21
2- 2- ة ي ر ي ت ك ب ل ا ات ب ن ل ا اض ر م ص ا ي خ ش ت ة ي ر ي ت ك ب ل ا ات ب ن ل ا اض ر م ص ا ي خ ش ت ص ي خ ش لت لة ب س و ك ة ري ه ا( الظ راض ع ى الأ عل ماد ت ع الأ5 ن ك م ي ة لأ ي ا ت ب ا ب ل ا5 ن م ص ي خ ش لت لة ب س و ك ة ري ه ا( الظ راض ع ى الأ عل ماد ت ع الأ5 ن ك م ي ة لأ ي ا ت ب ا ب ل ا5 ن م راض ع ة الأ اي ش لت=ك ل ود رض م ل ا راض ع ة الأ اي ش لت=ك ل ود رض م ل ا5 ن ف ع ل ا راض ع ة ا اي شG تG ت ال ب م ل ل ا بL ن سى عل ف. 5 ن ف ع ل ا راض ع ة ا اي شG تG ت ال ب م ل ل ا بL ن سى عل ف. ري ط ف ل ا ري لط ا5 ن ف ع ل وا ري ي ت ك ب ل ا ري لط ا ري ط ف ل ا ري لط ا5 ن ف ع ل وا ري ي ت ك ب ل ا ري لط ا ة ري ي ت ك ب ل ا ات درن ب ل ة ا اي شG تG ت . و ة ري ي ت ك ب ل ا ات درن ب ل ة ا اي شG تG ت . وBacterial Galls Bacterial Galls ة ري ش خ ل وا ة ري ش خ ل واInsect Galls Insect Galls . . 5 ن م اس ن ج ة ا بL ن ش ت د ق ري ي ت ك ب ل ا ري لط ا5 ن ف ع ل ا5 ن د ا ج ن ري خ ا ة ب ج ا ن5 ن م و ا رن ي ت ك ب ل اErwinia ا رن ي ت ك ب ل ا5 ن م و اPseudomonas . اك= ب ه و ف ي ر ع ت لا رده مف ي راض ع ى الأ عل ماد ت ع الأ5 ن ك م ي ة لأ ي د ا ك و ت ة ل ب م الأ5 ن م د عدن ل ا ى ف مار ت ل وا وراق الأ عات ق ت ت ا و ب لو ص ا ف ل ا جات ف ل5 ن م د عدن ل اً لأ ب م ف رض م ل ا ل ر عى ل} ا5 اج ن خ نا ه كل م جور س ل وا رة ر والد ك ش ل ا ب ص ق ى ف ط ي ط خ ت لم وا ط ما ط ل اً ما ت ل س ص ي خ ش لت ح ا ب ص ي ى ت ج ب ب س م ل ا ف ي ر ع ت م ث.

2- تشخيص أمراض النبات البكتيرية

  • Upload
    zenda

  • View
    482

  • Download
    25

Embed Size (px)

DESCRIPTION

2- تشخيص أمراض النبات البكتيرية. من الثابت أنه لا يمكن الاعتماد على الأعراض الظاهرية كوسيلة لتشخيص المرض وذلك لتشابه الأعراض . فعلى سبيل المثال تتشابه أعراض العفن الطري البكتيري والعفن الطري الفطري . وتتشابه التدرنات البكتيرية Bacterial Galls والحشرية Insect Galls. - PowerPoint PPT Presentation

Citation preview

البكتيرية -2 -2 النبات أمراض البكتيرية تشخيص النبات أمراض تشخيص

من الث���ابت أن���ه ال يمكن االعتم���اد على األع���راض الظاهري���ة من الث���ابت أن���ه ال يمكن االعتم���اد على األع���راض الظاهري���ة.� فعلى س�ب�يل .� فعلى س�ب�يل كوس�يلة �لتش�خي�ص ال�م�رض� و�ذل�ك ل�تش�ا�به �األع�ر�اضكوس�يلة �لتش�خي�ص ال�م�رض� و�ذل�ك ل�تش�ا�به �األع�ر�اض

الم�ث�ال تت�ش�ابه أع�راض ال�عف�ن الط�ر�ي البك�ت�يري وال�عفن الط�ري الم�ث�ال تت�ش�ابه أع�راض ال�عف�ن الط�ر�ي البك�ت�يري وال�عفن الط�ري Bacterial GallsBacterial Galls. �وت�تش��ابه �الت��درنات� البكت�يري��ة . �وت�تش��ابه �الت��درنات� البكت�يري��ة الفط��ريالفط��ري

. .Insect GallsInsect Gallsوالح�شرية والح�شرية

ومن ناحي�ة أخ�رى نج�د أن العفن الط�ري البكت�يري أو من Erwiniaق��د تس��ببه أجن��اس من البكتيري��ا

وهن��اك العدي��د من . Pseudomonasالبكتيري��ا األمثل�ة تؤك�د أن�ه ال يمكن االعتم�اد على األع�راض بمفرده�ا لتعري�ف الم�رض فمثًالT العدي�د من لفح�ات الفاص�وليا وتبقع�ات األوراق والثم�ار فى الطم�اطم والتخطي�ط في قص�ب الس�كر وال�ذرة والس�ورجم كله��ا تحت��اج إلى ع��زل ثم تعري��ف المس��بب ح��تى

Tيصبح التشخيص سليما .

