Virus Bibliografía: Brock. Biología de los Microorganismos (10ma. Edición) Cap. 9 Donoghue M. 2004. Assembling the Tree of Life. Cap. 8

Virus

Bibliografía:

• Brock. Biología de los Microorganismos (10ma. Edición) Cap. 9

• Donoghue M. 2004. Assembling the Tree of Life. Cap. 8.

Estructura de la clase

• Clasificación y taxonomía de los virus.

• Clasificación de Baltimore: forma de replicación y transcripción

• Ciclo de vida de virus

• Virus animales

• Origen y evolución de los virus: 3 hipótesis

• Priones

• Viroides

• Ejercicio 6

Virus

Definición: (del latín veneno) Elemento genético que contiene RNA o DNA y se replica dentro de las células hospedadoras (pero independientemente de los cromosomas de la célula) y también posee un estado extracelular.

No está formado por células.

Agente patógeno que mide entre 30-300 nm (0.03-0.3 um).

Son parásitos intracelulares: necesitan una célula hospedadora para

replicarse, ya que se aprovechan de la maquinaria metabólica.

Infectan a todo tipo de organismos celulares.

Los virus son los organismos más numerosos de la Tierra

Estado extracelular del virus

La partícula vírica en el estado extracelular se llama virión.

Es la estructura mediante la cual el genoma del virus se transporta

de una a otra célula.

El virión (partícula del virus completa) está compuesta de:

• Una cápside de proteínas.

• Material genético (DNA o RNA).

Es metabólicamente inerte, sin funciones catabólicas y biosintéticas.

Algunos viriones contienen enzimas que colaboran en el proceso infeccioso.

- Ejemplo 1: algunos fagos contienen lisozima que perfora la pared

celular de la bacteria y permite la entrada.

- Ejemplo 2: retrovirus contienen la enzima transcriptasa reversa.

• Estado intracelular del virus

Infección: introducción de un genoma vírico en una célula hospedadora y

su reproducción en la misma.

Replicación del virus: producción de nuevas copias del genoma vírico y

síntesis de los componentes de la cubierta o cápside.

Los genomas de los virus son pequeños (5.000-500.000 bp) y codifican

funciones que no pueden utilizar en sus hospedadores.

Genoma circular o linear (pueden tener menos de 5 genes!)

El material genético puede ser DNA o RNA, de cadena sencilla o doble.

Algunos virus tienen DNA y RNA como material genético en distintos

estadios de su ciclo reproductivo.

Cómo diferenciaría un virus de un plásmido?

Considera que los virus son seres vivos? Por qué?

Preguntas

Cómo se diferencia un virus de una célula?

Estructura de los viriones

Estructuras diversas en forma, tamaño y composición química.

Cubierta proteica formada por proteínas individuales: subunidades

estructurales, que siguen un modelo preciso y repetitivo.

Puede estar compuesta por uno o varios tipos de proteínas.

Distintas proteínas se asocian en estructuras específicas: capsómero, que

se autoensamblan.

Tiene estructura simétrica: cilíndrica o esférica.

Dentro del virión existen enzimas específicas.

Nucleocápside

capsómero

Material genético

TMV bacteriófago (o fagos)IBDV

Cilíndrica o helicoidalIcosaédrica Compleja

Estructuras de los virus

Cabeza icosaédricaCola helicoidal

• Virus del mosaico del tabaco

Virus cilíndrico, simetria helicoidal.

Virus desnudos Virus envueltos

Virus envueltos

Algunos virus poseen una membrana rodeando la nucleocápsida.

La mayoría son virus animales; e. g Influenza virus.

Consiste en una bicapa lipídica con glicoproteínas embebidas, derivada de

la membrana de la célula hospedadora.

Función: Da especificidad y colabora en la penetración.

Replicación de los virus - generalizada

Ver video del Brock

Sólo se replican en células. Se requiere la célula hospedadora para su cultivo. Los virus más fáciles de crecer en el laboratorio son los fagos. Se los cultiva

en medios líquidos o semisólidos. Para algunos virus de plantas o animales, se usan cultivos celulares para su

investigación.

