遺伝子導入技術
遺伝子導入技術 344
トランスフェクション試薬 345
エレクトロポレーション 348エレクトロポレーション試薬 348エレクトロポレーションシステム 349
パーティクルデリバリーシステム 356
遺伝子導入技術生体内へDNAおよびRNAを遺伝子導入することは、生命現象を解析する上で最も一般的なツールの一つとなっています。現在では、様々な標的や実験系に合わせて多くの遺伝子導入技術が確立されています。バイオ・ラッドは1986年のジーンパルサー発売以来、常にこの分野のリーダーとして多くの製品を提供しております。
バイオ・ラッドは、遺伝子導入に関連する様々なアプリケーションに、豊富なラインアップでお応えいたします。次の表から標的の種類やアプリケーションを選択し、最適な手法や製品をお選びいただけます。それぞれの製品に関する詳細は、次ページ以降をご参照ください。
遺伝子導入セレクションガイドTransfection Technologies Page Plants Bacteria Fungi Animals
Lipid Transfection
siLentFect™ lipid reagent for RNAi 348 ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦
TransFectin™ lipid reagent 347 ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦
Electroporation
Gene Pulser MXcell™ エレクトロポレーション システム
350 ◦ ◦ ◦ ◦
Gene Pulser Xcell™ コンプリートシステム 352 ◦* ◦* ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦
Gene Pulser Xcell CEシステム 353 ◦* ◦* ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦
Gene Pulser Xcell PCシステム 353 ◦ ◦ ◦ ◦
MicroPulser™エレクトロポレーター 354 ◦ ◦ ◦ ◦
Biolistic Particle Delivery
Helios® gene gun システム 357 ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦
PDS-1000/He™ 359 ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦
PDS-1000/He Hepta™ システム 359 ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦
◦ 最適◦ 適◦ 可 * プロトプラスト化が必要
Mam
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トランスフェクション試薬(P.345) エレクトロポレーション(P.348) パーティクルデリバリー(P.356)
Ions Gene
Cell Membrane
A
B
C
Gas
Sample
Helios Gene Gun System Particle Delivery Method
DNA coated microcarrier
核酸
脂質
リポソーム
複合体形成
分析
導入
エンドサイ トーシス
細胞
遺伝子導入技術 www.bio-rad.com/transfection
344 遺伝子導入技術
トランスフェクション試薬 www.bio-rad.com/lipids
トランスフェクション試薬カチオン性脂質によるトランスフェクションは、広範囲の真核細胞に適しています。市販されている多くの脂質性トランスフェクション試薬は、カチオン性脂質と、dioleoylphosphatidylethanolamine(DOPE)やコレステロールなどの脂質の水性懸濁液です。カチオン性脂質は、陽電荷表面を有する小さなリポソームを形成します。カチオン性脂質懸濁液にDNAを加えると、DNAの陰電荷を有するリン酸基がリポソームの陽電荷表面と相互に作用します。これらの脂質ーDNA複合体は負電荷を有する細胞膜表面と結合します。一般的に、脂質ーDNA複合体は、エンドソームおよびリソソームを通じて細胞内に取り込まれると考えられています。
セレクションガイド
siLentFect™ Lipid Reagent TransFectin™ Lipid Reagent
特 長 RNAi用試薬 汎用性試薬
用 途 siRNA 遺伝子発現siRNA(shRNA)
細胞株 多様な細胞例:A549、BHK、HeLa、K562、Jurkat、Vero、Primary Fibroblasts
多様な細胞例:A549、MCF-7、HeLa、HUVEC、Jurkat、Primary Fibroblasts
核酸
脂質
リポソーム
複合体形成
細胞
分析
導入
エンドサイトーシス
遺伝子導入技術 345
トランスフェクション試薬 www.bio-rad.com/lipids
siLentFect™ Lipid Reagent for RNAi
最近ではsmall interfering RNA(siRNA)によるジーンサイレンシングが遺伝子発現解析研究における重要なツールとなってきています。ジーンサイレンシングでは、特に低い細胞毒性がリポフェクションを評価する時の重要なファクターです。細胞毒性が高い場合、細胞の生存率の低下や形態の変化により正確な発現抑制効果の測定が難しくなります。バイオ・ラッドのsiLentFect Lipid ReagentはsiRNAの導入に特化したリポフェクション試薬です。siRNAとのアフィニティが高く、かつ細胞毒性を抑えた試薬ですので、siRNAを用いたジーンサイレンシング実験に適しています。
siLentFectは幅広い細胞種で利用可能で、導入が難しい細胞に対しても有効です。上皮細胞でのタイトジャンクションの研究によく用いられるCaco-2細胞は導入が比較的困難な細胞系ですが、シカゴ大学の研究室ではsiLentFectを用いてsiRNAを導入し、MLCK1遺伝子の発現抑制に成功しました。詳細はBulletin 5370に記載されております。
● siRNAとの親和性が高くなっていますので、siRNAと試薬の使用量を少なくできます。
● 幅広い細胞種において高い遺伝子導入効率を示します。
● 至適な濃度では細胞毒性は低く抑えられていますので、適正な発現抑制効果実験を行うことができます。
● siLentFectを用いてsiRNAとdsDNA vectorsを同時に導入することが可能です。
Suggested Reagent Quantities for Different Sizes of Plates/WellsCulture
Vessel SizeVolume of
Plating MediasiRNAconc.
Volume of SerumFree Medium
siLentFectReagent
96well 0.1ml 5-20nM 20μl 0.05-0.4μl24well 0.5ml* 5-20nM 50μl 0.25-2.0μl12well 1.0ml* 5-20nM 100μl 0.5-4.0μl
6well/35mm 2.5ml* 5-20nM 250μl 1.0-5.0μl60mm 5.0ml* 5-20nM 500μl 2.5-10μl
100mm 10.0ml* 5-20nM 1.0ml 5.0-20μl
* Carefully aspirate medium 15-60 minutes prior to transfection and add one-half volume of medium.
