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生生 生生 生生 生生 3 3 生生生生生生生生 生生生生生生生生 生生1973 生生生 DNA 生生生生生

生物 选修 3 现代生物科技专题

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生物 选修 3 现代生物科技专题. 标志: 1973 年重组 DNA 技术的诞生. 目 录. 专题 1 基因工程 专题 2 细胞工程 专题 3 胚胎工程 专题 4 生物技术的安全性和伦理问题 专题 5 生态工程. 专题 1 基因工程. 基因工程的诞生 基因工程的原理及技术 基因工程的应用 蛋白质工程. 荧光水母. 普通热带斑马鱼. 水母. 能发荧光的热带斑马鱼. 基因工程的诞生和发展. 1. 基础理论 艾弗里证明: 沃森和克里克: 克里克: 尼伦贝格:. DNA 是遗传物质. DNA 双螺旋结构的发现. 中心法则的确立. - PowerPoint PPT Presentation

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Page 1: 生物 选修 3 现代生物科技专题

生物 选修生物 选修 33现代生物科技专题现代生物科技专题标志: 1973 年重组 DNA 技术的诞生

Page 2: 生物 选修 3 现代生物科技专题

目 录目 录 专题专题 1 1 基因工程基因工程 专题专题 2 2 细胞工程细胞工程 专题专题 3 3 胚胎工程胚胎工程 专题专题 4 4 生物技术的安全性和伦理问题生物技术的安全性和伦理问题 专题专题 5 5 生态工程生态工程

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专题专题 1 1 基因工程基因工程基因工程的诞生基因工程的原理及技术基因工程的应用蛋白质工程

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水母

荧光水母 普通热带斑马鱼

能发荧光的热带斑马鱼

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基因工程的诞生和发展基因工程的诞生和发展1.1. 基础理论基础理论艾弗里证明:艾弗里证明:沃森和克里克:沃森和克里克:克里克:克里克:尼伦贝格:尼伦贝格:

DNADNA 是遗传物质是遗传物质DNADNA 双螺旋结构的发现双螺旋结构的发现

中心法则的确立中心法则的确立遗传密码的破译遗传密码的破译

Page 6: 生物 选修 3 现代生物科技专题

2.2. 工具基础工具基础酶:酶:载体:载体:

限制性核酸内切酶、限制性核酸内切酶、 DNADNA 连接酶、逆转录酶连接酶、逆转录酶质粒等质粒等

基因工程的诞生和发展基因工程的诞生和发展

3.3. 诞生诞生 19731973 年,美国斯坦福大学分子生物学家科年,美国斯坦福大学分子生物学家科

恩第一个建成“基因工程菌” 。科学界把恩第一个建成“基因工程菌” 。科学界把这一年定为“基因工程元年”这一年定为“基因工程元年”

基因工程的概念:书 P8 金榜

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基因工程的发展基因工程的发展1 、经过哪几个时期?2、基因工程是如何曲折发展的?1974 ~ 1976 :1977 :1978 ~ 1980 :1982 :

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基因工程的工具基因工程的工具 分子手术刀:分子手术刀: 分子缝合针:分子缝合针: 分子运输车:分子运输车:

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一、限制性核酸内切酶——“分子手术刀”1 、来源——主要是从原核生物中分离纯化而来(流感嗜血杆菌)

2 、功能——一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定的切点上切割 DNA 分子。寻根问底: 根据你掌握的知识,你能推测这类酶存在于原核生物中的作用是什么吗?

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原核生物容易受到自然界外源 DNA 的入侵,但是生物在长期的进化过程中形成了完善的防御机制,以防止外来病原物的侵害。限制性核酸内切酶就是细菌的防御性工具,当外源 DNA 侵入时,限制性核酸内切酶会将外源 DNA 切割掉,以保证自身的安全。所以,限制性核酸内切酶在原核生物中主要起到切割外源 DNA 、使之失效,从而保护自身的作用。

Page 11: 生物 选修 3 现代生物科技专题

限制性核酸内切酶作用的是 DNA 分子中的什么键?

磷酸二酯键即脱氧核糖、磷酸之间的连接

AA TT

GG

GG

CC

AA TT

CC

TT

TT

CC GG

AA

AA

GP

AP

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G A A T T C C T T A A G

C C C G G G G G G C C C

C T T A A G A A T T C

G

黏性末端

平末端C C C G G G G G G C C C

限制性核酸内切酶能识别特定的核苷酸序列:

科学家为何对“黏性末端”很感兴趣?

