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Universidade de São Paulo Faculdade de Filosofia, Ciências e Letras de Ribeirão Preto Departamento de Química Programa de Pós-Graduação em Química
“Estudos sobre a síntese de elagitaninos”
Marcelo Rodrigues de Carvalho
Dissertação apresentada à Faculdade
de Filosofia, Ciências e Letras de Ribeirão Preto da
Universidade de São Paulo, como parte das
exigências para a obtenção do título de Mestre em
Ciências, Área: Química
RIBEIRÃO PRETO -SP
2010
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Universidade de São Paulo Faculdade de Filosofia, Ciências e Letras de Ribeirão Preto Departamento de Química Programa de Pós-Graduação em Química
“Estudos sobre a síntese de elagitaninos”
Marcelo Rodrigues de Carvalho
Orientador: Prof. Dr. Gil Valdo José da Silva
Dissertação apresentada à Faculdade
de Filosofia, Ciências e Letras de Ribeirão Preto da
Universidade de São Paulo, como parte das
exigências para a obtenção do título de Mestre em
Ciências, Área: Química
RIBEIRÃO PRETO -SP
2010
FICHA CATALOGRÁFICA
Carvalho, Marcelo Rodrigues
“Estudos sobre a síntese de elagitaninos”
Ribeirão Preto, 2010.
141 p. : il. ; 30cm
Dissertação de Mestrado, apresentada à Faculdade Filosofia Ciências e
Letras. de Ribeirão Preto/USP – Área de concentração: Química Orgânica.
Orientador; Gil Valdo José da Silva.
1. elagitaninos. 2. carboidratos. 3. síntese. 4.vescalina.
"É melhor tentar e falhar, que preocupar-se e ver a vida passar; é melhor tentar, ainda que em vão,
que sentar-se fazendo nada até o final. Eu prefiro na chuva caminhar,
que em dias tristes em casa me esconder. Prefiro ser feliz, embora louco, que em conformidade viver ..."
Martin Luther King
DedicatóriaDedicatóriaDedicatóriaDedicatória
Dedico este trabalho aos meus pais, Ivete e Evaldo,.Dedico este trabalho aos meus pais, Ivete e Evaldo,.Dedico este trabalho aos meus pais, Ivete e Evaldo,.Dedico este trabalho aos meus pais, Ivete e Evaldo,. Ao meu avô Lázaro Rodrigues de Carvalho (in memorian)Ao meu avô Lázaro Rodrigues de Carvalho (in memorian)Ao meu avô Lázaro Rodrigues de Carvalho (in memorian)Ao meu avô Lázaro Rodrigues de Carvalho (in memorian)
Agradecimentos EspeciaisAgradecimentos EspeciaisAgradecimentos EspeciaisAgradecimentos Especiais
À Patrícia Betoni Momo porÀ Patrícia Betoni Momo porÀ Patrícia Betoni Momo porÀ Patrícia Betoni Momo por todo carinho e apoio nas horas mais difíceis. todo carinho e apoio nas horas mais difíceis. todo carinho e apoio nas horas mais difíceis. todo carinho e apoio nas horas mais difíceis.
Agradecimentos:Agradecimentos:Agradecimentos:Agradecimentos:
Ao meu orientador, Prof. Dr. Gil Valdo José da Silva, Prof. Dr. Gil Valdo José da Silva, Prof. Dr. Gil Valdo José da Silva, Prof. Dr. Gil Valdo José da Silva, pela oportunidade concedida.
Aos professores, Prof. Doutor Maurício Gomes Constantino e Prof. Dr. Paulo Marcos Donate.
À Professora Doutora Ivone Carvalho pela participação na banca de qualificação e pelo seu
conhecimento sobre carboidratos, contribuindo indiretamente para este trabalho.
A Vinícius Pallaretti e Virginia pelos excelentes espectros de RMN.
A Dijalma pelos espectros de IV.
A todo o pessoal do LSO: Daiane, Shirley, Rota, Jader, Tiago, Profa. Dra/Mirela, Aline,
Marcos, Eduardo, Lilian, Viviane, Pedro, Murilo e Daniel.
Ao laboratório de Química Farmacêutica FCF-RP: Pedro, Daniel, Galo, Luis,
Vanessa,Peterson, Tiago, Lilian, Armando.
Aos Funcionários do Departamento de Química: Lâmia, Maria, Sonia, André, Vera, Olímpia,
Vinicius Banhos.
À CNPQ pela bolsa concedida.
Enfim, a todos que torceram por mim:
Um muitíssimo Obrigado
Sumário
Resumo ........................................................................................................................................ 1
Abstract ........................................................................................................................................ 2
Lista deAbreviações ................................................................................................................... 3
Índice de Ilustrações .................................................................................................................. 5
1. Introdução ............................................................................................................................... 8
1.1. Sobre os Taninos: ...................................................................................................... 8
1.2. Classificação dos Taninos: ..................................................................................... 16
1.3. Considerações sobre a síntese de taninos. ......................................................... 28
2. Objetivos ................................................................................................................................ 34
3. Resultados e Discussão...................................................................................................... 39
4. Considerações Finais. ......................................................................................................... 56
5. Parte experimental. .............................................................................................................. 58
6. Seção de Espectros ............................................................................................................. 75
7.Referências Bibliográficas: ................................................................................................ 127
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 1
Resumo Taninos são substâncias polifenólicas encontradas em uma ampla gama
de vegetais superiores tanto angiospermas como giminospermas. Devido à enorme diversidade estrutural, os taninos são reunidos em diferentes subdivisões através de uma sistemática classificação baseado em suas propriedades estruturais e químicas. Portanto os taninos são subclassificados como galotaninos, elagitaninos, taninos complexos e taninos condensados. Os elagitaninos são taninos hidrolisáveis, derivados do metabolismo do ácido gálico no qual as unidades quirais hexahidroxdifenoila (HHDP) e/ou nonahidroxitrifenoila (NHTP) se encontram unidos a um núcleo de glicose através de uma ligação éster. Diversos trabalhos de atividade biológica inerentes aos elagitaninos são reportados ao longo dos anos. Dentre tais atividades podemos destacar: antiHIV, antitumoral, antiviral e antioxidante. Neste presente trabalho, nós apresentamos nossos estudos para elaboração de uma rota viável para o elagitanino vescalina, uma molécula com considerável atividade anti-tumoral que é encontrados nos troncos de madeiras nobres como castanheira e carvalho. Também é encontrado em vinhos como um produto de hidrólise de outros elagitaninos.
OH
O
HO
O
OH
O
HO
HOHO
HOOH
OH
OO
HOOH
OH
O
A proposta sintética inicia-se com um esquema de proteção de núcleo
glicosídico. O esquema de proteção nos forneceu a molécula de glicose convenientemente protegica, fenil 4,6-O-benzilideno-1-tio-β-D-glicopiranosídeo (composto 5). Partindo da D-glicose foi realizada a formação do doador glicosídico (composto 1) o qual foi submetido a uma reação com tiofenol formando a unidade tioglicosídica (composto 2). A reação de proteção das hidroxilas 4 e 6 do anel piranosídico foi realizada com sucesso fornecendo o composto 5. Em uma segunda etapa do trabalho foi realizado a proteção da molécula de metil galato que será posteriormente inserida no núcleo glicosídico através de uma ligação éster. A proteção foi realizada com sucesso, num total de 5 etapas. Foram empregados os reagente (Ph)2CCl2 e TBDMSi para a proteção da hidroxilas fenólicas. Ao final da etapa de proteção foi obtido o composto 9 (ácido 3-tertibutildimetilsiloxi 4,5-difenilmetilenodioxibenzóico). Devido a incompatibilidade de tioglicosídeos na síntese de elagitaninos, diversas tentativas foram conduzidas afim de solucionar os problemas decorrentes da síntese. Doadores glicosídicos alternativos foram testados como 1-O-ortonitrobenzil α-D-glicopiranosideo e (2-trimetil sililetil)-β-D-glicopiranosideo.
Figura i: Estrutura da Vescalina
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 2
Abstract
Tannins are polyphenolic substances found in superior vegetal in a wide variety of gymminosperms as well as angiosperms. Due to the enormous diversity of tannins, they are gathered in different subdivisions by a systematic classification based on their structural and chemical properties. Thus, tannins are classified as galotannins, ellagitannins, complex tannins and condensed tannins.
Ellagitannins are hidrolisable tannins, derived from acid gallic metabolism in which the chiral units of hexahidroxybiphenoyl (HHDP) and/or nonahidroxytriphenoyl (NHTP) units are esterefied in a glucose core. Many biological activities of ellagitannins like: antiHIV, antitumoral, and the most known antioxidant activity have been reported over recent years.
In this work, we present our efforts towards the synthesis of vescalin, an antitumor agent isolated from chesnut or oak wood and also from aged red wine as a product of hydrolysis of some ellagitannins.
OH
O
HO
O
OH
O
HO
HOHO
HOOH
OH
OO
HOOH
OH
O
The synthetic proposal starts with a protection protocol of the glucose
core. The protection protocol afforded a convenient protected sugar, phenyl 4,6-O-benzylidene-1-thio β-D-glucopyranoside (compound 5). The glycoside donor (compound 1) was synthesized from D-glucose. A glycosylation reaction with thiophenol afforded the thioglycoside (compound 2). Then the sugar´s 4 and 6 hydroxyls were protected trough a benzilidene formation. These 5 step protocol afforded compound 5 in a good overall yield. The gallic acid moiety as also convenient protected afforded 3 t-butyldimethylsiloxi-4,5-diphenilmetilenedioxi-benzoic acid (compound 9) throughout a 5 step protection procedure. Due to the incompatibility of the phenilthio glycosydes applied on ellagitannin synthesis, several attempts were carried out to solve the problem. Alternative glycosyde donors were tested such 1-O-orthonitrobenzyl α-D-glucopyranoside and (2-trimethyl sililethyl)-β-D-glucopyranoside.
Figure i: Estructure of Vescalin
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
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Lista deAbreviações (Ac)2O: Anidrido acético
AcOEt:Acetato de Etila
AIDS: Acquired immune deficiency syndrome
COSY:Correlation Espectroscopy
DAHP: 3-deoxi-D-arabino-heptulosonato-7-fosfato
DCC: Diciclohexilcarbodiimida
DEPT: Distortionless Enhancement by Polarization Transfer
DHQ: 3-desidroquinato
DMAP: Dimetilaminopiridina
DMF: N-N dimetilformamida
DMSO-D6: Dimetilsulfóxido deuterado
DNA: Ácido desoxirribonucléico
DPPH: (1,1-difenil -2-(2,4,6 trinitrofenil)hidrazila)
DSDG: NADP-dependente desidrochiquimato desidrogenase
HHDP: hexahidroxidifenoila
HIV: Human Immunodeficiency Virus
HMBC:Heteronuclear multiple-bond correlation
HMQC:Heteronuclear mutiple-quantum correlation.
LDL: Lipoproteína de baixa densidade
Li2CuCN: Cianocuprato de litio II
MHz: Megahertz
MMP-2: Matriz de metaloproteinase tipo 2
MMP-9: Matriz de metaloproteinase tipo 9
NBS: N-Bromosuccinimida
NHTP: nonahidroxitrifenoila
NO: Óxido nítrico
Pb(OAc)4: Tetracetato de chumbo IV
PDC: Dicromato Piridina
Ph2C(Cl)2: Diclorodifenilmetano
RMN 13C: Ressonância magnética nuclear de carbono 13
RMN 1H: Ressonância magnética nuclear de hidrogênio
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 4
Sn2: Substituição nucleófila de segunda ordem
TBDMSiCl: Cloreto de tertbutildimetilsilil
THF: Tetrahidrofurano
TLC: Thyn layer cromatografy (cromatografia de camada delgada)
TPA: 12-O-tetradecanoilforbol-13-acetato
UDP-glicose: uridina difosfato glicose
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 5
Índice de Ilustrações Figura 1: Exemplos de diversas classes de taninos ...................................................... 8
Figura 2: Estruturas de dois elagitaninos, A corilagina e B geraniina .......................... 12
Figura 4: Elagitanino de cadeia aberta extraído da planta Shepherdia argentea......... 13
Figura 3: Elagitanino punicalina e seu derivado 2-galoilpunicalina .............................. 13
Figura 5: Estrutura do elagitanino punicalagina .......................................................... 14
Figura 6: Estruta dos epímeros castalagina e cescalaginos ........................................ 15
Figura 7: Estrutura da punicafolina ............................................................................. 15
Figura 8: Estrutura da 1,2,3,4,6-penta-O-galoil-β-D-glicose, precursor dos elagitaninos. ................................................................................................................................... 17
Figura 9: Reação de hidrólise da vescalagina ............................................................. 20
Figura 10: Padrões de acoplamento resultantes das conformações 1C4 e 4C1 ............ 21
Figura 11: Exemplos de um elagitanino dímero coriariína A e moléculas da família das roburinas ..................................................................................................................... 22
Figura 12: Acido chebulágico ...................................................................................... 23
Figura 13: Telimagrandina II ....................................................................................... 25
Figura 14: Subunidades dos taninos complexos ......................................................... 26
Figura 15: Exemplos de taninos complexos. A: Proantocianidina tipo B 4-6, B: Proantocianidinas tipo B 4-8, C: Proantocianidina tipo C e D: Proantocianidina tipo A. ................................................................................................................................... 27
Figura 16: Exemplo das Acutissiminas A e B, elagitaninos C-glicosilados .................. 28
Figura 17: Reação de acoplamento biarílico utilizando Pb(OAc)4 ............................... 29
Figura 18: Estrutura da Vescalina ............................................................................... 34
Figura 19: Reação de formação da 2,3,4,6-O-acetil-α-glucopiranosídeo. ................... 39
Figura 20: Reação de formação da Fenil -2,3,4,6- O- acetil-1-tio-β-D-glicopiranosídeo. ................................................................................................................................... 40
Figura 21: Estabilização do cátion pela carbonila. ...................................................... 41
Figura 22: Reação de formação da fenil 1-tio-β-D-glicopiranosídeo. ........................... 41
Figura 23: Reação de formação da fenil 2,3-O-acetil-4,6-O-benzilideno-1-tio-β-D-glicopiranosideo. ......................................................................................................... 42
Figura 24: Reação de formação da fenil 4,6-O- benzilideno-1-tio-β-D-glicopiranosideo. ................................................................................................................................... 42
Figura 25: Formação composto 6 ............................................................................... 44
Figura 26: Reação de hidrólise originando o composto 7 ............................................ 44
Figura 27: Reação de proteção das hidroxilas por TBDMSi e mecanismo de hidrólise do silil éster. ................................................................................................................ 45
Figura 28: Reação hipotética entre composto 5 e 9. ................................................... 46
Figura 29: Reação de redução do orto-nitro benzaldeído ........................................... 48
Figura 30: Reação de formação 2,3,4,6,-O-acetil-1-O-nitrobenzil-α-D-glicopiranosideo ................................................................................................................................... 49
Figura 31:Estabilização promovida por substituinte adjacente .................................... 50
Figura 32: Equilibrio termodinâmico entre conformações α e β. .................................. 50
Figura 34:Reação de glicosilação utilzando BF3.Et2O como agente promotor............. 51
Figura 33: Estabilização por hiperconjugação do confôrmero α .................................. 51
Figura 35: Reação de formação do 2-trimetilsilil acetato de etila ................................ 52
Figura 36: Redução do composto 11 formando 2-trimetilsilil etanol ............................ 52
Figura 38:Reação de transesterificação utilizando do composto 14 ............................ 53
Figura 37: Reação de glicosilação emprgando HgO/HgBr2 como promotor ............... 53
Figura 39: Reações análogas de glicosilação. ............................................................ 56
Figura 40:Espectro de hidrogênio composto 1 ............................................................ 76
Figura 41:Espectro carbono 13 (Broad Band e DEPT) composto 1 ............................ 77
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 6
Figura 42:Espectro de hidrogênio composto 2 ............................................................ 79
Figura 43: Espectro carbono 13 (Broad Band e DEPT) composto 2 ........................... 80
Figura 44: Espectro de hidrogênio composto 3 ........................................................... 82
Figura 45: Espectro carbono 13 (Broad Band e DEPT) composto 3 ........................... 83
Figura 46: Espectro de hidrogênio composto 4 ........................................................... 85
Figura 47: Espectro carbono 13 (Broad Band e DEPT) composto 4 ........................... 86
Figura 48: Espectro de hidrogênio composto 5 ........................................................... 88
Figura 49: Espectro carbono 13 (Broad Band e DEPT) composto 5 ........................... 89
Figura 50: Espectro bidimensional HMQC ................................................................. 90
Figura 51: Espetro bidimensional HMBC .................................................................... 91
Figura 52: Espectro de hidrogênio composto 6 ........................................................... 93
Figura 53: Espectro carbono 13 (Broad Band e DEPT) composto 6 ........................... 94
Figura 54: Espectro bidimencional HMQC .................................................................. 95
Figura 55: Espectro bidimensional HMBC ................................................................... 96
Figura 56: Espectro de hidrogênio composto 7 ........................................................... 98
Figura 57: Espectro carbono 13 (Broad Band e DEPT) composto 7 ........................... 99
Figura 58: Espectro de Infravermelho composto 7 .................................................... 100
Figura 59: Espectro de hidrogênio composto 8 ......................................................... 102
Figura 60: Espectro carbono 13 (Broad Band e DEPT) composto 8 ......................... 103
Figura 61: Espectro de hidrogênio composto 9 ......................................................... 105
Figura 62: Espectro carbono 13 (Broad Band e DEPT) composto 9 ......................... 106
Figura 63: Espectro de hidrogênio composto 10 ....................................................... 108
Figura 64: Espectro carbono 13 (Broad Band e DEPT) composto 10 ....................... 109
Figura 65: Espectro bidimensional COSY ................................................................. 110
Figura 66: Espectro bidimensional HMQC ................................................................ 111
Figura 67: Espectro de Hidrogênio composto 11 ...................................................... 113
Figura 68: Espectro carbono 13 (Broad Band e DEPT) composto 11 ....................... 114
Figura 69: Espectro de hdrogênio composto 12 ........................................................ 116
Figura 70: Espectro carbono 13 (Broad Band e DEPT) composto 12 ....................... 117
Figura 71: Espectro dee hidrogênio do composto 13 ................................................ 119
Figura 72: Espectro carbono 13 (Broad Band e DEPT) composto 13 ....................... 120
Figura 73: Espectro de hidrogênio figura 14 ............................................................. 122
Figura 74: Espectro carbono 13 (Broad Band e DEPT) composto14 ........................ 123
Figura 75: Espectro bidimensional COSY ................................................................. 124
Figura 76: Espectro Infravermelho tiofenol ................................................................ 126
Esquema 1: Rota biossintética do ácido gálico ........................................................... 18
Esquema 2: Formação da 1,2,4,6 –β- pentagaloilglicose. ........................................... 19
Esquema 3: Formação de elagitaninos C-glicosilados ................................................ 24
Esquema 4:Rota sintética da telimagrandina II empre gando CuCN ..................... 29
Esquema 5:Rota sintética proposta por Khanbabaee et al. de um precursor de Lagerstanino C. .......................................................................................................... 30
Esquema 6: Reação de dimerização do ácido gálico realizada for Feldman e Quideau. ................................................................................................................................... 31
Esquema 7: Continuação ............................................................................................ 31
Esquema 8: Rota sintética da corilagina, elagitanino na conformação 1C4. ................. 32
Esquema 9: Rota Sintética Proposta .......................................................................... 35
Esquema 10: Rota sintética de proteção da D-glicose ................................................ 39
Esquema 11: Etapas de proteção do ácido gálico. ..................................................... 43
Esquema 12: Mecanismo de reação de esterificação empregando DCC e DMAP ...... 46
Esquema 13: Rota sintética empregando orto-nitro benzil .......................................... 47
Esquema 14: Rota sintética empregando trimetilsilil-etil ............................................. 48
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 7
1. Introdução
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 8
1. Introdução
1.1. Sobre os Taninos: O termo tanino designa uma ampla gama de substâncias naturais
polifenólicas. Sua origem é a palavra tannin[1], que em francês se traduz como
curtimento, ou seja, o processo de transformar peles animais em couro.