Examples of Cell Lines Successfully Transfected With siLentFect Lipid Reagent*Cell Line Cell Type Cell Line Cell Type
184htrt Human breast epithelial LNCap Human prostate adenocarcinoma
4T1 Mouse mammary tumor MCF-7 Human breast adenocarcinoma
A549 Human lung carcinoma Murine EC Mouse endothelial
Caco-2 Human colon adenocarcinoma NIH 3T3 Mouse embryo fibroblast
CHO-K1 Chinese hamster ovary epithelial PC-3 Human prostate cancer
COS-7 SV40-transformed African green monkey kidney Primary fibroblast Human foreskin fibroblast
HEK 293 Human embryonic kidney Primary keratinocyte Human keratinocyte
HeLa Human cervical adenocarcinoma Primary ovarian Epithelial
HepG2 Human liver carcinoma SVEC4 Vascular endothelial
HUVEC Human umbilical vein endothelial VSMC Vascular smooth muscle
* 詳しくは Bulletin 5343、または www.bio-rad.com/transfectionprotocols/をご参照ください。
Ordering Informationカタログ番号 品名 価格 保存170-3360 siLentFect Lipid Reagent, 0.5ml ¥34,000 4℃170-3361 siLentFect Lipid Reagent, 1.0ml ¥53,000 4℃170-3362 siLentFect Lipid Reagent, 5×1.0ml ¥168,000 4℃
MCF-7細胞への蛍光siRNAの効果的な導入左図:Hoechst核染色 右図:蛍光ラベルsiRNA
siLentFect Lipid ReagentとsiRNAの使用量の違いによる導入効果上段:恒常的にlacZを発現させたCHO細胞に対して、lacZをターゲットにしたsiRNAを導入したときのsiLentFect Lipid Reagentの使用量の違いによるβガラクトシターゼ活性(左)とノックダウン効率(右)。24wellプレートを使用。下段:恒常的にルシフェラーゼを発現させたCHO細胞に対して、ルシフェラーゼをターゲットにしたsiRNAの使用量の違いによるルシフェラーゼ活性(左)とノックダウン効率(右)。siLentFect Lipid Reagentは96wellプレートで、1wellあたり0.3μl使用。
0.0 0.25 0.5 0.75 1.0 2.0 3.0
Dow
nreg
ulat
ion,
%
0
20
40
60
80
100
siLentFect volume, μl/well 0.0 0.25 0.5 0.75 1.0 2.0 3.0
0.70.60.50.40.30.20.10.0
A 405
siLentFect volume, μl/well
0 2 10 20 50
3,0002,500
2,000
1,500
1,000
5000Lu
cife
rase
act
ivity
, RLU
siRNA, nM
0
20
40
60
80
100
Dow
nreg
ulat
ion,
%
siRNA, nM 0 2 10 20 50
See Also
セルカウンター: P.34
リアルタイム PCR機器:
P.369リアルタイム
PCR試薬: P.381
RNA抽出キット: P.13
ラボチップ電気泳動: P.278
346 遺伝子導入技術
トランスフェクション試薬 www.bio-rad.com/lipids
TransFectin™ Lipid Reagent
TransFectin Lipid Reagentは、カチオン性脂質を用いたトランスフェクション試薬です。様々な細胞において、高い遺伝子導入効率とタンパク質の高レベルな発現を実現します。
● 幅広い細胞において高い遺伝子導入効率を示します。
● 他の高効率な試薬と比べて、細胞毒性は低く抑えられています。
● タンパク質の高レベルな発現を実現します。
● シンプルな3ステップのプロトコールです。
● トランスフェクション後の培地交換は不要です。
● 40〜90% confluenceの細胞に使用できます。
● 血清含有培地上の細胞へ使用できます。
Suggested Reagent Quantities for Different Sizes of Plates/Wells
CultureVessel Size
SurfaceArea (cm2)
Volume ofPlating Media
PlasmidDNA
Volume of SerumFree Medium
TransFectinReagent
96well 0.32 0.1ml 50-200ng 25μl 0.1-0.6μl
24well 1.9 0.5ml 0.25-1.0μg 50μl 0.25-4.0μl
12well 3.8 1.0ml 0.50-2.0μg 100μl 2.0-8.0μl
6well/35mm 9.2 2.0ml 1.0-4.0μg 250μl 5.0-15μl
60mm 21 5.0ml 2.0-8.0μg 500μl 15-20μl
100mm 60 10.0ml 12-36μg 1.5ml 40-60μl
Examples of Cell Lines Successfully Transfected With TransFectin Lipid Reagent*Cell Line Cell Type Cell Line Cell Type
A375 Human malignant melanoma K562 Human bone marrow, chronic myelogenous leukemia
A549 Human lung carcinoma LLC-MK2 Monkey epithelial kidney
ACHN Human renal adenocarcinoma LNCaP Human prostate adenocarcinoma
BHK Newborn Syrian golden hamster kidney MEF Mouse embryo fibroblast
CHO Chinese hamster ovary NBT-II Rat bladder carcinoma
COS-7 SV40-transformed African green monkey kidney Neuro-2a Mouse neuroblastoma
CV-1 African green monkey fibroblast kidney NIH 3T3 Mouse embryo fibroblast
HEK 293 Human embryonic kidney SH-SY5Y Human neuroblastoma
HeLa Human cervical adenocarcinoma SW480 Human colorectal adenocarcinoma
Hep G2 Human epithelial liver carcinoma Vero African green monkey kidney
* 詳しくは Bulletin 5343、または www.bio-rad.com/transfectionprotocols/をご参照ください。