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GAATTCCGTAGAATTCGGATT

尝试写出下列序列受 EcoRI限制酶作用后的黏性末端CTTCATGAATTCCCTAA GAAGTACTTAAGGGATT

CTTAAGGCATCTTAAGCCTAA

CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT GGCATCTTAA

AATTCCGTAG

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二、 DNA 连接酶——“分子缝合针”1 、作用——把两条 DNA 末端之间的缝隙“缝合”起来。

G A A T T C C T T A A G

即脱氧核糖、磷酸基之间的连接 GP

AP

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2 、分类E.coli DNA 连接酶——只能将双链 DNA 片段互补的黏性末端之间连接起来,不能将双链 DNA 平末端之间进行连接

T4 DNA 连接酶——既可将双链 DNA 片段互补的黏性末端之间连接起来,也能将双链 DNA 平末端之间进行连接,但连接平末端的效率比较低

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寻根问底:DNA 连接酶和 DNA聚合酶是一回事吗?为什么? 不是。两者的差别在于( 1 ) DNA聚合酶只能将单个的核苷酸加到已有的核酸片段的 3‘ 末端的羟基上,形成磷酸二脂键,而 DNA 连接酶是在两个 DNA 片段之间形成磷酸二脂键。( 2 ) DNA聚合酶是以一条 DNA 为模板,将单个核苷酸通过形成磷酸二脂键形成一条与摸板互补的DNA 链;而 DNA 连接酶是将双链上的两个缺口同时连接起来。因此 DNA 连接酶不需要摸板。

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三、基因进入受体细胞的载体 ——“ 分子运输车”

1 、通常以质粒作为载体质粒——细菌细胞中一种很小的环状 DNA 分子。裸露的、结构简单、独立于细菌之外,并且有自我复制能力

氨苄青霉素抗性基因

质粒 拟核大肠杆菌细胞目的基因插入位点复制原点

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思考:具备什么样的条件才能充当“分子运输车”?

能自我复制有一个或多个切割位点有标记基因对受体细胞无害等。

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2 、作用 将外源 DNA携带进受体细胞后,停留在细胞中进行自我复制或整合到染色体上,随染色体 DNA 进行同步复制。质粒 DNA 分子上有特殊的遗传标记基因,如抗四环素、氨苄青霉素等标记基因,供重组 DNA 的鉴定和选择。3 、其他载体 噬菌体、动植物病毒 在基因工程操作中,真正被用作载体的质粒,都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的。

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基因工程的一般过程与技术1 、据图 1-4说出基因工程的基本过程。2 、认真阅读 13页图 1-6 ,讨论: 目的基因是什么? 受体细胞是什么? 基因表达产物是什么? 土壤农杆菌在其中可能起什么作用?

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1、从基因文库中获取 将含有某种生物不同基因的许多 DNA 片段,导入受体菌的群体中储存,各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因,称为基因文库。

一、目的基因的获取

基因组文库 含有一种生物全部基因的基因文库部分基因文库 含有一种生物部分基因的基因文库

像国家图书馆像市图书馆 如 cDNA文库

基因文库像“图书馆”每个基因是一本书

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① 概念: PCR全称为 _______________,是一项 在生物 ____ 复制 ___________的核酸合成技术 ③条件: ___________________、 _______________、 ______( 做启动子 )、 ___________. 前提条件:

②原理: __________

④方式:以 _____ 方式扩增,即 ____( n为循环的次数)⑤结果:

聚合酶链式反应体外 特定 DNA片段DNA复制

已知基因的核苷酸序列 四种脱氧核苷酸引物 DNA聚合酶指数 2n

使目的基因的片段在短时间内成百万倍地扩增

2、利用 PCR技术扩增目的基因一、目的基因的获取

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⑥过程:a、 DNA变性( 95℃):双链 DNA模板 在热作用下, _____ 断裂,形成 ___________b、退火(复性 25℃):系统温度降低,引物与DNA模板结合,形成局部 ________。 c、延伸( 72℃):在 Taq酶的作用下,从引物的 5′端→ 3′端延伸,合成与模板互补 的 ________。

