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Dépistage sélectif des erreurs innées du métabolisme
Olivier BOULAT, Médecin adjoint, MER2 Laboratoire Chimie Clinique
2
Case report
Male, 24 years old
Before hospitalization:
–Healthy, at a football camp for 1 week
–48 hours before hospitalization:
headache, vomiting & progressive
confusion
Case report
• Day 1, 4 a.m.: Check in, in the emergency unit
• Quickly transferred into the Intensive Care Unit:
1. Suspicion of acute encephalitis
(Clinical status: Hyperleucoytosis 30 G/l; Procalcitonin 62 mg/l)
2. Sudden pulseless electrical activity , with wide QRS at ECG, necessitating prolonged cardiopulmonary resuscitation and repeated glucose administration
3. Return to sinusal tachycardia
3
Case report
He then developed:
1. Rhabdomyolysis (CK 161’000 U/l)
2. Elevated liver enzymes (ASAT 2800 U/l, ALAT 500 U/l) with a CT Scan consistent with steatosic hepatomegaly
3. Acute anuric renal failure (P-Creatinin 500 µmol/l) requiring renal replacement therapy
Screening for intoxicationEthanol
Digoxine
Salicylate
Negative
??? Hypoglycemia, hyperammonemia, encephalopathy,
QRS widening, rhabdomyolysis, metabolic acidosis ???
-Could this be an
internal intoxication
(IEM) ?
⇒ Question adressed
to the IEM network
on Day 2 of
hospitalization
4
Analyzing the results with the IEM networkGazometry:
Urine Stix:
Blood ammonium:
Parameter Normal range Day 1, 10h30 Day 1, 14h00Color Yellow RedProt. Neg - traces g/l 0.3 1.0Ketones Traces Traces
Parameter Normal range Day 1, 13h45 Day 2, 9h30NH4 <50 umol/l 284 40
Parameter Normal range Day 1, 9h19 Day 1, 9h42 Day 1, 9 h51Arterial Glc 4.2 - 6.1 mM 2.9 2.2 8.9pH 7.35 - 7.45 7.275 7.185 7.244pCO2 35 - 45 mmHg 43.3 54 42.6Bic 22 - 26 mmHg 19.5 19.6 17.8Lactate 0.63 - 2.44 mM 5.7 6.2 5.7K 3.5 - 4.6 mM 6.9 6.5 6.5
Lipolyse
Corps cétoniques
Hypoglycémie
Système carnitine
Acétyl-CoA
Corps cétoniques
ß ß -- o x y d a t i o no x y d a t i o n
MitochondrieMitochondrie
Glucose Acyl-carnitinesSangSang
AcidesOrganiques
CorpsCétoniques
UrineUrine
CO-CarnitinesAcyl-Carnitines
CO-SCoAAcyl-CoA
CH3CO-SCoA
CarnitineCoA
Acides gras libresCOOH
ß-oxydation defects
Carnitine libre
Acyl-carnitines
AcidesOrganiques
5
Cycle de l’urée; Ammoniaque
Selective screening in emergency
•Organic Acids in urine (GC-MS)
•Acylcarnitines in plasma (TMS)
•Amino acids in plasma (HPLC)
IEM laboratory
6
Acylcarn. Norm. 15.03 17.03C0 5.6-20.9 20.36 2.47C6 0.02-0.16 3.35 0.11C8 0.02-0.8 44.66 0.54C10:1 0.03-0.46 3.30 0.19C10 0.03-0.9 3.13 0.09
Day 1, during metabolic crisis Day 3, after hemodialysis
Case report: Acylcarnitine profile in plasma
Case report:
•Diagnosis, day 3 : Medium Chain Acyl-CoA Dehydrogenase Deficiency (MCADD)
•Genetic confirmation: Homozygous for the most common mutation (A985G)
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MCADD
• Most frequent inborn error of fatty acidoxidation metabolism (1:10.000 live births)
•Usually symptomatic in early life - knowncause of sudden infant death syndrome
Test included in the newborn screening (in CH) since 2005 only
∼ 80’000 live births/year in CH
⇒ 4 – 90 y: > 600 unscreened in CH
Catamnesis
Month 1 - hospitalization:
renal replacement therapy
Month 2: discharged from hospital
Month 3: back to work (50%)
Month 4: normal cardiac, hepatic and renal functions
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Leçons de ce cas pour les EIM:• EIM, Héréditaire et non toujours congénital.• Maladies individuellement rares: y penser.• Bilan biologique de base comprenant
notamment:Glucose, Gazométrie, Lactate, Ammoniaque, Corps cétoniques urinaires.