Ordering Informationカタログ番号 品名 価格 保存170-3350 TransFectin Lipid Reagent, 0.5ml ¥29,000 4℃170-3351 TransFectin Lipid Reagent, 1.0ml ¥45,000 4℃170-3352 TransFectin Lipid Reagent, 5×1.0ml ¥147,000 4℃
TransFectin LipidReagentの使用量の違いによる導入効果K562細胞に対して、βガラクトシターゼを発現させるためのプラスミドDNAを導入したときのTransFectin LipidReagentの使用量の違いによるβガラクトシターゼ活性。1wellあたり4×105 cellを培養した24wellプレートを使用。導入後、24時間後測定。プラスミドDNAの使用量はそれぞれ0.25μl(■)、1.00μl(■)使用。
1 2 3 4
0.90.80.70.60.50.40.30.20.10.0
O.D
. 405
Volume of TransFectin, μl
無血清培地50μlに対して0.5〜4μlのTransFectin
無血清培地50μlに対して0.25〜1μgのプラスミドDNA
等容量のTransFectinおよびDNA溶液を混和
20分間インキュベートしてDNA-リポソーム複合体を形成
混和後、DNA-リポソーム複合体を細胞に直接添加
(100μl/24ウェルプレート)
培養細胞
一晩インキュベートした後に測定
TransFectinの3ステッププロトコール
See Also
セルカウンター: P.34リアルタイム PCR機器: P.381RNA抽出キット: P.13プラスミドDNA 抽出キット: P.15
遺伝子導入技術 347
エレクトロポレーションエレクトロポレーション試薬 www.bio-rad.com/electroporation
エレクトロポレーションエレクトロポレーションは、短パルスの電流を利用して、DNAやRNAなどの高分子を細胞内に導入する技術です。細胞を電気パルスにさらすと細胞膜に一時的に孔が形成され、核酸はこの孔を通過して細胞内に入り込むと考えられています。この手法には、エレクトロポレーション装置とエレクトロポレーション用のキュベットが必要です。バイオ・ラッドは、Gene Pulser MXcellシステム、Gene Pulser Xcellシステム、MicroPulserおよび専用のエレクトロポレーションキュベットを提供しています。Gene Pulserに最適化されたGene Pulserエレクトロポレーションバッファーをご用意しています。
エレクトロポレーション試薬Gene Pulser® エレクトロポレーションバッファー
浮遊系細胞、初代培養細胞などへ有効なエレクトロポレーション用バッファーです。
動物細胞へのsiRNA、プラスミドDNAの導入に威力を発揮します。
● 高い遺伝子導入効率を維持しながら、導入細胞の致死率を低減させます。
● Gene Pulserシリーズを含む様々なエレクトロポレーション装置に使用可能です。
● 様々な細胞株にsiRNA、プラスミドDNAの遺伝子導入を可能にします。
※ 他の試薬使用時のエレクトロポレーション条件とは、大きく異なります。目安としては、PBS使用時の1/2〜1/3の電気容量(μF)が至適条件に近い条件となります。
Ordering Informationカタログ番号 品名 価格 保存165-2676 Gene Pulserエレクトロポレーションバッファー 1.8ml×10本 ¥29,000 4℃165-2677 Gene Pulserエレクトロポレーションバッファー 30ml ¥42,000 4℃
Ions Gene
Cell membrane
A
B
C
エレクトロポレーション(電気穿孔法)の原理ターゲットとなる細胞を高電圧の電場にさらすと、細胞膜と細胞質の間で一時的に極端な電位差が生じます(A)。この影響で細胞膜の構造が変化し、透過性が上昇します(B)。電場から開放されると、細胞膜の構造は回復しますが、この際に、周囲に溶解している核酸、タンパク質、糖、低分子などの物質が、細胞内に取り込まれます(C)。エレクトロポレーションは、このような細胞膜の構造変化を利用し、目的となるDNAを細胞内へと導入する方法です。
See Also
セルカウンター: P.34
ラボチップ電気泳動: P.278
タンパク質電気泳動: P.155
348 遺伝子導入技術
エレクトロポレーションエレクトロポレーションシステムwww.bio-rad.com/electroporation
エレクトロポレーションシステムGene Pulser® システム
エレクトロポレーションは、効率の良い遺伝子導入法として広く使用されている手法です。目的の細胞に電気パルスを与えることで細胞膜の構造を一時的に変化させ、その透過性を増すことにより、周囲に溶解している核酸、タンパク質、糖などの物質を取り込ませます。
エクスポネンシャルパルス(減衰波)と スクエアパルス(矩形波)使用するパルスの波形は、エレクトロポレーションの効率を向上させる重要な条件のひとつです。一般に用いられている電気パルスの波形はエクスポネンシャルパルスとスクエアパルスです。Gene Pulser XcellおよびGene Pulser MXcellはその両方を供給することができます。
PulseTrac回路独自のPulseTrac回路が抵抗値やコンデンサー容量を測定し、供給されるパルスの誤差を最小限に抑えます。また、サンプル抵抗値の事前測定機能やアーク防止機能により、貴重なサンプルの浪費を防ぐことができます。さらに、余分な電気を自動的に放電する機能やコンデンサーのキャリブレーション機能などが、安全で信頼性の高い実験を支援します。
A
V0
Volta
ge, V
Time, msτ
V0
e
A. エクスポネンシャルパルスは最も広く使用されている波形である。コンデンサーより放出されたパルスの電圧は、時間とともに減衰する。使用されるエクスポネンシャルパルスはタイムコンスタントと電場強度の 2つのパラメータで表現される。タイムコンスタント(τ)は、設定した電圧を初期電圧V0とするとき、電圧がV0の37%まで減少するのに要する時間と定義される。タイムコンスタントは回路の抵抗値(R)とコンデンサー容量(C)により規定される(τ=R×C)。電場強度(E、単位はkV/cm)は初期電圧V0とキュベットの電極間距離で規定される。
B Time, ms
V0
Volta
ge, V
Vt
t
B. スクエアパルスはエクスポネンシャルパルスでは生存率が低い細胞に対して使用される。スクエアパルスを使用することで、一般に生存率が向上すると言われている。エクスポネンシャルパルスのタイムコンスタントを十分に大きくした条件下で、パルスを任意のタイミングで終了させることにより、ほぼ一定の電圧を維持したスクエアパルスを供給する。個々のスクエアパルスは設定電圧およびパルスの長さ(t)で表現される。また、複数のパルスを使用する際は、パルスの間隔もパラメーターのひとつとなる。実際には、初期電圧とパルス終了時の電圧には僅かな差が生じるが、この差はpulse droop(Vt)と呼ばれ、通常は5%以内に抑えられる。
エレクトロポレーションシステム選択ガイド
Gene Pulser Mxcellシステム Gene Pulser Xcellシステム MicroPulserプレート対応 対応 未対応 未対応
キュベット対応 対応 対応 対応
原核/真核生物 真核生物 両方 原核生物
推奨細胞
チャンバー プレートチャンバーShockPodチャンバー ShockPodチャンバー ShockPodチャンバー
システムオプション−
Gene Pulser XcellコンプリートシステムGene Pulser Xcell PCシステムGene Pulser Xcell CEシステム
−
遺伝子導入技術 349
Gene Pulser MXcell™ エレクトロポレーションシステム
