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ZEISS LSM 880 with Airyscan Revolutionize Your Confocal Imaging

4 11 20 14 ZEISS LSM 880 with Airyscan …...E-mail [email protected] ZEISS LSM 880 with Airyscan Revolutionize Your Confocal Imaging 観察対象物は非常に微小であったり、時には動きが速く、蛍光の褪色の速いものもあります。もしくは、それらの要素が

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Prin

ted

in J

apan

P15

MIC

016

PR

SK-1

1/14

●本製品の構成、仕様、外観等は予告なく変更する場合があります(カタログ記載内容:2014年11月現在)。●製品の色彩は印刷のため実物とは異なることがあります。●本カタログではTM、®マークは明記していません。システム名、製品名は各開発会社の登録商標または商標です。

●詳しくは、カールツァイスマイクロスコピー各営業所、または弊社機器製品取扱店へお問い合わせください。●本カタログは、環境に配慮した植物インキを使用しています。

カールツァイスマイクロスコピー株式会社

Tel 03-3355-0332Fax 03-3359-2118

http://www.zeiss.co.jp/microscopy

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E-mail [email protected]

ZEISS LSM 880 with Airyscan Revolutionize Your Confocal Imaging

Page 2: 4 11 20 14 ZEISS LSM 880 with Airyscan …...E-mail microscopy.ja@zeiss.com ZEISS LSM 880 with Airyscan Revolutionize Your Confocal Imaging 観察対象物は非常に微小であったり、時には動きが速く、蛍光の褪色の速いものもあります。もしくは、それらの要素が

Confocal Airyscan観察対象物は非常に微小であったり、時には動きが速く、蛍光の褪色の速いものもあります。もしくは、それらの要素がすべて含まれる場合もあるでしょう。これまで、生細胞や微弱蛍光でラベルされた試料から正確なデータを取得する際、感度、分解能、スピードを同時にバランスよく得ることはできませんでした。蛍光物質から放出された光子は非常に貴重な情報です。いま、任意に蛍光標識し多重蛍光染色された試料を使って、かつて見たことがないような最高の画質を得ることが可能となります。Airyscanを使うことで、常に試料に対して最適な取得方法を選択することができるのです。1.7倍高い分解能(5分の1のconfocal volume)を望むか。すべての共焦点レーザスキャン顕微鏡(CLSM)の限界を超えた感度まで押し上げるか。高速画像取得時のS/N比を向上させるか。選択は自由です。

Revolutionize Your Confocal Imaging with Airyscan

Airyscanによって得られるデータが従来のデータよりどのように優れているか、直接ご確認ください。弊社ラボでのハンズオンのデモンストレーションを今すぐご予約ください。>> www.zeiss.com/lsm880

アクチン(ファロイジン-Alexa 546)、AP3(Alexa 488)、核(DAPI)を多重蛍光染色したHeLa細胞。資料ご提供 : S. Traikov, BIOTEC, TU

Dresden, Germany

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ZEISS LSM 880with Airyscan

Revolutionize YourConfocal Imaging

› LSM 880 とは

› 特長

› アプリケーション

› システム構成

› 技術仕様

› サービス

Page 3: 4 11 20 14 ZEISS LSM 880 with Airyscan …...E-mail microscopy.ja@zeiss.com ZEISS LSM 880 with Airyscan Revolutionize Your Confocal Imaging 観察対象物は非常に微小であったり、時には動きが速く、蛍光の褪色の速いものもあります。もしくは、それらの要素が

Confocal Airyscan

定量イメージングの実行

科学的な結果はデータの正確さにかかっています。LSM 880では、均一な照明と高感度な検出機構によるリニアスキャンの組み合わせで、試料への光ダメージを極限まで抑えたイメージングが可能です。同一のピクセル時間と継続的なスキャナのモニタリングにより、どの速度及びスキャンモードでも定量的イメージングを実現できます。最も難しい単一分子イメージング / 解析からも確固たる信頼性の高い結果が得られます。

生産性の向上

多数の蛍光標識を必要とするタンパク質のローカライゼーション及び相互作用に関する実験時間を節約します。LSM 880は一度ですべてのシグナルを高速かつ高感度に収集します。GaAsP検出技術を備えた最大数のdescannedチャンネルまたはnon-descanned(NDD)チャンネルを使って、シングルスキャンで同時にスペクトル検出を行います。LSM 880では、広視野かつ最大13 fpsまで可能なリニアスキャンの最高速度をフル活用できます。

Simpler. More Intelligent. More Integrated.

Airyscan: CLSMが新しい世界へ

高感度、x、y、z全方向で向上した分解能、そしてハイスピードを1つのシステムで実現する真のCLSMです。Airyscanは、従来のCLSMをはるかに上回る分解能を実現します。感度やスピードを落とすことなく、XY方向で140 nm、Z方向で400nm(488nm使用時)の分解能が得られます。バーチャルピンホールモードでは、アプリケーションに最適なピンホールサイズを、画像取得後でも選択することができます。

GFP融合したヘテロクロマチンタンパク(HP-1)。左図 : ユークロマチンとより密なヘテロクロマチン領域間のHP-1の分布を示す。右図 : ヘテロクロマチン領域内HP-1の二量体化を示す輝度分布。資料ご提供 : P. Hemmerich, Leibniz-Institute for Age

Research (FLI), Jena, Germany

マゼンタでアクチン(Alexa 488)、黄色でNa,K-ATPase(GAR-CF 633)を示したショウジョウバエ網膜。Plan-APOCHROMAT20x/0.8、10μm

取得したスタック像をMIPで表示。

Histone2B(H2B,赤,mCherry)と微小管end binding protein3

(EB3、緑、GFP)をとらえたHela-Kyoto細胞株の有糸分裂像。資料ご提供 : J. Ellenberg, EMBL, Heidelberg, Germany.

