la HD
mediante el corte de la respuesta neural a cualquier estímulo que pueda provocar
dolor. (21)
Otros tratamientos usados son los que producen la obliteración de los túbulos
dentinarios en donde se puede nombrar al fluoruro de sodio, fluoruro de estaño,
estos actúan interactuando con el calcio que se encuentra en los cristales de
hidroxiapatita que se encuentran en la dentina, los que tienen como objetivo
principal depositar fluoruro en los túbulos dentinarios provocando así el sellado
de los mismo, por lo tanto, no existe movimiento de fluido dentinario por ende
disminuye la HD. (21) (26)
Mecanismos de sellado mecánico de la dentina expuesta mediante el uso de
ionómero de vidrio o el oxalato de potasio los cuales se aplican de manera tópica
sobre la dentina que se encuentra expuesta. (19) Existe también el flúor que puede
ser usado en barnices, pero solo tienen un efecto por poco tiempo ya que puede
ser eliminado por el cepillado, otra técnica usada son los rayos láser que estudios
demuestran que puede haber obliteración de los túbulos, así como también existe
riesgo de aumenta la HD (19) (26)
2.2.3.3. TRATAMIENTOS DE USO DOMESTICO
Dentro de los productos usados más comúnmente y pueden ser adquiridos de manera fácil
a nivel comercial son las pastas dentales desensibilizantes, así también los geles
desensibilizantes los que se encuentran usando:
Pastas desensibilizantes:
Sales de potasio como el nitrato o cloruro de potasio 5% en donde los iones de
potasio que se extienden a lo largo de los túbulos dentinarios evitan la
repolarización de las fibras nerviosas impidiendo así la transmisión del impulso
nervioso y por ende disminuye la producción del dolor. (27)
20
Cloruro o nitrato de estroncio al 10% en donde se forma un depósito cristalino de
estroncio el mismo que bloquea los túbulos dentinarios. (28)
Geles desensibilizantes:
Gel de nitrato de potasio al 3% con 0,25% de fluoruro de sodio. (28)
2.3. HIDROXIAPATITA
La hidroxiapatita (HA) cuya fórmula es Ca10 (PO4)6 (HO)2 es un fosfato de calcio que
tiene una estructura cristalina (6) y es uno de los componentes mayoritarios que
constituyen la matriz inorgánica de los órganos dentales y del hueso y tiene una estructura
hexagonal, es un biomaterial que pertenece naturalmente a las apatitas y se encuentra en
rocas sedimentarias y, que presenta cantidades mínimas de sodio, carbonatos, cloro y
magnesio que tienen un papel importante en la remodelación del hueso. (29)
2.3.1. COMPOSICIÓN QUÍMICA
Es un mineral que se encuentra naturalmente formado desde el calcio de la apatita y se
encuentra compuesto por fósforo y calcio y se representa como compuesto cristalino el
mismo que está constituido por 1 molécula de hidróxido de calcio y 3 de fosfato de calcio.
(29) (Figura 6)
Figura. 6 Estructura de la Hidroxiapatita
Fuente: Kowalyszyn, Silva, & Torres, 2013
21
2.3.2. FUENTES DE HIDROXIAPATITA
Dentro de las fuentes de hidroxiapatita tenemos: de origen natural y de origen sintético
las cuales serán descritas a continuación:
2.3.2.1. ORIGEN NATURAL
Proviene del carbonato de calcio presente en los corales, huesos humanos o animales
posterior a una reacción hidrotermal, además puede provenir de algas que presentan
microporos y que presentan una superficie parecida al hueso y facilita la osteointegración.
(29)
2.3.2.2. ORIGEN SINTETICO
Se refiere principalmente a la HA sintetizada artificialmente la cual puede ser cerámica o
no cerámica. La cerámica se constituye por partículas de forma esférica y que no es
reabsorbible además se obtiene de los fosfatos cálcicos; mientras que la no cerámica que
es la parte mineral que presenta el hueso que se reabsorbe y actúa como matriz ósea en la
que se deposita la nueva formación de hueso y se obtiene al realizar un precipitado
químico de fosfatos y calcio. (29)
2.3.3. SÍNTESIS DE HIDROXIAPATITA
Existen dos procesos químicos para la síntesis de HA:
22
2.3.3.1. SÍNTESIS QUÍMICA HÚMEDA
Es usada principalmente para la obtención de HA a nivel nanoestructurado la cual tiene
una morfología definida y que tiene poca posibilidad de contaminación durante el proceso
de síntesis, para ello se utilizan métodos como
Síntesis Hidrotérmica para la formación de HA se emplean soluciones líquidas
las cuales son sometidos a temperatura elevada (140 a 500°) en donde producto
de esta reacción se obtiene una HA con alta cristalinidad, con cristales
macrométricos, pero presenta la desventaja de que durante el proceso de obtención
no se puede controlar el tamaño y la morfología. (29) (30)
Síntesis por Precipitación el mismo que se presenta como uno de los métodos
más importantes ya que es un método económico y sencillo (30) de realizar en
donde se precipita principalmente fuentes de iones fosfato como el ácido fosfórico
y calcio como el hidróxido de calcio (31) en un medio líquido sometidos a
agitación y a temperatura de 90°C por una hora, posterior al tiempo esperado se
procede a la filtración y secado a 120°C por dos horas y luego se somete a
calcinación a 850°C por 4 horas, además se debe mantener un pH por encima de
10 con la ayuda de hidróxido de amonio durante todo el proceso de precipitación
ya que este influye en la calidad de la HA resultante por lo que un pH menor
provoca una insuficiencia en la cantidad de calcio. (Figura 7) (32)
La siguiente ecuación describe el proceso:
10Ca(OH)2 + 6H3P O4 → Ca10(P O4)6(OH)2 + 18H2O
23
Figura. 7 Síntesis de HA por precipitación
Fuente: Guzmán Vázquez, C., Piña Barba, C., & Munguía, N. 2005
Otro método empleado para la precipitación de HA es el que utiliza materiales como
Nitrato de calcio tetrahidratado, fosfato monoácido de diamonio y el hidróxido de amonio
en donde reaccionan los dos componentes obteniéndose como producto HA después de
someterse a una agitación por 14 días a temperatura ambiente, luego se procede a la
filtración y al secado a 250°C por 3 horas, posteriormente a una calcinación a 850°C (35)
La siguiente ecuación qué describe el proceso de obtención de HA
10(CaNO3)2.4H2O + 6(NH4)2HP O4 + 8NH4OH → Ca10(P O4)6(OH)2 +
20NH4NO3 + 46H2O
Síntesis Sol-Gel es usado para la formación de nano y micro partículas y se puede
tener un control el tamaño del poro producido aunque la desventaja que se
presenta al utilizar este método es que los materiales tienen costos elevados y la
HA que se obtiene no se presenta con una buena homogeneidad, además, se
presenta como un método que requiere de controles estrictos.