• Prélèvements concomitants, durant la crise.• Conserver un prélèvement de plasma et d’urine
du moment de la crise (-20°C).
Erreur innée du métabolisme
Garrod en 1909(Alcaptonurie), crée le terme de EIM:« inaptitude à dégrader le cycle benzène de l’acide homogentisique du fait d’un déficit enzymatique »
Homogentisate
Maleylacétoacétate
Homogemtisic acid oxydase (1958)
Benzoquinone acétate
Polymérisation
Pigment ochronotique de l’alcaptonurie
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Le « pas » d’homéostasie
Phe
Tyr
Enzyme (PAH)& cofacteur (BH4)
Hydroxylation de la phénylalanineEnzyme (hépatique) la phénylalanine hydroxylase catalyse l’hydroxylation de la Phe en Tyr en utilisant un cofacteur, le BH4.
Le « pas » d’homéostasie II
http://www.bh4.org/biodefimages/Fig_bh4biox.gif
Phe
Tyr
Enzyme (PAH)
& cofacteur BH4)
10
Métabolisme intermédiaire
Ensemble de réactions couplées par un intermédiaire, produit d’une réaction et substrat d’une autre.
Acides AminésGlucidesLipidesPurines/PyrimidinesHème,…
X
Y
Z
Individualité Chimique; Métabolisme et Homéostasie
Peau
Poumon
Rein
IntestinsLIC
LEC
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Individualité Chimique; Métabolisme et Homéostasie; Avant et après la vie foetale
Peau
Poumon
Rein
IntestinsLIC
LEC
Phe
Tyr
Enzyme (PAH)& cofacteur BH4)
Phénylcétonurie:Autosomale récessive caractérisée par un déficit de l’enzyme (hépatique) phénylalanine hydroxylase qui catalyse l’hydroxylation de la Phe en Tyr en utilisant un cofacteur, le BH4.Plus de 490 différentes mutations du gène codant pour la PAH sont actuellement rapportées. Les mutations conduisent à une variété de phénotypes cliniques et biochimiques avec différents degrés de gravité.Certaineas mutations de la PAH répondent bien à un apport de BH4Certains déficit de la biosynthèse ou de la régénération du BH4 sont également décrits.
Kim SW et al. Clin Chem Acta 365 (2006) 279-287
Gènes – Enzymes – Cofacteurs -Métabolites
Mise en évidence biologique de la lésion biochimique
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Maladies métaboliques héréditaires
Fréquence des maladies métaboliques: 1:4’000 naissances
Maladies du cycle de l’urée (6 gènes): 1 : 8’000Phénylcétonurie 1 : 12’000Porphyrie aiguë intermittente 1: 15’000MCAD (Medium Chain acylCoA dh def.) 1: 10 à 20’000Déficience en transporteur de créatine 1 : 14’000 => 1 : 50’000Maladie de Fabry 1: 40’000Galactosémie 1 : 47’000Tyrosinémie hépatorénale <1: 100’000 Déficit en mévalonate kinase <1 : 100’000H yperglycinémie non-cétotique 1 : 200’000MSUD 1 : 200’000Tyrosinémie type 1 1 : 200’000Homocystinurie classique 1 : 344’000
Nombre de naissances approx. en suisse par année: 80’000
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Maladies métaboliques héréditaires
> 500 maladies.
