Análisis de compuestos traza en muestras ambientales
Contaminación Ambiental
Presencia de compuestos químicos específicos,Presencia de compuestos químicos específicos, naturales o antropogénicos, que provocan efectos nocivos sobre la salud o los ecosistemasnocivos sobre la salud o los ecosistemas
QuímicosQuímicos Biológicos Sanitarios Sanitarios Legislativos, etc...
Análisis AmbientalOrigen (Caracterización de fuentes)Transporte y distribuciónP d d d ió bióti / biótiProcesos de degradación biótica o/y abiótica (¿nuevos contaminantes tóxicos?)
Destino final (bioacumulación, etc)Destino final (bioacumulación, etc)Efectos Límites legales
Identificación y Análisis de compuestosquímicos en el medio ambiente
Límites exigidos por la normativaLímites exigidos por la normativaNo Título Compuestos orgánicos Límites (ug/L) 75/440/EEC Aguas superficiales Cyfluthrin 0.001 Hidrocarburos 50-1000
Permerthrin 0.01
ppb
Permerthrin 0.01 Plaguicidas 1-5.0
Fenoles 1-100
Hidrocarburos aromáticos policíclicos (PAHs) 0.2-1.0
80/778/EEC Agua para consumo humano Plaguicidas individuales 0.1 Plaguicidas totales 0.5
Benzo 3 4 pireno 0 01 Benzo-3,4-pireno 0.01 Tetracloruro de carbono 3.0 Tricloroetano 30.0 Tetracloroetano 10.0 Trihalometanos 100.0 Fenoles 0.5
PAH 0 2 PAHs 0.276/659/EEC Aguas con peces Cyfluthrin 0.001
Flucofuron 1.0
PCSDs i PAD 0.05
Permethrin 0.01
Sulcofuron 25.0
76/464/EEC Substancias peligrosas Lista 1 Tetracloruro de carbono 12.0 Cloroformo 12.0
DDT 0.01 Endrin 0.005 Aldrin 0.01 Dieldrin 0.01 Isodrin 0.005 Hexaclorobenceno 0.03 Hexaclorobutadieno 0.01 Lindano 0.11 Pentaclorofenol 2.0
1 2-dicloroetano 10 0 1,2-dicloroetano 10.0 Percloroetileno 10.0
Triclorobenceno 0.1
Tricloroetileno 10.0
Determinación de compuestos orgánicos trazaDeterminación de compuestos orgánicos traza
Hidrocarburos alifáticos
Hidrocarburos aromáticos
Aldehidos Aldehidos
Alcoholes y fenoles
Anilinas y benzidinasy
VOCs (Disolventes clorados)
SOCs (PCBs, dioxinas)
Plaguicidas apolares y polares
Ftalatos i adipatos
Tensioactivos Tensioactivos
...y muchos más
Análisis Ambiental
l i id d Matrices complejasSelectividad Matrices complejas
Compuestos con un gran intervalo de
Universalidadgran intervalo de propiedades fisico‐químicas
Sensibilidadquímicas.