كذلك يجب معرف���ة اله���دف الرئيس���ي من التش���خيص حيث كذلك يجب معرف���ة اله���دف الرئيس���ي من التش���خيص حيث Tتت�دا�خل� ع�وام�ل ال�وق�ت �والجه�د وا�لتك�اليف� في اله�دف فم�ثًال Tتت�دا�خل� ع�وام�ل ال�وق�ت �والجه�د وا�لتك�اليف� في اله�دف فم�ثًالهن��ا�ك تش��خيص س��ري�ع� هدف��ه� إعط��ا�ء توص��ي�ة� للم��ز�ارع أو� هن��ا�ك تش��خيص س��ري�ع� هدف��ه� إعط��ا�ء توص��ي�ة� للم��ز�ارع أو�

وق�د ي�ك�ون �وق�د ي�ك�ون � .. ”�”� فتر�ا�ض�ىفتر�ا�ض�ىإإالب�س�تان�ي �للم�كافح�ة "وه�و تش�خ�يص الب�س�تان�ي �للم�كافح�ة "وه�و تش�خ�يص ا�ل�مط�ل��وب� ه��و� ت�ح�دي��د� ال�م�س��بب� �بد�ق��ة �وه��ذ�ا ي�ح�ت��ا�ج �إلى� جه��د� ا�ل�مط�ل��وب� ه��و� ت�ح�دي��د� ال�م�س��بب� �بد�ق��ة �وه��ذ�ا ي�ح�ت��ا�ج �إلى� جه��د� و�ت�ك�ا�لي�ف� أك�بر� وع�ا�د�ة م�ا ت�حت�ا�ج مع�ظم ال�ح�ا�الت� إل�ى �التش�خ�ي�ص و�ت�ك�ا�لي�ف� أك�بر� وع�ا�د�ة م�ا ت�حت�ا�ج مع�ظم ال�ح�ا�الت� إل�ى �التش�خ�ي�ص

.. ال�سريع �وقليل� منها� يحتاج إلى �عزل وتنقية...� الخال�سريع �وقليل� منها� يحتاج إلى �عزل وتنقية...� الخ

يعتم�د التش�خيص الس�ليم للم�رض فى البداي�ة على التس�جيل يعتم�د التش�خيص الس�ليم للم�رض فى البداي�ة على التس�جيلT التعر�ي��ف الس��ليم� للعائ��ل T التعر�ي��ف الس��ليم� للعائ��ل ال��دق�يق لألع��راض المر�ض��ية وأيض��ا� ال��دق�يق لألع��راض المر�ض��ية وأيض��ا�وهن�اك العدي�د� من ا�لمراج�ع ا�لعلمي�ة يمكن� االس�تعا�نة به�ا في وهن�اك العدي�د� من ا�لمراج�ع ا�لعلمي�ة يمكن� االس�تعا�نة به�ا في التع�رف عل�ى األع�را�ض من الص�و�ر الفوتوغرا�في�ة وأيض�اT تفي�د التع�رف عل�ى األع�را�ض من الص�و�ر الفوتوغرا�في�ة وأيض�اT تفي�د

.. في� ذلك في� ذلكHerbariumHerbariumالع�ينات المحفوظة �الع�ينات المحفوظة �

ولتًالفى ذل�ك يجب أن توض�ع العين�ات النباتي�ة ف�ور جمعه�ا في ولتًالفى ذل�ك يجب أن توض�ع العين�ات النباتي�ة ف�ور جمعه�ا في أكي��ا�س من الب��ولى إثيلي�ن ثم توض��ع األكي��اس� في ص��ندوق أكي��ا�س من الب��ولى إثيلي�ن ثم توض��ع األكي��اس� في ص��ندوق

م�ع تجن�ب تع�ريض العين�ات أو م�ع تجن�ب تع�ريض العين�ات أو Blue IceBlue Ice �ب�ه �ب�ه Ice BoxIce Boxحف�ظ حف�ظ ا�لص�ندوق لل�شمس. كم�ا �يجب تجفي�ف� العين�ات قب�ل و�ض�عها ا�لص�ندوق لل�شمس. كم�ا �يجب تجفي�ف� العين�ات قب�ل و�ض�عها

ومن الض��ر�ورى أن تك��ون ومن الض��ر�ورى أن تك��ون ..من ا�لم��اء �الزا�ئ��دمن ا�لم��اء �الزا�ئ��د في األكي��اسفي األكي��اسالع�ين�ات ممث�ل�ة لألع�راض� س�واء ك�انت� أعراض�ها� على ال�ج�ذر أو الع�ين�ات ممث�ل�ة لألع�راض� س�واء ك�انت� أعراض�ها� على ال�ج�ذر أو

. .الخالخ....� ....� السا�ق أو �األور�اق أو األزهار أو ال�ثمار السا�ق أو �األور�اق أو األزهار أو ال�ثمار

من الش�ائع ع�دم فحص العين�ات المص�ابة مباش�رة بع�دجمعه�ا من الحق�ل ل�ذلك ق�د ي�ؤدى ط�ول ف�ترة النق�ل

. والتخزين إلى فشل عمليات العزل

العينات 2-12-1 وجمع العينات األعراض وجمع األعراض العينات 2-12-1 وجمع العينات األعراض وجمع األعراض

فى حال��ة األم��راض ال��تي تص��يب الج��ذور يغس��ل ج��زء من العين��ة فى حال��ة األم��راض ال��تي تص��يب الج��ذور يغس��ل ج��زء من العين��ةلتخليص ا�لج�ذر من األت�رب�ة ثم تجف�ف �من المي�ا�ه والرطوب�ة الزائ�دة لتخليص ا�لج�ذر من األت�رب�ة ثم تجف�ف �من المي�ا�ه والرطوب�ة الزائ�دة قب�ل �ن�ق�ل ال�عين�ة� وي�ترك �الج�ز�ء� اآلخ�ر� ب�دون� إ�زا�ل�ة الترب�ة� حيث ق�د� قب�ل �ن�ق�ل ال�عين�ة� وي�ترك �الج�ز�ء� اآلخ�ر� ب�دون� إ�زا�ل�ة الترب�ة� حيث ق�د� ص�قة �للج�ذ�ر �فى ا�لع�ز�ل م�ع ص�قة �للج�ذ�ر �فى ا�لع�ز�ل م�ع يحت�اج� الع�ز�ل �إ�لى �اس�تخد�ام� ا�لتر�ب�ة �المًال� يحت�اج� الع�ز�ل �إ�لى �اس�تخد�ام� ا�لتر�ب�ة �المًال�ض��رو�رة �ل��ف ا�لك�ي�س ج�ي��دا�T ح��و�ل ا�لج��ذ�ر �لمن��ع ت�س��اق�ط ا�ألت�ر�ب��ة من ض��رو�رة �ل��ف ا�لك�ي�س ج�ي��دا�T ح��و�ل ا�لج��ذ�ر �لمن��ع ت�س��اق�ط ا�ألت�ر�ب��ة من