Maladies d’origine génétique (autosomal récessif).
Mutations touchent des gènes codant pour des enzymes impliquées dans le métabolisme cellulaire.
Héréditairen’est pas obligatoirement congénital;âge de présentation va de la naissance à l’âge adulte.
Très grande variabilité clinique dans la sévérité des symptômes et âge de présentation (substrat génétique, activité enzymatique résiduelle, facteurs environnementaux, …)
Erreurs innées du métabolisme I
Altération Synthèse ou catabolisme des molécules complexes
LysosomesPeroxisomesGlycosylationCholestérol (synthèse)
Ac. Billiairesa1-antitrypsine, …
Glycoformes des protéines Mucopolysaccharides / Oligosaccharides / …
VLCFAbiosynthèse Plasmalogènes, isoprénoïdes, cholestérol, ac. Billiaires…
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Erreurs innées du métabolisme IIIntoxication aiguë ou chronique par des petites molécules
AminoacidopathiesAciduries organiquesCycle de l’uréePorphyrines…
Intolérances Fructose / Galactose…
Erreurs innées du métabolisme III
Déficit production ou utilisation de l’énergie
Gluconéogénèse;ß-oxydation;Acidoses lactiques
Créatine…
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Erreurs innées du métabolismeTableaux cliniques
Altération Synthèse ou catabolisme des molécules complexes
LysosomesPeroxisomesCholestérol (synthèse) Ac. Billiairesa1-antitrypsine, CdT,…
Tableaux cliniques Symptômes permanents, progressifs, indépendants d’évènements intercurrents et non liés à l’alimentation
Intoxication aiguë ou chronique par petites molécules
AminoacidopathiesAciduries organiquesCycle de l’uréeIntolérances Fructose / Galactose
Intervalle libre
Perturbations récurrentes (intox aiguë) ou chroniques
Déficit production ou utilisation de l’énergie
Gluconéogénèse;ß-oxydation;Acidoses lactiques
Symptômes larges allant de l’intoxication au déficit énergétique.Hypoglycémie; HyperlactacidémieHypotonie; Myopathie / CardiomyopathieTroubles de la croissance, Retard mental…
Stratégie diagnostique CH
•Dépistage systématique
•Dépistage sélectif
•Réseaux: Accès aux spécialistes méd. et à un labo. expert
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Dépistage systématique:
Dépistage néonatal;1 centre suisse.Kinderspital Zürich
Dépistage systématique, CH
Maladies et analyse Dépistés 2008 (Sur 79’736)
Dépistés 1965 -2008
Phénylcétonurie et autres hyperPhenylalaninémies(Phe, TMS)
15 401
Galactosémie: (Gal-1-uridyltransféàrase (GALT); galactose; Enzymatique)
1 79
Déficit en biotinidase (Biotinidase, Wolf) 0 21
Déficit en MCAD (depuis 2005), Acylcarnitines(TMS)
9 31
Hypothyréose primaire (TSH, DELFIA) 21 687
Hyperplasie congénitale des surrénales (17-OH-progestérone) 8 151
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Dépistage systématique: confirmation
Phe Répéter ou dosage quantitatifs d’acides aminés (en urgence si > 400 µmol/l).Urine + sang pour dosage ptérines (pour BH4).Selon taux Phe: test de sensibilité à la BH4
Galactosémie Contact médical; selon clinique, stop galactose; dosage enzymatique sanguin (buvard) et Gal-1-P (1 ml sang hépariné); recherche de sucres réducteurs dans l’urine (Clinitest®)