Entre los materiales usados están el Nitrato de calcio y el Óxido de fósforo en una
mezcla que se envejece por 4 días a 80°C sometido a agitación y para iniciar la
gelificación se aumenta la temperatoura a <90°C se seca y se lava para finalmente
calcinarlo a 1200°C por 12 horas como se demuestra en la siguiente ecuación:
(35)
24
10Ca(NO3)24H2O + 6(C2H5O)3P(O) +20CH3O(CH2)2OH → Ca10(P
O4)6(OH)2 + subproducts
2.3.3.2. SÍNTESIS QUÍMICA SECA
Es utilizada principalmente para una producción masiva de HA y donde se presenta con
un tamaño elevado y forma definida, para ello existen técnicas como:
Síntesis en estado solido
Se utiliza un mortero el que mezcla materiales que contengan calcio como el Nitrato de
Calcio, Fosfato Diamónico, Carbonato de Calcio y Fósforo como el Fosfato Dicálcico,
posteriormente es llevado a tratamiento con altas temperaturas en donde como resultado
se obtiene HA cristalina (33)
Síntesis químico mecánica
Son utilizados reactivos que contienen calcio y fosforo los mismos que son sometidos al
molino de bolas en donde son pulverizados en donde se utiliza un molido seco o húmedo
(31) (33) para ello se encuentran sometidos a solventes con altas temperaturas (700°C) lo
que permite obtener HA con alta cristalinidad y cristales con tamaño aumentado (30).
25
2.3.3.3. SÍNTESIS A PARTIR DE UNA FUENTE NATURAL
Síntesis a partir del Coral
Se utiliza para la síntesis de HA ya que está formado por carbonato de calcio, el cual es
sometido a un secado y limpieza, una calcinación a 900°C por 2 horas, posteriormente se
le adiciona Fosfato Diamónico y se procede a moler en un mortero en donde se obtiene
HA sin presencia de impurezas (31)
Síntesis a partir de cáscaras de huevo
La cáscara de huevo de gallina contiene una fase inorgánica compuesta en un 97% a 98%
de carbonato de calcio5 y el 2% restante es carbonato de magnesio, además tiene
pequeñas cantidades de iones sodio, potasio y fosfato, lo que hace una constitución iónica
muy parecida a la de la dentina. Uno de los materiales de interés que pueden provenir de
la cáscara de huevo, son los fosfatos de calcio, que se ha demostrado que son
biocompatibles con tejido biológico. Se muestra el tratamiento que se le da a la cáscara
de huevo para convertir este material en un material biocompatible, haciendo la síntesis
de fosfato tricálcico a partir de cáscara de huevo. (Figura 8) (31)
Figura. 8 Síntesis de HA como material biocompatible a partir de cáscara de huevo
Fuente: Nerly Montañez Superlano MéD.2014
Las reacciones generales en el proceso de síntesis de fosfatos de calcio a partir de
carbonatos provenientes de materiales naturales como la cáscara de huevo son: (Figura9)
(31)
26
Figura. 9 Síntesis de HA a partir de cáscara huevo
Fuente: Nerly Montañez Superlano MéD.2014
Al estar compuesta por Carbonato de Calcio, fosfato de calcio, la cáscara de huevo es
sometida a altas temperaturas provocando así su calcinación y obteniendo como resultado
Óxido de calcio al cual se le adiciona Fosfato de Calcio y se obtiene como resultado HA
de muy alta calidad. (31)
2.3.4. PROPIEDADES
Dentro de las propiedades de la HA están:
Biocompatibilidad: se presenta como un material que no es tóxico ya que se
encuentra formado por calcio, magnesio, sodio y potasio lo cual hace que tenga
una similitud química y en su estructura tanto con el hueso como con los dientes
por lo que es usado para la regeneración de tejidos que además cuenta con
características de oseointegración y bioafinidad. (32)
Reacción con hueso: al ser el principal componente de los tejidos mineralizados
se presenta como material oseoconductor lo que le permite brindar una matriz
óptima para ser rellenado con tejido conectivo del hueso circundante lo que
hace que el hueso crezca y se osifique. (32)
Elasticidad y rigidez: la HA presenta una elasticidad debido a la cercanía con las
fibras colágenas, además es rígida y dura, la cual según estudios presenta una
resistencia a la tracción de 4 a 70 MPa y a la compresión entre 20 y 500 Mpa (32)
2.3.5. APLICACIONES DE HIDROXIAPATITA
El uso de HA se ha extendido en el campo biomédico; ortopédico, odontológico y
oftalmológico, en el campo médico, se usa principalmente en la como la regeneración de
los huesecillos del oído medio, en ortopedia se utiliza para la reparación o reconstrucción
de hueso, en el área farmacéutica es utilizado para la purificación de los anticuerpos (34)
27
Dentro del campo odontológico, se encuentra en aplicaciones como: aumento de hueso
en el reborde mandibular, como material en el campo de la implantología permitiendo la
fijación de los implantes ya que respeta a los tejidos blandos y duros, dando como
resultado una resistencia a la carga de prótesis sobre implantes, puede mantener y mejorar
la altura en el reborde alveolar después de una extracción dental, como remineralizante
en el caso de caries en el esmalte, además actúa como promotor en la remineralización de
la dentina por esta razón ayuda en el tratamiento de la HD (31) (35) (36)
2.4. NANOTEGNOLOGÍA
La nanotecnología en los últimos años aproximadamente ha sido un importante
complemento en la evolución de la ciencia, proviene de la palabra griega nanno que
significa enano (34) fue introducida por Kerie E. Drexler a mediados del siglo XX (61),
en 1974 Taniguchi Norio y fue Richard Feynman introdujeron el término en la
conferencia “There’s plenty of room at the bottom” la que impulsó el desarrollo en el
campo de la nanotecnología (34) y, que es considerada como una ciencia aplicada al
control y la manipulación de materiales a escala nanométrica, en donde 1 nanómetro
equivale a una billonésima parte de una micra (1nm – 1x109))(Figura 10) 32, se encarga
del estudio, creación, síntesis y aplicación de materiales a nanoescala.
28
Figura. 10 Medidas en nanotecnología
Fuente: digital.csic.es
La Nanotecnología trabaja con materiales estructurados en escala nanométrica las cuales
forman bloques de construcción como nanopartículas, nanotubos o nanofibras para hacer
productos más fuertes y accesibles (34).