Originalmente, como a própria origem do termo indica, eram utilizados extratos
vegetais ricos em polifenóis, entretanto com o avanço da tecnologia do
processo de fabricação de couro este método se tornou obsoleto.
Devido à grande diversidade, os taninos são subdivididos quanto as
suas propriedades estruturais e químicas (figura 1). Vários taninos podem ser
clivados hidrolíticamente; esta propriedade lhes confere a classificação de
taninos hidrolisáveis. Dentre os taninos hidrolisáveis encontramos os
galotaninos e elagitaninos. Os taninos que não são sujeitos à hidrólise são
classificados como taninos condensados. Estes se constituem de subunidades
de catequina polimerizadas; encontrado na natureza com diferentes graus de
polimerização. A exclusão do grupo de taninos hidrolisáveis e condensados dá
origem ao grupo dos taninos complexos.
Na natureza, os taninos são encontrados em diversas plantas
superiores[35,36]: Castanheira, Carvalho, divi-divi (Caesalpinia coriaria), aroeira
preta (Myracrodruon urundeuva), Angelica archangélica, Cinnamomum
camphoravat e Rosmarinus officinalis.
Aparentemente, o papel biológico dos taninos no vegetal está
Figura 1: Exemplos de diversas classes de taninos
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 9
relacionado com os mecanismos de defesa contra as infecções e ataques de
predadores (insetos e herbívoros).
Os taninos geralmente possuem uma alta massa molecular (MM>500),
são caracterizados morfologicamente como substancias sólidas amorfas com
coloração branca ou amarelo pálido, possuem um aroma característico e gosto
adstringente. A maioria dos vegetais são portadores de taninos que podem ser
encontrados nas raízes, no lenho, na casca, nas folhas, nos frutos, nas
sementes e na seiva. O teor e a espécie de taninos variam, não só de um
vegetal para outro, como também de uma parte para outro do mesmo vegetal
conforme demonstra Tabela 01[37] .
Tabela 1: Teor de taninos totais em algumas espécie s de vegetais
Produtos Teor de taninos Referência[37]
Abacaxi Folha Caule
0,81 % 0,61 %
Santos et al., 2001 Santos et al., 2001
Sorgo 0,60-2,61 % Rodrigues, 1991 Mandioca 0,62-1,11 % Carvalho et al., 1993 Cajú 0,35-0,72 % Embrapa, 1992 Café (Casca) 1,31-2,97 % Filho et al., 2000 Folha de Couve Flor 0,21 % Santos et al., 2000 Folha de Brócoli 0,32 % Santos et al., 2000 Couve 0,29 % Santos et al., 2000 Taioba Folhas Limbo Caule
1,00 % 1,17 % 0,82 %
Santos, 2000 Santos, 2000 Santos, 2000
Taninos são aplicados em diversas áreas dentre as quais merecem
destaque sua utilização medicinal e na indústria. Os estudos de atividade
biológica de muitos representantes dos taninos revelaram uma diversidade de
atividades biológicas como: anti-viral[2,38,39,42,43], anti-bacteriana[44] e
antitumoral[3,40,41].
Na medicina popular oriental utiliza-se plantas ricas em taninos
(polifenóis), pois são considerados os princípios ativos dos extratos vegetais
empregados como remédios. Estes são utilizados no tratamento de
inflamações, lesões hepáticas, arteriosclerose, pressão arterial, hipertensão,
distúrbios hormonais e nervosos, diarréia[45], úlceras[47] de estômago e
duodeno, antisséptico e anti-inflamatório[11]. Do mesmo modo são usados como
diuréticos[46], antidiarréicos e hemostáticos.
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página
10
Uma grande atenção é voltada a agentes antioxidantes devido à sua
atuação direta no combate aos radicais livres. Esses estão intimamente
relacionados às patologias associadas ao envelhecimento, diabetes tipo 2 e ao
câncer. Os radicais livres desempenham um importante papel fisiológico,
atuando como mediadores no processo de obtenção de energia, no sistema
imunológico e no processo de regulação celular. Em certas condições os
radicais livres podem tornar-se danosos ao organismo; existem mecanismos de
defesa em que o corpo regula a atuação redox dos radicais livres prevenindo a
sua presença em demasia. Devido à suas propriedades antioxidantes, os
taninos, bem como os flavonóides, auxiliam o organismo no processo de
regulação de radicais livres através de três diferentes formas: neutralização
(scavening) de radicais, complexação com metais de transição, inibição de
enzimas pró-oxidativas[113].
O conceito básico que rege a neutralização de radicais livres, inclusive
por taninos, é a capacidade de doar elétrons ao radical livre tornando-o mais
estável e conseqüentemente menos danoso ao organismo. Um número
considerável de taninos hidrolisáveis e condensados foram testados in vitro na
neutralização de radicais como: DPPH (1,1-difenil -2-(2,4,6
trinitrofenil)hidrazila)[48,49,50], hidroxilas[53,54],superóxidos[50,51], peróxidos[54] e
oxido nítrico[55].
A atividade de neutralização de radicais, aplicada às proantocianidinas
ou taninos condensados, aumenta à medida que o número de hidroxilas
aumenta e também quanto ao grau de condensação dos taninos condensados,
ocorrendo um acréscimo de atividade quando se vai de monômeros a trímeros.
No entanto observou-se um decréscimo da atividade quando o grau de
condensação é maior do que três[113,49,114] .
Proantocianidinas oligoméricas e monoméricas como catequina e
epicatequina, são os principais compostos bioativos do extrato de Pinus
maritima (Pycnogenol®). Este extrato inibe enzimas que causam inflamação,
reduz a produção de histamina, que ajudam as paredes das artérias a resistir a
ataques de agentes mutagênicos que podem provocar doenças
cardiovasculares, restaurando a integridade capilar e melhorando a circulação.
Estudos recentes têm chamado atenção devido a atividade biológica
Pycnogenol® contra radicais livres. Foi estudada[56] a atuação antioxidante do
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página
11
Pycnogenol®, onde este participa em conjunto com o mecanismo antioxidante
celular, atuando na proteção contra estresse oxidativo e regeneração do radical
ascorbila. Outra propriedade[56] deste extrato é modulação do metabolismo do
NO, neutralizando radicais *NO. O desequilíbrio do metabolismo do NO está
relacionado diretamente com desordens do sistema circulatório e doenças
neurodegenerativas.
A formação de complexos com metais de transição e taninos é também
uma atividade inerente ao combate de radicais livres. Esses metais, como Fe,
que usualmente estão ligados a proteínas e quando se encontram livres podem
catalisar reações de formação de radicais, como por exemplo, a reação entre
Fe e H2O2:
Há estudos[57] que comprovam a atividade quelante dos polifenóis como
o ácido tânico atuando na degradação de radicais hidroxila. Outros trabalhos[58]
comprovaram a capacidade dos taninos condensados de formarem quelatos
com íons de Fe e Al.
A inibição de enzimas pró-oxidativas é também um meio pelo qual os
taninos podem atuar como antioxidantes. Como exemplo[59], existem trabalhos
relacionando os taninos hidrolisáveis com o decréscimo da produção de
radicais *NO por macrófagos através da inibição da óxido nítrico sintetase. Os
macrófagos[60] desempenham papéis importantes no mecanismo de inflamação
e defesa imunológica. A óxido nítrico sintetase é ativada pela presença de
toxinas bacterianas e a presença de NO pode acarretar dano ás células e
tecidos.
Uma propriedade interessante relacionada aos taninos, principalmente
às proantocianidinas, é a de proteção cardiovascular devido à capacidade
antioxidante, inibindo a oxidação do LDL (lipoproteína de baixa de densidade).
A modificação oxidativa do LDL está intimamente relacionada a patogenias
cardíacas como lesões arterioscleróticas[61]. A capacidade de inibir a oxidação
do LDL é de certo modo análoga ao processo de neutralização de radicais
livres, pois o processo de oxidação lipídica é iniciado por radicais *OH. Diversos
taninos condensados como também hidrolisáveis apresentaram atividade
lipídica antioxidativa [50,62,51,63].
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página
12
Atualmente o grande interesse científico pelos taninos são as novas
possibilidades de aplicações farmacêuticas destes compostos em males como
o câncer[3,40,41] e a AIDS[38,39,42].
Diversos polifenóis foram testados biologicamente contra o HIV, dentre
estes encontramos uma quantidade substancial de trabalhos envolvendo
elagitaninos. Extratos da Phyllanthus amarus[42] rico em elagitaninos como
geraniina e corilagina (figura 1) mostraram-se eficazes no processo de
replicação do HIV, inibindo a entrada do vírus através do bloqueio dos
receptores CD4. Ambos os elagitaninos mostram-se também eficientes na
inibição da HIV-1protease[65]. Esta enzima desempenha um papel significativo
no ciclo de vida do vírus, clivando proteínas sintetizadas pela célula hospedeira
em lugares específicos, tornando-as assim proteínas funcionais. A capacidade
de inibição do vírus através do receptor CD4 foi recentemente relata por
Bedoya et al[66] onde extratos ricos em elagitaninos, extraídos da espécie
Tuberia lignosa, inibiram a infecção por HIV em células cultivadas.
Figura 2: Estruturas de dois elagitaninos, A corila gina e B geraniina
A transcriptase reversa também é alvo da atuação inibitória dos
elagitaninos frente ao combate do HIV. Ensaios[64] com extratos da planta
Terminlia triflora, planta nativa da América do Sul, demonstraram uma
significante atividade contra a transcriptase reversa. Em tais extratos verifica-se
a presença dos taninos punicalina e 2-O-galoilpunicalina (figura 3) sendo estes
os responsáveis pela sua atividade antiviral
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
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13
Segundo Yoshida et al[67], elagitaninos derivados do ácido glucônico
como Shephagenina (figura 4) obtidos através do extrato Shepherdia argentea
exibiram resultados positivos em testes em vitro quando a capacidade de
inibição da HIV transcriptase reversa.
Figura 4: Elagitanino de cadeia aberta extraído da planta Shepherdia argentea
.
As propriedades anticancerígenas dos taninos estão relatas em uma
significativa quantidade de trabalhos onde tanto os taninos hidrolisáveis como
taninos condensados apresentam tal atividade. A indução da apoptose de
células tumorais é um dos principais fatores que relacionam os taninos à suas
propriedades anticancerígenas. A apoptose é uma autodestruição celular que
ocorre de maneira ordenada pelo organismo. As suas causas podem ser de
origem fisiológica, como por exemplo: durante o desenvolvimento embrionário,
Figura 3: Elagitanino punicalina e seu derivado 2 -galoi lpunicalina
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
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14
renovação de células lábeis e no processo de resposta imunológica. Há
também o processo de apoptose patológico causado por lesões no material
genético. Entretanto uma características em comum entre todos os tumores
malignos é a resistência à apoptose[111] .
Estudos realizados com o extrato da fruta Punica granatum,
popularmente conhecida como romã, demonstraram propriedades antitumorais
contra o câncer de próstata[69]. A substância a qual é atribuída as principais
propriedades benéficas é o elagitanino punicalagina (figura 5) que é encontrado
com maior abundância[68] em comparação com outras substâncias bioativas.
Estudos realizados sobre câncer de pele comprovaram a ação inibitória do
câncer em ratos, através da aplicação tópica do extrato da Punica granatum
após a estimulação do tumor através do agente carcinogênico TPA (12-O-
tetradecanoilforbol-13-acetato).
Figura 5: Estrutura do elagitanino punicalagina
A capacidade dos elagitaninos punicalina e punicalagina de induzirem
apoptose é descrita por Kasimsetty et al[70] e Seeram et al[71] pois em ambos
os trabalhos são relatados a indução da apoptose em células de câncer de
cólon do útero HT-29. Os elagitaninos C-glicosilados castalagina e vescalagina
foram testados[72] em vitro e comprovaram potente ação inibitória contra as
células HT-29. Tais elagitaninos são encontratos em troncos de espécies como
carvalho e castanheira e são consumidos pelo homem através de bebidas
envelhecidas, como por exemplo o vinho. O processo de inibição das células
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
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15
HT-29 se concentram da supressão dos receptores de tirosina-quinase. A
principal função da tirosina quinase está relacionada com a regulação de
processos celulares como, por exemplo, crescimento, diferenciação, adesão e
morte[73]. A atuação específica da vescalagina e da castalagina (figura 6) se
concentra na inibição do receptor do fator de crescimento epidermal, sendo
este uma das diversas classes de receptores de tirosina quinase, que
conseqüentemente inibe o desenvolvimento das células cancerosas[112].
Figura 6: Estruta dos epímeros castalagina e cescal aginos
Segundo trabalho reportado por Tanimura et al[75] taninos hidrolisáveis
inibiram a capacidade de invasividade das células tumorais atuando
diretamente nas metaloproteinases de matriz (MMP-2 e MMP-9). Dentre os
taninos testados destaca-se o elagitanino punicafolina (figura 7).
Figura 7: Estrutura da punicafolina
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
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16
As metaloproteinases[76] de matriz são uma família de endopeptidases
dependentes de zinco, que estão envolvidas em diversos processos fisiológicos
e patológicos: clivagem de receptores na superfície celular, proliferação celular,
migração, e apoptose. Dentre as MMP´s, a MMP-2 e MMP-9 tem atraído
atenção de pesquisadores[77,78] devido às suas relações entre a invasão
tumoral e metástase.
1.2. Classificação dos Taninos:
Os Taninos Hidrolisáveis:
Os taninos hidrolisáveis, como citado anteriormente correspondem aos
galotaninos e elagitaninos, estão presentes em folhas e galhos de diversas
espécies como[37] Terminalia, Phyllantus e Caesalpina. Os taninos hidrolisáveis
são constituídos de uma unidade central, D-glicose, esterificada a unidades de
galoíla no caso dos galotaninos ou unidades HHDP (hexa-hidroxidifenoila) no
caso de elagitaninos.
Galotaninos são os taninos hidrolisáveis mais simples em ocorrência,
sua estrutura básica corresponde a um núcleo poliol ligado a moléculas de
ácido gálico. Apesar da grande variedade de combinações possíveis os
galotaninos apresentam um núcleo poliol, de glicose na maioria dos casos,
sendo que as hidroxilas podem estar totalmente ou parcialmente substituídas
por unidades galoila. Os galotaninos (figura 8) são encontrados em grande
parte das plantas e atuam como um intermediário para a biossíntese de taninos
hidrolisáveis mais complexos.
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
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17
OO
O OO
OO
OHOH
OH
O
HO OH
OH
O
O
OH
OH
HO
HO
OH
HO
OHO
HOOH
Figura 8: Estrutura da 1,2,3,4,6-penta- O-galoil- β-D-glicose, precursor dos elagitaninos.
A biossíntese do ácido gálico foi alvo de estudos durante décadas.
Estudos realizados por Haslam e Dewick[79] sugerem que a formação do ácido
gálico provem de um intermediário do ciclo de formação do ácido chiquímico,
mais precisamente o composto 3-dehidrochiquimato. Tal hipótese é ainda
sustentada por Werner et al[80] e Ossipov et al[81].
A rota biossintética (esquema 1) para a formação do ácido chiquímico
inicia-se com a 4-fosfatoeritrose e fosfoenolpiruvirato que reagem para formar
3-deoxi-D-arabino-heptulosonato-7-fosfato (DAHP), catalisada através da
enzima DAHP- sintetase. DAHP é então transformado em 3-desidroquinato
(DHQ), catalisado pela enzima DHQ-sintetase. Subseqüentemente o DHQ é
hidrolisado formando o composto 3-desidrochiquimato. Reações de
deshidrogenação enzimáticas levam a formação do ácido chiquímico.
A conversão do intermediário 3-desidrochiquimato ácido gálico se dá
através da atuação da enzima NADP-dependente desidrochiquimato
desidrogenase (DSDG).
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
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18
Esquema 1: Rota biossintética do ácido gálico
O processo biossintético (esquema 2) dos galotaninos inicia-se com a
reação de esterificação entre o ácido gálico e o substrato ativo UDP-glicose
(uridina difosfato glicose) formando a α-glucogalina (α-1-galoil-D-glicose), sendo
este o metabólito primário no processo de biossíntese de galotaninos. A α-
glucogalina desempenha um duplo papel no processo biossintético, pois esta
age não apenas como receptor, mas também como doador de grupos galoila
durante as etapas posteriores de inserção dos grupos galoila. Processos de
esterificação subseqüentes são realizados produzindo 1,6-digaloilglicose, 1,2,6-
trigaloilglicose, 1,2,3,6-tretragaloilglicose e 1,2,3,4,6 pentagaloilglicose, sendo
este o precursor para a formação dos elagitainos e galotaninos mais
complexos. É interessante enfatizar que o padrão de substituição das hidroxilas
por grupos galoila segue exatamente a ordem dos compostos citados
anteriormente, ou seja, o segundo grupo galoila irá se adicionar na posição 6
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
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19
da glicose, o terceiro na posição 2 e assim sucessivamente. Tal fato se deve às
características químicas das hidroxilas primárias e secundárias, impedimento
estérico e ativação pela mudança dos grupos vizinhos.
Esquema 2: Formação da 1,2,4,6 – β- pentagaloilglicose.
Elagitaninos são polifenóis oriundos do metabolismo secundário das
espécies dicotiledôneas das angiospermas[19]. São formados a partir dos
galotaninos, mais especificamente da pentagaloilglicose por um processo de
acoplamento oxidativo de pelo menos duas das espécies galoila, formando as
unidades quirais HHDP (hexahidroxidifenoila).
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
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A hidrólise (figura 9) dos elagitaninos resulta na liberação da porção
HHDP formando o ácido hexa-hidroxidifenóico que espontaneamente desidrata
formando sua dilactona estável, o ácido elágico.
A pentagaloilglicose (figura 8), substrato de partida de todos os
elagitaninos, possue duas conformações distintas 4C1 ( uma conformação do
tipo cadeira onde todos os substituintes estão na posição equatorial) e 1C4
(conformação do tipo cadeira invertida onde os substituintes estão na posição
axial), o que conseqüentemente torna a conformação 1C4 menos estável
termodinamicamente devido à repulsão entre os grupos galoila (figura 10).
A conformação do anel de glicose parece influenciar no padrão de
acoplamento oxidativo entre unidades galoila. A conformação 4C1 favorece o
acoplamento entre as unidades galóicas ligadas aos carbonos C-2 e C-3 da
glicose e outro acoplamento entre as unidades ligadas ao carbono C-4 e C-6.
A conformação 1C4 favorece ao padrão de acoplamento entre 1-6, 1-3, 2-4 e 3-
6. A diferença entre as energias das conformações 4C1 e 1C4 é de
aproximadamente 24,8 kJ.mol-1 [21] e tal diferença explica a maior ocorrência de
elagitaninos com padrões de acoplamento provenientes da conformação 4C1,
devido à sua estabilidade, do que da conformação 1C4.
Figura 9: Reação de hidrólise da vescalagina
O
O
O
O
OH
O
HOHO
HO O
HOOH
OH
O
HO
HOHO
HOOH
OH
OO
HOOH
OH
O
H
-H2O
OH
O
HO
O
OH
O
HO
HOHO
HOOH
OH
OO
HOOH
OH
O
H
+ HO
HOO O
OHOO
OH
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
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21
Algumas espécies de plantas tem a capacidade de condensar
elagitaninos monoméricos a dímeros,trímeros e tetrâmeros[19]. Os elagitaninos
oligoméricos com maior predominância são dímeros e tetrâmeros. O processo
de polimerização dos elagitaninos ocorre primariamente através de
acoplamento oxidativo C-O entre unidades de galoila e HHDP ou de um
acoplamento oxidativo C-C entre o carbono 1 da glicose e uma unidade HHDP
do elagitanino precursor. Tal padrão de acoplamento ocorre apenas em
elagitaninos de cadeia aberta e os oligômeros formados dão origem à classe
das roburinas (figura 11).