.. حولهحوله

من الث��ابت أن اس��تخدام عين��ات تمث��ل األع��راضالمبك�رة لإلص�ابة أفض�ل بكث�ير من اس�تخدام عين�ات

األع��راض المت��أخرة وذل��ك لتس��هيل عملي��ة ت�ظه��ر. العزل ومنع فرصة عزل مسببات أخرى ثانوية

األع�راض المرض�ية ال�تى تظه�ر على األوراق وال�تى فى Water Soakedتس��بب بق��ع ش��به مائي��ة

عن��د تعرض��ها ةمظهره��ا أو أع��راض ش��به ش��فافللض�وء تك�ون أفض�ل فى الع�زل من العين�ات ذات

.Necroticالمظهر البنى أو المتقرحة

فى حال�ة تبقع�ات األوراق يجب االحتف�اظ ببعض النم�اذج جاف�ة فى حال�ة تبقع�ات األوراق يجب االحتف�اظ ببعض النم�اذج جاف�ةب�ع�د� �ض�غط�ها �ب�ين� ط�بق�ت�ين م�ن ال�ورق� �ا�لخ�الى م�ن� �األص�باغ أو ورق ب�ع�د� �ض�غط�ها �ب�ين� ط�بق�ت�ين م�ن ال�ورق� �ا�لخ�الى م�ن� �األص�باغ أو ورق الت�ر�ش�يح ل�لرج�وع� إ�ليه�ا� عن�د ال�ل�زو�م �كم�عش�ب� �وأ�يض�ا�T ي�مكن الع�زل الت�ر�ش�يح ل�لرج�وع� إ�ليه�ا� عن�د ال�ل�زو�م �كم�عش�ب� �وأ�يض�ا�T ي�مكن الع�زل

.. منهامنها

لوح�ظ أن العدي�د من البكتيري�ا الممرض�ة يمكنه�ا أن تعيش فى لوح�ظ أن العدي�د من البكتيري�ا الممرض�ة يمكنه�ا أن تعيش فىاألنس��جة الجاف��ة لم��دد ت��تراو�ح بي�ن ش��هر لع��دة �س��نوات ويمكن األنس��جة الجاف��ة لم��دد ت��تراو�ح بي�ن ش��هر لع��دة �س��نوات ويمكن T م�عظم البكتيري�ا من T م�عظم البكتيري�ا من اس�تخدا�مها فى الع�زل �م�رات أخ�رى فمثًال� اس�تخدا�مها فى الع�زل �م�رات أخ�رى فمثًال�

يمكنه�ا� المعيش�ة� فى األنس�جة الجاف�ة يمكنه�ا� المعيش�ة� فى األنس�جة الجاف�ة XanthomonasXanthomonasال���جنس ال���جنس .. لمدد تزيد عن العا�ملمدد تزيد عن العا�م

الفحص 2-2الميكروسكوبى

الفحص 2-2قب�ل محاول�ة الع�زل يجب الفحص الميكروس�كوبى قب�ل محاول�ة الع�زل يجب الفحص الميكروس�كوبى الميكروسكوبى

.. لإلصابات البكتيرية الواضحةلإلصابات البكتيرية الواضحة يمكن التأك�د من خ�روج راش�ح من إف�رازات لزج�ة يمكن التأك�د من خ�روج راش�ح من إف�رازات لزج�ةOozesOozes من العين�ات من العين�ات

المص���ابة عن طري���ق النظ���ر� إلى أس���طح �األورا�ق المص���ابة فيمكن المص���ابة عن طري���ق النظ���ر� إلى أس���طح �األورا�ق المص���ابة فيمكن مع�ة� �وق�د ي�ش�ا�هد �ذل�ك� أيض�اT على أ�س�طح مع�ة� �وق�د ي�ش�ا�هد �ذل�ك� أيض�اT على أ�س�طح مش�اهدة آ�ث�ار طب�ق�ة �رقي�ق�ة ال� مش�اهدة آ�ث�ار طب�ق�ة �رقي�ق�ة ال�

ت تالسي�قان وع�لى ا�لبتًال� السي�قان وع�لى ا�لبتًال�

م�ازالت حي�ة لع�دة أي�ام فى م�ازالت حي�ة لع�دة أي�ام فى ىىإذا م�ا حض�نت األج�زاء المص�ابة وهإذا م�ا حض�نت األج�زاء المص�ابة وه .. ال�تقرح�اتال�تقرح�ات ع�لى ع�لىOozesOozesوج�ود رط�وب�ة عالي�ة فغالب�اT م�ا �تظه�ر ال�� وج�ود رط�وب�ة عالي�ة فغالب�اT م�ا �تظه�ر ال��

البط����اطس الطازج����ة المص����ابة بالبكتيري����ا Pseudomonas solanacearum فحص يجب

عيونه�ا أوالT فق�د تخ�رج منه�ا البكتيري�ا فى ص�ورة Oozes كما يخرج Oozeمن مدادات الدرنة Tأيضا .

إذا كانت األنسجة النباتية طازجة فإن ال� إذا كانت األنسجة النباتية طازجة فإن ال�OozeOoze سيخرج منها مباشرة سيخرج منها مباشرة .. أما إذا كانت مسنة فسيخرج ببطئ خاصة عند حواف القطعأما إذا كانت مسنة فسيخرج ببطئ خاصة عند حواف القطع

معظم البكتيريا الممرضة متحركة باألسواط ويمكن معظم البكتيريا الممرضة متحركة باألسواط ويمكن . .OozesOozesمشاهدة الحركة فى ال� مشاهدة الحركة فى ال�

تختل�ف طبيع�ةOozes من مس�بب آلخ�ر فال� Ooze Xanthomonasالخ��ارج من األنس��جة المص��ابة ب�

أك�����ثر تماس�����كاT من الن�����اتج عن البكتيري�����ا Pseudomonas.