氢键 单链 DNA双链

DNA链

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引物模板 DNA

dCTPdATPdGTPdTTP 热稳定 DNA聚合酶( Taq酶) DNA解链

引物结合到互补 DNA链 Taq酶从引物起始进行互补链合成

加热至 70~75℃

加热 至 90~95℃

冷却至 55~60 ℃

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若基因较小,核苷酸序列已知,也可以通过 DNA 合成仪用化学方法直接人工合成。

3、人工合成一、目的基因的获取

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1.用一定的 _________切割 质粒,使其出现一个切 口,露出 ____________。2.用 _____________切断目 的基因,使其产生 _____ ____________。

二、制备重组 DNA 分子 —— 核心

3.将切下的目的基因片段插入质粒的 ______ 处, 再加入适量 ___________,形成了一个重组 DNA分子(重组质粒)

限制性核酸内切酶黏性末端

同一种限制性核酸内切酶的黏性末端

切口DNA连接酶

相同

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质粒 DNA分子限制酶处理

一个切口两个黏性末端 两个切口获得目的基因DNA连接酶

重组 DNA分子(重组质粒)

同一种

4.过程 :二、制备重组 DNA 分子

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复制原点 +目的基因 + 启动子 + 终止子 +标记基因

它们有什么作用?

二、制备重组 DNA 分子

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补:原核细胞的基因结构非编码区 非编码区编码区编码区上游 编码区下游

与RNA聚合酶结合位点启动子 终止子

RNA聚合酶能够识别调控序列中的结合位点,并与其结合。 转录开始后, RNA聚合酶沿DNA分子移动,并以 DNA分子的一条链为模板合成 RNA。 转录完毕后, RNA链释放出来,紧接着RNA聚合酶也从 DNA模板链上脱落下来。

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①不能转录为信使 RNA,不能 编码蛋白质。

:能转录相应的信使 RNA,能 编码蛋白质 编码区

非编码区

原核细胞的 基因结构②有调控遗传信息表达的核 苷酸序列,在该序列中, 最重要的是位于编码区上 游的 RNA聚合酶结合位点。启动子

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补:真核细胞的基因结构编码区非编码区 非编码区

与RNA聚合酶结合位点 内含子 外显子 能够编码蛋白质的序列叫做外显子 不能够编码蛋白质的序列叫做内含子

启动子 终止子编码区上游 编码区下游

内含子: 外显子:

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真核细胞的 基因结构

编码区非编码区

外显子:能编码蛋白质的序列内含子:不能编码蛋白质的序列:有调控作用的核苷酸序列, 包括位于编码区上游的 RNA 聚合酶结合位点。

非编码序列:包括非编码区和内含子

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原核细胞 真核细胞不同点 编码区是_____的 编码区是间隔的、_____的相同点 都由能够编码蛋白质的 ______和具有调控作用的 ______ 区组成的

原核细胞与真核细胞的基因结构比较

思考 编码相同数目氨基酸的蛋白质,原核细胞与真核细胞基因结构一样长吗?

连续 不连续编码区非编码

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三、转化受体细胞转化 ——

方法

将目的基因导入植物细胞将目的基因导入动物细胞将目的基因导入微生物细胞

农杆菌转化法基因枪法花粉管通道法

——显微注射法—— 用钙离子处理细胞(感受态细胞)

目的基因进入 _________内,并且在 受体细胞内维持 _____和 _____的过程受体细胞稳定 表达

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1、将目的基因导入植物细胞( 1 )农杆菌转化法 双子叶植物中常用方法

( 2 )基因枪法( 3 )花粉管通道法

单子叶植物常用的转化方法,成本较高我国独创的转化方法如:我国的转基因抗虫棉

三、转化受体细胞书 P16

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显微注射技术

注入的是含有目的基因的表达载体 是转基因动物中采用最多、最有效的一种将目的基因导入动物细胞的方法。

2、将目的基因导入动物细胞三、转化受体细胞

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用原核细胞作为受体细胞的原因?繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少等大肠杆菌应用最为广泛大肠杆菌细胞最常用的转化方法:Ca2+处理细胞→感受态细胞→重组表达载体DNA溶于缓冲液中与感受态细胞混合→在一定的温度下促进感受态细胞吸收 DNA 分子→完成转化过程。

