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UNIVERSIDAD TÉCNICA ESTATAL DE QUEVEDO
FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS
CARRERA DE INGENIERÍA AGRONÓMICA
Portada
Proyecto de Investigación
Previo a la Obtención del
Título de Ingeniero
Agrónomo.
TÍTULO DEL PROYECTO DE INVESTIGACIÓN:
“Evaluación in vitro de la actividad biocida de diferentes fungicidas sobre
el crecimiento radial de Moniliophthora roreri, Moniliophthora perniciosa
y Phytophthora palmivora, agentes causales de enfermedades en cacao”
Autor:
Bravo Menéndez Joel Arturo
Director del Proyecto de Investigación:
Dr. Hayron Fabricio Canchignia Martínez
Quevedo – Los Ríos – Ecuador
2019
ii
DECLARACIÓN DE AUTORÍA Y CESIÓN DE
DERECHOS
Yo, Bravo Menéndez Joel Arturo, declaro que el trabajo de investigación aquí
descrito es de mi autoría; que no ha sido previamente presentado para ningún grado o
calificación profesional; y, que he consultado las referencias bibliográficas que se
incluyen en este documento.
La Universidad Técnica Estatal de Quevedo, puede hacer uso de los derechos
correspondientes a este trabajo, según lo establecido por la Ley de Propiedad
Intelectual, por su Reglamento y por la normativa institucional vigente.
Atentamente,
____________________________________
Bravo Menéndez Joel Arturo
C.I.: 0929293645
iii
CERTIFICACIÓN DE CULMINACIÓN DEL
PROYECTO DE INVESTIGACIÓN
Certificación de Culminación del Proyecto de Investigación
El suscrito Dr. Hayron Fabricio Canchignia Martínez, Docente de la Universidad
Técnica Estatal de Quevedo, certifica que el estudiante Bravo Menéndez Joel Arturo,
realizó el Proyecto de Investigación titulado “Evaluación in vitro de la actividad biocida
de diferentes fungicidas sobre el crecimiento radial de Moniliophthora roreri,
Moniliophthora perniciosa y Phytophthora palmivora, agentes causales de
enfermedades en cacao”, previo a la obtención del título de Ingeniero Agrónomo, bajo
mi dirección, habiendo cumplido con las disposiciones reglamentarias establecidas para
el efecto.
Atentamente,
________________________________________
Dr. Hayron Fabricio Canchignia Martínez
Director del Proyecto de Investigación
iv
REPORTE DE LA HERRRAMIENTA DE PREVENCIÓN
DE COINCIDENCIA Y/O PLAGIO ACADÉMICO
________________________________________
Dr. Hayron Fabricio Canchignia Martínez
Director del Proyecto de Investigación
v
UNIVERSIDAD TÉCNICA ESTATAL DE QUEVEDO
FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS
CARRERA DE INGENIERÍA AGRONÓMICA
TÍTULO DEL PROYECTO DE INVESTIGACIÓN:
“Evaluación in vitro de la actividad biocida de diferentes fungicidas sobre el
crecimiento radial de Moniliophthora roreri, Moniliophthora perniciosa y
Phytophthora palmivora, agentes causales de enfermedades en cacao”
Presentada a la Comisión Académica como requisito previo a la obtención del título de
Ingeniero Agrónomo.
Aprobado por:
Quevedo – Los Ríos – Ecuador
2019
___________________________________
Dr. Favio Herrera Eguez
MIEMBRO DEL TRIBUNAL
_______________________________
Dr. Fernando Abasolo Pacheco
MIEMBRO DEL TRIBUNAL
______________________________________
Dra. Silvia Saucedo Aguiar
PRESIDENTE DEL TRIBUNAL
vi
AGRADECIMIENTO
Por concluir con esta investigación quiero expresar mis agradecimientos a todos los que
hicieron posibles de una u otra manera el desarrollo y culminación de la misma.
A la Universidad Técnica Estatal de Quevedo institución forjadora de profesionales
capaces para el desarrollo de un país, quien me acogió como estudiante y ahora formar
parte de ese grupo de profesionales.
A la Fundación Maquita, por el auspicio del trabajo de Investigación y a todos lo que
conformar esa institución, al Ing. Carlos Zambrano, Ing. Celso Avero, Ing. Julio Arce,
Ing. David Riera quienes hicieron posible el desarrollo de la investigación en el
Laboratorio de Innovación Maquita.
Le agradezco a mi Director de tesis, Dr. Hayron Canchignia Martínez, por sus
enseñanzas, correcciones y ayuda, lo que hizo posible la ejecución, desarrollo y
culminación de este trabajo de investigación.
A la Dra. Carmita Suárez Capello por su amistad, enseñanzas, conocimientos,
vivencias, por impartirme su experiencia y guía durante todo el proceso y desarrollo de
este proyecto de Investigación.
A los docentes Ing. Ignacio Sotomayor, Ing. Leonardo Matute, Dra. Silvia Saucedo
Aguiar, Dr. Favio Herrera, Dr. Fernando Abasolo, Dr. Daniel Vera, Ing. Cesar Varas,
Ing. Ramiro Gaibor, Eco. Flavio Ramos, Ing. David Campi, Ing. Cesar Bermeo, Ing.
Luis Llerena, Ing. Yanilla Granados, Ing. Ricardo Romero, Ing. Ángel Cedeño, Ing.
Javier Auhing.
Joel Bravo Menéndez
vii
DEDICATORIA
Agradezco al ser supremo Omnipotente
Dios en nosotros por haberme dado la vida,
misericordia, por darme la valentía de
superar en ocasiones que he querido
desfallecer y oportunidad de haber logrado
lo que he querido y ha sido su voluntad,
agradezco a Arturo Bravo, Mónica
Menéndez padres que con amor, apoyo,
dedicación, supieron guiarme y darme esa
oportunidad de culminar mis estudios
universitarios. A mi hermano César Bravo
por haberme dado ese apoyo moral y
constante.
A memoria de mi abuelo Mabilo Menéndez
por ese apoyo inicial e incondicional y guía
para el estudio de la carrera de Ingeniería
Agronómica.
Joel Bravo Menéndez
viii
RESUMEN
Una de las limitantes más importantes del cultivo de cacao (Theobroma cacao L) es la
baja productividad, cuya causa primaria es el ataque de enfermedades fungosas. La
moniliasis cuyo agente causal es el hongo Moniliophthora roreri, la escoba de bruja
causada por Moniliophthora perniciosa y la mazorca negra causada por el pseudohongo
Phytophthora palmivora. Hasta el momento, se dispone relativamente de escasos
fungicidas eficaces contra estos patógenos, este estudio tuvo por objetivo evaluar la
eficiencia in vitro de cuatro fungicidas de síntesis químicas, fosetil aluminio, hidróxido
de cobre, citrato de cobre, azoxistrobina y un extracto vegetal del árbol del té Melaleuca
alternifolia (®Timorex); todos los fungicidas se usaron en experimentos individuales
para cada patógeno, en tres concentraciones 1000, 1500 y 2000 ppm. Usando el método
de dilución en placa de agar. El hidróxido de cobre (®Koccide 2000) mostro el mayor
efecto contra los tres patógenos mostrando 100% de inhibición del crecimiento micelial
en las tres dosis. Los demás productos mostraron comportamiento diferentes para cada
patógeno. La azoxistrobina (®Quadris) y el fosetil aluminio (®Fosetil-Al 80%) también
inhibieron el 100% del crecimiento micelial de P. palmivora en las tres dosis. A su vez,
el citrato de cobre fue el menos eficiente, permitiendo el crecimiento micelial de los tres
organismos aún a la dosis más alta de 2000 ppm. Al citrato de cobre se le determinó la
dosis letal media (DL50). Un aspecto a tener en cuenta es que la esporulación de M.
roreri y P. palmivora se vieron afectadas por todos los fungicidas en estudio, con
excepción del citrato de cobre cuya inhibición de P. palmivora fue de 28.73%, 68.53%
y 98.03% para las dosis de 1000, 1500 y 2000 ppm respectivamente, el timorex permitió
esporulación de M. roreri en las dosis 1000 ppm (79.87%) y 1500 ppm (47.83%) de
inhibición. El estudio permite confirmar nuevos fungicidas eficientes contra los tres
patógenos de cacao que pueden ser incorporadas en los planes de manejo, luego de
pruebas de eficiencia en campo.
Palabras claves: Moniliophthora roreri, Moniliophthora perniciosa, Phytophthora
palmivora, fungicidas, DL50, pseudohongo, extracto vegetal.
ix
ABSTRACT
One of the most important limitations of the cocoa crop (Theobroma cacao L) is the low
productivity, whose primary cause is the attack of fungal diseases. The moniliasis
whose causative agent is the fungus Moniliophthora roreri, the witch's broom caused by
Moniliophthora perniciosa and the black cob caused by the pseudohongo Phytophthora
palmivora. So far, there are relatively few effective fungicides against these pathogens,
this study aimed to evaluate the in vitro efficiency of four chemical synthesis
fungicides, fosetil aluminum, copper hydroxide, copper citrate, azoxystrobin and a tree
plant extract of the tea Melaleuca alternifolia (®Timorex); all fungicides were used in
individual experiments for each pathogen, in three concentrations 1000, 1500 and 2000
ppm. Using the agar plate dilution method. Copper hydroxide (®Koccide 2000) showed
the greatest effect against the three pathogens showing 100% inhibition of mycelial
growth in the three doses. The other products showed different behavior for each
pathogen. Azoxystrobin (®Quadris) and fosetyl aluminum (®Fosetil-Al 80%) also
inhibited 100% mycelial growth of P. palmivora in all three doses. In turn, copper
citrate was the least efficient, allowing the mycelial growth of the three organisms even
at the highest dose of 2000 ppm. The mean lethal dose (LD50) was determined for
copper citrate. One aspect to be taken into account is that the sporulation of M. roreri
and P. palmivora were affected by all the fungicides under study, with the exception of
copper citrate whose inhibition of P. palmivora was 28.73%, 68.53% and 98.03% for
the doses of 1000, 1500 and 2000 ppm respectively, the timorex allowed sporulation of
M. roreri in the doses 1000 ppm (79.87%) and 1500 ppm (47.83%) of inhibition. The
study allows to confirm new efficient fungicides against the three cocoa pathogens that
can be incorporated into the management plans, after field efficiency tests.