Déficit en biotinidase
Répéter screening; acides organiques dans l’urine.Si positif: dosage enzymatique spécifique (3 ml sang hépariné)
Déficit en MCAD
Confirmation du diagnostic par analyse indépendante acylcarnitines ; analyse des mutations génétiques;
Prise en charge des résultats positifs dans centres spécialisés. Réseau métabolique de la suisse occidentale et italienne (RMSOI); Head : Dr L. Bonafé, Pédiatrie Moléculaire, CHUV
Acides Aminés libres
Dépistage sélectifs des amino-acidopathies, -aciduriesPlasma et Urine, rarement LCR*, *Si LCR, plasma concomitant
Suivi du traitement (Plasma)
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Acides Aminés libres
Phosphosérine; Taurine; Phosphoéthanolamine; Ac.Aspartique; Hydroxyproline; Thréonine; Sérine; Asparagine; Ac.Glutamique; Glutamine; Sarcosine; Ac.α-aminoadipique; Proline; Glycine; Citrulline; Ac.-α-Aminobutyrique; Valine; Cystine; Methionine; Cystathionine; Isoleucine; Leucine; Tyrosine; Phénylalanine; β-Alanine; Ac. β-Aminoisobutyrique; Ac.γ -Aminobutyrique; Homocystine; Ethanolamine; DL-Hydroxylysine; Ornithine; Lysine; 1-CH3-Histidine; Histidine; 3-CH3-Histidine; Ansérine; Carnosine; Arginine; Cystéine-Homocystéine-disulfide; S-Sulfocystéine ; Homocarnosine, S-Sulfocystéine; Cystine; Saccharopine; Ac.pipécolique; Homocitrulline; Allo-Isoleucine; Cystéine-Homocystéine-disulfide; Homocystine; Tryptophane;
Méthode AA, plasmaAnalyseur AA; Colonne échange d’ions; Réaction post colonne avec ninhydrine; CV < 3 à 4 %
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Ac. OrganiquesR C
H
H
COO-
Acides Organiques
Acides Aminés
Acides gras
Neurotransmetteurs
Micro-organismesXénobiotiques
Cholestérol
Purines / Pyrimidines
Hydrates de carbone
Dépistage sélectif
Ac. OrganiquesR C
H
H
COO-
Les AOs accumulés dans le plasma sont excrétésen grande quantité dans les urines, car la plupart sont très peu réabsorbés au niveau tubulaire.
Le système de sécrétion rénal des anions organiques est capable d’éliminer une vaste gamme de composants dont la seule caractéristique moléculaire est d’avoir un squelette carboné et une charge appropriée.
20
Acides Organiques200 à 250 AO urinairesmétabolites principaux d’environ toutes les voies métaboliques. Comprend les classes de composés suivants: Acides gras; dicarboyliques; phénoliques; tricarboxyliques polyhydroxylés; conjugués aux AA; AA acétylés, …Lactate; 2-Hydroxyisobutyrate; Glycolate, 2-Hydroxybutyrate; 3-Hydroxypropionate; Pyruvate; 3-Hydroxybutyrate; 3-Hydroxyisobutyrate; 2-Hydroxyisovalérate; 3-Hydroxyisovalérate; Méthylmalonate; 4-Hydroxybutyrate; Glycérol; Ethylmalonate; Succinate; Méthylsuccinate; Glycérate; Uracile; Fumarate; Propionylglycine; Isobutyrylglycine; Glutarate; 3-Méthylglutarate; 2-Méthylbutyrylglycine, Malate; Adipate; Erythronate; Tiglylglycine; Threonate; 2-Hydroxyglutarate; 3-Hydroxyglutarate; Pimélate; 3-Hydroxy-3-Méthylglutarate; p-Hydroxyphénylacétate; N-Acétylaspartate; Furoylglycine; 2-Hydroxyadipate; Octènedioate I; 3-Hydroxyadipate; Subérate; Tricarballylate; Quinolinate; cis-Aconitate; Homovanillate; Azélate; Citrate; Isocitrate; 3-Hydroxyphénylhydracrylate, Vanillylmandelate, p-Hydroxy-phényllactate, p-Hydroxyphénylpyruvate, 4-Crésol; MéthylglutaconateI+II; 2-Oxoglutarate I+II; Méthylcitrate I+II; 3-Hydroxy2Méthylbutyrate I+II; …
