Lic. Edgar Gonzales EscalanteLic. Edgar Gonzales Escalante
TecnTecnóólogo Mlogo Méédicodico
RESITENCIA EN GRAM RESITENCIA EN GRAM NEGATIVOS:NEGATIVOS:
-LACTAMASAS -LACTAMASAS BLEE - AMPCBLEE - AMPC
Mecanismo de acciónMecanismo de acción
Resistencia bacterianaResistencia bacteriana
• Capacidad de una cepa bacteriana de resistir la acción de cierto antibiótico– NATURAL: propia del microorganismo.
– ADQUIRIDA: es aquel tipo de resistencia que determinada especie ha adquirido a lo largo del tiempo.
Características Características
Exoenzimas: Se excretan al medio. Gram positivas
Intracelulares: Retenidas en el medio periplasmatico. Gram negativas
Localización/Excreción:
Características Características
• Sintesis:– Inducibles. Codificadas por un gen no funcional
por represión activa que se desrreprime en presencia de inductor.
– Constitutivas. No se requiere presencia de inductor, formándose enzima en cantidades constantes cuantitativa y cualitativamente.
CaracterísticasCaracterísticas
• Cromosómica:–Mutación
espontánea
• Extracromosómica:–Plásmidos– Transposones– Integrones
“Cuando la resistencia se adquiere por mutación la CIM aumenta de 3 a 5
veces.”
“Cuando la resistencia se aquiere por transferencia horizontal de genes la CIM
aumenta por lo general entre 50 y 100 veces”
Presión selectiva:Presión selectiva:
Transmisión de la resistenciaTransmisión de la resistenciaConjugacióConjugaciónn
TransduccióTransducciónn
TransformacióTransformación n
Mecanismos de ResistenciaMecanismos de Resistencia
• Barreras de impermeabilidad• Modificación del sitio blanco• Inactivación enzimática
Mecanismos de ResistenciaMecanismos de ResistenciaBomba de eflujo Perdida de
porinas
Mecanismos de ResistenciaMecanismos de ResistenciaModificación del
sitio blancoModificación enzimática
Inactivación enzimáticaInactivación enzimática
• - lactamasas: Enzimas que hidrolizan irreversiblemente el enlace amida del núcleo betalactámico de los antibióticos betalactámicos, transformándolos en compuestos inactivos, incapaces de ejercer su acción antibiótica.
Efecto de las Efecto de las - lactamasas- lactamasas
Reseña históricaReseña histórica
• 1940. Abraham y Chain. Extracto de E.coli era capaz de inactivar soluciones de penicilina (penicilinasa).
• 1944. Kirby observó que la producción de penicilinasa se correlacionaba con R a Pen en aislados de S.aureus. Incremento de cepas productoras.
• Años 60. Introducción de aminopenicilinas y cefalosporinas. Aparición de cepas R por producción de betalactamasas.
ClasificaciónClasificación
-Lactamasas de Espectro Extendido (BLEE – ESBL)
-lactamasas de espectro extendido: -lactamasas de espectro extendido: BLEE – ESBLBLEE – ESBL
• Mediadas por plásmidos• No inducibles • Hidrolizan cadena oximino-b lactámica,
espectro de acción extendido (cefalosporinas de todas las generaciones) y monobactan (AZT)
• Inhibida por inhibidores de b-Lactamasas (Ac. Clavulanico)
-lactamasas de espectro -lactamasas de espectro extendido: BLEE – ESBLextendido: BLEE – ESBL
• Sensibles a cefamicinas (FOX) y carbapenems• Descubierta: Alemania - Knothe et al.
Infection 1983;11:315-317. • Plasmidos frecuentemente codifican
resistencia a aminoglucósidos, cloramfenicol, sulfonamidas y tetraciclina.
-lactamasas de espectro -lactamasas de espectro extendido: BLEE – ESBLextendido: BLEE – ESBL
• Muchas cepas portadoras de BLEE no aparecen resistente a C2G, C3G y C4G o aztreonam en el antibiograma.
• Algunos antibióticos son mejores para detectar la presencia de BLEE (p.e. Ceftazidima, aztreonam, cefpodoxima).
• Detección es imperativo para advertir a los clínicos que la terapia con algunos nuevos β-lactamicos puede no ser exitoso
-Lactamasas de -Lactamasas de espectro extendidoespectro extendido
Derivadas de TEM Derivadas de SHV Cefotaximasas (CTX-M) PER-1, PER-2 SFO, VEB, GES, TLA, BES…..