Cultivo de virus

- Diluciones seriales de virus en un cultivo de células.-Tinción: Células muertas se ven blancas.- Cada “placa” blanca es el rdo de la infección por 1 virus.

Cuantificación de fagos:

Tipos de virus según el hospedador

• Virus de bacterias = bacteriofagos = fagos

• Virus de plantas

• Virus de animales

• Virus de algas

• Virus de arqueas

• Virus de protistas

Virus de Bacterias o Bacteriofagos (fagos)

La mayoría con dsDNA (también hay fagos con ssRNA, dsRNA)

Con estructuras complejas (cabeza y cola), pocos con envoltura.

Virus virulentos o atemperados.

Hay fagos específicos de Bacteria y de Archaea.

QuickTime™ and a decompressor

are needed to see this picture.

Replicación vírica: ciclo lítico

Etapas de proceso de replicación de un bacteriófago:

1 Fijación/adsorción

3 Síntesis de ác. Nucleicos y prot.

2 Penetración

4 Ensamblaje y empaqueta-miento

5 Liberación de viriones

eclipse

Duración: 20-60’ fagos vs. 1-2 d virus animales

Rendimiento vírico

Maduración

Especificidad: interacción con receptores

Prot. Tempranas Prot Tardias

- Lisozima

Lisozima codificada por virus

Movie 1: replicacion de un virus mediante ciclo litico

Movies in chapter 16, 17 y 18 de MacGraw hill

Ciclo lítico vs. ciclo lisogénico

Fago atemperado

• Ciclo de vida virulento: ciclo replicativo resulta en la destrucción celular o lisis

Ciclo de vida temperado: ciclo replicativo conjunto con el del hospedador, sin destruirlo.

Fago virulento

Inducción por luz uV o qcos

Movie 2 - Fago Lambda: ciclo lisogenico

Resistencia

• No todas las células son susceptibles al ataque del virus.

Formas de resistencia en bacterias:

no existe un receptor de membrana indicado. destrucción del dsDNA viral por enzimas de restricción (protección de su propio DNA mediante modificaciones: metilación).

Algunos virus desarrollan nuevas estrategias:

Inhibición de sistemas de restricción del hospedador. Modificación de su DNA (metilación, glucosilación).

• Cabeza icosaédrica + cola de 110nm• dsDNA lineal, 168.000 bp, 250 proteínas• Citosinas modificadas por glucosilación• Infección: - síntesis de enzima para que la RNA polimerasa del hospedador reconozca los promotores - síntesis de enzimas virales para glucosilar las citosinas - ciclo lítico en 25’, 100 partículas víricas.

Fago T4

Fago Lambda

Infecta a E. coli dsDNA lineal, 48.000bp. Virus virulentos o atemperados. Ciclo lisogénico: se expresan genes para la integración del DNA del fago. En estado de lisogenia: no expresan sus genes, excepto un represor viral. Si se inactiva el represor, el profago es inducido y se desencadena el ciclo lítico. Causas: condiciones ambientales, luz uV, rayos X, compuestos químicos. Se usa en ingeniería genética para transportar DNA recombinante.





SEM (Microscopía electrónica de barrido) TEM (Microscopía electrónica de transmisión)

Preguntas

Por qué la curva de crecimiento de una población viral es escalonada (distinto a la curva bacteriana)?

En qué se diferencia el genoma viral de aquel de las células? Y en qué es similar?

Clasificación de los virus

Taxonomía formal: clasifica a los virus en órdenes, familias, géneros y

especies.

El nivel taxonómico más útil es el de familia. Miembros de una familia

poseen una determinada morfología, genoma y estrategias de replicación.

Las familias de virus terminan en -viridae. Ej. Poxviridae.

Se han clasificado basándose en características diversas:

en función de los hospedadores que pueden infectar: animales,

plantas, bacterias.

presencia de transcriptasa reversa

en función del tipo de ácido nucleico de los viriones: Sistema de

clasificación de Baltimore.