فى حال��ة تبقع��ات األوراق والتخطي��ط يجب قط��ع مم من الح�زم الوعائي�ة المج�اورة للمنطق�ة 4ح�والى

المص�ابة ثم تحم�ل فى قط�رات من المي�اه وتفحص ميكروس�كوبياT بع�د وض�عها على ش�ريحة وتغطيته�ا ب��

Cover واس��تخدام تكب��ير X100 ، X40 ويفض��ل Phase Contrast Microscopyالفحص باس�تخدام

8شكل – من سواء المصابة النباتية االنسجة من البكتيريا عزل تسلسل

مصاب نبات ساق من أو الورقة

8شكل –من سواء المصابة النباتية االنسجة من البكتيريا عزل تسلسل

مصاب نبات ساق من أو الورقة

9شكل –بالبكتيريا التربة تلوث مدى على للتعرف سريعة طريقة

Agrobacterium tumefaciens

9شكل –بالبكتيريا التربة تلوث مدى على للتعرف سريعة طريقة

Agrobacterium tumefaciens

باس�تثناء البكتيري�ا باس�تثناء البكتيري�اAgrobacteriumAgrobacterium ف�إن ال�� ف�إن ال�� OozesOozes تخ�رج تخ�رج من ا�إلص�ا�بات البكت�ي�ري�ة أو �تظه�ر� ك�ت�ل من ا�ل�نم�وا�ت البكت�يري�ة من ا�إلص�ا�بات البكت�ي�ري�ة أو �تظه�ر� ك�ت�ل من ا�ل�نم�وا�ت البكت�يري�ة فى� مك��ان� القطع. وعلى� ال��رغم �من� ذل��ك� فق��د تغي�ب ه��ذه �فى� مك��ان� القطع. وعلى� ال��رغم �من� ذل��ك� فق��د تغي�ب ه��ذه �ال�ظ�اهرة فى� �بعض �الح�االت �فيظن �ا�لب�عض خط�أ ع�دم� وج�ود ال�ظ�اهرة فى� �بعض �الح�االت �فيظن �ا�لب�عض خط�أ ع�دم� وج�ود إص�ا�بة �بكتيري�ة وق�د يك�و�ن �ا�لس�بب �فى ذ�ل�ك ه�و� ت�د�اخل مس�ب�ب إص�ا�بة �بكتيري�ة وق�د يك�و�ن �ا�لس�بب �فى ذ�ل�ك ه�و� ت�د�اخل مس�ب�ب حظ�ة ذل�ك ب�الفحص حظ�ة ذل�ك ب�الفحص آخ�ر ث�ا�نوى �مث�ل �الفطري�ات و�يمك�ن� مًال� آخ�ر ث�ا�نوى �مث�ل �الفطري�ات و�يمك�ن� مًال�

.. ال�ميكرو�سكو�بى أو ب�العدسات �المكبرةال�ميكرو�سكو�بى أو ب�العدسات �المكبرة

يجب الدق��ة التام��ة عن��د الفحص الميكروس��كوبى ح��تى ال يجب الدق��ة التام��ة عن��د الفحص الميكروس��كوبى ح��تى ال أو البًالس�تيدات أو البًالس�تيدات LatexLatexي�ختل�ط األم�ر� فيش�خص� اللب�ن النب�اتي ي�ختل�ط األم�ر� فيش�خص� اللب�ن النب�اتي

أو حبي�ب�ات النش�ا� على� أنه�ا خ�ًالي�ا بكتي�ري�ة ف�ا�الخ�تًالف �بينهم أو حبي�ب�ات النش�ا� على� أنه�ا خ�ًالي�ا بكتي�ري�ة ف�ا�الخ�تًالف �بينهم و�اض��ح� فى الش��ك�ل و�الحج�م ودرج��ة �انعك��اس� الض��وء ع�ليهم و�اض��ح� فى الش��ك�ل و�الحج�م ودرج��ة �انعك��اس� الض��وء ع�ليهم

..Phase Contrast MicroscopyPhase Contrast Microscopyفى ح�الة اس�ت�خدام ا�ل� فى ح�الة اس�ت�خدام ا�ل�

قد تظه�ر البكتيري�ا المعزول�ة من ال� قد تظه�ر البكتيري�ا المعزول�ة من ال�OozesOozes مختلف�ة مختلف�ة .. المزرعة الصلبة المزرعة الصلبةىىمورفولوجياT عن شكلها فمورفولوجياT عن شكلها ف

عن�د التأك�د من وج�ود ال� عن�د التأك�د من وج�ود ال�OozeOoze ف�إن الخط�وة التالي�ة ه�و قط�ع ف�إن الخط�وة التالي�ة ه�و قط�ع ج�ز�ء م�ن ا�لعين�ة ال�مص�ا�بة �باس�تخدا�م أ�دوات تش���ريح �معقم��ة ثم ج�ز�ء م�ن ا�لعين�ة ال�مص�ا�بة �باس�تخدا�م أ�دوات تش���ريح �معقم��ة ثم

معقم أو معقم أو Phosphate BufferPhosphate Buffer م�م م�اء مع�قم أو� م�م م�اء مع�قم أو� 33--22تعل�ق� �فى تعل�ق� �فى .. بيئة سائلة معقمة حت�ى ت�نتشر ال�بك�ت�ير�يا فى ا�لسائلبيئة سائلة معقمة حت�ى ت�نتشر ال�بك�ت�ير�يا فى ا�لسائل

دقيق��ة على درج��ة ح��رارة دقيق��ة على درج��ة ح��رارة 3030--2020تترك العين��ة لم��دة تترك العين��ة لم��دة الغرف�ة ثم� تغ�مس اإلب�ر�ة ا�لبكتيري�ة م�ن ا�لمع�ل�ق وتخط�ط� الغرف�ة ثم� تغ�مس اإلب�ر�ة ا�لبكتيري�ة م�ن ا�لمع�ل�ق وتخط�ط�

.. على �البيئة الصل�بة ال�مناسبة وتك�رر في �عدة أطب�اقعلى �البيئة الصل�بة ال�مناسبة وتك�رر في �عدة أطب�اق

