c148.206.53.84/tesiuami/UAM20487.pdf · en la estructura cmo en la foiu de las propias cÓlulas. Para poder resultar UM buena substancia fijadora. es necesario que presenta las

.. c . * *

Prepanc ih de Raterla1 MUó$ico c a c caitribraión

a la docenoia de la O.A.M. I.

I

JIumEZm: 31 u t e r i a l Mol6gico resulta de gnn importancia tanto en dwetb?ia cam0

en investigación.

Para l a elaboración de t a l material, existen una serie de etaaas, que a l

f inal dan como resultado una ser le de venaraclanes f l j a s - Ta l e s etapas SOD:

1. njac ión .

2. Inclusión.

?. Microtanfa.

4. Tinción.

5. Deshidratacl6n.

6. Aclaranlento.

7. Montaje.

1. La f l jación es un -roceso usado para D r w w a r l a muerte de l a s chu las ,

con e l fln de cawervar l o aejor oosible l a s caractedsticas morfoi6gicas.

Los fljadoras actúan sobre e l urotaplasu de l a s cdlulas, l o transforman

en geles insolubies uara lograr producir l a s -noms nodificaciaies tanto

en l a estructura cmo en l a f o i u de l a s propias cÓlulas. Para poder resultar

UM buena substancia fijadora. es necesario que presenta l a s siguientes ow-

lidades :

A) Rapides de nenetracibn, necesaria para lograr l a fijación de l a s cÓ-

lulaa de l a s %mas externa e interna en e1 menor tierno posible.

B) hnldea de ao c ih , que consiste en cceguiar a i coloide celular en mi

tierno tan a f l n de nue no came alteraciaies en l a s oamctedsticas

norioiógícas.

C) UH (gradisnte de oridorredwcidn). Ds -ireismacia. uaar un fijador que

presente M .JH ácido. ya que o-e Monos resultados.

D) Los f i j o d a e s deben de ser substancias que no interi lemn de alguna

manera en l a s etapas posterlaes.

Lns fi jadores sa i substancias quhlcas de composicikr variable, p qua

pueden ser de un solo t h o o bien estar foxmado de la mmia de varías sub2

tandas. En tdcnioas vegetales, e l f i jador d s usado es e l que se prepara

a base de alcohol, como e l F.A.A.

F6rnaila del P.A.A.

Alcohol de 960 5O ail.

Acid0 acdtico glacial --------- 5 d.

Formo1 canerclal ( a l 40%) ------ 10 rl.

Agua destilada ---------------- 75 d.

Este f i jador omsenta una efectiva aocibn endureoedoni y e l mmterial ve-

getal se mede conservar nor un tiempo indetedando.

2. La iaclusi&, cuando es necesaria. es otra de lea etapas que tienen

la finalidad de cmservar a b s estructuras en estudio, dentro de una subs_

tsncia pldstioa y de esta manera se puede manipular vara la realizacibn de

10s C h S .

3. La ndcrotcda, consiste en cortar en diferentes pianos a1 tej ido que

se encuentra o no Incluido. E l material se seociaia aediante un aparato de-

nominado nicr6tano. qua n r qomia i a cortes cuyo grosor se nide en micras;

l o s micrótmos que d s se van a elpiear am los siguientes:

A) PILcldtuno de rotación. Posee una cucMlla Innbrll y horlsmtal, iden-

tras que la e a t w t u r a norfo1ógio.a incluida se f l j a a una qlanta mó-

v i l vertical, quedando en nosic%& perpendicular a l a cuch i l l q de rg

n e n que a l mworsq hacia arrlba o hacia abajo nasa 701. e l borde de e l la .

Esto se logra aocimando oor ro tad& una man3rei.a. E 3 bl6que de inolu-

si& av*nsc en + 'om autodtica hacia la cuchilla, d e s d s de cede &e.

por M A I O de un nrc-nlmo wedaaente ajilstado, m e <?)or l o general9

cmr-nde cortes de 1 a 25 nicras.

B) Mlcrbtomo de caigelamiento. bmsb de una 7htiM alimntada par M

agente congelante y una navaja que se OTO horismtalnente y que se

acerca a l material por seacionar un nlbsro de d o r a s regulado p n un

cslibrador. b s saocion*s que se logran son do 5 a 50 nioras. Ir es-

tructura norfoidgica so monta en la niatina con una solución a?roDiada,

como \u?de ser l a de a d c a r a l 5 6 . E l agente congelante so hace cir-

cular desde 01 cil lndro nus l o contime hasta l a -.latins, donde qri-

moro enfrfa y d e s d s congqla a la estructura y a l a ao luc ih que l a

rodea, forundo un bloque de hielo.

4. ia tinción as ia otaaa ocnsistento ea exaltar l a s estrücturas ids iu

portantes de l o s t e j i d w vegetales, a través de las Irmiedades de los colo-

rantes.

5. La deshidrataci6n consiste en elindnar e l agua que se encuentra en

k s oÓlulas: dicha etapa se wede efectuar con la ayuda de substancias de2

hfdratentes, kl os e l caso del alcohol.

La etapa consiste, on hacer pasar loa cortes a t r d s de alcoholes de

diferente canoentraci6n y mediante un tiempo detendnado cada uno de el los :

se debede iniciar con los do ienor cmcontracibn hasta l l egar a l alcohol

absoluto.

Para canrobar s i 01 t e j i i o se .rncumt a a -w f r c t o estado do deshidra-

t e o i h , debe do -.onem* una wque-8 gata d- x i l o l : s i 1 4 mezcla se torna de

color 1-choso, se indica niie o1 tej ido se encuentra aún hidratado y ?or l o

tanto debo de iniciarse do nunva cuenta l a etana de deshidrht~cibn.

6. g i aoiaradento es l a * t a w siguimnte, y -onsiste en aiicicnar d i o l

a los cortes ?are obt-nor una imagen de mayor .irocisión.

7. E l montaje es l a Ú l t ima etma a desrrrollar, se e f s c t b con l a f i n a l l -

dad de lograr de que l a s estructuras morfológícas so conserven durante un

tioapo indefinido y de esta aanera ovitar que se deformen o destruyan.

i1 ...___I..

. . .*

81 montaje ?enmne&b, necesita un mdio de nontaje que no se evanore p

que conserve al u t e r i a l biol6glco en caidiciaies adecuadas mra an obser-

r a c i h durante mcho t iewo . Estos tmdlw, deben seoar y dejar sellada l a

prepamcida. dos nsdiw muy buenos son l a resina sintdtica y e l bálsamo de

Canadá.

-

. t

QuE€?mi: - Prenaraoibn , tinct& y montaje de estructuras anatdaicas y

morfol6ghas en diferentes ejemiares vegetales.

- Elaboracih de material visual.

J”IFTCACIQt :

Contribuir en el acervo de material diddctico destinado a la

docencia.

Laboratorio de dorrencia de Bíoiogía rli la U.A.M. I.

1. ReoopiLci6n MbliográPica de diferentes tdcnicas emleadas

en la elaboración de material bioibgico.

2. Entrenamiento en e l uso del equipo empleado en dichos tdcnioas.

3. Elaboraolón de colorantes.

4. Preparacibn, tincidn y montaje de una gran diversidad de

estructuras existentes en l a s diferentes espeoies vegetales.

5. Etiquetado y registro de l a s greaarsoiaies.

6. Arreglo de las ereparacinies ?ara l a elaboraci6n 39 uterial

ViSU?L.

.. I .

1-5 horas a l a aemna.

3 de Octubre de 1980.

30 de Abril de 1901.

#,

Maria sugenla b a i l s Ortega.

Abrahan Kobelkwak% D.

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37

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U N I V E R S I D A D A U T O N O M A M E T R O P O L I T A N A

I Z T A P A L A P A

P R E P A R A C I O N M A T E R I A L B I O L O G I C 0

C O M O L A D O C E N C I A

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D E L A U N I V E R S I D A D A U T O N O M A M E T R O P O -

L I T A K A I Z T A P A L A P A

+Jo&4eets: / P A T R I C I A O R D O m Z CAMACHO

J O S E FERNANDO M A R T I N E Z HERNANDEZ

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R E P O R T E F I N A L D E S E R V I C I O S O C I A L

TITULO :

Preparación de materia l b io lbg ico como contribución

a l a docencia de l a Universidad Autbnoma Netropolitaaa

Iztapalapa.

NOKBRES MATRICUIAS:

P a t r i c i a Ordbñez Camacho 76319230

José Fernando Martinez Hernández 76318879

B ib l . Maria E u k e a i l e Ortega.

ASESOR :

Bib l . Abraham Kobelkorsky Díaz.

FECHA DE IRICIO: -- 30 de Octubre de 1980.

-- FECHA DE TERMINACION:

30 de Octubre de 1981.

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2. Técnica para t a l l o s , hojas, r a í c es y embriones (Safranina-Ver 21 de rápido) _ _ _ _ _ _ _ _ _ - - - _ _ _ _ - - - - - - -

bcida- _ _ _ _ _ - _ _ - _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ - _ _ 26 a lcohbl ica a l 1% 1 _ _ - _ _ _ _ _ - - _ _ _ _ _ - _ - - - _ _

--- 3. Téc i i ca para granos de polen ( v i o l e t a cr is ta l -h ics ina

24

4. Técnica para embriones y t a l l o ( A z u l de Toluidina

111. Anatomía vege ta l descr ipt iva .

IV. in terpretac ión de preparaciones f i j a s _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ 60

V. R e h C i d B de transparencias _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ 78

Conclusione 8

Apéndice - -

B i b l i o g r a f í a

82

84

88

c

Preparación de material b io lóg ico como contribu - ción a l a docencia de l a Universidad Autónoma Metro-

politana Iztapalapa.

- preparación, t inción y montaje de t e j i dos y órga-

nos en diversos ejemplares vegetales.

- Elaboración de material visual.

- 5 -

E l mater ia l b i o l óg i co resu l ta de gran importancia tanto en docencia

como en l a invest igac ión.

Para l a elaboracibn de t a l mater ia l , existen una serie de etapas,

que a l f i n a l dan como resultado una s e r i e de preparaciones en forma per

manente; t a l e s etapas son :

1. Fi jac ión.

2 . inclusión.

3. Microtomla.

4. Tincibn.

5. Deshidratación

6. Aclaramiento

7. Montaje.

1. FIJACIOTI.

F i j a r consiste en matar l o más rápidamente pos ib le a una cé lu la ,

con e l f i n de que sus ca rac t e r í s t i cas morfolágicas no cambien y de que

no aparezcan o t ras di ferencias. Para lograr es t e proceso se u t i l i z a n

unas substancias denominadas f i j ado res ; los f i j ado res que mejor actúan

son los que penetran rápidamente y producen las menores modificaciones

en l a forma y en l a estructura de las células.

- 6 -

La accibn de los f i j ado res e s transformar e l co lo ide protopasmático

en g e l e s inso lubles e i r r e ve r s ib l e s , actúan so l i d i f i cando e l protopias

ma por medio de coagulación o de precipitación. Los resultados de l a

f i j a c i 6 n serán menores cuando más v iscoso sean los co lo ldes protoplag

máticos, e s dec i r , entre más denso e s un co lo ide mejor se conserva.

Los f i j ado r e s son substancias químicas orgánicas o inorgánicas que

pueden ser de un solo t i p o o bien es tar formadas por l a mezcla de va - r i a s substancias.