ZEISS LSM 880with Airyscan

Revolutionize YourConfocal Imaging

› LSM 880 とは

› 特長

› アプリケーション

› システム構成

› 技術仕様

› サービス

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ZEISS LSM 880with Airyscan

Revolutionize YourConfocal Imaging

› LSM 880 とは

› 特長

› アプリケーション

› システム構成

› 技術仕様

› サービス

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Resolution

Confocal

Airyscan

Speed SNR

Resolution and SNR = oversampling and longer pixel dwell times (increase image format and decrease speed)

Speed = undersampling and shorter pixel dwell times (keep image format and increase speed)

SNR = undersampling and longer pixel dwell times (keep image format and decrease speed)

Resolution = oversampling and shorter pixel dwell times (increase image format and keep speed)

感度(SNR) 24.0% Z方向の分解能

24.7%

XY方向の分解能 15.1%

その他 11.0%

最大フレームレート25.3%

Confocal

10 µm

Airyscan – higher SNR Airyscan – higher Speed Airyscan – higher Resolution

分解能

CLSM

AiryscanSNRスピード

Your Insight into the Technology Behind It

CLSMを利用している250名の研究者向けに行われた調査によれば、共焦点レーザスキャン顕微鏡によるイメージングの最大の関心は感度、分解能、スピードの向上です。

Airyscanでは個々のパラメーターの向上に加え、特定のスピードでの分解能とS/N比など、パラメーターを組み合わせた場合でも向上できます。

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› LSM 880 とは

› 特長

› アプリケーション

› システム構成

› 技術仕様

› サービス

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HEp2 細胞、動原体に標識したGFPの動き。資料ご提供 : V. Döring, Leibniz-Institute for Age Research (FLI), Jena, Germany

10 µm

Confocal Airyscan

4. Airy disk 5. Airyscan detector

1. Mirror2. Emission filters3. Zoom optics

1

2

3

5 5

4

Your Insight into the Technology Behind It

Airyscanの原理

顕微鏡の光路は十分に小さい点からの放出信号を、Airyディスクと呼ばれる複雑な3次元構造に変換します。この変換は点像分布関数(PSF)として知られているものです。一般的なCLSMは試料上の1点を照明し励起された蛍光シグナルを検出しますが、非焦点面からの蛍光シグナルはピンホールによって除かれ、Airyディスクのどの程度のサイズまで検出器に導くか決定します。ピンホールサイズを小さくすることで分解能の向上は可能ですが、蛍光シグナル量も減り、S/Nは極端に落ちてしまうのであまり実用的ではありませんでした。AiryscanでZEISSは新しい概念を導入します。ピンホールで光を取り除く代わりに、32Chエリア検出器がAiryディスクのすべてのシグナルを同時に検出。各検出素子は一つの非常に小さなピンホールとして機能します。光路及び各Airyディスクの空間分布を知ることが非常に光効率の良いイメージングを可能とし、対象の試料からより良いS/N、分解能、スピードなどの追加情報を得ることが可能となります。バーチャルピンホールモードでは、アプリケーションに最適なピンホールサイズを、画像取得後でも選択することができます。

1.ミラー 2.エミッションフィルタ 3.ズーム光学系 4.Airy ディスク 5.Airyscan検出器

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› LSM 880 とは

› 特長

› アプリケーション

› システム構成

› 技術仕様

› サービス

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› LSM 880 とは

› 特長

› アプリケーション

› システム構成

› 技術仕様

› サービス

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10. Zoom optics11. Airyscan detector

7. Recycling loop8. Quasar detection unit9. Emission filters

4. Objective5. Pinhole and pinhole optics6. Secondary beam splitters

1. Excitation laser lines2. Twin Gate main beam splitters3. Galvo scanning mirrors

1

2

3

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5

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Your Insight into the Technology Behind It

LSM 880及びAiryscanの光路図

試料からの蛍光はツインゲートメインダイクロイックビームスプリッタを通過します。これによって非常に効率的にレーザ戻り光を抑制し、優れたコントラストを得ることができます。次に2つ目のビームスプリッタが、すべての蛍光をリサイクルループ経由で 3 or 34チャネルの内部スペクトル検出ユニット(QUASAR)へ導くか、もしくはGaAsP技術を備えた革新的なAiryscan検出器に送るかを選択します。

1. PTCレーザポート(可視/紫外/赤外)2. ツインゲートメインビームスプリッタ3. ガルバノスキャニングミラー

4. 対物レンズ5. ピンホール6. セカンダリビームスプリッタ

7. スペクトルリサイクリングループ光学系8. QUASARスペクトル検出器(3 or 34ch)9. エミッションフィルタ

10. ズーム光学系11. Airyscan検出器

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› LSM 880 とは

› 特長

› アプリケーション

› システム構成

› 技術仕様

› サービス

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Linearized Scan

Duty Cycle(85%)

Field of View

Pixe

l Tim

e

Scan Line (x)

Linearized Scan

Duty Cycle(85%)

Field of View

Pixe

l Tim

e

Scan Line (x)

リニアスキャン(LSM 880)„Sine“ Scan

Equalization

Duty Cycle(60%)

Difference to Linearized Scan

Resulting Pixel Time

Signal not used (12%)

Scan Line (x)

サインスキャン

10 µm

デューティーサイクル(85%)

デューティーサイクル(60%)

リニアスキャンとの差

ピクセル時間の結果

使用されない信号(12%)

視野

均一化

スキャンライン(x)

スキャンライン(x)

ピクセル時間

Your Insight into the Technology Behind It

高速リニアスキャン – パワフルなコンビネーション

タンパク質を標識した細胞や細胞内プロセスを完全に捉えるには、およそ10フレーム/秒でのイメージングが必要です。LSM 880では、512×512画素の時、最大13フレーム/秒で取得可能となります。一方向スキャンや双方向スキャンの実行中、LSM 880はスキャナのポジションを常に監視し、かつ補正を行います。これによって、観察範囲における安定した視野と均一な各ピクセル積算時間が保証されます。リニアスキャンは定量的及び相関イメージングのために必須の前提条件です。それは一定のS/NレベルとマニピュレーションROIを含む視野全体への均一な励起光照射に寄与します。従来のサインスキャニングとは異なり、LSM 880はスキャン時間の80%以上をデータ取得のために使用しています。つまり、設定したフレームレートにおける、より長いピクセル積算時間によって、S/N

比を29%も改善できるのです。また、LSM 880ではスキャン領域を自由に設定して試料に最適な位置に回転させることができます。

シロイヌナズナ根においてGFP発現したMBD(microtubule binding

domain)像 資料ご提供 : O. Samajova, Faculty of Science, Palacky

University Olomouc, Czech Republic

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› LSM 880 とは

› 特長

› アプリケーション

› システム構成

› 技術仕様

› サービス

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› LSM 880 とは

› 特長

› アプリケーション

› システム構成

› 技術仕様

› サービス

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Typical Sensitivity of Detectors