Artéfacts:
Nutrition (adipate, furoate, tartarate, N-Acétyltyrosine, N-Acétaltyrosine, MCT :Sebacate – subérate –adipate – 7-OH-octanoate, Nutramigen: 5-oxoproline)
Médicaments: Valproate, Ethosuximide, Primidone (nbrx métabolites); salicylate (2-hydroxyhippurate), … Ethylène glycole
Contamination bactérienne: 3-Ohpropionate; 4-OH-phénylacétate; D-Lactate; 2-oxoglutarate; Phénylpropionylglycine; Succinate; Uracile…
Ac. Organiques, Analytique
R C
H
H
COO-
•Par GC-MS
•Préparation échantillon +++
•Coeff. Variation suffisant si < 20%
•Profils urinaires (pattern)
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Carnitine / Acyl-Carnitines
R= H: carnitine libreR = CH3CO : acetylcarnitine (C2)
R = CH3 – CH2CO: propionylcarnitine (C3)… C4, …C16, C18, C18OH,…
CH3
CH3
CH3
N+ CH2-CH-CH2-COO-
R-OCarnitine totale – Carnitine
libre – Acyl-Carnitine
LibreAcyl
Profil des acylcarnitines
AC_060405_08 #19-127 RT: 0.17-1.13 AV: 109 NL: 1.37E6T: + c sid=-10.00 Full pr 85.10@-30.00[ 200.00-550.00]
200 250 300 350 400 450 500 550m/z
0
2
4
6
8
10
12
14
16
18
20
22
24
26
28
30
32
34
36
38
40
42
44
46
48
50
52
Rel
ativ
e A
bund
ance
260.18 426.31218.20
227.27
428.33263.19
459.36
311.26 456.41237.11375.27 454.35319.15 403.28
437.36 482.37347.26291.15
487.34400.27350.05
277.15 398.28320.90372.22
480.30338.27 370.22 414.23388 .11 514.36 542.35
C0 C2
C3 C4
C14:1
C14
C18:1C16:1
*
*
**
* **
* * *
*
*
C14:2
VLCAD
22
Méthode Acylcarnitines, SCAD
Méthode Acylcarnitines, GA I
23
Conclusions
Présentation spécifique
Présentation non spécifique
Dépistage systématique
Contrôles
Dépistage sélectif
Tests sélectifs: Métabolites; Enzymes; Gènes
Crise métabolique
Symptômes (neurologiques)progressifs
Investigations initiales
ConclusionsAnalyses: crise métabolique
FSC, Glucose, Electrolytes, Gazométrie, Créatinine, Urée, Urate, Prot. Tot., Bilirubine tot., ASAT, ALAT, g-GT, PAL, (Cholestérol, Triglycérides)
Lactate, Ammoniaque, Carnitines, Acides Aminés, Profil des Acylcarnitines
Urines: Couleur / Odeur; Bandelettes urinaires (corps cétoniques), Acides Aminés, Acides Organiques.
Conserver prélèvement plasma / sérum pour (hormones) Acides Aminés, acylcarnitines et carte « Guthrie».Conserver urines pour Acides organiques ou autres investigations.Conserver LCR si ponction lombaire effectuée.
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Service de pédiatrie Laboratoire Central de Chimie Clinique
Division de Pédiatrie Moléculaire
Kit hypoglycémies Ces kits se trouvent aux urgences de l’HEL, aux SIPI, aux SC et étage de pédiatrie. Des kits en réserve sont prêts au LCC (BH18) L'investigation biochimique d'une hypoglycémie devrait comprendre, lors d'un épisode aigu, les analyses suivantes sur prélèvements concomitants:
Analyses Prélèvements Vol Min. de Sang
SANG Gazométrie
A faire sur place
Na, K, Cl Acides aminés Corps cétoniques semi-quantitatif (3-hydroxybutyrate) Acyl carnitines
1 monovette Orange (Hép. de Li) de 2.7 ml pleine.