Para poder resu l tar una buena substancia f i j adora , e s necesario

que presente l a s s iguientes cualidades:

A. Rapidez de penetración, necesaria para l ograr l a f i j a c i ó n de l a s

cé lu las de l a s zonas exteana e interna en e l menor tiempo posi - ble .

B. Rapidez de accibn, que consiste en coagular a l co lo ide c e lu l a r

en un tiempo t a l a f i n de que no cause a l t e rac iones en l a s ea - r a c t e r í s t i c a s morfoibgicas.

C. pH (gradiente de oxidorreduccibn). De preferencia, usar un f i -

jador que presente un pH ácido, ya que o f rece buen-os resul ta - dos.

D. Los f i j ado res deben de ser substancias que no i n t e r f i e r an de a l -

guna manera en l a s etapas poster iores a esta metodología.

Para poder r e a l i z a r una per fecta f i j a c ibn , e s necesario tomar en

cuenta l o s , s i gu i en t e s requ is i tos :

A. Los cor tes de l o s t e j i d o s que se van a f i j a r , no deben de exce-

crk: " . 7

- 7 - der de más de un centímetro cuadrado, para que los f i j ado res 10-

gren penetrar y actuar en un tiempo muy reducido.

B. La e l ecc ión d e l f i j a d o r determinará que los resultados sean o no

pos i t ivos .

C. E l volumen d e l f i j a d o r debe de s e r por l o menos 50 veces mayor

que e l volumen de l a pieza.

D. E l mater ia l que se va a f i j a r debe permanecer e l tiempo adecua-

do. Prolongar e s t e tiempo causará endurecimiento mayores y , a - demás, puede i n f l u i r en e l proceso de l a microtomfa y de l a t in

cibn.

E. La temperatura debe de ser l a d e l medio ambiente.

F. E l r ec ip i ente que contenga a l f i j a d o r debe es tar perfectamente

cerrado, debido a que e l f i j a d o r e s v o l á t i l y a s í se e v i t a r í a

d i sminu i r su concentración.

G. Una vez terminado e l periodo de f i j a c i ó n hay que el iminar e l

exceso de f i j a d o r con agua cor r i ente o dest i lada, para impedir

que e l f i j a d o r impregnado en e l t e j i d o s iga actuando.

Para l a rea l i zac ibn de l a s preparaciones d e f i n i t i v a s , se debe de

f i j a r antes de hacer los cortes , para e v i t a r que los t e j i d o s se con - traigan. En técnicas vege ta l es i e l f i j a d o r más usado e s e l que se p r e

para a base de alcohol, t a l e s e l caso d e l F.A.A. (formol-aceto-a1coho.R).

Fórmula d e l F.A.A.

Alcohol de 96' - - - - - - - - - - - 50 ml.

Acid0 a c é t i c o g l a c i a l --------------- 5 ml. Formo1 comercial ( a l 40%) ----------- 10 m l .

35 m l . Agua dest i lada ......................

- a - Este f i j a d o r t iene una e f e c t i v a acción endurecedora y e l mater ia l ve

g e t a l se puede conservar p o r un tiempo indeterminado.

2. INCLUSION.

la inclusidn e s o tra de l a s etapas que t ienen l a f i na l i dad de con-

servar l as p iezas por estudiar en e l i n t e r i o r de alguna substancia '1

que penetre hasta l o más interno de l a s estructuras celulares. De es-

t e modo se obtienen bloques f á c i l e s de manejar, dentro de l o s cuales

estan los t e j i d o s orientados en e l plano deseado.

Una vez incluidos, los t e j i d o s adquieren una consistencia t a l que se

puedan co r ta r en secciones sumamente delgadas sin modi f icar l a forma

y l a estructura d e l t e j i d o .

La inclusión se puede r e a l i z a r en parafina, ge lat ina, ce lo id ina,

cubos de h i e l o y muchos otros medios.

3. MICROYOMU.

La microtomla consiste en co r ta r en d i ferentes planos a los t e j i d o s

y órganos que se encuentran o no inc luidos; a l ser cortados, e s necesz

r i o que conserven los su f i c i en t es d e t a l l e s para BU estudio microsc6pi-

co y más tarde su i d e n t i f i c a c i h . E l mater ia l se secciona mediante un

aparato denominado microtomo, que proporciona co r t e s cuyo grosor se

mide en micras.

Existen va r i o s t i pbs de microtomos y entre los más usados se encueg

tran :

a. Microtomo de mano. b. Microtomo de mesa.

c. Microtomo de deslizamiento.

- 9 -

d. Microtomo de r o t a c i b n .

e . Microtomo de congelamiento.

a. Microtomo de mano.

C o n s i s t e en una p l a t i n a m e t á l i c a o de v i d r i o , con una cavidad cen - tral. La p l a t i n a e s t á firmemente montada sobre un c i l i n d r o hueco, den-

t r o d e l c u a l hay un c i l i n d r o ~ 6 l i d o que puede moverse por un mecanis - mo de t o r n i l l o que hace s a l i r a l o b j e t o sobre l a p l a t i n a .

Los c o r t e s se hacen psando sobre l a p l a t i n a e l borde a f i l a d o de una nE

v a j a de mano.

b.

ES

banco

de l a

Microtomo de mesa.

semejante a l a n t e r i o r , sólo d i f i e r e en que pueden a j u s t a r s e a un

o a una mesa, de manera que s e o b t i e n e un mejor c o n t r o l manual

navaja.

Algunos m a t e s i a l e s , como es e l c a s o de las r a í c e s y t a l l o s , f á c i l m e g

te pueden c o r t a r s e e n delgadas s e c c i o n e s colocaltdo un fragmento en e l

c i l i n d r o d e l microtomo. Pero hay o t r o s materiales, como 'las h o j a s de

U H árbo l o los p é t a l o s de una f l o r , son muy delgados y no s e podrían

c o r t a r d i r e c t a m e n t e , en e s t o s c a s o s s e hace un c l i a d r o de zanahor ia ,

s e c o r t a a la m i t a d , se c o l o c a la h o j a e n t r e la hendidura y se f i j a en

e l hueco d e l microtomo, haciéndose los c o r t e s .

c. Microtomo &

En e s t e t i p o de

en la p l a t i n a y la

d e s l i zamient o.

microtomo, e l 6rgano o t e j i d o puede permanecer f i j o

c u c h i l l a s e c c i o n a los c o r t e s , o b i e n la c u c h i l l a e s

- 10 - l a que permanece f i j a y e l t e j i d o es e l que se hace pasar por su borde

para e fectuar los cor tes que se logran de 5 a 50 micras. Este aparato

se acciona en sentido hor izonta l y no a t ravés de engranes o placas,

como en e l caso d e l microtomo de rotacibn.

d. Microtorno & rotacibn.

Posee una cuch i l l a inmbvil y hor izontal , mientras que e l t e j i d o io c lu ido se f i j a a una p lat ina móvil v e r t i c a l , quedando en posic ión per - pendicular a l a cuchi l la , de manera que a l moverse hacia arr iba o ha-

c i a abajo pasa p o r e l borde de e l l a . Esto se logra accionando por ro-

tación una manivela. E l bloque de inclusibn avanza autodticamente h&

c i a l a cuchi l la , después de cada cor te , por medio de un mecanismo pre

viamente ajustado, que por l o general comprende cor tes de 1 a 25 mi - cras.

e. Microtorno be congelamiento.

E l microtomo de congelamiento consta de una plat ina alimentada por

un agente congelante ( C O Z ) y una navaja que se mueve horizontalmente,

ésta se acerca a l mater ia l por seccionar mediante l a acción de una

manivela. E l agente congelante se hace c i r cu l a r desde e l c i l i n d r o que

l o contiene hasta l a plat ina, donde primero se en f r í a y después con - g e l a e l mater ia l a l cual previamente se l e ha colocado agua hasta fog

mar un bloque de h ie lo . Dicho bloque asciende en forma automática a l

accionar l a cuch i l l a y de esta manera se hacen los cor tes y se recogen

con p ince les f i n o s y más tarde se colocan en un recipiemte con agua.

E l número de micras e s regulado por un cal ibrador y l a s secciones es-

tarán entre un l ím i t e de- 1 a 50 micras.

. -

6

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m

1

1

- 11 - 4. TINCION.

La t inc i ón e s la etapa consistente en e xa l t a r l a s estructuras más

Importantes de los t e j i d o s vegeta les a t ravés de l a s propiedades de los

colorantes.

Existen dos t e o r í a s para exp l i car la coloración, una de caracter

f í s i c o y

de demostrar cómo penetran los colorantes y cómo se f i j an . La penetra-

c ión d e l colorante e s aceptada como un fenómeno osmótico, pero su f i -

jac ión, según l a t e o r í a f í s i c a , se debe a fenómenos de adsorcibn (ad-

sorc ión e s l a propiedad de los cuerpos s ó l i d o s de a t r a e r hacia e l l o s

part ícu las minÚsculas d e l mater ia l l i qu ido que les rodea; es tas part í -

culas pueden s e r compuestos o iones). Ln t e o r í a química atribuye e s t e

proceso a l a unión entre l a s moléculas d e l colorante con los elemen-

t o s constituyentes d e l t e j ido . E l pr inc ip io base de es ta t e o r í a con-

s i s t e en que c i e r t a s regiones ce lu lares t ienen un pB a l c a l i n o y se

ti f ien con los colorantes básicos. Una t e r c e r t e o r í a un i f i ca a l a s an-

t e r i o r e s y exp l i ca que los fenómenos de t inc ión se deben a procesos

f í s i c o s g químicos que interactúan durante e s t e proceso.

o t ra de caracter quimico. Las dos se enfrentan a l problema

A s í mismo, los colorantes se c l a s i f i c a n en ácidos, básicos, anfb-

t e r o s y neutros.

Un colorante ác ido e s aquel en e l que l a propiedad de t eñ i r res ide ea

e l anión (Valencia negativa).

Un colorante básico e s e l que t iene l a propiedad de co lorear con e l

grupo cat idn (Valencia posi t iva) . Ambos colorantes preservan su natu-

r a l e z a aniónica o cat ión ica dentro d e l l ím i t e normal d e l pA usado en

- 12 - l a c o l o r a c i ó n .

Los c o l o r a n t e s a n f ó t e r o s son los que, de acuerdo con e l pH s e com-

portan como a n i b n i c o s o c a t i b n i c o s ; e s t e pH c r i t i c o r e c i b e e l nombre

de punto i s o e l é c t r j co.

Un c o l o r a n t e n e u t r o generalmente e s t á formado de un solo compuesto

der ivado de o t r o á c i d o o b á s i c o en e l cual t a n t o l a p a r t e a n i ó n i c a co-

mo la c a t i ó n i c a son c o l o r a n t e s .

Los c o l o r a n t e s son c a t - i o n e s a b a j o de su punto i s o e l é t r i c o y a n i o -

su punto i s o e l é c t r i c o , de modo que e l pH de la s o l u c i ó n n e s sobre

que contengan a los c o l o r a n t e s e s muy importante , pues determina s i

obra o no sobre las p a r t e s c e l u l a r e s como á c i d o o como base .

Por o t r o l a d o , e x i s t e n una s e r i e de f a c t o r e s que i n t e r v i e n e n fueg

temente en la t i n c i ó o , e n t r e e s t o s f a c t o r e s s e pueden mencionar los

s i g u i e n t e s :

A.

B.

C.

D.

E.

F.

Pureza de los c o l o r a n t e s .

Concentración d e l c o lornnte .

pH de la s o l u c i d n d e l c o l o r a n t e .

Temperatura d e l medio ambiente.

S u b s t a n c i a s a d i c i o n a l e s .