LSM880とAiryscanの光路図

Your Insight into the Technology Behind It

多チャンネルパラレル検出

異なる細胞、もしくは細胞内構造間の相互作用を解析するために複数の蛍光標識を行いますが、最高のタイミング精度を達成し、同時にそれらの強度を記録することによって撮影時間をスピードアップすることができます。LSM 880は全体のスペクトル - 標識したすべて - を例えば512×512ピクセル、5フレーム/秒で32チャンネル分を1スキャンで取得することができます。マルチチャンネルスペクトルイメージングに10チャンネルを設定し透過検出器を追加。すべての蛍光色素に加え、追加のコントラスト像も1回のスキャンでイメージングすることができます。これにより試料を保護し、時間の節約にもつながります。特にマルチフォトンイメージングの場合、最大12基のNDD検出器を並列に読みだすことができ、この基本的な能力を有することが最大の効果を発揮します。GaAsP検出器は微弱な蛍光シグナルのイメージングに最適であることが実証されており、フォトンカウンティングモードでは、蛍光相関分光法(FCS)や蛍光相互相関分光法(FCCS)などの単一分子の手法に利用できます。

スペクトルイメージングの最大のメリット

タンパク質のローカライゼーション及び相互作用に関する実験には、一般的に多数の蛍光標識が必要です。そして、LSM 880では一度でこれらのシグナルをすべて高速かつ高感度に収集できるようになり、時間を節約することができます。LSM 880では、任意の数のdescannedチャンネルまたはnon-descannedチャンネルを使用したスペクトル検出を1回のスキャンで実行できます。

Phalloidin-Alexa546でアクチン、Alexa488でAP3、DAPIで核を3重染色したHela細胞。資料ご提供 : S. Traikov, BIOTEC, TU Dresden, Germany

通常PMTとGaAsP検出器の量子効率(QE)を示したグラフ

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› 特長

› アプリケーション

› システム構成

› 技術仕様

› サービス

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1. Repetitive Manipulation Experiments2. Multiposition Z-stack acquisition with individual heights3. Screening of multiple samples4. Heterogeneous time lapse imagin

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Experiment Designer : 生産性を向上する高機能な自動化モジュール

アプリケーションによっては複雑な画像取得方法が必要になります。特に統計解析では、大量の試料を異なる画像設定で繰り返しイメージングしなければならない場合があります。Experiment Designerは、LSM 880で可能とする多数のイメージング方式を使用して多点イメージングを簡単に設定できる、ZENイメージングソフトウェア用モジュールです。多くのハードウェアやソフトウェアオプションを補完することで、最も難しい長時間のタイムラプス撮影の間でも試料の焦点を保ち続けることが可能です。

Expand Your Possibilities

1. 繰り返しの光マニピュレーション実験2. 個々の高さのマルチポジションZスタック取得3. 複数サンプルのスクリーニング4. 異なる条件でのタイムラプスイメージング

ZENソフトウェアモジュールのExperiment Designerを使用し、マルチチャンネルZスタック/マルチポジションタイルスキャンを含む撮影ブロックを自由に定義し、反復して構成される複雑なイメージング手順を設定できます。

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› LSM 880 とは

› 特長

› アプリケーション

› システム構成

› 技術仕様

› サービス

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› LSM 880 とは

› 特長

› アプリケーション

› システム構成

› 技術仕様

› サービス

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SHG800nm 400nm

550nm1100nmSHG

振動緩和

蛍光

二光子同時吸収後の励起(IR)

一重項励起状態S1

基底状態S0

LSM 880 NLO : マルチフォトン顕微鏡

マルチフォトン顕微鏡では深部組織の光学セクショニング像を取得できます。このイメージング手法では以下の3つの基本原理を利用します。■ 光の波長が長いほど、組織入射時の散乱光は少なくなります。したがって、近赤外範囲の励起光は可視光に比べて、生体試料のより深部に到達します。

■ 波長が600~1300nmの光は組織への吸収が最も少なく、このスペクトル範囲の光はほぼ透過します。

■ 500nmの最大励起波長の蛍光色素は同じ波長の光子で励起できます。または、同時に到達する波長が2倍(1000nm)の二光子でも励起できます。

700~1300nmの波長の強力なパルスレーザにより、複数の光子が同時に到達し、蛍光色素を励起することが可能です。焦点面以外ではレーザ光度は指数的に減少し、励起は起こりません。もう1つの効果では、励起光の周波数を倍増して非常に明るい励起光を組織に作用させる際に、非染色組織を可視化することができます。横紋筋繊維やコラーゲン分子など、ほぼ周期的な配向性を持つ非中心対称分子では、周波数倍増による非線形効果(第二高調波 : SHG)が起こります。

Expand Your Possibilities

第二高調波発生メカニズムの概略

単一光子吸収後の励起(VIS)

二光子吸収の概略図

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LSM 880 & ELYRA コンビシステム

超解像顕微鏡法

LSM 880は、3つの相補的な超解像手法を1つのシステムで組み合わせることができる唯一のCLSMで、試料の真のマルチモーダルイメージングを可能にします。Airyscanを搭載したLSM 880では、厚みのある試料や高密度の試料であっても、XY方向で140nm、Z方向で400nmまでの分解能を得ることができます。専用の超解像顕微鏡システムELYRAは、構造化照明顕微鏡法(SR-SIM)と光活性化局在顕微鏡法(PALM)を組み合わせることで、さらに小さな構造も取得できます。SR-SIMは薄くて分散の少ない試料に最適で、視野が広く、XY

方向で120nm、Z方向で350nmまでの分解能を得ることができます。PALMでは光活性/光変換を起こす蛍光分子を利用し、それらを経時的に記録してデータを重ね合わせます。この手法ではXY方向で20nm、Z方向で50nmの分解能を得ることができます。

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組織透明化処理法

組織の透明化処理は、組織の断面、マウスの脳、胚、臓器、細胞塊、生体組織など、試料の超深部観察における新たな次元を開きます。

Axio ExaminerとLDプラン-アポクロマート20x/1.0では、屈折率1.38倍のScale手法で処理された組織の内部を見ることができます。これにより、マルチフォトン顕微鏡の最大6倍、従来のCLSMの最大60倍の深さのイメージングが可能です。もっとも深い層から得られる構造の情報は極めて高画質です。基礎的な神経生物学研究や神経回路網マッピングを大きく前進させる力となります。