Figura 10: Padrões de acoplamento resultantes das conformações 1C4 e 4C1
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
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22
Figura 11: Exemplos de um elagitanino dímero coriar iína A e moléculas da família das
roburinas
Algumas de famílias de plantas como: Cercidifilaceae, Ericaceae,
Onagraceae, Combretaceae, Nyssaceae, Aceracerae e Punicaceae, possuem
a capacidade de realizar acoplamentos oxidativos entre moléculas galoila
adjacentes onde o núcleo de glicose apresenta-se em uma conformação mais
energética, ou seja, a conformação 1C4. Umas das modificações estruturais
associadas aos elagitaninos que apresentam uma conformação 1C4 é a perda
da aromaticidade das unidades galoila, o que ocorre tipicamente quando temos
um padrão de acoplamento entre unidades galoila ligadas ao carbono 2 e 4 do
núcleo de glicose. Um dos mais conhecidos representantes desta classe de
compostos é o acido chebulágico (figura 12).
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
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Figura 12: Acido chebulágico
Uma única e interessante série de variações no padrão de metabolismo
dos elagitaninos ocorre em membros da família Fagaceae, Casuarinaceae e
Stachyraceae. Pertencentes ás famílias das plantas citadas encontra-se
espécies de valor econômico como por exemplo, carvalho e castanheira. O
metabolismo diferenciado destas plantas dá origem a elagitaninos de cadeia
aberta apresentando uma ligação glicosídica entre a porção HHDP e o carbono
1 da glicose. Como exemplo de tais compostos pode-se citar os elagitaninos
ilustrados na figura 6. Os elagitaninos C-glicosilados de cadeia aberta são
originados a partir dos elagitaninos monoméricos: pedunculagina e
casuarictina. Um possível caminho (esquema 3) para formação de elagitaninos
C-glicosilados de cadeia aberta é através da abertura do anel piranosídico do
núcleo de glicose. Complexas etapas subseqüentes de C-glicosilação,
estereficação entre a hidroxila do carbono 5 e uma molécula de ácido gálico e
por fim um acoplamento C-C oxidativo entre a unidade galoil em C-5 e o grupo
hexahidroxidifenoila ligado adjacente, formando o grupamento NHTP
(nonahidroxitrifenoila).
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
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O mecanismo de formação dos elagitaninos de cadeia aberta ainda não
foi completamente elucidado, no entanto tais elagitaninos têm despertado o
interesse de pesquisadores devido à sua capacidade de realizar ligações
carbono-carbono com unidades de taninos condensados reunindo assim
características de ambas as classes de taninos, condensados e hidrolisáveis.
Tais compostos são reunidos em uma classe distinta dos taninos hidrolisáveis
e condensados, abrindo uma nova classificação onde são chamados de
taninos complexos.
Os primeiros estudos[97] realizados com o objetivo de elucidar o processo
biossintético de formação dos elagitaninos datam dos anos 1930, mas apenas
nos anos 50 que Schmidt e Mayer[109] propuseram as primeiras teorias sobre o
acoplamento oxidativo entre unidades vizinhas de ácido gálico provindas do
galotanino 1,2,3,4,6 pentagaloilglicose. Décadas mais tarde, o trabalho de
Schimdt e Mayer foi sustentado por Haslam et al[83].
Esquema 3: Formação de elagitaninos C-glicosilados
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
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O processo biossintético de formação dos elagitaninos começou a ser
melhor elucidado a partir do trabalho publicado por Niemtz et al[84], através da
pentagaloil glicose marcada com o isótopo 14C. Pode-se, desta forma,
acompanhar a formação elagitaninos marcados isotopicamente empregando
extrato de enzimas provenientes da espécie Tellima grandiflora. Comparação
dos tempos de retenção de um dos produtos marcados isotopicamente
coincide com o elagitanino telimagrandina II, iniciando-se uma metodologia
para o estudo de enzimas envolvidas na formação dos elagitaninos. Em 2003,
Niemtz[96] continuando com seus estudos sobre a biossíntese dos elagitaninos
isola a fenol oxidase, tal enzima depende de O2, responsável pela ligação entre
as unidades de ácido gálico sendo, conseqüentemente, a enzima responsável
pela formação da telimagrandina II (figura 13) a partir da pentagaloilglicose
(figura 8).
Figura 13: Telimagrandina II
Os Taninos Condensados:
Proantocianidinas, como também são conhecidos os taninos
condensados, são formados a partir de estruturas básicas[26] como a catequina,
epicatequina, galogatequina e epigalogatequina (figura 14). Estes compostos
são resistentes à reação de hidrólise, porém são sujeitos à clivagem em meio
oxidativo dando origem às antocianidinas.
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
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Figura 14: Subunidades dos taninos complexos
Uma das propriedades[1] das catequinas é a de converter-se em
polímeros e oligômeros, através da ação de ácidos ou enzimas.
Biossintéticamente os taninos condensados são formados por sucessivas
reações de condensação, chegando a um grau que varia de dois a até
cinqüenta.
A diversidade estrutural (figura 15) pode variar no padrão de
hidroxilação, estereoquímica dos centros quirais e o local da ligação
interflavana. As proantocianidinas dímeras e trímeras são sub-classificadas
recebendo a denominação de proantocianidinas B e proantocianidinas C,
respectivamente. As diferentes variações das proantocianidinas B e C resultam
da variação da ligação interflavana, onde o carbono 4 de uma molécula de 3-
flavanol se liga com o carbono 6 ou 8 de outra unidade flavanol.
Proantocianidinas do tipo A são as espécies que possuem uma ligação
adicional tipo éter entre unidades de flavanol.
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
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27
Figura 15: Exemplos de taninos complexos. A: Proant ocianidina tipo B 4-6, B:
Proantocianidinas tipo B 4-8, C: Proantocianidina t ipo C e D: Proantocianidina tipo A.
A maior parte dos taninos[1,26] encontrados no vinho tinto são taninos
condensados que estão intimamente ligados ao processo de produção de
vinho, devido a numerosas reações com proteínas. Também durante o
processo de produção do vinho ocorre a formação de taninos complexos
através da reação de adição de monômeros de taninos condensados no
carbono 1 da unidade glicosídica de elagitaninos.
Taninos Complexos.
Também conhecidos como flavano- elagitaninos, os taninos complexos
recebem tal nome devido à resposta positiva para testes colorimétricos
característicos de taninos hidrolisáveis e também a testes de taninos
condensados[25].
Os flavano-elagitaninos são constituídos por uma unidade de tanino
hidrolisável e uma unidade de tanino condensado. A porção hidrolisável liga-se
à unidade de tanino condensado (flavanol) através de uma ligação carbono-
carbono entre o carbono C1 da glicose de cadeia aberta e carbono 6 ou 8 do
anel da unidade de flavanol (figura 16).
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
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28
Figura 16: Exemplo das Acutissiminas A e B, elagita ninos C-glicosilados
1.3. Considerações sobre a síntese de taninos. Um dos principais desafios no que se refere à síntese de elagitaninos é
a formação da ligação entre as unidades de ácido gálico respeitando a estéreo-
química de seus análogos produzidos biossintéticamente. No caso de
elagitaninos contendo um núcleo de glicose na conformação 4C1, têm-se a
formação de atropoisômeros entre as unidades de ácido gálico que se
apresentam exclusivamente na conformação (S). Apesar dos elagitaninos
serem objeto de estudo há varias décadas, apenas nos anos 90 foram
publicados trabalhos relatando metodologias sintéticas no que se refere à
reação de acoplamento biarílico, conseqüentemente, formação da porção
HHDP e sínteses totais[86, 85, 17, 87, 88].
Em 1993, Feldman et al[34]. publicou uma metodologia de acoplamento
biarílico oxidativo (figura 17) originando espécies HHDP com estéreo-química
correta, utilizando como agente oxidante Pb(OAc)4. A utilização de Pb(OAc)4 foi
previamente descrita[95] como um oxidante de compostos fenólicos, que no
entanto demonstrou ser muito bem sucedida nas reações de acoplamento
biarílico envolvidos na síntese de elagitaninos. A metodologia proposta por
Feldman et al empregando Pb(OAc)4 rendeu anos mais tarde a síntese total
dos elagitaninos monoméricos: Punicalagina[86], Telimagrandina I[85] e sangüina
H-5[17].
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
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Figura 17: Reação de acoplamento biarílico utilizan do Pb(OAc) 4
Outras metodologias sintéticas foram relatadas por Lipshutz et al [87]
(esquema 4) utilizando como precursores moléculas de metil galato
halogenadas, ligadas a um suporte quiral, conferindo a estereo-química correta
e como agente oxidante Li2CuCN. Após a reação de acoplamento biarílico o
suporte quiral é liberado e a unidade HHDP e ligada à molécula de glicose.
. Esquema 4:Rota sintética da telimagrandina II empre gando CuCN
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
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Em 1999, Khanbabaee e Lötzerich[88] publicaram um estudo sobre a
síntese de elagitaninos de cadeia aberta derivados de ácido glucônico. A
metodologia descrita (esquema 5) está baseada na oxidação do carbono 1 do
anel de glicose, utilizando para este fim o reagente PDC. A oxidação do anel de
glicose leva a formação de uma lactona que devido ao alto grau de tensão,
proporcionada pelos diversos substituintes, sofre fácil hidrólise e conseqüente
abertura do anel em meio ácido.
Esquema 5:Rota sintética proposta por Khanbabaee et al. de um precursor de
Lagerstanino C.
Feldman[89], continuando com seu trabalho sintético sobre elagitaninos,
publica em 1999 a síntese total do elagitanino dímérico coriariína A (figura 10).
Tal trabalho merece destaque devido à metodologia apresentada (esquema
6,7): a formação de uma ligação O-C entre duas unidades galoila, ou seja, a
formação de uma ligação entre a hidroxila fenólica de um grupo galoila e um
carbono do anel aromático de outra unidade galoila. Tal metodologia foi
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
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inicialmente estudada por Feldman e Quideau, basicamente consiste na
oxidação das hidroxilas fenólicas a ortoquinonas, seguida de uma reação de
dimerização utilizando ácido Lewis B(OAc)3.
Esquema 6: Reação de dimerização do ácido gálico re alizada for Feldman e Quideau.
Após a obtenção dos dímeros C e D, a eliminação da ligação β-fenóxido
através do tratamento com AcOH/AcO-Na e posterior redução Na2S2O4, origina
os compostos desidrodigaloil desejados.
Esquema 7: Continuação
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
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Em 2004, a síntese de elagitaninos na conformação menos estável 1C4,
foi reportada por Ikeda et al[90]. Em seu trabalho Ikeda apresentou a síntese
total (esquema 8) da corilagina baseada em uma diferente metodologia de
acoplamento biarílico e posterior abertura e fechamento do anel de glicose.
Esquema 8: Rota sintética da corilagina, elagitanin o na conformação 1C4. 1
1 G*=ácido 2-iodo-3,4,5-trimetoxibenzóico, PMB**=para-metoxibenzil, G1***=Cloreto de 3,4,5 trimetoxibenzoila
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2. Objetivos
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
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2. Objetivos
Este projeto tem como objetivo principal o estudo de uma rota viável
para a síntese da (-)-vescalina. Tais estudos representam uma contribuição ao
desenvolvimento da metodologia sintética de polifenóis biologicamente ativos,
substâncias que têm demonstrando enorme empregabilidade na área
farmacológica.
OH
O
HO
O
OH
O
HO
HOHO
HOOH
OH
OO
HOOH
OH
O
Figura 18: Estrutura da Vescalina
O elagitanino vescalina foi isolado e estruturalmente elucidado por
Mayer et al.[91,92]. Mais recentemente um estudo sobre atividade biológica de
elagitaninos C-glicosilados provou a capacidade da vescalina de inibir a
topoisomerase II[93], enzima que desempenha importante papel no processo de
replicação e transcrição de DNA. A topoisomerase II[94] é uma enzima alvo no
desenvolvimento de quimioterápicos, capazes de danificar o DNA de células
cancerosas.
O esquema 9 representa a rota sintética planejada:
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
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Esquema 9: Rota Sintética Proposta
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3. Resultados e Discussão
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3. Resultados e Discussão
Na parte inicial do trabalho foi realizado o procedimento de inclusão de
grupos protetores na unidade glicosídica de acordo com o esquema 10[5].
A partir da D-glicose é realizada a síntese do doador glicosídico 2,3,4,5-
O- acetil- 1-Bromo α-D-glicopiranosídeo (composto 1).
33% HBr/AcOH
(Ac)2O
OH
AcO
H
AcO
H
BrOAcH H
OAcO
H
HO
HHO
H
OHOHH H
OH
1 Figura 19: Reação de formação da 2,3,4,6-O-acetil- α-glucopiranosídeo.
O procedimento realizado para a preparação do doador glicosídico foi
realizado da seguinte maneira: a uma suspensão de D-glicose em anidrido
acético (aprox. 1 g em 5 ml) foi adicionado 1 ml de solução de 33% HBr/AcOH.
Após aproximadamente 1 hora, completa-se a processo de acetilação e toda a
glicose solubiliza-se, após este período á adicionado um volume de 5 mL de
solução 33% HBr/AcOH. Ao final de 4 horas, após a verificação do consumo de
todo o material de partida por TLC a reação foi interrompida e rota-evaporado o
solvente. Através da análise de RMN pode-se comprovar a acetilação total da
glicose, mas não a inserção de bromo no carbono anomérico.
Numa segunda tentativa foi adicionado 1mol equivalente de H2O que,
segundo literatura[23], atua como catalisador na reação. O procedimento foi
executado como descrito no parágrafo anterior com a adição de 1 mol
equivalente de água. Após um período de 3,5 horas foi rota-evaporado o
solvente, sem necessidade de qualquer neutralização prévia, e obtido o
O
OHHOHOHO
O
OHHOHOHO
SPhO
OAcAcOO SPh
OPh O
OHHOO SPh
OPh
OH
H O
OAcAcOAcOAcO
SPh33% HBr/AcOH
(Ac)2O
PhSH/1M Na2CO3
NaOMe PhC(Br)2/(Ac)2O NaOMe
OH
AcO
H
AcO
H
BrOAcH H
OAc
Esquema 10: Rota sintética de proteção da D-glicose
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 40
composto 2,3,4,6 – tetra-O- acetil-1- α-bromo -D-glicopiranosideo, com
rendimento de 88%, comprovado através de analise de RMN de hidrogênio e
carbono 13 e comparado com dados da literatura[23]. A hidratação do meio
reacional contribui com o aumento da velocidade da reação, sem detrimento do
rendimento, devido à capacidade de tornar mais ácido o meio, portanto
catalisando assim a reação de acetilação e aumento da quantidade de HBr livre
no meio.
Os tioglicosídeos são amplamente usados em reações de síntese
envolvendo carboidratos, pois funcionam muito bem como grupo protetor
ortogonal da posição anomérica, ou seja, são grupos protetores que reagem
sob condições altamente específicas, não interferindo nas demais reações de
proteção e desproteção dos diferentes sítios da molécula de açúcar.
Primeiramente o reagente tiofenol, PhSH, foi sintetizado a partir da
clivagem redutiva do dissulfeto de difenila, Ph-S-S-Ph, com o agente redutor
LiAlH4. Após 1,5 hora de reação todo reagente de partida foi consumido
produzindo quantitativamente PhSH. Para análise qualitativa, efetuou-se
análise de infravermelho na busca de estiramento típico de mercaptanas,
banda S-H. O espectro de infravermelho mostrou uma banda em 2568 cm-1
evidenciando a presença do tiofenol.
A preparação do composto Fenil -2,3,4,6- O- acetil-1-tio-β-D-
glicopiranosídeo foi realizada a partir do composto 1. Este foi submetido a
reação com tiofenol em AcOEt e sol. aquosa 1M de Na2CO3 utilizando
catalisador de transferência de fase, Bu4NHSO4. O produto da reação foi
extraído e cristalizado com EtOH absoluto. Obteve-se o composto Fenil 2,3,4,6-
tetra-O-acetil-1-tio-D-glucopiranose, composto 2, com rendimento de 82%.
Após a evaporação do solvente foi comum a presença de resíduo de tiofenol.
A purificação com coluna de sílica utilizando eluente AcOEt e hexano
mostrou-se um método não eficaz pois parte do produto epimeriza-se durante a
OH
AcO
H
AcO
H
BrOAcH H
OAc
O
H
AcO
H
AcO
H
HOAcH S
OAc
Ph
PhSH/1M Na2CO3
(Bu)4NHSO4
1 2Figura 20: Reação de formação da Fenil -2,3,4,6- O- acetil -1-tio -β-D-glicopiranosídeo .
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 41
eluição, portanto preferiu-se a lavagem do composto com hexano a frio devido
à baixa solubilidade do composto 2 e a alta solubilidade do PhSH em hexano.
A mudança da conformação α do composto 1 para conformação β do
composto 2 pode ser atribuída a fatores decorrentes do mecanismo da reação
e substituintes da posição 2 do anel piranosídico, no caso o grupo acetil. A
ligação glicosídica é formada através da substituição nucleófila de um grupo
abandonador, no caso o bromo, por um aceptor glicosídico no caso tiofenol.
Após a liberação do átomo de bromo há a formação de um intermediário
catiônico na posição 1, o qual é estabilizado pela carbonila da posição 2
deixando a posição axial impedida, favorecendo o ataque pela face β.
OH
AcO
H
AcO
H
BrOAcH H
OAc
-Br
OH
AcO
H
AcO
H
OHH
OAc
O
PhSH OH
AcO
H
AcO
H
HOAcH S
OAc
Ph
Figura 21: Estabilização do cátion pela carbonila.
Para a próxima etapa o composto 2 foi submetido a uma reação de
trans-esterificação empregando NaOMe em MeOH anidro. Após um período de
15 min. a solução foi então extraída e neutralizada através de uma coluna de
aproximadamente 5 ml de resina de troca iônica, DOWEX X8 50W H+ (200-400
mesh). Através do espectro de RMN foi comprovado sucesso na obtenção do
composto 3 ( fenil1-tio-β-D-glicopiranosídeo) com 96 % de rendimento.
OH
AcO
H
AcO
H
HOAcH S
OAc
Ph
2
NaOMe
MeOH
OH
HO
H
HO
H
HOHH S
OH
Ph
3
Figura 22: Reação de formação da fenil 1-tio -β-D-glicopiranosídeo .
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 42
Na próxima etapa o composto 3 foi diluído em piridina anidra, utilizando-
se do composto α, α- dibromotolueno efetuou-se a reação de proteção
regiosseletiva das hidroxilas das posições C 4 e C 6 no anel glicosídico. Após o
período de 2 horas sob agitação e refluxo a 140 ºC foi adicionado uma alíquota
de anidrido acético a fim de acetilar momentaneamente as posições 2 e 3 que
são posteriormente retiradas originando o composto 5 (figura 23). A acetilação
das hidroxilas 2 e 3 aumenta a solubilidade em AcOEt (solvente utilizado no
processo de extração), portanto minimiza perdas durante o procedimento de
neutralização e lavagem da fase orgânica. Após purificação em coluna
cromatográfica (6:4 hexano/AcOEt) o composto fenil 2,3-O-acetil-4,6-O-
benzilideno-1-tio-β- D-glicopiranosideo (composto 4) foi obtido com rendimento
de 65%.
Figura 23: Reação de formação da fenil 2,3- O-acetil-4,6- O-benzilideno-1-tio- β-D-glicopiranosideo.
Finalizando o procedimento de proteção da glicose o composto 4 foi
submetido novamente ao ataque com NaOMe. Procedendo-se da mesma
maneira referente à preparação do composto 3, resultando no composto fenil-
4,6-O- benzilideno-1-tio-β-D-glicopiranosídeo (composto 5). O rendimento
obtido nesta etapa foi de 95%.