Gene Pulser Mxcellは全く新しいプレートタイプのエレクトロポレーションシステムです。
反応容器は96well、24well、12wellの3種類の専用プレートがあり、1プレート内でウェルごとに24種類までの異なるプログラムを実行できます。内蔵されたプログラムを使用することで、1回の実験でエクスポネンシャルパルス(減衰波)、スクエアパルス(矩形波)の両方をパルスすることや、電圧、電気容量のグラジェントパルスをかけることが可能であり、その細胞に最適な導入条件を簡単に見つけることができます。
● プレートタイプの簡単操作。
● プリセットプログラムによる簡便な条件検討が可能。
● 1度の実験で24種類のプログラムを実行可能。
● エクスポネンシャルパルス、スクエアパルスの同時実行が可能。
● 1プレートあたり2分で操作完了。
● 専用シングルキュベットチャンバーを接続することでキュベットの使用が可能。
エクスポネンシャルパルス(減衰波)での条件検討96well/Exp, Vgrad/Cgrad
ウェルセットABCD1~12: 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
電圧勾配(ΔV )、350μF、1,000Ω
A
ΔV(V)
100 100 100 200 200 200 300 300 300 400 400 400BC
ウェルセットEFGH1~12: D
コンデンサー容量勾配(ΔC )、250V、1,000Ω
E
ΔC(μF)
200 200 200 350 350 350 500 500 500 1,000 1,000 1,000FGH
スクエアパルス(矩形波)での条件検討96well/Sqr, Vgrad, Dgrad
ウェルセットABCD1~12: 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
電圧勾配(ΔV )、2,000μF、1,000Ω、20ms
A
ΔV(V)
100 100 100 200 200 200 300 300 300 400 400 400BC
ウェルセットEFGH1~12: D
パルス持続時間勾配(ΔD )、250V、2,000μF、1,000Ω
E
ΔD(ms)
10 10 10 15 15 15 20 20 20 30 30 30FGH
エクスポネンシャルパルス(減衰波)とスクエアパルス(矩形波)の組合せ条件検討Opt 96well/Exp, Sqr
ウェルセットABCD1~12: 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12エクスポネンシャルパルス E
XP
A 150V 200V 250V 300V 350V 450V 250V 250V 250V 250V 250V 250V350μF 350μF 350μF 350μF 350μF 350μF 200μF 250μF 350μF 500μF 750μF 1,000μF
BC
ウェルセットEFGH1~12: Dスクエアパルス S
QR
E 150V 200V 250V 300V 350V 450V 250V 250V 250V 250V 250V 250V20ms 20ms 20ms 20ms 20ms 20ms 5ms 10ms 15ms 20ms 25ms 30ms
FGH
本体
エレクトロポレーション プレート96Well
プレート チャンバー
See Also
セルカウンター: P.34
エレクトロ ポレーション バッファー:
P.348タンパク質
電気泳動関連: P.155
エレクトロポレーションエレクトロポレーションシステム www.bio-rad.com/electroporation
350 遺伝子導入技術
Gene Pulser MXcell用Single ShockPodキュベット チャンバー
● プロトコールはキュベット、プレート共通です。
● チャンバーは片手で操作可能です。
● 軽量です。
● キュベットチャンバーは標準的キュベットが使用可能です。
Gene Pulser MXcell用エレクトロポレーションプレートGene Pulser MXcellエレクトロポレーションシステム用の電極付反応プレートです。デスポザーブルであるため、コンタミネーションの心配がありません。プレートの種類は96well、24well、12wellの3種類です。
Gene Pulser MXcell Sample Volume Selection Guide
Format Well Volume Cell Concentration Number ofWell Sets
12-well plate 1.0–1.5ml 1×106 to 1.5×107 12
24-well plate 500–800μl 5×105 to 8×106 24
96-well plate 100–200μl 1×105 to 2×106 24
0.4cm cuvette 400–800μl 4×105 to 8×106 N/A
仕様Gene Pulser MXcellシステム
入力電圧 100-120VACまたは220-240VAC 50/60Hz消費電力 最大240W規格 安全性EN61010、EMC EN61326 Class Aサイズ・重量 31×30×14cm 6.62kg出力波形 エクスポネンシャルパルス、スクエアパルス設定電圧(V) 10〜500(2V刻み)コンデンサ容量(μF) 25〜2,475(25μF刻み)設定抵抗値(Ω) 50〜1,500(50Ω刻み)、∞サンプル抵抗値(Ω) 最低10(10〜500V設定時)スクエアパルス幅(msec) 0.05〜9,999.95(10〜500V設定時)スクエアパルス数 1〜3(10〜500V設定時)スクエアパルス間隔(sec) 0.1〜10(10〜500V設定時)
Ordering Informationカタログ番号 品名 価格165-2670JA Gene Pulser MXcellシステム ¥1,320,000165-2670JB Gene Pulser MXcellシステムSingle Shock Pod付 ¥1,440,000165-2673 Gene Pulser MXcell用Single Shock Pod ¥250,000165-2681 Gene Pulser MXcell用エレクトロポレーションプレート 96well ¥38,000165-2681B05 Gene Pulser MXcell用エレクトロポレーションプレート 96well (5枚) ¥180,000165-2682 Gene Pulser MXcell用エレクトロポレーションプレート 24well ¥38,000165-2682B05 Gene Pulser MXcell用エレクトロポレーションプレート 24well (5枚) ¥180,000165-2683 Gene Pulser MXcell用エレクトロポレーションプレート 12well ¥38,000165-2683B05 Gene Pulser MXcell用エレクトロポレーションプレート 12well (5枚) ¥180,000
Gene Pulser MXcell用 Single ShockPod
エレクトロポレーションエレクトロポレーションシステムwww.bio-rad.com/electroporation
遺伝子導入技術 351
エレクトロポレーションエレクトロポレーションシステム www.bio-rad.com/electroporation
プリセットプロトコールMammalian Cells Bacterial Cells Fungal Cells
CHO E. coli S. cerevisiae
COS7 A. tumefaciens P. pastoris
3T3 P. aeruginosa C. albicans
293 S. aureus S. pombe
HeLa B. cereus D. discoideum
BHK21 S. pyrogenes
A549 L. plantarum
CV1
K562
HL60