Analitos a nivel de traza ( b t)(ppb, ppt)
ál íf l dAnálisis específicos vs multiresiduos
• Determinación de un solo compuesto o grupo de
• Determinación del máximo número de contaminantescompuesto o grupo de
compuestos en una matriz ambiental específica
número de contaminantes con propiedades físico‐químicas diferentesp q– Metabolitos
– Contaminación global
– ......EPA Priority PollutantsProtocols
Análisis AmbientalToma de muestra
Tratamiento previo% Tiempo de análisis
P ifi ió
ExtracciónToma muestra
Tratam muestra7 %6 %
6-20 %Purificación(Clean-up)
Tratam. muestra
Análisis
Tratam. datos
68 %
Análisis InstrumentalGC
HPLC
Tratam. datos
HPLCGC-MS; HPLC-MS
Cuantificación
Compartimentos medioambientales
Análisis AmbientalToma de muestra
Tratamiento previo
Extracción
Purificación(Clean-up)
Análisis InstrumentalGC
HPLCHPLCGC-MS; HPLC-MS
Cuantificación
Análisis Ambiental
Toma de muestra
Tratamiento previo
Toma de muestra
Eliminación agua
Sedimentos, suelos
ParticuladoEliminación agua
Agua
ParticuladoEliminación agua
Aire
Eliminación agua
Organismos
Eliminación material gruesoTamizado (>250 µm, 63 µm)
Eliminación agua Eliminación agua
Digestión ácida o alcalina
Homogeneizar
Homogeneizar
Homogeneizar
LiofilizaciónSecado en horno (35‐40 oC)
Eliminación agua
Secado en horno (35 40 C)Tratamiento con desecantesPre‐extracción con disolventes orgánicos miscibles en aguaorgánicos miscibles en agua
Análisis Ambiental
Tratamiento previo
Toma de muestra Contaminantes orgánicos
i l ió di l á i
Extracción
Tratamiento previo Disolución con disolventes orgánicos(hexano, diclorometano, tolueno, acetona,…)
Matrices acuosas
Extracción con fluidos
Matrices sólidas
Líquido-Líquido Extracción sólido-líquidoExtracción en fase sólida
Extracción con fluidossupercríticos (SFE)
Extracción sólido-líquido
Ultrasonidos Sohxlet Extracción asistida por microondas(MAE)
Extracción con disolventes acelerada(ASE)
Matrices acuosas. Extracción líquido‐líquido
Se extrae el total de componentes ( i l d di l )(particulado+disuelto)
Consumo de grandes cantidades de disolvente– Problema medioambiental
– Problema de blancos
– Paso de eliminación del disolvente pérdidas
Protocolos largosg
Extracción en fase sólida (SPE)
Paso a través de un adsorbente de sílica modificada químicamente (cadenas hidrocarbonadas C8 y C18, polímeros, inmunoadsorbentes)
Se extraen solo los componentes disueltos (filtrar previamente)p ( p ) Muy versátil Rápida y sencilla (automatización) Relativamente barata Relativamente barata Bajo consumo de disolventes A considerar :
o Volumen de rupturao Capacidado Limpiezao Limpieza
Adsorbentes en SPE
Identificar y cuantificar múltiples familias de contaminantes con un intervalo amplio de propiedadescontaminantes con un intervalo amplio de propiedades físico‐quimicas y estructuras químicas
Fases sólidas de alquilsilica o poliméricasFases sólidas de alquilsilica o poliméricas
Identificar y cuantificar un número limitado de compuestos de una misma clase químicacompuestos de una misma clase química
Molecularly imprinted polymers (MIPs)
Fases sólidas de immunoafinidadFases sólidas de immunoafinidad
Ot té i d t ió d t iOtras técnicas de extracción de matrices líquidas
• Microextracción en fase sólida (SPME)– Uso de una fibra recubierta de un polímero adsorbente– Uso de una fibra recubierta de un polímero adsorbente que se pone en contacto con la muestra acuosa, posteriormente se puede introducir directamente en el sistema cromatográficosistema cromatográfico
• Extracción con barra agitadora adsorbente.– Semejante a la anterior pero el material adsorbenteSemejante a la anterior pero el material adsorbente recubre una barra agitadora donde se adsorben los compuestos de interés. Posteriormente se realiza la desorción directamente en el cromatógrafodesorción directamente en el cromatógrafo.