طرق العزل طرق العزل1-3-12-3-2 طرق العزل طرق العزل2-3-12-3-1

أن يك�ون س�طح البيئ�ة ج�اف وإال ف�إن Tأن يك�ون س�طح البيئ�ة ج�اف وإال ف�إن من الض�رورى ج�دا Tمن الض�رورى ج�داا�لبكتيري��ا ست�س��بح ع�لى الس��طح ا�لمبل��ل وت�تك��ون ن�م��وات ا�لبكتيري��ا ست�س��بح ع�لى الس��طح ا�لمبل��ل وت�تك��ون ن�م��وات

. . مم�تزج���ة وال �يمكن الحص���ول على� مس���تعمرات فردي���ةمم�تزج���ة وال �يمكن الحص���ول على� مس���تعمرات فردي���ة د�رج�ة �مئو�ي�ة قب�ل� ص�بها د�رج�ة �مئو�ي�ة قب�ل� ص�بها 4545ول�تنف�ي�ذ ذل�ك ت�ب�رد البيئ�ة� إل�ى� ول�تنف�ي�ذ ذل�ك ت�ب�رد البيئ�ة� إل�ى�

وت�ترك� �األطب�ا�ق ال�مص�ب�وبة عل�ي در�ج��ة ح���رار�ة الغ��رفة لم�دة وت�ترك� �األطب�ا�ق ال�مص�ب�وبة عل�ي در�ج��ة ح���رار�ة الغ��رفة لم�دة .� ويمك����ن� ا�ختص����ار ال��وقت �إذ�ا �م���ا ت���رك� .� ويمك����ن� ا�ختص����ار ال��وقت �إذ�ا �م���ا ت���رك� س��اعة س��اعة4848--2424

( ( Laminar Flow ApparatusLaminar Flow Apparatus))ا�لط�ب����ق مفت���و�حاT ف���ى ا�لط�ب����ق مفت���و�حاT ف���ى Biological Safty CabinetBiological Safty Cabinet� حظ�ة 1515 ل�م�دة� � ل�م�دة� حظ�ة دقي�ق�ة م�ع م�ًال� دقي�ق�ة م�ع م�ًال�

.. � �أن يكون الفلتر الخاص بالتهوية صالح لًالستعمالأن يكون الفلتر الخاص بالتهوية صالح لًالستعمال

2525بع�د التخطي�ط تحض�ن األطب�اق على درج�ة ح�رارة بع�د التخطي�ط تحض�ن األطب�اق على درج�ة ح�رارة--م لك�ل� ا�لمس�ببا�ت الب�كتيري�ة ب�اس�تثن�اء الب�كتيري�ا م لك�ل� ا�لمس�ببا�ت الب�كتيري�ة ب�اس�تثن�اء الب�كتيري�ا 530530

ClavibacteriumClavibacterium ) )CorynebacteriumCorynebacterium(( ألن درج��ة ألن درج��ة .. مم525525--2323الحرارة� المث�لى لنموها تتراوح �بين� الحرارة� المث�لى لنموها تتراوح �بين�

Tيوج�د بين األجن�اس اختًالف�ات فى مع�دل النم�و فمثًال Tيوج�د بين األجن�اس اختًالف�ات فى مع�دل النم�و فمثًال تنتج تنتج ,,Pseudomonas, XanthomonasPseudomonas, Xanthomonasمعظم ال� معظم ال�

س�اعة من س�اعة من 7272--3636مس�تعمرات ميكروس�كوبية خًالل مس�تعمرات ميكروس�كوبية خًالل . .التحضين على الدرجة المثلى لنموهاالتحضين على الدرجة المثلى لنموها

هن��اك اختًالف��ات واض�حة فى مع��دل نم��و البكتيري�ا المختلف��ة هن��اك اختًالف��ات واض�حة فى مع��دل نم��و البكتيري�ا المختلف��ةالموج�ود�ة على ا�لنب�ات وال�تى �يمكن ا�س�تخدامها كمرش�د عن�د الموج�ود�ة على ا�لنب�ات وال�تى �يمكن ا�س�تخدامها كمرش�د عن�د

. فمع��ر�وف م�ثًالT أ�ن معظم ال�بكتيري��ا الرمي��ة تنم��و . فمع��ر�وف م�ثًالT أ�ن معظم ال�بكتيري��ا الرمي��ة تنم��و ال�تش��خيصال�تش��خيصت نج��د أن� بد�رج��ة أس��رع من �ال�ممرض��ةبد�رج��ة أس��رع من �ال�ممرض��ة ت نج��د أن� .� وفى �مع�ظم ا�لح��ا�ال� .� وفى �مع�ظم ا�لح��ا�ال�

س��ا�عة س��ا�عة 3636--2424ال�رمي��ا�ت تنتج مس��تعمرات �م�يكروس��ك�وبي�ة بع��د ال�رمي��ا�ت تنتج مس��تعمرات �م�يكروس��ك�وبي�ة بع��د .. م وبالت�الى يجب ا�ستبعادهام وبالت�الى يجب ا�ستبعادها528528--2525على درج�ة حرارة على درج�ة حرارة

للكش�ف عن ظه�ور المستعمرات Tللكش�ف عن ظه�ور المستعمراتيجب متابع�ة فحص األطب�اق يومي�ا Tيجب متابع�ة فحص األطب�اق يومي�ا ..