Expand Your Possibilities

7週齢YFP-Hマウス脳を固定後、Scaleにて透明化処理(Hama.et al, Nat Neurosci.2011)。Zスタック後、Maximum Intensity Projectionで表示。資料提供: H. Hama, F. Ishidate, A. Miyawaki, RIKEN BSI, Wako, Japan

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正立顕微鏡Axio ExaminerはLSM 880 NLOマルチフォトンシステムに最適なin vivo観察対応鏡基です。システムとAiryscanまたはインキュベーションを組み合わせることで、厳しい条件下での生体試料の撮影にも対応できます。

蛍光相関分光法(FCS)、フォトンカウンティングイメージング、蛍光寿命イメージング(FLIM)では、2つのGaAsP検出器を搭載したLSM BiG.2

を使用します。

Airyscanを使用する場合は、Zピエゾステージやレベリングインサートなどの追加アクセサリをお勧めします。

倒立顕微鏡Axio Observerとインキュベーションを組み合わせることで、安定した温度条件での長時間の生細胞イメージングに最適なツールを構成できます。

正立顕微鏡Axio Imagerも、LSM 880、Airyscan、インキュベーションと組み合わせることができます。

LSM BiG.2はNDD検出器として完璧に機能するほか、FLIMの高感度ダイレクト検出器としても使用できます。

LSM 880はニーズに応じて拡張することができ、多数の機能拡張の基盤となります。ZEISSが提供する他のあらゆるシステムと同様、オープンインタフェースとモジュール式のアーキテクチャにより、現在及び今後提供されるすべてのコンポーネントとのシームレスな連携が保証されます。以下のような機能拡張があります。

Expand Your Possibilities

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› 特長

› アプリケーション

› システム構成

› 技術仕様

› サービス

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› 特長

› アプリケーション

› システム構成

› 技術仕様

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2 µm

簡単にフィルタ交換が可能なGaAsP 2ch NDDの登場で、AxioExaminer

では最大6chのGaAsP NDDを利用できます。LSM BiG.2を含むすべてのLSM 880システム構成に、Airyscanを追加できます。

AxioCamシリーズからさまざまなカメラを選択し、顕微鏡イメージングを行うことができます。LSMイメージングとの組み合わせも可能です。

FCSは、主に単一分子の拡散運動の研究で使用される確立された手法で、GaAsP検出器を使用して容易に行うことができます。

蛍光共鳴エネルギー移動(FRET)及び光退色後蛍光回復(FRAP)は、分子間の相互作用や動きを調べるための手法です。

N&Bツールでは、試料内の輝度とこのシグナル輝度に関与している分子数との関連性を評価することができます。

LSM 880はニーズに応じて拡張することができ、多数の機能拡張の基盤となります。ZEISSが提供する他のあらゆるシステムと同様、オープンインタフェースとモジュール式のアーキテクチャにより、現在及び今後提供されるすべてのコンポーネントとのシームレスな連携が保証されます。以下のような機能拡張があります。

Expand Your Possibilities

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› システム構成

› 技術仕様

› サービス

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アプリケーション及び試料 課題 ZEISS LSM 880の機能

抗体染色した組織スライス 488nmの励起、分解能140nm (xy)/400nm (z)で構造の形態学的な関連性をイメージング

AiryscanとGaAsP検出器による超解像イメージング

Scaleにより透明化処理された組織 透明化処理された組織を深さ方向に最大5.6mmまでイメージング Axio Examinerでのシングル/マルチフォトンイメージングにおいて屈折率1.38に最適化された特殊対物レンズ

生細胞 小胞及び細胞小器官の運動性の研究 最大13フレーム/秒の高速タイムラプスイメージング

エンドサイトーシス及びエクソサイトーシスの動態解析 LSM及び光活性化局在性に基づく超解像によるミックスモードイメージング

薬理学的処理に反応した蛍光発現細胞の選別と記録 AxioCamによる顕微鏡イメージング

多重蛍光標識による生細胞観察 細胞内構造の運動性の研究 AiryscanとGaAsP検出器による、2.5フレーム/秒、2Dまたは3D高感度タイムラプスイメージングでの2色画像化

蛍光寿命イメージング(FLIM)による2つのタンパク質間相互作用の解析

FLIM用検出器としてのLSM BiG.2、サードパーティー製エレクトロニクス及びソフトウェア

蛍光共鳴エネルギー移動(FERT)を利用した2つのタンパク質間相互作用の研究

FRET解析ツール

複数ウエル上にある多重標識された生細胞 自動化された長時間のスクリーニング Experiment Designerソフトウェアツールとスペクトル画像解析の組み合わせ

固定した培養細胞 CLSMの約2倍の分解能を持つ3D超解像で細胞構造を記録 ELYRA S.1による構造化照明(SR-SIM)

多重標識及びオーバーラップした蛍光シグナルを持つ生細胞または固定細胞

複数のタンパク質相互作用のイメージング 5フレーム/秒でのスペクトル画像解析及びオンライン/オフラインアンミキシングによりすべての信号をパラレル収集

微弱蛍光標識された細胞構造 生理学的な発現レベルでの細胞内構造イメージング AiryscanとGaAsP検出器またはLSM 880とGaAsP検出器

生きた組織/動物 生体組織深部細胞の相互作用の観察 LSM 880 NLO マルチフォトン顕微鏡への拡張

複数の異なる蛍光タンパク発現細胞を持つ生体組織深部のイメージング

LSM 880 NLO/長波長OPOマルチフォトンへの拡張

Tailored Precisely to Your Applications

ZEISS LSM 880with Airyscan

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› LSM 880 とは

› 特長

› アプリケーション

› システム構成

› 技術仕様

› サービス

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› LSM 880 とは

› 特長

› アプリケーション

› システム構成

› 技術仕様

› サービス

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Page 16: 4 11 20 14 ZEISS LSM 880 with Airyscan …...E-mail microscopy.ja@zeiss.com ZEISS LSM 880 with Airyscan Revolutionize Your Confocal Imaging 観察対象物は非常に微小であったり、時には動きが速く、蛍光の褪色の速いものもあります。もしくは、それらの要素が