• Sistemas con membranas semipermeables (SPMDs)( )
Métodos de extracción de matrices sólidas
Convencionales Novedosos
Extracción líquida Soxhlet Ultrasonidos SFE MAEASE
Disminuir la cantidad de disolventeExtracciones más rápidasMejorar la cuantificación (mayores recuperaciones, j ( y p ,
más reproducibilidad, límite de detección menores)AutomatizaciónSelectividad (menor importancia)
Manipulación de las propiedades físicas del agente extractante (P, T)( p ) g ( , )Aplicación de sorbentes selectivos
Extracción en SoxhletExtracción en Soxhlet
R f i tRefrigerante
Muestra(Cartucho deCelulosa)
100-200 ml disolvente
1-200 gr
Calor
Diagrama de fases
Intervalo de operación de P y T del agente extractante para las diferentes SFEg ptécnicas de extracción sólido‐líquidoASE, accelerated solvent extractionMAE Microwave assisted extraction
PcSFE
MAE, Microwave assisted extractionSFE, supercritical fluid extractionPc, presión críticaTc temperatura crítica
Soxhlet
ASEMAE
Tc, temperatura críticaSonicación Tc
Fluidos Supercríticos
•DIFUSIVIDAD ALTA•VISCOSIDAD BAJA•TENSIÓN SUPERFICIAL NULA
GAS
•TRANSFERENCIA DE MASA RAPIDA•BUENA PENETRACION EN MATERIALES POCO POROSOS•BUENA PENETRACION EN MATERIALES POCO POROSOS•BUENA SOLUBILIZACIÓN COMPUESTOS DE INTERES
•ALTO PODER SOLVATANTE LIQUIDO
D id d lt i bl f(P T) E t iDensidad alta y variable f(P,T) ExtraccionesSelectivas
CO (Tc 31 1 oC Pc 72 9 atm )CO2 (Tc= 31.1 oC, Pc= 72.9 atm.)Analitos polares Modificadores
Técnicas de extracción de compuestos orgánicos en matrices sólidas
Soxhlet Sonicación SFE MAE ASE
Tiempo p Disolventes
Costes Automatización
Automatización Dificultad de optimización
optimización
Robustez
Análisis AmbientalToma de muestra
Tratamiento previo
Extracción
Purificación(Clean-up)
Análisis InstrumentalGC
HPLCHPLCGC-MS; HPLC-MS
Cuantificación
Análisis Ambiental
Toma de muestra
Tratamiento previo
Toma de muestra
Interferencias más importantes:
Extracción• Lípidos• Azufre• Carotenoides
Purificación(Clean-up)
• Carotenoides• Pigmentos...
Cromatografia de adsorción en columna
Ataque ácido o básicoAtaque ácido o básico
Extracción en fase sólida (SPE)
Clean up del extracto
Cromatografía de columna líquido‐sólido
apolarFase estacionaria polar
Fase móvilPolaridad creciente
– Adsorbentes más comunes:• Sílice (uso general)• Alúmina • Florisil (Clean‐up de plaguicidas organoclorados)• Poliestireno, poliacrilamida, p• Geles para GPC (Por ej.: Sephadex LH‐20, Bio‐Beads SX) (Clean‐up de muestras con alto contenido lipídico)
• Inmunoadsorbentes
Eliminación de azufre
Reacción con mercurio
Sulfuro de mercurio
Reacción con cobre
Sulfuro de cobre
Reacción con sulfito de sodio en hidróxido de Reacción con sulfito de sodio en hidróxido de tetrabutilamonio
Concentración del analito
Evaporación del disolvente a presión reducida (rotavapor)
K d D i h Kuderna‐Danish
Corriente de nitrógeno
Análisis AmbientalAnálisis Ambiental
Tratamiento previo
Toma de muestra
Extracción
p
Purificación(Clean-up)
Análisis IntrumentalGC
HPLCGC-MS; HPLC-MS
Sistemas de Cromatografía
Volatilidad
Cromatografíade gases (GC)
Cromatografía
de gases (GC)
g fLíquida (HPLC)
Polaridad(Solubilidad en agua)
Baja Alta
Cromatografía de gases
1-2 µl RegistradorIntegradorGas portador
Inyector
IntegradorOrdenador
250-300 oC
yecto
Horno + DetectorHorno + columna
C t fí dCromatografía de gases
Los analitos se evaporan a temperatura alta (250 300oC) y se hacenLos analitos se evaporan a temperatura alta (250‐300oC), y se hacen pasar por una columna cromatográfica. Separación isoterma o por gradiente de temperatura.