Tiempo de c o l o r a c i ó n .

51 DESHIDRATACION.

La d e s h i d r a t a c i ó n c o n s i s t e en e l i m i n a r e l agua que s e encuentra

en las c é l u l a s ; d i c h a e t a p a s e puede e f e c t u a r con la ayuda de substag

- 13 - L..

-- c i a s deshidratantes, t a l e s e l caso d e l a l coho l en d i f e rentes concen - .-"

b traciones.

- La etapa consiste , en hacer pasar los co r t e s obtenidos con anter io-

r idad, a t ravés de a l coho les de d i f e r en t es concentraciones y durante

determinado tiempo en cada uno de e l l o s ; se debe i n i c i a r con los de

menor concen t rac ih ( en es te estudio se i n i c i b l a deshidratación con

a l coho l d e l 60%), hasta l l e g a r a i a l cobo i absoluto.

Para comprobar s i e l t e j i d o se encuentra en per f ec to estado de des

hidratacibn, debe de ponerse sobre un portaobjetos, e l cor te con una

pequeña gota de a l coho l absoluto y posteriormente una gota de x i l o l ;

s i l a mezcla se torna de c o l o r lechoso, e s t o indica que e l t e j i d o aún

se encuentra hidratado y debe i n i c i a r s e nuevamente l a deshidratacibn.

Se puede e v i t a r una mala deshidratación haciendo pasar a l t e j i d o a

t ravés de 3 cambios de 5 minutos en cada uno de los alcoholes gradua-

l e s ( es te tiempo puede var ia r según e l t e j i d o u órgano a tratar ) .

6. ACURAMIENTO.

E l aclaramiento e s l a etapa s iguiente , y consiste en ad ic ionar x i -

l o 1 a los co r t e s de esta manera puede conseguir una i d g e n de más c la-

r idad y precisión.

7. MONTAJE.

El montaje es l a Última etapa a desarro l la ry se e fectúa con l a f i -

nalidad de l ograr que los t e j i d o s se conserven durante un tiempo inde-

f i n i d o y de es ta forma e v i t a r que se destruyan.

E l montaje permanente necesi ta de un medio que reuna los s iguientes

requ is i tos :

A. No se evapore.

B. Conserve a l mater ia l b i o l ó g i c o en condiciones adecuadas para l a

observación durante mucho tiempo.

C. Debe de tener e l mismo fndice de re f racc ibn que el ob je to monta-

do, es te índ ice e s de aproximadamente 1.54 para l a s cé lu las y

t e j i d o s que han s ido f i j a d o s y aclarados.

Los medios de montaje deben de secar y de jar bastante bien sel lada

l a preparación; unos medios de montaje bastante buenos son l a re-

s i n t é t i c a y e l bálsamo de Canadá.

A l Sinal , cuando l a s preparaciones se han secado a l a temperatura

ambiente durante var ios d ías ; se procede a l impiar las con sumo cuida-

do y posteriormente se r e a l i z a e l etiquetado. E l et iquetado consiste

en co locar un papel engomado sobre uno de l o s extremos de l a prepara-

cibn.

Entre los datos que debe presentar dicha e t iqueta , se encuentran:

a. Tipo de cor te real izado.

b. Mater ia l b io lbg i co ut i l i zado.

C. Técnica de t iac ibn empleada.

d. Fecha de rea l i zac ión.

e. Los nombres de l a s personas que e fecturon l a preparacibn.

- 15 - Ejemplo : Corte t r a i s v e r s a l de t a l l o de Psilotum.

Técnica : Safranlna-Verde rápido.

16-Febrero-1980.

P a t r i c i a Ordóiiez C. y José Fernando Martinez.

Por último, se recomienda guardar las en una c a j a de preparaciones

con e l propósito de proteger las de cualquier deter ioro.

En esta parte, se aprendió a manejar e l material b i o l óg i co y a e l %

borar l a s preparaciones f i j a s que fueran necesarias para l a s labores

de docencia.

Para e l l o , fue necesario tomar en cuenta e l s iguiente material , ya

que de alguna manera u otra , se u t i l i z b en cada una de l a s téanicas:

1. Mater ia l b io lóg ico .

2 . Mater ia l de laborator io .

Agujas de disección.

Charola.

Navajas.

Me c he Po.

Pinzas.

T i jeras .

Espatula.

P ince les d e l ce ro y doble cero.

Cinta adhesiva.

Etiquetas.

Papel f i l t r o .

IBmpara de alcohol.

Cajas de preparacibn.

3. Equipo.

- Balanza.

- Estufa

- 17 -

- Fotomicroscopio.

- Microscopio de disección.

- Microscopio bptico.

- Microtomo de congelamiento.

- R e l o j con segundero.

- Tanques de COZ . 4. Cr is ta l e r ía .

- Cajas de P e t r i .

- Cubreobjetos.

- Embudos.

- Frascos.

- Frascos goteros para colorantes.

- Goteros.

- Pipetas.

- Portaobjetos.

- Probetas.

- Vasos de precipitados.

5. Fi jadores.

- Fluido de ñavashin (Craf).

- F.A.A. (Formo-aceto-alcohol).

6. colorantes.

- Azul de Toluidina alcoh6l ica a i 1 %.

- Fucsina ácida a l 1% en Boiucibn a lcohól ica a l 96%.

- Safranina "0" acuosa a l 1%.

- Verde rápido.

- Vio le ta c r i s t a l a l 1% en solución a lcohól ica a l 96%.

- 18 - 7. Deshidra tan tes.

- Acetona.

- Acetoma-xilol.

- Alcohol e t i l i c o a l 60%.

- Alcohol e t i l i c o a i 70%.




- Alcohol absoluto.

- Alcohol abso luto -x i lo l .

8. Aclarador . - x i l o l .

9. Medios de montaje.

- Bálsamo de Canadá.

- Resina s intét ica .

10. Otras substancias.

- HC1 concentrado.

- Sul fa to ferroso .

- Sul fa to cfiprico a l 7.5% (Cu SO4 - 5 H,O).

- Vaselina só l ida .

- 19 - Dentro de l a s técnicas que se s iguieron en e l presente Se rv i c i o so

c i a 1 se encuentran l a s s iguientes :

1. Técnica para epidermis vege ta l es ( Safranina irO'l acuosa a l 1%).

2. Técnica para t a l l o s , hojas, r a í c e s y embriones (Safranina-Verde

rápido).

3. Técnica para granos de polen (V io l e ta cristal-Fucsina ácida).

4. Técnica para embriones y t a l l o (Azul de Toluidina a l cohó l i ca

a l 1%).

1. Técnica E epidermis vegeta les (Safranina ltpl acuosa & s). A. Cortar cuadri tos de hoja de 1 x 1 cm.

B. Hervir en 4 m l . de solución acuosa a l 7.5% de Su l fa to cúprico

(Cu SO4 - 5 H20) durante 1 a 2 minukos.

C. Agregar 8 m l . de H C l concentrado y de nueva cuenta he rv i r

durante 1 6 2 minutoe.

D. Vaciar en una ca ja de P e t r i y tender a separar l a epidermis

con l a ayuda de un pincel. Es importante qnikar los res tos

d e l mesófilo.

E. Lavar l a epidermis con agua destilada.

F. Teñir con Safranina "0" acuosa a l 1% durante 10 minutos en

una p a r r i l l a t i b i a a 60 OC o toda l a noche a temperatura am-

biente.

G. Lavar con agua dest i lada.

H. üeshidratar con acetona a t ravés de 2 6 3 cambios durante 5

minutos en cada cambio.

- 20 -

J. Aclarar con x i l o l (2 6 3 cambios).

K. Montar en resina s in té t i ca .

Es recomendable que :

A I herv i r los cuadritos de l a s hojas con los d i f e r en t es react ivos ,

se haga durante 1 minuto cuando l a s hojas presenten una c o i s i s - tenc ia suave y durante 2 minutos o más cuando l a consistencia

sea un poco más dura.

A l separar los res tos d e l mesbfilo, es necesario hacer lo con mu - cho cuidado, ya que e s indispensable obtener una per f e ta observa-

c i ón de los complejos estomiticos.

U r i a vez que se ha quitado e l mes6fil0, se hacen observaciones a l

microscopio ópt ico , para seleccionar aquel la cara de l a hoja que

presente la mayor cantidad de estomas.

La t inc ión con Safranina ‘10‘1 acuosa a l 1% presenta exce lentes re-

sultados a l dejarse d i cho colorante durante toda l a noche a tea-

peratura ambiente.

técnica se a p l i c ó a l s iguiente mater ia l :

a. Epidermisbde Dianthus ( c lave l ) .

b. Epidermis de Gladiolus (g lad io la ) .

C. Epidermis de Sedum (conchita).

d. Epidermis de Yucca. e. Epidermis de una dicoti ledbnea no ident i f i cada.

2 .

- 21 - Técnica para t a l l o s , r a í c e s embriones (Safraaina-Verde rá- -- pido).

A.

B.

C.

D.

E.

F.

G.

H.

I.

J.

Cortar t rozos pequeños de mater ia l que se va a t e ñ i r de aproxina-

damente 1 por lado y f i j a r en F.A.A. por l o menos durante 48

horas, teniendo cuidado de que e l f i j a d o r cubra perfectamente a l

material.

Lavar con agua corr iente durante una hora aproximadamente.

Cortar con microtomo de congelamiento y recoger los co r t e s en

una ca j a de P e t r i con agua dest i lada, u t i l i z ando un pincel .

Teñir con Safranina ''0" a l 1% durante 10 minutos.

Lavar con agua desti lada.

Deshidratar con alcoholes graduales (60°, 70°, 80°, 90' y 96')

haciendo 3 cambios en cada a lcohol y 5 minutos en cada cambio.

Teñir con Verde rápido a l cohó l i co durante 30 a 60 segundos.

Lavar con a loho l absoluto (3 a 4 cambios).

Aclarar con x i l o l (3 cambios).

Montar en resina s i n t é t i c a o bálsamo de Canadá.

Como recomendaciones, se pueden mencionar l a s s iguientes :

- E l lavado d e l mater ia l se r e a l i z a en un frasco l o bastante grande a l

que se coloca una gasa l a cual e s sujetada por una l i g a en l a boca de

dicho f r asco$ inmediatamente se hace c i r cu l a r libremente e l chorro de

agua corr iente , l a cual quita e l exceso de f i j a d o r y de e s ta manera

se e v i t a que é s t e i n t e r f i e r a en l a técnica.

-

r. - 22 - I - Los co r t e s en e l microtomo de congelamiento, se rea l i zaron por l o

general de 20 a 40 micras. A q u í se toma muy en cuenta l a posición

de los trozos d e l material , e s dec i r , deben de ser coloados sobre

l a p lat ina en una posición :Lo más v e r t i c a l posible (para cor tes

transversales) , ya que s i no se hace de e s t e modo, entonces los

cor tes tienden a s a l i r sesgados y por l o tanto ya no s i rven para

los propósitos perseguidos.

- También e s necesario mantener e l f l u ido de congelamiento en forma

constante, con e l f i n de e v i t a r un proceso de descongeiamiento a

los cubos de h ie lo .

- Se r e a l i z a una mayor cantidad de cor tes posibles, ya que de esta

manera se t iene l a oportunidad de escoger los más completos y en

una mayor proporción.

- En l o r e f e rente a l a t i n c i ó n corí Safraaina acuosa a l l%, se obtie-

nen exce lentes resultados, a1 dejar los cor tes durante toda l a no-

che a temperatura ambiente.

