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第三章 菌种的生产与保藏. 菌种,好比农作物的种子,是食用菌生产的根本,其优劣直接影响食用菌的产量和质量。因此,从事食用菌菌种工作的单位都必须认真做好菌种的培育和保藏工作。. 一、菌种培育技术. 人工培育的菌种有母种、原种和栽培种之分。 1 )母种(一级菌种): 用孢子分离或组织分离等培育的菌丝体称为母种。 2 )原种(二级菌种): 把母种扩大到木屑、棉籽壳等为主的培养料上的菌种称为原种。 3 )栽培种(三级菌种) :由原种扩大培养成为生产上使用的菌种称为栽培种。 4 )菌种: 实质上就是经过人工培养并进一步繁殖的食用菌的纯菌丝体。. 食用菌的制种程序. 孢子分离. - PowerPoint PPT Presentation
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第三章 菌种的生产与保藏
菌种,好比农作物的种子,是食用菌生产的根本,其优劣直接影响食用菌的产量和质量。因此,从事食用菌菌种工作的单位都必须认真做好菌种的培育和保藏工作。
一、菌种培育技术
人工培育的菌种有母种、原种和栽培种之分。
1 )母种(一级菌种):用孢子分离或组织分离等培育的菌丝体称为母种。
2 )原种(二级菌种):把母种扩大到木屑、棉籽壳等为主的培养料上的菌种称为原种。
3 )栽培种(三级菌种):由原种扩大培养成为生产上使用的菌种称为栽培种。
4 )菌种:实质上就是经过人工培养并进一步繁殖的食用菌的纯菌丝体。
食用菌的制种程序
组织分离接种→母种(一级)
接种→ →原种(二级)
接种→→栽培种(三级)
种菇孢子分离
经过这样三级培养,食用菌菌丝数量大大增加。
一般 1 支试管菌种可繁殖 4~6 瓶原种,每瓶原种又可扩大繁殖 60~100 瓶栽培种。
培养
培养
母 种
原种、
栽培种
栽培种
食用菌的制种程序
菌种生产必须在严格的无菌条件下进行。为了保证制种的成功,除必须掌握制种技术外,还需要一些基本的设备和用品。
1 、接种设备⑴ 接种室要求 :
①关闭严密,便于熏蒸、消毒;②空间不宜过大,一般长、宽、高均为 2m 即可 ;
③接种室外面最好有一个缓冲室;④墙壁、天花板和地面都要平整、光洁;⑤内装有紫外灯和日光灯。
( 一 ) 菌种生产常用的设备和用具
1 、接种设备 ⑵ 接种箱 当菌种生产量不大时,可在接种箱内进行。它是用木条作成框架,以 3mm 厚的玻璃作箱壁。要求:① 关闭严密,便于熏蒸;② 装有日光灯和紫外灯。优点:搬动方便,操作人员不会受有毒气体危害。缺点:容量小。
1 、接种设备 ⑶ 超净工作台原理:超净工作台是利用过滤除菌的原理,先将空气过滤,得到无菌空气,然后将无菌空气从风洞打出,使工作台范围内成为无菌状态。要求:放置工作台的房间要清洁,空气流动小,最好安装灭菌灯。优点:有效可靠,操作使用方便,在夏季接种时,使操作人员感到舒适。 每台 3000 元左右,有条件的食用菌专业户,可选用这种先进的接种设备。
超净工作台
( 一 ) 菌种生产常用的设备和用具 2 、灭菌设备
1 )手提式:容量小,适于斜面试管及玻璃器皿等;
2 )立式: 容量大,投资大;
3 )卧式:容量大,投资大;
4 )家用 24 或 26 cm 压力锅:母种、原种培养基 。
Ⅰ高压蒸气灭菌锅
优点:省时、省燃料、 效果好
2 )、 3 )一般在菌种场或研究所应用。
