7
A Novel Mouse Gene, Sh3yl1, is Expressed in the Anagen Hair Follicle Noriaki Aoki, Kaoru Ito, and Masaaki Ito Department of Dermatology, Niigata University School of Medicine, Niigata, Japan In an attempt to investigate the genes expressed in the anagen hair follicle, we differentially screened a mouse anagen skin cDNA library, and identi®ed a cDNA encoding a novel protein containing one Src homology 3 domain at the carboxyl terminus. The predicted amino acid sequence revealed a signi®cant homology with YHRO 16c/Ysc 84, the yeast Src homology 3 domain-containing protein, for which transcripts are expressed at high levels during meio- sis. The sequence identity was remarkable at the amino terminus as well as the carboxyl-terminal Src homology 3 domain, suggesting that the novel pro- tein is a mouse homolog of the yeast protein, and we have termed this protein Sh3yl1. In northern blot study, the transcripts were detected not only in the skin but also in other tissues, especially the kidney, stomach, small intestine, and colon. Furthermore, in mouse skin, the expression of these transcripts basi- cally followed the hair-growth cycle, increasing sig- ni®cantly during mid and late anagen phases, and decreasing during catagen, telogen, and early anagen phases. An in situ hybridization experiment showed that the Sh3yl1 transcripts are expressed predomi- nantly in the hair bulb, the hair shaft, inner root sheath, and outer root sheath in the lower half of the follicle during mid and late anagen phases. These transcripts were not detected in catagen, telogen, and early anagen hair follicles, or in other skin com- ponents. Thus, these data suggest the possible invol- vement of Sh3yl1 in the development of hair follicles during the anagen phase. Key words: differential hybri- dization/hair cycle/SH3 domain. J Invest Dermatol 114:1050±1056, 2000 A mongst the skin appendages, the hair follicle has the most complicated structure, being composed of several cell layers and displaying the most dynamic cell kinetics, as indicated by the cyclic morphologic changes from the anagen phase to the catagen and telogen phases, and then to the anagen phase again. These changes are called the hair cycle; hairs grow in the anagen phase, stop their growth in the catagen phase, fall out at the end of the telogen phase, and then regenerate in the next anagen phase (Ito, 1990). Within the anagen phase, six stages (anagen I-VI) have been further histologically identi®ed. We differentially screened a mouse skin cDNA library to identify genes expressed at higher levels in the anagen hair follicle. Using this differential hybridization technique, a cDNA encoding the protein containing one Src homology 3 (SH3) domain was identi®ed. SH2 and SH3 domains were originally described as conserved, noncatalytic regions in cytoplasmic tyrosine kinases such as p60 C±SRC (Cantley et al, 1991; Koch et al, 1991), and these domains have subsequently been shown to be present in many proteins involved in signal transduction (Mayer and Baltimore, 1993). Although the physiologic role of SH2 domains of signaling molecules is relatively well understood, little is known about the function of SH3 domains. A key to deciphering the function of SH3 domains came when two SH3 binding proteins, 3BP1 and 3BP2, were identi®ed by screening a cDNA expression library with the Abl SH3 domain (Ren et al, 1993). Since then, a number of in vivo SH3 ligands have been identi®ed. From these studies, SH3 domains have been shown to mediate speci®c protein±protein interactions via the recognition of proline-rich sequences (Ren et al, 1993; Finan et al, 1994). Here we characterize a novel protein containing one SH3 domain at the carboxyl terminus, and we report the gene expression pattern during the hair-growth cycle. This protein shows signi®cant homology with the yeast protein YHRO 16c/ Ysc 84 (Rocco et al, 1993), at both its amino- and its carboxyl- terminal portions, suggesting that it is probably a mouse homolog of the yeast protein. Therefore, we have designated it Sh3 domain YSC-like 1, Sh3yl1. MATERIALS AND METHODS Animals and skin samples Syngeneic C57BL/6NCrj female mice (purchased from Charles River, Yokohama, Japan), 1±42 d and 7±8 wk old, and BALB/cAnNCrj mice, 22±42 d old, were housed under 12 h light/ dark cycles and fed ad libitum. For library construction and screening, hair growth (anagen) was induced as previously described (Paus et al, 1990). Seven w-C57BL/6NCrj mice with all dorsal skin hair in telogen were depilated with a mixture of wax and resin. Dorsal skins were harvested at days 0 (telogen) and 6 (anagen) after follicle growth induction. All skin samples were con®rmed to be in telogen or anagen (anagen III-IV) phases histologically using a light microscope. Library construction and screening Poly-A + RNAs were isolated from the dorsal skin of three C57BL/6NCrj mice in anagen or telogen phases, respectively, by guanidine thiocyanate solubilization and centrifugation over CsCl, and with an oligo(dT)-cellulose column. A Manuscript received February 23, 1999; revised April 2, 2000; accepted for publication February 28, 2000. Reprint requests to: Dr. Noriaki Aoki, Department of Dermatology, Niigata University School of Medicine, Asahimachi-dori, Niigata 951± 8510, Japan. Abbreviation: SH3 domain, Src homology 3 domain. 0022-202X/00/$15.00 ´ Copyright # 2000 by The Society for Investigative Dermatology, Inc. 1050

