Laboratorio de Entomología "Herman Lent"
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DefensaDefensa
Trabajo Especial de Grado
R. Vegas
Laboratorio de Entomología "Herman Lent"
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Tutor: Tutor: Dr. Elis Dr. Elis Aldana.Aldana.
Jurado: Prof. Elis Aldana.
Prof. Elsa Nieves.
Prof. Laura Almeida.
Prof. Maritza Alarcón.
Laboratorio de Entomología “Herman Lent”Laboratorio de Entomología “Herman Lent”
Universidad de Los AndesUniversidad de Los Andes
Mérida - VenezuelaMérida - Venezuela
Determinación de respuestas no condicionadas en
Rhodnius proxilus Stål 1859, en condiciones de
laboratorio.
Determinación de respuestas no condicionadas en
Rhodnius proxilus Stål 1859, en condiciones de
laboratorio.
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Rhodnius prolixusRhodnius prolixus
Principal Vector en Venezuela.
Asociación al domicilio humano.
Estudios del comportamiento alimenticio.
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Comportamiento alimenticioComportamiento alimenticio
R. prolixus
Fisiología y Ecología sensorial
Psicología del Aprendizaje
Comportamiento
La orientación como respuesta innata
Categorías del aprendizaje:•No asociativo
•Asociativo
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Hipótesis del TrabajoHipótesis del Trabajo
El comportamiento de búsqueda de alimento en R. prolixus revela respuestas innatas que pueden ser modificadas por la experiencia.
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Objetivo GeneralObjetivo General
Estudiar las respuestas locomotoras y de orientación para la búsqueda de la fuente de alimentación en R. prolixus, en condiciones de laboratorio.
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Objetivos EspecíficosObjetivos Específicos
Determinar la existencia de aprendizaje asociativo frente a estímulos de temperatura y olor.
Determinación del patrón locomotor de orientación frente al antebrazo humano como estímulo incondicionado.
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Materiales y métodosMateriales y métodos
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Material biológicoMaterial biológico
Adultos de R. prolixus.
Alimentados sobre gallina (Gallus gallus domesticus), mantenidos a 28 – 30 ºC y 65 – 70 %HR.
15 a 21 días de ayuno hasta el momento de los ensayos.
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Test de Adquisición – Extinción.
Test de Adquisición – Extinción.
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Test Adquisición - ExtinciónTest Adquisición - Extinción
Alimentador artificial de insectos hematófagos, descrito por Aldana et al. (2005).
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Test de Adquisición-Extinción.Test de Adquisición-Extinción.
Estímulo no condicionado (EI): 36ºC.
Estímulo condicionado (EC): – Olor de Orina de Mapache
– Olor de Cebo de Ciervo.
6cm5cm
7cm
50cc
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Test de Adquisición-Extinción.Adquisición
Test de Adquisición-Extinción.Adquisición
24 ensayos EC-EI (1 al 24) de 2 min.
c/u
Frecuencia de aproximación:
24 ensayos EC-EI (1 al 24) de 2 min.
c/u
Frecuencia de aproximación:
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Test de Adquisición-Extinción.Extinción
Test de Adquisición-Extinción.Extinción
24 ensayos EC-EI (24 al 48) de 2
min. c/u
Frecuencia de aproximación:
24 ensayos EC-EI (24 al 48) de 2
min. c/u
Frecuencia de aproximación:
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Test de OrientaciónTest de Orientación
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Test de OrientaciónTest de Orientación
Estímulo atrayente: Antebrazo humano.
El cuadrante de posición en un instante será aquel donde se encuentra el extremo anterior de la cabeza.
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Test de OrientaciónTrayectoriasTest de OrientaciónTrayectorias
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ResultadosResultados
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Test Adquisición – Extinción Cebo de Ciervo (EC)Test Adquisición – Extinción Cebo de Ciervo (EC)
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0,2
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0,4
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0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1011121314151617181920212223 24252627282930313233343536373839404142434445464748
Ensayo
Fre
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Olor Cebo de Ciervo (EC) + 36ºC (EI)
Temperatura 36ºC (EI)
Temp. ambiente (21-23ºC)
Temp. ambiente + olor Cebo de Ciervo (EC)
Figura 2.1. Frecuencia de aproximación de Rhodnius prolixus durante la fase de adquisición y extinción con cebo de ciervo como EC y la temperatura como EI.
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Test Adquisición – Extinción Orina de Mapache (EC)Test Adquisición – Extinción Orina de Mapache (EC)
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0,2
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0,4
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0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10111213 1415161718 1920212223 242526 2728293031 3233343536 37383940 4142434445 464748
Ensayo
Fre
cu
en
cia
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ap
roxim
ac
ión
Olor Mapache (EC)
Temp. 36ºC (EI)
Temp. ambiente (21-23ºC)
Temp. ambiente con olor Mapache
Figura 2.2. Frecuencia de aproximación de Rhodnius prolixus durante la fase de adquisición y extinción con orina de mapache como EC y la temperatura como EI.
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Test OrientaciónTest Orientación
AA BB
CC
EE FF
DD
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Test de OrientaciónAntebrazo humano, sin fragancia.Test de OrientaciónAntebrazo humano, sin fragancia.
