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RUOLO E LIMITI DELL’ANALISI RUOLO E LIMITI DELL’ANALISI DEL LIQUIDO SEMINALEDEL LIQUIDO SEMINALE
Dr. ENZO TROILODr. ENZO TROILOGynePro Medical GroupGynePro Medical Group
Bologna, ItalyBologna, Italy
www.gynepro.it
Lo scopo dell’analisi seminaleLo scopo dell’analisi seminale è quello di fornire è quello di fornire informazioni, non solo sulla spermatogenesi, e informazioni, non solo sulla spermatogenesi, e
quindi sulla potenzialità fecondante quindi sulla potenzialità fecondante dell’individuo, ma anche su eventuali patologie dell’individuo, ma anche su eventuali patologie
FINALITA’FINALITA’
dell’individuo, ma anche su eventuali patologie dell’individuo, ma anche su eventuali patologie dell’apparato urogenitale (ghiandole dell’apparato urogenitale (ghiandole
accessorie, vie escretorie).accessorie, vie escretorie).
ESAME LIQUIDO SEMINALEESAME LIQUIDO SEMINALE
VALUTAZIONE MACROSCOPICAVALUTAZIONE MACROSCOPICA
�� VolumeVolume
�� pHpH
�� Fluidificazione Fluidificazione
�� ViscositàViscosità
ESAME LIQUIDO SEMINALEESAME LIQUIDO SEMINALE
VALUTAZIONE MICROSCOPICAVALUTAZIONE MICROSCOPICA
SPERMATOZOISPERMATOZOI
MOTILITÀ MORFOLOGIANUMERO
ESAME LIQUIDO SEMINALEESAME LIQUIDO SEMINALE
VALUTAZIONE MICROSCOPICAVALUTAZIONE MICROSCOPICA�� AgglutinazioniAgglutinazioni
�� LeucocitiLeucociti
�� EmazieEmazie
�� Cellule EpitelialiCellule Epiteliali
VALORI RIFERIMENTO WHOVALORI RIFERIMENTO WHO
�� NN°° spermatozoi spermatozoi ≥20x10≥20x1066/ml/ml�� Motilità totale ≥50%Motilità totale ≥50%�� Progressiva principale ≥15%Progressiva principale ≥15%�� Morfologia ≥30%Morfologia ≥30%�� Viscosità: normaleViscosità: normale�� Fluidificazione: regolareFluidificazione: regolare�� Agglutinazioni: assentiAgglutinazioni: assenti�� Leucociti ≤1x10Leucociti ≤1x1066/ml/ml
CONTEGGIO NUMERO SPERMATOZOICONTEGGIO NUMERO SPERMATOZOI
CAMERA NEUBAUERCAMERA NEUBAUER
Si parla di un valore di “riferimento” non di “normalità” perché questo numero Si parla di un valore di “riferimento” non di “normalità” perché questo numero di spermatozoi individuato non corrisponde al numero minimo di spermatozoi di spermatozoi individuato non corrisponde al numero minimo di spermatozoi per il concepimento sia nella fertilizzazione in vivo che in vitro.per il concepimento sia nella fertilizzazione in vivo che in vitro.
NUMERO SPERMATOZOINUMERO SPERMATOZOI
�� Azoospermia: totale assenza di spermatozoi Azoospermia: totale assenza di spermatozoi nell’eiaculato.nell’eiaculato.
�� Oligospermia o criptozoospermia: numero di Oligospermia o criptozoospermia: numero di spermatozoi <1x10spermatozoi <1x1066/ml. /ml. Oligozoospermia: numero di spermatozoi Oligozoospermia: numero di spermatozoi �� Oligozoospermia: numero di spermatozoi Oligozoospermia: numero di spermatozoi <20x10<20x1066/ml. /ml.
�� Polizoospermia: numero di spermatozoi Polizoospermia: numero di spermatozoi >250x10>250x1066/ml./ml.
MOTILITA’MOTILITA’
�� Spermatozoi con motilità progressiva rapida e Spermatozoi con motilità progressiva rapida e lineare.lineare.
�� Spermatozoi con movimenti lineari lenti o non Spermatozoi con movimenti lineari lenti o non lineari.lineari.lineari.lineari.
�� Spermatozoi con motilità non progressiva Spermatozoi con motilità non progressiva (agitatoria in situ).(agitatoria in situ).
�� Spermatozoi immobili.Spermatozoi immobili.