灭菌设备 Ⅰ 高压蒸气灭菌锅
( 一 ) 菌种生产常用的设备和用具 2 、灭菌设备
Ⅱ 常压灭菌锅 目前农村生产栽培种的必备设备,实际上是一种大型蒸笼式煮灶。底部为铸铁大锅,上部为圆形木桶,桶内装数层供放培养基的格架。桶盖装有活络搭及密闭的橡皮圈,由于锅内温度最高是 100℃,所以灭菌时间需维持 10~12h ,才能达到灭菌效果。
( 一 ) 菌种生产常用的设备和用具 3 、培养设备
⑴ 培养室大小:不宜过大,一般以 20 ~25℃ ℃,培养 500
0~6000 瓶菌种为宜,太大不易保温和管理。要求:干净、通风、保温,应设有调温设备,使室温保持在 20 ~25℃ ℃。门窗应设铁纱,以防鼠、虫为害。⑵ 生化培养箱 是专业工厂生产的恒温电器设备,用于培养母种或少量原种,可以根据需要任意温度调节。
( 一 ) 菌种生产常用的设备和用具 4 、培养菌种的容器母种:试管,常用规格 20×180~200mm , 18×
180mm 等。
原种、栽培种
菌种瓶:盐水瓶、罐头瓶
菌种袋聚丙稀袋
聚乙稀袋规格有: 12~15×30~35 cm ,
17×35~45 cm
母种 -试管
原种、栽培种—菌种瓶或塑料袋
菌种瓶
( 一 ) 菌种生产常用的设备和用具 5 、接种工具 移植菌种于培养基上的工具称接种工具,主要有以下几种:
接种针、环、刀、钩、铲、锄、枪等;
( 一 ) 菌种生产常用的设备和用具6 、常用的消毒药品
⑴ 70% 酒精:一般用于手、种菇表面消毒;
⑵ 0.1%升汞:常用于玻璃器皿、非金属器械及种菇表面消毒;
⑶ 0.1%KMnO4 :一般用于用具、器皿消毒;
( 一 ) 菌种生产常用的设备和用具6 、常用的消毒药品
⑷ 5%石炭酸:喷洒墙壁、地面及擦洗桌面等,也可用来苏尔代替;
⑸ 2%来苏尔、新洁尔灭:用法同上;
⑹甲醛(福尔马林):用于菇房和接种箱等空气消毒;
方法:关闭门窗消毒,自行气化;
用量: 10mL甲醛+ 5g KMnO4/立方米。
( 一 ) 菌种生产常用的设备和用具( 二 ) 母种生产技术
1 、母种培养基
食用菌母种培养基的种类繁多,由于不同营养类型的食用菌对营养物质的要求不同,所以,在培养不同食用菌母种时,应选择适宜该菌种的培养基。
母种培养基要求营养丰富、完全、氮源、维生素的比例应高。
现将食用菌常用的母种培养基列举如下 :
( 一 ) 菌种生产常用的设备和用具( 二 ) 母种生产技术
⑴ 配方①马铃薯葡萄糖琼脂培养基( PDA ) 马铃薯 200g 、葡萄糖(或蔗糖) 20
g 、琼脂 20g 、 H2O 1000mL 、 pH 6.5 。
适用于一般食用菌母种分离与培养,但草菇、猴头菌等在此培养基上生长不良。
( 二 ) 母种生产技术
②综合马铃薯培养基
马铃薯 200g 、葡萄糖(或蔗糖) 20g 、 KH
2PO4 2g 、 MgSO4 0.5g 、维生素 B1 10mg 、琼脂 20g 、 H2O 1000mL 、 pH自然。
适合培养草菇、猴头菌、灵芝及各种食用菌菌种分离、保藏。
( 二 ) 母种生产技术
③胡萝卜葡萄糖琼脂培养基
胡萝卜 200g 、葡萄糖(或蔗糖) 18~20g 、琼脂 20g 、 H2O 1000mL 、 pH自然。
( 二 ) 母种生产技术
④玉米粉培养基
玉米粉 40g 、葡萄糖(或蔗糖) 10g 、琼脂20g 、 H2O 1000mL 、 pH自然;
适用于大多数食用菌菌丝的生长。
⑤马铃薯、葡萄糖、蛋白胨、琼脂培养基