Fase móvil gas inerte: He, H (gas portador, carrier) Columnas capilares de sílice fundida (0,25 mm d.i. x 25‐50 m; espesor
de capa 0.25 µm) Normalmente con la fase líquida (WCOT) Fases más utilizadas: silicones
OV 1: Metilsilicones OV‐1: Metilsilicones OV‐17:metilfenilsilicones OV‐210: trifluoropropilsilicones
Detectores universales (FID) y selectivos: ECD, FPD, NPD.
Fases estacionariasPolidimetilsiloxano
Polietilenglicol
Cromatografía de gases. Detectores Detector Universal
Detector de ionización de llama (FID)o Universalo Destructivoo Estable y linealy
Detectores Selectivos Detector de captura de electrones.
o Para compuestos con grupos electronegativos (halogenados,..)o No destructivoo Rango lineal estrechog
Detector de nitrógeno‐fósforoo Para compuestos con N y Po Destructivoo Destructivoo Moderadamente lineal
Detector fotométrico de llama.C t S S (dif t filt )o Compuestos con S y Sn (diferentes filtros)
o Destructivoo No lineal
Detector de Ionización de Flama (FID)Consiste en una llama deConsiste en una llama dehidrógeno‐aire por la que pasael efluente de la columna.El paso del efluente de laEl paso del efluente de lacolumna por esta llama ionizalas moléculas orgánicas.Los iones producidos se recogenLos iones producidos se recogenen un electrodo de polarizaciónnegativa y dan lugar a una señaleléctricaeléctrica.El FID es muy sensible y es eldetector más ampliamenteutilizado su desventaja es queutilizado, su desventaja es quedestruye la muestra.
Empleado para hidrocarburos, poco sensible a compuestos muy oxidados
Detector de Nitrógeno Fósforo, NPD
Detector FID con una pastilla de metal alcalino (Rubidio oCesio)Cesio)
También conocido como detector de ionización de flamaTambién conocido como detector de ionización de flamaalcalino, detector de ionización (TID), detector termoiónicode flama (FTD) o detector específico termoiónico (TSD).
Al calentar el material alcalino en la zona de la llama sedetectan selectivamente y con gran sensibilidad loscompuestos orgánicos que contienen fósforo y nitrógeno.
Detector de Captura de electrones (ECD)
Utiliza un emisor beta radioactivo
Detector de Captura de electrones (ECD)
Utiliza un emisor beta radioactivopara ionizar parte del gas portador ypara producir una corriente deelectrones entre un par deelectrones entre un par deelectrodos.Cuando las moléculas orgánicas quecontienen grupos funcionalescontienen grupos funcionaleselectronegativos, tales comohalógenos, fósforo y grupos nitro,pasan por el detector, capturanpasan por el detector, capturanalgunos de los electrones y reducen lacorriente medida entre los electrodos.Rango lineal limitado, sensible y noRango lineal limitado, sensible y nodestructivo
Empleado frecuentemente paracompuestos halogenados
Características Detectores
Detector Límite de d ó
Rango lineal Comentarios Tratamientoldetección g soluto
FID 10‐12 106‐107 Detector l
Destructivouniversal
ECD 10‐14 102‐103 Detector Selectivo
No destructivoSelectivo
FPD 10‐13 102 Detector Selectivo S,P
Destructivo
NPD 10‐8‐10‐14 105‐107 Detector Selectivo N,P
Destructivo
HPLC. Cromatografía líquida de alta resolución
• Generalmente en fase inversa: fase estacionaria de C8‐C18; fase móvil acuosa con acetonitrilo, metanol o etanol.