OH
O
H
AcO
H
HOAcH S
O
OH
O
H
HO
H
HOHH S
O
MeOH
NaOMe
4 5
Figura 24: Reação de formação da fenil 4,6- O- benzilideno-1-tio- β-D-glicopiranosideo.
O
H
HO
H
HO
H
HOHH S
OH
PhC(Br)2/ (Ac)2O
Piridina
OH
O
H
AcO
H
HOAcH S
O
3 4
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 43
Após completo o procedimento de proteção da glicose partiu-se para
uma segunda etapa onde o objetivo foi a proteção das hidroxilas fenólicas do
metil galato conforme esquema 11[34].
Partindo do éster galato de metila e Ph2C(Cl)2 (diclorodifenilmetano),
ambos foram aquecidos a 180 ºC durante 10 min em reação sem solvente. O
produto proveniente do aquecimento foi diluído em benzeno e cristalizado
adicionando-se hexano. Após um período de 12 horas o produto, na forma de
sólido branco, foi filtrado e rotaevaporado o excesso de solvente. Obteve-se o
composto, metil- 3- hidroxi-difenilmetileno-4,5-dioxi-benzoato produto 6 com
79% de rendimento.
Diversas reações sem solventes são realizadas em microondas o que
nos levou a realizar tentativas de adaptar o procedimento para realização em
microondas. Uma tentativa bem sucedida foi realizada e o composto 6 foi
sintetizado utilizando equipamento de microondas CEM® mod. Discover
System, com parâmetros fixados em: temperatura 150 ºC, potencia 100 W e
tempo 5 min. O rendimento obtido foi de 81%.
O O
OO
OH
O O
HOOH
OH
(Ph)2C(Cl)2/180°C LiOH/ refluxo
O OH
OO
OH
O OH
OO
OH
TBDMSiCl(Et)3N
DMF
O O
OO
O
MeOH
Si
Si O OH
OO
O Si
AcOHH2O
THF
Esquema 11: Etapas de p roteção do ácido gálico.
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 44
O éster 6 foi submetido à hidrólise utilizando-se solução aquosa 2M de
LiOH e metanol, a uma temperatura de refluxo de aproximadamente 100º C
durante 1 hora. Após decorrido o tempo de reação, a solução foi diluída em
acetato de etila, lavada com solução 1M de H3PO4 e posteriormente água.
Após rotaevaporado o solvente o extrato bruto foi purificado em coluna
cromatográfica (6:4 Hexano/ AcOEt). Obteve-se o rendimento de 83 % para o
composto ácido 3- hidroxi-difenilmetileno-4,5-dioxi-benzóico (composto 7).
Para a proteção das hidroxilas ácidas e fenólicas do composto 7 utilizou-
se TBDMSiCl (cloreto de tertbutildimetilsilil) em solução com DMF, empregando
como base de Brönsted (Et)3N (trietilamina). A solução foi agitada à
temperatura ambiente sob atmosfera de N2 durante 12 horas. Após decorrido o
período a reação foi neutralizada com solução 1M de H3PO4, diluída em éter e
O O
OO
OH
O O
HOOH
OH
(Ph)2C(Cl)2/180°C
6
Figura 25: Formação composto 6
O O
OO
OH
LiOH/ refluxo
O OH
OO
OH
MeOH
6 7Figura 26: Reação de hidrólise originando o composto 7
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 45
lavada com sol. saturada de NaCl. O solvente foi rotaevaporado obtendo o
intermediário 8. A hidrólise ácida do silil éster foi realizada utilizando solução de
THF, AcOH, H2O em proporção 3:1:1, obtendo o composto 9 ( ácido 3 t-
butildimetilsiloxi-4,5 difenilmetilenodioxi-benzóico) na forma ácida e com a
hidroxila fenólica protegida. O rendimento sobre as duas etapas foi de 71%.
Figura 27: Reação de proteção das hidroxilas por TB DMSi e mecanismo de hidrólise do silil éster.
Prosseguindo com a rota sintética, o composto 9 e o composto 5 foram
submetidos a uma reação de esterificação[17] utilizando DCC (diciclo-
hexilcarbodiimida) e DMAP, DMAP.HCl (dimetil amino piridina e cloridrato de
dimetilamino piridina). A ativação da carbonila por DCC e o uso de DMAP como
catalisador fornece um método sob condições brandas para reações de
condensação entre ácidos e alcoóis[98,99,100]. Tal método é amplamente usado
na síntese de elagitaninos[17,20,34,87,88] em etapas de formação da ligação éster
entre moléculas de ácido gálico e glicose. O mecanismo de atuação do DCC
combinado com DMAP está ilustrado no esquema a seguir.
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 46
2
Esquema 12: Mecanismo de reação de esterificação em pregando DCC e DMAP
Contrariando as expectativas a reação entre o produto 5 e 9 não se
concretizou. Um dos fatores para um possível impedimento para a realização
da reação, seria a baixa solubilidade do produto 5 em CH2Cl2.
Tentativas de promover a reação em refluxo foram efetuadas, mas não
se obteve sucesso. Buscando outros solventes que solubilizem
apropriadamente o composto 5 utilizou-se DMF, em condições idênticas à
reação com CH2Cl2. Após 3 dias de agitação não houve sinal da formação do
éster. Testes utilizando THF foram realizados, mas também não se obteve
sucesso. A hipótese de baixa solubilidade é, portanto, descartada. Devido a
2 DCU= Diciclohexil uréia
O
OHHOO
SH
OPh+
COOH
O
O
O
PhPh
DCC/DMAP/DMAP.HClCH2Cl2X
O
OOO SPhOPh
O
OO
O
O
O
O
PhPh Ph
Ph5 9
OSi Si Si
Figura 28: Reação hipotética entre composto 5 e 9.
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 47
várias tentativas de promover a reação de esterificação com o grupo tiofenólico
protegendo o carbono 1 da glicose, abandonou-se o uso deste grupo protetor e
buscamos na literatura[27,28] outros grupos protetores que são mais adequados
na síntese de elagitaninos.
Conseqüentemente houve a necessidade de reformular a rota sintética.
Dentre os grupos protetores que poderiam ser utilizados no lugar do tiofenol
destaca-se o orto-nitrobenzil[28] (esquema 13), pois este apresenta fácil
remoção através de reação fotoquímica em comprimento de 300 nm e o grupo
trimetilsilil-etil[27] (esquema 14) pode ser clivado utilizando ácido
trifluoroacético[101].
Esquema 13: Rota sintética empregando orto-nitro be nzil
Com a possibilidade de trabalhar com os dois grupos protetores, foram
elaboradas duas rotas distintas e testes foram conduzidos para verificar a
viabilidade de utilização dos grupos protetores. Fatores como disponibilidade
de reagentes, rendimento e complexidade das reações foram levados em
conta.
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 48
Esquema 14: Rota sintética empregando trimetilsilil -etil
Os estudos iniciaram a partir da rota proposta no esquema 13. Para
realizar a reação de glicosilação utilizando orto –nitrobenzil álcool foi realizada
a redução do orto-nitrobenzaldeído utilizando NaBH4 em THF e quantidades
catalíticas de H2O[29]. Após cinco minutos de reação obteve-se com sucesso o
álcool orto-nitrobenzílico com rendimento de 95 %.
O H
NO2NaBH4 H2O cat
THF 95%
HO
NO2
Figura 29: Reação de redução do orto -nitro benzaldeído
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 49
Para a glicosilação empregando o orto-nitro benzil como aceptor
glicosídico, utiliza-se segundo literatura[28] o reagente AgClO4 em uma reação
empregando método de glicosilação koenings -knorr.
Devido à indisponibilidade deste reagente procurou-se métodos
alternativos para a síntese. Baseado em trabalho publicado[30] que descreve
reações de proteção de carboidratos promovidas por ultra-som, foi decidido
efetuar testes empregando BF3.Et2O para a preparação da 1-nitrobenzil-
glicopiranosídeo. A reação foi conduzida a partir do doador glicosídico tetra-O-
acetil 1- α bromo-D- glicopiranosídeo (composto 1 ) e álcool orto-nitrobenzílico
com 1 eq. mol de BF3.Et2O. Após 5 minutos de reação sob ultra-som à
temperatura ambiente obteve-se 2,3,4,6-O-acetil-1-O-nitrobenzil-α-D-
glicopiranosídeo (composto 10) com 81% de rendimento.
A reação entre o composto 1 e álcool orto-nitro benzílico realizada sob
as condições descritas no parágrafo anterior resultou no produto 10 em
conformação exclusivamente α. Em contrapartida o produto desejado era a sua
correspondente conformação β. Os fatores que levaram o produto á exclusiva
conformação α (alfa) podem ser entendidos como um conjunto de condições
que direcionam a reação de glicosilação para uma conformação ou outra. Tais
fatores podem ser repulsão estéreo-eletronica, mecanismo de substituição[102],
efeitos de solvente[103] e grupamentos vizinhos adjacentes.
A influencia dos grupos vizinhos frente a estéreo-seletividade das
reações de glicosilação pode ser explicada pela capacidade de alguns
substituintes têm de estabilizar o intermediário iônico formado após a saída do
grupo abandonador, tornado assim uma das faces impedidas, α ou β.
Conseqüentemente o ataque nucleófilo realizado pelo aceptor glicosídico é
oposto à face impedida. A assistência anquimérica (figura 30) promovida pelo
grupo 2- acetoxi estabiliza energeticamente o intermediário oxocarbonico,
devido à deslocalização da carga positiva entre dois átomos de oxigênio o que
BF3.Et2O (ultra-som)
CH2Cl2 81%
HO
NO2+
OH
AcO
H
AcO
H
BrOAcH H
OAc
10
OH
AcO
H
AcO
H
OOAc
H H
OAc
NO2
Figura 30: Reação de formação 2,3,4,6, -O-acetil -1-O-nitrobenzil -α-D-glicopiranosideo
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 50
é uma situação mais energeticamente favorável do que um carbocátion
secundário[104].
ORO
ROO
OR
L
O
AtivadorO
RORO
O
OR
O
R1OH
ORO
ROO
OR
O
OR1H
ORO
ROO
OR
O
ORO
ROO
OR
O
Figura 31:Estabilização promovida por substituinte adjacente
O efeito anomérico pode ser entendido como um efeito estéreo-
eletrônico que descreve a tendência de um substituinte adjacente ao
heteroátomo preferir uma orientação axial ao invés da equatorial.
Uma explicação para este efeito foi formulada por J. T.Edwardl[110], o
qual afirma que os dipolos alinhados dos heteroátomos causem repulsão entre
estes (figura 31) quando estes se encontram na posição β (equatorial). Porém
quando os dipolos se encontram na posição α (axial) a repulsão entre os
dipolos se anula, tornando-os mais estáveis.
Outra explicação bastante aceita[104,105] é a de estabilização eletrônica
(hiperconjugação) entre os pares de elétrons não compartilhados do oxigênio
do anel pirano e o orbital antiligante da ligação axial ( ) (figura 32). A
sobreposição é eficiente é apenas na posição axial. É importante salientar que
O
H
RO
H
RO
H
HORH O
OR
O
H
RO
H
RO
H
OORH H
OR
R
R
Figura 32: Equilibrio termodinâmico entre conformações α e β.
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 51
a magnitude do efeito anomérico depende do substituinte ligado ao carbono
anomérico, dos substituintes ligados ao anel e até mesmo do solvente.
A utilização de BF3.Et2O como promotor da reação de glicosilação,
utilizando como doador glicosídico o composto 2,3,4,6-O-acetil-1-bromo-α-D-
glicopiranosídeo, tem como mecanismo de ação o ataque eletrófilo ao grupo
abandonador (átomo de Bromo), enfraquecendo a ligação C-Br do anel
piranosídico tornando-o suscetível a uma reação de substituição Sn2 (figura
33). A obtenção do composto 10, na forma exclusiva α, pode ser explicada pela
ausência da assistência do grupo substituinte vizinho, o que implica dizer que
temos a predominância do efeito anomérico, que se caracteriza pela
predominância da conformação α.
OH
AcO
H
AcO
H
BrOAcH H
OAc
BF
F F
OH
AcO
H
AcO
H
BrOAcH
H
OAc
BF
F F
HO
NO2
OH
AcO
H
AcO
H
BrOAcH
H
OAc
BF
F F
HO
NO2
BF3.Et2OHBr
OH
AcO
H
AcO
H
OOAcH H
OAc
NO2
Figura 34:Reação de glicosilação utilzando BF 3.Et2O como agente promotor
ORO
ROOR
O
OR
ORO
RO
OOR
OR
R
RFigura 33: Estabilização por hiperconjugação do confôrmero α
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 52
Diante de tais resultados foi decidido realizar testes empregando como
protetor glicosídico 2-trimetilsilila conforme elaborado na rota sintética
alternativa do esquema 14.
A reação de glicosilação foi realizada[31] apartir do 2-trimetilsilil etanol,
que foi sintetizado a partir de redução do α trimetilsilacetato de etila (composto
11). O composto 11 por sua vez foi sintetizado a partir de uma reação com
bromoacetato de etila e clorotrimetilsilano, empregando Zn metálico em
solução de benzeno e éter, sob refluxo, com rendimento de 68%. Tal reação é
uma variação da reação de Reformatsky que consiste basicamente na
condensação de aldeídos ou cetonas com α-halo ésteres através da formação
de um intermediário complexo organozinco.
Obtido o composto 11 este foi submetido a redução com LiAlH4, em éter
previamente tratado. Após tempo de 2,5 horas foi obtido o composto, 2-
trimetilsilil etanol com rendimento de 92%. Vale observar a resistência do grupo
de trimetilsilil frente a agentes redutores fortes como LiAlH4.
Tendo em mãos o 2-Trimetilsilil etanol (composto 12) efetuou-se a
reação a reação de glicosilação utilizando também para este procedimento o
doador glicosídico 2,3,4,6-O- acetil 1- bromo- α –D – glicopiranosídeo
(composto 1). Foram utilizados como agentes promotores óxido de mercúrio
(HgO) combinado com catalisador (HgBr2). Este método é uma das variações
do método Koenings-Knorr[105] o qual é um método tradicional de glicosilação
que utiliza como agentes promotores sais de metais de transição, como Ag e
Hg. Alguns sais empregados neste tipo de reação são: AgTf[106], AgCO3,
AgClO4[28], HgO/HgBr2
[27,108], Hg(CN)2[107,27]. A reação foi conduzida segundo
Br
O
O Si Cl+Zn / refluxo
Benzeno/Éter 69%
Si
O
O11
Éter/ 92%Si
O
OLiAlH4 Si
OH
12
Figura 35: Reação de formação do 2 -trimetilsilil acetato de etila
Figura 36: Redução do composto 11 formando 2 -trimetilsilil etanol
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
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métodos descritos na literatura[27], HgO com quantidades catalíticas de HgBr2
em CHCl3 previamente tratado. No caso do emprego de CHCl3 o tempo
reacional total foi de 48 horas, utilizando CH2Cl2 o tempo de reação diminuiu
para 24 horas Após purificação através de cromatográfica em coluna com a
proporção da fase móvel 1:1 AcOEt/Hexano foi obtido o composto 13 (2,3,4,6-
O-acetil-1-O-(2-trimetilsilil etil) -β-D-glicopiranosídeo). O rendimento da reação
foi de 42% deixando ainda espaço para testes empregando outros reagentes
que possibilitem o aumento do rendimento. Dentre outros reagentes descritos
na literatura[32,33] destaca-se AgO3SCF3 (triflato de prata).
Continuando com o protocolo, os grupos acetilas foram clivados
utilizando solução 1M de NaOMe em metanol anidro. Após 2 horas de tempo
reacional o NaOMe é neutralizado através de uma coluna de 5 mL contendo
resina de troca iônica DOWEX X8 50W H+ (200-400 mesh). O rendimento da
reação foi de 89% obtendo o composto 14 (2-trimetilsilil etil -β-D-
glicopiranosídeo).
OH
AcO
H
AcO
H
HOAcH
OAc
O Si
NaOMe
MeOH
OH
HO
H
HO
H
HOHH
OH
O Si
Figura 38:Reação de transesterificação utilizando d o composto 14
Na seguinte etapa o composto 14 foi submetido a uma reação de
formação de benzilideno com a finalidade de proteger as hidroxilas C 4 e C 6
do anel piranosídico. O procedimento foi realizado utilizando benzaldeído
dimetil acetal em THF. Quantidades catalíticas de ácido p-toluenosulfônico
foram adicionadas à reação (0,06 mol eq mol de composto 14). Após o período
de 24 horas notou-se a formação de produto através de TLC (8:1
CHCl3/AcOEt). O solvente foi rotaevaporado e resíduo impuro foi submetido ao
SiOH O
H
AcO
H
AcO
H
HOAcH Br
OAc
+ OH
AcO
H
AcO
H
HOAcH
OAc
O Si
HgO/HgBr2
CH2Cl2 40%
Figura 37: Reação de glicosilação emprgando HgO/HgBr2 como p romotor
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 54
processo de purificação utilizando cromatografia em coluna (SiO2). Durante a
eluição do produto ocorreu a sua degradação no interior da coluna . Tentativas
de utilizar a neutralização da sílica adicionando 1% V/V de Et3N foram
realizadas, mas não tiveram efeito positivo. Outros métodos cromatográficos
foram testados, como cromatografia preparativa, porém também não se obteve
sucesso.
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 55
4. Considerações Finais
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 56
4. Considerações Finais. A rota sintética proposta mostrou inúmeros desafios dentre os quais a escolhe do aceptor glicosídico,com a ortogonalidade adequada, ainda permanece em questão. Este é um problema delicado, pois como o produto natural é derivado de uma molécula de glicose de cadeia aberta o grupo que permanece ligado ao carbono 1 da glicose deverá ter a labilidade correta para ser retirado sem afetar os demais grupos ligados á molécula de glicose. Temos ainda como ressalva que as funções ésteres ligadas ao anel piranosídico apresentam também uma alta labilidade quando expostas a condições extremas. A utilização de fenil tioglicosídeos foi de uma decepcionante surpresa, pois este não se mostrou adequado quando submetido a reações de condensação utilizando DCC e DMAP. Porém um estudo futuro poderá ser realizado utilizando fenil tioglicosídeos, atuando como um doador glicosídico temporário. Os fenil tioglicosídeos são sensíveis á NBS e reações de glicosilação utilizando NBS como promotor em condições brandas já foram descritas. Uma reação de glicosilação utilizando entre trimetil silil etanol e 4,6-O-benzilideno-2,3-O-β-D-glicopiranosídeo talvez resolvesse o problema de formação do benzilideno no composto 14.
O
H
AcO
H
AcO
H
HOAcH Br
OAc
O
H
AcO
H
AcO
H
HOAcH O
OAc
SiHgO/
(CH3)3SiOH
O
H
O
H
AcO
H
HOAcH S
O
NBS/O
H
AcO
H
AcO
H
HOAcH O
OAc
Si
(CH3)3SiOH
Figura 39: Reações análogas de glicosilação.
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
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5. Parte Experimental
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 58
5. Parte experimental.
Nesta seção, os compostos foram nomeados conforme recomendações
oficiais de International Union of Pure and Apllied Chemistry (IUPAC) para
nomenclatura de compostos orgânicos.
Para concentrar as soluções orgânicas foram utilizados evaporadores
rotatórios do tipo Buchler e Büchi, operando sob pressão reduzida de
aproximadamente 30 mmHg.
As análises por cromatografia em camada delgada foram realizadas
utilizando-se placas de sílica gel 60 da Merck®. As purificações por
cromatografia em coluna foram realizadas utilizando sílica gel 70-230 mesh da
Aldrich®.
Os pontos de fusão foram determinados em uma placa de aquecimento
segundo com um termômetro não aferido, instalado em microscópio modelo
Bristoline®.
