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FUNDACION INSTITUTO DE INMUNOLOGIAFUNDACION INSTITUTO DE INMUNOLOGIA
Bioseguridad en Bioseguridad en Microbiología yMicrobiología y
Laboratorios Biomédicos Laboratorios Biomédicos 44rdrd Edición Edición
Luz Esmeralda Murcia UrregoLuz Esmeralda Murcia Urrego
22
INTRODUCCION INTRODUCCION Desarrollo de prácticas de BSDesarrollo de prácticas de BS
1941 - Meyer and Eddie1941 - Meyer and Eddie 74 intectados con brucellosis in US74 intectados con brucellosis in US
Enfermedades más comunmente Enfermedades más comunmente reportadasreportadas Hepatitis Hepatitis TuberculosisTuberculosis TifoideaTifoidea Encefalitis equina venezolanaEncefalitis equina venezolana Brucelosis turalemiaBrucelosis turalemia Infecciones estreptocóccicasInfecciones estreptocóccicas
33
INTRODUCCION INTRODUCCION Desarrollo de prácticas de BSDesarrollo de prácticas de BS
Causas de infecciones asociadas Causas de infecciones asociadas en laboratoristasen laboratoristas Exposición a aerosoles.Exposición a aerosoles. Manipulación de agujasManipulación de agujas Pipeteo con la boca.Pipeteo con la boca. Manipulación de cultivos o especímenes.Manipulación de cultivos o especímenes.
44
INTRODUCCION INTRODUCCION Cadena de InfecciónCadena de Infección
Reservorio del patógenoReservorio del patógeno
Puerta de escapePuerta de escape
TransmisiónTransmisión
Ruta de entrada / dosis infecciosaRuta de entrada / dosis infecciosa
Huésped susceptibleHuésped susceptible
Período de incubaciónPeríodo de incubación
POE / Mantenimiento
Equipo protector personal
Inmunización
VigilanciaRIESGO
55
PRINCIPIOS PRINCIPIOS Requerimientos generales del laboratorioRequerimientos generales del laboratorio
POE
INSTALACIONES
66
PRINCIPIOS PRINCIPIOS Requerimientos generales del laboratorioRequerimientos generales del laboratorio
Supervisor bien informado Supervisor bien informado Personal bien informadoPersonal bien informado
• Enterado de riesgos potencialesEnterado de riesgos potenciales• Ilusrado en prácticas / técnicasIlusrado en prácticas / técnicas
Manual de bioseguridad específico para el Manual de bioseguridad específico para el laboratoriolaboratorio
77
PRINCIPIOS PRINCIPIOS Requerimientos generales del laboratorioRequerimientos generales del laboratorio
Niveles de BioseguridadNiveles de Bioseguridad Prácticas y técnicas de LaboratorioPrácticas y técnicas de Laboratorio
Procedimientos Operativos Estándar POEProcedimientos Operativos Estándar POE Procedimientos Operativos EspecialesProcedimientos Operativos Especiales
Barreras primarias (Equipo de seguridad)Barreras primarias (Equipo de seguridad) Barreras secundarias (Diseño y Barreras secundarias (Diseño y
construcciónconstrucción
88
Requerimientos Generales del Requerimientos Generales del LaboratorioLaboratorio
Cabinas de bioseguridad BSL2/3Cabinas de bioseguridad BSL2/3 DotaciónDotación
BatasBatas GuantesGuantes Protección ocular, facial, respiratoria etc.Protección ocular, facial, respiratoria etc.