3、将目的基因导入微生物细胞三、转化受体细胞

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四、筛选出获得目的基因的受体细胞是检查基因工程是否成功的一步

(一)首先要检测转基因生物染色体 上的 DNA 上是否插入了目的基因检测方法是 采用 DNA 分子杂交技术 DNA—DNA(二)其次,还需要检测目的基因是 否转录出了 mRNA这是检测目的基因是否发挥功能的第一步检测方法是 采用分子杂交技术 DNA—mRNA

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——检查是否成功

检测—

鉴定——

①检测转基因生物染色体的 DNA 上是否插入了目的基因②检测目的基因是否转录出了mRNA③检测目的基因是否翻译成蛋白质

抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等

方法——方法——方法——

DNA分子杂交分子杂交(注意与上不同之处)

抗原抗体杂交

四、筛选出获得目的基因的受体细胞

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DNA分子杂交示意图

采用一定的技术手段,将两种生物的 DNA分子的单链放在一起,如果这两个单链具有互补的碱基序列,那么,互补的碱基序列就会结合在一起,形成杂合双链区;在没有互补碱基序列的部位,仍然是两条游离的单链。

四、筛选出获得目的基因的受体细胞

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第二节 基因工程的应用一、基因工程的应用

二、转基因生物的安全性问题

三、生物武器的危害性

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1、抗虫转基因植物 —— 从某些生物中分离出具有杀虫活性的基因,将其导入作物中,使其具有抗虫性。 已问世的转基因抗虫植物主要有水稻、棉、玉米、马铃薯、番茄、大豆、蚕豆、烟草、苹果、核桃、杨、菊花和白花三叶草等。 用于杀虫的基因主要是: Bt毒蛋白基因 蛋白酶抑制剂基因 淀粉酶抑制剂基因 植物凝集素基因等 例如,我国转基因抗虫棉就是转入 Bt毒蛋白基因培育出来的,它对棉铃虫具有较强的抗性。

一、转基因植物

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2、抗病转基因植物 引起植物生病的微生物称为病原微生物,主要有病毒、真菌和细菌等。 目前,人们已获得抗烟草花叶病毒的转基因烟草和抗病毒的转基因小麦、甜椒、番茄等多种作物。用于抗病转基因植物的基因主要是: 病毒外壳蛋白( CP )基因 病毒的复制酶基因用于抗真菌转基因植物的基因主要是: 几丁质酶基因和抗毒素合成基因

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3、其它抗逆转基因植物 利用调节细胞渗透压的基因,来提高农作物的抗盐碱和抗干旱的能力。 将鱼的抗冻蛋白基因导入烟草和番茄,使烟草和番茄的耐寒能力均有提高。 将抗除草剂基因导入大豆、玉米等作物,喷洒除草剂时,杀死田间杂草而不损伤作物。 4、利用转基因改良植物的品质 将必需氨基酸含量多的蛋白质编码基因,导入植物中,或者改变这些氨基酸合成途径中某种关键酶的活性,以提高氨基酸的含量。富含赖氨酸的转基因玉米

Page 45: 生物 选修 3 现代生物科技专题

用基因重组蓝玫瑰

将控制番茄果实成熟的基因导入番茄,获得转基因延熟番茄。 将与植物花青素代谢有关的基因导入花卉植物矮牵牛中,转基因矮牵牛呈现出自然界没有的颜色变异。

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1、用于提高动物生长速度 将外源生长激素基因的表达可以使转基因动物生长得更快。 转生长激素基因鲤鱼 转生长激素基因绵羊

二、转基因动物

超级小鼠 转生长激素基因鲤鱼

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2、用于改善畜产品的品质 例如,有些人对牛奶中的乳糖不能完全消化或食用后会出现过敏、腹泻、恶心等不适症状,科学家将肠乳糖酶基因导入奶牛基因组,使获得的转基因牛分泌的乳汁,在其他营养成分不受影响的情况下,乳糖的含量大大减低。

乳腺生物反应器: 目前科学家已在牛和山羊等动物乳腺生物反应器中表达畜了抗凝血酶、血清白蛋白、生长激素和 α抗胰蛋白酶等重要医药产品。

3、用转基因动物生产药物

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4、用转基因动物作器官移植的供体 将器官共同基因组导入某种调节因子,一顿抑制抗原决定基因的表达,或设法除去抗原决定基因,在结婚克隆技术,培育畜没有免疫排斥反应的转基因克隆猪器官。

假如某位心脏病人换上了经过改造的猪的心脏,在生活中他会遭到歧视吗?