Hoy en día la nanotecnología es un instrumento que ayuda al avance de la ciencia, que
tiene aplicaciones en el campo textil, en el de la química, física, biología, ingeniería,
medicina, odontología los que utilizan nanomateriales como nanocristales, nanotubos,
nanocables que presentan propiedades que son útiles en varias aplicaciones, las mismas
que pueden ser iguales o parecidas a los materiales usados convencionalmente, los que
pueden variar de acuerdo al tamaño de partícula que se obtenga de la síntesis de
nanopartículas por medio de procesos de fragmentación en técnicas como Top-Down o
técnica descendente y Bottom-Up en donde las partículas muy pequeñas se unen para
formar nanopartículas. (Figura 11) (34)
Figura. 11 Síntesis de nanopartículas
Fuente: Yadav, Mungray & Mungray 2014
29
2.4.1. NANOTECNOLOGÍA APLICADA A ODONTOLOGÍA
La nanotecnología ha tenido un impacto importante en el campo odontológico
permitiendo el impulso de nuevos e innovadores materiales con características
nanométricas como nanocomposites, nanotubos, nanopartículas los que permitan tener
nuevas terapias para su aplicación en la práctica diaria, de esta manera regenerar los
tejidos dentarios de una manera total o parcial. (37) (38)
2.4.1.1. ÁREAS DE APLICACIÓN DE LA NANOODONTOLOGÍA
Nanodiagnóstico: para realizar un diagnóstico se aplica nanodispositivos capaces de
identificar patologías. Estudios in vitro demuestran que con ayuda de la nanotecnología
se puede aumentar la eficiencia en los métodos diagnósticos usados en la actualidad
aplicando para este fin saliva o tejidos en donde los dispositivos actúan a nivel
nanomoleclar con el propósito final de determinar de manera temprana tumores o
enfermedades infecciosas para ello en los últimos años han existido contribuciones
significantes a partir de la nanotecnología principalmente; microscopía de fuerza atómica
(AFM), elementos de contraste en imagenología, biochips (39)
Cáncer oral: la posibilidad de obtener imágenes de las lesiones cancerígenas es una de
las contribuciones más notorias de la nanotecnología en el campo odontológico, el uso de
las nanopartículas de oro como elemento de contraste ya que se une a receptores celulares
específicos permitiendo una mayor acumulación en el tejido tumoral y de esta forma
detectar el cáncer oral (39)
Anestesia local: al desarrollar nanoesferas y microesferas biocompatibles para el control
de la liberación de fármacos se ha facilitado la capacidad de los anestésicos y obtener
mejor capacidad de acción y evitar efectos adversos que se podrían presentar, de esta
forma se reduce la toxicidad, todo en forma de nanorobots los que ingresarían a la pulpa
a través de los túbulos dentinarios produciendo así un efecto anestésico. (36)
Caries dental: al ser causada por bacterias que generalmente se encuentran en la
superficie del diente como biofilm producen ácidos que provocan la desmineralización y
de esta manera facilitan la producción de caries la nanotecnología actúa en el desarrollo
de una nanoterapia antibacteriana las cuales interrumpen la continuidad de la membrana
30
celular inhibiendo el metabolismo del azúcar y de esta manera evitando el crecimiento de
estas bacterias y por ende la formación de caries, además actualmente se encuentran
desarrollando una vacuna anticaries aunque todavía no existe una en el mercado. (36)
Hipersensibilidad dentinaria: al ser provocada por cambios en la presión hidrodinámica
los cuales transmiten impulsos dolorosos a través de los túbulos dentinarios los que se
presentan con un diámetro mayor que los dientes sin HD. La nanotecnología busca aplicar
materiales nativos que actúen en la oclusión de los túbulos dentinarios lo cual permite
ofrecer una cura permanente. (7)
Implantología: a través de la nanotecnología se ha incorporado nanocristales a los
implantes de titanio los cuales permite que existe mayor oseointegración y
biocompatibilidad de los implantes produciendo estabilidad en el mismo (11), además los
pacientes tienen menor tiempo de recuperación y son muy compatibles con el hueso lo
que proporciona una unión más sólida y hasta 20 veces más resistente. (37) ya que al
obtener una fusión mayor de la raíz del implante con el hueso que se encuentra alrededor
es primordial para el éxito del implante por lo que al estar en contacto con los tejidos
duros y blandos deben tener una biocompatibilidad adecuada ya que así se mejora la
osteointegración. (35)
Endodoncia: estudios in vitro demuestran que un nuevo nanomaterial de relleno
radicular “Nanomaterial enhanced retrofil polymer (NERP)” cuenta con una mejor
adaptación al medio radicular, se encuentra formado por fármacos antimicrobianos,
clorhexidina que cuentan con la propiedad de reducir la acidez presentada en una
infección apical provocando la reducción de esta y la capacidad de evitar las microfugas
que podrían existir de bacterias y aumenta su capacidad de sellado. (40)
Materiales Dentales: varias investigaciones aplicadas a este campo han dado como
resultado la producción de nanocomposites nanohíbridos, que permiten desarrollar mejor
las propiedades tanto funcionales como de manipulación que los materiales utilizados
anteriormente (26) los mismos que presentan cualidades como tiempo reducido de
polimerización, resistencia al desgaste, mayor biocompatibilidad. Materiales de
nanorelleno como el ionómero de vidrio que cuenta con propiedades que mejoran la
liberación de flúor de esta manera vuelve más fuerte a la pieza dentaria. (41)
31
2.5. MICROSCOPIA DE FUERZAS ATÓMICAS (AFM)
La microscopía de fuerza atómica (AFM) hoy por hoy es una herramienta útil en la
caracterización de muestras a escala atómica, fue inventado por Gerd Binning y Heinrich
Rhomer en 1981 (42) su funcionamiento se debe a una punta de 20 a 60 m de radio de
curvatura y se localiza al final de un cantiliver que recorre la superficie de la muestra
manteniendo una fuerza de interacción mínima y que se controla reflejando un láser en la
parte posterior de la palanca y se dirige al diodo el cual determina de forma precisa los
cambios en la inclinación o amplitud de oscilación de la punta. (43)
Su funcionamiento se encuentra basado en detectar las fuerzas que actúan entra la punta
del AFM y la superficie de la muestra, trabaja en diferentes modos de operación dentro
de ellos encontramos: Modo contacto, imagen de fase, modo no contacto, modo Tapping
con lo que se obtiene la topografía de la superficie de la muestra. (44)
El estudio de la microscopía de fuerza atómica ha creado una nueva oportunidad en el
campo de la odontología ya que es útil al momento de observar superficies inertes así
como también células vivas como por ejemplo en el campo de la obturación endodóntica
en donde se puede estudiar la topografía del cono de gutapercha y poder ser evaluado
directamente, es útil también en la observación microscópica del esmalte y la dentina
después de un grabado ácido, así como comparando la forma y la densidad de los prismas
y partículas del esmalte. (45)
32
CAPITULO III
3. MATERIALES Y METODOS
3.1. TIPO Y DISEÑO DE LA INVESTIGACIÓN
Analítico, porque se analizó cuantitativamente el grado de sellado de túbulos
dentinarios en cada uno de los grupos: grupo A (Control), grupo B (gel
desensibilizante con nano-partículas de hidroxiapatita).
Comparativo, ya que se comparó los valores finales obtenidos de los diferentes
grupos con el fin de contrastar la efectividad para reducir la sensibilidad dentaria.
Longitudinal porque en el sellado de túbulos dentinarios se valoró en dos
momentos en el tiempo, una al inicio y otra al final, después de siete días de
estudio.
Experimental ya que se analizó el efecto de las variables independientes
(Concentración de HAP en gel desensibilizante, tiempo de aplicación del gel con
HAP) sobre la variable dependiente (sensibilidad dentaria).
In Vitro ya que la investigación se llevó a cabo mediante un estudio y observación
en el laboratorio.
3.2. POBLACIÓN DE ESTUDIO Y MUESTRA
3.2.1. MUESTREO POR CONVENIENCIA
La población en la presente investigación fueron terceros molares extraídos por razones
terapéuticas, donados y recolectados en el Centro Odontológico Dental Artist el cual es
una institución privada que se encuentra dirigido por el Dr. Roberto Chango y se
encuentra ubicado en Av. Pérez Guerrero Oe 3124PB Edificio y San Gregorio (Instituto
de diagnóstico médico) centro-norte del Distrito Metropolitano de Quito.