Ayudas para pipeteoAyudas para pipeteo Centrífugas (rotores, anti-aerosoles etc)Centrífugas (rotores, anti-aerosoles etc)
99
PRINCIPIOSPRINCIPIOSDefiniciónDefinición
BIOSEGURIDAD:BIOSEGURIDAD:Aplicación de las combinaciones de Aplicación de las combinaciones de prácticas y procedimientos, facilidades del prácticas y procedimientos, facilidades del laboratorio, y equipos de seguridad laboratorio, y equipos de seguridad cuando se trabaja con microorganismos cuando se trabaja con microorganismos potencialmente infecciosos y tiene por potencialmente infecciosos y tiene por objeto proteger la salud de los objeto proteger la salud de los profesionalesprofesionales
1010
PRINCIPIOSPRINCIPIOSNiveles de bioseguridadNiveles de bioseguridad
BSL1 BSL1 Agentes que no se les conoce Agentes que no se les conoce que causen enfermedadque causen enfermedad
BSL2 BSL2 Agentes asociados con Agentes asociados con enfermedades en humanosenfermedades en humanos
BSL3 BSL3 Agentes indígenas / exóticos Agentes indígenas / exóticos asociados con enfermedad humana y asociados con enfermedad humana y con potencial transmisión por aerosol.con potencial transmisión por aerosol.
BSL4 BSL4 Agentes exóticos / peligrosos y Agentes exóticos / peligrosos y naturaleza amenazadora de vidanaturaleza amenazadora de vida
1111
Bioseguridad Nivel 1Bioseguridad Nivel 1IntroducciónIntroducción
Trabajo con agentes bien conocidos, Trabajo con agentes bien conocidos,
caracterizados y que no ocasionan caracterizados y que no ocasionan
enfermedad en humanos sanos adultos, y enfermedad en humanos sanos adultos, y
representando un mínimo potencial de riesgo representando un mínimo potencial de riesgo
al personal del laboratorio y al ambiente.al personal del laboratorio y al ambiente.
1212
Bioseguridad Nivel 1Bioseguridad Nivel 1IntroducciónIntroducción
Agentes bien caracterizadosAgentes bien caracterizados Naegleria gruberiNaegleria gruberi
Bacillus subtillisBacillus subtillis
Canine Hepatitis virusCanine Hepatitis virus
E.coliE.coli
1313
Bioseguridad Nivel 1 Bioseguridad Nivel 1 Facilidad del Laboratorio (Barreras Facilidad del Laboratorio (Barreras
Secundarias)Secundarias) Requerimientos:Requerimientos: Diseño de puertasDiseño de puertas LavamanosLavamanos Superficies de trabajo fáciles de limpiarSuperficies de trabajo fáciles de limpiar Impermeabilidad de sillasImpermeabilidad de sillas Aireación ninguna Aireación ninguna IluminaciónIluminación GabinetesGabinetes
1414
Bioseguridad Nivel 1 Bioseguridad Nivel 1 Facilidad del Laboratorio (Barreras Facilidad del Laboratorio (Barreras
Secundarias)Secundarias)
1515
Bioseguridad Nivel 1 Bioseguridad Nivel 1 Prácticas microbiológicas estándarPrácticas microbiológicas estándar
Restingir o limitar el Restingir o limitar el
acceso cuando se está acceso cuando se está
trabajandotrabajando
Prohibido comer, beber, Prohibido comer, beber,
y fumar y fumar
Prohibido pipetear con Prohibido pipetear con
la bocala boca
1616
Bioseguridad Nivel 1 Bioseguridad Nivel 1 Prácticas microbiológicas estándarPrácticas microbiológicas estándar
1717
Bioseguridad Nivel 1 Bioseguridad Nivel 1 Prácticas microbiológicas estándarPrácticas microbiológicas estándar
Lavado de manosLavado de manos
Decontaminar área de trabajo diariamenteDecontaminar área de trabajo diariamente
Minimizar salpicaduras y aerosolesMinimizar salpicaduras y aerosoles
Decontaminar los desechosDecontaminar los desechos
Programa de control de roedores e insectosPrograma de control de roedores e insectos
1818
Bioseguridad Nivel 1 Bioseguridad Nivel 1 Equipos de seguridad (Barrera primaria)Equipos de seguridad (Barrera primaria)
Ropa protectoraRopa protectora• BataBata• GuantesGuantes
Equipo personalEquipo personal• Protección facialProtección facial• RespiratoriaRespiratoria
1919
Bioseguridad Nivel 1 Bioseguridad Nivel 1 Requisitos de entrenamientoRequisitos de entrenamiento
SupervisionSupervision Científico con conocimiento general en Científico con conocimiento general en
microbiología o ciencia afínmicrobiología o ciencia afín
Personal LaboratoristaPersonal Laboratorista Conocimiento y habilidades específicas en las Conocimiento y habilidades específicas en las
técnicas y procedimientos de laboratoriotécnicas y procedimientos de laboratorio
2020
Bioseguridad Nivel 2Bioseguridad Nivel 2IntroducciónIntroducción
Trabajo con agentes de moderado Trabajo con agentes de moderado
riesgo potencial al personal y al medio riesgo potencial al personal y al medio
ambiente.ambiente.