Apporter immédiatement le prélèvement au laboratoire
2.7 ml
Ammoniac 1 tube EDTA-K ("tube à formule") Prélever sans garrot.
Apporter au laboratoire dans de la glace
0.5 ml
Glucose, Lactate 1 microvette fluorure de sodium
0.3 ml
Acides Gras Libres (NEFA) Dosage de GH, cortisol et insuline. Réserve de sérum pour dosages ultérieurs éventuels (peptide C, glucagon)
Au minimum 1 monovette Blanche (Sérum) 2.7 ml. Apporter au laboratoire dans de la glace. Après le dosage des acides gras libres, le sérum restant sera envoyé au labo d’ endocrinologie pour les analyses hormonales
2.7 ml
URINE (portion) Acides Organiques Spot Urinaire (min 2 ml)
Apporter au laboratoire dans de la glace
Après utilisation du kit, renvoyer cette feuille à C. Roux (LCC - CHUV, BH 18) pour demande de remplacement du kit. Pour un remplacement du Kit en urgence, appeler le bip 744172 durant les heures ouvrables. Veuillez me faire parvenir un Kit pour Hypoglycémies: Nom:................................................. Adresse:..................................................... Le 16.02.2010 PD Dr L. Bonafé, Pédiatrie Moléculaire (43483)
Dr O. Boulat, LCC (44150), C. Roux, LCC (44137)
LCR pour maladies neuro-métaboliquesAprès analyses de base, dépistage métabolique, tests de charges…
Anaylses usuelles LCR: Glu (et rapport au plasma), Prt, …
Lactate/Pyruvate chez tous.
Acides Aminés
Neurotransmetteurs
Acides Organiques (sont exceptionnellement élevés dans LCR sans l’être dans les urines).
Hoffmann GF et coll, Neuropediatrics 29 ,1998
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Erreurs innées du métabolisme; Liste des analyses Utilisée parPMO – LCC - CHUV
Examen Indication Quantité Conditions pré-analytiquesAcides amines (sang)
Aminoacidopathies, aciduries organiques
Sang héparinémin. 0.9 ml.
À jeun. Pour les nouveau-nés: juste avant un repas. Si AEDC: arrêter 3h avant ou spécifier “pendant AEDC sur le bon
Acides aminés spécifiques (sang)
Contrôle dans Phénylcétonurie, Tyrosinémie (spécifier Phe/Tyr sur le bon)
Min. 0.3 ml, sang hépariné.
Comme pour les acides aminés complets
Acides aminés (urines)
Aminoacidopathies, aciduries organiques, tubulopathie
Min. 1 ml d’urine En même temps que les acides aminés sanguins. Si dépistage seulement urinaire : urines du matin à jeun préférées
Acides gras libres (sang)
Bilan d’hypoglycémie, trouble de l’oxydation des acides gras
Min. 0.3 ml de sang natif .
À jeun, spécifier la durée du jeûne. Lors d’hypoglycémie, même si pas à jeun.Congeler sérum, -20°C.
Acides gras à très longue chaîne (VLCFA) (sang)
Dépistage maladies peroxisomales
Sang hépariné , min. 1 ml
Préférable à jeun (doit être centrifugé dans l’heure qui suit le prélèvement).Congeler sérum, -20°C.
26
Examen Indication Quantité Conditions pré-analytiques
Acides organiques (urines)
Aciduries organiques, troubles de l’oxydation des acides gras, mitochondriopathies
10 ml d’urine, min. 3 ml
Préférable 1ère ou 2ème miction du matin. Si « crises » métaboliques : prélever pendant phase aiguë.Congeler Urine: -20°C
Acylcarnitines (sang)
Aciduries organiques, troubles de l’oxydation des acides gras,
0.3 ml sang héparinée (veineux ou capillaire) ; possible aussi sur sang complet (carte Guthrie).