Os solventes e reagentes foram convenientemente purificados conforme
métodos usuais[115].
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 59
5.1- Preparação do composto 1 (2,3,4,5- O- acetil- 1-Bromo α-D-
glicopiranosídeo) .
Anidrido acético (5ml), foi adicionado a uma balão contendo glicose
(1,000 g 5,55 mmol) sob agitação. Em seguida adicionou-se solução 33% m/m
de HBr em AcOH (1 mL) e H2O (0,05 mL 2,77 mmol). A solução foi agitada até
a solubilização completa da glicose (cerca de 70 minutos). Em seguida, foi
adicionado uma nova alíquota da solução de HBr/AcOH 33% (5 mL),
mantendo-se agitação por 3 horas. A solução foi concentrada através de
coevaporação com tolueno. O resíduo sólido foi cristalizado com éter etílico
fornecendo 2,021 g, com 88% de rendimento.
Rendimento: 2,021 g (4,914 mmol) 88%
RMN 1H,500 MHz,CDCl3 δδδδ (ppm): 6,61 (d, 1H J=3,8 H 1), 5,56 (t 1H J=9,7 H3)
5,17 (t 1H J=9,9 H4), 4,84 (dd 1H J 1=6,0 J2=9,6 H2), 4,35 (dd 1H J 1=12,3
J2=4,1 H6) 4,31 (1H multipleto H 5) 4,13 (dd 1H J 1=10,9 J2=1,5 H6) 2,09-2,10-
2,06-2,04 (3H s CH3).
RMN 13C CDCl3 125 MHz, CDCl3 δδδδ (ppm): 169,5-169,8-196,9-170,1 (CO), 87,0
(C1) 72,5 (C2) 71,0 (C3) 67,2 (C4), 61,0 (C6) 20,5-20,6-20,7-20,7 (CH3).
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 60
5.2- Preparação do Tiofenol
Sob atmosfera de nitrogênio, uma solução de bissulfeto de fenila (0,831
g 3,80 mmol) em THF anidro (2,5 mL) foi adicionada gota a gota, através de um
funil de adição, a um balão de duas bocas de 50 mL, contendo LiAlH4 (0,12 g
3,15 mmol) em THF (5 mL), mantido sob agitação por uma hora. O excesso de
LiAlH4 foi destruído pela adição cuidadosa de H2O (3 mL) e em seguida o meio
foi acidificado pela adição de uma alíquota de 4 mL de solução 6M de HCl. A
mistura foi transferida para um funil de separação, adicionou-se éter etílico e as
fases foram separadas. A fase aquosa foi extraída com éter etílico (3x 15 mL).
As fases orgânicas foram cominadas, lavadas com água, solução saturada de
NaCl e secadas com MgSO4 anidro. O solvente foi eliminado em um
rotaevaporador fornecendo 0,821 g de tiofenol como um líquido incolor.
Rendimento: 0,821g ( 7,45 mmol) 98%
IV=2600 cm -1 SH
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 61
5.3- Preparação do composto 2 (fenil -2,3,4,6- O- acetil-1-tio- β-D-
glicopiranosídeo).
A um balão de fundo redondo de 50 mL, contendo o composto 1 (0,3132
g, 0,761 mmol) foi adicionado uma solução uma solução de Bu4NHSO4 (0,025
g 0,710 mmol) em AcOEt (5 mL) e solução aquosa 1M de Na2CO3 (5 mL). A
mistura foi mantida sob agitação vigorosa por 30 minutos. Em seguida a
mistura foi transferida para um funil de separação, diluída adicionando-se 5 mL
de AcOEt e descartada a fase aquosa. A fase orgânica foi lavada com solução
1M de NaOH (5 mL), água e solução saturada de NaCl. A fase orgânica foi
transferida para erlenmeyer e adicionado MgSO4 anidro. Após a filtragem da
solução, o solvente foi removido por rotaevaporação e o resíduo foi
recristalizado com EtOH absoluto. Composto 2 foi obtido na forma de cristais
brancos.
Rendimento: 0,276 g (0,626 mmol) 82%
Ponto de Fusão: 131-132 ºC
RMN 1H,500 MHz, DMSO-D6 δδδδ (ppm):5,30 (1H d J=10,0 H 1), 4,80 (1H t J=9,4
H2), 5,37 (1H J=9,4 H3), 4,90 (1H t J=9,1 H4), 4,18 (3H multipleto H 5 H6 H6 ),
2,3-2,3-2,0-1,9 (3H s CH3) 7,37 (2H t J=6,9 H arom ), 7,44 (1H t J=7,2 Harom ), 7,32
(2H t J=7,2 Harom ).
RMN 13C 125 MHz, DMSO-D6 δδδδ (ppm): 84,1 (C1), 70,5 (C2), 74,8 (C3), 69,0
(C4) 75,1 (C5), 62,7 (C6), 127,5 129,0 130,0 132,0 (Carom ), 20,1-20,2-20,3-20,3
(CH3), 168,9-169,2-196,4-169,8 (CO).
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 62
5.4- Preparação do composto 3 (fenil1-tio- β-D-glicopiranosídeo).
A uma suspensão do composto 2 (0,087 g 0,2 mmol) em metanol anidro
(1,5 mL) a uma temperatura de 0 ºC, foi adicionado uma solução 1M de
NaOMe em metanol anidro (0,5 mL). Após agitação durante 15 min a solução
homogênea foi eluída em uma pequena coluna (aproximadamente 1,5 cm
diâmetro) contendo uma camada de aproximadamente 4 mL de altura de
resina de troca iônica DOWEX X8 50W (H+ form 200-400 mesh). Após toda a
eluíção o composto 3 foi concentrado por rotaevaporação e cristalizado com
ajuda de hexano.
Rendimento: 0,0519 g (0,190 mmol) 96%
RMN 1H 500 MHz DMSO-D6 δδδδ (ppm): 4,60 (1H d J=9,7 H 1), 3,07 (1H - H2),
3,23 (1H – H3), 3,23 (1H – H4), 3,07 (1H – H5), 3,44 (1H ddd/ J= 6,0-6,0-12,0),
3,70 (ddd/ J=1,7-5,2-10,0 ), 7,46 (2H d/ J=7,2 H arom ), 7,30 (2H t/J= 7,5 Harom ),
7,22 (1H t/ J= 7,2 Harom ), 5,28-5,09-4,98 (1H d/ J=6,0 , 5,0 , 5,2 OH), 4,56 (1H
t/ J=5,7 OH).
RMN 13C 125 MHz DMSO-D6 δδδδ (ppm): 84,1 (C1) 70,5 (C2) 74,8 (C3) 69 (C4)
75,1 (C5) 62,7 (C6) 127,5 129,0 130,0 132,0 135,5 (Carom. )
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 63
5.5- Preparação do composto 4 (fenil 2,3- O-acetil-4,6- O-benzilideno-1-tio-
β- D-glicopiranosideo).
A um balão de duas bocas equipado com condensador de refluxo
contendo o composto 3 (0,542 g 2,00 mmol) foi adicionado piridina anidra (8
mL) e α,α- dibromotolueno (0,27 mL 2,01 mmol). A solução foi mantida sobre
refluxo a uma temperatura de 140 ºC durante 2,5 horas. Após este período a
mistura foi resfriada à temperatura ambiente e foi adicionada uma alíquota de
Ac2O (1 mL). A mistura foi agitada por 24 horas e concentrada através de
rotaevaporação. O resíduo foi diluído em AcOEt (10 mL) e lavado com água em
funil de separação. A fase orgânica foi separada, secada com a ajuda de
MgSO4 e concentrada através de rotaevaporação. O resíduo foi purificado
através de cromatografia em coluna (SiO2) (6:4 hexano/ AcOEt) fornecendo o
produto 4 na forma de sólido branco.
Rendimento: 0,578 g (1,30 mmol) 65%
RMN 1H,500 MHz,CDCl3 δδδδ (ppm): 4,80 (1H d J=10,0 H 1), 5,01 (1H t J=10,0
H2) 5,34 (1H t J=9,4 H3), 3,66 (1H t J=9,4 H4), 3,57(1H ddd J= 4,7, 9,5 9,5 H 5),
3,79 (1H t J 1=9,8 H6), 4,40 (1H dd J 1= dd/ J=4,8 10,6 H 6), 5,65 (1H s Ph-CH),
7,45 (10 H multipleto H arom ), 2,02- 2,10 (3H s CH3).
RMN 13C 125 MHz CDCl3 δδδδ (ppm):86,6 (C1), 70,8 (C2), 72,9 (C3), 70,6(C4),
78,0 (C5), 68,4 (C6), 101,5 (Ph-CH), 126,1-128,2-128,4-129,0-129,2-133,0 (Ph-
C PH-S-), 20,8 (CH3), 199,5-170,0 (CO).
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 64
5.1 Preparação do composto 5 (fenil- 4,6- O- benzilideno-1-tio- ββββ-D-
glicopiranosídeo)
Uma solução de 0,2 mL 1M NaOMe em MeOH foi adicionada
gradualmente em uma suspensão do composto 4 ( 1,024g 2,30 mmol) em de
MeOH anidro (15 mL) a 0ºC. A mistura foi mantida sob agitação por 3h. Em
seguida a solução foi neutralizada em uma coluna contendo camada de resina
de troca iônica DOWEX X8 50W (H+ form 200-400 mesh). Após toda a eluição
do composto, o solvente foi rotaevaporado e o resíduo foi cristalizado com
hexano fornecendo composto 5 na forma de sólido branco.
Rendimento : 0,788 g (2,188 mmol) 95%.
RMN 1H,500 MHz, DMSO-D6 δδδδ (ppm): 4,90 (1H d J=9,8 H 1), 3,44 (1H t J=9,3
H2), 3,56(1H, H3), 3,56 (1H, H4), 3,23(1H ddd J= 4,7-9,5-9,5 H 5), 3,72 (1H t
J1=10,0 H6), 4,25 (1H dd J 1= dd/ J=4,9-10,0 H 6), 5,65 (1H s Ph-CH), 7,30-7,50
(10 H multipleto H arom ), 5,55 (1H d J=5,1 OH), 6,36(1H d J=6,3 OH).
RMN 13C 125 MHz, DMSO-D6 δδδδ (ppm):88,2 (C1), 81,2 (C2), 75,2 (C3),
70,6(C4), 74,0, (C5), 68,7 (C6), 101,5 (Ph-CH), 127,2-127,7-128,8-129,6-129,8-
131,3, 134,7, 138,6 (Ph-C PH-S-).
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 65
5.2 Preparação do composto 6 (metil- 3- hidroxi-dif enilmetileno-4,5-dioxi-
benzoato).
Em um balão de fundo redondo de 100 mL contendo galato de metila
(2,007 g 10, 890 mmol) foi adicionado α,α diclorodifeniltemtano ( 2,09ml 10,90
mmol). A mistura foi aquecida à temperatura de 180 ºC e mantida por 10
minutos. O sólido proveniente foi resfriado à temperatura ambiente e diluído
com uma alíquota de benzeno (20 mL). Após a diluição foi adicionado hexano
(20 mL) até que o produto comece a precipitar. A solução foi deixada em
descanso durante 12 horas. Posteriormente foi filtrado o sólido, realizado
lavagens com hexano (2x 10 mL) e rotaevaporado o resíduo de solvente. O
composto 6 foi obtido na forma de sólido branco.
Rendimento: 2,998g (8,612 mmol) 79%.
Ponto de Fusão: 167-168 ºC
RMN 1H,500 MHz, DMSO-D6 δδδδ (ppm): 3,18 (3H s CH 3), 7,06 (1H d J=1,5
H(ácido galico) ), 7,18(1H d J=1,5 H (ácido gálico) ), 7,53 (4H dd J=2,0 7,4 H (fenil orto) ),
7,45 (6H d H(fenil meta e para) ), 10,30 (1H s OH).
RMN 13C 125 MHz, DMSO-D6 δδδδ (ppm):52,0 (OCH 3), 165,4 (CO), 123,8-101,2-
147,7-137,5-140,8-113,6 (C(ácido galico) ), 139,2-125,7-128,7-129,4 (CFenil ),
117,2(Ph2COO).
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 66
5.3 Preparação composto 7 (ácido 3- hidroxi-difenil metileno-4,5-dioxi-
benzóico).
A um balão de duas bocas equipado com condensador de refluxo
contendo o composto 6 (1,120 g 3,215 mmol) foi adicionado 20 mL de MeOH.
Em seguida foi adicionado ao balão 7 mL de uma solução aquosa de LiOH
(0,09 g/mL). A mistura foi aquecida à temperatura de 100 ºC e agitada. Depois
de 1 hora de aquecimento a mistura foi resfriada à temperatura ambiente e
diluída com AcOEt (20 mL). A mistura foi transferida a um funil de separação
onde foi lavada com solução 1M de H3PO4 (10 mL), água (10 mL) e solução
saturada de NaCl (10 mL). A fase orgânica foi então separada, secada com
ajuda de MgSO4 anidro e concentrada através de rotaevaporação. O produto
foi purificado através de coluna de sílica (SiO2) (6:4 hexano/AcOEt). O
composto 7 foi obtido na forma de pó branco.
Rendimento: 0,892 g (2,670 mmol) 83%.
Ponto de Fusão: 170-171 ºC
RMN 1H, 300 MHz, DMSO-D6 δδδδ (ppm): 7,01 (1H s H (ácido galico) ), 7,14(1H s
H(ácido gálico) ), 7,55-7,40 (10H H(fenil) ), 10,20 (1H s OH).
RMN 13C 75 MHz, DMSO-D6 δδδδ (ppm):167,0 (CO), 125,5-101,8-148,1-137,6-
141,1-114,2 (C(ácido galico) ), 139,9-126,3-129,0-129,9 (CFenil ), 117,5 (Ph2COO).
IVmax= 3600-2580 1700-1683 cm -1
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 67
5.4 Preparação composto 9 (ácido 3 t-butildimetilsi loxi-4,5
difenilmetilenodioxi-benzoico).
A um balão de 50 mL sob atmosfera de N2 contendo composto 7 (1,500
g 4,486 mmol), foi adicionado DMF (previamente destilado) (12 mL). A solução
foi resfriada a 0 ºC em seguida foi adicionado cloreto de tertibutildimetilsilil
(1,356 g 9 mmol) e trietilamina (0,2 mL). A solução ficou sob agitação durante
14 horas. Após este período foi adicionado à mistura uma alíquota de solução
1M de H3PO4 (8 mL) e em seguida transferiu-se a mistura para um funil de
separação. Foi adicionado à mistura éter etílico (30 mL) e separadas as fases.
A fase aquosa foi extraída com éter etílico (2x 10 mL). As fases orgânicas
foram reunidas e lavadas com H2O e solução saturada de NaCl. A solução foi
secada empregando MgSO4 anidro e em seguida rotaevaporado o solvente.
O resíduo impuro proveniente da reação anterior foi adicionado a uma
solução de THF, AcOH, H2O (na proporção de 1:3:1) (20 mL) sob agitação
durante 4 horas. Após o total consumo do material de partida, verificado por
TLC (1:1 AcOEt/ hexano), foi adicionado solução saturada de NaHCO3 (15 mL).
A mistura foi transferida para um funil de separação onde foi adicionado 10 mL
de H2O, em seguida foi adicionado AcOEt (30 mL) e separada a fase orgânica.
A fase aquosa foi extraída com 2 porções de acetato de etila (10 mL). As fases
orgânicas foram combinadas, lavadas com solução saturada de NaCl 2x e
rotaevaporado o solvente. A purificação foi realizada através de coluna
cromatográfica (SiO2) (1:1 AcOEt/hexano) obtendo o composto 9 (1,42 g na
forma de sólido branco.
Rendimento: 1,42 g (3,165 mmol) 71% (sobre duas etapas).
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
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Ponto deFusão: 210-211 ºC
RMN 1H, 300 MHz, CDCl3 δδδδ (ppm): 7,01 (1H s H (ácido galico) ), 7,14(1H s H(ácido
gálico) ), 7,55-7,40 (10H H(fenil) ), 10,20 (1H s OH).
RMN 13C 75 MHz, CDCl3 δδδδ (ppm): 118,3-104,4-139,8-123,1-142,1 119,3(C (ácido
galico) ), 138,6-126,2-128,3-129,3 (CFenil ), 148,6 (Ph2COO) -4,5 (SiCH2) 18,3
(C-(CH3)3) 25,5 (CH3)
5.5 Preparação orto-nitrobenzil álcool.
Em uma balão de fundo redondo de 50 mL contendo orto-
nitrobenzaldeido (0,106 g, 0,7 mmol) foi adicionado THF (3 mL) e H2O (0,05
mL). Em seguida foi adicionado NaBH4 (0,026 g, 0,7 mmol) e a mistura foi
agitada durante 5 minutos. Após este período foi adicionado mais uma alíquota
de H2O (2 mL) e a mistura foi agitada por mais 5 minutos. A mistura foi diluída
com CH2Cl2 (20 mL) e transferida para um funil de separação. A fase orgânica
foi separada e lavada com H2O (2x 10 mL) e secada utilizando MgSO4 anidro.
O solvente foi rotaevaporado originando orto-nitrobenzil álcool na forma de
cristais na cor amarelo pálido.
Rendimento: 0,102 (0,666 mmol) g 95%.
RMN 1H, 300 MHz, CDCl3 δδδδ (ppm): 8,10 (1H d J=8,1 H (orto NO2) ), 7,73(1H t
J=7,3 H(meta NO2)), 7,67 (1 t J=7,3 H (para NO2)), 7,47 (1H t J=7,8 H (orto CH2OH) ), 5,00
(2H s CH2).
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 69
RMN 13C 75 MHz, CDCl3 δδδδ (ppm):136,8 (CNO 2), 125,0-129,9-134,4-148,1 (C-
H(aromático) ), 128,5 (C(aromático) -CH2OH), 61,9 (CH2OH).
5.6 Preparação composto 10 ( 2,3,4,6,-O-acetil-1- O-nitrobenzil- α-D-
glicopiranosideo) .
Em um balão de fundo redondo de 50 mL contendo 2,3,4,6 O-Acetil 1-α-
bromo-D glucopiranose (0,2 g 0,48 mmol) e orto-nitro benzilalcool (0,073 g 0,48
mmol) em 5 mL de CH2Cl2 foi adicionado 1 eq. mol de BF3.(Et)2O. Deixa-se a
solução em banho de ultra-som por aproximadamente 5 min. Adiciona-se 10
mL de CH2Cl2 e a solução é lavada com NaHCO3 saturado (3x). Extraída a fase
orgânica, seca-se com MgSO4 e em seguida rotaevaporado o solvente. O
produto bruto foi purificado através de cromatografia preparativa (6:4 hexano/
AcOEt).
Rendimento: 0,1825 g 81%.
RMN 1H,300 MHz, CDCl3 δδδδ (ppm):3,60 (1H d J=3,9 H 1), 4,83 (1H dd J=4,1-10,1
H2), 5,54 (1H t J= 9,9 Hz H3), 5,15 (1H t J=9,9 H4), 4,30 (2H multipleto H 5, H6 ),
4,12 (1H d J=11,4 H6), 8,08 (1H d J=8,0 H (orto NO2) ), 7,66 (1H t J=7,8 H (meta
NO2)), 7,45 (1 t J=7,8 H (para NO2)), 7,45 (1H t J=7,8 H (orto CH2OH) ), 4,97 (2H s CH2).
.
RMN 13C 125 MHz, CDCl3 δδδδ (ppm): 86,9 (C1), 70,9 (C2), 70,6 (C3), 67,6 (C4)
73,5 (C5), 61,4 (C6), 62,7 (CH2), 125,3-128,7-130,1-134,4-137,7-148,0 (Carom ),
21,0-20,9-20,9-20,8 (CH3), 170,9-170,2-170,1-169,9 (CO).