2121
Bioseguridad Nivel 2Bioseguridad Nivel 2IntroducciónIntroducción
Se dispone de Inmunización o Se dispone de Inmunización o tratamiento antibiótico tratamiento antibiótico
Ejemplos:Ejemplos: Virus del SarampiónVirus del Sarampión Salmonella spp.Salmonella spp. Toxoplasma spp.Toxoplasma spp. Virus Hepatitis BVirus Hepatitis B
2222
Bioseguridad Nivel 2Bioseguridad Nivel 2IntroducciónIntroducción
Extrema precaución con agujas Extrema precaución con agujas contaminadas e implementos contaminadas e implementos cortopunzantescortopunzantes
Ejemplos:Ejemplos: Patógenos sanguíneosPatógenos sanguíneos Fluídos o secrecionesFluídos o secreciones
2323
2424
Bioseguridad Nivel 2 Bioseguridad Nivel 2 Facilidad del Laboratorio (Barreras Facilidad del Laboratorio (Barreras
Secundarias)Secundarias)
2525
Bioseguridad Nivel 2 Bioseguridad Nivel 2 Facilidad del Laboratorio (Barreras Facilidad del Laboratorio (Barreras
Secundarias)Secundarias)
RequerimientosRequerimientos Puertas bloqueablesPuertas bloqueables LavamanosLavamanos Gabinetes ampliosGabinetes amplios Superficies de trabajo fáciles de limpiarSuperficies de trabajo fáciles de limpiar Impermeabilidad de sillasImpermeabilidad de sillas
2626
Bioseguridad Nivel 2 Bioseguridad Nivel 2 Facilidad del Laboratorio (Barreras Facilidad del Laboratorio (Barreras
Secundarias)Secundarias)
RequerimientosRequerimientos Lavador de ojosLavador de ojos Adecuada iluminaciónAdecuada iluminación Cabina de bioseguridadCabina de bioseguridad Aireación dentro del laboratorio sin Aireación dentro del laboratorio sin
recirculación a ningún área del laboratoriorecirculación a ningún área del laboratorio
2727
Bioseguridad Nivel 2 Bioseguridad Nivel 2 Equipos de seguridad (Barreras primarias)Equipos de seguridad (Barreras primarias)
Cabina de Bioseguridad Clase IICabina de Bioseguridad Clase II Circulación del aireCirculación del aire Disposición del equipoDisposición del equipo TécnicaTécnica
2828
Bioseguridad Nivel 2 Bioseguridad Nivel 2 Equipos de seguridad (Barreras primarias)Equipos de seguridad (Barreras primarias)
BSL-1 Más:BSL-1 Más:Uso de cabinas de Uso de cabinas de bioseguridad (clase II) para bioseguridad (clase II) para trabajo con agentes trabajo con agentes infecciosos que involucran:infecciosos que involucran:
Aerosoles y salpicadurasAerosoles y salpicaduras Grandes volumenes Grandes volumenes Altas concentracionesAltas concentraciones
2929
Bioseguridad Nivel 2Bioseguridad Nivel 2 Facilidad de laboratorio (barreras Facilidad de laboratorio (barreras
secundarias)secundarias)
3030
Bioseguridad Nivel 2 Bioseguridad Nivel 2 Facilidad del laboratorio (Barreras Facilidad del laboratorio (Barreras
secundarias)secundarias)
Facilidades BSL-1 Más:Facilidades BSL-1 Más: AutoclaveAutoclave Lava - ojosLava - ojos
3131
Bioseguridad Nivel 2 Bioseguridad Nivel 2 Prácticas especialesPrácticas especiales
SupervisiónSupervisión Científico competente con mayor responsabilidadCientífico competente con mayor responsabilidad
• Limita el acceso de inmunocomprometidosLimita el acceso de inmunocomprometidos• Restringe el acceso a inmunizadosRestringe el acceso a inmunizados
Personal LaboratoristaPersonal Laboratorista Conocimiento y habilidades específicas en las Conocimiento y habilidades específicas en las
técnicas y procedimientos de laboratoriotécnicas y procedimientos de laboratorio Conocimiento de riesgo biológicoConocimiento de riesgo biológico
3232
Bioseguridad Nivel 2Bioseguridad Nivel 2
NoNo Romper, doblar, Romper, doblar,
re-usar, re-re-usar, re-enfundar las enfundar las agujasagujas
Recoger vidrio roto Recoger vidrio roto directamente con directamente con las manoslas manos
Prácticas especiales
3333
Bioseguridad Nivel 2Bioseguridad Nivel 2Prácticas especialesPrácticas especiales (cont.) (cont.)