Ú– Útil para substancias:• alto peso molecular
• baja volatilidad
• lábiles, degradaciones térmicas
• polares Si son muy polares: cromatografía de par iónico o en fase normal (aminopropil, fases ó il di l t á i )móviles con disolventes orgánicos)
HPLC. Detectores
Detector de ultravioleta‐visibleDetector de ultravioleta visible
Detector de fluorescencia
Detector de batería de diodos (Diode‐array)
Baja selectividadBaja sensibilidad
Espectrometría de MasasEspectrometría de Masas
Identificación inequívoca de sustancias en matrices complejas (CG CL )
Selectividad
complejas (CG,CL...)
Análisis de sustancias con propiedades fisico‐químicas
l d dp p qdistintas (átomos a biopolímeros)
áli i i i
Universalidad
Análisis cuantitativos (límites de detección ppb, ppt)
Sensibilidadpp )
Espectrómetro de Masas
ió 6 8
Introducciónmuestra
Presión ~ 10-6-10-8 Torr
muestra
+ ++++
+
+ ++100 %
++++ M/Z
Fuente de iones (Ionización)
Analizador (Separación)
Detector de iones(Detección)
Acoplamiento GC/LC‐MSSeparación
Acoplamiento GC/LC‐MS
100p
cromatográfica100
%
Ionización2 00 4 00 6 00 8 00 10 00 12 00 14 00 16 00 18 00rt0
%
t (min)2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00 14.00 16.00 18.00
100 218
Análisis espectral
% 162
220
% 162
8315484
12398
164
165177 216
222284223 256 288
masa/carga100 150 200 250 300
0223 256 288
HAP. Análisis por CG‐EM (SIM)
TIC (SIM) +
+
Rango lineal :250 10 000 ng/ml (ppb) tR (min)Rango lineal :250-10.000 ng/ml (ppb)LDD (S/N =3) : 2,5 - 10,5 pg
R ( )
Sistemas de Introducción
GASES CROMATOGRAFIA GASES CAPILARGASES CROMATOGRAFIA GASES CAPILAR
Conexión directa
LÍQUIDOS LC, EC Interfases especialesDLI
MEMBRANA PB
CF‐FAB
SÓLIDOS SONDA DIRECTATSPAPcI
ESP (ionspray)
Interfases CL‐EM
INTRODUCEN MUESTRA
Haz de partículas (ParticleINTRODUCEN E IONIZAN
Introducción directa (DLI) Haz de partículas (Particle beam PB)
Cinta móvil (moving belt)
Introducción directa (DLI)
Termospray (TSP)
Bombardeo con átomos( g ) Bombardeo con átomos rápidos a flujo continuo (CF‐FAB)
Ionización a presión atmosférica (API)
Electrospray (ESP) Ionspray Ionización química a Ionización química a
presión atmosférica(APcI)
Sistemas de Introducción
ElectrosprayPeso Mol.
ElectrosprayIonspray
Particle APCI
CF-FAB
CG/EMParticleBeam
APCITermospray
Polaridad(Solubilidad en agua)
Baja Alta
CL‐EM. Aplicaciones descritas en la literatura
250
300
MBL
150
200
cio
ne
s
MBL
TSP
PB
50
100
150
Pu
bli
ca
c PB
ESP
APcI
0
50
79-80 81-82 83-84 85-86 87-88 89-90 91-92 93-94 95-96 97-98
Nº APcI
79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98
Años
W.M.A. Niessen, en: D. Barceló (Ed.), Applications of LC-MS in Environmental Chemistry. J. Chromatography Lib. Vol 59, Elsevier Sc. Amsterdam, Holanda (1996).