Jurkat
HuT78
Gene Pulser Xcell™ エレクトロポレーションシステム
エレクトロポレーションは、効率の良い遺伝子導入法として広く使用されている手法です。目的の細胞に電気パルスを与えることで細胞膜の構造を一時的に変化させ、その透過性を増すことにより、周囲に溶解している核酸、タンパク質、糖などの物質を取り込ませます。エレクトロポレーションにおいて、一般に用いられている電気パルスの波形はエクスポネンシャルパルス(減衰波)とスクエアパルス(矩形波)です。Gene Pulser Xcellはその両方を供給することができます。従来品Gene Pulser、Gene PulserⅡの後継機種です。これまでのGene Pulserシリーズにて得られた設定パラメータは、Gene Pulser Xcellにそのまま使用できない場合があります。その場合は、再検討が必要となります。
● エクスポネンシャルパルス(減衰波)とスクエアパルス(矩形波)の両方を供給することができるため、原核細胞・真核細胞を問わず幅広いターゲットへの応用が可能です。
● 易しい操作方法と広い表示画面により、初めての方でもすぐにお使いいただけます。
● 広く使用されている哺乳動物や微生物へのプリセットプロトコールが内蔵されており、条件検討の手間を軽減します。
● 独自のPulseTrac回路は、正確なパルス供給、サンプルの抵抗値測定、パルスの実効値やタイムコンスタントの表示等、様々な側面で実験の信頼性を高めます。
● 最大で144件のユーザープロトコールを保存し、呼び出して使用することができます。また、過去100件分の実験結果を自動的に保存します。
● 高電圧回路(PC module)使用時には最大3,000Vまでの電圧を供給できます。
ShockPod™ Cuvette Chamber
PCモジュール
CEモジュール
本体
See Also
セルカウンター: P.34
タンパク質電気泳動: P.155
352 遺伝子導入技術
エレクトロポレーションエレクトロポレーションシステムwww.bio-rad.com/electroporation
Gene Pulser Xcellシステム選択ガイドシステム
GENE Pulser Xcellコンプリートシステム 真核生物、原核生物の両方にトランスフェクション可能なシステム。本体の他にCEモジュールとPCモジュールを含みます。
Gene Pulser Xcell CEシステム 哺乳類動物細胞や植物プロトプラストを含む真核生物へのエレクトロポレーション用システム。本体とCEモジュールを含みます。
Gene Pulser Xcell PCシステム 細菌や真菌もしくは少容量サンプルに高電圧をかけるエレクトロポレーション用システム。本体の他にPCモジュールが含まれます。
Ordering Informationカタログ番号 品名 価格165-2660J1 Gene Pulser Xcellコンプリートシステム(動物細胞、植物プロトプラスト、バクテリア用) ¥1,450,000
構成内容:Gene Pulser Xcell Main unitGene Pulser Xcell CE moduleGene Pulser Xcell PC moduleGene Pulser Xcell ShockPodエレクトロポレーションキュベット0.1cm, 0.2cm, 0.4cm 各50個
165-2661J1 Gene Pulser Xcell CEシステム(動物細胞、植物プロトプラスト用) ¥1,050,000構成内容:Gene Pulser Xcell Main unitGene Pulser Xcell CE moduleGene Pulser Xcell ShockPodエレクトロポレーションキュベット0.2cm, 0.4cm 各50個
165-2662J1 Gene Pulser Xcell PCシステム(バクテリア用) ¥950,000構成内容:Gene Pulser Xcell Main unitGene Pulser Xcell PC moduleGene Pulser Xcell ShockPodエレクトロポレーションキュベット0.1cm, 0.2cm 各50個
165-2666J1 Gene Pulser Xcellコアユニット ¥930,000構成内容:Gene Pulser Xcell Main unitGene Pulser Xcell ShockPod
165-2666 Gene Pulser Xcell Main unit ¥850,000165-2667 Gene Pulser Xcell CE module ¥550,000165-2668 Gene Pulser Xcell PC module ¥450,000165-2669 Gene Pulser Xcell ShockPod ¥80,000165-2086 エレクトロポレーションキュベット 0.2cm(酵母用)、50個 ¥24,800165-2088 エレクトロポレーションキュベット 0.4cm(動物細胞、植物プロトプラスト用)、50個 ¥24,800165-2089 エレクトロポレーションキュベット 0.1cm(バクテリア用)、50個 ¥24,800
※エレクトロポレーションキュベットはGene Pulser Xcell、Gene PulserⅡ、MicroPulserで使用できます。
遺伝子導入技術 353
E. coliパルサー、Gene Pulserシリーズにて得られた設定パラメーターは、MicroPulserにそのまま使用できない場合があります。その場合は再検討が必要となります。ご注意願います。
MicroPulser™ エレクトロポレーター
MicroPulserはバクテリア、菌類などの微生物専用のシンプルなエレクトロポレーターです。エレクトロポレーションは化学的遺伝子導入方法などと比べ、その効率は最も高い手法のひとつです。
● バクテリア、菌類のプリセットプログラムにより、標準的なプロトコールがすぐにご利用いただけます。
● アーククエンチング機能(アーク防止機能)により、誤って高塩濃度に調整されたサンプルへのパルス発生を防止します。
● プリセット以外にもマニュアル設定が可能です。最大3,000Vまで出力が行え、より高い効率での導入の可能性が広がります。
● タイムコンスタント(τ)、実効電圧の表示が可能です。
● コンパクト、軽量設計です。
● 電気容量(10μF)、抵抗値(600Ω)は固定設計です。
プリセットプログラムおよび実験例Program Species Cuvette Size Preset Conditions
Bact
eria
Ec1 Escherichia coli 0.1cm 1.80kV, 1pulseEc2 Escherichia coli 0.2cm 2.50kV, 1pulseStA Staphylococcus aureus 0.2cm 1.80kV, 1pulse, 2.5msecAgr Agrobacterium tumefaciens 0.1cm 2.20kV, 1pulseEc3 Escherichia coli 0.2cm 3.00kV, 1pulse
Fung
i
Sc2 Saccharomyces cerevisiae 0.2cm 1.50kV, 1pulseSc4 Saccharomyces cerevisiae 0.4cm 3.00kV, 1pulseShS Schizosaccharomyces pombe 0.2cm 2.00kV, 1pulseDic Dictyostelium discoideum 0.4cm 1.00kV, 2pulse, 1.0msecPic Pichia pastoris 0.2cm 2.00kV, 1pulse
Unless the pulse time is truncated below 5msec, the unit will deliver the optimal time constant 〜5msec to samples in high-resistance media.