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这些药物包括细胞因子、抗体、疫苗、激素。如 胰岛素 、白细胞介素- 2 、干扰素、乙肝疫苗等近 20 种基因工程药物

基因治疗使把正常基因导入病人体内,使该基因的表达产物发挥功能,从而达到治疗疾病的目的,这是治疗遗传病的最有效的手段。

三、基因工程药物异军突起

四、基因治疗曙光初照 生产干扰素的车间

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体外基因治疗 先从病人体内获得某种细胞,进行培养,然后,在体外完成基因转移,再筛选成功转移的细胞扩增培养,最后重新输入患者体内。(效果较为可靠) 体内基因治疗 直接向人体组织细胞中转移基因的治病方法用于基因治疗的基因种类第一类 从健康人体上分离得到的功能正常的基因;第二类 反义基因第三类 编码可以杀死癌变细胞的蛋白酶基因,又称自杀基因

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4 蛋白质工程的应用

Page 52: 生物 选修 3 现代生物科技专题

一、蛋白质工程崛起的缘由 通过基因工程能够大规模生产生物体内微量存在的活性物质,并借助转基因而改变动植物性状,得以在人类医疗保健中进行基因诊断和基因治疗。然而在广泛利用自然界各种蛋白质的过程中就发现,这些蛋白质只是适应生物自身的需要,而对它们进行产业化开发往往不合意,需要加以改造。 1983年 Ulmer首先提出蛋白质工程,它是指按照特定的需要,对蛋白质进行分子设计和改造的工程。自此以后,蛋白质工程迅速发展,已成为生物工程的重要组成部分。

 

4 蛋白质工程的应用

Page 53: 生物 选修 3 现代生物科技专题

在已研究过的几千种酶中,只有极少数可以应用于工业生产,绝大多数酶都不能应用于工业生产,这些酶虽然在自然状态下有活性,但在工业生产中没有活性或活性很低。这是因为工业生产中每一步的反应体系中常常会有酸、碱或有机溶剂存在,反应温度较高,在这种条件下,大多数酶会很快变性失活。提高蛋白质的稳定性是工业生产中一个非常重要的课题。一般来说,提高蛋白质的稳定性包括:延长酶的半衰期,提高酶的热稳定性,延长药用蛋白的保存期,抵御由于重要氨基酸氧化引起的活性丧失等。

Page 54: 生物 选修 3 现代生物科技专题

例如 :干扰素是一种抗病毒、抗肿瘤的药物。将人的干扰素的 cDNA 在大肠杆菌中进行表达,产生的干扰素的抗病毒活性为 106 U/mg ,只相当于天然产品的十分之一,虽然在大肠杆菌中合成的 β-干扰素量很多,但多数是以无活性的二聚体形式存在。为什么会这样?如何改变这种状况?研究发现, β-干扰素蛋白质中有 3 个半胱氨酸(第 17位、 31位和 141位),推测可能是有一个或几个半胱氨酸形成了不正确的二硫键。研究人员将第 17位的半胱氨酸,通过基因定点突变改变成丝氨酸,结果使大肠杆菌中生产的 β-干扰素的抗病性活性提高到 108 U/mg ,并且比天然 β-干扰素的贮存稳定性高很多。

Page 55: 生物 选修 3 现代生物科技专题

“ 后基因组时代”将是“蛋白质组学时代”,即从对基因信息的研究转向对蛋白质信息的研究,包括研究蛋白质结构、功能与应用及蛋白质相互关系和作用。

蛋白质工程就是在对蛋白质的化学、晶体学、动力学等结构与功能认识的基础上,对蛋白质人工改造与合成,最终获得商业化的产品。

Page 56: 生物 选修 3 现代生物科技专题

二、蛋白质工程的基本原理

Page 57: 生物 选修 3 现代生物科技专题

蛋白质工程的主要步骤通常包括:蛋白质工程的主要步骤通常包括:( 1)从生物体中分离纯化目的蛋白;( 2)测定其氨基酸序列;( 3)借助核磁共振和 X射线晶体衍射等手段,尽可能地了解蛋白质的二维重组和三维晶体结构 ;( 4)设计各种处理条件,了解蛋白质的结构变化,包括折叠与去折叠等对其活性与功能的影响;( 5)设计编码该蛋白的基因改造方案,如点突变;( 6)分离、纯化新蛋白,功能检测后投入实际使用。