马铃薯 200g 、葡萄糖(或蔗糖) 20g 、蛋白胨 10g 、琼脂 20g 、 H2O 1000mL 、 pH自然;
适用于培养和保藏多种食用菌。
( 二 ) 母种生产技术⑥黄豆芽、松针培养基
黄豆芽 250g 、松针 50g 、葡萄糖(或蔗糖) 20g 、琼脂 20g 、 H2O 1000mL 、pH 5~5.5 。
将松针、黄豆芽按量称好,加水煮 30min ,取滤液,加入葡萄糖、琼脂,充分搅拌,使琼脂熔化,补水至 1000ml ,即分装试管。
主要用于培养竹荪母种。
( 二 ) 母种生产技术
⑦苹果汁培养基
苹果 100g 、蛋白胨 2g 、蔗糖 20g 、琼脂 20g 、 H2O 1000mL ;
主要用于草菇培养
(配制方法同 PDA )
⑴ 配方
⑵ 配制方法(以 PDA 为例) 马铃薯(去皮、去芽眼)→切成片→称取 200g+ 1000mL H2O→煮沸→双层纱布过滤→取滤液并补足 1000mL+琼脂→熔化+其它营养物质→调节 pH (用 HCl 或 NaOH )→分装试管→灭菌(高压蒸气灭菌 15-30min )→制成斜面→检查灭菌效果(即 28~30℃培养 2~3d )
其它天然培养基或综合培养基,如:玉米粉、黄豆粉、胡萝卜、麸皮等原料,加适量水煮汁过滤,取滤液与其它成分混合。
( 二 ) 母种生产技术
2 、母种分离
母种分离方法
孢子分离
组织分离
基质分离
有性
无性
⑴ 孢子分离法
利用孢子在适宜培养基上形成菌丝来获得纯菌种的方法。
孢子分离法
1 )单孢子分离法:培养基上只接种 1个担孢子,使它萌发成菌丝体而获得纯菌种的方法。 如:双孢蘑菇、草菇单个孢子分离得到菌丝便能结实。
(一个孢子→萌发→菌丝体→纯种)
2 )多孢子分离法:许多孢子接种于同一培养基上,使它们萌发自由交配来获得纯菌种的方法。如:香菇、平菇、金针菇、毛木耳等。 (多个孢子→萌发→菌丝体→纯种)
( 二 ) 母种生产技术
下面先解释二个基本概念
1 )同宗配合:同一担子孢子萌发产生的两条菌丝之间进行结合便能生育(自交亲合、可孕,类似于高等植物自花授粉),可用单孢子分离。
如:双孢蘑菇、草菇
2)异宗配合:同一性别菌丝之间不亲合,只有两条性别不同的菌丝交配才能产生子实体。
大多数食用菌属此类型,需用多孢子分离法。
( 二 ) 母种生产技术
担子菌亚门中,约 10% 菌类属同宗结合, 90% 以上是异宗配合,所以单孢子分离对大多数食用菌不适用,只有育种时才采用。
此法技术复杂,生产上很少采用,在此不作详述。
( 二 ) 母种生产技术 多孢子分离简单易行,生产上经常采用,多孢子分离的具体操作方法有以下几种:
①整菇插种法:伞菌常用此法采得孢子。
即选择成熟度适当的优良种菇,在无菌操作下,插入无菌孢子采集器内,置适温下让其自然弹散孢子。用接种环取少量孢子,放入试管斜面上培养。
种菇选择:菌丝生长健壮,无病虫杂菌,出菇均匀,转潮较快,菇形圆整,菌盖肥厚,达八九成熟。
参见 P48
( 二 ) 母种生产技术
孢子采集器是用来采集食用菌孢子的一种装置。
孢子采集器
搪瓷盘(大号培养皿)
培养皿
种菇支架
玻璃钟罩(大漏斗)
参见 P48
②悬钓法 此法主要用于耳类(黑木耳、毛木耳、银耳等)孢子的采集。
耳片(表面消毒) → 悬挂于培养基上方→培养→ →取出挂钩与耳片→培养→挑取先端菌丝→转管纯化→母种
12~24h
培养基耳片 参见 P48
组织分离:指通过菇体组织分离纯种。
优点:操作简便、取材广泛、不易变异,保持原菌种优良种性。
方法:
