GENEROS: PSEUDOMONAS y BURKHOLDERIA.
CLASIFICACION RECIENTE (1994 Manual de Bergey´s)
FAMILIA PSEUDOMONADACEAEFAMILIA BURKHOLDERIACEAE (1993)
CARACTERÍSTICAS PRINCIPALES DE PSEUDOMONAS SPP. Y BURKHOLDERIA SPP. :
1. Bacilos de tamaño mediano de 0.5 a 1.0 x 1.5- 5.0 m
Gramnegativos rectos o ligeramente curvos 2. Son aerobios estrictos 3. Mayoría son catalasa y citocromo-oxidasa positivos 4. Pseudomonas especies y Burkholderia pseudomallei
son MÓVILES 5. Burkholderia mallei es INMOVIL y requiere 1% de
glicerol en el medio de cultivo para su óptimo crecimiento
6. Utilización de aazúcares por vía oxidativa 7. La mayoría especies de Pseudomonas producen
pigmentos solubles 8. No requieren de medios enriquecidos y crecen en
MacConkey Agar 9. Usados biorremediación. 10. Pseudomonas producen pigmentos.
ESPECIES DE PSEUDOMONAS DE INTERÉS VETERINARIO
HOSPEDADORES ENFERMEDAD
P. aeruginosa
Animales domésticos "oportunista“
Genera Infecciones piogénicas
*P. mallei
Equinos Muermo – granulomas purulentos piel y TR
(Asia, Australia y África. Zoonosis.
*P. pseudomall
ei
Animales domésticosMELIOIDOSIS (Falso
Muermo)Nódulos y abscesos en
órganosZoonosis* P. mallei y P. pseudomallei están reclasificadas en el Género
BURKHOLDERIA
Otras especies de Pseudomonas
saprofitas:
P. (Burkholderia) cepacia esta presente en infecciones humanas con fibrosis quisticas
P. stutzeri : rara vez causa infecciones en animales
P. fluorescens puede causar lesiones en reptiles y peces
HABITAT
Ampliamente distribuidos en la naturaleza y mundialmente
Son saprofitos de vida libre en suelo, agua y vegetación en descomposición
P. aeruginosa también puede encontrarse en piel, membranas mucosas y heces de animales
RESISTENCIA
1. Presencia de pus los protege 2. Sobreviven en desinfectantes de amonio
cuaternario, compuestos yodados y fenólicos, el cloro es efectivo
3. Humedad adecuada puede sobrevivir por largos periodos en llaves de agua, utensilios, pisos, instrumentos, humidificadores y equipos para apoyo respiratorio
4. Son susceptibles al calor 550C por una hora y al oxido de etileno
CARACTERÍSTICAS CULTURALES
1. Son aerobios obligados (O/F) (+/-)
2. P. aeruginosa puede utilizar el nitrato en lugar de oxigeno molecular como aceptor final de electrones (RESPIRACIÓN ANAEROBIA)
3. Crecen en agar sangre, tripticasa soya agar y/o agar MacConkey a 37º C por 24 – 48 horas
4. Muchas especies crecen mejor 20 - 30ºC (P. fluorescens)
5. En agar sangre, colonias de P. aeruginosa son grandes,
grises, planas, de bordes irregulares de 3 a 5 mm
6. Producen hemólisis alrededor de la colonia en AS7. Presentan un aroma afrutado (grappe-like)8. Crece en MC sin utilizar la lactosa
CARACTERÍSTICAS BIOQUÍMICAS Oxidasa - positivas excepto B. mallei Degradan Glucosa por vía oxidativa - Prueba
O/F. Reducen Nitratos a Nitritos y nitrógeno
molecular Indol negativoBUSCAR CUADRO PARA DIFERENCIAR P. aeruginosa de otras Pseudomonas
saprofitas
9. P. pseudomallei colonias redondas, convexas que
al envejecer son granulares de color pardo y no produce pigmentos
PSEUDOMONA AERUGINOSA
1. Son bacilos Gramnegativos, anaerobios facultativos 2. Producen dos pigmentos hidrosolubles: Uno azul verdoso soluble en cloroformo y agua denominado PIOCIANINA y otro verde amarillento PIOVERDINA. FLUORESCEÍNA o pioverdina no soluble en cloroformo. 3. En ocasiones, una cepa puede producir pigmento rojo (piorrubina) o pigmento pardo negruzco (piomelanina) 4. Patógeno oportunista. 5. Resistente a los ANTIBIOTICOS comunes.