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(一)蛋白质的分子设计与改造 蛋白质工程首先是以蛋白质的结构为基础,通过蛋白质的一级结构、晶体结构和溶液构象的研究,积累了成千上万蛋白质一级结构和高级结构的数据资料,并编制成系统的数据库,得以从中找出蛋白质分子间的进化关系、一级结构和高级结构的关系、结构与功能的关系方面的规律。

Page 59: 生物 选修 3 现代生物科技专题

蛋白质作为生物大分子是生物化学和分子生物学的研究重点,大量蛋白质被分离纯化,测定了它们的结构、性质和生物学作用。分子生物学有关基因组的研究,也可以用以推测出一些未知蛋白质的结构与功能。采用定位诱变的方法,可以对编码蛋白质的基因进行核苷酸密码子的插入、删除、置换和改组,其结果为分子改造提供新的设计方案。现有的蛋白质是生物长期进化的结果,蛋白质工程则是对生物进化的模拟,按照蛋白质形成的规律,改造蛋白质或构建新的蛋白质。 蛋白质的改造通常需要先经周密的分子设计,然后依赖基因工程获得突变型蛋白质,以检验其是否达到了预期的效果。如果改造的结果不理想,还需要从新设计再进行改造,往往经历多次实践摸索才能达到改进蛋白质性能的预定目标。

Page 60: 生物 选修 3 现代生物科技专题

(二)蛋白质改造工程举例1.水蛭素改造水蛭素是水蛭唾液腺分泌的凝血酶特异抑制剂,它有多种变异体,由 65或 66 个氨基酸残基组成。水蛭素在临床上可作为抗栓药物用于治疗血栓疾病。为提高水蛭素活性,在综合各变异体结构特点的基础上提出改造水蛭素主要变异体 HV2 的设计方案,将 47位的 Asn (天冬酰胺)变成 Lys (赖氨酸),使其与分子内第 4或第 5位 Thr (苏氨酸)间形成氢键来帮助水蛭素 N 端肽段的正确取向,从而提高凝血效率,试管试验活性提高 4倍,在动物模型上检验抗血栓形成的效果,提高 20倍。

Page 61: 生物 选修 3 现代生物科技专题

2.生长激素改造生长激素通过对它特异受体的作用促进细胞和机体的生长发育,然而它不仅可以结合生长激素受体,还可以结合许多种不同类型细胞的催乳激素受体,引发其他生理过程。在治疗过程中为减少副作用,需使人的重组生长激素只与生长激素受体结合,尽可能减少与其他激素受体的结合。经研究发现,二者受体结合区有一部分重叠,但并不完全相同,有可能通过改造加以区别。由于人的生长激素和催乳激素受体结合需要锌离子参与作用,而它与生长激素受体结合则无需锌离子参与,于是考虑取代充当锌离子配基的氨基酸侧链,如第 18 和第 21位 His (组氨酸)和第 1

7位 Glu (谷氨酸)。实验结果与预先设想一致,但要开发作为临床用药还有大量的工作要做。

Page 62: 生物 选修 3 现代生物科技专题

3.胰岛素改造 天然胰岛素制剂在储存中易形成二聚体和六聚体,延缓胰岛素从注射部位进入血液,从而延缓了其降血糖作用,也增加了抗原性,这是胰岛素 B23-

B28氨基酸残基结构所致。利用蛋白质工程技术改变这些残基,则可降低其聚合作用,使胰岛素快速起作用。该速效胰岛素已通过临床实验。 

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4.治癌酶的改造 癌症的基因治疗分二个方面:药物作用于癌细胞,特异性地抑制或杀死癌细胞;药物保护正常细胞免受化学药物的侵害,可以提高化学治疗的剂量。疱疹病毒( HSV )胸腺嘧啶激酶( TK )可以催化胸腺嘧啶和其它结构类似物磷酸化而使这些碱基 3’-OH缺乏 , 从而阻断 DNA 的合成,杀死癌细胞。 HSV—TK催化能力可以通过基因突变来提高。从大量的随机突变中进行筛选出一种酶 , 在酶活性部位附近有 6 个氨基酸被替换,催化能力 20倍以上。蛋白质工程的发展很快,研究工作很多,以上仅介绍了几个例子。蛋白质工程除了用于改造天然蛋白质或设计制造新的蛋白质外,其本身还是研究蛋白质结构功能的一种强有力的工具,它在解决生物理论方面所起的作用,可以和任何重大的生物研究方法相提并论。

