Gâmeta feminino
Oocito secundário
Gâmeta masculino
Espermatozóide
EspermatogéneseOogénese
Gametogénese
Fertilização em mamíferos - Visão geral -
Desenvolvimento embrionário
pré-implantaçãoEm suspensão,
acessível àmanipulação
humano
ratinho
Sinalização molecular durante a implantação
Contudo por vezes
implantação ectópica
Transição da trofo-ectoderme para um fenótipo invasivo
As técnicas de contracepção libertaram o sexo da associação com a reprodução
As técnicas da Medicina da Reprodução trouxeram a autonomização da reprodução relativamente ao sexo
A vida ocidental (sbt urbana) actual veio adicionar factores de infertilidade:
a idade da gestação é adiada
Causas de infertilidade
Desenvolvimento embrionário
pré-implantaçãoEm suspensão,
acessível àmanipulação
humano
ratinho
Fertilização e desenvolvimento pré-implantação em culturaEstratégias da Reprodução Medicamente Assistida
O processo da fertilização e o desenvolvimento pré-implantação ocorrem em suspensão no interior do aparelho reprodutor feminino
Trompa de Falópio
humano
ratinho
Técnicas de Reprodução Medicamente AssistidaEstimulação controlada da ovulaçãoInseminação intra-uterina
Fertilização in vitro (FIV)Injecção intra-citoplasmática de espermatozóide (ICSI)Congelamento de gâmetas e embriõesTransferência de embriões congelados (TEC)Biópsia testicular para extracção de espermatozóides (TESE)
Inseminação intra-uterina com esperma de dador Doação de oocitosDoação de embriões
Biópsia embrionária e diagnóstico genético pré-implantação (PGD)
As técnicas hoje disponíveis em Medicina da Reprodução permitem ultrapassar com sucesso a maioria das situações de Infertilidade Conjugal.
Técnicas de Reprodução Medicamente AssistidaEstimulação controlada da ovulaçãoInseminação intra-uterina
Fertilização in vitro (FIV)Injecção intra-citoplasmática de espermatozóide (ICSI)Congelamento de gâmetas e embriõesTransferência de embriões congelados (TEC)Biópsia testicular para extracção de espermatozóides (TESE)
Inseminação intra-uterina com esperma de dador Doação de oocitosDoação de embriões
Biópsia embrionária e diagnóstico genético pré-implantação (PGD)
As técnicas hoje disponíveis em Medicina da Reprodução permitem ultrapassar com sucesso a maioria das situações de Infertilidade Conjugal.
Técnicas de Reprodução Medicamente Assistida
Estimulação controlada da ovulação
Aumentam a possibilidade de ocorrência de fertilização in vivo
Inseminação intra-uterina
Técnicas de Reprodução Medicamente AssistidaFertilização in vitro (FIV)
Para ocorrer implantação:
1. Os gâmetas têm de viajar no ap. reprodutor feminino
2. Têm de interagir no processo da fertilização
3. O desenvolvimento embrionário pré-implantatório ocorre em suspensão ao longo do ap. reprodutor feminino
A FIV surgiu originalmente para fazer face a situações de infertilidade de causa feminina por oclusão tubária
A colheita de gâmetas femininos realiza-se por punção e aspiração folicular, com acesso
transvaginal, sob controlo ecográfico
+
FIV Fertilização in vitro
Técnicas de Reprodução Medicamente AssistidaFertilização in vitro (FIV)
Injecção intra-citoplasmática de espermatozóide (ICSI)
Para fertilizarem o oocito, os espermatozóides:
1. Concentração total adequada
2. Fracção adequada de formas móveis
3. Fracção adequada de formas morfologicamente normais
A ICSI (Intra-Cytoplasmic Sperm Injection) surgiu para fazer face a alguns tipos de infertilidade de causa masculina
ICSIInjecção intra-citoplasmática de espermatozóide
ICSIInjecção intra-citoplasmática de espermatozóide
ICSIInjecção intra-citoplasmática de espermatozóide
ICSIInjecção intra-citoplasmática de espermatozóide
ICSIInjecção intra-citoplasmática de espermatozóide
FIV ou ICSI
Desenvolvimento pré-implantatório humano
1-célula
2-células 4-células
In vivo em suspensão... In vitro em cultura...