① 选择种菇(出菇早、无病虫害、柄短、肉厚、大小适中、 5~6 分成熟)
② 组织分离
⑵ 组织分离法 参见 P45
选择种菇→表面消毒( 75% 酒精或 0.1%升汞)→撕成两半→取菌柄菌盖交界处→小块菌肉→移入 PDA→ 培养→观察→转管→纯种 上述分离物在 25℃下,经 3d~5d 可看到分离物表面长出白色绒毛状丝,每隔 1d~2d 检查 1次,随时淘汰霉菌、细菌污染的培养物,培养 10d~15d ,再作 1次转管即得到纯种。
⑵ 组织分离法 参见 P45-46
注: ⑴取组织块不要贪大,因组织块小易定植 ;
⑵ 有些食用菌不易用组织分离法获纯种; ⑶ 不同的食用菌切取部位和消毒方法不同。如: 1 )红菇、乳菇等,因它们菇体细胞已泡囊化,再生能力极弱;又如: 2 )银耳和木耳等胶质菌,它们子实体中菌丝含量极少,组织分离法不易成功。而只能取其生长的基质即菇木、耳木分离。
⑵ 组织分离法
概念:
由菇木、耳木、培养料等食用菌生长基质中的菌丝分离培养而成。这是利用潜在于寄主组织内的菌丝体获得纯种的方法。
(常用于银耳及木耳菌种分离)
⑶ 基内菌丝分离法(基质分离法)参见 P46-47
段木内菌丝分离法:
取 1~2cm 菇木、耳木(子实体着生部位)→去皮→消毒( 75% 酒精或 0.1%升汞浸泡 1
min )→切去四周木块→切成火柴杆粗细, 0.5
cm长的小木梗→取 1 根放入试管斜面上→培养→取菌丝→转管纯化
⑶ 基内菌丝分离法(基质分离法)
参见 P46-47
( 二 ) 母种生产技术3 、菌种提纯与扩大繁殖 用孢子、组织或基质分离法得到的菌种,一般不宜直接用于生产,必须经过提纯方可应用。
⑴ 提纯:选稀疏单菌落→边缘取菌→接种试管斜面( 3~5支)→培养→纯菌种。
⑵扩大繁殖:提纯的母种或从有关单位引进的母种,数量均很少,应扩大繁殖后再用。
在母种繁殖时,最好一次多移些,不易多次转管,以免影响出菇率,降低产量和质量。
一支斜面母种可移接 40支左右斜面试管。
4 、质量检验 对分离、引进或转管扩大的菌种,应经过质量鉴定,选优去劣,方可使用。1 )检验方法① 外观鉴定优良菌种:菌丝浓白、粗壮、富有弹性,则生命力强。如有子实体或茶褐色被膜,只要除去仍可使用。老化菌种:菌种已收缩、干燥或菌丝体自溶产生了大量红褐色液体,说明生活力弱,不可使用。
( 二 ) 母种生产技术
②显微镜检验 挑取少许菌丝于载玻片上,加蒸馏水 1滴,盖上盖玻片,观察菌丝形态是否为培育的菌种。
③菌丝生长速度 将其接种到适宜斜面培养基上,在适温下培养。凡菌丝生长较快、整齐、浓密而健壮的就是优良母种。
参见 52( 二 ) 母种生产技术
②显微镜检验③菌丝生长速度④出菇试验 进行子实体产量和品质评比。 经以上检验,通过综合评比,选出菌丝生长速度较快,子实体生长健壮、品质好、产量高的母种,即可供生产上使用。
参见 52( 二 ) 母种生产技术
( 二 ) 母种生产技术
2 )检验标准
①首先要辨认分离或引进的是不是所需要的菌种;
② 有无杂菌污染,是否老化。
简 答 题
1 、食用菌生产中常用的设备和用具有哪些?2 、什么叫组织分离法?写出组织分离法的步骤和注意事项。3 、写出 PDA 培养基配方及配制方法。
( 二 ) 母种生产技术( 三 ) 原种和栽培种的生产技术
原种和栽培种的生产,无论是培养基成分,配制方法和灭菌方法基本上是相同的。
1 )原种:是由试管斜面培养基培养的母种作种源接种而成,主要用于繁殖栽培种,也可直接用于生产。(母种→原种)