- Todos los cor tes se ti f íeron en conjunto, usando para e l l o l a s ca - j a s de P e t r i ; con un gotero se r e t i r a e l sobrante de cada substan-

c i a y se agrega l a s iguiente , cuidando de no sacar l os cor tes con

e l mismo.

- E l lavado con agua dest i lada se hace cuantas veces sea necesario, ya

és- que e l propósito e s e l de qu i tar e l exceso de colorante, cuando

t e e s acuoso.

- Durante e l proceso de aclaramiento, e s dec i r , a l e fec tuar los cambi-

os de x i l o l s i se obtiene una consistencia lechosa, nos indica que

no se ha rea l i zado una per fecta deshidratación y por l o tanto e s mz

- 23 - c e s a r i o deshidratar nuevamente con la a d i c i ó n de a l c o h o l a b s o l u t o

v a r i o s cambios , y p o s t e r i o r m e n t e x i l o l .

- Es importante que los cambios de a l c o h o l a b s o l u t o y de x i l o l , as í

como e l montaje se r e a l i c e n e n forma r á p i d a , ya que l a s prepara - c i o n e s pueden hidratarse f á c i l m e n t e s i no se toma en c u e n t a esta

medida. También. se recomienda que las cajas de P e t r i que conten-

gan l o s c o r t e s , se mantengan tapadas para e v i t a r h i d r a t a c i o n e s

durante e l montaje.

- Otro d e t a l l e de i m p o r t a n c i a , es que s i se d e j a n los c o r t e s en x i -

lo1 durante mucho t iempo, e s t o s t i e n d e n a e n d u r e c e r s e y arrugar - se s i e n d o d i f í c i l su manipulación.

La a p l i c a c i ó n de la t é c n i c a , se e f e c t u ó en e l m a t e r i a l que a:

c o n t i n u a c i ó n se menciona:

a. T a l l o modificado de Casuarina.

b. T a l l o de Cyperaceae.

c . T a l l o de Equisetum.

d. T a l l o de Lycopodium.

e. T a l l o de Psi lotum con s i n a n g i o s .

f. T a l l o de Sechium ( c h a y o t e ) .

g. Hoja de Ficus e l a s t i c a ( h u l e ) .

h. Hoja de m. i. R a í z de Gramineae (monocoti ledónea).

j. R a í z s e c u n d a r i a de Vicia faba (haba).

k. Embriones de Vicia faba (haba). *

' En e s t e c a s o se u t i l i z ó Craf como f i j a d o r ya que e s recomendable

u s a r un f i j a d o r suave para t e j i d o s e m b r i o n a r i o s , a s € también se de-

j a completo e l embrión pasa s e c c i o n a r .

L - 24 - pl

c

L

- L

I

En todos los casos se h ic ieron c o r t e s transversales excepto ea

los embriones de haba que fueron longitudinales.

3. Técnica para granos de polen (V i o l e t a cristal-Fucsina ácida).

A. Poner e l polen sobre un portaobjetos.

B. Agregar una gota de a l coho l e t í l i c o a i 70%.

C. Dejar evaporar a l a i r e .

D. Agraegar una gota de a lcohol e t í l i c o a i 90% y calentar sobre

una lámpara de alcohol para f i j a r e l mater ia l a l portaobjetos.

E. Teñir durante un tiempo de 1 a 5 minutos:

- Una gota de a lcohol e t f l i c o a l 96%.

- Una gota de v i o l e t a c r i s t a l a l 1% en solución alcohól ica.

- Una gota de Fucsina ácida de 1% en solución alcohól ica.

F. Lavar con a lcohol e t i l i c o d e l 96%

G. Deshidratar con a lcohol e t f l i c o absoluto (3 cambios de 5 m i -

nutos cada uno).

H. Aclarar con x i l o l : 3 cambios.

I. Montar en resina s i n t é t i c a o bálsamo de Canadá.

J. Secar en estufa t i b i a .

Se recomienda que:

- A 1 colocar l a gota de a lcohol e t i l i c o d e l 96’ y f i j a r e l %

t e r i a l en e l portaobjetos a l a flama de una lámpara de alco-

hol , se debe

._

c

I

- 25 - . hacer rápidamente, ya que s i se deja bastante tiempo, entonces se

quema e l material .

Antes de t eñ i r , se necesi ta de jar e n f r i a r todo e l portaobjetos, ya

que de e s t e modo se e v i t a l a efervescencia d e l polen y además se

presenta una f á c i l manipulación de l a preparación.

E l tiempo de t i n c i ó n para los granos de polen en los d i f e rentes e-

jemplares vegeta les o s c i l a entre l y 2 minutos.

S i se deja t e ñ i r más de este tiempo, entonces e l mater ia l se sobre

tiiPe y por l o tanto ya no presenta s e r v i c i o a los f i n e s a l cual se

destine.

E l lavado con a lcoho l e t f l i c o de 96' se hace tantas veces como sea

necesario, ya que e l propósito e s de qui tar e l exceso de los colo-

rante s.

Otra recomendación, es e v i t a r l a mezcla de granos de polem de los

d i f e rentes ejemplares.

La presente técnica de t inción, se l l e v ó a cabo en e l s iguiente mate- c

I r i a l :

I

a. Granos de polen de Antherrhinum (perr i tos ) .

b. Granos de polen de Gladiolus (g ladio la ) .

I

c

I C. Granos de polen de L i l i u m (azucena).

I

L

I

i

c

L

c

-

- 26 -

4. Técnica para embriones - t a l l o ( A zu l -- de Toluidina a lcohdl ica - a i s ) .

A. Lavar en agua corr iente durante 1 hora aproximadamente.

B. Cortar en microtomo de congelamiento y obtener los cor tes en una

ca ja de P e t r i conteniendo agua desti lada.

C. Deshidratar con a lcoholes graduales (60°, 70°, 80°, 90' y 9 6 O ) ,

se r ea l i z an 3 cambios durante un tiempo de 5 minutos en cada

uno.

D. Teñir con azu l de to lu id ina a lcob6l ica a l 1% durante 20 minutos

o toda l a noche a temperatura ambiente.

E. Lavar con a lcohol absoluto.

F. Aclarar con x i l o l : 3 cambios.

G. Montar en res ina s in té t i ca .

La t4cnica se ap l i cd a l s iguiente material :

a. hibriones de V i c i a faba (haba).

b. Ta l l o joven.de Quercus SE.

--

Los embriones de V ic ia faba (haba se f i j a r on con Craf y los cor tes

se efectuaron a un grosor de 25 micras y en un plano longitudinal.

La t inc ión a base de A z u l de Toluidina a lcohól ica a l 1% presenta exce-

l en t es resultados a l dejarse durante toda l a noche a temperatura am - biente.

Para l o s t a l l o s jóvenes de guercus SE. se deja en Su l fa to f e r roso

durante

n in i f e ras , los co r t e s se rea l i zaron a 20 micras en plano transversal.

5 d ías antes de proceder a co r ta r para destacar l a s cé lu las tg

- 27 -

A . Descripcibn de t e j idos .

1. KERISTEMOS

Los meristemos son t e j i d o s embrionario5 que se conservan como t a l

hasta e l estado adulto d e l vege ta l , su función e s permit i r e l desarro-

llo y crecimiento de éste. Son t e j i d o s que se caracterizan por poseer

pocos rasgos de d i ferenc iac ibn en sus cé lu las , las cuales mantienea

su capacidad p r o l i f e r a t i v a y a su vez conservan su carácter embrio - nario.

Las cé lu las meristemáticas generalmente tienen una pared delgada,

son de forma d s isodiamétrica que l a de los t e j i d o s maduros y más

r i c a s en protoplasma. Normalmente los protoplastos de los meristemos

estan deeprovistos de material de reserva y c r i s t a l e s . La presencia

de vacuolas en los meristemos e s frecuente, así entre mayor e s e l

tamaño de la cé lu la mayor e s la presencia de vacuolas.

E l proceso de crecimiento y espec ia l i zac ibn anatómica y funcional

que r ea l i z an l a s cé lu las de los meristemos produce l a d i f e r e a c i a c i h

que da como resultado l a formación de t e j i d o s adultos ya espec ia l i za-

dos.

.

Los meristemos pueden c l a s i f i c a r s e según :

1) La posicibn que ocupan dentro de l a planta.

2 ) E l origen de los meristemos.

- 28 - En e l primer c a s o s e suelen c l a s i f i c a r en t r e s t i p o s :

a )

b)

C )

Meristemos a p i c a l e s .

Los c u a l e s se encuentran en los ápices de las r a í c e s y de

los t a l l o s p r i n c i p a l e s y l a t e r a l e s .

Meristemos i n t e r c a l a r e s .

Los c u a l e s se encuentran e n t r e los t e j i d o s maduros, por

ejemplo en l a base de l o s entrenudos de las gramheas.

Meristemos l a t e r a l e s .

Que sue len c o l o c a r s e a l rededor d e l órgano e n que se em

cuentran, como por e jemplo, e l cambium v a s c u l a r y e l f e l ó -

geno.

Según su origen los meristemos s e c l a s i f i c a n e n :

a ) Meristemos primarios.

Son a q u e l l o s cuyas c é l u l a s derivan directamente de las

c é l u l a s embrionarias y que conservan t a l e s t r u c t u r a embrio-

naria. En los meristemos primarios se dist inguen d i v e r s a s

reg iones con d i f e r e n t e s n i v e l e s de d i f e r e n c i a c i ó n . A s í pues,

encontramos que en los meristemos a p i c a l e s pr imarios s e

d i f e r n c i a n dos zonas : una promeristemática (zona e x t e r n a )

que c o n s t a de c é l u l a s i n i c i a l e s a p i c a l e s y o t r a zona que es

l a meris temática (zona i a t e r n a ) que e s t a c o n s t i t u i d a por

t r e s meristemos :

h Protodermis: de l a c u a l s e d e s a r r o l l a e l t e j i d o e p i -

dkrmico d e l vegeta l . (ver Fig. 1).

- Procámbium: de é s t e der ivan los t e j i d o s vascuales

(Ver pig. 1)

- 29 - primarios (xilema y floema primarios).

- Meristem0 fundamental: de 61 se desarrol lan los t e j i -

dos fundamentales de l a planta, como son

e l pardnquima, esclerknquima, médula y cg

lénquimi. (Ver Fig. 1).

b) Meristemos secundarios.

Son aquel los que se desarrol lan a p a r t i r de t e j i d o s a-

dul tos ya di ferenciados y en los cuales no se distinguen

morfológicamente d i s t i n t o s estadlos.

E l crecimiento que presentan es tos meristemos se l e llama

crecimiento secundario, e l cual se va a caracter i zar por

ser un crecimiento en espesor que sufre dicho vegetal .

Los meristemos secundarios son:

- Cambium vascular.

- Felbgeno.

Ambos meristemos son considerados como meristemos la tera-

l es .

E l cambium vascular se d ice que adopta l a estructura

de cordones longitudinales o de c i l i n d r o hueco.

Como e s bien sabido en monocotiledbneas e l procdmbium e s

e l que se d i f e r enc ia y da or igen a los t e j i d o s vasculares

primarios.

En dicot i ledbneas y gimnospermas una porción d e l procam-

bium conserva su capacidad meristemática y por l o tanto

e l l a or ig inará e l cambium, e l cual formará xilema y floema

L.

r I" - 30 - - c

L

r .- c

L

r

L

c

L

....

secundari o.

E l cambium esta formado por dos t ipos de cé lu las :

1. ~ é i . i n i c i a l e s fusiformes.