Si patient substitué en carnitine, prélever avant la prise du médicament.Congeler plasma; -20°C.
CDG (sang) Congenital disorders of glycosylation
Min. 0.3 ml de sang natif ou hépariné .
Pas d’influence du jeûne.
Clinitest (urine) fournisseur :
Max Baldinger AG
Bruggacherstrasse 8
8117 Fällanden
Tel : 044.806.80.80
Fax : 044.806.80.85
Galactosémie, fructosémie (substances réductrices)
4 gouttes d’urine Test rapide;Faire sur urine fraîche.
Examen Indication Quantité Conditions pré-analytiques
Corps cétoniques (sang) : béta-hydroxybutyrate et acétoacétate
Mitochondriopathies. Suivi régime cétogène
Tube spécial contenant 1 ml de PCA 0.6N ; Y introduire 1 ml précis de sang.
Agiter le tube après avoir ajoute le ml de sang au réactif dans le tube. Mettre immédiatement dans la glace et amener au labo dans les 15 minutes.
Corps cétoniques (sang) : béta-hydroxybutyrate
Bilan d’hypoglycémie, trouble de l’oxydation des acides gras et de la cétogénèse/cétolyse. Suivi régime cétogène
0.5 ml sang hépariné À jeun ou post-prandial, selon indication clinique.Congeler plasma.
Créatine (sang) Guanidinoacétate (sang)
Déficit de synthèse de la créatine
1 monovette héparinée (orange), min. 0.5 ml
Pas d’influence du jeûne.Congeler plasma; -20 C
Créatine (urine) Guanidinoacétate (urine)Rapport créatine/créatinine (urine)
Déficit de synthèse et de transport de la créatine
5 ml d’urine, min. 0.5 ml.
Pas d’influence du jeûne. (Apport de créatine ?).Congeler urine; -20°C.
27
Examen Indication Quantité Conditions pré-analytiques
7-déhydrocholestérol et 8-déhydrocholestérol (sang)
Syndrome de Smith-Lemli-Opitz ; autres troubles de la synthèse du cholestérol
1 monovette de sérum (blanche) ou héparinée (orange), min. 0.6 ml (2 microvettes blanches ou oranges)
Amener au labo dans les 15 minutes (doit être centrifugé et congelé rapidement).Congeler sérum ou plasma; -20°C.
Galactose-1-phosphate (sang)
Galactosémie 1 monovette héparinée (orange)
À jeun. Pour les nouveau-nés: juste avant un repas. Si AEDC: arrêter 3h avant ou spécifier “pendant AEDC sur le bon.Envoyer l’échantillon à t° ambiante.
Glycosaminoglycanes (GAGs ou mucopolysaccharides) (urine)
Mucopolysaccharidoses
Min 5 ml d’urine Pas d’influence du jeûne.Congeler uriner; -20°C.
Homocystéine totale (sang)
Homocystinurie. Déficit en vitamine B12, troubles du métabolisme de la B12. Bilan lors de thrombose
1 monovette EDTA (rouge), min. 1 ml
À jeun. Mettre dans la glace et amener au labo dans les 15 minutes pour séparation plasma et éléments figurés.Une fois plasma séparé, stable à t°ambiante.
Examen Indication Quantité Conditions pré-analytiques
L-Lactate (sang) Tout trouble du métabolisme intermédiaire, mitochondriopathies
1 monovette jaune, min. 0.3 ml (1 microvette jaune)
À jeun et/ou post-prandiale selon indication clinique
Lactate, pyruvate (sang)
Mitochondriopathies, troubles du cycle de Krebs et de la néoglucogenèse. Bilan d’hypoglycémie
Tube spécial « lactate/pyruvate », 1 ml précis de sang*
Agiter le tube après avoir ajoute le ml de sang au réactif dans le tube. Mettre immédiatement dans la glace et amener au labo dans les 15 minutes.
