View
1
Download
0
Category
Preview:
Citation preview
Direktni preparati
Izolacija i identifikacija uzročnika Molekularne i imunološke metode
Prve indicije da li prisutan infektivni agens
tinktorijalne i morfološke osobine mikroorganizma –izbor terapije i pre same izolacije uzročnika
Najmanje 104 uzročnika u ml/gr da bi se lako ustanovili na mikroskopskom preparatu
Primer – urin – pronalaženje jedne bakterije u vidnom polju – 105-106 bakterija u 1 ml
Bojenje po Gramu – utvrđuje se oblik, građa ćelijskog zida
Romanovski top bojenja – bojenje po Wright-u ili
Giemsa-i – prirodan izgled preparata – uočavanje svih ćelija koje se nalaze na mestu infekcije
Gnoj – mnoge vrste - Staphylococcus aureus,
Streptococcus spp, Trueperella pyogenes,
Corynebacterium pseudotuberculosis,
Enterotoksemija – preparat tanka creva telad i jagnjad
- Clostridium perfringens
Campylobacter fetus – abortusi, sterilitet ovce i krave
– vaginalni iscedak ili sadržaj stomaka fetusa
Dezenterija svinja – feces ili skarifikat kolona –Brachyspira hyodysenteriae
Brucella spp., Nocardia asteroides, Chlamydophila
abortus, Chlamydophila pecorum, Chlamydophila felis
Mycobacterium bovis , Mycobacterium avium ,
Mycobacterium lepraemurium , Mycobacterium avium
subspecies paratuberculosis
Bacillus anthracis, Mycoplasma haemofelis, Borrelia
anserina, Dermatophilus congolensis
Bacillus anthracis
Leptospira spp, Microsporum i Trichophyton spp,
Aspergillus fumigatus,Candida albicans
Selektivne podloge
Diferencijalne podloge
MacConkey agar
Manitol slani agar
Podloge za obogaćenje Specijalne podloge
Podloge sa hromogenima
Actinomyces bovis
Bacteroides species
Clostridium species
Actinobaculum suis
Fusobacterium species
Peptoniphilus species
Brachyspira hyodysenteriae.
Actinobacillus pleuropneumoniae
Actinomyces viscosus
Brucella species
Campylobacter jejuni i C. fetus(optimalno 6% O2, 10% CO2, 84% N2)
Dermatophilus congolensis
Francisella tularensis
Haemophilus species
Histophilus species
Taylorella equigenitalis
Actinobacillus pleuropneumoniae, Brucella spp, Campylobacter spp. i Haemophilus spp. kao kapnofilizahtevaju prisustvo 5-10% CO2
Clostridium spp, Bacteroides spp, Fusobacterium spp i Serpulina hyodysenteriae kao anaerobnimikroorganizmi odsustvo O2.
Određenu temperaturu Campylobacter jejuni, Serpulina hyodysenteriae od 42 oC
Leptospira spp. od 28-30 oC
Listeria monocytogenes i Yersinia spp. od 4oC kod hladnogobogaćivanja
Okom vidljiva formacija nastala od jedne bakterije
24-48 h – većina brzo rastućih vrsta 48-72 h - većina brzo rastućih vrsta na selektivnim podlogama • 4–6 days:
Brucella species
Campylobacter species
Nocardia asteroides
Mycoplasma species
Atipične mycobacteria
• 2–3 nedelje većina vrsta dermatofita (T. verrucosum do 5 nedelja) i Mycobacterium avium
• 3–8 nedelje Mycobacterium bovis
• 4–16 nedelje Mycobacterium avium subspecies paratuberculosis
10-2
10-510-4
10-3
Utvrđivanje relativnog broja mikroorganizama olakšava interpretaciju.
Velika razlika 1-2 kolonije ili veliki broj
Obogaćivanje pre zasejavanja na podloge nije obično neophodno.
Citološki nalaz – izolacija čak i većeg broja mikroorganizama bez inflamacije ne ukazuje na infekciju
Izuzetak infekcije prouzrokovane sa Cryptococcus spp.
Morfološki izgled na mikroskopskom preparatu
Tintorijelne osobine - sposobnost bojenja
Uslovi kultivisanja
Izgled kolonija na hranljivim podlogama
Fiziološke i biohemijske karakteristike
Antigenska građu
Patogena svojstva
Bojenje po Gram-u – oblik i primanje boje
Rast ili odsustvo rasta na MacConkey agaru
Katalaza i oksidaza test
Pokretljivost
Oksidativno fermentacioni (O-F) test – podloga po
Hugh i Leifson-u
Bojenje po Gram-u
LANA test L-alanine-4-nitroanilide
Test sa 3% KOH
Osetljivost na vancomycin
Rast ili odsustvo rasta na MacConkey agaru
Katalaza i oksidaza test
Pokretljivost
Oksidativno fermentacioni (O-F) test – podloga po
Hugh i Leifson-u
Zbog posedovanja različitih enzima bakterije se
odlikuju određenim metaboličkim profilom
Ispitivanje njihovih fizoloških i biohemijskih osobina
obezbeđuje preciznu identifikaciju vrste
mikroorganizama
Recommended