Keywords: Moniliophthora roreri, Moniliophthora perniciosa, Phytophthora
palmivora, fungicides, LD50, pseudohongo, plant extract.
x
TABLA DE CONTENIDO
DECLARACIÓN DE AUTORÍA Y CESIÓN DE DERECHOS .................................... ii
CERTIFICACIÓN DE CULMINACIÓN DEL PROYECTO DE
INVESTIGACIÓN ...................................................................................... iii
REPORTE DE LA HERRRAMIENTA DE PREVENCIÓN DE COINCIDENCIA Y/O
PLAGIO ACADÉMICO ..................................................................................iv
AGRADECIMIENTO ......................................................................................................vi
DEDICATORIA ............................................................................................................. vii
RESUMEN .................................................................................................................... viii
ABSTRACT .....................................................................................................................ix
ÍNDICE DE TABLAS ....................................................................................................xiv
ÍNDICE DE FIGURAS ..................................................................................................xiv
ÍNDICE DE ANEXOS ...................................................................................................xiv
Código Dublín ................................................................................................................. xv
Introducción ....................................................................................................................... 1
CAPÍTULO I. CONTEXTUALIZACIÓN DE LA INVESTIGACIÓN
1.1. Problema de la investigación ............................................................................ 4
1.1.1. Planteamiento del problema .............................................................................. 4
1.1.2. Formulación del problema ................................................................................ 4
1.1.3. Sistematización del problema ........................................................................... 4
1.2. Objetivos General ............................................................................................. 5
1.2.1. Específicos ........................................................................................................ 5
1.3. Justificación ...................................................................................................... 6
CAPÍTULO II. FUNDAMENTACIÓN TEÓRICA DE LA INVESTIGACIÓN
2.1. Marco Teórico ................................................................................................... 8
2.2.1. El cacao ............................................................................................................. 8
2.2.2. Cacao CCN-51 .................................................................................................. 8
2.2.3. Importancia económica ..................................................................................... 8
2.3. Enfermedades de cacao ..................................................................................... 9
2.3.1. Mancha negra (Phytophthora palmivora) ......................................................... 9
2.3.1.1. Descripción Taxonómica ................................................................................ 10
xi
2.3.1.2. Ciclo de vida ................................................................................................... 10
2.3.1.3. Síntomas .......................................................................................................... 11
2.3.2. Moniliasis del Cacao (Moniliophthora roreri) ............................................... 12
2.3.2.1. Descripción taxonómica .................................................................................. 13
2.3.2.2. Ciclo de vida ................................................................................................... 13
2.3.2.3. Síntomas .......................................................................................................... 14
2.3.3. Escoba de bruja (Moniliophthora perniciosa) ................................................ 14
2.3.3.1. Descripción taxonómica. ................................................................................. 15
2.3.3.2. Ciclo de vida ................................................................................................... 15
2.3.3.3. Síntomas .......................................................................................................... 16
2.4. Control químico “Fungicidas” ........................................................................ 16
2.4.1. Clasificación de los fungicidas ....................................................................... 17
2.4.1.1. Según su modo de acción ................................................................................ 17
2.4.1.2. Según su mecanismo de acción ....................................................................... 18
2.4.2. Tipos de Fungicidas ........................................................................................ 19
2.4.2.1. Moléculas botánicas ........................................................................................ 19
2.4.2.1.1. Timorex Gold .................................................................................................. 19
2.4.2.2. Grupo químico estrobilurinas ......................................................................... 20
2.4.2.2.1. Quadris ............................................................................................................ 21
2.4.2.3. Grupo químico Cobre ..................................................................................... 21
2.4.2.3.1. Kocide® 2000 ................................................................................................. 23
2.4.2.3.2. Citrato de cobre ............................................................................................... 23
2.4.2.4. Grupo químico Fosfonatos .............................................................................. 24
2.4.2.4.1. Sinotyl 80% WP .............................................................................................. 25
2.4.3. Resistencia a fungicidas .................................................................................. 26
2.4.3.1. Resistencia de hongos a fungicidas sistémicos ............................................... 26
2.4.4. Dosis letal media (DL50) ................................................................................ 27
CAPÍTULO III. METODOLOGÍA DE LA INVESTIGACIÓN
3.1. Localización del experimento ......................................................................... 29
3.2. Tipo de investigación ...................................................................................... 29
3.3. Método de investigación ................................................................................. 29
3.4. Fuentes de recopilación de información ......................................................... 29
3.5. Materiales y equipos ....................................................................................... 29
xii
3.5.1. Material genético............................................................................................. 29
3.5.2. Material del laboratorio ................................................................................... 30
3.5.3. Equipos y reactivos ......................................................................................... 30
3.6. Fungicidas usados en el estudio ...................................................................... 31
3.7. Diseño de la Investigación .............................................................................. 32
3.8. Diseño para la evaluación de P. palmivora, M. perniciosa, M. roreri ........... 32
3.9.1. Tratamientos ................................................................................................... 33
3.10. Análisis estadístico .......................................................................................... 34
3.11. Manejo del experimento ................................................................................. 34
3.11.1. Método de aislamiento para las cepas de hongos ........................................... 34
3.11.2. Prueba del crecimiento radial .......................................................................... 34
3.11.3. Variables a medir ............................................................................................ 35
3.11.3.1. Diámetro de la cepa después de la inoculación en el medio ........................... 35
3.11.3.2 Evaluación del porcentaje de inhibición del crecimiento radial de M.roreri,
M. perniciosa y P. palmivora ......................................................................... 35
3.11.3.3. Capacidad de esporulación.............................................................................. 35
3.11.3.4. Cambios estructurales ..................................................................................... 36
3.11.3.5. Dosis letal media (DL50) ................................................................................. 36
CAPITULO IV. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
4.1. Resultados ....................................................................................................... 38
4.1.1. Determinar la capacidad biocida de los fungicidas, en el desarrollo in vitro
de M. roreri, M. perniciosa y P. palmivora. ................................................... 38
4.1.1.1. Porcentaje de inhibición de M. roreri ............................................................. 38
4.1.1.3. Inhibición de la esporulación de M. roreri ..................................................... 40
4.1.1.4. Porcentaje de inhibición de M. perniciosa ...................................................... 41
4.1.1.6. Porcentaje de inhibición de P. palmivora ....................................................... 43
4.1.1.8. Inhibición de la esporulación de P. palmivora ............................................... 45
4.1.2. Establecer la DL50 (Dosis letal media) de los fungicidas en estudio ............. 46
4.1.2.1. Dosis letal media del citrato de cobre para M. roreri ..................................... 46
4.1.2.2. Dosis letal media del citrato de cobre para M. perniciosa .............................. 46
4.1.2.3. Dosis letal media del citrato de cobre para P. palmivora ............................... 47
4.2. Discusión ......................................................................................................... 48
xiii
CAPÍTULO V. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
5.1. Conclusiones ................................................................................................... 52
5.2. Recomendaciones ........................................................................................... 53
CAPÍTULO VI. BIBLIOGRAFÍA