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E1
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Trayectoria
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cuencia
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Figura 3.1. Frecuencia de aproximación de R. prolixus al antebrazo humano a través de las diferentes trayectorias descritas por cuadrantes enumerados
Figura 3.4. Frecuencia de aproximación de R. prolixus al antebrazo humano a través de las diferentes trayectorias descritas por cuadrantes de letras
0,00
0,05
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Trayectoria
Fre
cu
en
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nA, C, F
A, D, F
AB, C, E
B, CD, E
A, C, E
B, D, F
A, CD, F
B, C, E
B, D, E
AB, D, E
B, D, EF
AB, D, F
B, CD, F
B, CD, EF
AB, CB, E
AB, D, EF
AB, D, F
A, C, EF
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Test de OrientaciónAntebrazo con fragancia AlmizcleTest de OrientaciónAntebrazo con fragancia Almizcle
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E1
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Trayectoria
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Trayectoria
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nA, C, F
A, D, F
AB, C, E
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A, CD, F
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AB, D, E
B, D, EF
AB, D, F
B, CD, F
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AB, CB, E
AB, D, EF
AB, D, F
A, C, EF
Figura 4.1. Frecuencia de aproximación de R. prolixus al antebrazo humano fragancia almizcle a través de las diferentes trayectorias descritas por cuadrantes enumerados
Figura 4.2. Frecuencia de aproximación de R. prolixus al antebrazo humano fragancia almizcle a través de las diferentes trayectorias descritas por cuadrantes de letras
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Test de OrientaciónAntebrazo con fragancia RudaTest de OrientaciónAntebrazo con fragancia Ruda
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Figura 5.1.Figura 5.1. Frecuencia de aproximación de Frecuencia de aproximación de R. prolixusR. prolixus al antebrazo al antebrazo humano fragancia ruda a través de las diferentes trayectorias descritas humano fragancia ruda a través de las diferentes trayectorias descritas por cuadrantes enumerados por cuadrantes enumerados
Figura 5.2. Frecuencia de aproximación de R. prolixus al antebrazo humano fragancia ruda a través de las diferentes trayectorias descritas por cuadrantes de letras
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Discusión de los resultados
Discusión de los resultados
1) Test Adquisición – Extinción
2) Test de Orientación
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Test Adquisición - ExtinciónTest Adquisición - Extinción
Falta de estudios de aprendizaje en insectos hematófagos.
Alonso et al. (2003).
Triatominos y los paradigmas del aprendizaje.
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TestAdquisición - ExtinciónTestAdquisición - Extinción
Sulbarán (2005).
No se encontraron evidencias de aprendizaje asociativo en R. prolixus.
Números de ensayos
Intensidad del estímulo
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TestAdquisición - ExtinciónTestAdquisición - Extinción
Intervalo de tiempo de exposición de EI – EC
Mientras más corto, mayor es la asociación
Intervalo entre ensayos
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Lecciones para el futuroLecciones para el futuro
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Qué funcionó bienQué funcionó bien
Memoria pre-imagal con los olores almizcle, cebo de ciervo u orina de mapache (Sulbarán, 2005).
Temperatura 36ºC (EI).
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TestOrientaciónTestOrientación
Se evidenció un patrón de orientación del insecto hacia el antebrazo humano, revelado por dos trayectorias de aproximación con frecuencias superiores a 0,10 (B,D,F 0,36 y A,C,E 0,43) y además ocho trayectorias más con valores inferiores a 0,10.
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TestOrientaciónTestOrientación
Trayectorias A,C,E y B,D,F
Trayectoria A,B,D,F0,00
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B, CD, F
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0,00
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Trayectoria
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TestOrientación (Estudios Futuros)TestOrientación (Estudios Futuros)
Estas evidencias señalan un efecto sobre la fisiología sensorial en R. prolixus de las fragancias almizcle o ruda, y dan inicio a un nuevo tema de estudio de la fisiología de los receptores del insecto, que por escapar a los alcances del presente trabajo, no profundizaremos en el mismo.
Las sustancias almizcle y ruda para la realización de estudios futuros enfocados en la fisiología sensorial.
Consideración de estas fragancias como posible medida, en estudio, para el empleo de control vectorial de triatominos; sustancias no toxicas para el ser humano.
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Conclusiones (Test Adquisición – Extinción)Conclusiones (Test Adquisición – Extinción)
No se hallaron evidencias de Condicionamiento Clásico en R. prolixus, con 36 ºC como EI y los olores orina de mapache y cebo de ciervo como EC.
La temperatura a 36 ºC demostró ser un EI efectivo para evocar la extensión de la probóscide y aproximación a la fuente alimenticia como Respuesta Incondicionada (RI) en R. prolixus.
Los olores empleados como EC, no evocan por si solos la RI, podrían ser empleados en estudios futuros de aprendizaje y comportamiento de orientación.
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Conclusiones (Test de Orientación)Conclusiones (Test de Orientación)
El sistema experimental empleado en el test de orientación resultó ser eficiente para revelar las trayectorias de aproximación del insecto a un atrayente natural como el antebrazo humano en condiciones de laboratorio.
Los fragancias almizcle y ruda, demostraron tener
efecto sobre la orientación de R. prolixus.
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Preguntas y comentariosPreguntas y comentarios
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