33
Fundada en 1534 en la provincia de Pichincha se encuentra el Distrito Metropolitano de
Quito y es la capital de la República del Ecuador, tiene a su haber 8 administraciones
zonales, con 32 parroquias urbanas y 33 rurales comprendidas en un total de 4210,83
Km2. (Anexo1)
3.2.2. SELECCIÓN Y TAMAÑO DE MUESTRA
UNIVERSO: Finito 24 unidades
MUESTREO: Por Conveniencia
El criterio de selección de muestra fue por conveniencia, tomando en cuenta el propósito
de la presente investigación para esto se ha tomado como referencia el artículo de Divya
Kunam (“Evaluation of dentinal tubule occlusion and depth of penetration of nano-
hydroxyapatite derived from chicken eggshell powder with and without addition of
sodium fluoride: An in vitro study”). (46) Se tomó 24 terceros molares se dividieron
aleatoriamente en 4 grupos cada uno de estos 4 grupos fueron conformados por 6
muestras los mismos que se codificaron numéricamente al grupo que sea asignado. (46)
3.3. CRITERIOS DE INCLUSIÓN
Terceros molares extraídos por indicaciones desconocidas al estudio.
Molares sin alteraciones de la estructura del esmalte como amelogénesis
imperfecta o hipoplasia de esmalte.
Molares libres de micro fracturas a nivel coronal.
Molares con superficies lisas sin presencia de caries, fractura o fisura en el
esmalte.
3.4. CRITERIOS DE EXCLUSIÓN
Molares con superficies que presenten dentina expuesta.
Molares que presenten erosión, abrasiones.
34
Molares con caries en superficies interproximales, vestibular, oclusal, lingual o
palatina. Molares con restauraciones
3.5. VARIABLES
3.5.1. CONCEPTUALIZACIÓN DE LAS VARIABLES
En el proyecto de investigación se determinó:
3.5.2. VARIABLE DEPENDIENTE
OBLITERACIÓN DEL TÚBULO DENTINARIO
Debido a que la hipersensibilidad dentinaria tiene estrecha relación con el área del túbulo
dentinario cuando estos tienen mayor diámetro los estímulos externos provocan que haya
un desplazamiento de fluido tubular el cual estimula las terminaciones nerviosas de la
zona pulpar y de esta manera se provoca el impulso doloroso por lo que la oclusión o
disminución del tamaño del diámetro del mismo limitaría el paso del fluido dentro de
ellos lo que desencadenaría en una disminución del impulso doloroso. (11)
3.5.3. VARIABLE INDEPENDIENTE
CONCENTRACIÓN DE HIDROXIAPATITA
La Hidroxiapatita siendo un elemento natural del propio diente éstas se integran y
remineralizan la superficie de la dentina y ocluyendo los tubulos dentinarios, reduciendo
progresivamente el número de túbulos dentinarios permeables, impidiendo la transmisión
de estímulos a las terminaciones nerviosas que se encuentran en la pulpa, por lo que se
tomó diferentes concentraciones de nHAP (0, 1, 2,3%) para valorar el sellado de los
túbulos dentinarios. (12)
TIEMPO
El Tiempo es una magnitud física fundamental, el cual puede ser medido utilizando un
proceso periódico, entendiéndose como un proceso que se repite de una manera idéntica
e indefinidamente, que permite secuenciar hechos y determinar momentos. (47)
35
Variable Definición operacional Tipo Categoría Indicador Unidad de medición
Obliteración de
Túbulos Dentinario
Disminución en el tamaño
del túbulo dentinario
el mismo limitaría el paso
del fluido dentro de
ellos lo que desencadenaría
en una disminución del
impulso doloroso.
Dependiente Cuantitativa
Diámetro de los
túbulos dentinarios
medidos con
Microscopio de
Fuerza Atómica
µm
Concentración de
Hidroxiapatita
Es el principal componente
de la fase mineral del tejido
óseo de los seres humanos,
además, es un mineral que
endurece el esmalte dental,
reduce la sensibilidad
Independiente Cuantitativa
Disminución del diámetro de
los túbulos dentinarios
Porcentaje de
nHAP
0, 1, 2, 3%
Tiempo Magnitud física que
permite secuenciar hechos
y determinar momentos
Independiente Cuantitativa Medición de túbulos
dentinarios antes y después
de la aplicación del gel
desensibilizante con NHA
Por siete días
36
3.6. METODOLOGIA
3.6.1. TECNICAS E INSTRUMENTOS DE RECOLECCION DE DATOS
Fase de estandarización
La síntesis de las nanopartículas de hidroxiapatita, la realización del gel desensibilizante
con las nanopartículas a diferentes concentraciones, además de las mediciones de los
resultados del presente estudio, se ejecutó en la Facultad de Ciencias Químicas,
Laboratorio de coloides de La Facultad de Química de la Universidad Central del
Ecuador, conjuntamente con el Doctor Pablo Bonilla quien guió y superviso cada paso a
realizarse.
Para la observación del antes, durante y después de la aplicación del gel se realizó en
el Laboratorio de Nanoestructura del Posgrado de Química con el apoyo y dirección del
Dr. Pablo Bonilla.
Fase administrativa
Para la elaboración del proyecto de investigación “Sellado de túbulos dentinarios con un
gel desensibilizante con nano-partículas de hidroxiapatita. Estudio In- Vitro” se realizó
la solicitud para la tutoría del proyecto a la Dra. Karina Farfán. (Anexo 2)
El proyecto de investigación se desarrolló en el Laboratorio de Posgrado de Química de
la Facultad de Ciencias Químicas de la Universidad Central del Ecuador (Laboratorio de
Energías Renovables) para lo cual se realizó el oficio correspondiente a la Dra. Isabel
Fierro Decana de la Facultad de Ciencias Químicas de la Universidad Central del Ecuador
para que se facilite el trabajo del investigador (Anexo 3)
La recolección de las piezas dentarias (Terceros Molares) útiles para el proyecto de
investigación se contó con el apoyo del Centro Odontológico Dental Artist ubicado en la
Ciudad de Quito y Dirigido por el Dr. Roberto Chango I. y se solicitó la firma del
consentimiento explicativo informado tanto de los pacientes donadores de piezas
37
dentarias como del Odontólogo recolector y donador de las piezas dentarios (Anexo 4y5)
en el cual se explicó los riesgos, beneficios y procedimiento a realizarse en la
investigación.
La confidencialidad de cada uno de los pacientes participantes en la investigación
posterior a la firma de consentimiento informado tanto del centro Odontológico cómo
también el de los pacientes para la extracción y donación de los terceros molares útiles
para la investigación
Fase operativa
FASE I: Recolección y conservación de las piezas dentarias
Para el proyecto se utilizó una población que está conformada por 24 terceros
molares humanos, recolectados en el Centro Odontológico Dental Artist , ubicado
en Quito, que fueron extraídos por motivos terapéuticos y que cumplen con los
adecuados criterios de inclusión.
A continuación se retiró los tejidos blandos con la utilización de ultrasonido y
curetas.
Se lavó con agua corriente y se conservó en agua destilada con timol al 2%
Figura 12 Recolección y conservación de las piezas dentarias
Fuente: Maritza Gómez B.