Son cé lu las largas y con extremos aguzados.

2. Céi. i n i c i a l e s radiales.

Células más pequeñas que l a s anter io res y

cas i iaodiamétricas.

E l fe iógeno e s más s enc i l l o que e l cambium vascular

pues t i ene solamente un t i p o de cé lu laa i n i c i a l e s . E l pro

toplasma de l a s cé lu las d e l fe lbgeao presenta vacuolas de

d iversos tamaAos y puede contener c lorop lastos y taniaos.

~.

..

.. " - 31 - .." i

P-

._ 2. EPIDERMIS

La epidermis es l a capa de cé lu las más externas que recubren to-

do e l cuerpo de l a planta. En el caso de l a r a í z suele denominarsele

rizodermis, debido a que t i ene d i ferente origen, func ión y estructura.

La función primordial de l a epidermis e s l a de actuar como una estruc - tura que permita l a transpiracibn, da protección mecánica, permite e l

intercambio gaseoso a t ravés de los estomas y también actúa como una

zona de almacenaje de agua y productos metabólicos.

Las cé lu las epidérmicas tienen generalmente forma tabular, es dec i r ,

son angostas en d i recc ión normal a l a super f i c i e d e l brgano. La farma

de es tas cé lu las es ta relacionada con l a forma d e l órgano vege ta l

bre e l que se hallan.

so-

Las cé lu las epidérmicas contienen 'protoplastos vivos, suelen ser

vacuoladas y presentan leucoplastos. Los p las t i d i o s que presentan l a s

cé lu las epidérmicas no se hal lan definitivamente d i ferenc iados como

c l o rop las t os.

Algunos helechos, plantas acuáticas y c i e r t a s plantas vascukares supe-

riores t e r r es t r es contienen protoplastos bien de f in idos e n l a epidermis.

En los p las t i d i o s de l a epidermis se ha encontrado almidón y en el

jugo c e lu l a r se ha v i s t o l a presencia de antocianinas.

Las paredes de l a s cé lu las epidérmicas tienen un grosor variable,

l a s hay desde l a s que poseen una pared delgada hasta otras con paredes

sumamente gruesas, e incluso pueden es tar l i gn i f i c adas como en e l caso

de l a s paredes ce lu lares de semil las, escamas y en hojas de co -

- 32 - n í feras.

En l a s paredes e s común encontrar punteaduras primarias y plasmo - demos.

En l a s paredes super f i c ia l es de l a s cé lu las epidérmicas e x i s t e

una sustancia l i p í d i c a , l a cutiira. Esta substancia se encuentra de=-

tro de l a pared ce lu lar . A su vez ésta forma l a capa denominada cu - t í cu la , l a que suele encontrarse en l a super f i c i e externa de l a pa-

red ce lu lar . Esta capa t iene un grosor muy var iab le en l a s plantas,

generalmente e l grosor depende de l a s condiciones que prevalezcan

en los s i t i o s ocupados por los vege ta l es y de otros fac tores descono

c idos que in f luyen en esta forma, por e l l o l a super f i c i e de l a cut í -

cula puede ser l i s a , rugosa y arrugada o surcada.(Ver Fig. 8, 9, 12 y

Dentro de l a s cé lu las que constituyen e l t e j i d o epidérmico se en - 13)

cuentran 2

a ) Estomas.

En l a epidermis ex is ten discontinuidades o pequeñas aperturas

que son los estomas ( d e l g r i e go estoma - boca; estructuras a t ravés

de l a s cuales se efectúa e l intercambio gaseoso).

Estan formados por dos cé lu las oclusivas que forman un poro y dos o

más cé lu las adyacentes a l a s loclusivas a las cuales se l e s denomina

cé lu las anexas o acompañantes ( l a s cuales pueden es tar presentes o no).

Así pues a l conjunto antes r e f e r i d o suele dársele e l nombre de

p l e j o estomático.

com-

Los estomas se encuentran sobre todo en l a s partes aéreas de l a

planta, su presencia e s mayor en l a s hojas (principalmente en e l en - vés) , aunque también suele encontrarseles en t a l l o s normales y r i z o - (Ver Fig. 12).

- 33 - zomas. Estan ausentes en r a í c e s y en plantas parás i tas sin c l o r o f i l a .

Las cé lu las estomáticas generalmente t ienen forma arrifíonada, a

excepcidn de las gramheas y ciperáceas. E l tamaño de la apertura va-

r i a según los cambios de turgencia que ocurran en l a s células.

Se distinguen s e i s t i p o s de complejos estomáticos ea dicoti ledbneas,

e s ta c l a s i f i c a c i ó n toma en cuenta l a d ispos ic ión que t i enea l a s cé lu las

epidérmicas con respecto a lau cé lu las estomáticas:

1) Tipo anomocítico: no estan presentes cé lu las acompafíantes o ane-

xas. (Ver Fig. 6).

2) Tipo an i soc i t i c o : l a s cé lu las estomáticas u oc lus ivas estan ro-

deadas por t r e s cé lu las acompañantes, una mucho más pequeña

que l a s o t ras dos. (Ver Fig. 4).

3) Tipo parac i t i co : con una o más cé lu las anexas a cada lado d e l e s

toma o posición para le la a l e j e longitudinal.

4 ) Tipo d i a c f t i c o : en e l que cada estoma esta rodeado por dos célu-

l a s acompafíantes cuya pared común forma un ángulo r e c t o con e l

e j e long i tudina l d e l estoma. (Ver Fig. 2).

5) Tipo a c t i no c i t i c o : e l estoma es ta rodeado por una corona de célu-

las anexas dispuestas radialmente.

6) Tipo c i c l o c i t i c o : t i ene más de t r e s cé lu las acompañantes. Las

paredes an t i c l i na l e s son más cor tas que l a s per i c l lna les .

En l a s monocotileddneas l a s cé lu las e s t o d & i c a s ~ 8on alargadas en

l a forma de hueso (los extremos de l a s c é lu l as estan ensamhados y

cc . ' !

- 34 - pared e s f i na , mientras que l a parte media e s angosta y de pared

gruesa).

En l a s monocotiledóneas se sistinguen 4 t i pos de complejos estomá-

t i c o s :

1) Tipo I: donde las cé lu las estomáticas estan rodeadas por 4 a 6

cé lu las anexas.

2 ) Tipo 11: las cé lu las estomáticas también estan rodeadas por 4

a 6 cé lu las anexas, donde 2 son redondas y menores que l a s

o tras y situadas en los extremos de l a s estomáticas.

3) Tipo 111: l a s cé lu las estan acompañadas por 2 cé lu las la tera-

les anexas a cada lado d e l estoma.

4 ) Tipo I V : l a s cé lu las estomáticas no estan asociadas a ninguna

cé lu la acompañante.

b) Derivados epidérmicos.

Los derivados epidérmicos unicelulares como p lur i ce lu lares reciben

el nombre de tricomas. Estos se suelen encontrar en d i f e rentes partes

d e l vegetal .

Se pueden d i s t ingu i r morfol6gicamente d iversos t i pos de tricomas:

1) Pelos simples.

Pueden ser unicelulares y p lur ice lu lares , ambos pueden ser

ramificados, en e l caso de los pelos p lur i ce lu lares l a rami f i -

cación suele ser dendroide ( es dec i r muy ramificado).

Los pelos pluriceluaares constan de un pie i i t roduc ido en l a

epidermis y un pedúnculo.

- 35 -

2 ) Pelos escamosos y peltados.

Son las escamas l a s cuales estan constituidas por un pie un

pequeflp pedúnculo y una cabeza o super f i c i e en forma de disco.

Algunos de estos t i p o s de tricomas son s é s i l e s en t a l caso se

l e s llama escamas en otros casos son pedunculados y se l e s de - nomina peltados.

3) Pelos glandulares.

Generalmente constan de un pedúnculo y de una cabeza uni o

plur ice lu lar . La cabeza e s l a estructura secretora.

4 ) Pelos radicales.

Son elongaciones tubulares de l a s cé lu las epidérmicas de l a

r a í z . Generalmente es tos poseen grandes vacuolas y tienen mem-

branas. Su función e s absorber agua.

t , ,. . . . . . , . , " .~ -

- 36

3. PARENQUIM,

Es un t e j i d o const i tu ido por cé lu las con poca espec ia l i zac ión.

Este t e j i d o esta formado por cé lu las vivas, generalmente tienen forma

po l i édr i ca , poseen pared primaria que puede ser delgada pero en ocac ig

nes e s gruesa. En l a s cé lu las parenqu id t i cas se pueden almacenar d i -

f erentes materiales de reserva, l a s cuales bien puedem encontrarse en

forma só l ida o l íquida en l a s vacuolas o bieñ en e l citoplasma. EU el

jugo c e lu l a r pueden encontrarse azúcares, arbohidratos, substancias

nitrogenadas, amidas y proteínas.

Este t e j i d o se encuentra abundantemente d i s t r ibu ido en toda l a plan

ta.

E l parénquima se puede c l a s i f i c a r en:

a ) Clorénquima : formado por cé lu las parenquimáticas que poseen e lo -

plastos. Este t i p o de parénquima se presenta en hojas y abar-

ca e l parknquima en empalizada y e l esponjoso.

Las chulas que forman el parénquima en empalizada tienen

forma tabular, se encuentran debajo de l a epidermis que puede

ser un i o p lur i es t ra t i f i cada . (Ver Fig. U).

El parénquima esponjoso esta formado por cé lu las de forma

muy i r r egu la r , posee una gran cantidad de espacios interce lu-

l a r e s y da hacia l a super f ic ie abax ia l de l a hoja, en caso de

hojas bi faciadas. (Ver Fig. 12).

b) Parénquima inco lo ro : formado por cé lu las grandes, presenta uea

gran cantidad de amiloplastos, no presenta cloroplastos. Se

presenta en t a l l o s .

- 37 -

c ) Aerknquima: se carac te r i za por l a abundancia de espacios in t e r -

ce lu lares , que permite el aEmac6n de grandes cantidades de

a i r e . Se encuentra generalmente en plantas acuáticas.

d) Parbnquima acu í f e ro : formado por cé lu las que almacenan agua.

Las cé lu las son generalmente grandes de pared f ina, tienen

una delgada capa de citoplasma y carecen de cloroplastoa. E l

agua se almacena en las vacuolas, cuyo jugo c e lu l a r t i ene ca-

r a c t e r í s t i c a s muoilaginosas, que dan a l a cé lu la una mayor

capacidad para re tener agua. Este t e j i d o o t i p o de parénqui-

ma e s frecuente en plantas suculentas.

- 38 - 4. COLENQUIM

Deriva d e l parénquima y sblo se presenta en plantas superiores a

excepción de algunos helechos. Es un t e j i d o de sostén mecánico, és ta

formado por cé lu las v i vas más o meos alargadas que presentan paredes

primarias desigualmente engrosadas.

E5 l a s primeras cé lu las que forman e l colénquima e s frecuente encog

t r a r c lorop lastos , en estad ios muy adultos su presencia disminuye, tag

bien e s comb encontrar en e l l a s taninos.

Em l o que respecta a l tamaño y forma de las cé lu las coienquimáticas,

Bste es muy variado, de es ta manera se ha observado que pueden tener

forma de prisma, pueden ser largas o bien en forma de extremos aguza-

dos.

Generalmente se l e encuentra en t a l l o s y hojas. (Ver Fig. 11).