Métodos de ionización
Ionización por Impacto Electrónico (IE)I i ió Q í iIonización Química
Ionización Química Positiva Ionización Química Negativa Ionización Química Negativa Ionización Negativa por Captura de Electrones
Ionización/Desorción de CampoIonización/Desorción por PlasmaIonización por Bombardeo de Atomos Rápidos (FAB)Ionización MultifotónicaIonización Laser Asistida por Matriz (MALDI)I i ió Pl d A l i t I d ti (ICP)Ionización por Plasma de Acoplamiento Inductivo (ICP)
Métodos de ionización en EM
Impacto de electrones (70 eV).o Mucha energía, muchas fragmentaciones
o Universal
Ionización química negativa y positivao Técnicas de ionización suaves, poca fragmentación (ión molecular)
o Selectivas, compuestos electronegativos o electropositivos
o Método de ionización en HPLC‐EM
El cuadrupolo consiste de cuatro cilindros metálicos paralelosp pentre los que se forma un campo magnético, los iones con ciertarelación (m/z) pasan a través del cuadrupolo, el resto soneliminados El sistema trabaja en condiciones de alto vacío para eleliminados. El sistema trabaja en condiciones de alto vacío para eltransporte de los iones a través del analizador (10‐9 torr).
Avances recientes en las técnicas deAvances recientes en las técnicas de separación y detección
Cromatografía de gasesDesarrollo de nuevas fases estacionarias (separaciones quirales), contaminantes enantiómeros con diferente t i id d (b t i l d t i )toxicidad (beta‐ciclodextrinas)
Cromatografía de gases rápida
fí d bidi i lCromatografía de gases bidimensional
Sistemas de inyección de grandes volúmenes (100‐200 l)ul)
Cromatografía de gases bidimensional (GC x GC)Cromatografía de gases bidimensional (GC x GC)
Los componentes de una mezcla se separan mediante el uso de dos columnas cromatográficas de diferente selectividad.
A i t l té i dAvances recientes en las técnicas de separación y detección
Cromatografía de líquidosDesarrollo de nuevas fases estacionarias.
Fases estacionarias con partículas de tamaño < 2um (sistemas d Ult P f Li id Ch t h UPLC )de Ultra Performance Liquid Chromatography –UPLC‐)
Incremento de aplicaciones de “microbore LC”(columnas de diámetro interno de 1 mm en(columnas de diámetro interno de 1 mm en comparación con las columnas convencionales de 2‐4 mm)Mayor eficacia de separación
Mayor sensibilidad
Menor consumo de disolventes
Costes de análisis más bajos
Avances recientes en las técnicas de separación y detección
E t t í dEspectrometría de masas
Incremento del uso de la espectrometría de masas con analizador de tiempo de vuelo (Time‐f li h O S)of‐Flight, TOF‐MS).
Espectrometría de masas multidimensional (MS/MS MS )(MS/MS, MSn)
Espectrometría de masas de relación isotópica, b d 13C/12C 18O/16 15N/14Nsobre todo 13C/12C, 18O/16 y 15N/14N.
TOF MSTOF‐MS Convencionales (cuadrupolo, magnético y trampa de iones): usan Convencionales (cuadrupolo, magnético y trampa de iones): usan
un campo eléctrico o magnético para separar los iones con diferente m/z, velocidad de adquisición hasta 10 espectros/s
TOF mide el tiempo que un ión necesita para “viajar” a través de TOF mide el tiempo que un ión necesita para viajar a través de una región libre, los iones generados en la fuente se aceleran hacia el tubo de vuelo. Los tiempos de vuelo son del orden de los microsegundos, obteniéndose entre 100‐500 espectros/s.microsegundos, obteniéndose entre 100 500 espectros/s.Mayor resolución que los espectrómetros convencionales (cuadrupolos, trampa de iones < 1.000) aprox 5000, aunque menor que los espectrómetros magnéticos de alta resolución (>10.000)q p g
Proporciona el espectro de masas total de los compuestos al contrario de los magnéticos que trabajan en un rango de masas estrecho.
Velocidad de adquisición muy alta, mayor sensibilidad (técnica apropiada para GC x GC).