仕様インプット電圧 100-120V 規格 EN61010
Meets EN61000-3-2 and EN61000-3-3harmonic, flicker and voltage fluctuationstandards that will be mandatory in 2001FCC, Class AEC 1010, CE
最大消費電流 2A RMS (100-120V)最大出力 3,000V, 100A出力波形 エクスポネンシャルパルス(減衰波)出力電圧 200〜3,000V 10Vステップ操作環境 温度 3.5-35℃
湿度 0-95%
消費電力 200Wサイズ 21(W)×31(D)×8(H)cm重量 2.9kg
Ordering Informationカタログ番号 品名 価格165-2100 MicroPulserエレクトロポレーター ¥498,000
構成内容:MicroPulser本体、ショッキングチャンバー、キュベット10個(0.1cm 5個、0.2cm 5個)
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354 遺伝子導入技術
エレクトロポレーションキュベット
再現性のあるエレクトロポレーションを行うには、ハイクオリティーなキュベットが必要です。Gene Pulser Xcell本体または、MicroPulserから出力された正確なパルスは損失することなくキュベットに伝わります。バイオ・ラッドのキュベットは減菌済で個別に包装されているので、無駄なく清潔にご使用いただけます。大腸菌やバクテリアの高効率形質転換には、0.1cmキュベットを用い、高い電場強度を使用します。酵母の形質転換は、0.2cmキュベットを用い、動物細胞の場合は0.4cmキュベットを使用します。バイオ・ラッドは再現性のある結果が得られるようハイクオリティーなキュベットを提供します。
導入効率Gene Pulserシリーズ、MicroPulser用に規定されたキュベットにより、最大のエレクトロポレーション効率が得られます。
キュベット容量キュベットタイプ 容量 キャップの色
0.1cm 20μl〜 80μl 茶色0.2cm 40μl〜400μl 緑色0.4cm 200μl〜800μl* 青色
* 350μl〜400μlが最適です。
エレクトロポレーションキュベットは1回のみの使用をお勧めしております。再使用または当社製以外のキュベットの使用は品質保証の対象外となりますのでご注意願 います。
Ordering Informationカタログ番号 品名 価格165-2088 エレクトロポレーションキュベット 0.4cm(動物細胞、植物プロトプラスト用)、50個 ¥24,800165-2086 エレクトロポレーションキュベット 0.2cm(酵母用)、50個 ¥24,800165-2089 エレクトロポレーションキュベット 0.1cm(バクテリア用)、50個 ¥24,800165-2088B05 エレクトロポレーションキュベット 0.4cm(動物細胞、植物プロトプラスト用)、50個×5箱 ¥99,400165-2086B05 エレクトロポレーションキュベット 0.2cm(酵母用)、50個×5箱 ¥99,400165-2089B05 エレクトロポレーションキュベット 0.1cm(バクテリア用)、50個×5箱 ¥99,400165-2091 エレクトロポレーションキュベット 0.4cm 500個 ¥150,000165-2092 エレクトロポレーションキュベット 0.2cm 500個 ¥150,000165-2093 エレクトロポレーションキュベット 0.1cm 500個 ¥150,000165-2091B05 エレクトロポレーションキュベット 0.4cm 2,500個 ¥650,000165-2092B05 エレクトロポレーションキュベット 0.2cm 2,500個 ¥650,000165-2093B05 エレクトロポレーションキュベット 0.1cm 2,500個 ¥650,000165-2091B10 エレクトロポレーションキュベット 0.4cm 5,000個 ¥1,000,000165-2092B10 エレクトロポレーションキュベット 0.2cm 5,000個 ¥1,000,000165-2093B10 エレクトロポレーションキュベット 0.1cm 5,000個 ¥1,000,000
検査と試験キュベットには製造過程中に数種の検査と、品質保証のために実際にエレクトロポレーション試験が行われています。
殺菌キュベットはそれぞれフタをもち、γ線による3段階の殺菌が行われ、1個ずつ包装されています。
頑丈な構造キュベットは非常に高い電圧(電場)パルスがかかるため、丈夫なポリカーボネート製となっています。
徹底された洗浄キュベット内はクリーンルーム環境内での組立てと、2種類の洗浄繰り返しによってコンタミネーションの心配がありません。
スムーズな電極表面アルミニウム電極はサンプル全体に均一の電場がかかるよう、エッチングクリーニングが11段階行われています。
色による識別0.4cm、0.2cm、0.1cmキュベットはそれぞれ包装が色分けされています。
堅固なチャンバー継ぎ目のないチャンバーはサンプル漏れの可能性を排除し、またその堅固な構造のため電極間は常に平行に保たれます。
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遺伝子導入技術 355
パーティクルデリバリーシステム www.bio-rad.com/biolistics
パーティクルデリバリーシステム
多様な細胞と形質転換PDS-1000/Heは、ターゲット細胞より小さいマイクロキャリア
(微粒子)にDNAをコーティングし細胞に撃ち込むことにより形質転換します。今日、利用できるいくつかの形質転換法のうち、パーティクルデリバリー法は、細胞種に関わらず、広範囲な応用が期待できます。この方法は、従来の胚へのマイクロインジェクション法に比べ、操作が非常に簡単であり、時間がかかりません。このパーティクルデリバリー法は、撃ち込みの前後処理が少なくて済み、インタクトな培養細胞への形質転換にも便利な方法です。
最近のレポートでは、化学的方法、リポフェクション、エレクトロポレーションでさえ難しいセンシティブな哺乳動物細胞にPDS-1000/He を用いてin vitroで形質転換する方法が報告されています。また、より少量のDNAと細胞でトランジェントまたはステーブルな形質転換が可能です。初代のパーティクルデリバリー装置は火薬式でした。ヘリウムの方式を用いたPDS-1000/Heは、これよりも再現性、使用上の安全性に優れており火薬によるコンタミネーションがありません。また、組織に与えるダメージも非常に少なくなっています。一定の圧力で破裂するラプチャーディスクを用いて、マイクロキャリア(微粒子)の速度をコントロールしています。
2つのパーティクルデリバリーFactors AffectingTransformation Helios Gene Gunシステム PDS-1000/He*
状態 In situ, in vitro,in vivo, ex vivo
In vitro, ex vivo,in vivo(plants)
エリア 狭い(2cm2) 広い(40cm2)He圧 100-600psi** 450-2,200psi種類 動物:皮膚、器官
培養細胞(マウス、ウサギ、魚など)
動物:培養細胞(付着性動物細胞、
植物細胞)植物:葉、分裂組織 植物:卵、藻類、菌類、
植物、バクテリア酵母、バクテリア、その他微生物酵母、バクテリア、その他微生物オルガネラ、葉緑体、ミトコンドリア
詳しい情報はwww.bio-rad.com/genetransfer/をご覧ください。 * この製品を導入される場合は高圧ガス保安法に関する届出が必要です。 ** 高圧ガス保安法の規制に基づき、560psi以下でご使用ください。本装置は高圧ガスを取扱うため、各都道府県への「高圧ガス保安法」に基づく届出(または許可等)が必要となります。 また、移設する際も、納品時と同様の届出が必要になる場合がございます。
ご購入にあたっては、設置条件およびご使用上の注意点等をお問い合わせください。
Gas
Sample
Helios Gene Gun System Particle Delivery Method
DNA coated microcarrier
For More Information Web: www.bio-rad.com/biolistics Request or download bulletin: 5443
356 遺伝子導入技術
パーティクルデリバリーシステム www.bio-rad.com/biolistics
Helios® Gene Gun システム
Helios Gene Gunシステムは多彩な目的細胞にin vivoにて迅速に直接撃ち込むために独特なハンドヘルドタイプの銃身部を持ちます。細いチューブ内壁に目的細胞に導入するDNAもしくはRNAをコーティングした金粒子を付着させそれをヘリウム圧にて撃ち込みます。専用のチュービングプレップステーション及びチュービングカッターにより一度に約40のサンプルカートリッジが作製できます。サンプルカートリッジホルダーには一度に最大12のサンプルカートリッジが装着できます。必要に応じて連続に撃ち込みを行うことや、ターゲット部を変えて撃ち込むことが可能です。