يًالح�ظ أن�ه إذا ك�انت العين�ات المع�زول منه�ا عين�ات طازج�ة يًالح�ظ أن�ه إذا ك�انت العين�ات المع�زول منه�ا عين�ات طازج�ةوحال�ته�ا جي�دة� ف�إن� نتي�ج�ة التخ�طي�ط على �البيئ�ات الص�لبة ه�و وحال�ته�ا جي�دة� ف�إن� نتي�ج�ة التخ�طي�ط على �البيئ�ات الص�لبة ه�و

.. ظه�و�ر �الم�س�تع�م�رات �س�ائ�د�ة فى ال�طب�ق دون �تل�وث� بالرمياتظه�و�ر �الم�س�تع�م�رات �س�ائ�د�ة فى ال�طب�ق دون �تل�وث� بالرميات

البكتيري�ا الرمي�ة البكتيري�ا الرمي�ةErwiniaErwinia herbicolaherbicola تعطى نم�و رقي�ق تعطى نم�و رقي�ق ل�ز�ج� أص�فر� ال�ل�ون �ذو� ص�ب�غة غ�ير �من�تش�ر�ة وه�ذه� تح�ت�اج إ�لى ل�ز�ج� أص�فر� ال�ل�ون �ذو� ص�ب�غة غ�ير �من�تش�ر�ة وه�ذه� تح�ت�اج إ�لى

ح�يث ح�يث XanthomonasXanthomonasخ�بر�ة خاص�ة ل�تميزه�ا �عن الب�كت�يري�ا خ�بر�ة خاص�ة ل�تميزه�ا �عن الب�كت�يري�ا .. يقع الكثيرين فى خط�أ التف�ريق بينهما�يقع الكثيرين فى خط�أ التف�ريق بينهما�

إذا ت�ركت األج�زاء النباتي�ة مبلل�ة عقب جمعه�ا فإنه�ا س�تحمل إذا ت�ركت األج�زاء النباتي�ة مبلل�ة عقب جمعه�ا فإنه�ا س�تحملا�لعدي�د من ا�لبكتيري�ا الرم�ي�ة ال�تى� تف�و�ق س�رع�ة نموه�ا البكتيري�ا ا�لعدي�د من ا�لبكتيري�ا الرم�ي�ة ال�تى� تف�و�ق س�رع�ة نموه�ا البكتيري�ا ا�لممرض��ة و�فى ه��ذه الح�ال��ة يحت��ا�ج الع��زل� إلى بي�ئ��ات ش��به ا�لممرض��ة و�فى ه��ذه الح�ال��ة يحت��ا�ج الع��زل� إلى بي�ئ��ات ش��به

، وذل�ك عن�د ، وذل�ك عن�د اخت�ياري�ة �أو تحض�ير سل�س�لة �من التخفيف�ات العال�ي�ةاخت�ياري�ة �أو تحض�ير سل�س�لة �من التخفيف�ات العال�ي�ةإج�ر�اء عملي�ات الت�خطي�ط على �البيئ�ات� الص�لبة �ف�المعلق المعتم إج�ر�اء عملي�ات الت�خطي�ط على �البيئ�ات� الص�لبة �ف�المعلق المعتم

OpaqueOpaque 10001000 : : 11 ، � ، �100100 : : 11 يمكن ت�خفيف�������ه بنس�������بة� يمكن ت�خفيف�������ه بنس�������بة� باس�تخدام كمي�ة من بيئ�ة س�ا�ئلة م�عقم�ة. ويمكن ببس�اطة ملئ باس�تخدام كمي�ة من بيئ�ة س�ا�ئلة م�عقم�ة. ويمكن ببس�اطة ملئ

الخ�اص� ب�اإلبرة� )و�مع�روف أن �قطره�ا ح�والى الخ�اص� ب�اإلبرة� )و�مع�روف أن �قطره�ا ح�والى LoopLoopال��حلقة ال��حلقة .. � �مم( ث�م يلقح به ا�لبيئة السائلةمم( ث�م يلقح به ا�لبيئة السائلة44- - 33

أخرى 2-3-22-3-2 عزل أخرى طريقة عزل أخرى 2-3-22-3-2طريقة عزل أخرى طريقة عزل طريقة

وهى طريق��ة اقتص��ادية ويس��تخدم فيه��ا أدوات زجاجي��ة وهى طريق��ة اقتص��ادية ويس��تخدم فيه��ا أدوات زجاجي��ة :: ىىتتآلآلمعقمة� مثل ا�لمست�خدمة ف�ى عزل الفط�ريات كامعقمة� مثل ا�لمست�خدمة ف�ى عزل الفط�ريات كا

يوض�ع ج�زء ص�غير من النس�يج النب�اتى المص�اب ق�رب حاف�ة يوض�ع ج�زء ص�غير من النس�يج النب�اتى المص�اب ق�رب حاف�ةالط�ب��ق� الم�حت��وي ع�ل�ي �بيئ��ة ص��لب�ة �ثم يوض��ع� علي� ه��ذ�ا الط�ب��ق� الم�حت��وي ع�ل�ي �بيئ��ة ص��لب�ة �ثم يوض��ع� علي� ه��ذ�ا

.. دقيقة دقيقة2020--1515ا�لنس�ي�ج ق�ط�رة �م�ن م�ا�ء م�عقم �وي�ترك �لم�دة� ا�لنس�ي�ج ق�ط�رة �م�ن م�ا�ء م�عقم �وي�ترك �لم�دة�

يخط�ط ه�ذا المعل�ق مباش�رة فى الطب�ق واله�دف من ت�رك العين�ة يخط�ط ه�ذا المعل�ق مباش�رة فى الطب�ق واله�دف من ت�رك العين�ةله�ذه� �الم�د�ة ه�و ا�ل�س�ما�ح ل�لب�كت�يري�ا �ب�الخر�وج �من ا�لنس�يج المص�اب له�ذه� �الم�د�ة ه�و ا�ل�س�ما�ح ل�لب�كت�يري�ا �ب�الخر�وج �من ا�لنس�يج المص�اب

.. إلى الماء وتحررهاإلى الماء وتحررها

يمكن رف�ع كف�اءة ه�ذه الطريق�ة بالض�غط على النس�يج النب�اتى ب�إبرة معقم�ةيمكن رف�ع كف�اءة ه�ذه الطريق�ة بالض�غط على النس�يج النب�اتى ب�إبرة معقم�ة ..