38
FASE II: Síntesis de la nanopartícula de hidroxiapatita
MATERIALES
Cáscaras de huevo, Ácido Nítrico concentrado, Ácido Cítrico 1M, 1M de
Hidrogenofosfato de Diamonio.
Este proyecto se llevó acabo siguiendo el método de combustión simple dado por
Sasikumar y Vijayaraghavan (46) fue adoptado para sintetizar polvo nanocristalino de
HAp de las cáscaras de huevo.
Se recogieron cáscaras de huevos y se limpiarón en agua hirviendo durante 30
min. Las conchas se secarán y luego se triturarán hasta convertirse en un polvo
fino.
Figura.13 Síntesis del polvo de cáscara de huevo
a) Cocción de las cáscaras de huevo, b)limpieza y secado de las cáscaras de huevo,
c)Molino KMI d)selección del polvo de cáscara de huevo
Fuente: Maritza Gómez B.
a
b
d c
39
El polvo se disolverá en ácido nítrico concentrado, seguido de la adición de ácido
cítrico 1M. Se añadirá hidróxido de amonio en una proporción de 1: 1 para ajustar
el pH de la solución a 9.5. La adición de 1 M de hidrogenofosfato de diamonio a
la velocidad de 1 ml / min; esta solución dio como resultado un precipitado
blanco, que se disolverá con ácido nítrico.
Figura. 14 Síntesis de la nanopartícula de hidroxiapatita
a) Se pesa el polvo de la cáscara de huevo, b) ácido nítrico y ácido cítrico c)
administración de ácido nítrico en el polvo de cáscara de huevo d)medición del pH
e)administración de ácido cítrico, f) adición de 1 M de hidrogenofosfato de diamonio,
g)medición del pH por segunda ocasión
Fuente: Maritza Gómez B.
b a c
f e
a
g
d
40
La solución se agitará a 70 ° C durante 2 h hasta la formación de un gel
transparente.
Figura. 15 Síntesis de la nanopartícula de hidroxiapatita
h) solución con ácido cítrico, j) medición de la temperatura 70º, i)precipitado color
blanco.
Fuente: Maritza Gómez B.
Fue Calentado el gel en un horno de mufla precalentado a 250 ° C produjo un
precursor de color negro.
Figura.16 Síntesis de la nanopartícula de hidroxiapatita
k) colocación de la preparación en un mortero, l) horno de mubla a 250º m) resultado
polvo de color negro
Fuente: Maritza Gómez B.
h i j
l m k
41
Este polvo de color negro fue sometido por según ocasión a un horno de mufla
a 900 ° C durante 2 h dará como resultado la formación de un polvo de color
blanco. (46)
Figura. 17 Síntesis de la nanopartícula de hidroxiapatita
n)horno de mufla a 900º o) resultado final de la nHAP
Fuente: Maritza Gómez B.
Para obtener el tamaño de las nano-partículas se lo realizará por un análisis de
dispersión de luz dinámica con el uso del equipo SZ – 100 dynamic light scattering
(DLS) system.
FASE III: Corte de piezas dentarias para recibir la aplicación del gel
desensibilizante
Una vez obtenida la muestra se dividieron aleatoriamente en 4 grupos los mismos que se
codificarán numéricamente al grupo que sea asignado, enumerados del 1 al 24 para luego
llevar a cabo el corte de las mismas, que se lo realizó de acuerdo al protocolo de Divya
Kunam(2016) con un espesor aproximadamente de 3mm.
Las piezas dentarias fueron cortadas en la unión cemento esmalte con un disco
de diamante marca Jota a baja velocidad (micromotor MTI) con refrigeración
constante durante todo el proceso.
Las raíces fueron descartadas, la superficie oclusal de cada parte de la corona se
cortaron perpendicularmente al eje longitudinal del diente para exponer la
superficie de la dentina
n o
42
Se hizo otro corte de 3 mm apical a la superficie de dentina expuesta se obtuvo
un disco de dentina de 3 mm de espesor.
Se colocó cada uno de los discos de dentina en una base de acrílico lo cual facilito
la estabilidad del mismo y facilito la aplicación del gel.
Se procedió a pulir cada uno de los discos de dentina con discos Sof-LexTM 3M
ESPE para formar una superficie homogénea y lisa la cual será confirmada
mediante la medición en el Microscopio de Fuerza Atómica (AFM).
Se procedió a dividir a los discos en 4 grupos de estudio:
GRUPO A: control, solo se le aplicará el gel desensibilizante (UltraEZ) sin nano-
partículas de Hidroxiapatita.
GRUPO B: Se le aplicará el gel desensibilizante dopado con nano-partículas de
hidroxiapatita al 1% p/p nHAP.
GRUPO C: Se le aplicará el gel desensibilizante dopado con nano-partículas de
hidroxiapatita al 2% p/p nHAP.
GRUPO D: Se le aplicará el gel desensibilizante dopado con nano-partículas de
hidroxiapatita al 3% p/p nHAP.
Se dividió a cada disco dentinario en tres sectores para realizar las observaciones
y mediciones primarias de los túbulos dentinarios en AFM.
Posteriormente fueron sometidos a un grabado ácido con la ayuda de ácido
ortofosfórico al 37% de uso dental durante 30 segundos, una vez transcurrido el
tiempo se lavó cada disco con agua destilada por 30 segundos. Con esto se simuló
una dentina sensible; se realizó la segunda medición observación y medición de
los túbulos dentinarios en AFM
43
Figura.18 Corte de piezas dentarias para recibir la aplicación del gel desensibilizante
a) disco de diamante, b)corte de las piezas con micromotor c) eliminación de la raíz de
las muestras, d) colocación de las 24 muestras en discos de acrílico, e)aplicación de
ácido orto fosfórico al 35% f) observación del túbulo dentinario en AFM
Fuente: Maritza Gómez B.
FASE IV: Preparacion del gel desensibilizante con nanopartículas de hidroxiapatita
Para la preparación del gel desensibilizante comercial (UltraEZ), gel con nitrato de
potasio al 3% con 0,25 de fluoruro de sodio, al cual se le añadió las nanopartículas de
hidroxiapatita en una concentración de 1,2,3%(p/p).
Se pesó el gel desensibilizante y se realizó los cálculos adecuados para poder
añadir la nanopartícula de hidroxiapatita al 1,2,3%.
a b c
e d
f
44
Se utilizó un mortero para obtener una sustancia homogénea durante 3 minutos,
se obtuvo una sustancia pegajosa y viscosa.
Figura.19 Preparacion del gel desensibilizante con nanoparticulas de hidroxiapatita
a)materiales para la preparación del gel con nHAP, b)cálculo de la cantidad de nHAP
en el gel desensibilizante, c) mezcla de la sustancia, d) gel dopado con nHAP
Fuente: Maritza Gómez B.
FASE V: Aplicación del gel desensibilizante en los discos de dentina
A los discos de dentina se les aplicó con un aplicador (brush) el gel desensibilizante con
nanopartículas de hidroxiapatita en toda la superficie durante 60 minutos, transcurrido
este tiempo se lavó los discos de dentina con agua destilada hasta retirar el gel
b a c
d
45
completamente, se mantuvieron en 10ml de saliva artificial sustituida a diario, este
procedimiento se llevó a cabo 1 vez al día por 7 días, al finalizar este tiempo procedimos
a medir la rugosidad de los túbulos dentinarios en el Microscopio de Fuerzas Atómicas.