2 )栽培种:由原种作种源扩大而成,只能用于生产。(原种→栽培种 )
( 三 ) 原种和栽培种的生产技术
1 、常用培养料的配方和配制方法
培养料
木屑——米糠培养料:木生菇类,如:木耳、银耳、香菇;
草茎或草粪——厩肥培养料:草生菇类,如:蘑菇、草菇;
棉籽壳——米糠培养料:多种菇类。
⑴粪草培养基(适用于蘑菇)
稻草或麦秸 20kg 、粪肥(干) 30kg 、石膏500g 、水适量。
方法:稻草切成 2cm长+粪肥→混合发酵+石膏→调水→装瓶→灭菌
⑵稻草麸皮培养基(草菇)
干稻草 78% 、麸皮或米糠 20% 、蔗糖 1% 、过磷酸钙 1% 、水适量
方法:稻草切成 2cm长→发酵→+蔗糖+麸皮+过磷酸钙
1 、常用培养料的配方和配制方法
⑶ 木屑米糠培养基(香菇、木耳、猴头、平菇等)
木屑 78% 、麸皮或米糠 20% 、石膏 1% 、蔗糖 1% 、水适量。
⑷木屑、麸皮、黄豆粉培养基(银耳)
木屑 50kg 、麸皮 15kg 、黄豆粉 1kg 、蔗糖 0.75kg 、 MgSO4 0.25kg 、水 70~75kg 。
⑸棉籽壳培养基(平菇、猴头、金针菇) 棉籽壳 99.7% 、蔗糖 0.1% 、石膏 0.2% 、水适量。
1 、常用培养料的配方和配制方法
( 三 ) 原种和栽培种的生产技术
2 、培养基(料)配制原则
⑴掌握碳氮比例
食用菌对碳和氮的需要有一个比例,简称碳氮比( C/N)。
菌丝体生长阶段: C/N =20 1∶ ;
子实体形成阶段: C/N =30~40 1∶ ;
C/N 过高,菌丝体生长过旺,而子实体小、产量低。
2 、培养基(料)配制原则
⑵ 选好培养材料①首先选不含杀菌物质的木屑 杉、松、樟等树种,含酚、酯、精油等杀菌物质,会抑制食用菌生长。要用必须经过处理,如:蒸煮、晒等。 ② 根据食用菌的喜好选木屑 如:培养香菇用桦木屑就比椴木屑好; 培养金针菇用构,楮等木屑就比用榆、槐等木屑好。
⑶ 注意物理性状 培养原料要注意颗粒粗细、质地软硬程度,以及持水性能等物理性状。⑷调节酸碱度 各种食用菌需要的 pH值不同,配制培养料时,应选用 NaOH 、石灰、盐酸或过磷酸钙等物质调节 pH值。霉菌比食用菌喜欢更低的 pH值,生产上有时为了控制这类杂菌的发生,往往将 pH值适当调高 0.5~1 。
2 、培养基(料)配制原则
3 、原料选择的注意事项(几点说明)
⑴ 木屑:
树种:除松树、杉树、柏树、樟树、芸香属、按属等树种之外,绝大多数阔叶树和木屑都可以利用。(因其中含有酚、酯、精油等杀菌物质)
粗细:不宜过细,以免培养基过湿或通气不良。
3 、原料选择的注意事项(几点说明)
⑴ 木屑:
选择:根据食用菌分解能力选择,分解能力较强的食用菌采用硬质阔叶树木屑,反之采用软质树种木屑。
如:金针菇分解能力较弱,以含单宁较少木屑为宜,木屑越陈越好;
茯苓菌分解能力较强,可采用颗粒粗的松木屑或松木钉。
⑵米糠、麸皮作用
作用:补充氮源和维生素。
稻草、麦秸、木屑、棉籽壳等纤维素原料,含氮量低。如:木屑含氮量 0.03% 以下。
麸皮:含氮量比米糠多,但维生素不如米糠。
米糠:含氮量比麸皮少。
用量:一般 10%~20% ,过多易引起污染。
3 、原料选择的注意事项(几点说明)
⑶加糖的作用
①初期补充碳源,用量 1%~5% 。
②诱导胞外酶的产生。
纤维素原料,食用菌利用缓慢。加入少量白糖作为食用菌初期补充碳源,促进菌丝快速生长,同时诱导纤维素酶的产生,更好地利用纤维素。