التعقيم الس�طحى ب�المطهرات غ�ير مطل�وب فى ع�زل البكتيري�ا التعقيم الس�طحى ب�المطهرات غ�ير مطل�وب فى ع�زل البكتيري�ات� ن�ادرة� �وأي�ض�ا�T فى� حا�ل�ة� م�ا �إ�ذا ك�ان� �ا�لس�طح ط�ارد� ت� ن�ادرة� �وأي�ض�ا�T فى� حا�ل�ة� م�ا �إ�ذا ك�ان� �ا�لس�طح ط�ارد� إ�ال �فى ح�اال� إ�ال �فى ح�اال�ل�ل�م�اء ك�م�ا �فى ح�ال�ة �أ�و�راق ق�ص�ب� ال�س�كر.أ�ما� �الس�ب�ب فى ع�دم ل�ل�م�اء ك�م�ا �فى ح�ال�ة �أ�و�راق ق�ص�ب� ال�س�كر.أ�ما� �الس�ب�ب فى ع�دم ال�ت�عقي�م� ه���و� أن ال�م���واد ا�لد�اخل���ة ف�ى التع�قيم �تمتص� بس���رعة ال�ت�عقي�م� ه���و� أن ال�م���واد ا�لد�اخل���ة ف�ى التع�قيم �تمتص� بس���رعة

.. فائ�قة ف�ى األن�سج�ة النباتية� وتقتل ا�لب�كتيريا� الموجودة �بهافائ�قة ف�ى األن�سج�ة النباتية� وتقتل ا�لب�كتيريا� الموجودة �بها

الصوديوم هيبوكلوريت هى التعقيم فى المستخدمة المواد الصوديوم أهم هيبوكلوريت هى التعقيم فى المستخدمة المواد أهمبنسبة بنسبة ويستخدم عدة% 0.50.5ويستخدم المعقم بالماء الشطف ثم دقيقتين عدة% لمدة المعقم بالماء الشطف ثم دقيقتين لمدة

.. مراتمرات

ف�إن األفض�ل ه�و غس�ل األج�زاء النباتي�ة بالم�اء الج�ارى Tف�إن األفض�ل ه�و غس�ل األج�زاء النباتي�ة بالم�اء الج�ارى وعموم�ا Tوعموم�ا.. عدة� �مرات� ث�م �الم�عقم �وذلك قبل إ�جراء� تق�ط�يع �للنسي�جعدة� �مرات� ث�م �الم�عقم �وذلك قبل إ�جراء� تق�ط�يع �للنسي�ج

Needle Puncture MethodNeedle Puncture Method طريقة العزل ب� طريقة العزل ب� 2-3-32-3-3 Needle Puncture MethodNeedle Puncture Method طريقة العزل ب� طريقة العزل ب� 2-3-32-3-3

نف�ذها نف�ذهاGoth, 1965Goth, 1965 وذل�ك لع�زل البكتيري�ا من الفاص�وليا وتس�تخدم وذل�ك لع�زل البكتيري�ا من الفاص�وليا وتس�تخدم ى :ى :اآلن �على نطاق� واسع �فى محا�صيل �أخرى �و�تتم �كاآلتاآلن �على نطاق� واسع �فى محا�صيل �أخرى �و�تتم �كاآلت

فى معقمة مدببة إبرة تغمس المصابة القرون من فى للعزل معقمة مدببة إبرة تغمس المصابة القرون من للعزلويوضع اآلجار بيئة فى غمسها يعاد ثم اإلصابة ويوضع مكان اآلجار بيئة فى غمسها يعاد ثم اإلصابة مكان

البكتيريا بإبرة تفرد ثم الثقب مكان فى معقم ماء البكتيريا قطرة بإبرة تفرد ثم الثقب مكان فى معقم ماء .. قطرة

سطح على Tسطحيا المغسولة العينة توضع األوراق تبقعات سطح فى على Tسطحيا المغسولة العينة توضع األوراق تبقعات فىترفع ثم البقعة مكان فى المعقمة المدببة اإلبرة تغمس ثم ترفع اآلجار ثم البقعة مكان فى المعقمة المدببة اإلبرة تغمس ثم اآلجار

البكتيريا بإبرة وتفرد عليها معقم ماء قطرة ويوضع البكتيريا العينة بإبرة وتفرد عليها معقم ماء قطرة ويوضع .. العينة

االختيارية 2-3-42-3-4 االختيارية البيئات االختيارية 4-3-42-3-2البيئات االختيارية البيئات البيئات

تعت�بر عملي�ة الع�زل من الترب�ة أو من األج�زاء النباتي�ة المتحلل�ة تعت�بر عملي�ة الع�زل من الترب�ة أو من األج�زاء النباتي�ة المتحلل�ةعملي�ة ص�عبة نظ�راT لوج�ود� خل�ي�ط م�ن �المت�رمم�ات وال�متط�فًالت عملي�ة ص�عبة نظ�راT لوج�ود� خل�ي�ط م�ن �المت�رمم�ات وال�متط�فًالت واألولى أس�رع فى نموه�ا� وق�د تخل�ق �ظ�رو�ف� بيئي�ة غ�ير مًالئم�ة واألولى أس�رع فى نموه�ا� وق�د تخل�ق �ظ�رو�ف� بيئي�ة غ�ير مًالئم�ة ل�نم�و� ال�ب�ك�تير�ي�ا �ا�لممر�ض�ة و�ذ�ل�ك� من� خًالل� ال�تن�افس� على �الغ�ذاء ل�نم�و� ال�ب�ك�تير�ي�ا �ا�لممر�ض�ة و�ذ�ل�ك� من� خًالل� ال�تن�افس� على �الغ�ذاء

.. غي�ر م�ن�اسب أ�و �إ�نتاج م�ضا�دات� ح�ي�وية ...� الخ غي�ر م�ن�اسب أ�و �إ�نتاج م�ضا�دات� ح�ي�وية ...� الخpHpHأو خ�لق أو خ�لق

اختياري�ة Tاختياري�ة ولح�ل ه�ذه المش�كلة نلج�أ إلى البيئ�ات المس�ماة مج�ازا Tولح�ل ه�ذه المش�كلة نلج�أ إلى البيئ�ات المس�ماة مج�ازاة �وه�ذ�ه� تقل�ل م�ن ن�م�و الم�ترمم�ات �ة �وه�ذ�ه� تقل�ل م�ن ن�م�و الم�ترمم�ات �����وه�ى فى ا�لوا�ق�ع �ش�به اختي�اريوه�ى فى ا�لوا�ق�ع �ش�به اختي�اري