Helios Gene Gunシステムを用いて遺伝子導入を行うことにより、in vivoをターゲットとした新しく幅広い研究の可能性が広がります。この可能性は遺伝子治療(特にガン治療、傷の治療および感染症)を研究する上で特に有効と考えられています。
植物への応用としては茎頂組織や葉のin vivoトランスフォーメーションなどが行われています。
またDNAワクチン(Genetic Immunization)の分野では皮膚に直接撃ち込むことによりDNA量を少なく(μgオーダー)手間のかかるタンパク質精製の過程が省けます。体液性免疫や細胞媒介性免疫においてはこの技術が動物において試みられています。
Helios Gene GunシステムはPDS-1000/Heと同様にBiolistic技術をもとに開発された、パーティクルデリバリーシステムである。DNAをコーティングした金粒子をヘリウムガス圧力によって加速し目的の細胞へ撃ち込む。
Ordering Informationカタログ番号 品名 価格165-2431J2 Helios Gene Gunシステム(100/120V 50/60Hz用) ¥6,400,000
構成内容:「Helios Gene Gunキット」
Helios Gene Gun(1)、カートリッジエクストラクターツール(1)、カートリッジホルダー(5)、交換用バレルライナー(5)、O-リング(5)、電池9V(1)「ヘリウムホースアッセンブリー」
「ヘリウムレギュレーター」(GA580フィメールフィッティング プレッシャーリリーフ/バルブ付)、最大圧2,600psi(1)「チュービングプレップステーション(100/120V)」チュービングプレップステーション(1)、3/16"メールルアー(2)、チュービングサポートシリンダー(1)、1/8"レンチルアー(2)、パワーコード(1)、レンチ(1,5/64")、O-リング(5)、シリンジホルダー(1、10cc用)、N2レギュレーターホース(Nalgene 12ft)
「シリンジキット」シリンジアダプターチュービング(5ft、0.104"ID×0.192"OD)、シリンジ10cc(5)、1/8"フィーメールルアーフィッティング(5)「チュービングカッター」チュービングカッター(1)、レザーブレード(10)「Helios 条件設定キット」0.6μm金粒子(0.25g)、1.0μm金粒子(0.25g)、1.6μm金粒子(0.25g)、PVP(0.5g、MW360,000)
Helios Gene Gun 関連製品165-2424 Helios Gene Gun用条件設定キット ¥110,000
構成内容:0.6μm金粒子(0.25g)、1.0μm金粒子(0.25g)、1.6μm金粒子(0.25g)、Heliosカートリッジキット(1)
165-2262 PDS/Helios用マイクロキャリアパッケージ0.6μ金粒子、0.25g ¥55,000165-2263 PDS/Helios用マイクロキャリアパッケージ1.0μ金粒子、0.25g ¥55,000165-2264 PDS/Helios用マイクロキャリアパッケージ1.6μ金粒子、0.25g ¥55,000165-2440 Helios Gene Gun用カートリッジキット ¥29,000
構成内容:PVP(MW360,000、0.5g)、カートリッジバイアル(5)、乾燥剤(5)、ゴールドコート用チューブ(50ft)
165-2441 Helios Gene Gun用ゴールドコート用チューブ(50ft) ¥25,000
For More Information Web: www.bio-rad.com/helios Request or download bulletins: 5443 and 5446
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遺伝子導入技術 357
Helios Gene Gunシステムご使用に関してHelios Gene Gunシステムは、高圧ガスを使用するため高圧ガス保安法の対象となります。以下の点を遵守していただくことにより、高圧ガス保安法で定める“適用除外”となります。
● 本体へは、ヘリウムガス以外を供給しないでください。 ● ヘリウム供給元へ接続するレギュレーターの2次圧(出力)を1Mpa未満にしてください。 ● 全ガス漏洩時、実験室の酸素濃度が18%未満にならない環境でご使用ください。(10m3のボンベをご使用の場合は、目安として60m3以上の容積が必要となります)
● 実験室には十分な換気設備を備え、ガス漏洩時、ガスが滞留しないようにしてください。 ● 弊社納品後のシステムは、構成品の除去や入れ替え、改造など行わないでください。
Ordering Informationカタログ番号 品名 価格スペアパーツ165-2416 Helios Gene Gun用O-リング 5個 ¥3,000165-2417 Helios Gene Gun用バレルライナー 5個 ¥12,000165-2426 Helios Gene Gun用カートリッジホルダー 5個 ¥22,000165-2435 Helios Gene Gun用カートリッジエクストラクターツール ¥3,000
165-2475 Helios Gene Gun用Diffusion Screen 5個 ¥11,000
※Helios Gene Gunにはこの他に別途購入品(ヘリウムガス、窒素ガス、窒素レギュレーター等)が必要です。詳細はお問い合わせください。
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358 遺伝子導入技術
PDS-1000/He™ and Hepta™ システム
PDS-1000/Heは、減圧装置とヘリウムの圧力を用いて、目的の細胞へマイクロキャリアを効果的に加速して撃ち込む装置です。
撃ち込み前にチャンバーのドアを閉め、チャンバー内を陰圧にします。これは、DNAでコーティングしたマイクロキャリアの空気抵抗を抑えるために必要で、安全インターロックになっています(この装置は、チャンバー内が陰圧にならないと作動しません)。
“Fire”スイッチを押し、ヘリウムガスがメーターバルブで調整した目盛りまで上部シリンダー内に流れ込みます。ガスは、設定したラプチャーディスクが破裂圧力に到達するまで送られます。破裂により、ヘリウムガス衝撃圧力が発生し、マイクロキャリアアッセンブリーに伝わります。
この衝撃圧力はプラスチックのマクロキャリア上のDNAコーティングしたマイクロキャリアをターゲット細胞の方向へ移動させます。
マクロキャリアアッセンブリーとターゲットサンプル間にストッピングスクリーンが取り付けられており、発射されたプラスチックディスク(マクロキャリア)はこのスクリーンで停止し、マイクロキャリアのみスクリーンを通過して、ターゲット細胞へ撃ち込まれます。
For More InformationWeb: www.bio-rad.com/pds1000 Request or download bulletins: 5443 and 5447
PDS-1000/He HeptaアダプターPDS-1000 HeptaアダプターはPDS-1000/Heと接続することによって、従来のPDS-1000システムより、一度に7〜10倍の多くの細胞へ導入することが可能です。
注意: 本製品を導入される場合は高圧ガス保安法に関する届出が必要です。現在、所有されているPDSシステムに、Heptaアダプターを導入される場合も、新たに届出が必要です。
● パーティクルデリバリー法なので、リポフェクションのように導入後の細胞毒性がありません。
● C. elegansの研究で、多数の実績があります。
● ストッピングスクリーン以外の消耗品は標準システムと共通です。
Bombardment Parameters*Cell Type Vacuum, " Hg Target Distance, cm Helium Pressure, psi Particle Size
Yeast 28 6 1,300 0.6μm gold
Algae 29 6 1,300 0.6μm gold
Plant
Embryos 28 6 1,300 1.0μm gold
Callus or cell cultures 28 9 1,100 1.0μm gold
Subcellular organelles 28 6 1,300 0.6μm gold
Animal
Tissue cultures 15 3 1,100 1.6μm gold
Tissue sections 25 9 1,100 1.6μm gold
* Recommended settings as starting parameters for bombardment of a variety of cell types. Many factors affect bombardment efficiency, but most users will find it sufficient to optimize the major variables individually, then test their interactions on a limited scale.