Méthylmalonate (sang)
Acidémie méthylmalonique. Déficit en vitamine B12, troubles du métabolisme de la B12.
Sang hépariné , min. 1 ml.
Pas d’influence du jeûne.Congeler plasma, -20°C.
Oligosaccharides (urine)
Oligosaccharidoses Min 5 ml d’urine Pas d’influence du jeûne.
28
Examen Indication Quantité Conditions pré-analytiques
Porphyrines (urines) et précurseurs (ALA et PBG)
Porphyries Min 5 ml d’urine Urine à l’abris de la lumière ! Si « crises » métaboliques : prélever pendant phase aiguë. Selon indication clinique une récolte urine de 24h peut être indiquée.Congeler urine; -20°C.
Porphyrines (selles)
Porphyries 1 échantillon de selles
Conserver à l’abri de la lumière !Conserver à 4°C.
Ptérines (urines) Dépistage des déficits en BH4 (formes atypiques de phénylcétonurie)
Min 3 ml d’urine Urine à l’abri de la lumière !Congeler; -20°C.
Purines et pyrimidines (urines)
Maladies des purines et pyrimidines
Min 1 ml d’urine Pas d’influence du jeûne. Bien homogénéiser l’ensemble de la récolte d’urine avant de prélever l’échantillon dans la monovette.Congeler -80°C avant envoi sur glace sèche.
Sulfites (urine) Déficit en sulfite oxidase ou Molibdenum cofactor (convulsions néonatales)
Quelques gouttes d’urine
Test rapide; faire sur urine fraîche
Examen (LCR) Indication Quantité Conditions pré-analyt iques
Lactate, glucose Mitochondriopathies, troubles du transport cérébral du glucose
1-2 microvettes jaunes (fluorure de sodium)
À jeun. Prise de sang pour glucose en même temps si indiqué.
Acides aminés Aminoacidopathies, aciduries organiques cérébrales
1-2 microvettes héparinée (orange)
Préférable à jeun ; prélèvement de sang pour acides aminés concomitant.
Acides organiques Aciduries organiques cérébrales, mitochondriopathies
1-2 microvettes blanches
--
Neurotransmetteurs Déficits des monoamines et folates
Prélever le 2ème ml de LCR dans cryotubes
Prélèvement entre 9h et 11h (rytme circadien) ; congeler immédiatement l’échantillon dans l’azote liquide*
Créatine, guanidinoacétate
Déficits de synthèse de la créatine
1 microvette blanche --
Protéines Toutes inflammations cérébrales ; maladie de Krabbe
1-2 microvettes blanches
--
29
Clinitest; substances réductrices
Max Baldinger AG
Bruggacherstrasse 8
8117 Fällanden
Composé Pathologie / source
Galactose Galactosémie; Déf. En galactokinase; Fanconi-Bickel; Maladie de Wilson
Fructose Intolérance au fructose; Frustosurie essentielle
P-hydroxyphénylpyruvate
Tyrosinémies type I et II
Acide Homogentisique Alcaptonurie
Xylose Pentosurie
Glucose Diabète; Syndorme de Fanconi
Oxalate Hyperoxalurie
Xénobiotiques Salicylates; Ascorbate
Urate Hyeruricosurie
Indication:
Confirmation présence de Galactose suite à test de dépistage positif pour la galacotsémie
Test Sulfites
Indications: suspicion de déficit en sulfite oxydase vs Déficit du cofacteur Molybdène
Stix urinaire: Merckoquant® 10013
Urine fraîche , car sulfite rapidement détruit par oxydation à t° ambiante.
Faux négatifs: Dépistage seulement. Confirmation par S-Sulfocystéine (AA)
Faux positifs:
2-mercaptoethanesulfonate; Cystéine; Homocystéine; ß-mercaptoéthylamine; N-Acétyl-L-Cystéine
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