アプリケーション及び試料 課題 ZEISS LSM 880の機能

植物の根 細胞内構造の経時的変化を高分解能で追跡 AiryscanとGaAsP検出器による、最大5フレーム/秒(512×512)

での40μmを超える組織深部の超解像イメージング

ゼブラフィッシュ、ショウジョウバエ、線虫などのモデル生物 内因性に発現した蛍光タンパクの形成及び動態の詳細観察 AiryscanとGaAsP検出器による40μmを超える組織内深部の

超解像イメージング

視野全体でさまざまな標識輝度を持つ生きた試料 すべての画像情報を収集し、最適なコントラストの画像を示す方法を後

で決定

Airyscanによる3Airyユニットでのイメージング、画像取得後

にピンホールを仮想的に閉じる機能(VPモード)

Tailored Precisely to Your Applications

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› LSM 880 とは

› 特長

› アプリケーション

› システム構成

› 技術仕様

› サービス

Page 17: 4 11 20 14 ZEISS LSM 880 with Airyscan …...E-mail microscopy.ja@zeiss.com ZEISS LSM 880 with Airyscan Revolutionize Your Confocal Imaging 観察対象物は非常に微小であったり、時には動きが速く、蛍光の褪色の速いものもあります。もしくは、それらの要素が

2 µm

2 µm

Confocal Airyscan

Confocal Airyscan

Confocal Airyscan

ZEISS LSM 880 at Work

ヒト網膜色素上皮細胞、ZO-1(タイトジャンクションマーカー)を青、FITCで染色した視細胞外節を緑、EEA1(エンドソームマーカー)を赤で示した。資料ご提供 : S. Almewadar, CRTD, TU Dresden, Germany

固定腫瘍細胞、Alexa 555でチューブリンを標識資料ご提供 : P. O`Toole and P. Pryor, University of York, UK

エチレンブルーで標識した豚皮膚組織。生きた組織はOPO(optical

parametric oscillator)を使った1100nmで励起された。蛍光寿命はLSM BiG.2にBecker & Hickel社製TCSPCエレクトロニクスを接続し測定。カラーコードした画像は皮膚細胞の異なるタイプによる蛍光寿命の違いを示している。

488nm励起で観察した1μm径の蛍光ビーズリング像

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› LSM 880 とは

› 特長

› アプリケーション

› システム構成

› 技術仕様

› サービス

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› LSM 880 とは

› 特長

› アプリケーション

› システム構成

› 技術仕様

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Confocal AiryscanConfocal Airyscan

10 µm

10 µm

Confocal Airyscan

固定腫瘍細胞、Alexa 555でチューブリンを標識、ZEISS LSM 880 による CLSM像とAiryscan ユニットで得たSRモード像。資料ご提供 : P. O`Toole and

P. Pryor, University of York, UK

ZEISS LSM 880 at Work

オリゴデンドロサイト、CNPase抗体染色資料ご提供 : C. Dornblut, Leibniz Institute for Age Research

(FLI),Jena, Germany

マウス脳スライス、CNPase抗体染色、10倍で観察資料ご提供 : C. Dornblut, Leibniz Institute for Age Research

(FLI), Jena, Germany

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› LSM 880 とは

› 特長

› アプリケーション

› システム構成

› 技術仕様

› サービス

Page 19: 4 11 20 14 ZEISS LSM 880 with Airyscan …...E-mail microscopy.ja@zeiss.com ZEISS LSM 880 with Airyscan Revolutionize Your Confocal Imaging 観察対象物は非常に微小であったり、時には動きが速く、蛍光の褪色の速いものもあります。もしくは、それらの要素が

Confocal Confocal

Airyscan Airyscan Airyscan

Confocal

ZEISS LSM 880 at Work

IMR90ヒト2倍体肺線維芽細胞 DNAにDAPI、緑色のテロメアG鎖(リーディング鎖)にペプチド核酸プローブ及びAlexa 488、赤色のテロメアC鎖(ラギング鎖)にペプチド核酸プローブ及びAlexa 546。採取前に、細胞はRTEL1 (2)を標的とするsiRNAにより処理。RTEL1はテロメアの複製のために必須のヘリカーゼで、タンパク質が欠如しているとテロメアのフォークのストールやテロメアの破損の原因になる。これは画像でハイライト表示されている、2つ以上のドットとして発現している個別のテロメアによって観察できる。Airyscan(SRモード)では複数のテロメアドットを分解し、これによって末端複製問題を正確に定量化することができる。資料ご提供 : J. Karlseder (Molecular and Cell Biology Laboratory) and J. Fitzpatrick (Waitt Advanced Biophotonics Core), The Salk Institute, La Jolla, USA.

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› LSM 880 とは

› 特長

› アプリケーション

› システム構成

› 技術仕様

› サービス

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› LSM 880 とは

› 特長

› アプリケーション

› システム構成

› 技術仕様

› サービス

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5

1

2

3 4

ZEISS LSM 880: Your Flexible Choice of Components

1. 顕微鏡■ 倒立顕微鏡 : Axio Observer

■ 正立顕微鏡 : Axio Examiner、Axio Imager

■ ELYRA接続ポート■ カメラポート■ 手動及び電動ステージ■ インキュベーション機器■ 高速Zピエゾインサート■ Definite Focus

2. 対物レンズ■ C-APOCHROMAT

■ Plan-APOCHROMAT

■ W Plan-APOCHROMAT、LD Plan-APOCHROMAT

■ EC Plan-NEOFLUAR

3. 励起レーザ波長■ UVレーザ : 355nm、405nm

■ VISレーザ : 440nm、458nm、488nm、514nm、 543nm、561nm、594nm、633nm

■ マルチフォトンレーザ(近赤外) : Ti-Sa、OPO

4. 検出器■ 3 or 34chスペクトル検出器(GaAsP and/or PMT)■ Airyscan検出器■ 追加2ch GaAsP検出ユニット(BiG.2)■ 最大6基のNDD GaAsP検出器■ 最大12基のNDD GaAsP/PMT検出器■ 透過光検出器(T-PMT)

5. ソフトウェア■ ZEN (black edition)