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 70
5.7 Preparação composto 11 (2-trimetisilil acetato de etila).
Em um balão de três bocas 100 mL equipado com funil de adição e
condensador de refluxo com tubo secante contento CaCl2 foi adicionado
benzeno (recém destilado) (20 mL) e zinco finamente particulado (3,17g 50
mmol). Ao funil de adição foi adicionado 10 mL de benzeno, 10 mL de éter
anidro, cloreto de trimetilsilil (4, 35 g 40 mmol) e bromoacetato de etila (8,35 g
50 mmol). O sistema foi aquecido até um ponto de refluxo brando e o conteúdo
do funil de adição foi gotejado no interior do balão. O sistema foi agitado sob
refluxo por um período de 3 horas. Durante o gotejamento da solução do funil
de adição foram colocados alguns cristais de iodo. Decorridas as 3 horas de
aquecimento a solução foi resfriada em banho de gelo e adicionado 15 mL de
solução 1M de HCl. Após 10 minutos de agitação a mistura foi transferida para
um funil de adição e separada a fase orgânica. A fase aquosa foi extraída com
éter etílico (2x 15 ml). As fases orgânicas foram reunidas e lavadas com HCl
1M (10 mL), NaHCO3 sat.(10 mL), água (10 mL) e secado com MgSO4 anidro.
O produto, composto 11 (líquido incolor), foi purificado em coluna
cromatográfica (SiO2) (95% hexano: 5% acetato de etila).
Rendimento : 3,95 g (24,642 mmol) 68%
RMN 1H, 300 MHz, CDCl3 δδδδ (ppm): 0,00 (9H s/ H (Si-(CH3)3)), 1,90 (2H s/ H(Si-CH2-
CO)), 4,07 (2H q/ J=7,2 H (O-CH2)), 1,22 (3H t/ J=7,2 H (CH2-CH3)).
RMN 13C 75 MHz, CDCl3 δδδδ (ppm): -2,0(C (SiCH3)), 13,8 (C(CH3)) 26,3 (C(-Si-CH2CO)),
59,2 (C(O-CH2)) 173,0 (CO).
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 71
5.8 Preparação composto 12 (2- trimetilsilil etanol ) .
Em um balão de duas bocas de 50 ml equipado com funil de adição,
sob atmosfera de N2, foi adicionado éter etílico anidro (15 mL) e LiAlH4 (0,12 g
3,157 mmol). Ao funil de adição foi adicionado éter anidro (10 mL) e o
composto 11 (0,545 g 3,401 mmol). O sistema foi resfriado à temperatura de 0
ºC e a solução contida no funil de adição foi adicionada no interior do balão
gota a gota. A mistura foi agitada durante 1,5 hora à temperatura ambiente.
Após o período de agitação o sistema foi colocado em banho de gelo e foi
adicionado H2O (1,5 mL) cuidadosamente através do funil de adição. Em
seguida foi adicionado à mistura 1,5 mL de solução 1M de hidróxido de sódio e
1,5 mL de H2O. A mistura foi diluída com éter etílico (20 mL) e transferida para
erlenmeyer e secada com MgSO4 anidro. A solução foi concentrada através de
rotaevaporação resultando no composto 12 (líquido incolor)
Rendimento : 0,37 g (3,128 mmol) 92%.
RMN 1H, 300 MHz, CDCl3 δδδδ (ppm): 0 (9H s H (SiCH3)), 0,93 (2H t/ J=8,4
CH2Si(CH3)3 ), 3,70 (2H t/ J=8,5 OH-CH2).
RMN 13C 75 MHz, CDCl3 δδδδ (ppm): -2,1(C (SiCH3)), 21,4 (C(Si-CH2)), 59,4 (C(CH2-OH)).
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 72
5.9 Preparação composto 13 (2,3,4,6- O-acetil-1- O-(2-trimetilsilil etil) - β-D-
glicopiranosídeo).
Em um balão de 50 mL, sob atmosfera de nitrogênio, foi adicionado o
composto 1 (2,3,4,5-O- acetil- 1-Bromo α-D-glicopiranosídeo) (1,023 g 2,480
mmol), CH2Cl2 anidro (20 mL), composto 12 (2- trimetilsilil etanol) (0,29g 2,452
mmol), HgO ( 0,53 g 2,480 mol) e HgBr2 (0,05 g 0,138 mmol). O balão foi
protegido da luz e a mistura agitada durante 24 horas. Após o período de
agitação a mistura foi filtrada em funil de placa sinterizada contendo Celite®. A
mistura foi concentrada através de rotaevaporação e a purificação foi realizada
por cromatografia em coluna (SiO2) (1:1 AcOEt/ hexano). O composto 13 foi
obtido na forma óleo incolor.
Rendimento: 0,447 g (1,033 mmol) 41%.
RMN 1H,300 MHz, CDCl3 δδδδ (ppm): 4,50 (1H d J=8,0 H 1), 4,98 (1H t J=9,3 H2),
5,20 (1H t/ J=9,3 H3), 5,09 (1H t/ J=9,5 H4) 3,69(1H ddd/ J=2,3, 4,6, 9,2 H5),
4,28 (1H dd/ J=4,7-12,3 H6), 4,13 (1H dd/ J=4,9-10,0 H 6), 3,98 (1H ddd/ J=5,9
-9,8-9,8 OCH2), 3,56(1H ddd/ J=7,0-9,8-9,8 OCH2), 0,93 (2H multipleto CH 2-
Si(CH3)3), 2,10-2,48-2,35-2,01 (12H s CH3CO), 0 (9H s Si-(CH3)3).
RMN 13C 75 MHz, CDCl3 δδδδ (ppm):100,2 (C1), 71,7 (C2), 73,0 (C3), 68,5 (C4),
71,4 (C5), 62,0 (C6), 67,7 (C(OCH2)), 17,9 (C(CH2Si(CH3)3)), -1,4 (C(Si(CH3)3), 20,7-
20,6 (C(CH3CO)), 170,7-170,3-169,4-169,3 (CO).
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 73
6.0 Preparação Composto 14 (2 -trimetilsilil etil - β-D-glicopiranosídeo).
Em um balão de 50 mL foi adicionado o composto 14 (0,150 g 0,346
mmmol) e MeOH anidro (5 mL). Após solubilização completa do composto 14
foi adicionado ao sistema 0,2 mL de solução 1M de NaOMe em MeOH. A
mistura foi agitada durante 2 horas. Em seguida a mistura foi eluída em coluna
de aproximadamente 1,5 cm de diâmetro empacotada com 4 mL de resina de
troca iônica DOWEX X8 50W (H+ form 200-400 mesh). Após a eluíção da
mistura o solvente foi rotaevaporado e o composto 15 obtido na forma de óleo
amarelado.
Rendimento: 0,081 g (0,307 mmol) 89 %
RMN 1H,300 MHz, DMSO-D6 δδδδ (ppm): 4,95 (1H d J=8,0 H 1), 2,90 (1H t J=8,4
H2), 3,15(1H, t/ J=8,6 H3), 3,03 (1H, t/ J=8,6 Hz H4), 3,05(1H H5), 3,63 (1H dd/
J=1,0-11,0 H6), 3,41 (1H dd/ J=5,7-11,9 H6), 3,45 (1H ddd/ J=5,7 -10,1 OCH 2),
3,83(1H ddd/ J=5,7-10,1 OCH 2), 0,93 (1H ddd/ J=5,7-11,4 CH 2-Si(CH3)3), 0,85
(1H ddd/ J=5,7-11,4 CH 2-Si(CH3)3) -0,1 (9H s Si-(CH3)3).
RMN 13C 75 MHz, DMSO-D6 δδδδ (ppm):103,2 (C1), 74,6 (C2), 77,6 (C3), 70,9
(C4), 77,9 (C5), 61,9 (C6), 66,5 (C(OCH2)), 18,7 (C(CH2Si(CH3)3)), -0,5 (C(Si(CH3)3).
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 74
6. Seção de Espectros
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 75
6. Seção de Espectros
Os espectros de ressonância magnética nuclear de próton RMN 1H foram
obtidos a partir de espectrômetros Bruker DRX-500 MHz e 300 MHz. Os
deslocamentos químicos (δ) estão relatados em parte por milhão (ppm) em
relação ao tetrametilsilano (TMS), utilizado como padrão interno.
Os sinais foram atribuidos nomeando-se de acordo com a seguinte
legenda: s = singleto, d = dubleto, t = tripleto, q = quarteto, dd = duplo dubleto,
ddd = duplo, duplo dubleto. As constantes de acoplamento (J) estão medidas
em Hertz (Hz) e o número de hidrogênios foi deduzido da integral relativa.
Os espectros de ressonância magnética nuclear de carbono-13 (RMN 13C,
75 e 125 MHz) foram obtidos a partir de espectrômetros Bruker DRX-300 e 500
e foram traçados, de acordo com a conveniência, utilizando-se as seguintes
técnicas: 13C {1H} – Carbon Totalmente Desacoplado de Hidrogênio.
DEPT 135- Distortionless Enhancement by Polarization Transfer.
Também constarão nesta seção espectros contendo dados obtidos pelas
técnicas de correlação COSY, HMQC, HBMC.
Os espectros de absorção no infravermelho foram adquiridos em um
espectrofotômetro Perkin-Elmer modelo 1600 FT, em celas de KBr para
líquidos e pastilhas de KBr para sólidos.
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 76
Acquisition Time (sec) 4.1288 DateFrequency (MHz) 500.13
Nucleus 1H Number of Transients 16 Original Points Count 32768 Points Count 32768Pulse Sequence zg30 Solvent CDCl3 Sweep Width (Hz) 7936.51 Temperature (degree C) 27.000
7.5 7.0 6.5 6.0 5.5 5.0 4.5 4.0 3.5 3.0 2.5 2.0 1.5 1.0 0.5 0Chemical Shift (ppm)
6.342.101.00 1.000.97 0.95 0.92
3309
.44
3305
.56
2791
.35
2781
.66
2771
.97
2592
.74
2582
.80
2573
.12
2428
.27
2424
.40
2418
.34
2414
.23
2174
.92
2170
.81
2162
.57
2158
.45
2152
.15
2145
.86
2072
.47
2061
.57
1053
.25
1028
.30
1019
.82
4.9 4.8 4.7 4.6 4.5 4.4 4.3 4.2 4.1 4.0Chemical Shift (ppm)
2.100.95 0.92
2060
.11
2061
.57
2072
.47
2145
.86
2152
.15
2158
.45
2162
.57
2170
.81
2174
.92
2414
.23
2418
.34
2424
.40
2428
.27
5.65 5.60 5.55 5.50 5.45 5.40 5.35 5.30 5.25 5.20 5.15 5.10Chemical Shift (ppm)
1.000.9725
73.1
225
82.8
025
92.7
4
2771
.97
2781
.66
2791
.35
6.8 6.7 6.6 6.5 6.4 6.3Chemical Shift (ppm)
1.00
3305
.56
3309
.44
Figura 40:Espectro de hidrogênio composto 1
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 77
Acquisition Time (sec) 1.0420 . DateFrequency (MHz) 125.76
Nucleus 13C Number of Transients 2048 Original Points Count 32768 Points Count 32768Pulse Sequence zgpg30 Solvent CHLOROFORM-D Sweep Width (Hz) 31446.54Temperature (degree C) 27.000
168 160 152 144 136 128 120 112 104 96 88 80 72 64 56 48 40 32 24 16 8 0Chemical Shift (ppm)
20.5
420
.65
60.9
9
67.2
370
.21
70.6
472
.18
86.5
8
169.
4616
9.84
170.
49
171 170 169 168 167Chemical Shift (ppm)
170.
49
169.
8416
9.79
169.
46
21.0 20.5 20.0 19.5 19.0Chemical Shift (ppm)
20.6
520
.64
20.6
120
.54
Acquisition Time (sec) 1.0912 .Frequency (MHz) 125.76
Nucleus 13C Number of Transients 1024 Original Points Count 32768 Points Count 32768Pulse Sequence dept135 Solvent CHLOROFORM-D Sweep Width (Hz) 30030.03Temperature (degree C) 27.000
90 85 80 75 70 65 60 55 50 45 40 35 30 25 20 15 10 5 0Chemical Shift (ppm)
20.9
421
.04
21.0
6
61.3
5
67.5
870
.57
71.0
072
.53
86.9
5
Figura 41:Espectro carbono 13 (Broad Band e DEPT) composto 1
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 78
Número δδδδ (ppm) 1H Multiplicidade/J δδδδ (ppm) 13C Integral Relativa
1 6,61 d/ J= 3,8 Hz 87,0 1,0 2 4,84 dd/ J 1= 6,0 Hz
J2= 9,6 Hz 72,5
0,95
3 5,56 t/ J= 9,7 Hz 71,0
0,97
4 5,17 t/ J=9,9 Hz 67,2 1,00 5 4,31 multipleto 72,5 2,00 6 4,35 dd/ J 1=12,3
J2= 4,1 61,0
6 4,13 dd/ J 1=10,9
J2= 1,5 61,0 0,92
CH3x4 2,09-2,10-2,06-2,04
s 20,5-20,6-20,6-20,7
12
COx4 169,5-169,8-196,9-170,1
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 79
Acquisition Time (sec) 4.0108Frequency (MHz) 500.13
Nucleus 1H Number of Transients 16 Original Points Count 32768 Points Count 32768Pulse Sequence zg30 Solvent CHLOROFORM-D Sweep Width (Hz) 8169.93Temperature (degree C) 27.000
7.5 7.0 6.5 6.0 5.5 5.0 4.5 4.0 3.5 3.0 2.5 2.0 1.5 1.0 0.5 0Chemical Shift (ppm)
6.532.252.06 1.09 1.08
967
.43
995
.60
101
0.07
203
0.59
204
0.81
205
9.02
206
7.49
207
8.21
208
3.70
240
4.84
241
4.57
242
4.04
243
9.75
244
9.22
245
8.70
264
7.94
265
8.17
267
4.37
268
3.60
269
3.07
366
1.98
366
9.22
367
7.44
368
5.17
369
2.15
371
8.09
372
5.32
7.4 7.3 7.2Chemical Shift (ppm)
2.062.00 0.88
372
5.3
23
718.
09
369
2.1
53
685.
17
367
7.4
43
669.
22
366
1.9
8
5.4 5.3 5.2Chemical Shift (ppm)
1.09 1.0026
93.
07
268
3.6
026
74.
37
265
8.1
726
47.
94
4.75 4.50 4.25 4.00Chemical Shift (ppm)
2.251.08
245
8.7
02
449.
22
243
9.7
52
424.
04
241
4.5
72
404.
84
208
3.7
02
078.
21
206
7.4
92
059.
02
204
0.8
12
030.
59
Figura 42:Espectro de hidrogênio composto 2
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 80
Acquisition Time (sec) 1.0420 Comment Imported from UXNMR. DateFile Name r Frequency (MHz) 125.76Nucleus 13C Number of Transients 12288 Original Points Count 32768 Points Count 32768Pulse Sequence zgpg30 Solvent DMSO-D6 Sweep Width (Hz) 31446.54 Temperature (degree C) 27.000
168 160 152 144 136 128 120 112 104 96 88 80 72 64 56 48 40 32 24 16 8 0Chemical Shift (ppm)
20.1
420
.28
20.3
7
61.8
1
67.9
769
.51
72.8
974
.18
83.1
7
127.
5412
8.96
130.
8613
2.11
168.
8916
9.17
169.
3616
9.81
170 169 168Chemical Shift (ppm)
169.
81
169.
3616
9.17
168.
89
21.0 20.5 20.0 19.5 19.0Chemical Shift (ppm)
20.3
720
.28
20.2
520
.14
Acquisition Time (sec) 1.0912 Comment Imported from UXNMR. DateFile Name Frequency (MHz) 125.76Nucleus 13C Number of Transients 6144 Original Points Count 32768 Points Count 32768Pulse Sequence dept135 Solvent DMSO-D6 Sweep Width (Hz) 30030.03 Temperature (degree C) 27.000
135 130 125 120 115 110 105 100 95 90 85 80 75 70 65 60 55 50 45 40 35 30 25 20 15 10 5 0Chemical Shift (ppm)
21.1
321
.26
21.3
5
62.7
7
68.9
070
.46
73.8
275
.12
84.1
2
128.
5012
9.94
131.
80
22 21 20Chemical Shift (ppm)
21.3
521
.26
21.2
421
.13
Figura 43: Espectro carbono 13 (Broad Band e DEPT) composto 2
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 81
Numero δδδδ (ppm) 1H Multiplicidade/J δδδδ (ppm) 13C Integral Relativa
1 5,30 d/ J= 10,0 Hz 84,1 1,00 2 4,80 t/ J= 9,4 Hz
70,5
1,08
3 5,37 t/ J= 9,4 Hz 74,8
1,09
4 4,90 t/ J=9,1Hz 69,0 1,08 5,6,6 4,18 multipleto C6(62,7)
C5(75,1) 3
1` 7,44 d/ J=7,2 Hz 127,5 129,0 130,0 132,0
2 2` 7,37 t/J= 6,9 Hz 2,06 3` 7,32 t/ J= 7,2Hz 0,88
CH3x4 2,3-2,3-2,0-1,9 s 20,1-20,2-20,3-20,4
12
COx4 168,9-169,2-196,4-169,8
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 82
Acquisition Time (sec) 8.0216 Comment Imported from UXNMR.Frequency (MHz) 500.13
Nucleus 1H Number of Transients 16 Original Points Count 65536 Points Count 32768Pulse Sequence zg30 Solvent DMSO-D6 Sweep Width (Hz) 8169.93 Temperature (degree C) 27.000
7.0 6.5 6.0 5.5 5.0 4.5 4.0 3.5 3.0 2.5 2.0 1.5 1.0 0.5 0Chemical Shift (ppm)
2.102.061.98 1.001.00 0.970.950.92
1527
.46
1530
.70
1536
.93
1541
.67
1599
.27
1602
.51
1607
.74
1611
.24
1616
.47
1718
.45
1724
.43
1835
.14
1838
.88
1850
.60
1852
.34
2272
.72
2278
.45
2284
.19
2298
.65
2308
.37
2487
.40
2492
.63
2544
.99
2549
.98
2637
.25
2643
.23
3610
.65
3617
.88
3645
.80
3653
.53
3661
.01
3725
.84
3733
.07
7.4 7.3 7.2 7.1Chemical Shift (ppm)
2.061.98 1.06
3733
.07
3725
.84
3661
.01
3653
.53
3645
.80
3617
.88
3610
.65
3603
.17
5.25 5.00 4.75 4.50Chemical Shift (ppm)
1.000.950.92 0.89
2643
.23
2637
.25
2549
.98
2544
.99
2492
.63
2487
.40
2308
.37
2298
.65
2284
.19
2278
.45
2272
.72
4.00 3.75 3.50 3.25 3.00Chemical Shift (ppm)
2.102.031.000.97
1852
.34
1850
.60
1847
.11
1840
.62
1838
.88
1835
.14
1730
.42
1724
.43
1718
.45
1616
.47
1611
.24
1607
.74
1602
.51
1599
.27
1547
.16
1541
.67
1536
.93
1530
.70
1527
.46
1521
.23
Figura 44: Espectro de hidrogênio composto 3
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 83
Acquisition Time (sec) 1.8219 Date
Frequency (MHz) 125,0Nucleus 13C Number of Transients 2780 Original Points Count 32768 Points Count 32768Pulse Sequence zgpg30 Solvent DMSO-D6 Sweep Width (Hz) 17985.61 Temperature (degree C) 18.800
136 128 120 112 104 96 88 80 72 64 56 48 40 32 24 16 8 0Chemical Shift (ppm)
61.4
3
70.1
972
.82
77.1
978
.62
81.4
1
87.4
9
126.
7412
9.29
129.
94
135.
