Implicancias de los polimorfismos del gen de la enzima convertidora de Angiotensina en el...

Implicancias de los polimorfismos del gen de la enzima convertidora de Angiotensina en el

pronóstico de pacientes pediátricos con Síndrome de Distress Respiratorio Agudo

Tutor: Dr. Pablo Cruces, UCI pediátrica, Hospital Padre Hurtado.

Cook F. Idalsoaga F. Izquierdo N. Litenstein G. Martínez R. Maturana E.

Facultad de Medicina Clínica Alemana - Universidad del Desarrollo

Antecedentes• Síndrome de Distrés Respiratorio

- Curso agudo

- Infiltrados pulmonares bilaterales

(Rx tórax)

- Disminución de intercambio gaseoso

(≤ 200 PaO2/FiO2 )

- Disminución compliance pulmonar

- Presión pulmonar ( ≤ 18 mmHg) (Bernard GR et al.)

Antecedentes• Incidencia:

- 70 por 100.000 habitantes (Manteiga Riestra E. et al.)

- Causa de muerte en UCI (cerca del 50%) (Marshall RP et al.-Manteiga Riestra. et al.)

• Factores de riesgo:

- Neumonía

- Sepsis de origen pulmonar

- Shock séptico

- Traumatismo pulmonar ( JS Wu et al.)

- Factores genéticos (Jih-Shuin Jerng, MD et al.)

Antecedentes

Antecedentes

• El gen de la ECA se encuentra en el cromosoma 17q23. (Marshall RP. Et al)

• Posee un segmento polimórfico con presencia (inserción, I) o ausencia (deleción, D)de una secuencia repetida de 287 pb. Localizada en el intrón 16 (Marshall RP. Et al)

• La deleción aumenta la actividad de la ECA.

• Herencia Mendeliana con Codominancia. (variación en niveles séricos según genotipo)(Rigat B. Et al)

AntecedentesExón Exón Inserción

Exón Deleción Exón

DD Dl ll

La presencia del aleo D en el polimorfismo del gen 17q23 de la ECA aumenta el riesgo y la evolución de SDRA en pacientes pediátricos en Chile.

Hipótesis

Hipótesis alternativa

La predisposición que presentan algunos pacientes pediátricos en Chile a padecer SDRA y la evolución diferencial de la patología, se debe a la presencia del alelo I en el gen de la ECA.

Objetivo general

Establecer la asociación entre el polimorfismo de inserción/ deleción de un fragmento de 287 pares de bases en el intrón 16 del gen de la ECA, con el desarrollo y gravedad del síndrome de distress respiratorio agudo en pacientes pediátricos

Objetivo específico

1. Determinar el genotipo de los polimorfismos I/D de los pacientes.

2. Relacionar los genotipos con el desarrollo de la SDRA en los pacientes.

3. Analizar la frecuencia de los genotipos II, ID y DD en los pacientes.

4. Correlacionar los genotipos II, ID y DD con el grado de severidad del SDRA.

5. Relacionar la frecuencia de los alelos con el género.

Diseño experimental• Estudio transversal.

• Dos grupos a analizar de 60 individuos cada uno.

• Extracción de sangre sin intervenciones adicionales.

• Toma de consentimiento informado escrito a los tutores de ambos grupos.

• Pacientes pediátricos ingresados al Hospital Padre Hurtado que estén diagnosticados con SDRA bajo los criterios de la Conferencia de Consejo Americana-Europea.

Diseño experimental

• Cuantificación de el genotipo de los polimorfismos I/D de la ECA, por medio de un PCR y correlacionar los resultados con la frecuencia y gravedad del síndrome de distress respiratorio agudo, utilizando el software SPSS.

• Para evaluar gravedad en el grupo de estudio se consignará días libres de ventilación mecánica y oxígeno suplementario a los 28 días, duración de la hospitalización y estadía en UCI.

Inclusión y exclusión

• Grupos:

Grupo Control 60

Grupo Experimental 60

SDRANeumonía SBO

SDRA previo

Cardiopatía congénita cianótica

Inhibidores de ECA

Síndrome de Down

Ventilación mecánica crónica

Cortocircuito Derecha Izquierda

Metodología• Obtención de muestras:

- 60 muestras de 2mL de cada grupo, por medio de una punción venosa.

- Tubos con ácido etilendiaminotetraacético (EDTA) de 3mL

- Tubos eppendorfs de 1.5mL.

- Centrifugación (5 minutos a 5000 RPM.)

- Micropipeteo de fases.

-Rotulación y refrigeración a 2-8ºC.

• Genotipificación de los polimorfismos I/D de la ECA en los pacientes.- Hablar con Puga

Consideraciones bioéticas- Investigación fue presentada y aprobada por el Comité de Evaluación Ético-Científico del Servicio de Salud Metropolitano Sur Oriente (Hospital Dr. Sotero del

Río).

- Acta de consentimiento informado, fue aprobada por este Comité. (características generales y específicas de la investigación al apoderado de los pacientes, las cuales deciden con plena voluntad y sin ninguna tipo de presión formar parte del estudio.)

- El estudio no representa riesgos ni intervenciones especiales en los pacientes y las muestras son obtenidas de exámenes indicados por su médico tratante.

- Los datos obtenidos de los pacientes y los resultados de los análisis de las muestras son totalmente confidenciales y no son utilizados con otros fines.

Avances• Recolección de muestras:

- 7 de Agosto Inicio de recolección en el hospital padre hurtado

- 40 muestras del grupo control obtenidas hasta la fecha en urgencia pediátrica

- 38 muestras del grupo experimental hasta la fecha en la UCI pediátrica

• Los materiales necesarios para realizar el PCR, ya han sido adquiridos y almacenados en el laboratorio de genética.

• El inicio de procesamiento de muestras se dará inicio la próxima semana

Complicaciones

Nº de consultas de urgencia para patologías respiratorias según mes del año. Gráfico hecho en base a las

estadísticas del MINSAL para 2007 y 2008

0

5000

10000

15000

20000

25000

30000

35000

40000

Ene* Feb* Mar Abr May Jun Jul Ago Sep* Oct* Nov* Dic*

Meses, * = Datos para 2008 incompletos o ausentes.

Caso

s

2008

2007

Proyección disminuidas del número de muestras

Referencias1. - Bernard GR, Artigas A, Brigham KL, et al. The American-European Consensus Conference on ARDS:

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Referencias