Tile & Positions、Experiment Designer、FRAP、FRET、RICS、FCS、Deconvolution、3D VisArt

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› LSM 880 とは

› 特長

› アプリケーション

› システム構成

› 技術仕様

› サービス

Page 21: 4 11 20 14 ZEISS LSM 880 with Airyscan …...E-mail microscopy.ja@zeiss.com ZEISS LSM 880 with Airyscan Revolutionize Your Confocal Imaging 観察対象物は非常に微小であったり、時には動きが速く、蛍光の褪色の速いものもあります。もしくは、それらの要素が

拡張レーザ用制御モジュール(UV / NLO)

ELYRA P.1ELYRA PS.1

Airyscan

LSM 880

LSM 880

Rearportfor system

Interfacefor lamp

ピエゾステージフォーカス

Definite Focusモジュール

ピエゾ対物フォーカス

ピエゾ対物フォーカス

デジタルカメラAxioCam

デジタルカメラAxioCam

LSM BiG.22ch GaAsP

倒立顕微鏡Axio Observer.Z1

正立顕微鏡Axio Imager.Z2 / M2P

正立顕微鏡Axio Examiner.Z1

Axio Examiner用スキャニングステージ

XYジョイスティックピエゾ

コントローラ(ジョイスティック付)

倒立顕微鏡用スキャニングステージ130x85STEP

正立顕微鏡用スキャニングステージ130x85ピエゾ

レーザ・システム制御モジュール(4x laser 405-635 nm)or(6x laser 405-633 nm)

アクティブ除振機能付システムテーブル/NLO1800 × 1500 × 750mm(l × d × h)or:1800 × 1800 × 750mm(l × d × h)

アクティブ・パッシブ除振機能付システムテーブル小900(750) × 750(900) × 770mm(l × d × h)or:アクティブ除振機能付システムテーブル大1200(900) × 900(1200) × 770mm(l × d × h)

NLO接続キット

XYステージコントローラピエゾ

30インチTFTモニタ

リアルタイムコントロールシステム

制御用ワークステーション 2ch GaAsP NDD

マルチフォトン用外部検出器(NDD)

LSM BiG.22ch GaAsP

デジタルカメラAxioCam

LSM BiG.22ch GaAsP

マルチフォトン用外部検出器(NDD)

コントローラ(ジョイスティック付)

LSM BiG.22ch GaAsP

LSM BiG.22ch GaAsP

LSM BiG.22ch GaAsP

LSM BiG.22ch GaAsP

LSM BiG.22ch GaAsP

マルチフォトン用外部検出器(NDD)

光路切り替えミラー

光路切り替えミラー

HALランプハウス100V

HALランプハウス100V

マルチフォトン用外部検出器(NDD)

蛍光光源 HBO100W

メタルハライド光源 HXP120V / X-Cite 120V

LED蛍光光源 Colibri

LSM 880

LSM 880

LSM 880

Interfacefor lamp

T-PMT

T-PMT

ELYRA P.1ELYRA PS.1

ZEISS LSM 880: System Overview

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› LSM 880 とは

› 特長

› アプリケーション

› システム構成

› 技術仕様

› サービス

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› LSM 880 とは

› 特長

› アプリケーション

› システム構成

› 技術仕様

› サービス

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Page 22: 4 11 20 14 ZEISS LSM 880 with Airyscan …...E-mail microscopy.ja@zeiss.com ZEISS LSM 880 with Airyscan Revolutionize Your Confocal Imaging 観察対象物は非常に微小であったり、時には動きが速く、蛍光の褪色の速いものもあります。もしくは、それらの要素が

レーザラック

レーザラック

防震台

防震台

SPPCデスク

PCデスク

防震台

PCデスク

防震台

PCデスク

レーザラック

※Axio Imager/Axio Examinerも同様です

※仕様により一部サイズが異なる場合があります。 詳しくは弊社担当者までお問い合わせ下さい。

LSM 880 システム設置図例 LSM 880 with Airyscan システム設置図例

Technical Specifications

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› LSM 880 とは

› 特長

› アプリケーション

› システム構成

› 技術仕様

› サービス

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レーザラック

防震台

PCデスク

レーザラック

防震台

PCデスク

※仕様により一部サイズが異なる場合があります。 詳しくは弊社担当者までお問い合わせ下さい。

Technical Specifications

LSM 880 NLO設置図例

LSM 880 NLO Dual Stand設置図例

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› LSM 880 とは

› 特長

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› システム構成

› 技術仕様

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› LSM 880 とは

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› アプリケーション

› システム構成

› 技術仕様

› サービス

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レーザラック

防震台

PCデスク

レーザラック

防震台

PCデスク

レーザラック

防震台

PCデスク

レーザラック

防震台

PCデスク

LSM 880 NLO / Axio Observer 2x NLOレーザ設置図例

Technical Specifications

LSM 880 NLO / Axio Examiner OPOレーザ設置図例

LSM 880 NLO / Axio Examiner 2x NLOレーザ設置図例

LSM 880 NLO / Axio Observer OPOレーザ設置図例

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Physical Dimensions 長さ(cm) 幅(cm) 高さ(cm) 重量(kg)

防震台 小 90 75 77 90

防震台 大 120 90 77 120

NLO用除振台1 180 150 75 200

NLO用除振台2 (LSM880NLO×2 + 1 laserシステム) 250 150 75 400

2×NLO or OPO用ペリスコープ 40 37 70 40

NLO用アクティブ除振台 180 180 75 410

スキャニングモジュールLSM880 50 45 22 27

顕微鏡鏡基 50 35 50 20

レーザモジュールラック 80 60 65 80

追加レーザ用プラグインモジュール 70 55 25 10

レーザモジュールUV 80 60 65 40

Airyscanユニット 40 20 24 12

UV用ファイバー 200

VIS用ファイバー 250

ケーブル 250

顕微鏡

鏡基 正立 : Axio Imager.Z2、Axio Examiner.Z1、 チューブ/リアポート

倒立 : Axio Observer.Z1, サイドポート(SP)/リアポート(RP)

Zドライブ 最少ステップ Axio Imager.Z2:<25 nm;

Axio Observer.Z1: <25 nm;

Axio Examiner.Z1: <30 nm;

高速対物レンズ/ステージピエゾ取り付け可、Axio ObserverにはDefinite Focus取り付け可

XYステージ(オプション)  電動XYスキャニングステージ(マーク&ファインド、タイルスキャン)

最少ステップ1 μm(Axio Observer) または0.2 μm(Axio Imager)