3434
Bioseguridad Nivel 2Bioseguridad Nivel 2Prácticas especiales Prácticas especiales (cont.)(cont.)
Políticas y Políticas y procedimientos para procedimientos para entrada al laboratorioentrada al laboratorio
Señalización de Señalización de BioseguridadBioseguridad
Manual de bioseguridad Manual de bioseguridad específico para el específico para el laboratoriolaboratorio
Entrenamiento anualEntrenamiento anual
3535
Bioseguridad Nivel 2Bioseguridad Nivel 2Prácticas especiales Prácticas especiales (cont.)(cont.)
Uso de instrumentos para el transporteUso de instrumentos para el transporte
3636
Bioseguridad Nivel 2Bioseguridad Nivel 2Prácticas especiales Prácticas especiales (cont.)(cont.)
ImmunizaciónImmunización Líneas base séricasLíneas base séricas
3737
Bioseguridad Nivel 2Bioseguridad Nivel 2 Prácticas microbiológicas estándarPrácticas microbiológicas estándar
Igual que BSL1Igual que BSL1
Reportar salpicaduras y accidentesReportar salpicaduras y accidentes
No animalesNo animales
3838
Bioseguridad Nivel 3Bioseguridad Nivel 3
Trabajo con agentes que Trabajo con agentes que
potencialmente pueden causar potencialmente pueden causar
enfermedad letal como resultado de la enfermedad letal como resultado de la
exposición por la vía de inhalación.exposición por la vía de inhalación.
3939
Bioseguridad Nivel 3Bioseguridad Nivel 3
Examples:Examples:• M. tuberculosisM. tuberculosis• Virus de encefalitis de St. LouisVirus de encefalitis de St. Louis• Coxiella burnetiiCoxiella burnetii
4040
Bioseguridad Nivel 3Bioseguridad Nivel 3 Facilidad del laborarotio (Barreras Facilidad del laborarotio (Barreras
Secundarias)Secundarias)
4141
Bioseguridad Nivel 3Bioseguridad Nivel 3 Facilidad del laborarotio (Barreras Facilidad del laborarotio (Barreras
Secundarias)Secundarias)
Facilidades BSL-1 y 2 Más:Facilidades BSL-1 y 2 Más:
Edificio separado o zona aisladaEdificio separado o zona aislada
Entrada de doble puertaEntrada de doble puerta
Flujo de aire interno dirigido y de un solo pasoFlujo de aire interno dirigido y de un solo paso
4242
Bioseguridad Nivel 3Bioseguridad Nivel 3 Facilidad del laborarotio (Barreras Facilidad del laborarotio (Barreras
Secundarias)Secundarias)
Facilidades BSL-1 y 2 Más Facilidades BSL-1 y 2 Más (cont.):(cont.):
Recintos para equipos generadores de Recintos para equipos generadores de aerosolesaerosoles
Sellado (ventanas, otros accesos)Sellado (ventanas, otros accesos) Muros, pisos y techos son resistentes al Muros, pisos y techos son resistentes al
agua y fáciles de limpiaragua y fáciles de limpiar
4343
Bioseguridad Nivel 3Bioseguridad Nivel 3 Facilidad del laborarotio (Barreras Facilidad del laborarotio (Barreras
Secundarias)Secundarias)
•Facilidades BSL-1 y 2 Más Facilidades BSL-1 y 2 Más (cont.):(cont.): Protección de las líneas de vacíoProtección de las líneas de vacío
4444
Facilidad de diseñoFacilidad de diseño(Barreras terciarias)(Barreras terciarias)
Locación Locación del CDCdel CDCAtlantaAtlanta
4545
Facilidad de diseñoFacilidad de diseño(Barreras terciarias)(Barreras terciarias)
EstructuraEstructuraVentilaciónVentilación
4646
Prácticas Especiales BSL-2 Más:Prácticas Especiales BSL-2 Más: Trabajo en cabinas Trabajo en cabinas