Debido a l desigual engrosamiento que presentan l a s cé lu las , ex i s ten

cuatro t i pos de colénqulma :

a ) Colénquima angular: e l engrosamiento de l a pared ce lu la r e s lon-

g i tud ina l y muy prominente en los ángulos que forman l a s c6lu-

las.

b) Colénquima laminas: e l engrosamiento e s más abundante en l a s pa-

redes tangenciales de las células.

c ) Colénquima lajígunar: e l engrosamiento es más pronunciado en a-

que l las partes de las paredes ce lu lares que dan hacia espa-

c i o s i n t e r c e lu lare s.

d ) Colénquima anular: aquí e l engrosamiento se encuentra uniforme-

- 39 - mente d i s t r i bu ido a lo l a r go de l a cé lu la .

Resumiendo, es un t e j i do de sostén mecánico, se encuentra de prefe-

rencia en los estados juven i l es d e l vegetal , s in embargo en algunas

ocaciones suele continuarse hasta etapas adultas en cuyos casos se ha

ce más res i s tente y para e l l o se e s c l e r i f i c a .

- - I

L

c

i.

r- ! i

- 40 - 5. ESCLERENQUIMA

Es un t e j i d o const i tuido por c é lu l as de paredes secundarias, engrosa

das y l i gn i f i cadas , por l o tanto sus cé lu las son muertas en l a madurez.

Debido a l o an t e r i o r e s un t e j i d o de sostén mecánico y de protección.

Las c é lu l a s d e l esclerénquima son muy variadas a pesar de e l l o se ha

seguido e l c r i t e r i o de agruparlas en:

1) Fibras

2 ) Esclere idas

Ontogenéticamente las f i b r a s se desarrol lan a p a r t i r de meristemos

como son procámbium, cámbium y meristem0 fundamental.

Las f i b r a s (Ver Fig. 7 y 9). se encuentran en d i f e r en t es partes d e l

cuerpo vegetal , preferentemente asociadas a xilema, formando bandas o

redes. En l o que respecta a l a forma de t a l e s cé lulas, e s tas sou alaf

gadas, estrechas con extremos aguzados y a veces ramificados.

Según l a d is t r ibuc ión que tengan l a s f i b r a s en el cuerpo d e l vege - t a l e s tas pueden se r :

1) Fibras xilemáticas.

Forman parte d e l xilema. Son de forma variada a pesar de su 2

r i g en comlin. Demtro de e s tas f i b r a s se dist inguen dos t ipos , y

e s t o e s en base a i grosor que presentan sus paredes, a s í como e l

t i p o y cantidad de punteaduras. Estas f i b r a s se div iden en:

- Fibras l ibr i formes: generalmente son mtis largas que l a s

traqueidas de l a planta en que se encuentren. Tales f i -

bras t ienen paredes muy gruesas y punteaduras simples.

- 41 -

- F i b r o t r a q u e i d a s : t i e n e n forma in termedia e n t r e t r a q u e i d a s

y fibras l i b r i f o r m e s , sus paredes son más g r u e s a s que

las de las t raqueidas . Las punteaduras de e s t a s f ibras

son a r e o l a d a s .

2 ) Fibras e x t r a x i l e mát icas .

E s t a n l o c a l i z a d a s en o t r a s p a r t e s de l a p l a n t a que no e s e l x&

lema. Se encuentran en l a c o r t e z a o b i e n e s t a n r e l a c i o n a d a s con

los elementos d e l floema.

E x i s t e n dos t i p o s de f i b r a s e x t r a x i l e m á t i c a s a

- Fibras p e r i v a s c u l a r e s : s e pueden e n c o n t r a r en las capas i n -

t e r n a s d e l c i l i n d r o c o x t i c a l y en la p e r i f é r i a d e l c i l i n -

dro c e n t r a l .

- Fibras c o r t i c a l e s : s e encuentran d e b a j o de la epidermis f o r - mando paquetes 6 b i e n e s t a r en forma de un a n i l l o c o n t i 1-

nuo. (Ver Fig . 11).

E l segundo elemento c o n s t i t u t i v o d e l t e j i d o esce lerenquimatoso que

son las e s c l e r e i d a s , t i e n e n una l o c a l i z a c i ó n no e s p e c í f i c a en e l c u e r - PO d e l v e g e t a l . Las e s c l e r e i d a s aparecen en d i v e r s a s plantas como con - glomerados c e l u l a r e s de c o n s i s t e n c i a d u r a dentro Be las c é l u l a s paren

q u i m á t i c a s que son b l a n d a s

Las e s c l e r e i d a s t i e n e n e s t r u c t u r a s muy d i v e r s a s e s por e l l o que

s u e l e a g r u p a r s e l e s en c i n c o t i p o s , que son:

1) B r a q u i e s c l e r e i d a s o c é l u l a s p é t r e a s .

Tienen forma isodiamé t r i ca s e l e s encuentra generalmente em

- 42 - floema, cor teza de t a l l o s y en e l mesocarpio de frutos como son

l a pera y e l membrillo.

2) Mac roe sc l e reidas.

Esclereidas en forma de v a r i l l a s , forman una capa continua en

la t es ta de semil las, ejem: en semi l las de leguminosas.

3) Osteosclereidas.

Esclereidas en forma de hueso, con extremos ensanchados, lo-

bulados en ocaciones y ramificados. Son comunes en cubiertas

de semillas.

4) A s tr oe sc l e r e i d as.

Son ramificadas y frecuentemente es t re l l adas , se encuea-

tran en hojas.

5 ) Tr i c oe sc le reidas.

Se caracterizan por ser esc l e re idas muy alargadas y nor-

malmente ramificadas una so la vez.

- 43 -

Es un t e j i d o de conducción en sentido acrópeto, que transporta agua

y minerales, pero además se caracter i za por ser un t e j i d o de soporte

mecánico.

Estructuralmente e s un t e j i d o formado por cé lu las v i vas y muertas que

son :

1) Elementos traqueales formados por :

- Miembros de vaso.

- Traqueidas.

Fibras.

Células de parénquima.

2

3

En l o que se r e f i e r e a los vasos, están formados por var ias célu-

l a s que se denominan miembros de vasos que se unen formando a s í tubos

la rgos y continuos llamados frecuentemente vasos. Los vasos presentan

paredes secundarias l i gn i f i c adas y tienen ausencia de protoplasto.

Después de algún tiempo de haberse formado l a pared primaria y se-

cundaria de es tas cé lu las se desintegran y desaparece e l núcleo y c i -

toplasma. A d e d s de l a pared transversal pueden desarro l larse una o

más aberturas o bien esta parte puede d iso l ve rse por completo, a es-

ta zona suele denominarsele placa multiperforada. Dependiendo de como

sea e l acomodo de t a l e s perforaciones l a placa puede ser de perfora-

c i b n simple (con una so la perforacibn), perforación escalari forme

( l a s perforaciones se disponen en s e r i e s paralelas) , placa de perfo-

racibn re t icu lada (a manera de r e t i cu l o ) y placa de perforacibn e f e - dro ida l (con o r i f i c i o s c i rculares ) .

- 44 - Los miembros de vaso presentan d i v e r s o s engrosamientos en sus pare -

d e s secundar ias .

En cuanto a l segundo miembro de los elementos t r a q u e a l e s que son las

t r a q u e i d a s , é s t a s son e lementos más s imples c o n s t i t u i d o s por una s o l a

c é l u l a . Su func ibn e s compartida con la de conduccidn y de sos tén .

Las f ibras a s o c i a d a s a x i lema son f i b r a s x i l e m á t i c a s .

Las c é l u l a s parenquimáticas generalmente acompañan a xi lema prima - r i o y secundario . En e l x i lema secundar io s e halla en dos formas: como

parénquima x i l e m á t i c o o axia l y como parénquima radiomeduñar o radial.

Encontramos que e a los v e g e t a l e s pueden d i s t i n g u i r s e dos t i p o s de x i - lema de acuerdo a s u o r i g e n : x i lema pr imar io y xi lema secundario .

Xilema pr imar io

E s t a formado por protoxi lema y metaxilema. E l primero aparece a i

comenzar la d i f e r e n c i a c i ó n v a s c u l a r y ocupa una p o s i c i b n c a r a c t e r í s t i

c a en e l s i s t e m a v a s c u l a r pr imar io de l a planta.

En paantas v a s c u l a r e s s u p e r i o r e s ( en un c o r t e t r a n s v e r s a l de ta-

llo), e l protoxi lema e s endarco e s d e c i r mira o e s t á c e r c a de l a mé-

d u l a , mientras que en un c o r t e de la misma i n d o l e en r a í z e l x i lema

s e encuentra l e j o s de l a médula por l o t a n t o e l x i l ema e s exarco .

E l protoxi lema posee :

- pocos e lementos t r a q u e a l e s ( t r a q u e i d a s y elementos de vasos ) y

- b a s t a n t e s c é l u l a s parenquimatosas.

- 45 -

Comunmente los elementos d e l protoxilema son más estrechos que 10s

d e l metaxilema. (Ver Fig. 8).

El metaxilema e s un t e j i d o que se empieza a desarro l lar cuando ha ce - sado l a elongacibn d e l órgano en que se encuentra. Generalmente e s

un t e j i d o más complejo que e l protoxilema y sus elementos también son

más anchos. (Ver f igura. 8 ) .

En plantas con crecimiento primario e l metaxilema conduce agua, mien - t r a s que en aque l las que t ienen crecimiento secundario é s t e se vuelve

no funcional, conservándose los elementos traqueaies intactos.

E l metaxilema es ta formado port

1) Elementos traqueaies que son:

- traqueidas o miembros de vaso.

2) Células paresqu id t i cas .

3 ) Fibras.

I

Xilema secundario

A d i f e renc ia d e l primario que der iva d e l procámbium, 81 deriva d e l

cambium vascular.

Una d i ferenc ia importante entre xilema secundario y primario, e8

que generalmente en el xilema secundario l a s cé lu las que l o forman

se acomodan paralelamente a los rad ios d e l cuerpo secundario d e l ve-

ge ta l .

Em e l xilema secundario encontramos que l o forman dos sistemas:

...

- 46 - c <.

-.

L..

- , ...

L

I) Sistema a x i a l o ve r t i c a l donde se distinguen:

- traqueidas

- f i b r a s

- parénquima a x i a l

2 ) Sistema r a d i a l u hor izonta l , donde se d ist ingue:

- parénquima r a d i a l

....

- 47 -

A1 i gua l que e l xilema forma parte d e l sistema conductor de l a plan

ta. Pero mientras que e l xilema conduce agua y minerales, e l floema

transporta productos de l a f o tos in tés i s , e s dec i r savia elaborada, t a l

f l u j o de la savia e s basípeto.

asta const i tu ido por: E l floema

1 Elementos cr ibosos formados por:

- Miembros de tubo cr iboso (Ver Fig. 11).

- Células cribosas

2) Fibras.

3) Células parenquimáticas.

4 ) Esclereidae.

E l rasgo más ca rac t e r í s t i c o de los elementos cr ibosos es l a presen-

c i a de c r ibas en sus paredes y l a desaparición d e l núcleo en su proto-

p las t o.

En los miembros cribosos l a comunicaci6n se establece a t ravés de

l a s áreas cibosas, l a s cuales presentan perforaciones o poros a tra-

vés de los cuales los protoplastos de los elementos cribosos adya - cen t e s están relacionados por prolongaciones c ordonif ormes.

Es por e l l o que t a l e s áreas cribosas se consideran como puntuaciones

primarias prov is tas de plasmodesmos.

