Yadira Yleana Pinto QuinteroYadira Yleana Pinto Quintero
Universidad de los Andes- Universidad del Rosario-Hospital Militar Central
Agosto de 2006
POLIMORFISMOS DEL GEN P53 POLIMORFISMOS DEL GEN P53 EN CÁNCER DE MAMA FAMILIAR EN CÁNCER DE MAMA FAMILIAR
EN UNA POBLACIÓN EN UNA POBLACIÓN
COLOMBIANACOLOMBIANA
• Estudio Colaborativo Interinstitucional:HMC Dr. William Sánchez Dr. Diego Vanegas. Dr. Alfredo BallénUnidad Oncológica del Country Dr. José Fdo Robledo Dr. José Joaquín CaicedoUniversidad Javeriana Dr. Ignacio Briceño Dra. Diana Torres Dr. Jaime BernalFundacion Santafe de Bogota Dr. Fabio TorresFundación ONES
POLIMORFISMOS DEL GEN P53 EN CÁNCER DE POLIMORFISMOS DEL GEN P53 EN CÁNCER DE MAMA FAMILIAR EN UNA POBLACIÓN MAMA FAMILIAR EN UNA POBLACIÓN
COLOMBIANA COLOMBIANA
Enfermedad multifactorial caracterizada por
una proliferación celular descontrolada,
causada por alteraciones en la información
genética que inducen cambios en eventos
moleculares de la células.
CÁNCER
MutacionesMutaciones::
• Espontáneas.
• Producidas por cancerígenos (químicos, físicos y virales).
Mecanismos celulares alteradosMecanismos celulares alterados::
• Reparación del ADN (BRCA 1, BRCA 2, ATM, P53)
• Proliferación (PRb, control ciclo celular Ciclina y CDKs y P53)
• Adhesión celular (cadherinas)
• Apoptosis o muerte celular programada P53
Cáncer de mamaCáncer de mama
• PrevalenciaPrevalencia
- En el Reino Unido 1:12 mujeres
- En USA 1:8 mujeres
• 10-15% son de origen familiar (BRCA)
• Factores genéticos de baja penetrancia “Polimorfismos”
P53 y el cáncer de P53 y el cáncer de mamamama
Localizado en el cromosoma 17 posición 17p13.1
Factor de transcripción.
Monitorea la integridad y la estabilidad del genoma.
Se transcribe y traduce continuamente.
En humanos el gen p53 es polimórfico en el exón 4, el intrón 3 y el intrón 6.
Polimorfismo del exón 4: Codón 72; a.a. Arginina o Prolina.
Intrón 3: duplicación de 16 pb.
Intrón 6 presenta un cambio de A/G : donde G contiene el sitio de restricción para la enzima MspI.
Polimorfismos del gen p53Polimorfismos del gen p53
Relación del polimorfismo Relación del polimorfismo del codón 72 con la función del codón 72 con la función
de P53de P53P53 codón 72 Prolina Arginina
Movilidad electroforética más rápidaCrecimiento tumor más lentoTamaño tumor más pequeñoCaracterística enfermedad más oncogénicoInducción de la transcripción más fuerteInducción apoptósis más eficienteInteracción con mdm2 mayor afinidad
más rápido
OBJETIVOSOBJETIVOS
OBJETIVO GENERALOBJETIVO GENERAL
Describir la frecuencia de los polimorfismos del codón 72, del intrón 3 y del intrón 6 del gen p53, en una población colombiana con cáncer de mama familiar con respecto a un grupo control de individuos sin antecedentes de cáncer.
OBJETIVOS ESPECíFICOSOBJETIVOS ESPECíFICOS
• Determinar las frecuencias alélicas del polimorfismo del codón 72 del gen p53
• Determinar las frecuencias alélicas del polimorfismo de la inserción de 16 pb en el intrón 3 del gen p53.
• Determinar las frecuencias alélicas del polimorfismo del intrón 6 (A/G) Msp I del gen p53
• Determinar si existe asociación entre los polimorfismos del gen p53 en el codón 72, intrón 6 (A/G) MspI o Inserción en el intrón 3 de16pb y la presencia de cáncer de mama familiar.
Tipo de estudio: Prospectivo y analítico de casos y controles (1:1).
Población : mujeres con edad entre 18 y 80 años.
Caso: Paciente con Dx de Ca de mama con patología confirmada que cumpla
con los criterios de inclusión de Bethesda.