certificadas certificadas Uso de equipos Uso de equipos
controladores de aerosolescontroladores de aerosoles Decontaminación de Decontaminación de
derrames inmediataderrames inmediata
Bioseguridad Nivel 3Bioseguridad Nivel 3 PrácticasPrácticas EspecialesEspeciales
4747
Bioseguridad Nivel 3Bioseguridad Nivel 3 Equipos deEquipos de Seguridad (Barrieras Primarias)Seguridad (Barrieras Primarias)
Equipos de Seguridad BSL-1 y 2 Más:Equipos de Seguridad BSL-1 y 2 Más:
Cabina de bioseguridad clase II o III Cabina de bioseguridad clase II o III para manipulación para manipulación de materialde material
infecciosoinfeccioso
4848
Bioseguridad Nivel 3Bioseguridad Nivel 3 Equipos deEquipos de Seguridad (Barrieras Primarias)Seguridad (Barrieras Primarias)
Equipos de Seguridad BSL-1 y 2 Más: Equipos de Seguridad BSL-1 y 2 Más:
Protección respiratoriaProtección respiratoria
4949
Bioseguridad Nivel 3Bioseguridad Nivel 3 PrácticasPrácticas EspecialesEspeciales
SupervisiónSupervisión Científico competente con experiencia en el Científico competente con experiencia en el
trabajo con los agentestrabajo con los agentes• Establece los criterios para ingresoEstablece los criterios para ingreso• Restringe accesosRestringe accesos• Desarrolla políticas y procedimientosDesarrolla políticas y procedimientos• Entrena al personal del laboratorioEntrena al personal del laboratorio
5050
Bioseguridad Nivel 3Bioseguridad Nivel 3 PrácticasPrácticas EspecialesEspeciales
Personal del LaboratorioPersonal del Laboratorio Sigue estrictamente las indicacionesSigue estrictamente las indicaciones Demuestra habilidadesDemuestra habilidades Recibe entrenamiento apropiadoRecibe entrenamiento apropiado Reporta accidentesReporta accidentes Participa en la vigilancia médicaParticipa en la vigilancia médica
5151
Bioseguridad Nivel 4Bioseguridad Nivel 4
Trabajo con agentes exóticos y peligrosos Trabajo con agentes exóticos y peligrosos que individualmente poseen un alto riesgo que individualmente poseen un alto riesgo de ser transmitidos en laboratorios por de ser transmitidos en laboratorios por aerosoles y amenaza la vidaaerosoles y amenaza la vida
5252
Bioseguridad Nivel 4Bioseguridad Nivel 4
Exposición potencial a patógenos que se Exposición potencial a patógenos que se dispersan por aerosol o con desconocido riesgo dispersan por aerosol o con desconocido riesgo de transmisiónde transmisión
Infección posiblemente letalInfección posiblemente letal Elemplos:Elemplos:
Ebola zaireEbola zaire Virus Sin nombreVirus Sin nombre Fiebre del valle riftFiebre del valle rift
5353
Bioseguridad Nivel 4Bioseguridad Nivel 4 Facilidad del laboratorio (Barreras Facilidad del laboratorio (Barreras
secundarias)secundarias)
5454
Bioseguridad Nivel 4Bioseguridad Nivel 4 Facilidad del laborarotio (Barreras Facilidad del laborarotio (Barreras
Secundarias)Secundarias)
Facilitdad BSL-1, 2 y 3 Más:Facilitdad BSL-1, 2 y 3 Más:
Edificio separado o zona aisladaEdificio separado o zona aislada
Entrada de doble puertaEntrada de doble puerta
Flujo de aire interno dirigido y de un solo pasoFlujo de aire interno dirigido y de un solo paso
Fuente y extractor de vacío exclusivoFuente y extractor de vacío exclusivo
5555
Bioseguridad Nivel 4Bioseguridad Nivel 4 Facilidad del laborarotio (Barreras Facilidad del laborarotio (Barreras