MORFOLOGIAMORFOLOGIA
�� Forme tipicheForme tipiche�� WHOWHO ≥ 30%, basato sulla normalità ≥ 30%, basato sulla normalità
di spermatozoi selezionati in base a di spermatozoi selezionati in base a processi biologici naturaliprocessi biologici naturali
�� Criteri ristretti di KrugerCriteri ristretti di Kruger, tre classi , tre classi prognostiche in relazione alla prognostiche in relazione alla capacità di fertilizzazione capacità di fertilizzazione in vitroin vitro::
<4%: bassa prognosi<4%: bassa prognositra 5% e 14%: buona prognositra 5% e 14%: buona prognosi> 14%: normale> 14%: normale
�� Forme atipicheForme atipiche
FORME ATIPICHEFORME ATIPICHE
�� Con anomalie della testa.Con anomalie della testa.
�� Con anomalie del tratto Con anomalie del tratto intermedio, residuo intermedio, residuo citoplasmatico.citoplasmatico.citoplasmatico.citoplasmatico.
�� Con anomalie della coda.Con anomalie della coda.
�� Amorfi: che presentano più di Amorfi: che presentano più di una anomalia.una anomalia.
ESAME LIQUIDO SEMINALEESAME LIQUIDO SEMINALE
Cellule germinaliCellule germinali LeucocitiLeucociti
AgglutinazioniAgglutinazioni
ALTERAZIONI DEL LIQUIDO SEMINALEALTERAZIONI DEL LIQUIDO SEMINALE
PARAMETRIFISICO-CHIMICI NUMEROFISICO-CHIMICI
VolumepH, viscosità
-FUNZIONE GHIANDOLE ACCESSORIE: VESCICHETTE SEMINALI, PROSTATA -VIE ESCRETORIE DISTALI-ANDROGENIZZAZIONE
NUMEROMOTILITA’
MORFOLOGIA
-FUNZIONE TESTICOLARE:SPERMATO/SPERMIOGENESI-VIE ESCRETORIE
ESAME LIQUIDO SEMINALEESAME LIQUIDO SEMINALE
�� ERRORI METODOLOGICIERRORI METODOLOGICI�� Fase preanaliticaFase preanalitica�� Fase analiticaFase analitica
�� ERRORI DI REFERTAZIONEERRORI DI REFERTAZIONE�� Fase postanaliticaFase postanalitica
ESAME LIQUIDO SEMINALEESAME LIQUIDO SEMINALE
�� ERRORI METODOLOGICIERRORI METODOLOGICIFase preanaliticaFase preanalitica
�� Norme per la raccoltaNorme per la raccolta
�� Norme di processazioneNorme di processazione
ESAME LIQUIDO SEMINALEESAME LIQUIDO SEMINALE
FASE PREANALITICANorme per la raccolta del campione
�Astinenza sessuale: 3 – 5 gg non inferiore a 2 e non superiore a 7 giorni. �Raccolta: per masturbazione in un contenitore sterile �Raccolta: per masturbazione in un contenitore sterile per urine. La raccolta deve essere completa: se si perde la prima parte di eiaculato (di qualità e concentrazione migliore) l’esame andrà ripetuto.�Consegna del liquido: entro 30 - 60 min. dalla raccolta.�Il campione non dovrà subire escursioni termiche durante il trasporto.
ERRORI METODOLOGICIFase preanalitica
Perdita del l.s.durante la raccolta
Trasporto inadeguato
RIPETIZIONEa distanza breve
In caso di azoospermia: Spermiogramma con l’esame del sedimento
DD criptozoospermia vs azoospermia
OSCILLAZIONE FISIOLOGICA DELLA OSCILLAZIONE FISIOLOGICA DELLA SPERMATOGENESISPERMATOGENESI
DETERMINAZIONE DI ALTRI PARAMETRIDETERMINAZIONE DI ALTRI PARAMETRI
�� Test di separazione nemaspermicaTest di separazione nemaspermica
Valuta il n. di spermatozoi mobili recuperabili dopo Valuta il n. di spermatozoi mobili recuperabili dopo trattamentotrattamento�� Swim upSwim up
�� Gradienti di percollGradienti di percoll
�� SpermiocolturaSpermiocoltura�� Frequente il riscontro di batteri (specie enterobatteri)Frequente il riscontro di batteri (specie enterobatteri)
�� La terapia antimicrobicaLa terapia antimicrobica--antiflogistica può migliorare i parametri seminaliantiflogistica può migliorare i parametri seminali
�� Test di frammentazione del DNA spermaticoTest di frammentazione del DNA spermatico�� Valuta l’integrità della cromatina degli spermatozoiValuta l’integrità della cromatina degli spermatozoi
�� Secondo alcuni autori l’aumentata frammentazione è correlata con Secondo alcuni autori l’aumentata frammentazione è correlata con poliabortività e fallimenti riproduttivipoliabortività e fallimenti riproduttivi
CONCLUSIONI
L’esame del liquido seminale non può essere considerato come esame unico e definitivo, è un’indagine laboratoristica che dà un insieme di informazioni che che dà un insieme di informazioni che devono essere interpretate e correlate con altre nell’ambito di un problema clinico del paziente per uno specifico check up diagnostico.