Heptaアダプター PDS-1000/He装置
PDS-1000/Heの作動方式図解矢印は、ヘリウムの流れる方向。
Gas acceleration tube
Rupture disk
Microcarrier launch assembly
Stopping screen
Target cells
Target shelf
Macrocarrier
DNA-coated microcarriers
マイクロキャリアランチアッセンブリー、ヘリウムプレッシャーゲージ
(上部)装備のメインチャンバー、中央のゲージ(装置左側)は、チャンバー内の陰圧をモニターし、下方2つのノブは、吸引とベント速度を調整。
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遺伝子導入技術 359
Ordering Informationカタログ番号 品名 価格PDS-1000/He* 165-2257J1 PDS-1000/He ¥5,400,000165-2258J1 PDS-1000/He Hepta システム ¥7,200,000165-2225 PDS-1000/He Hepta アダプター ¥1,800,000Expert Careプラン(通常の無償保証1年間に加え、さらに保証期間を延長するプランです)SVCEC020-01 PDS-1000/He 保証延長 1年 ¥250,000SVCEC020-02 PDS-1000/He 保証延長 2年 ¥465,000PDS-1000/He 消耗品165-2278 PDS-1000/He条件設定キット500回 ¥175,000
構成内容:1.0μm金粒子および1.6μm金粒子0.25g8種類のラプチャーディスク100枚マクロキャリア500枚ストッピングスクリーン500枚
165-2280JA PDS-1000/Heスタンダードプレッシャーキット(1.0μ金+450psi** ラプチャーディスク)500回 ¥145,000構成内容:1.0μm金粒子0.5g、450psi** ラプチャーディスク500枚マクロキャリア500枚ストッピングスクリーン500枚
165-2281JA PDS-1000/Heスタンダードプレッシャーキット(1.0μ金+650psi** ラプチャーディスク)500回 ¥145,000165-2282JA PDS-1000/Heスタンダードプレッシャーキット(1.0μ金+900psi** ラプチャーディスク)500回 ¥145,000165-2283JA PDS-1000/Heスタンダードプレッシャーキット(1.0μ金+1,100psi** ラプチャーディスク)500回 ¥145,000165-2284JA PDS-1000/Heスタンダードプレッシャーキット(1.0μ金+1,350psi** ラプチャーディスク)500回 ¥145,000165-2285JA PDS-1000/Heスタンダードプレッシャーキット(1.0μ金+1,550psi** ラプチャーディスク)500回 ¥145,000165-2286JA PDS-1000/Heスタンダードプレッシャーキット(1.0μ金+1,800psi** ラプチャーディスク)500回 ¥145,000165-2287JA PDS-1000/Heスタンダードプレッシャーキット(1.0μ金+2,000psi** ラプチャーディスク)500回 ¥145,000
165-2290JA PDS-1000/Heスタンダードプレッシャーキット(1.6μ金+450psi** ラプチャーディスク)500回 ¥150,000構成内容:1.6μ金0.5g、450psi** ラプチャーディスク500枚、マクロキャリア500枚、ストッピングスクリーン500枚
165-2291JA PDS-1000/Heスタンダードプレッシャーキット(1.6μ金+650psi** ラプチャーディスク)500回 ¥150,000165-2292JA PDS-1000/Heスタンダードプレッシャーキット(1.6μ金+900psi** ラプチャーディスク)500回 ¥150,000165-2293JA PDS-1000/Heスタンダードプレッシャーキット(1.6μ金+1,100psi** ラプチャーディスク)500回 ¥150,000165-2294JA PDS-1000/Heスタンダードプレッシャーキット(1.6μ金+1,350psi** ラプチャーディスク)500回 ¥150,000165-2295JA PDS-1000/Heスタンダードプレッシャーキット(1.6μ金+1,550psi** ラプチャーディスク)500回 ¥150,000165-2296JA PDS-1000/Heスタンダードプレッシャーキット(1.6μ金+1,800psi** ラプチャーディスク)500回 ¥150,000165-2297JA PDS-1000/Heスタンダードプレッシャーキット(1.6μ金+2,000psi** ラプチャーディスク)500回 ¥150,000
165-2326 PDS-1000/Heラプチャーディスク 450psi** 100枚 ¥23,000165-2327 PDS-1000/Heラプチャーディスク 650psi** 100枚 ¥23,000165-2328 PDS-1000/Heラプチャーディスク 900psi** 100枚 ¥23,000165-2329 PDS-1000/Heラプチャーディスク 1,100psi** 100枚 ¥23,000165-2330 PDS-1000/Heラプチャーディスク 1,350psi** 100枚 ¥23,000165-2331 PDS-1000/Heラプチャーディスク 1,550psi** 100枚 ¥23,000165-2332 PDS-1000/Heラプチャーディスク 1,800psi** 100枚 ¥23,000165-2333 PDS-1000/Heラプチャーディスク 2,000psi** 100枚 ¥23,000
165-2262 PDS/Helios用マイクロキャリアパッケージ、0.6μ金粒子0.25g ¥55,000165-2263 PDS/Helios用マイクロキャリアパッケージ、1.0μ金粒子0.25g ¥55,000165-2264 PDS/Helios用マイクロキャリアパッケージ、1.6μ金粒子0.25g ¥55,000165-2335 PDS-1000/He用マクロキャリア、500枚 ¥36,000165-2336 PDS-1000/He用ストッピングスクリーン、500枚 ¥25,000165-2226 PDS-1000/He Hepta用ストッピングスクリーン、50枚 ¥93,000165-2322 PDS-1000/Heマクロキャリアホルダーパッケージ、5個 ¥29,000
* このシステムには別途購入品が必要です。また、消耗品は附属されておりません。 ** 1psi≒0.07kg/cm2≒6.9kPa本装置は高圧ガスを取扱うため、各都道府県への「高圧ガス保安法」に基づく届出(または許可等)が必要となります。 また、移設する際も、納品時と同様の届出が必要になる場合がございます。
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360 遺伝子導入技術