51
Acquisition Time (sec) 1.8219 DateFile Name Frequency (MHz) 125,0
0Nucleus 13C Number of Transients 640 Original Points Count 32768 Points Count 32768Pulse Sequence dept135 Solvent DMSO-D6 Sweep Width (Hz) 17985.61 Temperature (degree C) 20.500
136 128 120 112 104 96 88 80 72 64 56 48 40 32 24 16 8 0Chemical Shift (ppm)
60.8
2
69.5
772
.21
78.0
180
.79
86.8
7
126.
1212
8.68
129.
33
Figura 45: Espectro carbono 13 (Broad Band e DEPT) composto 3
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 84
Numero δδδδ (ppm) 1H Multiplicidade/J δδδδ (ppm) 13C Integral Relativa
1 4,60 d/ J= 9,7 Hz 84,1 1,00 2 3,07
70,5
1,00
3 3,23 74,8
1,00
4 3,23 69 1,00 5 3,07 C6(62,7)
C5(75,1) 1,00
6 3,44 ddd/ J= 6,0 Hz-6,0Hz-12,0 Hz
1,00
6 3,70 ddd/ J=1,7 -5,2-10,0 Hz
1,00
1` 7,46 d/ J=7,2 Hz 127,5 129,0 130,0 132,0 135,5
2,00 2` 7,30 t/J= 7,5 Hz 2,00 3` 7,22 t/ J= 7,2 Hz 1,00
OH 5,28-5,09-4,98 d/ J=6,0 - 5,0- 5,2 Hz
1,00
OH 4,56 t/ J=5,7 Hz 1,00
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 85
Acquisition Time (sec) 6.4094Frequency (MHz) 300.13
Nucleus 1H Number of Transients 16 Original Points Count 32768 Points Count 32768Pulse Sequence zg30 Solvent CHLOROFORM-D Sweep Width (Hz) 5112.47Temperature (degree C) 24.200
7.5 7.0 6.5 6.0 5.5 5.0 4.5 4.0 3.5 3.0 2.5 2.0 1.5 1.0 0.5 0 -0.5Chemical Shift (ppm)
6.19 2.971.121.10 1.071.05 1.040.97
612.
4062
9.72
1070
.49
1075
.17
1080
.01
1090
.62
1100
.13
1109
.49
1127
.91
1138
.20
1148
.03
1309
.83
1314
.36
1320
.13
1324
.97
1437
.30
1447
.29
1491
.76
1500
.65
1510
.64
1592
.55
1601
.91
1610
.80
1647
.94
2177
.95
2197
.77
2200
.89
2204
.17
2206
.04
2207
.29
2221
.49
2223
.67
2239
.43
5.5 5.4 5.3 5.2 5.1 5.0 4.9 4.8Chemical Shift (ppm)
1.101.051.00 0.97
4.25 4.00 3.75 3.50Chemical Shift (ppm)
1.121.091.071.04
1324
.97
1320
.13
1314
.36
1309
.83
1148
.03
1138
.20
1127
.91
1109
.49
1100
.13
1090
.62
1084
.69
1080
.01
1075
.17
1070
.49
1065
.65
1060
.81
Figura 46: Espectro de hidrogênio composto 4
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 86
Acquisition Time (sec) 1.8219File Name Frequency (MHz) 75.47Nucleus 13C Number of Transients 24576 Original Points Count 32768 Points Count 32768Pulse Sequence zgpg30 Solvent CHLOROFORM-D Sweep Width (Hz) 17985.61Temperature (degree C) 24.400
184 176 168 160 152 144 136 128 120 112 104 96 88 80 72 64 56 48 40 32 24 16 8 0Chemical Shift (ppm)
20.7
9
68.4
670
.81
72.9
2
78.1
1
86.6
1
101.
53
126.
1412
8.25
128.
4312
9.06
131.
7313
3.00
136.
73
169.
5317
0.10
Acquisition Time (sec) 1.8219File Name Frequency (MHz) 75.47Nucleus 13C Number of Transients 16384 Original Points Count 32768 Points Count 32768Pulse Sequence dept135 Solvent CHLOROFORM-D Sweep Width (Hz) 17985.61Temperature (degree C) 20.900
135 130 125 120 115 110 105 100 95 90 85 80 75 70 65 60 55 50 45 40 35 30 25 20 15 10 5 0Chemical Shift (ppm)
20.1
7
67.8
470
.05
70.1
772
.29
77.4
9
86.0
0
100.
91
125.
5312
7.64
128.
4513
2.38
Figura 47: Espectro carbono 13 (Broad Band e DEPT) composto 4
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 87
Numero δδδδ (ppm) 1H Multiplicidade/J δδδδ (ppm) 13C Integral Relativa
1 4,80 d/ J= 10,0 Hz 86,6 1,00 2 5,01 t/ J= 10,0 Hz
70,8
1,1
3 5,34 t/ J= 9,4 Hz 72,9
1,1
4 3,66 t/ J=9,4 Hz 70,6 1,1 5 3,57 ddd/ J=4,7 -9,5-
9,5 Hz 78,0 1,1
6 3,79 t/ J=9,8 Hz 68,4 1,1 6 4,40 dd/ J=4,8 -10,6
Hz 1,0
7 5,65 s 101,5 1,0 1´ 7,45
126,1-128,2-
128,4-129,0-129,2-133,00
10 2´ 3´ 4´ 131,7 5´ 136,7
CH3x2 2,02-2,10 s 20,8 5,8 COx2 199,5-170,0
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 88
Acquisition Time (sec) 4.0894 Comment Imported from UXNMR.Frequency (MHz) 500.13
Nucleus 1H Number of Transients 16 Original Points Count 32768 Points Count 32768Pulse Sequence zg30 Solvent DMSO-D6 Sweep Width (Hz) 8012.82 Temperature (degree C) 27.000
7.5 7.0 6.5 6.0 5.5 5.0 4.5 4.0 3.5 3.0 2.5 2.0 1.5 1.0 0.5 0Chemical Shift (ppm)
4.83 2.12 1.030.980.940.920.91
1603
.98
1612
.30
1710
.85
1720
.38
1729
.68
1767
.82
1772
.96
1785
.43
1790
.57
1795
.46
1848
.52
1858
.55
1868
.57
2114
.09
2118
.98
2124
.12
2129
.01
2444
.22
2454
.00
2756
.01
2761
.14
2815
.19
2835
.24
2841
.60
3647
.11
3694
.30
3705
.06
3707
.02
3711
.91
3735
.88
3737
.59
3743
.70
3752
.26
7.6 7.5 7.4 7.3 7.2Chemical Shift (ppm)
4.833.90 0.95
3752
.26
3743
.70
3737
.59
3735
.88
3711
.91
3710
.20
3707
.02
3705
.06
3701
.64
3694
.30
3686
.48
3661
.78
3654
.44
3647
.11
5.65 5.60 5.55 5.50Chemical Shift (ppm)
0.920.91 0.87
2841
.60
2835
.24
2815
.19
2761
.14
2756
.01
5.0 4.5 4.0 3.5 3.0Chemical Shift (ppm)
2.12 1.030.98 0.970.94
2454
.00
2444
.22
2129
.01
2124
.12
2118
.98
2114
.09
1868
.57
1858
.55
1848
.52
1795
.46
1790
.57
1785
.43
1772
.96
1767
.82
1729
.68
1720
.38
1710
.85
1618
.41
1612
.30
1603
.98
Figura 48: Espectro de hidrogênio composto 5
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 89
Acquisition Time (sec) 1.0420 Comment Imported from UXNMR. DateFile Name Frequency (MHz) 125.76Nucleus 13C Number of Transients 20480 Original Points Count 32768 Points Count 32768Pulse Sequence zgpg30 Solvent CHLOROFORM-D Sweep Width (Hz) 31446.54Temperature (degree C) 27.000
152 144 136 128 120 112 104 96 88 80 72 64 56 48 40 32 24 16 8 0Chemical Shift (ppm)
68.7
170
.66
74.0
175
.19
81.2
5
88.2
5
101.
54
127.
1812
7.67
128.
8412
9.78
131.
3013
4.70
138.
66
Acquisition Time (sec) 1.0420 Comment Imported from UXNMR. DateFrequency (MHz) 125.76
Nucleus 13C Number of Transients 20480 Original Points Count 32768 Points Count 32768Pulse Sequence dept135 Solvent CHLOROFORM-D Sweep Width (Hz) 31446.54Temperature (degree C) 27.000
135 130 125 120 115 110 105 100 95 90 85 80 75 70 65 60 55 50 45 40 35 30 25 20 15 10 5 0Chemical Shift (ppm)
68.6
770
.60
73.9
275
.11
81.2
0
88.1
3
101.
51
127.
1912
7.64
128.
8712
9.82
131.
15
Figura 49: Espectro carbono 13 (Broad Band e DEPT) composto 5
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 90
7.5 7.0 6.5 6.0 5.5 5.0 4.5 4.0 3.5 3.0 2.5ppm
0
8
16
24
32
40
48
56
64
72
80
88
96
104
112
120
128
136
144
152
160
168pp
m
Figura 50: Espectro bidimensional HMQC
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 91
7.5 7.0 6.5 6.0 5.5 5.0 4.5 4.0 3.5 3.0 2.5ppm
-8
0
8
16
24
32
40
48
56
64
72
80
88
96
104
112
120
128
136
144
152
160
168
ppm
Figura 51: Espetro bidimensional HMBC
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 92
Numero δδδδ (ppm) 1H Multiplicidade/J δδδδ (ppm) 13C Integral Relativa
1 4,90 d/ J= 9,8 Hz 88,2 1,0 2 3,44 t/ J= 9,3Hz
81,2
1,3
3 3,56 --- 75,2 2,0 4 3,56 ---
70,6
5 3,23 ddd/ J=4,7 -9,5-9,5 Hz
74,0 1,0
6 4,25 dd/ J=4,9 -10,0 Hz
68,7 1,0
6 3,72 t/ J=10,0 Hz 1,0 7 5,65 s 101,5 1,0 1´ 7,50-7,30
127,2-127,7-
128,8-129,6-129,8-131,3
9,9 2´ 3´ 4´ 134,7 5´ 138,6
OH 5,55 d/ J=5,1 Hz 0,9 OH 5,68 d/ J=6,3 Hz 0,9
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 93
Acquisition Time (sec) 3.9059 Comment . DateFrequency (MHz) 500.13
Nucleus 1H Number of Transients 16 Original Points Count 32768 Points Count 32768Pulse Sequence zg30 Solvent DMSO-D6 Sweep Width (Hz) 8389.26 Temperature (degree C) 27.000
10.5 10.0 9.5 9.0 8.5 8.0 7.5 7.0 6.5 6.0 5.5 5.0 4.5 4.0 3.5 3.0 2.5 2.0 1.5 1.0 0.5 0Chemical Shift (ppm)
6.22 3.141.071.02
1888
.47
3531
.66
3589
.52
3591
.05
3723
.93
3730
.85
3764
.90
3771
.04
5152
.82
7.70 7.65 7.60 7.55 7.50 7.45 7.40 7.35 7.30Chemical Shift (ppm)
6.224.00
3773
.09
3771
.04
3764
.90
3763
.62
3730
.85
3723
.93
Figura 52: Espectro de hidrogênio composto 6
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 94
Acquisition Time (sec) 1.0420 Comment Imported from UXNMR. DateFrequency (MHz) 125.76
Nucleus 13C Number of Transients 6144 Original Points Count 32768 Points Count 32768Pulse Sequence zgpg30 Solvent DMSO-D6 Sweep Width (Hz) 31446.54 Temperature (degree C) 27.000
168 160 152 144 136 128 120 112 104 96 88 80 72 64 56 48 40 32 24 16 8 0Chemical Shift (ppm)
51.9
7
101.
20
113.
59
123.
7812
5.76
128.
5212
9.43
137.
4813
9.25
140.
76
147.
75
165.
45
Acquisition Time (sec) 1.0912 Comment Imported from UXNMR.Frequency (MHz) 125.76
Nucleus 13C Number of Transients 2048 Original Points Count 32768 Points Count 32768Pulse Sequence dept135 Solvent DMSO-D6 Sweep Width (Hz) 30030.03 Temperature (degree C) 27.000
135 130 125 120 115 110 105 100 95 90 85 80 75 70 65 60 55 50 45 40 35 30 25 20 15 10 5 0Chemical Shift (ppm)
51.
97
101
.19
113
.53
125
.75
128
.51
129
.43
Figura 53: Espectro carbono 13 (Broad Band e DEPT) composto 6
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 95
10 9 8 7 6 5 4 3 2 1 0ppm
-8
0
8
16
24
32
40
48
56
64
72
80
88
96
104
112
120
128
136
144
152
ppm
Figura 54: Espectro bidimencional HMQC
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 96
10 9 8 7 6 5 4 3 2 1 0ppm
-10
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
110
120
130
140
150
160
170
180
190
200pp
m
Figura 55: Espectro bidimensional HMBC
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 97
Numero δδδδ (ppm) 1H Multiplicidade/J δδδδ (ppm) 13C Integral Relativa
1 3,78 s 52,0 3,14 2 165,4 3 123,8 4 7,06 d/ J=1,5 Hz 101,2 1,0 5 147,7 6 137,5 7 140,8 8 7,18 d/ J=1,5 Hz 113,6 1,0 9 117,2 1´ 139,2 2´ 7,53 dd/ J=2,0 -7,4 Hz 125,7 4,0 3´ 7,45 128,7 6,0 4´ 7,45 129,4
OH 10,30 s
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 98
Acquisition Time (sec) 6.4094 Comment 1H - DMSO-d6Frequency (M Hz) 300.13
Nucleus 1H Number of Transients 16 Original Points Count 32768 Points Count 32768Pulse Sequence zg30 Solvent DMSO-D6 Sweep Width (Hz) 5112.47 Temperature (degree C) 21.400
10.0 9.5 9.0 8.5 8.0 7.5 7.0 6.5 6.0 5.5 5.0 4.5 4.0 3.5 3.0 2.5 2.0 1.5 1.0 0.5 0Chemical Shift (ppm)
10.09 1.020.90
7.01
7.14
7.44
7.51
10.2
0
Figura 56: Espectro de hidrogênio composto 7
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 99
Acquisition Time (sec) 1.8219 DateFrequency (MHz) 75.47
Nucleus 13C Number of Transients 6144 Original Points Count 32768 Points Count 32768Pulse Sequence dept135 Solvent DMSO-D6 Sweep Width (Hz) 17985.61 Temperature (degree C) 20.700
130 125 120 115 110 105 100 95 90 85 80 75 70 65 60 55 50 45 40 35 30 25 20 15 10 5 0Chemical Shift (ppm)
101.
22
113.
52
125.
6612
8.41
129.
31
Acquisition Time (sec) 1.8219 Dater Frequency (MHz) 75.47
Nucleus 13C Number of Transients 8192 Original Points Count 32768 Points Count 32768Pulse Sequence zgpg30 Solvent DMSO-D6 Sweep Width (Hz) 17985.61 Temperature (degree C) 21.400
168 160 152 144 136 128 120 112 104 96 88 80 72 64 56 48 40 32 24 16 8 0Chemical Shift (ppm)
101.
84
114.
1711
7.54
125.
5012
6.29
129.
0312
9.93
137.
6413
9.88
141.
13
148.
13
167.
03
Figura 57: Espectro carbono 13 (Broad Band e DEPT) composto 7
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 100
File Name Date Stamp �08/11/05 Date 08/11/05 Technique InfraredInstrument 502,02.19SE Spectral Region NIR-IR X Axis Wavenumber (cm-1) Y Axis %TransmittanceSpectrum Range 450.0000 - 4450.0000 Points Count 4001 Data Spacing 1.0000
3200 3100 3000 2900 2800 2700 2600 2500 2400 2300 2200 2100 2000 1900 1800 1700 1600 1500 1400 1300 1200 1100 1000 900 800 700Wavenumber (cm-1)
0
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
%T
ransm
ittan
ce
Figura 58: Espectro de Infravermelho composto 7
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 101
Numero δδδδ (ppm) 1H Multiplicidade/J δδδδ (ppm) 13C Integral Relativa
1 167,0 2 125,5 3 7,01 s 101,8 1,0 4 148,1 5 137,6 6 141,1 7 7,14 s 114,2 1,0 8 117,55 1´ 139,9 2´ 7,51-7,43 126,3 10,0 3´ 129,0 4´ 129,9
OH 10,20 s 0,9 IV 3600-2580 1700-1683 cm -1
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 102
Acquisition Time (sec) 6.4094 DateFrequency (MHz) 300.13
Nucleus 1H Number of Transients 16 Original Points Count 32768 Points Count 32768Pulse Sequence zg30 Solvent CHLOROFORM-D Sweep Width (Hz) 5112.47Temperature (degree C) 22.900
7.5 7.0 6.5 6.0 5.5 5.0 4.5 4.0 3.5 3.0 2.5 2.0 1.5 1.0 0.5 0Chemical Shift (ppm)
9.12 6.025.994.00
55.2
3
299.
10
2185
.60
2209
.32
2211
.34
2214
.62
2215
.56
2266
.73
2270
.17
2274
.38
7.7 7.6 7.5 7.4 7.3 7.2 7.1Chemical Shift (ppm)
5.994.00 1.91
2185
.60
2209
.32
2211
.34
2214
.62
2215
.56
2264
.86
2266
.73
2270
.17
2274
.38
Figura 59: Espectro de hidrogênio composto 8
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 103
Acquisition Time (sec) 1.8219 DateFile Name Frequency (MHz) 75.47Nucleus 13C Number of Transients 8192 Original Points Count 32768 Points Count 32768Pulse Sequence zgpg30 Solvent CHLOROFORM-D Sweep Width (Hz) 17985.61Temperature (degree C) 23.100
152 144 136 128 120 112 104 96 88 80 72 64 56 48 40 32 24 16 8 0Chemical Shift (ppm)
-4.5
2
18.2
8
25.5
5
104.
38
118.
2611
9.28
126.
2012
8.29
129.
26
138.
6013
9.75
142.
12
148.
58
Acquisition Time (sec) 1.8219 Date 29 Mar 2010 07:59:28Frequency (MHz) 75.47
Nucleus 13C Number of Transients 6144 Original Points Count 32768 Points Count 32768Pulse Sequence dept135 Solvent CHLOROFORM-D Sweep Width (Hz) 17985.61Temperature (degree C) 22.000
136 128 120 112 104 96 88 80 72 64 56 48 40 32 24 16 8 0 -8Chemical Shift (ppm)
-5.1
4
24.9
3
103.
76
118.
67
125.
5812
7.68
128.
65
Figura 60: Espectro carbono 13 (Broad Band e DEPT) composto 8
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 104
O OH
OO
O Si
12
3
4
5 6
7 8
8
109
10
10111´
2´
3´
4´ 1´2´
3´3´
3´ 2´
2´
4´
Numero δδδδ (ppm) 1H Multiplicidade/J δδδδ (ppm) 13C Integral Relativa
1 ---- 2 118,26 3 7,28 s 104,38 1 4 139,75 5 123,10 6 142,12 7 7,28 s 119,28 1 8 0,18 s -4,52 6 9 18,28 10 1,00 s 25,55 9 11 148,58 1´ 138,60 2´ 7,56 dd/ J=3,00 - 6,44
Hz 126,20 4
3´ 7,37 -- 128,29 6 4´ 129,26
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 105
Acquisition Time (sec) 6.4094
Frequency (MHz) 300.13 Nucleus 1H Number of Transients 16Original Points Count 32768 Points Count 32768 Pulse Sequence zg30Solvent CHLOROFORM-D Sweep Width (Hz) 5112.47Temperature (degree C) 25.400
8.0 7.5 7.0 6.5 6.0 5.5 5.0 4.5 4.0 3.5 3.0 2.5 2.0 1.5 1.0 0.5 0Chemical Shift (ppm)
2.112.11 1.061.00
1491
.13
2234
.44
2242
.08
2249
.88
2293
.73
2301
.37
2308
.70
2318
.84
2326
.18
2424
.79
2432
.90
8.0 7.5 7.0Chemical Shift (ppm)
2.11 1.061.00
2234
.44
2242
.08
2249
.88
2293
.73
2301
.37
2308
.70
2318
.84
2326
.18
2424
.79
2432
.90
Figura 61: Espectro de hidrogênio composto 9
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 106
Acquisition Time (sec) 1.8219Frequency (MHz) 75.47
Nucleus 13C Number of Transients 12288 Original Points Count 32768 Points Count 32768Pulse Sequence zgpg30 Solvent CHLOROFORM-D Sweep Width (Hz) 17985.61Temperature (degree C) 24.900
140 135 130 125 120 115 110 105 100 95 90 85 80 75 70 65 60 55 50 45 40 35 30 25 20 15 10 5 0Chemical Shift (ppm)
62.5
4
125.