Technical Specifications

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Technical Specifications

スキャニングモジュール

スキャナー 戻り時間を最短におさえる2つの独立ガルバノメータミラー方式

スキャニング解像度 4×1~8192×8192画素、マルチプルチャンネル、連続的にキャリブレーション

スキャニングスピード 19段階×2(一方向/双方向)、512×512画素で13フレーム/秒(最大430フレーム/秒@512x16)、最大6875ライン/sec

スキャニングズーム 0.6x~40x;0.1x単位で可変(Axio Examinerでは0.67~40x)

スキャニングローテーション 1°単位で360°自由に回転可能、XYオフセットも自由に設定可

スキャン領域 最大で視野数20 mmに内接する正方形(Axio Examinerは18 mm)

ピンホール サイズ及び位置を自動設定、マルチトラッキングや短波長(405 nm)時には任意にサイズ調整

ビームパス 交換可能なツインゲートメインビームスプリッタ : 100通り以上の励起光の組み合わせ、レーザ戻り光の大幅低減に寄与、外部検出器モ

ジュール(BiG.2、Airyscanなど)のためのマニアルインターフェースポート、スペクトルの分離と偏光効果を補償するためのスペクトル

リサイクリングループ

検出系

検出器 3 or 34chスペクトル検出チャネル、GaAsP and/or PMT (GaAsPは最大量子効率45%)

2ch GaAsP検出器モジュール(LSM BiG.2)

Airyscanモジュール(32ch GaAsP)

最大12基同時搭載可能なNLO用NDD検出器(PMT and/or GaAsP)

透過光検出器(T-PMT)

スペクトル検出 3 or 34同時検出、共焦点の反射光検出側に装備、GaAsP and/or PMT使用で自由に検出波長域の設定が可(最少3 nm毎に検出)

画像階調 8/12/16bitから選択、最大35chの同時検出

リアルタイムエレクトロニクス 顕微鏡、レーザ、スキャニングモジュール及びその他アクセサリの高速制御、データ取得及び同調制御、オーバーサンプルング読み出し

方式、ギガバイトイーサネットを介した制御用PCと制御系の通信により、オンラインでのデータ解析と画像取得が可能。

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Technical Specifications

ZENコントロールソフトウェア(標準機能)

各種設定の保存・呼び出し 電動化された顕微鏡、レーザ及びスキャニングモジュールの設定の保存。及び、画像に記録された取得条件をワンクリックで呼び出す(Reuse)。

システムセルフテスト機能 キャリブレーション及び自己診断機能を搭載。

画像取得モードとスマートセットアップ(Smart setup) スポット、ライン/自由曲線、フレーム、タイル、Zスタック、ラムダスタック、タイムラプス及びすべてのコンビネーション(xyz、Lambda、t)、レシオ像のオン

ライン解析及び表示、平均と積算処理(ライン/フレーム毎選択)、蛍光色素名を選択するだけで簡単にライトパスの設定可能なSmart setup機能

Crop機能 観察視野内エリアの自由選択(スキャンズーム、オフセット、回転などの変更)。

リアルROIスキャン、自由曲線スキャン 最大99か所まで。自由曲線設定領域を画素単位の精度で設定、レーザ照射を制御。

ROIブリーチング FRAPやケージド化合物に有効、最大99か所までブリーチ位置の設定が可能。画像取得とは独立したスピードでブリーチ可能、ROI毎にレーザ波長/強

度設定が可能。

マルチトラッキング レーザ波長と検出チャンネルを高速でline/frame切り替え、蛍光のクロストーク防止に寄与。

ラムダスキャン 各ピクセルに波長情報を付加。(同時またはシーケンシャル)

リニアアンミキシング 独自の計算アルゴリズムを採用。蛍光、励起光のクロストークを回避して近接波長も簡単に分離。オンライン/オフライン、自動/インタラクティブに

アンミキシング。

画像表示 XY、XZ/YZ断面表示(Orthogonal)、任意面での断層表示(Cut)、ラインスキャンタイムラプス時の2.5D表示、プロジェクション(Maximum intensity

projection);アニメーション;デプスコーディング、明るさ/コントラストの変更、ガンマ補正、LUT変更及び新規作成、描画機能など。

画像解析とオペレーション 定量的コロカライゼーション表示/測定、直線/曲線プロファイルの設定と輝度測定及びグラフ化、キャリブレーションバー、他、描画測定機能、輝度測

定、画像間の四則測定、レシオ、画素単位でのシフト機能、数学的フィルタリングなど。

イメージマネージメント 画像及び対応する撮影パラメータを管理するための機能;マルチプリント機能

オプションソフトウェア

3D VisArt 高機能3D/4Dレンダリングとアニメーション表示(表示モード:shadow projection、transparency projection、surface rendering)

デコンボルーション point spred functionに基づいた3次元画像復元(モード:nearest neighbor、maximum likelihood、contrst iterative)

ROI-HDR 強度の違いを認識し、レーザもしくはGainを変えて取得した複数の画像を1つに合成。

Physiology オンライン/オフラインにより輝度変化カーブの作成及びそれらを用いた輝度/濃度変換。

FRET パラメータ入力によるFRET画像の定量解析、Accepter Photobleaching/Sensitized Emission法に対応。

FRAP efficiency analysis FRAP画像の定量解析。

Visual Macro Editor 複数の画像取得方式をマクロ登録、繰り返しイメージングのルーチン作成。

RICS Image Correlation 画像相関分光法、PMT及びGaAsP検出器を利用した一分子イメージングと解析(Publish by Gratton)

Experimant Designer 複数の画像取得設定/条件を登録し実行。

Macro Environment VBAマクロによるプログラミング機能。

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› 特長

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› システム構成

› 技術仕様

› サービス

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› 特長

› アプリケーション

› システム構成

› 技術仕様

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Technical Specifications

レーザ

レーザインサート RGB

(PTC方式 ; 458、488、514、543、561、594、633 nm)

偏波面保存シングルモードファイバ

VIS-AOTFによるレーザ減光

Arレーザ(458/488/514 nm、25 or 35 mW)

HeNeレーザ(543 nm、1 mW)

DPSSレーザ(561 nm、20 mW)

HeNeレーザ(594 nm、2 mW)

HeNeレーザ(633 nm、5 mW)