Figura.20 Aplicación del gel desensibilizante en los discos de dentina
a) los cuatro grupos de estudio,b) materiales para la aplicación del gel
desensibilizante con nHAP, c) aplicación de disco en disco del gel, d) aplicación
completa a todas las muestras, f) lavado de las muestras g) conservación de los discos
de dentina en saliva artificial.
Fuente: Maritza Gómez B.
a b
c d
f g
46
Determinación de la rugosidad de túbulos dentinarios por AFM
Para la observación de microscopio se procedió a dividir a cada disco de dentina en tres
sectores (sitios de escaneo) en los cuales se analizó la medida de la rugosidad de los
túbulos dentinario.
La determinación de la rugosidad de los tubulos dentinarios se utilizó en el equipo AFM
park Systems NX10, con un área de escaneo de (10μmx10μm). En modo contacto-
intermitente (Tapping).
Figura .21Determinación de la rugosidad de túbulos dentinarios por AFM
Fuente: Maritza Gómez B.
3.7. PROTOCOLO DE ELIMINACION DE LAS PIEZAS DENTARIAS
Una vez culminada la fase experimental y recolectados los datos necesarios para el
desarrollo del proyecto los residuos fueron receptados en la FACULTAD DE
ODONTOLOGÍA DE LA UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR y bajo su
protocolo de manejo de desechos fueron clasificados y colocados en envases plásticos
rígidos y serán enviados al Servicio de Gestión Integral de Desechos Hospitalarios
(EMGIRS) la cual es una empresa pública con la que tiene convenio la Facultad de
Odontología y brinda el servicio especializado para el transporte de los desechos y así
culminar con el tratamiento y de esta manera garantizar que esta investigación es factible
y no existe riesgo ni daño al medio ambiente y garantizando también la integridad de los
47
participantes (investigador y colaboradores) ya que se tendrá un estricto manejo de
bioseguridad (Anexo6)
3.8. ANÁLISIS ESTADISTICO
Para el análisis estadístico se midió la rugosidad de los túbulos destinarios evidentes en
cada una de las imágenes escaneadas por el AFM con área de escaneo (10μmx10μm),
Para el análisis de varianza se utilizó las pruebas de ANOVA y Tukey los cuales nos
permitieron determinar que las medias se diferencian entre sí en los grupos estudiados.
Así también analizamos la influencia de factores como la adición de ácido, las distintas
muestras (los discos de dentina) y sitio de escaneo por cada disco en la determinación
del rugosidad de túbulos por escaneo de AFM, se realizó evaluaciones estadísticas de
significancia (diseño experimental multinivel) en los 24 discos.
Con este análisis se evidenció si el sitio de escaneo y los diferentes discos de dentina,
influyen en la determinación de la rugosidad de los túbulos dentinarios.
Para la eficiencia del sellado de túbulos dentinarios debido a la aplicación del gel
desensibilizante dopados con nanopartículas de hidroxiapatita al 1,2,3% fueron evaluados
a partir de la ecuación:
% oclusión de túbulos= (DTA-DTD/ DTA) x 100
En donde DTA es el diámetro de túbulos abiertos mediante el uso de acido ortofosfórico
simulando una dentina sensible y DTD es el diametro del túbulos después de siete días
de aplicado el gel desensibilizante dopado con la nHAp con diferentes concentraciones.
48
CAPITULO IV
4. ANÁLISIS DE RESULTADOS
4.1.1. NANOPARTÍCULAS DE HIDROXIAPATITA
Una vez que se obtuvo la nanopartícula de Hidroxiapatita se determinó el tamaño de las
mismas con la ayuda de DLS ( equipo SZ- 100 Dynamic light scattering(DLS) system)
obteniéndose un tamaño de 442,32nm. Podemos observar en la grafica1.
Grafica 1 Tamaño de nanoparticulas (equipo SZ-100 dynamic light scattering
(DLS) system)
Fuente: Maritza Gómez B.
4.1.2. ANALISIS DE DIÁMETRO DE TÚBULOS DENTINARIOS
Gracias a los datos obtenidos de las rugosidades de los túbulos dentinarios en el
Microscopio de Fuerzas Atómicas se diseñó una tabla de Microsoft Excel 2010 cuyos
resultados se organizaron en una base de datos en el programa Statgraphics. (Anexo 11y
12)
442,32nm
49
Grafica 2 Diagrama de Pareto: Se observa los factores que afectan a los tubulos
dentinarios
Fuente/ Elaborado por: Dr. Molina 2018.
En la gráfica 2. Diagrama de Pareto se puede observar los factores que afectan a la media
de rugosidad de túbulos dentinarios en los 24 discos de dentina, pero como sabemos la
adición de ácido tiene un efecto significativo positivo en la rugosidad del túbulo
dentinario, por lo cual a todas las muestras se les acondicionó con ácido ortofosfórico al
37% (P/P), obteniendo una rugosidad del túbulo de (117,354± 003) μm, con la adición de
ácido.
Mientras que sin la adición de ácido tiene un tamaño promedio de (36,450± 002)μm, de
esta forma se confirma que se simuló una dentina sensible, Gráfica 3.
Por otra parte, se evidencia que los factores como el sitio de escaneo y los diferentes
discos de dentina no influyen en la toma de medidas de la rugosidad del túbulo.
Grafica 3 Comparación de medias: Se observa la rugosidad de los túbulos dentinarios
con el ataque del ácido ortofosfórico
Fuente/Elaborado: Dr. Molina 2018
36,450
117,354
50,590
COMPARACION DE MEDIAS
inicial Con ácido Final
50
Mediante el Microscopio de Fuerzas Atómicas podemos evidenciar una dentina sensible
al aplicar ácido ortofosfórico al 37% (P/P).Figura
Figura.22 Disco de dentina sin y con adición de ácido observados en AFM
a) Imagen microscópica de disco de dentina donde se observa los túbulos destinarios
sin adición de ácido, b) imagen microscópica de disco de dentina donde se observa los
túbulos destinarios con adición de ácido
Fuente: Maritza Gómez B.