Secundarias)Secundarias)
Facilidad BSL-1, 2 y 3 Más Facilidad BSL-1, 2 y 3 Más (cont.):(cont.):
Recintos para equipos generadores de Recintos para equipos generadores de aerosolesaerosoles
Sellado (ventanas, otros accesos)Sellado (ventanas, otros accesos) Autoclave de doble puertaAutoclave de doble puerta Muros, pisos y techos son Muros, pisos y techos son
completamente selladoscompletamente sellados
5656
Bioseguridad Nivel 4Bioseguridad Nivel 4 Facilidad del laborarotio (Barreras Facilidad del laborarotio (Barreras
Secundarias)Secundarias)
Facilidades BSL-3 Más Facilidades BSL-3 Más (cont.):(cont.):
Puertas internas y externas interbloqueadas Puertas internas y externas interbloqueadas para prevenir aperturas simultámeaspara prevenir aperturas simultámeas
Líquidos afluentes son decontaminados por Líquidos afluentes son decontaminados por un método aprobado antes de su disposición un método aprobado antes de su disposición finalfinal
Debe haber un sistema de comunicación Debe haber un sistema de comunicación entre el interior y el exterior del laboratorioentre el interior y el exterior del laboratorio
5757
Bioseguridad Nivel 4Bioseguridad Nivel 4 Facilidad del laborarotio (Barreras Facilidad del laborarotio (Barreras
Secundarias)Secundarias)
(cont):(cont): Aire de emergenciaAire de emergencia Salida de emergenciaSalida de emergencia Planta eléctrica de Planta eléctrica de
emergenciaemergencia
5858
Bioseguridad Nivel 4Bioseguridad Nivel 4 Equipos de seguridad (Barreras Equipos de seguridad (Barreras
primarias)primarias)
(cont.):(cont.): Cabina biológica Cabina biológica
clase II B2 o IIIclase II B2 o III
5959
Bioseguridad Nivel 4Bioseguridad Nivel 4 Equipos de seguridad (Barreras Equipos de seguridad (Barreras
primarias)primarias)
(cont.):(cont.): Traje personal de Traje personal de
presión positivapresión positiva
6060
Bioseguridad Nivel 4Bioseguridad Nivel 4 Prácticas especialesPrácticas especiales
(cont.):(cont.): Se decontamina todo Se decontamina todo
desecho sólido o desecho sólido o líquidolíquido
Acceso exclusivo y Acceso exclusivo y controladocontrolado
Cuarto de cambio de Cuarto de cambio de roparopa
Cuarto de fumigaciónCuarto de fumigación DuchasDuchas
6161
Bioseguridad Nivel 4Bioseguridad Nivel 4 PrácticasPrácticas EspecialesEspeciales
SupervisiónSupervisión Científico competente con experiencia en el Científico competente con experiencia en el
trabajo con los agentestrabajo con los agentes• Establece los criterios para ingresoEstablece los criterios para ingreso• Restringe accesosRestringe accesos• Desarrolla políticas y procedimientosDesarrolla políticas y procedimientos• Entrena al personal del laboratorioEntrena al personal del laboratorio
6262
Bioseguridad Nivel 4Bioseguridad Nivel 4 PrácticasPrácticas EspecialesEspeciales
Personal del LaboratorioPersonal del Laboratorio Sigue estrictamente las indicacionesSigue estrictamente las indicaciones Demuestra habilidadesDemuestra habilidades Recibe entrenamiento apropiadoRecibe entrenamiento apropiado Reporta accidentesReporta accidentes Participa en la vigilancia médicaParticipa en la vigilancia médica Recibe vacunas disponiblesRecibe vacunas disponibles