Page 64: 生物 选修 3 现代生物科技专题

何谓蛋白质工程? •  在现代生物技术中,蛋白质工程出现得最晚,是在 20世纪 80 年代初期出现的。 1983年 “蛋白质工程”这个名词出现后,随即被广泛接受和采用。蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础 ,通过基因修饰或基因合成 , 对现有蛋白质进行改造 ,或制造一种新的蛋白质 , 以满足人类的生产和生活的需求。

Page 65: 生物 选修 3 现代生物科技专题

三、蛋白质工程的进展和前景 蛋白质工程汇集了当代分子生物学等学科的一些前沿领域的最新成就,它把核酸与蛋白质结合、蛋白质空间结构与生物功能结合起来研究。蛋白质工程将蛋白质与酶的研究推进到崭新的时代,为蛋白质和酶在工业、农业和医药方面的应用开拓了诱人的前景。蛋白质工程开创了按照人类意愿改造、创造符合人类需要的蛋白质的新时期。

Page 66: 生物 选修 3 现代生物科技专题

1、基因工程

2、蛋白质工程

( 1 )基本工具( 2 )基本操作程序( 3 )应用

专题 1 基因工程

Page 67: 生物 选修 3 现代生物科技专题

A1 、 DNA 的基本功能是使遗传信息得到A. 传递和表达 B. 储存和复制C. 转录和翻译 D. 复制和翻译

A2 、对比 RNA 和 DNA 化学成分, RNA 特有的是A. 核糖和尿嘧啶 B. 脱氧核糖和尿嘧啶C. 核糖和胸腺嘧啶 D. 脱氧核糖和胸腺嘧啶

D3 、 DNA 分子的解旋发生在哪一过程中A. 复制 B. 转录C. 翻译 D. 复制和转录

习题训练

Page 68: 生物 选修 3 现代生物科技专题

B4 、组成 DNA 和 RNA 的核苷酸、五碳糖和碱基各共有

A. 8 、 8 、 8种 B. 8 、 2 、 5种C. 2 、 2 、 4种 D. 2 、 2 、 8种B5 、小麦的遗传物质由几种核苷酸组成

A. 2种 B. 4种 C. 5 种 D. 8种D6 、以下哪项对 RNA 来说是正确的

A. C+ G= A+ UB. C+ G> A+ UC. G+ A= C+ UD. 前三项都不对

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9 、已知一段双链 DNA 分子中,鸟嘌呤所占比例为 20% ,由该 DNA 转录出来的 RNA 中,其胞嘧啶的比例是A. 10% B. 20% C. 40% D. 无法确定

D

8 、某信使 RNA 的碱基中, U占 19% , A占 21% ,则作为它的模板的 DNA 中,胞嘧啶占全部碱基的A. 21% B. 19% C. 60% D. 30%

D

7 、某信使 RNA 上, A 的含量是 24% , U的含量是 26% , C 的含量是 27% ,则控制其合成的模板链中 G 的含量为A. 23% D. 24%B. 25% C. 27%

C

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A

11 、有 3 个核酸分子,经分析共有 5 种碱基,8 种核苷酸, 4 条多核苷酸链,它的组成是

A. 一个 DNA 分子,两个 RNA 分子B. 两个 DNA 分子,一个 RNA 分子C. 三个 DNA 分子D. 三个 RNA 分子

B10 、某一核酸分子,碱基 A数量为 52% ,该核酸分子是

A. 只是 DNA 分子B. 单链 DNA 分子或 RNA 分子C. 只有 RNA 分子D. 双链 DNA 分子或 RNA 分子

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7 、碱基数、氨基酸数计算DNA mRNA

转录 翻译蛋白质

碱基个数n

碱基个数n2

n2 3

n6

氨基酸个数

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例:由 n 个碱基组成的基因,控制合成一条多肽链组成的蛋白质,氨基酸的平均相对分子质量为 a ,则该蛋白质的现代分子质量最大为A.a/6 B.a/3-18(n/3-1)C.na-18(n-1) D.na/6-18(n/6-1)

