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UNIVERSIDADE CATÓLICA DE GOIÁS
Biotecnologia
Prof. Ricardo Goulart
DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA
TÓPICOS EM BIOTECNOLOGIABIO 1320
CONSIDERAÇÕES GERAIS
• Informação Genética
DNA
RNA
PROTEÍNA
“Nuclear”
Transiçã
o “Citoplasmáti
ca”
Códon Trinca
UCU CCG AUG CGU GAU GGG...
CONSIDERAÇÕES GERAIS
• DNA
Transcrição
RNA
• Códon
Aminoácido
Códon Aminoácido
UCU .......... Serina
CCG .......... Prolina
AUG .......... Metionina
CGU .......... Arginina
GAU .......... Glutamina
CGG .......... Arginina
• Conjunto de Aminoácidos
PROTEÍNA
Tradução
BIOTECNOLOGIA
• Multidisciplinar
- Engenharia- Genética
Plantas e animais com características desejáveis, cultura de células e de tecidos, marcadores
genéticos, produção de antibióticos,...
É o conjunto de conhecimentos técnicos e métodos, de base científica ou prática, que permite a utilização direta ou indireta de organismos ou seres vivos como parte integrante e ativa do processo de produção industrial de bens e serviços
BIOTECNOLOGIA
TRADICIONAL x MODERNA
BIOTECNOLOGIA
• Tradicional- Fermentação
6000 a.C. – bebidas alcoólicas – grãos cereais
Sumérios
Babilônios
2000 a.C. – fermento – cerveja e pão Egípcio
s
• Moderna- Maior escalaKornberg 1967 – ponto de partida – síntese de
DNARevolução genética – novas técnicas de manipulação genética / tecnologia do DNA recombinante
BIOTECNOLOGIA
• Tradicional
- Seleção de organismos – caract. Desejáveis / cruzamento- + tempo – transferências de genes NÃO desejáveis
• Moderna- Transferência APENAS de genes desejáveis- Doador – espécie diferente- + preciso, + rápido e + eficiente
HISTÓRICO – Eventos Importantes
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1943
1944
1953
1961
-66
1973
1975
1988
1990
1996
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2000
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1982
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1956
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do
DN
A
MANIPULAÇÃO GENÉTICA
• Técnica DNA Recombinante- Novos organ. – características não encontradas
natureza - Expressão DNA exógeno – espécies diferentes
Transformação direta
Biobalística
Transfecção
Transformação indireta
Vetores
Plasmídeo
Enzimas de Restrição
- 1953 – Restrição crescimento de fagos- Presença de endonucleases
- Metilação (Adenina/Citosina) DNA bact.- Degradação DNA viral
Enzimas de Restrição
- Sítio de reconhecimento – geralmente palindrômico
ARARAARARA
OMO
OMO
ANA
ANA
- Reconhecem de 4 a 8 pb- Cortes com extremidades abruptas / coesivas
- Nomenclatura: 1ª letra – Gênero / 2ª3ª - Espécie- Clonagem molecular - ~ 1.073 enzimas diferentes- Isolamento DNA – separado por Eletroforese
Enzimas de Restrição
Eletroforese
- Conhecida desde 1930- Difundida 1950-1960- Movimentação de moléculas – campo elétrico- Matriz – Agarose / Poliacrilamida- Separa proteínas – carga elétrica / peso molecular- Separa ácido nucléico – peso molecular
Eletroforese
Eletroforese
Clonagem Molecular
- Isolamento e propagação de moléculas idênticas
+ rDNA=
INSERTO
VETOR
+ =rDNA
CÉLULA HOSPEDEIRA
TRANSFORMAÇÃO
Clonagem Molecular
Plasmídeo
- Fita dupla
- Circular
- Extracromossômico
- Conjugação
- Resistência à antibióticos
- Insertos até 4.000 pb
Clonagem Molecular
DÚVIDAS ???
MUITO