.� �و�الفك�رة �منه�ا �هى تن�ش�ي�ط ظه�و�ر األع�داد �.� �و�الفك�رة �منه�ا �هى تن�ش�ي�ط ظه�و�ر األع�داد � بي�ن�م�ا تن�م�و المت�طف�ًالتبي�ن�م�ا تن�م�و المت�طف�ًالتالقل�يل��ة� من الم�س��بب�ات الم�ر�ض��ية� ا�لم�خ�لوط��ة� ب�أع��داد كب��ير�ة م�ن القل�يل��ة� من الم�س��بب�ات الم�ر�ض��ية� ا�لم�خ�لوط��ة� ب�أع��داد كب��ير�ة م�ن

الكا�ئنات األخر�ى الموجود�ة فى الترب�ةالكا�ئنات األخر�ى الموجود�ة فى الترب�ة

وهناك عدة ثغرات فى استخدام هذه البيئاتوهناك عدة ثغرات فى استخدام هذه البيئات

.. معقدة - مرتفعة التكاليف – صعبة التحضيرمعقدة - مرتفعة التكاليف – صعبة التحضير � � 11

ق���د تعطى نت���ائج غ���ير حقيقي���ة عن تع���داد البكتيري���ا ق���د تعطى نت���ائج غ���ير حقيقي���ة عن تع���داد البكتيري���ا � � 22.. المعزول�ة وذل�ك لوج�ود الم�واد المثبط�ة فى البيئةالمعزول�ة وذل�ك لوج�ود الم�واد المثبط�ة فى البيئة

إال أنه�ا ذات فوائ�د عدي�دة خاص�ة فى حال�ة الدراس�ات إال أنه�ا ذات فوائ�د عدي�دة خاص�ة فى حال�ة الدراس�اتالكمي�ة� لحي�اة ا�لبكتي�ري�ا الممرض�ة� والرمي�ة� فى منطق�ة الكمي�ة� لحي�اة ا�لبكتي�ري�ا الممرض�ة� والرمي�ة� فى منطق�ة

و�فى منطق���ة ال���� � و�فى منطق���ة ال���� �RhizosphereRhizosphereالري�زو�س���فير الري�زو�س���فير PhyllospherePhyllosphereع�لى الب�ذور �واألج�زاء �النباتية Tع�لى الب�ذور �واألج�زاء �النباتية وأيض�ا Tوأيض�ا ..

مهمة فى دورة العدوى حيث يمكن التعرف على الدورة Tمهمة فى دورة العدوى حيث يمكن التعرف على الدورة أيضا Tأيضا.. خاصة فى وجود مصادر عدوى فى الحقلخاصة فى وجود مصادر عدوى فى الحقل

وتعتم��د ه��ذه البيئ��ات على التحكم في مص��ادر الكرب��ون في وتعتم��د ه��ذه البيئ��ات على التحكم في مص��ادر الكرب��ون في.. البيئ�ات المختلفة� ذات الترك�يب المعق�دالبيئ�ات المختلفة� ذات الترك�يب المعق�د

فى الت�داخل Tفى الت�داخل وأيض�ا Tوأيض�اInclusionInclusion للص�بغات والمض�ادات الحيوي�ة للص�بغات والمض�ادات الحيوي�ة .�.� أو ال�مضادات الحي�وية المحب�بة للمسببأو ال�مضادات الحي�وية المحب�بة للمسبب

اختبارات العدوىاختبارات العدوى 4-42-2 اختبارات العدوىاختبارات العدوى 2-42-4

هى الخط��وة التالي��ة بع��د الع��زل وذل��ك اس��تكماال هى الخط��وة التالي��ة بع��د الع��زل وذل��ك اس��تكماال.. الشتراطات كوخ إلثبات القدرة المرضيةالشتراطات كوخ إلثبات القدرة المرضية

ال تعت��بر الط��رق الخاص��ة بتلقيح الثم��ار أو ش��رائح األنس��جة ال تعت��بر الط��رق الخاص��ة بتلقيح الثم��ار أو ش��رائح األنس��جةالنب�ا�تي�ة ا�ختب�ار�ات ع�دو�ى ب�الر�غ�م من� �دوره�ا اله�ا�م �فى التش�خيص النب�ا�تي�ة ا�ختب�ار�ات ع�دو�ى ب�الر�غ�م من� �دوره�ا اله�ا�م �فى التش�خيص

.. وال�م�ساعدة على� فصل البك�تي�ريا الممر�ض�ة عن الم�ترممةوال�م�ساعدة على� فصل البك�تي�ريا الممر�ض�ة عن الم�ترممة

الحقن الحقنInfiltration TechniqueInfiltration Technique. .

تلقيح قرون الفاصوليا "الختبار أمراض الفاصولياتلقيح قرون الفاصوليا "الختبار أمراض الفاصوليا ”” ..

فرط الحساسية فى أوراق الدخان فرط الحساسية فى أوراق الدخانHypersensitive Hypersensitive ReactionReaction. .

الرش الرش AtomizationAtomization..

تلقيح السيقان والجذورتلقيح السيقان والجذور ..

تلقيح شرائ����ح البط��اطس وه����ى ط���ريقة مفي����دة فى تلقيح شرائ����ح البط��اطس وه����ى ط���ريقة مفي����دة فى �م�ع �م�ع Erwinia carotovoraErwinia carotovoraالتع��رف على �البكتي�ري�ا الت��ابعة ل�التع��رف على �البكتي�ري�ا الت��ابعة ل�

.. م�ًالحظة أ�ن هذ�ه �ليست �ط�ريقة �ع�دوى� و�لكنها �م�جرد �اختبارم�ًالحظة أ�ن هذ�ه �ليست �ط�ريقة �ع�دوى� و�لكنها �م�جرد �اختبار

الشائعةالشائعةالعدوي العدوي اختبارات اختبارات الشائعةالشائعةالعدوي العدوي اختبارات اختبارات