Taxonomía

En el año 2000, se estimaron:

• 6 grupos de virus

• 62 familias

• 233 géneros

• 3600 especies

• 30.000 cepas y subtipos.

Se examinaron animales y plantas principalmente.

Pocos estudios de virus de archaea, hongos, protistas, algas, etc.

Muchos de las familias parecen ser monofiléticas.

Pero los virus son polifiléticos.

Problemas:- difícil encontrar caracteres homólogos; pocos genes en virus.- rápida tasa de evolución en virus.- gran extinción de virus.- transferencia horizontal de genes con los hospedadores.

Clasificación de Baltimore

Ejemplos:

I: herpesII: parvovirusIII: IBDV (pollos)IV: SARS, TMV, hepatitis CV: sarampión, gripe, dengueVI: RetrovirusVII: Hepatitis B

Basada en la relación entre su genoma viral y su mRNA

RNA polimerasa (hospedador)


RNA polimerasas del hospedador sólo usan dsDNA para formar mRNA (ni ssDNA ni RNA)

RNA polimerasa dependiente de RNA (virus)

RNA polimerasa dependiente de RNA (virus)

(Actúa como mRNA)

RNA polimerasa dependiente de RNA (viral) - dentro del virus

RNA polimerasa dependiente de RNA (viral) - dentro del virus

Retrovirus

Transcriptasa reversa (viral)Proteasa,Integrasa - dentro del virus



Transcriptasa reversa (viral) para Replicación, mediante RNA

DNA polimerasa (hospedador)

Virus del Group IV: ssRNA (+)

Ciclo de infección y replicación de un Fago ssRNA (+): video

Virus del Group I dsDNA: AdenoviridaeMovie: http://www.mcb.uct.ac.za/tutorial/calgary_files/

Virus del Group II ssDNA: Parvoviridae

Virus del Group III dsRNA: Reoviridae

Virus del Group V: ssRNA (-): Rhabdoviridae

Virus del Group VI: ssRNA (+): Retrovirus

Movie: http://www.mcb.uct.ac.za/tutorial/calgary_files/



Retrovirus



Genoma ssRNA pero se replican mediante DNA intermediario.

usan enzima transcriptasa reversa.

Semejantes a elementos transponibles escapados de células.

Son virus envueltos.

Movie: retrovirus replication McGrawHill



Replicación de Retrovirus

gemación

Entrada

Decapsidación

RT

integración

transcripción

encapsidación

Ejemplo: HIV

Movie: HIV replication

Virus animales

- El virión entero entra (por endocitosis o

por fusión con la membrana) o solo

se inyecta el material genetico

- Los ácidos nucleicos se dirigen al

núcleo para replicación y

transcripción.

- Liberación de virus por lisis o exocitosis

- Hay de todas las clases de virus: DNA,

RNA.

- Virus de RNA + con modificaciones

como cola poli-A.



Video Brock

Los virus de eucariotas, en gral, se encuentran con una célula muy distinta

Características generales de virus animales:



Varias formas de virus animales

Polio virus Herpes virus Influenza virus

Infecciones persistentes: viriones son liberados sin lisar la célula.

Infecciones latentes: la aparición de síntomas (por lisis celular) ocurre un tiempo despues de la infección.

Si encontramos a un virus que lleva dentro de su cápside la enzima RNA polimersa dependiente de RNA, que tipo de genoma es probable que posea?

Un virus que contiene como genoma mRNA (+), cómo predeciría que va a replicarse?

Qué clases de virus poseen transcriptasa reversa?

Preguntas

Origen de los virus

Se originaron en forma independiente, múltiples veces.

Grupo polifilético.

Tres hipótesis de mecanismos del origen de los virus:

1. Hipótesis Primordial

2. Hipótesis de la fuga de transcriptos

3. Hipótesis Regresiva

1. Hipótesis Primordial: algunos RNA virus existen desde los principios de la vida en la Tierra hace 3800 millones de años. Pequeñas moléculas de RNA surgieron independientemente.