8-células Blastocisto
Resolução de situações de Infertilidade
Estratégias da Reprodução Medicamente Assistida
Técnicas de Reprodução Medicamente Assistida
TESETEsticular Sperm Extraction
Congelamentoespermatozóides
oocitos
embriões (estadios pré-implantatórios)
TEC Transferência de embriões congelados
Técnicas de Reprodução Medicamente Assistida
Fertilização in vitro (FIV)Injecção intra-citoplasmática de espermatozóide (ICSI)Biópsia testicular para extracção de espermatozóides (TESE)Congelamento de gâmetas e embriõesTransferência de embriões congelados (TEC)
Inseminação intra-uterina com esperma de dador Doação de oocitosDoação de embriões
Biópsia embrionária e diagnóstico genético pré-implantação (PGD)
Técnicas de Reprodução Medicamente AssistidaEstimulação controlada da ovulaçãoInseminação intra-uterina
Fertilização in vitro (FIV)Injecção intra-citoplasmática de espermatozóide (ICSI)Congelamento de gâmetas e embriõesTransferência de embriões congelados (TEC)Biópsia testicular para extracção de espermatozóides (TESE)
Inseminação intra-uterina com esperma de dador Doação de oocitosDoação de embriões
Biópsia embrionária e diagnóstico genético pré-implantação (PGD)
Estudos de Biologia fundamental vieram demonstrar a grande capacidade regulativa do desenvolvimento pré-implantatório:
1. Podem ser retirados algunsblastómeros, sem consequência para o desenvolvimento
2. Podem ser produzidos gémeos idênticos a partir da separação de blastómerosem fases iniciais do desenvolvimento
O diagnóstico genético pré-implantação (PGD)permite estender as indicações para Reprodução
Medicamente Assistida a casais férteis
Técnicasde análisemolecular em célula
única
A Biópsia embrionária e o diagnóstico genético pré-implantação (PGD) aproveitam estes conhecimentos da Biologia Fundamental e de técnicas de análise molecular em célula única
para estender as indicações para Reprodução Medicamente Assistida a casais férteis
PGDBiópsia embrionária eDiagnóstico genético pré-implantação
biópsiaembrionária
PGDBiópsia embrionária eDiagnóstico genético pré-implantação
biópsiaembrionária
Definição de Diagnóstico Genético Pré-Implantação (PGD)Trata-se de um diagnóstico pré-natal muito precoce em que embriõespré-implantação (ou oocitos) são biopsados durante a cultura, sendo
depois transferidos para a cavidade uterina os embriões livres dadoença genética em causa
PGDBiópsia embrionária eDiagnóstico genético pré-implantação
biópsiaembrionária
biópsia embrionária
ICSI
biópsiaembrionária
blastómeros
diagnóstico (PCR / FISH)
afectados não afectados
não transferidos
transferidos congelados
Embrião biopsado
PGDBiópsia embrionária eDiagnóstico genético pré-implantação
Existem hoje técnicas de Medicina da Reprodução indicadas para
situações de Fertilidade
Indicações para Diagnóstico Genético Pré-Implantação(PGD)
Semelhantes às para diagnóstico pré-natal por BVC ou amniocentese(se possíveis em célula única, evita-se ITG, mas necessita RMA):
1. Risco aumentado para anomalias cromossómicas(translocações e microdelecções)
2. Doenças monogénicas(ligadas ao X, autossómicas recessivas, autossómicas dominantes)
Capacidade regulativa do desenvolvimento pré-implantação:
Quimeras de agregação resultantes da agregação mórulasde 8-células originam apenas 1 blastocisto
Células estaminais embrionárias (células ES)
O botão embrionário de blastocistos isolado e colocado em cultura origina células ES.
Para manterem a pluripotencialidade as células ES devem ser
cultivadas em condições particulares, ainda mal
caracterizadas.
Células estaminais embrionárias (células ES)
Produção de animais “Knock-out”
Células estaminais embrionárias (células ES)
Para obterem especificidade as células ES devem ser
cultivadas noutras condições particulares, ainda menos
caracterizadas.
Exemplo de células ES de ratinho
Transferência nuclear em zigotos
Transferência nuclear em zigotos
Os pronúcleos masculino e feminino não são equivalentes
“Genomicimprinting”
Os cromossomas maternos regulam o desenvolvimento do embrião.
Os cromossomas paternos regulam o desenvolvimento dos anexos embrionários.
Alguma expressão genética precoce depende do “genomicimprinting”
Mecanismos de formação de molas hidatiformes completas As molas hidatiformes completas contém 46 cromossomas, sempre de origem paterna.
Geralmente o cariotipo é 46-XX, sendo por vezes 46-XY.
Mecanismo de formação de molas hidatiformesparciais As molas hidatiformes parciais contém 69 cromossomas (triploidia), com dose dupla de cromossomas paternos, podendo o cariotipo ser 96-XXX, 96-XXY ou 96-XYY.
Mecanismos de formação de gémeos verdadeiros
Clonagem