3 、原料选择的注意事项(几点说明)
⑷Ca2 +作用
① 提供食用菌钙离子:原料中加石膏、CaCO3 或过磷酸钙、骨粉提供食用菌钙离子;
②钙不断中和食用菌产生的有机酸;
③钙还能中和单宁;
④减少过量 K 、 Mg对菌丝中毒,促进菌丝生长。
3 、原料选择的注意事项(几点说明)
( 三 ) 原种和栽培种的生产技术
4 、原种、栽培种的制作方法
按配方称取原料→拌料→装瓶(袋)→打洞(孔径 1cm深至瓶底)→灭菌( 1.5kg/ cm2 , 1.5~2h )→冷却→接种(接入黄豆大小一块)→培养( 25 ~27℃℃)→菌丝长满瓶(袋)→培养 7d~8d→ 扩大成栽培种。
( 三 ) 原种和栽培种的生产技术5 、杂菌检查(菌种检查)
接种后的原种,一般在 3d~5d左右菌丝恢复生长,应每天全面检查杂菌情况,如有污染及时剔除。(正常为白色,若混有其它色泽,应及时处理);如发现接种块无新菌丝萌发,则认为是死菌,应及时补种。 正常:菌丝白色 杂菌:黄、红、绿、黑 死菌:补种
二、菌种保藏
菌种是食用菌栽培成败的关键。分离筛选一株优良的菌种是一项艰苦的任务,而长期保持优良菌种的性能,也是一项极为重要的工作。食用菌与其他微生物一样,都是有遗传性和变异性。
遗传性:保证了优良菌种的性能相对稳定,能传给下一代,为菌种保藏提供了良好的条件。
变异性:使高产优质的菌种,逐渐衰退,给菌种保藏带来了困难。
菌种保藏的目的:
① 保持菌种的优良性状;
②降低衰退速度。
③确保菌种纯洁,长期在生产上应用。
(不衰退、不死亡、不污染杂菌)
二、菌种保藏
原理:降低菌种代谢活动。
降低代谢活动方法:(创造各种条件)
低温
干燥
缺氧等
在这些条件下,食用菌可处于“休眠”状态或处于微弱的代谢活动。
常用的保存方法有以下几种。
二、菌种保藏
(一)斜面低温保藏法 这是一种较好的简易保藏法,目前应用最多。方法:将培养好的斜面菌种,放入 4℃冰箱内保藏。保存期: 3~6月适用范围:多数食用菌注:不适于草菇。由于草菇对低温的耐受力较差,其菌丝在 5℃下易死亡,所以保藏草菇菌种的温度需提高至 10~12℃或在草菇斜面菌种上加 3~4mL 10%甘油防冻。
二、菌种保藏
(二)石蜡封藏法(隔绝空气法)方法:用注射器注入灭菌的石蜡。注入量以高出斜面尖端 1cm 为宜,然后塞上棉塞或无菌橡皮塞,用蜡封好,保藏在冰箱或低温干燥处。
(菌丝体与空气隔绝,降低其代谢活动,防止培养基干燥)
保存期: 6年
适用范围: 可用于保藏所有不宜用冷冻或干燥保藏的真菌。
石蜡
培养基菌丝体
二、菌种保藏
(三)担孢子保藏法(干燥)
食用菌的孢子,可用滤纸条、河砂、氯化硅胶作吸附剂,干燥后进行保存。
1 、滤纸片保藏法
将食用菌的孢子吸附在无菌的滤纸条上,干燥后进行保存,一般可保存 3~5年。
方法:滤纸片(剪成 4×0.8cm 小条→灭菌)→收集孢子(让孢子弹射到滤纸条上)→将有孢子的滤纸条放入试管中(含硅胶)→封口→冰箱中保存
(三)担子孢子保藏法(干燥)
1 、滤纸片保藏法
2 、砂土管保藏法
砂土( 2 1∶ )→装管→灭菌→接入孢子→干燥→保存。
(四)冷冻、真空、干燥保藏法
这种方法是利用低温、干燥、缺氧等条件保存菌种,一般可保存 10
年左右。
二、菌种保藏三、制种、保藏中易碰到的问题及处理方法1 、母种污染处理⑴细菌污染底部取菌:可根据细菌只发生在培养基表面,而真菌菌丝能穿透到培养基内部的特点,用无菌操作法敲破试管取出培养基,在培养基的底部挑取一小块带有菌丝的培养基,移植到另一试管中培养,可得到纯正的母种。