6.1. Bibliografía ..................................................................................................... 55
CAPÍTULO VII. ANEXOS
7.1. Anexos ............................................................................................................ 65
xiv
ÍNDICE DE TABLAS
Tabla 1. Descripción de los fungicidas usados en este estudio. ................................. 31
Tabla 2. Concentraciones de los fungicidas usados en el estudio. ............................. 31
Tabla 3. Categoría Toxicológica de los fungicidas en estudio. .................................. 31
Tabla 4. Esquema del ADEVA ................................................................................... 32
ÍNDICE DE FIGURAS
Figura 1. Ciclo de vida de la Phytophthora palmivora en Theobroma cacao L. .......... 11
Figura 2. Mazorcas de cacao infectadas por Phytophthora palmivora. ........................ 12
Figura 3. Ciclo de vida del agente causal de la monilla Moniliophthora roreri ........... 13
Figura 4. Moniliophthora roreri agente causal de la Moniliasis del Cacao. ................. 14
Figura 5. Porcentaje de inhibición de M. roreri. .......................................................... 38
Figura 6. Efecto de la actividad fungicida en el crecimiento radial de M. roreri. ........ 39
Figura 7. Porcentaje de la esporulación del hongo M. roreri ........................................ 40
Figura 8. Porcentaje de inhibición de M. perniciosa ..................................................... 41
Figura 9. Efecto de la actividad fungicida en el crecimiento radial de M. perniciosa. . 42
Figura 10. Porcentaje de inhibición de P. palmivora. ................................................... 43
Figura 11. Efecto de la actividad fungicida en el crecimiento radial de P. palmivora. 44
Figura 12. Porcentaje de inhibición de la esporulación del hongo P. palmivora. ......... 45
Figura 13. Dosis letal media (DL50) de citrato de cobre para M. roreri ...................... 46
Figura 14. Dosis letal media (DL50) de citrato de cobre para M. perniciosa ............... 46
Figura 15. Dosis letal media (DL50) de citrato de cobre para P. palmivora. ............... 47
ÍNDICE DE ANEXOS
Anexo 1. Aislamiento e incubación de los patógenos en estudio. .................................. 65
Anexo 2. Purificación de cepas de (P. palmivora, M. perniciosa, M. roreri) ................. 65
Anexo 3. Manejo del experimento, inoculación del patógeno ........................................ 66
Anexo 4. Registro de datos de los ensayos, crecimiento radial de los patógenos. .......... 67
Anexo 5. Toma de datos de la esporulación de los patógenos. ....................................... 68
Anexo 6. Tabla transformación de porcentajes a probit. ................................................. 68
file:///F:/TESIS/19-may-2019%20P.%20Investigación%20-%20CORRECIONES%20TRIBUNAL.docx%23_Toc9381247file:///F:/TESIS/19-may-2019%20P.%20Investigación%20-%20CORRECIONES%20TRIBUNAL.docx%23_Toc9381248file:///F:/TESIS/19-may-2019%20P.%20Investigación%20-%20CORRECIONES%20TRIBUNAL.docx%23_Toc9381249file:///F:/TESIS/19-may-2019%20P.%20Investigación%20-%20CORRECIONES%20TRIBUNAL.docx%23_Toc9381250file:///F:/TESIS/19-may-2019%20P.%20Investigación%20-%20CORRECIONES%20TRIBUNAL.docx%23_Toc9381251file:///F:/TESIS/19-may-2019%20P.%20Investigación%20-%20CORRECIONES%20TRIBUNAL.docx%23_Toc9381252file:///F:/TESIS/19-may-2019%20P.%20Investigación%20-%20CORRECIONES%20TRIBUNAL.docx%23_Toc9381253file:///F:/TESIS/19-may-2019%20P.%20Investigación%20-%20CORRECIONES%20TRIBUNAL.docx%23_Toc9381254file:///F:/TESIS/19-may-2019%20P.%20Investigación%20-%20CORRECIONES%20TRIBUNAL.docx%23_Toc9381255file:///F:/TESIS/19-may-2019%20P.%20Investigación%20-%20CORRECIONES%20TRIBUNAL.docx%23_Toc9381256file:///F:/TESIS/19-may-2019%20P.%20Investigación%20-%20CORRECIONES%20TRIBUNAL.docx%23_Toc9381257file:///F:/TESIS/19-may-2019%20P.%20Investigación%20-%20CORRECIONES%20TRIBUNAL.docx%23_Toc9381258file:///F:/TESIS/19-may-2019%20P.%20Investigación%20-%20CORRECIONES%20TRIBUNAL.docx%23_Toc9381259file:///F:/TESIS/19-may-2019%20P.%20Investigación%20-%20CORRECIONES%20TRIBUNAL.docx%23_Toc9381260file:///F:/TESIS/19-may-2019%20P.%20Investigación%20-%20CORRECIONES%20TRIBUNAL.docx%23_Toc9381261file:///F:/TESIS/19-may-2019%20P.%20Investigación%20-%20CORRECIONES%20TRIBUNAL.docx%23_Toc9380907file:///F:/TESIS/19-may-2019%20P.%20Investigación%20-%20CORRECIONES%20TRIBUNAL.docx%23_Toc9380908file:///F:/TESIS/19-may-2019%20P.%20Investigación%20-%20CORRECIONES%20TRIBUNAL.docx%23_Toc9380909file:///F:/TESIS/19-may-2019%20P.%20Investigación%20-%20CORRECIONES%20TRIBUNAL.docx%23_Toc9380910file:///F:/TESIS/19-may-2019%20P.%20Investigación%20-%20CORRECIONES%20TRIBUNAL.docx%23_Toc9380911
xv
Código Dublín
Título:
“Evaluación in vitro de la actividad biocida de diferentes fungicidas sobre el
crecimiento radial de Moniliophthora roreri, Moniliophthora perniciosa y
Phytophthora palmivora, agentes causales de enfermedades en cacao”
Autor: Bravo Menéndez Joel Arturo
Palabras clave: Moniliophthora roreri, Moniliophthora perniciosa, Phytophthora palmivora,
fungicidas, DL50, pseudohongo, extracto vegetal.
Fecha de publicación:
Editorial: Quevedo: UTEQ 2019
Resumen:
(hasta 300 palabras)
Una de las limitantes más importantes del cultivo de cacao (Theobroma cacao L) es
la baja productividad, cuya causa primaria es el ataque de enfermedades fungosas. La
moniliasis cuyo agente causal es el hongo Moniliophthora roreri, la escoba de bruja
causada por Moniliophthora perniciosa y la mazorca negra causada por el
pseudohongo Phytophthora palmivora. Hasta el momento, se dispone relativamente
de escasos fungicidas eficaces contra estos patógenos, este estudio tuvo por objetivo
evaluar la eficiencia in vitro de cuatro fungicidas de síntesis químicas, fosetil
aluminio, hidróxido de cobre, citrato de cobre, azoxistrobina y un extracto vegetal del
árbol del té Melaleuca alternifolia (®Timorex); todos los fungicidas se usaron en
experimentos individuales para cada patógeno, en tres concentraciones 1000, 1500 y
2000 ppm. Usando el método de dilución en placa de agar. El hidróxido de cobre
(®Koccide 2000) mostro el mayor efecto contra los tres patógenos mostrando 100%
de inhibición del crecimiento micelial en las tres dosis. Los demás productos
mostraron comportamiento diferentes para cada patógeno. La azoxistrobina
(®Quadris) y el fosetil aluminio (®Fosetil-Al 80%) también inhibieron el 100% del
crecimiento micelial de P. palmivora en las tres dosis. A su vez, el citrato de cobre
fue el menos eficiente, permitiendo el crecimiento micelial de los tres organismos
aún a la dosis más alta de 2000 ppm. Al citrato de cobre se le determinó la dosis letal
media (DL50). Un aspecto a tener en cuenta es que la esporulación de M. roreri y P.
palmivora se vieron afectadas por todos los fungicidas en estudio, con excepción del
citrato de cobre cuya inhibición de P. palmivora fue de 28.73%, 68.53% y 98.03%
para las dosis de 1000, 1500 y 2000 ppm respectivamente, el timorex permitió
esporulación de M. roreri en las dosis 1000 ppm (79.87%) y 1500 ppm (47.83%) de
inhibición. El estudio permite confirmar nuevos fungicidas eficientes contra los tres
patógenos de cacao que pueden ser incorporadas en los planes de manejo, luego de
pruebas de eficiencia en campo.
Descripción: Hojas : dimensiones, 29 x 21 cm + CD-ROM 6162
URI:
1
Introducción
El cacao (Theobroma cacao L) se produce principalmente en las regiones tropicales de
América Latina, casi el 90% de la producción total proviene de pequeños agricultores de
menos de cinco hectáreas en países como Ecuador, Colombia, Brasil y Republica
Dominicana, en el Continente Americano; Costa de Marfil, Ghana, Camerún y Nigeria, en
África e Indonesia, Malasia, Nueva Guinea, Asia y Oceanía (Franzen y Borgerhoff, 2007).
El cultivo es de gran importancia económica en Ecuador, a la actualidad existen 500.000
hectáreas cultivadas de las cuales se benefician alrededor de 100.000 familias de pequeños
y medianos productores.
Considerando el hectareaje sembrada, apenas hay un promedio de producción de poco más
de 0,5 tm/ha. La productividad se ha visto afectada por el inadecuado manejo agronómico
del cultivo y enfermedades fungosas (Hebbar, 2007). Se considera de importancia
económica las siguientes: la moniliasis causada por el hongo Moniliophthora roreri, que
afecta al fruto y causa pérdidas del 80% de la producción y es considerada la enfermedad
más destructiva del cacao (Phillips y Mora, 2003).; la escoba de bruja causada por
Moniliophthora perniciosa que afecta los tejidos en crecimiento, cojinetes florales,
debilitando la planta, además del daño directo al fruto, y la mazorca negra causada por el
pseudohongo Phytophthora palmivora, que afecta también las diferentes partes de la planta
(Ponce, 2015) y cuyo daño al fruto principalmente se ha incrementado sustancialmente en
la última década.
Es difícil cuantificar el porcentaje del daño de estas dos últimas, por lo que en Ecuador se
estima que la baja productividad de las huertas es principalmente causada por escoba de
bruja y el complejo de los tres agentes (M. roreri, M. perniciosa y P. palmivora) afecta en
promedio el 50 % de la productividad de las huertas (Suárez, 2017; Comunicación
personal). La mayoría de plantaciones cacaoteras del país son manejadas de forma
integral, incluyendo las labores sanitarias las mismas que si no se realizan a tiempo,
comprometen la producción hasta en un 90% por el ataque de patógenos (Sánchez y
Garcés, 2012). (Sánchez-Mora et al., 2011) mencionan que en la zona de Quevedo,
particularmente el 80 % de las mazorcas enfermas presentaron sintomatología de
moniliasis y el 20% restante escoba de bruja y mazorca negra.
2
Para el control de estas enfermedades se requiere de diferentes medidas de control y
técnicas adecuadas, como labores culturales que se realizan durante toda la etapa del
cultivo, controles químicos mediante la aplicación y dosificación adecuada de los
fungicidas, que permitan mantener la población de este patógeno en niveles inferiores al
umbral de daño económico (Agrios, 2005). En el caso de las plantaciones extensas, o en
periodos de alta precipitación de la enfermedad, el uso de fungicidas es necesario como
táctica de control. Sin embargo, la tendencia a incrementar prácticas de cultivo orgánico y
la seguridad ambiental, hace necesario mantenerse en alerta los fungicidas químicos
disponibles en el mercado, en consecuencia es de suma importancia probar nuevos
fungicidas de baja toxicidad que aparecen en el mercado, especialmente las que, por su
origen biológico, pudieran ser usadas en procesos de certificación “verde”, en este
contexto, se presenta el fungicida de amplio espectro de acción “®TIMOREX”. Los
productores empresariales, que dependen mayormente de tratamientos químicos, requieren
fungicidas alternativas para sus programas de aspersión anual debido al temor a desarrollo
de resistencia. Debido a este contexto aparecen nuevos fungicidas en el mercado como son
los fosfonatos y otras formas de cobre que se recomiendan para cacao sin que haya
estudios específicos para su uso y manejo.