Derivadas de OXA
Clase AClase A
Clase DClase D
Inhibidores (competitivos) de -lactamasas
Sulbactam
Ampicilina
Ac. Clavulánico
Inhibidores de Inhibidores de -lactamasas -lactamasas
-Lactamasas AmpC
-Lactamasas AmpC-Lactamasas AmpC
• Muy común en bacilos gram negativos• Cromosómicas• Inducibles • Hidrolizan cefalosporinas de 1º, 2º
y 3º generación
-Lactamasas AmpC-Lactamasas AmpC
• Sensible a Carbapemenas y cefalosporinas de 4º generación• No inhibida por inhibidores de -Lactamasas (Ac. Clavulanico)• Resistente a cefamicinas (FOX)• 1988 AMP C plasmídicas
-Lactamasas AmpC -Lactamasas AmpC mediadas por plásmidosmediadas por plásmidos
-Lactamasas AmpC-Lactamasas AmpC
• Inductores fuertes : ampicilina, cefoxitin, e imipenem causan un incremento en la producción de ß-lactamasas AmpC (resistencia inducible).
• Inductores débiles: cefalosporinas de tercera y cuarta generación
• Mutaciones espontáneas (gen ampD) generan microorganismos en estados desrreprimidos (resistencia constitutiva).
-Lactamasas AmpC-Lactamasas AmpC
• Característico de ciertos géneros y especies–A eromonas–M organella–P rovidencia/Pseudomonas–C itrobacter freundii– E nterobacter– S erratia
RESUMENRESUMEN
BLEE AMP CCodificación Plasmídica Cromosómica
Inhibida por Ac. clav
+ -
Cefoxitin FOX
S R
Espectro de actividad
Cef. 1, 2,3 y 4 generación
Cef. 1, 2 y 3 generación
Sintesis Constitutiva Inducible
MÉTODOS DE DETECCIÓNMÉTODOS DE DETECCIÓN
MÉTODOS DE DETECCIÓNMÉTODOS DE DETECCIÓN
• El fundamento de la detección es enfrentar las bacterias en estudio con los preparados betalactámicos para poner en evidencia la mayor o menor estabilidad de éstos frente a las betalactamasas.
• Los métodos usados varían según la especie a estudiar, el antibiótico a ensayar y el tipo de enzima a detectar.
• Diferencias entre BGP y BGN.
DETECCION DE BLEEDETECCION DE BLEE
Control de calidadControl de calidad
CAZ
CTICTX
CTA
MÉTODO AMERICANO
BLEE
> 5mm
AMC
CTX
AZT
CAZ
MÉTODO FRANCES
BLEE
Como reportamosComo reportamos
• Cepa productora de BLEE: Cepa productora de BLEE: resistente a penicilinas, resistente a penicilinas, cefalosporinas de todas las cefalosporinas de todas las generaciones y aztreonamgeneraciones y aztreonam
DETECION DE AMP C FOX CAZ
FOX vs CAZ
DETECION DE AmpC
IMP vs CAZ
Como reportamosComo reportamos• Cepa productora de Amp C: puede Cepa productora de Amp C: puede
desarrollar resistencia durante desarrollar resistencia durante tratamiento prolongado con tratamiento prolongado con cefalosporinas de 3º generación. cefalosporinas de 3º generación.
Por consiguiente, aislados Por consiguiente, aislados inicialmente sensible pueden inicialmente sensible pueden convertirse en resistentes tres a convertirse en resistentes tres a cuatro días después del comienzo cuatro días después del comienzo del tratamiento. Se justifica la del tratamiento. Se justifica la evaluación repetida de los evaluación repetida de los aislamientos. aislamientos.
¿SI TIENE LOS DOS?¿SI TIENE LOS DOS?
• ¿cómo lo detectamos?• La R al FOX indica posible AMP C• Los BLEE no serán detectados por inhibición
con Ac. Clavulánico• Combinar FEP con Tazobactan o Sulbactan• Método tridimensional
Método TridimensionalMétodo Tridimensional
• Detección de mecanismos enzimáticos de resistencia
• Detecta cualquier tipo de -lactamasa: BLEE, AMP C o Carbapenemasa
• Altamente sensible• Mas trabajo
Método TridimensionalMétodo Tridimensional
• Se necesita:–Cepa E. coli ATCC 25922–Sacabocado–Agar Mueller Hinton–Asa en punta–Tubos esteriles
Método TridimensionalMétodo Tridimensional
Método HodgeMétodo Hodge
2000 A.C. Come este trozo de raíz
Año 1000: Comer estas raíces es una costumbre pagana. Repite esta plegaria
1850: Esta plegaria es una nueva superstición. Bebe esta poción.
1920: Esta poción esta preparada con aceite de serpiente. Toma esta pastilla.
1950: Esta pastilla es ineficaz. Toma penicilina.
1955: Oh!!! Los microorganismos se han hecho resistentes a este antibiótico. Toma
tetraciclina.1960-2000: Otros 40 oh!!!!Toma este
antibiótico más potente. 2020: Los microorganismos han vencido. Come
este trozo de raíz.
Gracias por su atención…Gracias por su atención…
Louis Pasteur (1822-1895)
““SSorprendernos orprendernos de las cosas, es el de las cosas, es el primer paso para primer paso para el descubrimiento el descubrimiento ””