METODOLOGIAMETODOLOGIA
Análisis Estadístico• Se utilizo el programa estadístico SPSS 11.5• Pruebas efectuadas:• Análisis Bivariado:
– Prueba exacta de Fisher– Prueba Ji-cuadrado sin corregir de Pearson
• Análisis Multivariado:– Regresión Logística incondicional – Razón de disparidad (OR)
• Todas las purebas estadisticas se evaluaron con una Significancia (p<0,005)
Marco Muestral:Marco Muestral: HMC UOC
FSFBUJParticulares
Tamaño de Muestra: 186 Casos186
Controles
MUESTRAMUESTRA
RESULTADORESULTADOSS
GENOTIPOS DE LOS GENOTIPOS DE LOS POLIMORFISMOS DEL GEN p53 POLIMORFISMOS DEL GEN p53
404pb
336pb
199pb
113pb
86pb
196pb180pb
Gel de agarosa 2% con los productos de PCR-RFLP’s. Línea 1 y 8 marcador de peso 50 pb, Intrón 6: Línea 2 homocigoto (M/M), línea 3 heterocigoto (W/M), línea 4 homocigoto (W/W); Exón 4: Línea 5 homocigoto (Pro/Pro), línea 6 heterocigoto (Arg/Pro), línea 7 homocigoto (Arg/Arg); Intrón 3: línea 9 homocigoto (M/M), línea 10 heterocigoto (W/M), línea 11 homocigoto (W/W)
Edad P=0,020 Estrato Social Educación
P=0,000
Características Características Sociodemográficas en Casos y Sociodemográficas en Casos y
ControlesControles
05
1015202530354045
<39
40-4
9
50-5
9
60-6
9>7
0 2 3 4 5 6
Primar
ia
Secun
daria
Univer
sitar
io
Post-g
rado
Po
rce
nta
je (
%)
Casos (%) Controles (%)
Características Clínicas en casos y Características Clínicas en casos y controlescontroles
8.2
28.6
63.2
73.6
26.423.1
76.9
8.1
19.9
72
55.9
44.1
16.7
83.3
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
< 20 20-23 > 23 Si No Si No
Po
rcen
taje
(%)
Casos (%) Controles (%)
IMC Medicamentos
P=0,000
Alergias P=0,125P=0,144
Antecedentes Gineco-Antecedentes Gineco-ObstetricosObstetricos
Edad Menarquia Edad del Primer Embarazo P=0,015P=0,006
42
29,3
2,8
20,211,3 14
65,8
9,916 14,3
8,8
76,9
15,616,123,7
33,3
0102030405060708090
≤12 13 14 15 ≥16 ≤25 26-29 ≥30
Casos (%) Controles (%)
No. Embarazos
P=0,868
Anticonceptivos
P=0,946
Terapia Hormonal
P=0,008
Antecedentes Gineco-Antecedentes Gineco-ObstObstéétricostricos
18,8
90,9
57,7
42,3
81,2
1,77,9
20,7
56,2
13,5
58,1
41,9
9,11,6
10,8
22
51,6
14
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100Casos (%) Controles (%)
Hábitos Alimenticios en Casos y Hábitos Alimenticios en Casos y ControlesControles
24,9
87,9
12,1
80,986,1
13,9
69,471
29
41,9
31
75,1
30,6
69
19,1 16,1
34,4
15,117,7
82,3 84,9 83,9
58,165,6
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
Si No Si No Si No Si No Si No Si No
Casos (%) Controles (%)
FumaP = 0,099
CarnesAsadas
P = 0,421
EnlatadosP = 0,036
CaféP = 0,550
EmbutidosP = 0,029
AlcoholP = 0,496
Características Clínico Características Clínico Patológicas de los casos de Patológicas de los casos de
cáncer de mamacáncer de mama
13,926,1
6,514,4
9,4
49,2 44,2
6,6
24,4
54
18,6
56,243,8
0102030405060
Casos %
Edad n = 180 Lateralidad n = 181
NódulosLinfáticos
n = 169
GradoHistológico
n = 172
Características Clínico Características Clínico Patológicas de los casos de Patológicas de los casos de
cáncer de mamacáncer de mama71.5
20.3
3.8 4.4
77.2
13.310
0.6 0.6 1.1 1.1 0.6
63.9
36.1
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
Pos Neg
ER+ y PR-
ER- y P
R+CDI
CD In si
tu CLI
CD y CL
In si
tu
Muc
inoso
Coloide
CL Insit
u
Filode
s
Pre-M
eno
Post-M
eno
Casos %
ReceptoresHormonales
n = 158
TipoHistológico
n = 180
EstadoMenopáusico
n = 182
Asociación entre los genotipos de los Asociación entre los genotipos de los polimorfismos y las características polimorfismos y las características
clinicopatolclinicopatolóógicas de los casosgicas de los casos
P≥0,15
8,3
18
7
16,2
7
14,8
6,3
41,7
23,428,1 27,9
25
100
24,7
37,5
50
3640,4
34,6
41,938,3
13,518,6
13,6
50
9 8,8 11
4,78,6
58,363,7 65,5
61,6
70,5
100
65,5
43,8
100
36,3 34,938,4
29,534,5
56,2
15,8 13,216,7 18,8
41,7
0
20
40
60
80
100
120
Pro/Pro (%) Arg/Arg (%) Pro/Arg (%) I 6W/W (%) I6 W/M(%) I6 M/M (%) I3 W/W (%) I3 W/M(%) I3 M/M (%)
≤39 40-49 50-59 60-59 ≥ 70 Pre-Meno Post-meno