二、菌种保藏三、制种、保藏中易碰到的问题及处理方法1 、母种污染处理⑴细菌污染底部取菌覆盖培养:将熔化培养基冷却到 40℃,倒在已污染细菌的斜面上,使之形成厚约 20 cm 的覆盖层,当食用菌菌丝透过培养基形成新的菌落时,即可挑取转管纯化。
三、制种、保藏中易碰到的问题及处理方法1 、母种污染处理⑴细菌污染⑵真菌污染 若污染的是青霉、黄霉、木霉等真菌,只要母种菌丝与这些杂菌没有相联或尚有一部分菌丝没有相联,并且这些杂菌的菌丝还没有产生孢子时,可以用无菌方法仔细挑取没有相联的一部分菌丝,移植到另外的试管中继续培育,就能得到纯正的母种。
三、制种、保藏中易碰到的问题及处理方法1 、母种污染处理2 、原种、栽培种被杂菌污染的原因有哪些?怎样鉴别? 根据杂菌开始发生的部位,大致有以下几种污染原因:⑴若杂菌同时在培养基的上、中、下部位发生,主要是由于培养基灭菌不彻底造成的。⑵若杂菌开始发生在接种块上,这很可能是母种或原种已经感染了杂菌;或者是由于接种工具不严格(消毒),把杂菌带入。
2 、原种、栽培种被杂菌污染的原因有哪些?怎样鉴别?⑶若杂菌先在培养基表面发生,这是由于接种过程中无菌操作不严而引起的。⑷若杂菌是在接种后若干天才发生的,而且是发生在瓶口往下挂的,这说明杂菌是从棉花塞侵入培养基的。引起的原因是培养室湿度过大、棉塞受潮,造成霉菌滋生所致。
三、制种、保藏中易碰到的问题及处理方法
3 、为什么母种不能多次转管移植?
母种转管次数多了会削弱菌丝的生活力,降低出菇率,甚至造成菌丝不孕而不能形成子实体。因此母种培育可以一次多培育几支试管,不要反复多次分离转管,以确保菌丝旺盛的生活力。
(发生变异)
4 、优良菌种的标准是什么?
各种食用菌菌种,既有特定的质量标准,也有共同的质量标准。这些共同的质量标准主要是纯、壮两条。
⑴纯:除银耳菌种,其余各种栽培食用菌均是一种菌丝体的纯培养物,不得混入杂菌或纯培养物以外的其它菌种。
例如:香菇 7925 菌种,只能是 7925 菌株菌丝体的纯培养。
4 、优良菌种的标准是什么?
第一、不得混入毛霉、根霉、曲霉、木霉等任何霉菌或细菌、病毒;(杂菌)
第二、也不得混入平菇、金针菇等其它食用菌的菌丝体;(其它食用菌)
第三、也不得混入香菇 7925 菌株以外的任何一种香菇菌株。(其它菌株)
⑵壮:菌种长相正常、长势旺、再生能力强。
1 、培养料中麸皮、米糠的主要作用有( )。 A 补充维生素 B 提供碳源 C 提供氮源 D 提供矿质元素
一、选择题
2 、培养料中加石膏、 CaCO3 等的作用主要有( )。 A 提供 Ca++ B 中和有机酸 C 补充碳源 D 提供能源
1 、菌种袋内出现了绿色、黑色、黄色、红色等颜色,原因是( 1 ),若此现象同时发生在菌种袋的上、中、下部位,其原因可能是( 2 )。防止此现象发生通常可用( 3 )、( 4 )等处理。( 1 )杂菌污染,( 2 )培养料灭菌不彻底,
( 3 ) 15% 的石灰水, ( 4 ) 0.3% 多菌灵
14 、食用菌栽培常用的消毒药品有( 5 )、( 6 )、( 7 )等。( 5 ) 70%酒精、( 6 ) 0.1%升汞、( 7 ) 0.1%KMn
O4
二、填空题
三、简答题
1 、优良菌种的标准是什么?
2 、菌种保藏的原理和常用的保藏方法?
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