FACTORES DE VIRULENCIA
1. Pili y flagelos, que facilitan la adherencia a células epiteliales susceptibles del tracto respiratorio (COLONIZACION)
2. Colonizan epitelio superficial y también tejido profundo (caso: quemaduras y traumatismos graves)
3. Cápsula polisacáridica: antifagocitica4. Endotoxina (LPS) y Lípido A: median los
efectos biológicos del síndrome séptico: fiebre, shock, leucopenia, coagulación intravascular diseminada
5. Exotoxina A: producida por cepas patógenas que inhiben la síntesis de proteínas en células eucarióticas, causando necrosis
6. Exotoxina S: no muy claro mecanismo de acción, pero inhibe tambien la síntesis proteica
7. Fosfolipasa C destruye la membrana
citoplasmática (que actua como surfactante pulmonar)
, causando atelectasia
8. Proteasas: involucradas en invasión y
destrucción de tejido
Leucocidinas: inhiben la función de neutrófilos y
linfocitos 9. Produce una Enterotoxina que causa diarrea en infecciones intestinal
|0. Hemolisinas que actúan en
sinergismo con Fosfolipasa C para descomponer
lípidos y lecitina facilitando la destrucción tisular
||. Producen Piocianinas que suprimen el
desarrollo de otras bacterias, producen daños
oxidativos en los tejidos
PATOGENICIDAD
PATOGENO OPORTUNISTA
1. Contaminante frecuente en procesos patológicos con otras bacterias 2. Patógeno oportunista en tejidos debilitados en caso de quemaduras, heridas, pacientes con neoplasias, débiles e inmunodeficientes y en animales jóvenes 3. Reemplaza a bacterias que han sido eliminadas de procesos infecciosos por tratamiento antimicrobianos y puede causar septicemias mortales 4. Rara vez infecta a individuos sanos.
NATURALEZA ANTIGENICA
Especie muy heterogénea, con 20 serotipos basados en diferentes antígenos "O“
Pueden tipificarse por bacteriófagos y producción de piocianinas (bacteriocinas)
DIAGNÓSTICO LABORATORIAL
MUESTRAS: 1. Orina, pus, tejidos infectados, hisopados con exudado o raspado de superficie tisulares infectadas 2. Examen directo de la muestra con Tinción de Gram es de poca utilidad
1. Sembrar en medios simples: agar nutItivo 2. Crecen en agar sangre / MacConkey agar a 370C en
aerobiosis x 24- 48 h 3. Colonias irregulares grandes, planas, translúcidas,
de 3 a 5 mm, y pueden mostrar un brillo 4. Azul metálico (Piocianina).5. Olor a frutas (aminoacetofeno)6. Hemólisis Beta en AS7. Variación colonial: Forma S (lisa y brillante); Forma
R ( rugosa y seca); y Forma M (mucoide)8. MacConkey agar forma colonias grandes pálidas
( lactosa negativo) con pigmentación verde azulada9. Frotis de colonias: bacilos gramnegativos, tamaño
mediano
AISLAMIENTO Y CULTIVO DE PSEUDOMONA AERUGINOSA
1. Producción de pigmentos hidrosolubles: PIOCIANINA (azul), PIOVERDINA llamada “fluoresceína” (amarillo), piorrubina (rojo oscuro) y piomelanina (marrón oscuro) según medio de cultivo empleado 2. Movilidad por flagelos polares3. Licuefacción de gelatina4. Peptoniza la leche tornasolada
RESUMEN DE LA IDENTIFICACION
5. Utiliza citrato fuente de carbono.6. Indol negativo.7. Oxidasa positiva.8. Reduce Nitratos a Nitritos y a nitrógeno Molecular.9. Prueba O/F positiva para Oxidación de la glucosa
Elaborado por: Profa . Zoraida M. Nava Lotuffo. M,V. MSc.