Los productos de mayor uso al momento se basan en azoxistrobina, hidróxido de cobre,
otras formas del cobre, particularmente el óxido de cobre, que se prefiere sustituirlo por el
hidróxido (®Koccide) debido a su mayor toxicidad (categoría II) y el oxicloruro por ser
menos eficiente y requerir mayor frecuencia en las aplicaciones. En la investigación se
exploró la eficiencia in vitro de diferentes productos comerciales como fungicidas
químicos y un extracto vegetal, con el propósito de contribuir al conocimiento de nuevas
alternativas para el control de la enfermedades en cacao.
CAPÍTULO I
CONTEXTUALIZACIÓN DE LA INVESTIGACIÓN
4
1.1. Problema de la investigación
1.1.1. Planteamiento del problema
Los principales problemas fitosanitarios que presenta el cacao CCN51 es causada por
Moniliophthora roreri, M. perniciosa y P. palmivora. Actualmente, existen diferentes
moléculas de origen orgánicas, amigables con el ambiente que pueden resultar muy
satisfactoria en el control de estos patógenos, pero la falta de investigación o pruebas
específicas ha imposibilitado su uso en plantaciones, o se observa usos a-priori, sin
respaldo científico.
1.1.2. Formulación del problema
En la actualidad existen muchas moléculas fungicidas y es necesario comprobar su efecto
sobre estos hongos especializados, ampliando las alternativas de control químico en estas
plantaciones, la abundancia de productos fungicidas sin respaldo técnico que se ofrecen al
productor encarece el cultivo sin que realmente se consiga el efecto de reducir la
enfermedad. Los agentes de pudrición de las mazorcas de cacao, especialmente M. roreri
son altamente específicos, lo que significa que al alterar la biodiversidad característica de
las huertas tradicionales transformándolas en un monocultivo extensivo, el hongo puede
desarrollarse sin competencia y, en este caso, manejarlo solamente con métodos culturales
se torna más difícil. Si bien las prácticas culturales y biológicas, ayudan reducir la
infección, en el caso de epidemias por condiciones especialmente críticas, se hace
necesario aplicar fungicidas para minimizar la enfermedad.
1.1.3. Sistematización del problema
¿Los fungicidas disponibles en el mercado son suficientemente eficientes para inhibir el
crecimiento o control de patógenos de cultivo cacao?
¿Qué fungicida tiene mayor efecto como antiesporulante, para implementarlo en
programas de trabajo para reducir la diseminación de las enfermedades en las plantaciones
monocultivo extensivo de cacao?
5
1.2. Objetivos General
Evaluar el efecto in vitro de los fungicidas, en inhibición al crecimiento radial de
M. roreri, M. perniciosa y P. palmivora.
1.2.1. Específicos
Determinar la capacidad biocida de distintos fungicidas, en el desarrollo in vitro de
M. roreri, M. perniciosa y P. palmivora.
Establecer la DL50 (Dosis letal media) de los diferentes fungicidas en estudio.
6
1.3. Justificación
El uso de fungicidas es uno de los métodos de control más frecuentemente usado para el
control de diferentes patógenos. La producción de nuevos fungicidas químicos con ese fin
es continua y aunque los productores la usan a priori, no todas tienen el efecto de control
esperado; por otra parte, estas moléculas presentan ciertas desventajas ya que mientras más
específico sea el fungicida que usemos y mientras más complejo sea este organismo es más
fácil su mutabilidad, lo cual puede llegar a que este reaccione y genere así una resistencia a
estos pesticidas. Para ello se necesita tener alternativas de moléculas que minimicen el
riesgo a la generación de tolerancia, facilitando su alternabilidad en un programa de trabajo
que permita mantener la población de patógenos a niveles inferiores.
Con el auge de las certificaciones sobre todo para mercado de exportación, ha aumentado
la oferta de fungicidas disponibles y son pocos los que presentan información científica
para cacao, a pesar de incluirlo en sus recomendaciones.
Por otro lado, tanto las condiciones del cultivo, como el clima de las áreas
correspondientes han cambiado en la última década, por lo que hasta los fungicidas
tradicionales deben someterse a prueba para ratificar o rectificar recomendaciones. Los
beneficiares directos son en primer lugar los productores cacaoteros y con ellos toda la
cadena productiva. En segundo, pero no menos importante lugar está el ambiente, pues este
tipo de investigaciones apunta a un uso racional y, moderado de agroquímicos.
CAPÍTULO II
FUNDAMENTACIÓN TEÓRICA DE LA INVESTIGACIÓN
8
2.1. Marco Teórico
2.2.1. El cacao
La planta de cacao se caracteriza por crecer en climas tropicales, cálidos y húmedos,
originario de América del Sur, su nombre científico es “Theobroma cacao”. Derivándose
del griego “Theo” cuyo significado es “dios” y “Broma” que significa “Aliento”, aliento
de los dioses, según lo expresado por Espinosa y Mosquera (2012).
El cultivo de cacao se distribuye en más de 100,000 unidades productivas, en su gran
mayoría en la región litoral o costa. Hasta hace poco tiempo, el país era considerado como
productor de cacao fino de aroma y en función de esa realidad productiva, ocupa la octava
posición mundial como productor y exportador de cacao, con el 50% de la oferta que
alimenta el importante segmento del mercado (INIAP, 2009).
2.2.2. Cacao CCN-51
Luego de varias investigaciones, el agrónomo ecuatoriano Homero Castro Zurita, logró en
1965 el denominado cacao clonal CCN-51 siglas que significa Colección Castro Naranjal
(ANECACAO, 2015). Este clon proviene de una hibridación inicial entre ICS-95 x IMC-
67, habiendo procedido luego a realizar un segundo cruce entre dicho híbrido con un cacao
encontrado por él en el Oriente Ecuatoriano y denominado “Canelos”, de todos los CCN
seleccionados a Homero Castro le llamó especialmente la atención el CCN-51, ya que
reunía todas las características buscadas por él durante algunos años (Fajardo, 2013). De
acuerdo a (ANECACAO, 2015) el CCN-51 es un cacao clonado de origen ecuatoriano que
el 22 de junio del 2005 fue declarado, mediante acuerdo ministerial, una bien de alta
productividad. Con esta declaratoria, el Ministerio de Agricultura brinda apoyo para
fomentar la producción de ese tipo de cacao, así como su comercialización y exportación.
2.2.3. Importancia económica
La variedad CCN-51 se está cultivando en distintos lugares del continente americano,
como es el caso de Centro América, detectándose en otros lugares del mundo que la
variedad no se adapta a las condiciones ambientales de estos países. Esta variedad presenta
cuatro veces más producción que las variedades nativas, y con un adecuado proceso de
post cosecha de secado y fermentado, a causa de su gran cantidad de mucilago, se obtienen
resultados apetecidos por los compradores más exigentes del mundo (Rivadeneria, 2013).
9
La alta productividad característica de este clon y la facilidad para su multiplicación
vegetativa contribuyeron a su expansión en el país en plantaciones monoclonales, algunas
se extienden por más de cien hectáreas. Al momento la variedad de cacao CCN51
representa el 20% de la producción nacional (Rivadeneria, 2013). Existen
aproximadamente 16 provincias que cultivan cacao, principalmente en la costa y amazonia
(INIAP, 2012).
Al concluir el 2015 las exportaciones ecuatorianas de cacao alcanzaron un volumen total
de 260 mil toneladas métricas de cacao en grano y productos derivados, un incremento del
10% en relación al 2014. De ésta solo 236 mil toneladas métricas fueron exportadas en
grano seco, el resto correspondió a producto semielaborados. Las exportaciones de la pepa
de oro en 2015 en un 39% estuvieron destinadas a los Estados Unidos de Norte América
con 91.3 mil toneladas métricas, seguidos por Holanda con un 14% de participación
equivalente a 34 mil TM, por encima de Malasia con 9% igual a 21 mil TM, y México con
el 8% de la participación igual a 19 mil TM (ANECACAO, 2016).
El cacao ha sido objeto de explotación comercial, para la fabricación de chocolates,
industrias alimentarias, cosméticos y farmacéuticos desde tiempos de la colonización de
América (Gutiérrez et al., 2011).
2.3. Enfermedades de cacao
Las enfermedades son el factor biótico de mayor impacto en la producción de cacao en
Latinoamérica y el mundo (Rodríguez y Vera, 2015). Además de las pérdidas directas en el
cultivo, las medidas de control de enfermedades pueden representar costos del 20% o más de la
producción, dependiendo de la severidad de daño. Los productos químicos sintéticos han
representado la alternativa más común para protección de los cultivos (Falconi y Cesar, 2003)
y por lo tanto se busca aquellos más eficientes que justifiquen estos costos. Para la selección
del químico apropiado y optimizar el método de aplicación, es conveniente conocer el
patógeno y su relación con el cultivo. A continuación una breve reseña de las tres
enfermedades seleccionadas para este estudio y que requieren de tácticas especiales de lucha.
2.3.1. Mancha negra (Phytophthora palmivora)
La mazorca negra del cacao, es el factor más limitante en el cultivo de cacao en el mundo,
debido a las considerables pérdidas que origina en el rendimiento del grano en las regiones
de África occidental y central, que son responsables de aproximadamente el 70 % de la
10
producción mundial. Este impacto negativo origina pérdidas mundiales cercanas al 30 % y
muerte de un 10 % de los árboles, mermas que se pueden incrementar en presencia de
factores como la alta humedad en el suelo y en el ambiente (Rodríguez y Vera, 2015). Sin
embargo la mazorca negra se ha reportado como dos veces más destructiva y de difícil
control que la escoba de bruja (M. perniciosa) (Aránzazu, 2000), las pérdidas del 10 al
100%, han provocado el abandono de las plantaciones en algunos países (Ecuador,
Colombia, Venezuela, Costa Rica) (Krauss y Soberanis, 2001; Enríquez et al., 1982).