レーザインサート V(PTC方式 ; 405、440 nm) 偏波面保存シングルモードファイバ

Diode Laser Pulsed/CW (405 nm、30 mW)

CW mode 最大出力約15 mW(ファイバー出口)

0.6-15 mW時は減光無し

attenuator使用時、1/25の減衰

Pulse mode 繰り返し周波数 10-50-80 MHz

平均出力 : @20 MHz-約0.2 mW; @50 MHz-約0.5 mW;

@80 MHz-約0.8 mW

ピークパワー : 50-300 mW

パルス幅 : 50-90 ps

ジッタ<20 ps

Diode Laser Pulsed/CW (440 nm、25 mW)

CW mode 最大出力約15 mW(ファイバー出口)

0.6-15 mW時は減光無し

attenuator使用時、1/25の減衰

Pulse mode 繰り返し周波数 10-50-80 MHz

平均出力 : @20 MHz-約0.1 mW; @50 MHz-約0.25 mW;

@80 MHz-約0.4 mW

ピークパワー : 50-300 mW

パルス幅 : 50-90 ps

ジッタ<20 ps

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› 技術仕様

› サービス

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Technical Specifications

電源条件

電源電圧 3相3線式 200V 30A(アース付き)

動作周波数 50...60 Hz

消費電力 2100 VA

マルチフォトンレーザ

電源電圧 100V 15A 2系統

消費電力

チタンサファイヤレーザ 1 最大 800 VA

チタンサファイヤレーザ 2 最大 800 VA

OPO 最大 600 VA

発熱量

(チタンサファイヤ、OPOレーザ除く)

最大 2000 W

レーザ

Laser Module UV (355 nm) 偏波面保存シングルモードファイバ

AOMによるレーザ減光

DPSSレーザ(355 nm、60 mW)

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› LSM 880 とは

› 特長

› アプリケーション

› システム構成

› 技術仕様

› サービス

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› LSM 880 とは

› 特長

› アプリケーション

› システム構成

› 技術仕様

› サービス

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Avoid direct exposure to beam

Class IIIb Laser product

VISIBLE AND INVISIBLE LASER RADIATIONAvoid eye or skin exposure to direct or scattered radiation

Class IV Laser product

VISIBLE AND INVISIBLE

LASER RADIATION

Avoid exposure to beam

Class 3 B laser product

IEC 60825-1: 2007

VISIBLE AND INVISIBLE LASER RADIATIONAvoid eye or skin exposure to direct or scattered radiationClass 4 laser product IEC 60825-1: 2007

VISIBLE AND INVISIBLE LASER RADIATION

Technical Specifications

使用環境条件

システムは暗室に設置されることが望ましい。

1. 規定操作温度 T = 22℃±3℃(24時間)エアコンの風は直接装置に当らないようにしてください。

2. 許容温度 T = 15℃~35℃

3. 16時間以内の保管許容温度 T = -20℃~55℃

4. 6時間以内の保管許容温度 T = -20℃~55℃

5. 温度勾配(温度変化) ±0.5 ℃/h

6. 暖機時間 1 h、ただし高精度及び長時間観察の場合は3 h以上が望ましい

7. 相対湿度 <65% at 30℃

8. 動作高度(標高) 最大 2000 m

9 .熱損失 2 kW

10. 動作条件下での振動(with system table)

5 μm pp at 5 Hz10 μm pp at 10 Hz10 μm pp at 20 Hz

11. 輸送衝撃 10 g

LSM 880 meets the requirements according to IEC 60825-1:2007

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ZEISS LSM 880with Airyscan

Revolutionize YourConfocal Imaging

› LSM 880 とは

› 特長

› アプリケーション

› システム構成

› 技術仕様

› サービス

Page 31: 4 11 20 14 ZEISS LSM 880 with Airyscan …...E-mail microscopy.ja@zeiss.com ZEISS LSM 880 with Airyscan Revolutionize Your Confocal Imaging 観察対象物は非常に微小であったり、時には動きが速く、蛍光の褪色の速いものもあります。もしくは、それらの要素が

Count on Service in the True Sense of the word

真の意味でのサービスを追及します

メンテナンスサービス

修理・部品代を含む標準パッケージ

私たちにとって大切なのはお客様の出される結果です。私たちの願いは、お客様がお使いの顕微鏡から期待しうる最高の結果を出されることです。顕微鏡の設置後も、私たちはお客様とともにあり、技術・ソフトウェア・アドバイス・サービス、お客様に必要とされるすべてにおいて頼りになるよう努めます。ZEISSのスペシャリストは、システムのメンテナンス・修理・修理部品の供給を含めたサポートを継続していきます。

顕微鏡も機械である以上、使用頻度や経年変化による部品の摩耗、劣化は避けられないものです。このため、最適な状態の維持及び事前の不良・劣化箇所の発見の方法として、定期点検を受けることをお勧めいたします。また、故障が発生した際でも、できるだけお客様の負担を少なくするよう、年契約のメンテナンスを用意しております。システムの効率を保つためには、安全で現実的な選択です。メンテナンス契約によって、よりコスト高となるシステム停止期間を防ぐことができます。

点検作業に加えて、修理料金・出張料金・部品代金が含まれています。お使いの機器を常に最適の状態に保つことができます。

お客様の顕微鏡システムの性能を、ZEISSのサービスで今も将来も最適にすることができます。

>> www.zeiss.com/microservice

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Page 32: 4 11 20 14 ZEISS LSM 880 with Airyscan …...E-mail microscopy.ja@zeiss.com ZEISS LSM 880 with Airyscan Revolutionize Your Confocal Imaging 観察対象物は非常に微小であったり、時には動きが速く、蛍光の褪色の速いものもあります。もしくは、それらの要素が

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SK-1

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●本製品の構成、仕様、外観等は予告なく変更する場合があります(カタログ記載内容:2014年11月現在)。●製品の色彩は印刷のため実物とは異なることがあります。●本カタログではTM、®マークは明記していません。システム名、製品名は各開発会社の登録商標または商標です。

●詳しくは、カールツァイスマイクロスコピー各営業所、または弊社機器製品取扱店へお問い合わせください。●本カタログは、環境に配慮した植物インキを使用しています。

カールツァイスマイクロスコピー株式会社

Tel 03-3355-0332Fax 03-3359-2118

http://www.zeiss.co.jp/microscopy

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