Los miembros d e l tubo cr iboso estan formados por placas cribosas

que se encuentran sobre paredes terminales que varían desde muy i n c i i -

das hasta transversales u hor izonta les (que son l a s más evolucionadas) , t a l e s tubos se disponen en forma longitudinal. A s í pues l a s e r i e de

miembros forman los tubos cribosos.

La cé lu la cribosa esta formada por áreas cr ibosas poco e spe c i a l i z a

das. Estas cé lu las SOB largas y delgadas con extremos a f i l a d o s o pa-

redes terminales muy inclinadas.

E l floema esta const i tu ido por u rn gran divers idad de cé lu las pa-

r enqu id t i c a s , además de cé lu las acompañantes y de las albuminosas.

Estas cé lu las parenquimáticas t ienen l a funcibn de almacenar almidón,

grasas, taninos y resinas.

E l floema de acuerdo a su or igea se div iden en: floema primario y

floema secundario.

Floema primario

Este se or ig ina d e l procambium y en él se disntinguen e l proto - floema y metafloema.

E l protofloema es e l t e j i d o conductor de l a s partes de l a planta

que estan en crecimiento ac t i vo . Se desarro l la antes que termine l a

elomgación d e l Órgano en que se presentan.

Los elementos cr ibosos que l o forman generalmente son menos largos

y más angostos que los d e l metafloema.

El metafloema se desarro l la después que e l protofloema se ha desa-

r ro l l ado , se caracter i za porque se conserva como t e j i d o conductor du-

rante más tiempo que e l protofloema. Los elementos cr ibosos que l o

- 49 -

forman soa más l a rgos y anchos que los de l protofloema.

Floema secundario

A l i gua l que e l xiiema secundario posee dos sistemas, uno Vert i -

c a l y o t r o horizontal.

E l sistema v e r t i c a l o long i tudina l es ta compuesto de:

1) Elementos cr ibosos que son:

- cé lu las cribosas.

- miembros d e l tubo criboso.

2 ) Parknquima floemático.

3) Fibras floemáticas.

Todos e s t os elementos derivan de l a s cé lu las i n i c i a l e s fusi foraes.

E l sistema hor i zonta l o transversal compuesto por :

1) Cél. parenquimáticas de los radios.

Estas últimas derivan de l a s cé lu las i n i c i a l e s radiales.

- 50 - B. Descrpción de órganos.

1. RAIZ

La r a í z e s l a porción i n f e r i o r y subterránea de l a planta, espe-

c i a l i z ada en l a absorción de substancias y también t iene función de

anc la je . En un cor te transversal l a disposición de los t e j i d o s más externos

hasta los internos en una anatomía primaria e s i a s i gn iente :

1) Rizodermis: t e j i d o constituido de cé lu las de pared delgada y

normalmente carece de cutícula. La rizodermis generalmente e s

uniseriada pero en ocaciones puede ser multiseriada (ejem: or-

quídeas y e p i f i t a s , en cuyo caso suele l lamárseie velamen).

Presenta pe los rad ica les como derivados epidérmicos, a d e d s

está espec ia l i zada y adaptada para l a absorción e f i c a z de agua

y sales.

2) Corteza : constituida normalmente por cé lu las parenquimáticas,

diferenciandose entre e l l o s en muchas ocaciones esclerénqui - ma, que se s i tua como un c i l i n d r o por debajo de l a exodermis

o bien junto a l a endodermis. (Ver Fig. 14).

La corteza esta formada por:

- Exodermis.

Son cé lu las subepid6rmicas que generalmente se suberizan.

Es un t e j i d o protector, que puede e s ta r formado por una so-

i a capa de Células o varias. (Ver Fig. 14).

- 51 -

- Endodermis.

Es UN c i l i i td ro c e lu l a r uniseriado. Esta capa de c é lu l a s

representa e l l ím i t e entre l a corteza y e l c i l i n d r o vas-

cular. (Ver Fig. 14).

Es frecuente encontrar en l a s paredes r ad i a l e s de t a l e s

cé lu las pequeiios engrosamientos de suberina denominados

Bandas de Caspary, que inhibe e l paso de agua y solutos

los cuales logran pasar a t ravés de l a s cé lu las de paso.

3) C i l indro vascular: ocupa l a porción cent ra l de l a ra í z . E l te-

j i d o vascular primario que rodea a e s t e c i l i n d r o e s e l p e r i c i

c l o , const i tuido por una o más capas de cé lu las parenquimáto-

sa8 de pared delgada. (Ver Fig. 14).

Una propiedad muy importante d e l p e r i c i c l o e s que conserva

su capacidad meristemática, permitiendo a s í e l desar ro l l o de

r a i c e s la te ra l es , cambium vascular y felbgeno.

Existe una d i ferenc iac ión c la ra en l a disposic ión de los

t e j i d o s vasculares primarios entre t a l l o y ra íz . En l a r a í z

después d e l p e r i c i c l o 6e encuentra e l floema y xiiema.

Los cordones de floema estan siempre separados de los d e l

xtlema y se encuentran alternados entre los brazos de x i l e -

ma.

E l xilema en l a r a í z e s exarco, e s d e c i r e l protoxilema

e s t a situado fuera d e l metaxilema. (Ver Fig. 14).

En e l caso d e l floema, e l protofloema está más cerca d e l

p e r i c i c l o y e l metafloema está más prdximo a l e j e de l a ra-

íz.

L

- 52 - Segfin la presencia de grupos de protoxilema que haya en l a

r a í z , bien 1, 2 , 3, 4; l a r a í z se dice que e s monarca, diarca,

t r i a r ca y tekrarca. Cuando e l número de grupos de protoxilema

e s abundante se dice que la r a í z e s po l iarca .

- 53 -

h

r" L

r L

r.

L

e

i

c

L

c

L

c

L

2. TALLO.

E l t a l l o e s uno de los órganos primarios de l a s plantas vascuiares,

que l l e v a l a s estructuras reproductoras y l a s hojas. Algunos autores

consideran que fi logenéticamente e s l a estructura más pr imi t iva d e l

vega ta l .

Los t e j i d o s que encoatramos en la anatomía primaria de un t a l l o ,

según un cor te transversal y de afuera hacia adentro son:

1) Epidermis : generalmente e s monoestratif icada, puede tener esto-

mas, pero en menor porción que en l a s hojas, presenta i d i o - blastos, hay ausencia de c lo rop las tos y presenta d i f e rentes

t i pos de tricomas. La pared de t a l e s cé lu las esta cutinizada.

(Ver Fig. 8).

2) Corteza: comprende desde e l t e j i d o que se encuentra abajo de l a

epidermis hasta l a endodermis cuando ésta se presenta, es te e s

e l caso de plantas in fe r io res . (Ver Fig. 7, 8 y 9).

A l a cor teza se l ed i v ide en:

- Corteza externa: l a cual l im i ta corn l a epidermis y puede

tener inc lu ido colénquima o esclerénquima, es tos pue-

den formar un a n i l l o completo o bien se puede presen-

t a r en paquetes separados. (Ver Fig. 7, 8, 9 y 11).

- Corteza interna: es ta constituida por cé lu las parenquima-

tosas de pared delgada, es tas pueden tener función fo-

t o s i a t é t i ca o bien de almacenamiento temporal de almi-

dbn y o t ros metabolitos.

- 54 -

En la corteza tambi4n e s frecuente encontrar esclere idad,

cé lu las secretoras y l a t í c i f e r o s .

3) Sistema vascular: se encuentra después de l a corteza. En l a s

gimnospermas y mayoría de las d i c o t i l e d h e a s el sistema vas-

cular consta de paquetes de xilema y floema arreglados en un

c i l i n d r o continuo o discontinuo que envuelve a l a m4dula.

A dichos paquetes de xiiema y floema se les denomina haz

vascular los cuales pueden s e r de d i f e rentes t ipos. A s í pues

ex is ten haces co la te ra l es (donde e l floema se encuentra a un

lado d e l cordón xi lemático) , haces b i c o l a t e r a l e s (aquí e l

floema se encuentra en ambos lados d e l xilema sin rodear a

é s t e últ imo; Ver Fig. U), haces conc6ntricos (uno de los

t e j i d o s vasculares rodea por completo a l otro, de esta mane-

ra se distinguen dos t i p o s de haces concéntricos:

- Haz

- Haz

En el

acomodos

an f i vasa l : el floema se encuentra completamente ro-

deado por el xilema.

a n f i c r i v a l : e l floema rodea a xilema,

c i l i n d r o cent ra l d e l t a l l o se dist inguen d i f e rentes

d e l sistema vascular, dando patrones estructurales d&

ferentes, a t a l arreg lo , de manera general, se l e denomina

e s t e la.

La e s t e l a en plantas vasculares puede d i v i d i r s e en dos ti-

pos b h i c o s : (Ver Fig. I).

A ) Protoste la : e s l a más pt imi t iva , se caracter i za por no

Y ’ ! ,

- 55 -

presentar médula, es un c i l i n d r o cent ra l s6 l ido de

xilema rodeado por floema, ex is ten t r e s var iantes de

és te :

a ) Haploste la: es e l más simple, e l xiieaia forma

un c i l i n d r o central , e l floema se

desarro l la alrededor d e l xilema.

b) Act inoste la : e l xilema tie- forma es t re l l ada

(puede tener desde 2 6 más de 5

brazos) y l o rodea floema.

c ) P l e c t o s t e l a : e l xilema esta d i v i d i do en placas

longitudinales rodeadas por floema.

B) Si fonos te la : presenta una parte centra l medualr, e s ca-

r a c t e r í s t i c o de plantas más evolucionadas como son en

l a mayoría de las p t e r i d o f i t a s , gimnospermas y angis-

permas.

S e g h l a posici6n d e l xilema y floema hay dos ti-

pos de s i f onos te las : (Ver Fig. I) .

a ) S i fonoste la e r t o f l 6 i c a : e l floema e s t a rodeando

a l xilema externamente.

b )Si fonoste la a n f i f l ó i c a : e l floema rodea a x i l e -

ma externa e internamente, l a endoderrnis apa-

rece por fuera y por dentro d e l t e j i d o vascu-

l a r l imitando tanto corteza como médula.

-

- 56 -

Como derivados de los s i f onos t e l e s tenemos:

a ) D i c t i o s t e l a : 108 haces estan formando una red C i

l f nd r i ca , cada haz t i ene una estructura concég

t r i c a con una banda cent ra l de xilema rodeado

por floema.

b) Eustela: ca rac t e r í s t i c o de d icot i l edóneas y gim-

nospermas, formado por haces vasculares los

cuales contienen floema hacia e l e x t e r i o r y floe I I

I I

ma hacia e l i n t e r i o r . Est6 formado p o r haces i co la t e ra l e s y bico latera les .

c ) Atactoste ia : com6n de monocotiledóneas, los haces

vasculares se encuentran dispersos ea e l parkg

quima.

En es t e t i p o de e s t e l a no hay una de f in i -

c ión c lara entre corteza y médula.

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- 57 -

L

c

I

F i g u r a : I

Esquemas de 106 t i p o s de e s t e l a , diagramas en sección

t r a n s v e r s a l . A-A**. P r o t o s t e i a s . A. Haplostel . A ' . Actinoste la . A". Piec - t o s t e l a . B. Sifonoste la e c t o f l ó i c a . B*. Sifonoste la anfi - flbica o so-lenostela. C. D i c t l o s t e l a . D. E u s t e l a . E. Atac- t o s t e l a . Xilema, negro; floema blanco y médula punteada.

(Según : Bold . 1973).

L

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- 58 - 3. HOJA.