La infección en la mazorca se manifiesta en forma de manchas de color café oscura, que se
inicia en el borde donde generalmente se acumula agua, luego invade rápidamente toda su
superficie cubriéndola totalmente, en el interior de la mazorca la calidad del grano
disminuye o se pierde totalmente en poco tiempo (Pico et al., 2012).
2.3.1.1. Descripción Taxonómica
Reino: Chromista
Clase: Oomycota
Orden: Peronosporales
Familia Peronosporaceae
Género: Phytophthora
Especie: palmivora. (Agrios, 2002)
2.3.1.2. Ciclo de vida
Phytophthora palmivora tiene dos tipos de reproducción asexual y sexual, que producen
cuatro tipos de esporas diferentes que pueden causar infección directa o indirectamente:
esporangios, zoosporas, clamidosporas (producidos durante la reproducción asexual) y
Oospora (producidas durante la reproducción sexual). El tipo de reproducción asexual es
predominante y se inicia con la producción de esporangios sobre el tejido infectado (frutas
infectadas, hojas, tallos o raíces).
Los esporangios son capaces de germinar directamente sobre la superficie de la planta o en
el suelo, en presencia de temperaturas cercanas o superiores a los 25 °C. La baja
temperatura (15 a 20 °C) favorece la ruptura del esporangio, liberación y germinación de
las zoosporas, lo cual incrementa el nivel de inóculo (Dennis y Konam, 1994; Erwin y
Ribeiro, 1996), que actúan como un medio de diseminación del patógeno a nuevo
hospederos (Walker y West, 2007); Al llegar las zoosporas al tejido vegetal estas germinan
rápidamente y los tubos germinativos penetran la epidermis; esto ocurre en un periodo
11
Figura 1. Ciclo de vida de la Phytophthora palmivora en Theobroma cacao L.
aproximado de 48 horas (Attard et al., 2008). La colonización del tejido del hospedante
progresa y, en tejidos susceptibles, la esporulación ocurre dentro de tres a cinco días en
condiciones de ambiente favorable. (Figura 1). Phytophthora palmivora es un parásito
facultativo y requiere de estructuras de supervivencia como clamidosporas y oosporas que
le permitan sobrevivir en ausencia de hospederos (Widmer, 2010).
Fuente. Adaptado de Agrios 2005.
2.3.1.3. Síntomas
La infección puede ocurrir en cualquier parte del fruto y en cualquier etapa de su
desarrollo, pero, por lo general, se observa en los extremos de la mazorca, área donde se
acumula más agua, y en frutos maduros, que son los más susceptibles (Rodríguez y Vera,
2015).
Los primeros síntomas de la enfermedad se desarrollan bajo condiciones de alta humedad y
se manifiestan aproximadamente a las 30 horas después de ocurrida la infección, como
pequeñas manchas en la superficie de los frutos de apariencia acuosa (Figura 2). Las
lesiones necróticas de color café (pardo) se desarrollan rápidamente y en condiciones de
alta humedad entre 3 y 5 días después la aparición de los primeros síntomas. Sobre la
superficie de la lesión se puede observar la presencia de un crecimiento pulverulento poco
denso formado por el micelio y los esporangios del hongo. La lesión avanza en su interior
a la misma velocidad que progresa la lesión externa. Esta crece rápidamente y llega a
cubrir la totalidad de la superficie del fruto y los tejidos internos, incluyendo los granos, en
12
Figura 2. Mazorcas de cacao infectadas por Phytophthora palmivora. Primeros síntomas
visibles, zona central; B: síntomas de la mancha negra muy avanzada en un extremo; C:
Fuente de inoculo, aparición del signo (esporangios).
Fuente. Figura 2ª. Eleonora Rodríguez P.
un periodo aproximado de 10 a 14 días. El borde de la lesión avanza aproximadamente 12
mm por día y se caracteriza por tener límites bien definidos. En frutos de más de tres
meses, las infecciones generalmente inician en la punta o en el pedúnculo de la mazorca; y
al ser infectada, también se asocia con un fuerte olor a pescado (Vos et al., 2003).
Las mazorcas enfermas permanecen en el árbol y continúan produciendo inóculo, por un
periodo de más o menos tres años, hasta su completa momificación (pérdida de agua en los
tejidos). En condiciones de alta humedad, un fruto enfermo puede llegar a producir hasta
cuatro millones de esporangios (Rodríguez y Vera, 2015).
2.3.2. Moniliasis del Cacao (Moniliophthora roreri)
Otras de las enfermedades es la moniliasis causada por el hongo Moniliophthora roreri que
afecta hasta el 80% en la producción (Sánchez y Garcés, 2012), la moniliasis es una de las
enfermedades más destructivas del cacao restringida a 11 países latinoamericanos
(Phillips-Mora, 2006).
La enfermedad es conocida como “Moniliasis” (Colombia, Venezuela y Costa Rica) o
simplemente “Monilia” o “Monilla” (Ecuador). En el litoral se citan otras designaciones
locales como: “Mal de Quevedo” (aludiendo al área, en Ecuador, donde aparentemente,
adquirió por primera vez carácter epidémico.) y “Helada” por la aparición en ciertas
épocas; o “Ceniza” debido a la masa blanca de esporas en la superficie del fruto (Figura 3)
(Suárez y Delgado, 1993).
B A C
13
Figura 3. Ciclo de vida del agente causal de la monilla Moniliophthora roreri
2.3.2.1. Descripción taxonómica
De acuerdo con Evans et al. (1978) y Aime y Phillips-Mora (2005), la clasificación
taxonómica de M. roreri es la siguiente:
Clase: Basidiomycetes
Orden: Agaricales
Familia: Tricholomataceae
Género: Moniliophthora
Especie: roreri.
2.3.2.2. Ciclo de vida
La maduración del hongo ocurre bajo condiciones óptimas de calor y humedad, más de
25ºC y 85% de humedad relativa. Las esporas pasan de fruto a fruto tanto dentro del
mismo árbol como de árboles vecinos, mayormente con la acción del viento y con menor
influencia por el agua de lluvia y algunos insectos (FHIA, 2003).
Los conidios son las únicas estructuras, hasta ahora conocidas, capaces de causar infección
(Figura 4). Las conidias se depositan sobre el fruto, germinan si hay agua o mueren por la
radiación/desecación; éstas al germinar pueden penetrar directamente a la cáscara del fruto
(Phillips-Mora, 2006). Una de las características del patógeno es su largo período de
incubación antes de aparecer los síntomas (Johnson et al., 2008).
Fuente: AGI-DP CACAO IDEAS 2012.
14
A B
El tiempo de infección puede ser de 3 a 8 semanas, pudiendo variar según la edad del fruto,
la severidad del ataque, la susceptibilidad del árbol y las condiciones de clima,
principalmente presencia de lluvias, mientras que en frutos tiernos, en días lluviosos y
calurosos, el período de incubación se acorta a tres semanas (FHIA, 2003). Sin embargo,
Cruz (1993) relata que el período de incubación (latente) fluctúa entre 30 y 70 días.
2.3.2.3. Síntomas
La sintomatología varía dependiendo de la edad del fruto, en las primeras etapas de
crecimiento produce protuberancias y manchas de color pardo mientras que en frutos más
desarrollados las manchas cambian de pardas a marrón y a su vez el fruto se vuelve más
pesado que los frutos sanos (Figura 4) (Phillips-Mora et al., 2007). El daño externo es
caracterizado por una necrosis, deformación y pudrición en mazorcas, aunque algunos
frutos de 60 y 80 días pueden completar su desarrollo sin síntomas externos, pero con el
tejido interno necrosado. Esto conlleva a la muerte del fruto, con un color café oscuro, para
luego cubrirse de una “felpa” de color crema, que son las esporas del hongo (Johnson et
al., 2008).
2.3.3. Escoba de bruja (Moniliophthora perniciosa)
Moniliophthora perniciosa es un hongo hemibiotrófico que causa la enfermedad de escoba
de bruja en el cacao. Este hongo basidiomiceto es un taxón hermano de M. roreri, el agente
causal de la moniliasis. En conjunto, estos hongos patógenos constituyen las dos
enfermedades más devastadoras del cacao en las Américas (Pereira et al., 2008).
Figura 4. Moniliophthora roreri agente causal de la Moniliasis del Cacao. A: Signo
presente en fruto de cacao, esporulación blanquecina externa; B: conidios o esporas
de Moniliophthora roreri.
15
M. perniciosa exhibe un ciclo de vida hemibiotrófico que es paralelo a los síntomas en la
planta: un micelio biotrófico monocariótico, sin conexiones de abrazadera, se forma
después de la germinación de basiodiosporas e infecta cojines de flores, frutos en
desarrollo. En este caso, la infección causa hipertrofia, hiperplasia y pérdida de dominancia
apical, produciendo una escoba verde característica (Pereira et al.,2008).
2.3.3.1. Descripción taxonómica.
Phylum: Basidiomycota
Clase: Agaricomycetes
Orden: Agaricales
Familia: Marasmiaceae
Género: Moniliophthora
Especie: perniciosa
(Stahel) Aime y Phillips-Mora. (SENASICA, 2016).
2.3.3.2. Ciclo de vida
La infección provocada por las basiodiosporas sólo ocurre en tejidos con crecimiento
activo (vivo) (Porras y Sánchez, 1991). Existen dos fases en el ciclo de M. perniciosa. En
la primera fase, el patógeno infecta al tejido joven en crecimiento, induce hipertrofia e
hiperplasia y vive como un parásito obligado de forma intracelular. En la segunda fase, el
tejido con hipertrofia muere y el hongo cambia sus hábitos y crece como un saprófito.
Cuando las condiciones son favorables producen los basidiocarpos en los cuales se forman
las basiodiosporas (CABI, 2016).