02
128.
5112
9.98
134.
1413
6.78
Acquisition Time (sec) 1.8219File Name Frequency (MHz) 75.47Nucleus 13C Number of Transients 5088 Original Points Count 32768 Points Count 32768Pulse Sequence dept135 Solvent CHLOROFORM-D Sweep Width (Hz) 17985.61Temperature (degree C) 22.500
140 135 130 125 120 115 110 105 100 95 90 85 80 75 70 65 60 55 50 45 40 35 30 25 20 15 10 5 0Chemical Shift (ppm)
61.9
4
124.
41
127.
9012
9.37
133.
54
Figura 62: Espectro carbono 13 (Broad Band e DEPT) composto 9
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 107
Numero δδδδ (ppm) 1H Multiplicidade/J δδδδ (ppm) 13C Integral Relativa
1 8,10 d/ J=8,1 Hz 125,0 1,0 2 7,73 t/ J=7,3 Hz 129,9 2,0 3 7,67 t/ J=7,3 Hz 134,1 4 7,47 t/ J=7,8 Hz 148,1 1,0 5 128,5 6 136,8 7 5,00 s 61,9 2,0
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 108
Acquisition Time (sec) 3.8535 Comment Imported from UXNMR. DateFrequency (MHz) 500.13 Nucleus 1H Number of Transients 16
Original Points Count 32768 Points Count 32768 Pulse Sequence zg30 Solvent CHLOROFORM-DSweep Width (Hz) 8503.40 Temperature (degree C) 27.000
8.0 7.5 7.0 6.5 6.0 5.5 5.0 4.5 4.0 3.5 3.0 2.5 2.0 1.5 1.0 0.5 0Chemical Shift (ppm)
3.222.87 2.291.43 1.421.36 1.17 1.101.071.00
1011
.12
1018
.90
1039
.92
1043
.82
2050
.98
2062
.40
2136
.10
2147
.52
2159
.72
2163
.87
2404
.43
2408
.59
2414
.55
2418
.45
2482
.81
2563
.77
2573
.38
2583
.24
2760
.74
2770
.34
2780
.21
3720
.16
3727
.68
3735
.47
3822
.92
3830
.45
3837
.97
3873
.27
3880
.79
4033
.13
4041
.17
8.1 8.0 7.9 7.8 7.7 7.6 7.5 7.4Chemical Shift (ppm)
1.43 1.421.36 1.33
404
1.17
403
3.13
388
0.79
387
3.27
383
7.97
383
0.45
382
2.92
373
5.47
372
7.68
372
0.16
6.7 6.6 6.5Chemical Shift (ppm)
1.00
5.50 5.25 5.00 4.75Chemical Shift (ppm)
2.871.171.07 1.05
278
0.21
277
0.34
276
0.74
258
3.24
257
3.38
256
3.77
248
2.81
241
8.45
241
4.55
240
8.59
240
4.43
4.50 4.25 4.00 3.75Chemical Shift (ppm)
2.29 1.10
2163
.87
2159
.72
2147
.52
2136
.10
2062
.40
2050
.98
Figura 63: Espectro de hidrogênio composto 10
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 109
Acquisition Time (sec) 1.0420 Comment Imported from UXNMR.Frequency (MHz) 125.76 Nucleus 13C
Number of Transients 768 Original Points Count 32768 Points Count 32768 Pulse Sequence zgpg30Solvent CHLOROFORM-D Sweep Width (Hz) 31446.54 Temperature (degree C) 27.000
168 160 152 144 136 128 120 112 104 96 88 80 72 64 56 48 40 32 24 16 8 0Chemical Shift (ppm)
20.9
521
.00
61.3
862
.68
67.6
070
.58
70.9
972
.53
86.9
7
125.
2912
8.73
130.
0713
4.42
137.
37
169.
8817
0.26
170.
94
Acquisition Time (sec) 1.0420 .
Frequency (MHz) 125.76 Nucleus 13CNumber of Transients 256 Original Points Count 32768 Points Count 32768 Pulse Sequence dept135Solvent CHLOROFORM-D Sweep Width (Hz) 31446.54 Temperature (degree C) 27.000
140 135 130 125 120 115 110 105 100 95 90 85 80 75 70 65 60 55 50 45 40 35 30 25 20 15 10 5 0Chemical Shift (ppm)
21.0
2
61.3
762
.69
67.5
570
.55
70.9
772
.50
86.9
6
125.
3212
8.75
130.
07
134.
47
Figura 64: Espectro carbono 13 (Broad Band e DEPT) composto 10
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 110
10 9 8 7 6 5 4 3 2 1 0 -1ppm
-1
0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
ppm
Figura 65: Espectro bidimensional COSY
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 111
10 9 8 7 6 5 4 3 2 1 0 -1ppm
-8
0
8
16
24
32
40
48
56
64
72
80
88
96
104
112
120
128
136
144
152
160
ppm
Figura 66: Espectro bidimensional HMQC
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 112
Numero δδδδ (ppm) 1H Multiplicidade/J δδδδ (ppm) 13C Integral Relativa
1 6,63 d/ J= 3,9 Hz 86,9 1,00 2 4,83 dd/ J= 4,1 10,1
Hz
70,9
1,05
3 5,54 t/ J= 9,9 Hz 70,6
1,07
4 5,15 t/ J=9,9Hz 67,6 1,17 5,6 4,30 C6(61,4)
C5(73,5) 2,3
6 4,12 d/ J=11,4 61,4 1,0 7 4,97 s 62,7 2,0 1´ 7,75 d/ J=7,5 134,4 1,43 2´ 7,45 t/ J= 7,8 Hz 128,7 1,3 3´ 7,66 t/ J= 7,8 130,1 1,4 4´ 8,08 d/J= 8,0 Hz 125,3 1,3 5´ 148,0 6´ 137,7
CH3x4 2,09-2,08-2,04-2,02
s 21,0-20,9-20,9-20,8
12
COx4 170,9-170,2-170,1-169,9
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 113
Acquisition Time (sec) 6.4094 Comment 1HFrequency (MHz) 300.13 Nucleus 1H
Number of Transients 16 Original Points Count 32768 Points Count 32768 Pulse Sequence zg30Solvent CHLOROFORM-D Sweep Width (Hz) 5112.47 Temperature (degree C) 19.200
4.5 4.0 3.5 3.0 2.5 2.0 1.5 1.0 0.5 0 -0.5 -1.0Chemical Shift (ppm)
9.183.632.28 2.00
0.11
1.20
1.23
1.25
1.88
4.05
4.07
4.09
4.12
Figura 67: Espectro de Hidrogênio composto 11
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 114
Acquisition Time (sec) 1.8219Frequency (MHz) 75.47
Nucleus 13C Number of Transients 879 Original Points Count 32768 Points Count 32768Pulse Sequence zgpg30 Solvent CHLOROFORM-D Sweep Width (Hz) 17985.61Temperature (degree C) 19.000
220 210 200 190 180 170 160 150 140 130 120 110 100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 -10 -20Chemical Shift (ppm)
-1.4
4
14.4
5
26.9
3
59.8
0
173.
01
Acquisition Time (sec) 1.8219Frequency (MHz) 75.47
Nucleus 13C Number of Transients 500 Original Points Count 32768 Points Count 32768Pulse Sequence dept135 Solvent CHLOROFORM-D Sweep Width (Hz) 17985.61Temperature (degree C) 19.300
70 65 60 55 50 45 40 35 30 25 20 15 10 5 0 -5 -10Chemical Shift (ppm)
-2.0
5
13.
83
26.
31
59.
18
Figura 68: Espectro carbono 13 (Broad Band e DEPT) composto 11
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 115
Numero δδδδ (ppm) 1H Multiplicidade/J δδδδ (ppm) 13C Integral Relativa
1 1,90 s 26,3 2,00 2 4,07 q/ J=7,2 Hz 59,2 2,28 3 1,22 t/ J=7,2 Hz 13,82 3,63
Si-CH3 0,00 s -2,0 9,18 CO 173,0
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 116
Acquisition Time (sec) 6.4094 Comment 1HFrequency (MHz) 300.13
Nucleus 1H Number of Transients 16 Original Points Count 32768 Points Count 32768Pulse Sequence zg30 Solvent CHLOROFORM-D Sweep Width (Hz) 5112.47Temperature (degree C) 24.000
4.0 3.5 3.0 2.5 2.0 1.5 1.0 0.5 0 -0.5Chemical Shift (ppm)
8.472.00 1.90
-0.0
1
0.90
0.93
0.96
3.66
3.69
3.72
Figura 69: Espectro de hdrogênio composto 12
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 117
Acquisition Time (sec) 1.8219Frequency (MHz) 75.47
Nucleus 13C Number of Transients 8192 Original Points Count 32768 Points Count 32768Pulse Sequence zgpg30 Solvent CHLOROFORM-D Sweep Width (Hz) 17985.61Temperature (degree C) 20.200
85 80 75 70 65 60 55 50 45 40 35 30 25 20 15 10 5 0Chemical Shift (ppm)
-1.4
6
22.0
5
59.9
9
Acquisition Time (sec) 1.8219Frequency (MHz) 75.47
Nucleus 13C Number of Transients 5120 Original Points Count 32768 Points Count 32768Pulse Sequence dept135 Solvent CHLOROFORM-D Sweep Width (Hz) 17985.61Temperature (degree C) 20.800
75 70 65 60 55 50 45 40 35 30 25 20 15 10 5 0 -5 -10 -15Chemical Shift (ppm)
-2.0
7
21.
42
59.
36
Figura 70: Espectro carbono 13 (Broad Band e DEPT) composto 12
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 118
Numero δδδδ (ppm) 1H Multiplicidade/J δδδδ (ppm) 13C Integral Relativa
1 0,93 t/ J=8,4 Hz 21,4 1,90 2 3,70 t/ J=8,5 Hz 59,4 2,0
Si-CH3 0,00 s -2,1 8,47
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 119
Acquisition Time (sec) 6.4094 Comment 1HFrequency (MHz) 300.13 Nucleus 1H Number of Transients 16
Original Points Count 32768 Points Count 32768 Pulse Sequence zg30 Solvent CHLOROFORM-DSweep Width (Hz) 5112.47 Temperature (degree C) 20.300
7.0 6.5 6.0 5.5 5.0 4.5 4.0 3.5 3.0 2.5 2.0 1.5 1.0 0.5 0Chemical Shift (ppm)
8.983.37 2.211.251.111.00 0.970.96 0.88
1.95
267.
5026
9.53
273.
4327
7.33
283.
2628
6.38
293.
09
601.
2460
7.64
612.
3262
5.89
1063
.23
1066
.35
1073
.06
1104
.11
1111
.76
1113
.94
1190
.70
1196
.63
1232
.99
1235
.48
1245
.47
1247
.65
1273
.24
1277
.92
1285
.57
1351
.72
1359
.68
1485
.59
1494
.95
1502
.91
1518
.20
1527
.72
1537
.39
1551
.28
1560
.80
1570
.16
5.3 5.2 5.1 5.0 4.9 4.8 4.7Chemical Shift (ppm)
1.111.00 0.96
1570
.16
1560
.80
1551
.28
1537
.39
1527
.72
1518
.20
1502
.91
1494
.95
1485
.59
4.5 4.0 3.5Chemical Shift (ppm)
1.250.98 0.970.96 0.930.88
1359
.68
1351
.72
1290
.25
1285
.57
1277
.92
1273
.24
1247
.65
1245
.47
1235
.48
1232
.99
1206
.46
1200
.53
1196
.63
1190
.70
1186
.80
1180
.72
1116
.28
1113
.94
1111
.76
1109
.26
1106
.61
1104
.11
1101
.93
1099
.59
1075
.87
1073
.06
1066
.35
1063
.23
1056
.52
1.5 1.0 0.5Chemical Shift (ppm)
2.21
293.
0928
6.38
283.
2627
7.33
273.
4326
9.53
267.
50
Figura 71: Espectro dee hidrogênio do composto 13
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 120
Acquisition Time (sec) 1.8219Frequency (MHz) 75.47 Nucleus 13C Number of Transients 6144 Original Points Count 32768 Points Count 32768Pulse Sequence dept135 Solvent CHLOROFORM-D Sweep Width (Hz) 17985.61 Temperature (degree C) 19.600
110 105 100 95 90 85 80 75 70 65 60 55 50 45 40 35 30 25 20 15 10 5 0 -5 -10Chemical Shift (ppm)
-2.0
5
17.
29
20.
01
20.
13
61.
41
66.
98
67.
86
70.
80
71.
06
72.
40
99.
60
Acquisition Time (sec) 1.8219Frequency (MHz) 75.47 Nucleus 13C Number of Transients 10240 Original Points Count 32768 Points Count 32768Pulse Sequence zgpg30 Solvent CHLOROFORM-D Sweep Width (Hz) 17985.61 Temperature (degree C) 20.600
184 176 168 160 152 144 136 128 120 112 104 96 88 80 72 64 56 48 40 32 24 16 8 0 -8Chemical Shift (ppm)
-1.4
4
17.9
020
.62
62.0
367
.59
68.5
071
.42
71.6
873
.01
100.
22
169.
3317
0.37
170.
73
Figura 72: Espectro carbono 13 (Broad Band e DEPT) composto 13
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Numero δδδδ (ppm)
1 4,502 4,983 5,204 5,095 3,69
6 4,28
6 4,13
7, 3,98
7 3,56
8, 8 0.93Si-CH3 0
CH3 2,10-2,482,35-2,01
CO
Página 121
(ppm) 1H Multiplicidade/J δδδδ (ppm) 13C
4,50 d/ J=8,0 Hz 100,2 4,98 t/ J=9,3 Hz 71,7 5,20 t/ J=9,3 Hz 73,0 5,09 t/ J=9,52 Hz 68,5 3,69 ddd/ J=2,3 - 4,6-
9,2 Hz 71,4
4,28 dd/ J=4,7 -12,3 Hz
62,0
4,13 dd/ J= 4,9-10,0 Hz
62,0
3,98 ddd/ J=5,9 -9,8-9,8 Hz
67,7
3,56 ddd/ J=7,0 -9,8-9,8 Hz
67,7
0.93 multipleto 17,9 s -1,4 2,48-2,01
s 20,7-20,6
170,7-170,3-169,4-169,3
Integral Relativa
1 1,1 1,0 1,0 1,0
1,2
1,0
0,9
0,9
2 9,0 12
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 122
Acquisition Time (sec) 3.8535 Frequency (MHz) 500.13Nucleus 1H Number of Transients 16 Original Points Count 32768Points Count 32768 Pulse Sequence zg30 Solvent DMSO-D6Sweep Width (Hz) 8503.40 Temperature (degree C) 27.000
4.5 4.0 3.5 3.0 2.5 2.0 1.5 1.0 0.5 0Chemical Shift (ppm)
8.241.72 1.201.10 1.041.00 0.98
410.
5741
8.87
424.
3243
0.03
435.
7444
6.38
452.
0945
7.80
463.
5147
7.26
1443
.16
1451
.99
1460
.03
1505
.97
1514
.53
1520
.76
1526
.21
1545
.93
1554
.75
1697
.74
1703
.19
1709
.42
1715
.13
1727
.33
1733
.04
1738
.23
1815
.30
1825
.68
1826
.72
2044
.45
2052
.50
4.00 3.75 3.50 3.25Chemical Shift (ppm)
1.10 1.041.00
2052
.50
2044
.45
1826
.72
1825
.68
1815
.30
1743
.94
1738
.23
1733
.04
1727
.33
1723
.18
1715
.13
1709
.42
1703
.19
1697
.74
3.25 3.00 2.75 2.50Chemical Shift (ppm)
1.72 1.200.86
1563
.32
1554
.75
1545
.93
1534
.51
1526
.21
1520
.76
1514
.53
1505
.97
1496
.62
1460
.03
1451
.99
1443
.16
1.50 1.25 1.00 0.75Chemical Shift (ppm)
0.980.84
477.
2647
1.55
463.
5145
7.80
452.
0944
6.38
435.
7443
0.03
424.
3241
8.87
410.
57
Figura 73: Espectro de hidrogênio figura 14
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 123
Acquisition Time (sec) 1.0420 CommentFrequency (MHz) 125.76 Nucleus 13C Number of Transients 769
Original Points Count 32768 Points Count 32768 Pulse Sequence zgpg30 Solvent DMSO-D6 Sweep Width (Hz) 31446.54Temperature (degree C) 27.000
125 120 115 110 105 100 95 90 85 80 75 70 65 60 55 50 45 40 35 30 25 20 15 10 5 0 -5Chemical Shift (ppm)
-0.4
6
18.7
1
61.9
9
66.5
1
71.0
1
74.3
8
77.6
0
103.
22
Acquisition Time (sec) 1.0420 Comment Date 03 Mar 2010 11:22:56Frequency (MHz) 125.76 Nucleus 13C Number of Transients 128
Original Points Count 32768 Points Count 32768 Pulse Sequence dept135 Solvent DMSO-D6 Sweep Width (Hz) 31446.54Temperature (degree C) 27.000
110 105 100 95 90 85 80 75 70 65 60 55 50 45 40 35 30 25 20 15 10 5 0 -5Chemical Shift (ppm)
-0.4
6
18.7
1
61.9
5
66.5
2
70.9
6
74.3
5
77.6
0
103.
21
Figura 74: Espectro carbono 13 (Broad Band e DEPT) composto 14
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 124
5.0 4.5 4.0 3.5 3.0 2.5 2.0 1.5 1.0 0.5 0 -0.5ppm
0
0.5
1.0
1.5
2.0
2.5
3.0
3.5
4.0
4.5
5.0
5.5
ppm
Figura 75: Espectro bidimensional COSY
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 125
Numero δδδδ (ppm) 1H Multiplicidade/J δδδδ (ppm) 13C Integral Relativa
1 4,95 d/ J=8,0 Hz 103,2 1 2 2,90 t/ J=8,4 Hz 74,6 0,9 3 3,15 t/ J=8,6 Hz 77,6 1,0 4 3,03 t/ J=8,6 Hz 70,9 1,0 5 3,05 ---- 77,9 1,2 6 3,63 dd/ J=1,0 -11,0
Hz 61,9 1,1
6 3,41 dd/ J= 5,7-11,9 Hz
61,9 1,0
7, 7 3,45-3,83 ddd/ J=5,7 -10,1 Hz
66,5 1,0
8, 8 0.93-0,85 ddd/ J=5,7 -11,4 Hz
18,7 0,9-1,0
Si-CH3 -0,1 s -0,5 8,6
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
Página 126
File Name Date Stamp DateTechnique Infrared Instrument 502,02.19SE Spectral Region NIR-IR X Axis W avenumber (cm-1)Y Axis %Transmittance Spectrum Range 450.0000 - 4450.0000 Points Count 2001 Data Spacing 2.0000
4400 4200 4000 3800 3600 3400 3200 3000 2800 2600 2400 2200 2000 1800 1600 1400 1200 1000 800 600 400Wavenumber (cm-1)
0
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
%T
rans
mitt
ance
Figura 76: Espectro Infravermelho tiofenol
Estudos sobre a síntese dos elagitaninos
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