Universidade Estadual do Ceará Faculdade de Veterinária Biotecnologia da Reprodução Animal

Tecnologia do sêmen: colheita, diluição, envase e congelação

Vicente José de F. Freitas

Laboratório de Fisiologia e Controle da Reprodução

www.uece.br/lfcr

Plano de Aula

�  Apresentar os conceitos e importância da realização da

técnica.

�  Discutir as diferentes etapas do processamento do

sêmen, com especial atenção à espécie bovina.

�  Apresentar as considerações sobre o tema.

Conceito

�  É uma biotécnica da reprodução que tem por finalidade

realizar a avaliação e processamento do sêmen de um

determinado reprodutor para congelação, envase e posterior

uso em I.A..

Etapas 1.  Colheita de sêmen

•  Realizada adequadamente e respeitando as características fisiológicas da espécie.

•  Deve ser realizada, preferencialmente, através do método de vagina artificial.

Etapas

2. Avaliação do sêmen q  Análise macroscópica:

q  Volume

q  Aspecto

q  Cor

q  Odor

q  Turbilhonamento

q  pH

Etapas

2. Avaliação do sêmen q  Análise microscópica:

q  Concentração

q  Motilidade massal (0-5)

q  Motilidade individual progressiva (%)

q  Vigor (0-5)

q  Patologias espermáticas

Sêmen recém-colhido

Resfriado (4oC) Congelado (-196oC)

Conservação por poucas horas (até 24 h) Conservação por tempo indefinido

Etapas Lavagem do sêmen:

q  Caso específico da espécie caprina.

q  Presença da Fosfolipase A na bulbouretral:

q  Produção de ácidos graxos e lisolecitinas è tóxicos aos sptz.

Etapas 3. Diluição do sêmen

q Realizada em duas etapas:

q  1ª. Etapa: metade do volume em diluidor não glicerolizado.

q  2ª. Etapa: outra metade com diluidor glicerolizado.

q Diluidores:

q  Gema de ovo-citrato homogeneizado com leite integral/desnatado acrescido de antibióticos.

� Qualidades de um “bom” diluidor:

�  Ausência de toxidez para os espermatozoides;

�  Apresentar pH favorável à sobrevivência dos espermatozoides;

�  Ter pressão osmótica igual à do sêmen;

�  Ser de baixo custo e de fácil preparo;

�  Não mascarar o exame microscópico do sêmen.

Etapas

4. Envasamento

q Após a diluição, faz-se o envase do sêmen dividindo-se em doses em palhetas de 0,25 ml para posterior criopreservação.

Etapas 5. Congelação do sêmen

q Congeladores mecânicos e congeladores com gelo seco, oxigênio líquido e nitrogênio líquido têm sido usados satisfatoriamente.

q O nitrogênio líquido (N2) tem aumentado a popularidade porque é também utilizado na conservação por longos períodos.

Curva para congelação do sêmen bovino

Etapas

6. Descongelação do sêmen q Muitos estudos comprovam que nenhum outro método se mostra

tão eficiente para o trabalho de campo quanto a descongelação é realizada em água à temperatura entre 35 a 37°C por 30 seg.

Considerações finais

�  O método de criopreservação escolhido dependerá do uso do sêmen (manutenção curta ou longa).

�  A congelação, devido suas vantagens é de longe o método mais recomendado.

�  Diferenças entre a fisiologia seminal das espécies podem interferir no tipo de crioprotetor utilizado.