El proceso de infección en los tejidos jóvenes, inicia cuando los tubos germinativos de las
basiodiosporas penetran a través de las estomas o directamente atravesando la epidermis.
Después de la penetración, las hifas del hongo colonizan intercelularmente el tejido. El
tiempo de incubación puede variar considerablemente (3-14 semanas), pero generalmente
es de 5-6 semanas. El hongo causa un desequilibrio hormonal, por lo que las células del
hospedante son más grandes de lo normal, particularmente las de la corteza y médula
(SENASICA, 2016).
Los tejidos con el síntoma de “escoba de bruja”, permanecen de color verde durante un
período relativamente corto. Comienzan a secarse a partir de los ápices y adquieren una
tonalidad de color café en aproximadamente 5 ó 6 semanas y luego se secan
16
progresivamente; Cuando el tejido muere de la escoba seca se forman basidiocarpos,
después de 4 semanas de incubación (CABI, 2016).
2.3.3.3. Síntomas
Este hongo se caracteriza por inducir proliferación de yemas apicales y axilares en ramas
de cacao. El hongo afecta todos los órganos de crecimiento activo principalmente los
brotes tiernos, yemas florales y frutos jóvenes, en los cuales produce hipertrofia y
crecimientos anormales causados por un desbalance hormonal inducido (Parra et al.,
2008).
Las escobas son de corta vida, al morir se tornan de color marrón y sobre las mismas se
forman los basidiocarpos, lo que constituye la etapa más peligrosa de la enfermedad
(Phillips-Mora, 2008). Las flores presentan síntomas de “flor estrellada”, ya que el
pedicelo de la flor se engrosa y los sépalos necrosados persisten dándole un aspecto de
estrella.
La producción de frutos disminuye debido al daño ocasionado por el hongo durante la
floración. En frutos jóvenes (hasta los 3 meses de edad) ocurre deformación y
engrosamiento del pedúnculo. Generalmente, las almendras afectadas se adhieren a la
cáscara y no son aprovechadas debido a que producen una masa de consistencia muy dura,
el síntoma se conoce como “mazorca de piedra” también, las almendras se pudren dentro
de la mazorca y no pueden aprovecharse (Parra et al ., 2008).
2.4. Control químico “Fungicidas”
La palabra fungicida se deriva de los términos latinos “fungus”; hongos y “caedo”; matar.
Etimológicamente, fungicida, es todo agente con habilidad para destruir organismos
fungosos; sin embargo, el término fungicida se refiere a los productos químicos usados en
la prevención y en algunos casos en la erradicación o curación de enfermedades producidas
por hongos fitopatógenos.
En otras palabras se habla de fungicida cuando la sustancia química produce la destrucción
del hongo ocasionando una acción irreversible; en cambio cuando se trata de una acción
fungistática ocurre una actividad reversible, produciendo un efecto inhibitorio temporal en
la germinación de las esporas, diferenciándose así la acción fungicida de la acción
fungistática; en la actualidad se cuenta con un amplio espectro de compuestos fungicidas,
17
los cuales pueden adaptarse a las formulaciones que satisfagan necesidades precisas. Entre
las características deseables en un fungicida se encuentran que debe ofrecer un control de
la enfermedad eficaz y consistente; no debe ser tóxico a la concentración recomendada y
no debe afectar adversamente a otras partes del ecosistema del cultivo (Ochoa, 2004).
Los fungicidas que tienen propiedades “curativas”, es decir que son activos contra
patógenos que ya han infectado a la planta, presentan mayor riesgo a desarrollar
resistencia. Un patógeno resistente es menos sensible a la acción del fungicida, haciendo
que éste pierda eficacia o peor aún, sea inefectivo. Estos son capaces de penetrar la planta
y eliminar selectivamente los hongos invasores. Debido a que el modo de acción de estos
fungicidas es tan específico, cualquier pequeño cambio en la genética de los hongos,
pueden superar o escapar a su mecanismo de acción y las poblaciones del patógeno pueden
tornarse resistentes en aplicaciones futuras (McGrath, 2004).
El empleo de plaguicidas sintéticos ha permitido de forma relativamente rápida y efectiva
controlar el problema, pero esta efectividad está unida a efectos desfavorables como son
afecciones sobre la fauna benéfica, contaminación ambiental y el desarrollo acelerado de
resistencia a aquellos de mayor uso (Portugal, 2012).
El uso de fungicidas químicos sigue ocupando el primer lugar en el control de
enfermedades, seguido por la rotación de estos con productos biológicos, los cuales han
dado buenos resultados en el control de enfermedades en los cultivos, citado por Gaviria et
al.,(2013) de Hincapié y Saldarriaga, (2009).
La aplicación de funguicidas es el método más utilizado en la actualidad, la eficiencia del
producto depende de la manera de aplicación, dosis, época del año y el modo de acción del
producto (Gonzaga, 2010). La selección de fungicidas efectivos contra M. roreri, M.
perniciosa y P. palmivora podría dar resultados favorables (González et al.,1983) y si se
usan de manera eficiente, pueden ser adoptados en el control de las enfermedades en
cacaotales productivos.
2.4.1. Clasificación de los fungicidas
2.4.1.1. Según su modo de acción
Contacto: De acuerdo a McGrath (2004) los fungicidas de contacto (también llamados
protectores) permanecen en la superficie de la planta, esto son a su vez potencialmente
18
fitotóxicos (tóxicos a la planta) y pueden dañar la planta si se absorben. La mayoría de los
fungicidas se usan como protectante debido a que forman una barrera protectora en la
planta, estos actúan en sitios múltiples, debido a que infieren en procesos metabólicos del
hongo, además de afectar la producción de energía o ATP e inhiben la respiración (Patiño
y Rodríguez, 2001)
Sistémico: Agrios (2005) indica que las plantas absorben este tipo de fungicidas a través
de su follaje o raíces, y los translocan en sentido ascendente y por vía interna a través de su
xilema. Por lo general, los fungicidas sistémicos son translocados en sentido ascendente en
la corriente de transpiración y pueden acumularse en el borde de las hojas, mientras que su
translocación en sentido descendente y a través del floema es bastante raro o no se lleva a
cabo. Cabe mencionar que no son translocados hacia nuevas zonas de crecimiento.
Casi todos los fungicidas sistémicos muestran su acción al inhibir varias etapas específicas
del metabolismo de los hongos, como resultado, al cabo de algunos años después de haber
introducido alguno de esos compuestos, aparecen nuevas cepas de esos hongos, que son
resistentes a cada fungicida sistémico. Razón por la que se debe dejar de utilizar, después
de que ha aparecido alguna cepa del patógeno que sea resistente a él, o del por qué debe
utilizarse combinado con algún otro fungicida de contacto de amplio espectro bajo varios
métodos de aplicación (Agrios, 2005).
2.4.1.2. Según su mecanismo de acción
Los fungicidas “matan” a los hongos dañando su membrana celular, inactivando enzimas o
proteínas esenciales o interfiriendo con procesos claves tales como la producción de
energía o la respiración. Otros impactan rutas metabólicas específicas como son la
producción de esteroles o quitina. Por ejemplo, el grupo a base de fenilamida, inhiben la
función de la polimerasa del ARN en oomicetos, mientras que los benzimidazoles inhiben
la formación de polímeros de beta tubulina usados por las células fungosas durante su
división nuclear. El modo de acción del fungicida determina cuales hongos serán afectados
y que enfermedades pueden ser controladas mediante su uso y aquellos con modos de
acción diferentes son necesarios en un programa de manejo de enfermedades para retardar
el desarrollo de resistencia (McGrath, 2004).
Melgarejo (2011), define al mecanismo de acción de este tipo de producto, como el efecto
directo que hace el fungicida sobre la biología del microorganismo o en la reacción
19
bioquímica y biofísica que provoca un cambio fisiológico o la muerte del hongo. Aunque
varios mecanismos son desconocidos o se están investigando, podemos agruparlos en
cuatro tipos básicos de como los fungicidas ejercen su acción: Inhibición del metabolismo
energético, interferencia con la biosíntesis, interferencia con la estructura celular, actividad
multisitio
2.4.2. Tipos de Fungicidas
2.4.2.1. Moléculas botánicas
Existen determinadas plantas que constituyen una alternativa natural para el control de las
diferentes plagas que causan daños a cultivos de gran importancia económica, ofreciendo
seguridad para el medio ambiente (Ortiz et al., 2009). El empleo de estos plaguicidas
botánicos dentro de los Programas de Manejo Integrado de Plagas (MIP), ha permitido
mostrarlos como una alternativa de control eficaz, económica, y sana para el medio
ambiente (Vázquez, 2006).
Por otra parte, los plaguicidas naturales obtenidos de plantas, más conocidos y utilizados a
nivel mundial, son aquellos para el control de insectos. En cambio la información referente
a extractos vegetales para el control de las enfermedades fúngicas y bacterianas es mucho
más escasa, debido principalmente a que los cambios son menos perceptibles y por lo tanto
más difíciles de estudiar (Ortiz et al., 2009).
Las moléculas botánicas ofrecen una solución más sostenible para el control de plagas que
las alternativas sintéticas. A medida que los plaguicidas químicos se retiran debido a
problemas de resistencia o porque ya no son comercialmente viables, surge una
oportunidad para soluciones bio racionales (González, 2015).
Los plaguicidas botánicos no presentan los problemas de residuos que son motivo de gran
preocupación para los consumidores que exigen la aplicación de productos ecológicos a los
productos alimenticios (González, 2015). Entre estos últimos ya hay algunos que se
expenden comercialmente, como es el caso del fungicida natural de amplio espectro que
tiene como ingrediente activo el extracto de la planta del té Melaleuca alternifolia.