• Evidencia: hay virus en todas las formas de vida.

2. Hipótesis de la fuga de transcriptos: los virus se originan de mRNA (u otras moléculas de RNA o DNA) de las células hospedadoras que adquirieron la capacidad de replicarse y ser empaquetadas en una cubierta proteica, permitiendo el escape de la célula.

• Esta hipótesis es sugestiva pero no hay ejemplos claros.

3. Hipótesis Regresiva: los virus han descendido de bacterias libres (no parásitas) que perdieron sus funciones, DNA y las estructuras asociadas.

• Esta hipótesis no explica los virus con características no bacterianas.

Es probable que las tres hipótesis expliquen el origen de algún virus.

BacteriaVirus

Origen de algunos virus y análisis filogenéticos

Virus de RNA:

- origen primordial?

- grupo monofilético?

- analisis con RNA polimerasa

Virus de DNA: - grupo heterogéneo- dsDNA o ssDNA- múltiples orígenes- hipótesis del escape de transcriptos?

RT virus: - único origen?- escape de elementos genómicos con RT de una célula?- analisis con transcriptasa reversa de virus + telomerasas +

transposones: único origen.

Origen de algunos virus y análisis filogenéticos

Viroides Descubiertos en 1960, en papas infectadas. Pequeñas moléculas de ssRNA circular. Genoma: 246-375 nt. No codifica para proteínas. Secuencias muy similares: ancestro común. Estado extracelular: RNA desnudo, estable. Penetra la planta por heridas o mediante insectos. Se replica en el núcleo o cloroplasto de la célula utilizando su maquinaria, ya que forma estructura ~dsDNA. La célula forma estructuras multiméricas y el mismo RNA actuando como ribozima, corta el RNA liberando múltiples viroides. Responsables de enfermedades en plantas únicamente. Pueden interferir en la regulación por RNA pequeños de la planta.

TEM de un viroide de papa.

Viroides afectando a papas (alargadas)



Priones

Constituido únicamente por proteína, sin ácidos nucleicos.

Forma extracelular: proteínas.

Responsable de la enfermedad de la vaca loca.

Se propaga transmitiendo una alteración en el plegamiento de la proteína.

El contacto prion-proteína, induce alteración del plegamiento y cambio en la

función.

(proteinaceous-infective particle)

• Las proteínas alteradas son altamente estables.

• No se desnaturalizan - dificil eliminarlas.

Enfermedad de Kuru o de la risa:- transmitida en una tribu de Nueva Guinea.- Consumian los cerebros de personas fallecidas.

• Priones son resistentes a radiación,

temperatura y proteasas.• Se pueden destruir con lavandina (hidrolisis)

Quién las codifica? Proteínas similares están codificadas en el

cromosoma del hospedador pero con distinto plegamiento.

Se conocen enfermedades por priones en animales únicamente.

Las enfermedades por priones se las llaman encefalopatías

espongiformes transmisibles.

Priones

Microbiologyplace: movies

Las enfermedades por priones ocurren de 3 formas:

- enfermedad infecciosa por priones: por infección, ya que los priones se transmiten entre animales, ej. Ingestión

- enfermedad por priones esporádicos: plegamiento anormal al azar en moleculas de un individuo sano y normal.

- enfermedad hereditaria por priones: una mutación en un gen de una proteína induce a la proteína a plegamietos anormales de forma frecuente.

Preguntas:

1- Cree que los priones son organismos vivos? Por qué no? Por qué si?

2- Y los viroides?

3- Si los virus son polifiléticos, por qué todos poseen una cápside para sobrevivir extracelularmente?

Varicela = chicken poxMeasles = sarampionMumps = paperasRubiola = rubella

Cronograma

Segundo Parcial 16 de noviembre

Documents

Virus Bibliografía: Brock. Biología de los Microorganismos (10ma. Edición) Cap. 9 Donoghue M. 2004. Assembling the Tree of Life. Cap. 8