Asociación entre los genotipos de los Asociación entre los genotipos de los polimorfismos y las características polimorfismos y las características
clinicopatolclinicopatolóógicas de los casosgicas de los casos
70
51,4
63
53,9
62,5
100
55,8
64,3
30
48,6
37
46,1
37,5
44,2
35,7
66,7
74
67,971,7 73 71,3 71,4
22,218,8
22,620 18,9
100
21
14,3
4,2 3,8 3,80
2,8
14,311,1
3,15,7 3,3
8,14,9
100
0
20
40
60
80
100
120
Pro/Pro (%) Arg/Arg (%) Pro/Arg (%) I 6W/W (%) I6 W/M(%) I6 M/M (%) I3 W/W (%) I3 W/M(%) I3 M/M (%)
Gan. Linf Neg Gan Linf Pos ER-PR Pos ER-PR Neg ER (+) – PR(-) ER(-) PR(+)
P>0,15
Cáncer de mama
Controles Valor –P
Genotipos Codón 72
n (%) n (%) 0,004
Arg/Arg 114(61,3) 82(44,1) 0,001 Pro/Arg 60(32,3) 85(45,7) 0,008 Pro/Pro 12(6,5) 19(10,2) 0,260 Alelos 0,004
Arg 288 (77,4) 249 (67,0) Pro 84 (22,6) 123 (33,0)
λ2 EHW 1,113 0,195
Distribución de frecuencias Distribución de frecuencias genotípicas y alélicas del codón 72 genotípicas y alélicas del codón 72
en casos y controlesen casos y controles
*Regresión Logística Incondicional OR ajustado por edad menarquia, nuliparidad, edad del primer embarazo, IMC
Asociación entre el genotipo del codón Asociación entre el genotipo del codón 72 de p53 y el riesgo a 72 de p53 y el riesgo a desarrollar desarrollar
Cáncer de mamaCáncer de mama
*Regresión Logística Incondicional OR ajustado por Estrato social, Nivel educativo, Terapia hormonal, Enlatados y Embutidos
Asociación entre el genotipo del codón Asociación entre el genotipo del codón 72 y factores de riesgo hallados en el 72 y factores de riesgo hallados en el
presente estudiopresente estudio
Frecuencias genotFrecuencias genotíípicas y alélicas del picas y alélicas del Intron 3 y 6 en Casos y ControlesIntron 3 y 6 en Casos y Controles
Asociación entre el genotipo deAsociación entre el genotipo de los los intrintroonneses 3 y 6 3 y 6 yy el riesgo el riesgo a a desarrollardesarrollar Cáncer de mama Cáncer de mama
Genotipos Intrón 6
Cáncer de mama n= 186
Controles n=186
OR (IC95%) OR Ajustado* (IC95%)
W/W 140 153 1 referencia 1 referencia W/M 45 29 1,7 (1,08-2,85) 1,53 (0,89-2,82) M/M 1 4 0,27 (0,03-2,47) 0,36 (0,03-3,81)
Genotipos Intrón 3
W/W 168 184 1 referencia 1 referencia W/M 16 1 17,53 (2,29-133,57) 17,86(2,25-141,84) M/M 2 1 2,19 (0,19-24,38) No aplica
*Regresión Logística Incondicional OR ajustado por edad menarquia, nuliparidad, edad del primer embarazo, IMC
Genotipos Intrón 6 Cáncer de mama n= 186
Controles n=186
OR (IC95%) OR Ajustado* (IC95%)
W/W 109 92 1 referencia 1 referencia W/M 33 12 1,7 (1,08-2,85) 1,26(0,68-2,32) M/M 1 2 0,27 (0,03-2,47) 0,16(0,01-2,09)
Genotipos Intrón 3 W/W 168 184 1 referencia 1 referencia W/M 16 1 18,53 (2,29-133,57) 18,24 (2,30-144,4 M/M 2 1 2,19 (0,19-24,38) 2,66(0,14-50,87)
Asociación entre el genotipo deAsociación entre el genotipo de llosos iintrntroonneses 33 yy 6 6
y y los factores de riesgo hallados en el los factores de riesgo hallados en el presente estudiopresente estudio
*Regresión Logística Incondicional OR ajustado por estrato social, nivel educativo, terapia hormonal, enlatados y embutidos
CONCLUSIONESCONCLUSIONES
Para la población colombiana estudiada de individuos
con cáncer de mama heredofamiliar se puede concluir
que:
El genotipo Arg/Arg del codón 72 del gen p53 es un
factor de riesgo (2 veces más) para el desarrollo del
cáncer de mama heredofamiliar.
El genotipo W/M del intrón 3 del gen p53 es un factor
de riesgo (18 veces más) para el desarrollo del cáncer
de mama heredofamiliar.
El genotipo W/M del intrón 6 del gen p53 tiene asociación aunque
no muy fuerte con el riesgo en el desarrollo del cáncer de mama
heredofamiliar.
Hay asociación entre los siguientes factores y el desarrollo de
cáncer de mama heredofamiliar:
Edad de la menarquia inferior a 12 años
La edad del primer hijo (26-29 años)
El consumo de embutidos y de enlatados
El uso de terapia hormonal
No hay asociación entre los genotipos de los diferentes
polimorfismos del gen p53 y las características clinicopatológicas
en los casos con cáncer.