2.4.2.1.1. Timorex Gold
Composición:
20
Aceite del árbol del té (Melaleuca alternifolia) 222,5 g/l
Es un fungicida natural, biológico meso-sistémico que actúa en forma preventiva, curativa
y antiesporulante, con un amplio espectro de acción, mediante la inhibición del desarrollo
de la germinación de esporas, inhibición del crecimiento del micelio y lesión expansiva;
inhibición en la producción de esporangios, mediante supresión y erradicación de colonias
de los patógenos presentes en los frutos y hojas (Syngenta, 2014).
El principal mecanismo de acción es la ruptura de la membrana y pared celular, aumentado
la permeabilidad de la membrana del hongo fitopatógeno, causando pérdidas del
citoplasma y un desequilibrio osmótico, a su vez altera la estructura de las mitocondrias
afectando a la respiración celular y por ende la producción de energía del hongo (Stockton,
2018).
2.4.2.2. Grupo químico estrobilurinas
Las estrobilurinas son compuestos aislados a partir del hongo Strobilurus tenacellus,
causante de la pudrición de la madera. El descubrimiento de estos compuestos llevó a los
científicos a aislar y producir estrobilurinas sintéticas, alterando químicamente el
compuesto para que sea capaz de tolerar la luz solar actualmente las estrobilurinas son una
clase importante de fungicidas sistémicos y de contacto de amplio espectro de acción
(Intagri, 2015).
Los dos ingredientes activos más conocidos de fungicidas de la clase estrobilurina son: el
azoxystrobin y el piraclostrobin. La actividad de estos dos fungicidas está dirigida contra:
Ascomycetes, Basidiomicetos y Oomycetes. Son reconocidos como fungicidas con acción
preventiva, curativa, translaminar y loco sistémica. Este grupo de fungicidas actúa de dos
formas fundamentales, controla los patógenos causantes de enfermedades en las plantas,
estudios recientes de varios investigadores, entre ellos el Dr. Below, coinciden que las
estrobilurinas tienen un efecto positivo sobre los procesos fisiológicos de las plantas, es
decir, actúan como bioestimulantes en el metabolismo vegetal (Intagri, 2015).
Las estrobilurinas son un grupo de fungicidas que inhiben la respiración mitocondrial
bloqueando el sitio Qo1 (sitio de oxidación de quinonas en la membrana interna de la
mitocondria), del complejo enzimático citocromo bc1 (Complejo III); ésta inhibición
bloquea la transferencia de electrones entre el citocromo b y el citocromo c1 con lo cual, se
provoca una diferencia en la producción de energía en las células del hongo, deteniéndose
21
la producción de ATP (Bartlett et al., 2002). Las estrobilurinas tienen una particular
importancia contra los tres grandes grupos de patógenos (hongos ascomicetes o
basidiomicetes y los pseudohongo u oomycetes); sin embargo, estos fungicidas varían en
sus niveles de efectividad y no todos los fungicidas pueden dar altos niveles de eficiencias
contra estos grupos de patógenos (Bartlett et al., 2002)
2.4.2.2.1. Quadris
Composición:
Azoxistrobin 480 g/l
Grupo químico Estrobilurina.
Es un fungicida sistémico de categoría toxicológica III ligeramente peligroso, franja azul,
de acción preventiva, que al ser aplicado en las hojas, es absorbido presentando
movimiento translaminar y un ligero movimiento a través de las nervaduras de la hoja, vía
xilema (Consultado de Syngenta, 2018). Actúa suprimiendo la germinación de esporas e
impide el desarrollo micelial (Calva, 2016).
Azoxistrobin es considerado un producto de amplio espectro, sin embargo su efectividad
biológica muchas veces es limitada por la deficiente actividad translaminar que es
característico de este grupo de fungicidas (Barlett, 2011).
Evaluaciones realizadas sobre el crecimiento radial en M. roreri con el fungicida
Azoxistrobina demostraron un control de un 96% con una concentración de 1250 mg/L e
inhibió un 100% la germinación de esporas con 450 mg / L. a nivel in vitro, lo que
demuestra que el azoxistrobin puede ser incorporado en programas de manejo integrado de
la enfermedad y del cultivo. (Torres et al., 2013).
La diferenciación del grupo de oomicetos se manifiesta por su menor susceptibilidad a este
tipo de fungicidas. Para un mayor control del fungicida azoxistrobin sobre el micelio de P.
capsici, P. citrophthora, y P. parasítica se necesita una concentración superior a 1000g/ml:
la evaluación de la inhibición del crecimiento del micelio en presencia de fosetil-Al, fue a
favor de este último, mayor en comparación con azoxistrobin (Matheron y Porchas, 2000).
2.4.2.3. Grupo químico Cobre
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La humanidad ha aprovechado las propiedades antimicrobianas inherentes al cobre desde
el inicio de la civilización. Antes que se conociera que los microorganismos existían, los
ciudadanos del Imperio Romano usaban el cobre para mejorar la higiene pública. Se dieron
cuenta que el agua transportada a través de este material era segura de beber y que los
utensilios para cocinar ayudaban a prevenir enfermedades. El cobre como fungicida es uno
de los recursos clásicos en agricultura, siendo de los pocos productos (junto con el azufre)
de origen mineral autorizados en agricultura ecológica. Además, es un nutriente necesario
para el desarrollo de los cultivos. Como micronutriente para las plantas este mineral
interviene absorbido por las raíces en forma de ión Cu2+, entre otras funciones, en la
biosíntesis de clorofila proceso fundamental de la vida vegetal. Como fitosanitario el cobre
se ha utilizado desde las primeras formulaciones de sulfato de cobre para proteger las
semillas de trigo en su proceso de germinación frente al ataque de hongos patógenos en el
siglo XVIII hasta nuestros días (Novasys, 2015).
Es un protector de contacto, sus aplicaciones forman una lámina o película superficial que
evita que las esporas de los hongos y las bacterias se establezcan y se desarrollen. El cobre
se disuelve en una pequeña proporción y los iones Cu2+ son absorbidos por contacto por
patógenos que intentan establecerse en las plantas en la etapa de germinación de las
esporas. Entonces el Cu2+ sustituye a otros metales esenciales para la vida de los
patógenos en cantidades infinitesimales produciendo su intoxicación y muerte (Novasys,
2015).
La acción fungicida y bactericida de los compuestos insolubles de Cobre, se basa en la
liberación lenta y constante del ion Cobre (II) o Cu2+ en contacto con el agua. Actúa
bloqueando los grupos funcionales de la enzimas, desnaturaliza las moléculas de proteínas,
interrumpe la función de las enzimas interfiere los sistemas de transporte de energía en el
patógeno (acción multisitio) (Iqvagro, 2017 ).
Recordando un poco de historia en 1880, llegó a Europa procedente de América el mildiu
de la vid (Plasmopara viticola), esta enfermedad causó daños devastadores en todos los
viñedos de Francia. En ese momento, los fungicidas azufrados, los únicos empleados hasta
entonces para el control de enfermedades de origen fúngico, no fueron eficaces. De un
modo accidental, pero como resultado de la observación, Millardet reparó en que ciertas
cepas embadurnadas con una mezcla de sulfato de Cobre y cal, distinguibles por su
tonalidad azulada, no contraían la enfermedad. A partir de esta combinación se desarrolló
la fórmula del que fue el primer compuesto de síntesis química, el sulfato cuprocálcico o
23
también llamado caldo bordelés, marcando así un hito histórico en la lucha fitosanitaria.
Desde entonces y hasta hoy, se han ido sintetizado otros compuestos cúpricos y
formulaciones más eficaces y valiosos para los agricultores de todo el mundo (Iqvagro,
2017 ).
2.4.2.3.1. Kocide® 2000
Composición:
Hidróxido de cobre 538g/kg
Grupo químico cúpricos
Es un fungicida-bactericida cúprico de contacto categoría toxicológica III, ligeramente
peligroso de franja azul, de contacto y de amplio espectro, seguro para el medio ambiente,
aceptado por la agricultura orgánica y de altísima actividad fitosanitaria. Gracias a su
nueva formulación de gránulos dispersables en agua, asegura una correcta aplicación del
producto. Tiene una acción preventiva, protectora y de contacto sobre bacterias y hongos
inferiores y menos efectivo en superiores. Su actividad la ejercen fundamentalmente
durante la etapa de germinación de las esporas. Los fungicidas cúpricos como el hidróxido
de cobre, por su mecanismo de acción multisitio no específico poseen bajo riesgo para el
desarrollo de resistencia (Kumar et al., 2007).
Resultados obtenidos por (Gaviria et al., 2013) demostró que el fungicida comercial
Kocide® 101 (hidróxido de cobre) en la inhibición del crecimiento micelial de C.
gloeosporioides y C. acutatum, en las tres dosis (1230; 2460; 3690 ppm) fueron 100%
efectivas para ambas cepas. Estudios realizados por Macías (1977) en Costa Rica indican
que utilizaron Kocide, para el control de Phytophthora sp, realizaron aplicaciones
mensuales, en dosis de 3 kg/ha a toda la planta. Los productos a base de cobre siguen
mostrado la mayor efectividad en el control de la enfermedad (Sánchez et al., 2003).
2.4.2.3.2. Citrato de cobre
Composición:
Sulfato de cobre + ácido cítrico 247.0 g/l
Grupo químico cúprico
Es un bactericida y fungicida sistémico, de acción preventiva y curativa contra una amplia
gama de enfermedades bacterianas y fungosas. Su proceso de fabricación exclusiva
24
convierte las moléculas de cobre en absorbibles por el follaje, transportándolas en forma
sistémica translaminar a los tejidos de la planta dándole efectiva protección contra el
ataque de hongos y bacterias. El citrato de cobre inhibe la germinación del estado
vegetativo de los hongos y destruye la pared celular de las bacterias (Maquita, 2018).
