Morfologi Fungi dan Khamir
Praktikum mikrobiologi
Jurusan BiologiFakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam
Universitas Jember
I. MORFOLOGI FUNGI
Kelompok 1. Aspergillus sp.
Kelompok 2. Penicillium sp.
Kelompok 3. Fusarium sp.
Kelompok 4. Rhizopus sp.
Kelompok 5. Tricoderma sp.
Kelompok 6. Metharizium
A. Mikroskopis PDA dipanaskan di atas bunsen
sampai agak meleleh
Ambil satu ose PDA dan diletakkan pada tepi kanan dan kiri slide kultur
Di beri isolat diatas PDA
Ditutup deck glass
Tisu ditetesi akuades steril
Di inkubasi
Diamati dengan mikroskop
B. Makroskopis
PDA di petri+isolat
Diamati menggunakan loupe, meliputi: ada tidaknya exudat, pigmentasi, garis radial, garis konsentris, dan morfologi koloni
(permukaan, warna dan bentuk koloni).
II. MORFOLOGI KHAMIR
Isolat : Yeast dan Candidaa. Pengecatan sel 1. Ditetesi MB
2. Di beri isolat di PDA umur 24 jam.
Ditutup dengan deck glass
Tepi deck glas di usap sampai kering
Di amati dengan mikroskop
b. Pengecatan sporaIsolat pada wortel umur 7x24 jam
akuades steril akuades steril
vortex
Dimasukkan isolat dalam objek glass
Dilakukan pengecatan
Fiksasi
a. Isolat Yeast
a. Isolat Candida
1. Cat A = gram A2. Larutan Alkohol3. Cat B = gram D
TERIMA KASIH
a. Pengecatan sel khamirKaca objek
Dibersihkan dengan alkohol 70%
Ditetesi sedikit MB
Ambil sedikit khamir dengan ose dan letakkan dalam larutam MB
Ditutup dengan gelas obyek
Diamati di bawah mikroskop, meliputi: bentuk sel, ada atau tidaknya pertunasan dan miselium semu serta banyaknya tunas taip sel.
B. Pengecatan spora khamirBiakan murni khamir
Disuspensikan dalam akuades steril
Diambil satu ose dan diratakan diatas gelas objek
Kering anginkan dan di fiksasi diatas api
Noda ditetesi dengan cat A dan dipanasi selama 3 menit
Cuci dengan air mengalir
Dilunturkan dengan alkohol asam dan cuci dengan air mengalir
Ditetesi cat B selama 10-15 detik
Cuci kembali dengan air mengalir
Amati dengan mikroskop tentang sel khamir dan sporanya.
c. Pengecatan negatifGelas objek dibersihkan
dengan alkohol 70%
Ditetesi larutan nigrosin di
sebelah kanan
Diletakkan sedikit biakan diatas
larutan nigrosin
Diratakan (gelas objek dimiringkan
45o) sambil digerakkan
(kekanan dan kekiri)
Kering anginkan
Diamati dengan mikroskop yang
telah ditetesi minyak imersi
dengan perbesaran 100x
Diulangi pada preparat yang
berbeda
d. Pengecatan sederhanaPreparat olesan bakteri (B.
substilis dan E. coli)
Ditetesi 1-2 tetes larutan cat
Dibiarkan 1-2 menit
Dicuci dengan air mengalir
Di keringanginkan dan di amati di bawah mikroskop
Morfologi bakteri
e. Pengecatan Ziehl Nielsen (acid fast)Preparat olesan bakteri (B.
substilis dan E. coli)
Dikering anginkan dan difiksasi
Ditetesi larutan ZN-A dan difiksasi kembali
Dicuci dengan ZN-B
Dicuci dDicuci dengan air mengalir dan dikering anginkanengan ZN-B
Ditetesi ZN-C selama 30 detik dan dicuci air mengalir
Diamati dibawah mikroskop
Bakteri acid fast berwarna merahBakteri non acid fast berwwarna
biru
f. Pengecatan gramGelas objek dibersihkan dengan alkohol
Diambil 1 ose suspensi B. substilis dan E. coli
Diratakan pada kanan dan kiri gelas objek
Dikering anginkan dan di fiksasi
Ditetesi cat Gram A 2-3 tetes selama 1 menit dan Dicuci dengan air mengalir lalu dikering anginkan
Ditetesi cat Gram B selama 1 menit, di cuci dan dikering anginkan
Ditetesi cat Gram C selama 30 detik, di cuci dan dikering anginkan
Ditetesi cat Gram D selama 2 menit, dicuci dan dikering anginkan
Diamati dibawah mikroskop (bakteri gram positif atau negatif)
g. Pengamatan bakteri dengan preparat gantung
Gelas objek berlekuk
dibersihkan dengan alkohol
Dipanaskan diatas lampu
bunsen
Gelas penutup dibersihkan dan dioles vaseline
Diambil 1 ose B. substilis
diletakkan diatas gelas penutup
Gelas penutup yang
mengandung suspensi dibalik
Gelas penutup posisi berada
dibawah