ANÁLISIS DE COMPUESTOS ORGÁNICOS VOLÁTILES (VOCs)
Técnicas
Headspace (espacio de cabeza)
Purge and Trap (Purga y Trampa)principales
g p g y p
Desorción con CS2
Microextracción en fase sólidaMicroextracción en fase sólida
Extracción térmica directa
Purga y Trampa
Purga del cartucho
Captación del aire
Primera desorción:desorción térmica de los cartuchos
Refocalización de los analitos en una trampa criogénica
Segunda desorción: desorción térmica de la trampa y transferencia -inyección de los analitos a la columna cromatográficacromatográfica
Separación, identificación y cuantificación de los analitos
DESORCIÓN TÉRMICA
Primera desorción: desorción térmica de los compuestos retenidos en eladsorbente del cartucho a una T de 300ºC durante 5 minutos yrefocalizados hacia una trampa criogénica que contiene Tenax TA a T de-30ºC
Segunda desorción: desorción térmica de los compuestos retenidosg pen el adsorbente de la trampa a una T de 300ºC y transferidos a lacolumna cromatográfica
Análisis de COVs en aire.
Análisis de VOCs en agua y matrices sólidas
• Headspace (espacio de cabeza).
– Estático
– Dinámico
Gas inerte Trampa CG
Espacio de cabezaGas inerte Trampa CG
Muestra
Microextracción en fase sólida (SPME)
Aplicaciones de SPME
350
400
250
300
350
150
200
0
50
100
01990-95 1996 1997 1998 1999 2000 2001 2002
Análisis AmbientalToma de muestra
Tratamiento previo
Extracción
Purificación(Clean-up)
Análisis InstrumentalGC
HPLCHPLCGC-MS; HPLC-MS
Cuantificación
Cuantificación
• Calibración con patrones externos e internos (identificación por tiempo de retención)(identificación por tiempo de retención)
• Blancos del procedimiento• Determinación de
– sensibilidad– límite de detección
i t l d li lid d
Validación del método
– intervalo de linealidad– precisión– exactitud– robustez – interferencias del método
C fi ió GC MS HPLC MS• Confirmación por GC‐MS o HPLC‐MS
% Errores generados en el% Errores generados en elanálisis de la muestra
Calibrado
9%11%
6%7%
8%
CalibradoColumnasOperadorTratam. muestra
19%4%
6%6% Tratam. muestra
ContaminaciónInyeccionIntegración
30%
IntegraciónCromatografíaInstrumentación
ErroresErrores Equivocaciones (error en la pesada mal etiquetado error de Equivocaciones (error en la pesada, mal etiquetado, error de
transcripción, intercambio de muestras) Ocasionales Pueden afectar a una muestra o a todas Pueden afectar a una muestra o a todas De tipo cualitativo o/y cuantitativo Controlables a través de los programas de control de calidad. Pueden o no ser medibles Pueden o no ser medibles
Errores sistemáticos De tipo cuantitativo N dibl No medibles
Errores “al azar” Controlables a través de los programas de las muestras de
t l d lid dcontrol de calidad. A mayor número de muestras y replicados menor error.
Control de calidad Falsos positivos : Objetivo
Comprobar: eficiencia de la extracción
Interferencias de la muestra o contaminación externaFalsos negativos: Se concluye que un
eficiencia de la extracción pérdidas en las etapas de clean up pureza de los blancos S ió áfi
contaminante no aparece cuando en realidad si está en cantidades detectables:
B j i Separación cromatográfica
Procedimiento Añadir un “surrogate”, compuesto similar a nuestro analito, pero no presente en
Bajas recuperacionesInterferencias que enmascaran
la muestra. Como mínimo una muestra de la serie por duplicado Muestra certificada o repetida “Muestra ciega” Blancos Calibrado del aparato con 4 puntos mínimo y comprobación periódicap p y p p
Criterios de calidad: Recuperación entre 50‐130% Diferencia entre los dos duplicados <25% Diferencia entre los dos duplicados <25% Blanco no tendría que dar niveles detectables del analito límite de
cuantificación.