4.1.3. INFLUENCIA DE LA CONCENTRACION DE nHAp % EN LA
OCLUSIÓN DE TÚBULOS DENTINARIOS
Los valores de la rugosidad de los túbulos dentinarios al primer día fueron: El gel con
0% de nHAP (grupo control) fue de 39,450±0,031μm, para el gel con 1% de nHAP fue
de 39,141±0.031μm, para el gel con 2% de nHAP fue de 39,326±0.031μm y para el gel
con 3% de nHAP fue de 39,092±0.031μm por lo que de acuerdo a ANOVA (p=0,1421)
no existían diferencias estadísticamente significativas, mientras que los valores de la
rugosidad de los túbulos dentinarios después de los 7 días de aplicación del gel con nHAP
a 0, 1, 2, 3% fueron: gel 0% de nHAP 39.784±0.026μm, para el gel con 1% de nHAP fue
de 40.458±0.026μm, para el gel con 2% de nHAP fue de 41,985±0.026μm, para el gel
con 3% de nHAP fue de 43,215±0.026μm hallándose mediante ANOVA que sí existían
diferencias estadísticamente significativas (p=0,0000) tal como se aprecia en la Tabla 1
a b
51
Tabla 2 Media, Desviación estándar y test de ANOVA diámetro de los túbulos
dentinarios por concentración de nHAp
Concentración nHAP
%
Diámetro Inicial TD
μm
Diámetro Final TD μm
0 39,450 ± 0,031 39,784± 0.026
1 39,141± 0.031 40,458± 0.026
2 39,326 ± 0.031 41,985 ± 0.026
3 39,092± 0.031 43,215 ± 0.026
(p) 0,1421 0,0000
± Desviación estándar
p= significancia a través de ANOVA
Fuente/ Elaborado por Dr. Molina 2018
Se realizó además un análisis del diámetro de túbulos dentinarios sin tratamiento con gel
desensibilizante de cada una de los discos y posterior al tratamiento a los 7 días con el gel
desensibilizante obteniendo los siguientes resultados: pasta con 0% de nHAP (p=0,731)
lo que demuestra que no existe una diferencia estadísticamente significativa, de acuerdo
a la prueba de ANOVA, mientras que la tendencia fue similar entre las gel
desensibilizante con concentraciones de 1, 2, 3% de nHAP en donde sí se apreciaron
diferencias estadísticamente significativas (p<0,05) como se aprecia en la tabla 2.
Tabla 3 Media, y test de ANOVA
Diámetro de los túbulos dentinarios por concentración de nHAp
Concentració
n nHAP %
Diámetro
Inicial TD μm
Diámetro
Final TD μm
P
0 39,450 39,784 0,7314
1 39,141 40,458 0,0000
2 39,326 41,985 0,0000
3 39,092 43,215 0,0000
P = significancia a través de ANOVA
Fuente/ Elaborado por Dr. Molina 2018
52
Tomando en cuenta los valores obtenidos se realizó la prueba ANOVA la cual demostró
que existieron diferencias significativas en la rugosidad final de los túbulos dentinarios
en comparación con el porcentaje de nHAP con el gel desensibilizante por lo que fue
necesario realizar la prueba post Hoc de Tukey, cuyos resultados se presentan en la tabla
3:
Tabla 4 Media mrtodo Tukey
Concentrac
ión de
nHAP %
Diferencia Diferencia
estandariza
da
Valor
crítico
Pr > Dif. Significativo
0 vs 3 0,446 12,002 2,600 < 0,0001 Sí
0 vs 2 0,390 10,506 2,600 < 0,0001 Sí
0 vs 1 0,319 8,599 2,600 < 0,0001 Sí
1 vs 3 0,126 3,402 2,600 0,005 Sí
1 vs 2 0,071 1,907 2,600 0,230 No
2 vs 3 0,056 1,496 2,600 0,443 No
Fuente/ Elaborado por Dr. Molina 2018
Para el gel desensibilizante con 0% de nHAP se encontraron diferencias significativas
con el gel desensibilizante con 1, 2, 3% de nHAP al igual que el gel desensibilizante con
1% de nHAP tuvo diferencias significativas con el gel con 3% de nHAP, sin embargo,
no se encontraron diferencias entre el gel con 2% de nHAP vs el gel con 1% y 3% de
nHAP. Con lo que se confirma que el gel desensiblizante con nHAP tiene un efecto
positivo en el sellado de túbulos dentinarios.
Adicionalmente para la evaluación del porcentaje de disminución de diámetro de túbulos
dentinarios se realizó un análisis estadístico valorando el porcentaje de sellado de los
túbulos dentinarios por cada gel con varias concentraciones de nHAP (0, 1, 2, 3%) y se
lo hizo mediante una prueba de Fisher de análisis de significancia LDS (Tabla 6). 51
53
Grafica 4 Porcentaje de oclusión de túbulos dentinarios
Fuente/ Elaborado por Dr. Molina 2018
La gráfica 4 demostró que el gel con nanopartículas de hidroxiapatita al 3% en promedio
fue la mejor al momento de disminuir el diámetro de túbulos dentinarios con un
porcentaje de disminución del 30,31 ± 2,03 %.
54
4.2. DISCUSION
El presente estudio tuvo como objetivo la elaboración de la nanoparticula de
hidroxiapatita para ser unida a un gel desensibilizante el cual actuará en los túbulos
dentinarios sellándolos así evitando el paso de fluidos hacia el interior de la pulpa
responsable de la hipersensibilidad dentinaria.
Bahamonde Carmen (2016), obtuvo que el tamaño de la nanopartícula de hidroxiapatita
mediante el DLS de 407,3 nm en el cual el polvo sintetizado se lo elaboró con reactivos
químicos como el el Ácido fosfórico ≥ 85%, el Hidróxido de Calcio ≥ 95% y el Hidróxido
de amonio ≥ 99.98% .
En el presente estudio al polvo sintetizado se lo obtuvo mediante la síntesis de la cáscara
de huevo de pollo debido a su alto porcentaje de calcio y fósforo, éste polvo de
nanopartículas de hidroxiapatita fue analizado en el DLS (equipo SZ- 100 Dynamic light
scattering(DLS) system) obteniéndose un tamaño de 442,32nm.
Peiyan Yua, Jing Liu (2012), determinaron que el dentífrico que contiene nanopartículas de
hidroxiapatita fue significativamente mejor que el dentífrico ordinario en la oclusión de
los túbulos dentinarios con una tasa de obstrucción
En esta investigación pudimos constatar que al unir biomateriales dentales; en este caso
el gel desensibilizante con la nanopartículas de hidroxiapatita brindó grandes resultados
para la oclusión de los túbulos dentinarios.
Orchardson R GD.(1998), aportó que para evaluar el efecto del sellado de los túbulos
dentinarios se han utilizado diversos métodos los cuales pueden aplicar dispositivos útiles
para su medición de permeabilidad dentinaria como es el análisis microscópico, los
cuales nos permiten evaluar la permeabilidad de los túbulos así también la visualización
55
del sellado de los mismos que si existe reducción del diámetro del túbulo, reduce el paso
del líquido, por lo cual se podrá observar una reducción de la sensibilidad dental.
En nuestra investigación para evaluar el sellado de túbulos dentinarios se utilizó el
Microscopio de Fuerzas Atómicas AFM, el cual nos arrojó datos de rugosidad teniendo
en cuenta que a menor rugosidad existe sellado de túbulos destinarios disminuyendo en
gran porcentaje la sensibilidad dental.
56
CAPITULO V
5. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
5.1. CONCLUSIONES
Al finalizar la síntesis química a partir de cáscaras de huevo, dio como resultado
nanopartículas de hidroxiapatita de 442,32nm, lo que resultaron óptimas para su
aplicación en el gel desensibilizante.
Una vez obtenida la nanopartícula de hidroxiapatita se dopo a un gel
desensibilizante UltraEZ con el 1,2,3%de nHAP en la cual se obtuvo excelentes
resultados en el sellado de túbulos dentinarios lo que demuestra que el uso de este
gel desensibilizante con esta nanopartícula puede ayudarnos en el tratamiento de
hipersensibilidad.