Las hojas se consideran los órganos f o t o s i n t é t i c o s de l a s plantas

vasculares. Son Bpendices d e l t a l l o y están formadas por un pec io lo y

una lámina. La lámina presenta una venación muy variada, en d i c o t i l e -

dbneas l a nervacibn e s ret iculada, mientras que en monocotiledóneas

l a nervacibn e s paralela.

En base a l a forma que presentan y función se distinguen di feren-

tes t i p o s de hojas.:

- Coti ledónes: que son l a s primeras hojas de l a planta.

- tiomófilas: que son órganos fo tos intét icos .

- Catá f i l as : Son hojas modificadas que no se encuentran en órganos

reproduc t ores.

- Antóf i las: son los péta los y los sépalos.

- Megasporbfilas: hojas carpelares, e s dec i r hojas de l a porcibn

femeniña.

- Microsporbf i las: son los f i lamentos de los estambres, es d e c i r

hojas de l a porción masculina.

En la hoja como primer t e j i d o externo ( en un cor te transversal ) , se

presenta l a epidermis, cuya función es protectora y reguladora de l a

evaporacibn de agua. Aquí es donde se presentan espacios interce lu la-

res , estomas (Ver F ig l3)r que permiten e l intercambio gaseoso.

Después se presenta e l mesbfilo, const i tuido por clor6nquiea (Ver

- 59 - Figura 12), en 61 cual se distinguen dos t i pos de parénquima (en e l

caso de hojas dors iventra les o b i f a c i a l e s :

a) Parénquima en empalizada.

Se encuentra debajo de l a epidermis que puede ser u n i o

p lur i e s t r a t i ficada.

Sus cé lu las se distr ibuyen en h i leras .

b ) Parénquima esponjoso.

SUS cé lu las tienen forma i r regular . Generalmente l a s célu-

l a s presentan ldbulos los cuales establecen contacto con los

lóbulos de l a s cé lu las vecinas.

Posee una gran cantidad de espacios interce lu lares . Se loca-

l i z a en l a cara abax ia l de l a hoja.

E l sistema conductor es ta representado por l a venacibn. Dicha ve-

na o haz vascular esta rodeado p o r cé lu las parenquimáticas que for - man l a vaina d e l haz. E l xilema 88 proyecta hacia l a super f i c i e adaxial

de l a hoja mientras que e l floema l o hace hacia l a super f i c i e abaxial.

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- 61 -

- 62 -

E a q u ~ de ia epidunids de Oiadíolas.

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- 65 -

tmm de 1i egiderds de urn dicotiledánei no identWiaada

(conipleJo e s t d t i c o de t ipo ananwftlco) .

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- ?a - V*BñhAG. iLgN PPL Z B h I S L b R E N c Z A S .

18. de transparencia:

1. Corte longi tudin l de eibhib d. ai. fib. (m).

2. Corte longitudinal de embrldn de p i a faba (2Cat).

3. corto iongitwiimi de e.bri6a de vicia faim ( 2 a ) .

4. Corte longitudinel do embrih de si. , f a k (2CE).

5. ~ p i d o n d s de e n t h u a (12m).

6. Eplderds B. pladiolw (=EX).

7. Epidemia de gLdielw (l2ear).

8. Epidords de phdiolua (2arX).

9. Epidermis de (l28X).

10. Epidermís de (Zaox) . 11. Epidoruís de una d i c e t i l o d k (#)(J1[).

12. Corte tranworsrl de he* do

13. Corte transversal d. hoj. de

U. C a r t . t n m r s a l de t a l l o rodifioado de CaauriU (U!&).

ap. (128X).

sp. (U&).

15. carte t n a s r e n a i d~ t i l i o a 4cpuimtia (ax).

l6. C o r t . t n m r s a l de t a l l o do Fauisetum (2OX).

- 79 - 17. Corte trausrersal de t a l l o de L~eoaadimn (2OX).

18. Corta tnwrersril de t a l l o de Ls0m.dItp (2OX).

19. Car te t r a a s r e r a l de tallo da ?ailrtum (m).

20. Cort. transversal de ta l lo $..en de Qmmw sp. (126X).

21. Corte tnasrarsa l do t a l l o joven do SP. (128X).

22. C d . tnnsvorsal de k más de ü rudr su (la).

23 *

24.

25

26.

27

28.

29.

30 *

31.

32 *

33

34.

- 80 - 35. Corte transversal de hoja de Fiaua elastiaa (2OX).

36. Corte transversal de hoj. de elastlaa (20x1.

37. Corte transversal de hoja de ekst laa (Zax).

38. Corte t r a m o r u l de ho3p de Fbw e lmtiaa (2OX).

39. Corte transrema1 de hoj. &

40. Corte tramml de ho3p do

41. Cork, t r a i a a u l de t a l l o modiflado de Casiurlna (I28X).

42. Corte t r a a a u m l da t a l l o nodifloado de Casuariar; (U&).

b3. C6rte t ranaersa i de t a l l o de EgUlSatUR (u&).

44. C o r t a transversal de t a l l o de Rauisstor (U&).

45. Corte transversal da t a l l o de Lseoboüiue (U&).

46. Corte tn n ms r s a l de t a l l o de Lmmodim (126X).

47. Corte traasrsrsai da t a l l o de Psiioter (u=).

48. Corte transversal d. t a l l o de Pallotum (U&).

49. Cor ta t m n m r s a l de t a l l o jwen de gaaous ap. (u&).

9. Corte tmnsrsrsal de a l l o jora de Qwmi sp. (Zoox).

9. Corte tm-i de la mí8 do OriiminMO (u8X).

52. Corte trriraerul de lo mí5 do Oruineae (U&).

q. (Urn).

sp. (U&).

- 53

c

- 81 - Corte transversal de mis swaandaria de Vicia faba (128x).

Corte tramvenal de nih. secundaria de vicia faba (128x).

Corte transtmai de los irliungioa de ?i letir (m).

corte transversal de lea s i n a ~ w de P s i l o t u (128~) .

Granos de polen de @thiirhlismi (2üOX).

Grinos de poien de Giadiohs (fDOx).

- 82 -

E l contenido d e l presente informe se ideb con l a inteac ión de

o f r e ce r una s e r i e de técnicas de preparaciones f i j a s que sirvan

como base para los cursos de l Area de Botánica que se imperten en

es ta Universidad.

Sin embargo, conscientes de l a s l imi tac iones ex is tentes , e l in-

forme que se presenta cumple con otro de sus f i n e s como urn fuente

informativa de in te rés , aunque resumida, ya que puede s e r v i r como

un inetrnmento ú t i l de enlace entre l a t eo r í a y l a práctica.

De ninguna manera, se pretende presentar un tratado acerca de

los temas expuestos, ya que e x i s t e bastante l i t e r a tu ra que expone

es tos mismos tóp icos más amplia y profundamente. Se trabadb COB e l

f i n de dar una informacida general, l a cual se ve enriquecida con

l a s preparaciones elaboradas en forma permanente, a s í mismo, con

e l mater ia l v i sua l que permite un mejor entendimiento de es tos temas.

Se espera que haya l a s fac i l idades y recursos su f i c i en t es para

próximos Se rv i c i o s Soc ia les , que contribuyan a l aumento d e l acervo

de l mater ia l ex i s tente , ya que es obv io que é s t e debe es tar en con-

t i nuo mantenimiento por e l uso a l que e s destinado.

Por último, entendiendo e l S e r v i c i o Soc i a l como urn t rabajo que

bene f i c i e a l a comunidad (en e s t e caso a l a un ivers i ta r ia ) y no co -

- 83 - P

mo un mero r equ i s i t o a cumplir durante la carrera consideramos que

se cumplió con los ob jet ivos estab lec idos de incrementar l a colec-

cibn de preparaciones f i j a s y material v i sua l u t i l i z ado en l o s cur-

80s d e l área de Botánica de la Universidad Aut6noma Metropolitana

I z t a pa l a pa.

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b - - L-

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- 84 -

A P E N L l ' C E

1. Fi ladores :

Mezclar l a s porciones A y B antes de usar.

Formol-aceto-alcohpl (F.A.A.)

Formo1 comercial ---------------- 16 m l

35 m l

Acido a c é t i c o comercial --------- 5 m l

Alcohol a l 96% ( e t í l i c o ) -------- 50 ml

Agua dest i lada ------------------

Este f i j a d o r e s recomendable para l a mayoría de los t e j i d o s ve-

geta les . E l tiempo mínimo de acción debe de ser 24 horas en l a

mayoría de los casos.

2. Colorantes:

- 85 - Cristal v i o l e t a & solución a lcohól ica

1 gr C r i s t a l v i o l e t a - ----- ------------ Alcoho l e t í l i c o a l 96% ----------- 100 gx

Se disuelve e l C r i s t a l v i o l e t a en e l a lcoho l e t í l i c o d e l 96% y

d s tarde tender a f i l t r a r .

F’ucsina ácida -- a l a solución a lohdl ica

1 g r F’ucsina ácida ------------------- Alcohol e t í l i c o de l 96% --------- 100 m i

D iso lver l a Fucsirra ácida en e l a lcohol e t í l i c o d e l 96% y más

más tarde f b l t r a r .

Safranina ‘loll acuosa

Safranim “On ----_-------------- Agua dest i lada ------------------ 100 ml

Disolver l a Safranina lqOll en agua dest i lada y en seguida f i l t r a r .

1 g r

soluci6n A :

Solución hiaturada de f a s t green

en a l coho l absoluto -------------- 1 parte

Met i l ce loso lve en ig t ia l cantidad

de a lcohol absoluto -------------- 1 parte

S o l u c i ó ~ B:

Alcohol absoluto ----------------- 25 partes

Ace i te de c lavo ------------------ 75 partes

Mezclar l a soiuci6n A con l a solución B. No necesi ta moverse.

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- 86 - 3. Deshidratantes :

Alcohol e t í i i c o 60% 60 ml de a lcoho l e t í i i c o de 96'

40 m l de agua dest i l ada

Alcohol e t í i i c o de 70%

70 m l de a lcohol e t í i i c o de 96'


Alcohol e t í l i c o d e l 80%

80 m l de a lcohol de 96° (et í i ico )

20 ml de agua dest i l ada

Alcohol e t í l i c o d e l 90%

90 m l de a lcohol e t i l i c o de 96'


Alcohol e t í l i c o -- de 9 6 ' ~ a lcohol absoluto

4. Medios de montaje:

Bálsamo be Canadá

E l bálsamo de Canadá e8 uno de los medios resinosos de montaje

a&s comunes. Se obtiene del exudado aa tu ra l de Abies balsamica.

Para obtener bUeR06 resultados, l o s cortes se deben de deshidratar

perfectamente hasta a lcohol abso luto y luego aclararmos, pues de lo

contrario las preparaciones se tornan amaril lentas.

L

L r

- 87 -

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- Resina s intet ica

La res ina s intat ica se adquiere comercialmente , está preparada

para usarse como medio de montaje. Con e l l a se pueden lograr prg

paraciones permanentes, que di f íc i lmente l legan adestruirse y no

l legan a tomarse amaril lentas como con e l bálsamo de Canadá.

Nota: De cada sustancia preparada, de acuerdo a las i n d i c a

ciones de cada caso, se colocaron en frascos goteros de

co lor ámbar, para e v i t a r que sufran descomposici6n por

acción de l a luz. Se etiquetan, colocando e l nombre c o i

p le to de l a substancia a l a que corresponde a s í como l a

fecha de preparación.

t

c

- aa -

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