D

Page 73: 生物 选修 3 现代生物科技专题

1 、在遗传信息的转录和翻译过程中,翻译者是 A. 基因 B. 信使 RNA C. 转移 RNA D. 遗传密码

3 、下列关于遗传密码的叙述中,错误的是 A. 一种氨基酸可能有多种与之对应的遗传 密码 B. GTA肯定不是遗传密码 C. 每种密码都有与之对应的氨基酸 D. 信使 RNA 上的 GCA 在人细胞中和小麦细 胞中决定的是同一种氨基酸

C

2 、复制、转录、翻译的场所依次是 A. 细胞核、细胞核、核糖体 B. 细胞核、细胞质、核糖体 C. 细胞核、细胞核、高尔基体 D. 细胞核、细胞质、线粒体

A

C

习题训练

Page 74: 生物 选修 3 现代生物科技专题

B4 、由密码子表可知A. 密码子是 DNA 的成分B. 一个密码子只能代表一种氨基酸C. 密码子可以代表遗传物质D. 密码子存在于细胞核中

A5 、如果细胞甲比细胞乙 RNA含量多,可能的原因是

A. 甲合成的蛋白质比乙多B. 乙合成的蛋白质比甲多C. 甲含的染色体比乙多D. 甲含的 DNA比乙多

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D

6 、构成蛋白质的氨基酸有 20 种,则决定氨基酸的密码子和组成密码子的碱基种类分别有A. 20 种和 20种 B. 64 种和 20种C. 64 种和 4种 D. 61 种和 4种

B

7 、控制合成胰岛素(含 51 个氨基酸)的基因中,含有嘧啶碱基至少有A. 306个 B. 153个 C. 102个 D. 51个

C

8 、某 DNA 片段中有 1200 个碱基对,控制合成某蛋白质,从理论上计算,在翻译过程中,最多需要多少种转移 RNA参与运输氨基酸A. 400 B. 200 C. 61 D. 20

Page 76: 生物 选修 3 现代生物科技专题

11 、一条多肽链含有氨基酸 2000 个,则作为合成该多肽链模板的信使 RNA 分子和用来转录信使 RNA 的 DNA 分子分别至少要有碱基(含终止密码子) A. 6003 和 6006 个 B. 6003 和 12006 个 C. 3003 和 6006 个 D. 5003 和 8006 个

10 、构成蛋白质的氨基酸种类约有 20 种,则决定氨基酸的密码子和转运氨基酸的 RNA 种类分别约有 A. 20 种、 20 种 B. 64 种、 20 种 C. 64 种、 64 种 D. 61 种、 61 种

9 、科研人员用鸟嘌呤、腺嘌呤和胞嘧啶三种碱基人工合成 mRNA 分子,请分析该mRNA分子包含的密码子的种类最多有 A. 8 种 B. 9 种 C. 64 种 D. 27 种 D

D

B

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12 、下列关于 DNA 、 RNA 和性状遗传的四种说法,正确的是 A. 一种转移 RNA 能够转运一种或几种不同 的氨基酸 B. 信使 RNA 上的每个遗传密码只能决定一 种氨基酸 C. 如果用尿嘧啶将 DNA非模板链上的所有 胸腺嘧啶替换下来,那么这条链在化学 组成上同 RNA 就一致了 D. 子代之所以相似于亲代,是由于亲代个 体能够将其性状直接传递给子代

B

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13 、已知一个双链 DNA 分子中碱基 A占 30%,其转录成的信使 RNA 上的 U 为 35%,则信使 RNA 上的碱基 A 为 A. 30% B. 35% C. 40% D. 25%

D

14 、已知一段信使 RNA 上有 12 个 A 和 G ,该信使 RNA 上共有 30 个碱基。那么转录成信使 RNA 的一段 DNA 分子中应有 C 和 T A. 12 个 B. 18 个 C. 24 个 D. 30个

D

总 (A+T)%= (A2+T2)%=RNA 中 (A+U)%