2.4.2.4. Grupo químico Fosfonatos
Las propiedades fungicidas de los fosfonatos fueron descubiertas por los científicos
franceses durante los años setenta, seleccionaron varias sustancias químicas para
determinar sus propiedades fungicidas cuando descubrieron que las sales de fosfonato eran
efectivas para controlar enfermedades causadas por oomicetos (Phytophthora,
Plasmopara, Pythium y otros). Poco después de este descubrimiento, el fosetil-Al se
formuló con el nombre comercial Aliette y se lanzó para uso comercial (Landschoot,
2016).
En el sentido más amplio, el término fosfonato describe cualquier compuesto que contenga
un enlace carbono a fósforo. Más comúnmente, se usa para describir productos hechos de
sales o ésteres del ácido fosforoso (HPO (OH) 2). El ácido fosfórico (HPO (OH) 3) cuando
se mezcla con agua, forma un ácido fuerte llamado ácido fosfónico. Este ácido es
demasiado fuerte para ser utilizado en las plantas y debe combinarse con otros productos
químicos para elevar el pH de la solución y disminuir el potencial de daño a la planta. Un
medio para reducir la acidez del ácido fosfónico es neutralizarlo con una sal alcalina;
típicamente hidróxido de potasio (KOH). La solución resultante contiene sales mono y di
potásicas de ácido fosforoso (a menudo denominado fosfito de potasio) y es el ingrediente
activo de varios fungicidas de fosfonato. Los fungicidas y fertilizantes de fosfonato no
deben confundirse con los fertilizantes derivados de fosfatos como el fosfato de amonio y
el superfosfato triple. A pesar de que los compuestos de fosfonato y fosfato son muy
similares químicamente, difieren significativamente en cómo actúan en las plantas y los
hongos. El fosfato (HPO 4 = H2 PO 4) es absorbido por las plantas e incorporado a las
células donde forma una importante molécula que produce energía (ATP) y los
componentes estructurales de las membranas celulares y el ADN. Es esencial para el
crecimiento de las raíces, la fotosíntesis y la respiración en las plantas. El fosfato no tiene
un fuerte efecto directo sobre las enfermedades, aunque las plantas con deficiencia de
fósforo probablemente sean más susceptibles a ciertas enfermedades que las plantas con
suficiente fósforo (Landschoot, 2016).
25
Los fungicidas y fertilizantes de fosfonato son absorbidos por las plantas e incorporados en
las células como iones de fosfito (H2PO3). El hecho de que este ion tenga un átomo de
oxígeno menos que el fosfato significa que no actúa de la misma manera que el fosfato en
las plantas. Aunque el ion fosfito puede ser transportado a las células vegetales, no parece
estar involucrado en ninguna fase del metabolismo del fósforo (producción de ATP,
fotosíntesis o respiración). Con el tiempo, el fertilizante de fosfonato se puede convertir
por bacterias en fosfato en el suelo, donde las plantas pueden absorberlo y metabolizarlo.
Esta conversión puede tomar varias semanas y no se cree que sea un medio muy eficiente
de suministro de fósforo a las plantas en comparación con los fertilizantes de fosfato. Los
iones de fosfito tienen efectos fungitóxicos directos sobre ciertos patógenos de plantas, un
beneficio que no se encuentra con el fosfato (Landschoot, 2016).
2.4.2.4.1. Sinotyl 80% WP
Composición:
Fosetil Aluminio 80% 800g/Kg
Grupo químico Organofosfonatos
Es un fungicida sistémico de categoría toxicológica II moderadamente peligroso de franja
amarilla que se trasloca en forma ascendente (xilema) y descendente (floema) controlando
las enfermedades de la raíz de los nuevos brotes que se forman después de la aplicación
(Melgarejo, 2011). Controla enfermedades producidas por Oomicetes, en particular Mildiú,
Phytophthora y Pythium, además estimula los medios naturales de defensa de la planta
(fitoalexinas) frente a posibles ataques de enfermedades. Con capacidad de rápida
penetración y acción preventiva y curativa. Su mecanismo de acción es la inhibición de la
germinación de esporas, bloquea el desarrollo del micelio y la esporulación así, se ha
comprobado que impide la formación de esporangios, oosporas y clamidosporas (Bayer,
2014).
Después de la inoculación, cuando el patógeno está iniciando la infección, al aplicar fosetil
aluminio, se inicia la síntesis de glóbulos fenólicos dentro de la célula. Estos glóbulos,
colectados luego de un estrato osmiofilico, protegerán la célula de la planta contra la
penetración del patógeno y posteriormente rodea y destruye la célula del hongo. Gracias al
modo de acción de este producto que involucra un mecanismo fisiológico complejo, para
26
posibilidad de aparición de una raza de hongos resistentes a fosetil aluminio es muy
improbable (Melgarejo, 2011).
La acción del fosetil-aluminio se postula que puede ser indirecta activando los mecanismos
de defensa de la planta, o bien, directa a través de su transformación en ácido fosforoso,
compuesto que ha demostrado tener efecto sobre diferentes especies de Phytophthora y
Pythium (Pinto, 1990).
2.4.3. Resistencia a fungicidas
La resistencia de los patógenos se define como la reducción de la sensibilidad a los
fungicidas, y como consecuencia la pérdida de capacidad biocida del producto para dichos
hongos. (Guzmán y Alarcon, 1997). La resistencia ocurre cuando naturalmente se genera
mutaciones genéticas que permiten al patógeno resistir y sobrevivir los efectos de los
productos químicos. Si se usa continuamente el mismo plaguicida, los organismos
resistentes se reproducirán y los cambios genéticos que puedan causar la resistencia serán
transferidos de los progenitores a las futuras generaciones (FAO, 2012).
2.4.3.1. Resistencia de hongos a fungicidas sistémicos
Según las investigaciones de Carmona y Sautua (2017), con aparición de los fungicidas
sistémicos modernos, la agricultura obtuvo una nueva arma en el control de hongos
fitopatógenos. Entretanto, a medida que el hombre mejoró sus estrategias de control,
también los patógenos pasaron por alteraciones genéticas que los han tornado resistentes a
algunas moléculas químicas. Se conoce (FAO, 2012) que el uso de plaguicidas sistémicos
más que de los de contacto puede apresurar el desarrollo de la resistencia.
Con la introducción de los fungicidas sistémicos la inducción de resistencia ha aumentado
considerablemente. En algunos casos, dos años después del uso de un fungicida en campo
puede llegar a ser detectada la resistencia al mismo. La mayoría de los grupos nuevos han
sido seriamente afectados, con excepción de los morfolínicos, fosetil y triciclazole. Entre
los fungicidas utilizados actualmente, los más afectados por la resistencia han sido los
Benzimidazoles, las acilalaninas y algunos triazoles (Carmona y Sautua, 2017).
27
2.4.4. Dosis letal media (DL50)
Los químicos son capaces de producir en un patógeno lesiones estructurales o funcionales
e incluso provocar la muerte”. Sin embargo, potencialmente casi todas las sustancias
conocidas pueden provocar daño y/o la muerte si están presentes en el microorganismo en
una cantidad suficiente. La dosis correcta es la que diferencia a un veneno de un remedio.
No es posible, por tanto, clasificar a las sustancias químicas como inocuas y tóxicas, sin
embargo, se han creado grados de toxicidad, basados en la DL (dosis letal), DL 50 (dosis
letal 50), que poseen un cierto valor práctico (García et al., s.f.). Los estudios de toxicidad
que se realizan para evaluar una sustancia, comprenden la determinación de la Dosis Letal
50% (DL50) del producto y la caracterización de los cuadros producidos en toxicidad
aguda y cónica. En ellos se trabaja con distintas proporciones de la DL50 durante un
período determinado de vida útil de la especie que se trate. El valor de DL50 es el más
representativo de la toxicidad aguda de una sustancia, es decir: "aquella dosis que origina
la muerte del 50% de los organismos" citado por Cubillos et al., (1999) de Jurado (1989).
En el caso de semillas, la DL50 corresponde a la cantidad de radiación absorbida con la
cual sobrevive 50 % de la población que ha sido expuesta, proporción que se considera
como el rango donde se favorece la aparición de mutaciones útiles en los programas de
mejoramiento genético (Morela et al., 2002).
En el caso de plántulas, la DL50 o dosis reductiva media (GR50) se determina cuando un
carácter manifiesta una disminución de 50 % en su expresión con respecto al tratamiento
testigo, pues la radicación absorbida provoca cambios en el ADN y origina mutaciones
somáticas, mismas que causan alteraciones en la fisiología de la plántula (González et al.,
2007).
CAPÍTULO III
METODOLOGÍA DE LA INVESTIGACIÓN
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3.1. Localización del experimento
El trabajo de investigación se realizó en el Laboratorio de Innovación Agrícola de la
Fundación Maquita, ubicada en el km 3 vía Santo Domingo, del cantón Buena Fe de la
provincia de los Ríos, sector Limones cuyas coordenadas geográficas son 0°50'56.3" de
latitud Sur y 79°29'21.5" de longitud occidental, a una altura promedio de 103 msnm.
3.2. Tipo de investigación
La investigación es de tipo experimental, implementando un ensayo que determino el
efecto de sensibilidad a fungicidas sobre el crecimiento radial de patógenos de cacao como
M. roreri, M. perniciosa y P. palmivora en diferentes dosis.
3.3. Método de investigación
La metodología empleada para resolver los diferentes objetivos planteados es el método
deductivo, partiendo entonces de la información de diferentes fuentes sobre los fungicidas
usados en plantaciones de cacao, y el uso de diferentes dosis para el control de M. roreri,
M. perniciosa y P. palmivora.
3.4. Fuentes de recopilación de información
Dentro de esta investigación se utilizó información recopilada de fuentes primarias a través
de la observación directa mediante la medición de las variables, así como de información
secundaria bibliográfica de libros, revistas, publicaciones, etc.
3.5. Materiales y equipos
Equipos y materiales que se utilizaron en el desarro