Con los resultados obtenidos es este estudio in vitro y las imágenes
proporcionadas por el escaneo realizado por el Microscopio de Fuerzas Atómicas,
después de la aplicación del gel desensibilizante dopado con NHAP al 1,2,3% se
concluye que con el 3% de nHAp hubo un sellado de túbulos dentinarios
30,31±2,03%
Todos los datos que obtuvimos en este estudio proporciona una evidencia con alto
valor terapéutico en la utilización de geles desensibilizantes con nHAP como una
forma prometedora de dopar HA en los gel desensibilizantes para elaborar
productos efectivos para la hipersensibilidad dentinaria.
57
5.2. RECOMENDACIONES
Tomando en cuenta la información obtenida y recabada para esta investigación es
recomendable realizar otros estudios en los que se investigue la acción de las
nanotecnologías en la hipersensibilidad dentaria ya que esta no ocurre de manera
aislada, sino que se encuentra asociada a ciertos desgastes mecánicos como la
abrasión.
Se recomienda realizar investigaciones toxicológicos sobre la aplicación de
nanopartículas de hidroxiapatita para que posteriormente puedan ser aplicados in
vivo.
Se recomienda realizar más estudios in vitro e in vivo, sobre la aplicación de
nanopartículas de hidroxiapatita para el tratamiento de la hipersensibilidad
dentinaria y demás aplicaciones en el campo odontológico.
Es recomendable reforzar el tema de las aplicaciones de la nanotecnología en el
plan de estudios de la carrera de odontología.
Es necesaria una inmersión mayor en el campo nanodontológico ya que la
nanotecnología representa el futuro de la odontología.
58
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Jornadas de Ingeniería Clínica. 2011 Aug; 7(17).
61
ANEXOS
Anexo 1 Aprobación del Subcomité de Ética de Investigación en seres humanos
62
Anexo 2 Aceptación de Tutoría Dra. Karina Farfán
63
Anexo 3 Oficio para la Facultad de Ciencias Químicas
64
ANEXO 4 Oficio para la obtención de las piezas dentales con su correspondiente
consentimiento informado
65
ANEXO 5 Certificado de donación de piezas dentarias
66
ANEXO 6 Oficio Manejo de Desechos
67
ANEXO 7 Formulario de Consentimiento Informado Paciente
68
ANEXO 8 Acuerdo de Confidencialidad
69
Anexo 9 Certificado de sistema antiplagio URKUND.
70
Anexo 10 Abstract
71
Anexo 11 Tabla de resultados de mediciones obtenidas con y sin ácido
ortofosfórico al 37%
DISCOS SIN ÁCIDO DISCOS CON ÁCIDO
1 A1 30,149 1 A1 94,253
B1 30,337 B1 97,395
C1 32,014 C1 98,132
2 A1 20,263 2 A1 83,593
B1 20,095 B1 83,053
C1 19,836 C1 82,623
3 A1 13,007 3 A1 75,671
B1 14,219 B1 69,768
C1 13,019 C1 79,083
4 A1 41,714 4 A1 103,747
B1 42,174 B1 110,407
C1 42,088 C1 104,651
5 A1 62,659 5 A1 188
B1 62,486 B1 184
C1 62,021 C1 184
6 A1 49,456 6 A1 153
B1 49,928 B1 158
C1 50,638 C1 163
7 A1 15,342 7 A1 59,796
B1 15,762 B1 60,637
C1 15,442 C1 59,835
8 A1 64,114 8 A1 209
B1 64,358 B1 214
C1 65,032 C1 214,466
9 A1 33,231 9 A1 102,398
B1 34,191 B1 103,565
C1 35,108 C1 114
10 A1 43,984 10 A1 135
B1 44,308 B1 135.413
C1 44,204 C1 137
11 A1 54,561 11 A1 175,416
B1 54,277 B1 170
C1 54,254 C1 167
12 A1 22,438 12 A1 86
B1 22,038 B1 85,085
C1 21,887 C1 84,025
13 A1 26,412 13 A1 86,254
72
B1 26,464 B1 88,103
C1 26,758 C1 88,676
14 A1 57,962 14 A1 166,323
B1 59,351 B1 166,957
C1 59,565 C1 167
15 A1 39,203 15 A1 125
B1 38,893 B1 122,587
C1 38,781 C1 115,455
16 A1 45,195 16 A1 127,441
B1 46,086 B1 143
C1 46,476 C1 144
17 A1 16,664 17 A1 60,694
B1 17,521 B1 61,445
C1 17,675 C1 61,767
18 A1 67,914 18 A1 195
B1 68,512 B1 205
C1 68,397 C1 204.43
19 A1 69,057 19 A1 265
B1 68,734 B1 248
C1 69,689 C1 270
20 A1 27,561 20 A1 90,868
B1 28,523 B1 93,848
C1 28,159 C1 92,758
21 A1 44,703 21 A1 145,157
B1 44,978 B1 147
C1 45,055 C1 150,368
22 A1 37,802 22 A1 129
B1 38,586 B1 129,621
C1 38,704 C1 130
23 A1 51,645 23 A1 179
B1 53,583 B1 183
C1 52,889 C1 180
24 A1 19,554 24 A1 80
B1 17,781 B1 79,888
C1 20,652 C1 82,128
73
Anexo 12 Imágenes en AFM de discos con y sin ácido ortofosfórico 37%
DISCOS CON PASTA
1%
DISCOS CON PASTA
2%
1 A1 25,023 1 A1 32,048
B1 25,852 B1 32,304
C1 25,284 C1 33,188
2 A1 71,473 2 A1 65,905
B1 71,973 B1 66,436
C1 72,754 C1 66,532
3 A1 43,194 3 A1 43,001
B1 43,861 B1 42,384
C1 41,389 C1 42,19
4 A1 57,051 4 A1 51,163
B1 57,49 B1 51,519
C1 57,834 C1 51,436
5 A1 64,09 5 A1 22,123
B1 63,639 B1 24,421
C1 63,659 C1 24,897
6 A1 30,026 6 A1 73,093
B1 29,769 B1 74,037
C1 27,552 C1 73,782
DISCOS CON PASTA 3% DISCOS CON GEL 0%
1 A1 70,508 1 A1 46,324
B1 70,297 B1 45.356
C1 70,635 C1 47,081
2 A1 28,803 2 A1 33,564
B1 29,765 B1 34,453
C1 29,141 C1 32,518
3 A1 47,474 3 A1 26,987
B1 47,584 B1 27,762
C1 48,252 C1 27,081
4 A1 40,464 4 A1 58,003
B1 40,9 B1 57,678
C1 41,055 C1 55,783
5 A1 54,644 5 A1 76,432
B1 56,586 B1 75,093
C1 54,796 C1 76,765
6 A1 21,156 6 A1 63,509
B1 20,915 B1 62,899
C1 22,613 C1 63,333
74
ANEXO 14 Imágenes AFM discos antes y después de la aplicación del gel desensibilizante CON nano partículas de hidroxihapatita
24 DISCOS
.
1
2
75
3
4
76
6
5
77
7
4
7
8
78
9
10
0
79
11
12
80
13
14
81
15
16
82
17
18
83
19
20
84
21
22
85
23
24
86