A Novel Mouse Gene, Sh3yl1, is Expressed in the Anagen Hair Follicle

  • Upload
    masaaki

  • View
    213

  • Download
    0

Embed Size (px)

Citation preview

� ����� ���� ���� ������� ������� � ��� ������ �� ����� ���

������� ����� ��� ���� � � ������� ����������� � �� ������������ ������� � �������� ������ �� ������ �� �������� ����

�� �� ������� �� ���� ���� ��� ���� ������� ���� ������ �� � ���� ���� �� � ������� ���� ������� ����� ������ � � � �� � !����� ��� ���� "�� �� �� ����� �� � ����� ����� � ����� � �� ��� #���������� $ ���� � �� ��� ���!���� ���� ��% &������ ���� �� �� �� � �'����� �������� � �� "������������ � �� (�)* +,�-(� ./� ��� ���� #���������� $ ���� �0����� � �� ����� �� ��� �� �������� �� ��� ������� �� � �� ����� ��� �� �� �0 % &�� �'����� ���� �� �� �������!�� �� ����� �� ���� �� � ���� � ��� ���!����0���� ��� #���������� $ ���� �� ����� �� ���� ��� ����� ���0�� � � ���� ������� �� ��� ���� ����� �� ����� ���� ������ �� ����� � #�$��+% �� �������� !�������� ��� ������ �� ���� �������� ��� ���� � ���� � !�� ��� � ����� � ��� ���� ���� ��� � ������������ ���� ���� ��� ��� �����% ������������ �

���� � �� ��� ����� �� �� ���� ������ �� !� 0����� �������� ��� �� �0������ ������ ����� �� �0� "������ ��� �� � � ��� ���� ������ ����� ��������� �� ��� �� �������� �������� ��� ����� ����������% �� �� �� ��!� � 1�� �� ����� ���� ��������� ��� ������ ������ �� ��� ������� ������ 0������ � ��� �� � !��!� ��� �� � ����� ���� ���������� ��� ����� ���� ����� � ��� ����� ���� �� ������� ��� ��� �� � � ��� ���� ������ ����% &��������� �� ���� ��� �������� � �������� ����������� ����� ������ �� � ���� ���� �� � ����� � � ���0������% &��� ���� ���� ����� ��� �� !�� ����0������ �� #�$��+ � ��� ����������� �� �� � ���� ������ �� ��� ������ ����% � � ����� ���� � ���� ������������������ ���� ���� ������� � ��� �������!��"#"$�"#%& '"""

��� ��� ��� ��� ���� ������ ��� ���� �������� ��� ������� ����������� �������� ��� � �������� ��������� ���� ������ � � �������� � ��� ���� �� �������� �� ������ �� � ������� �� ��� ������ �������������� ��� ���� ��� � ��� ����� �� ��� ������ � �

������ ������� � � ��� �� ��� � ��� ����� ���� !���� ��� ������ ������ ��� ���� �����" ����� ���# � ��� � ��� ������ ���� ��������#�� � ��� ������ ������ ���� �� �� ��� � � �� ��� ������ ������ � � ��� ���� ����� � ��� �$� � ��� ����� %���� &''() *���� ��� � ��� ������ ��$ ������ %� ��� �+,�) ���� ��� �������������������� ��� ��-��

*� ������� ������ ����� �� � ���� ��� ���� ������� �� ��� ������ �� �$������� �� ������ ������ � ��� � ��� ���� �������� ��� ����� ������� ���� �������.���� ���� �/�� � ���� � ���� � ��������� �� ��� � � � � ��� �������� 0 %�10) ����� #����� ��-�� �12 � � �10 ����� � #��� ����� ���� ��������� ���� ������� � ��������� ����� � � ����������� ������ � �� ���� ����� �3(45�64 %4� ���� �� ��� &''&" ��� �� ��� &''&)� � � ���������� � ���� ����/� ��� ��� ���# �� �� ����� � � �� ������� � � ������ � ��� �� ��� ������ %����� � � 7���������&''0) ������� ��� ����������� ���� �� �12 ����� � �� ��� ��� ��������� �� ���������� #��� ��������� ������ �� � �# ���� ���� ���� �� �10 ����� � � ��� �� ��������� � ��� � ���� ���10 ����� � ���� #�� �#� �10 �� �� � ������ �� 078& � �

0782� #��� ��� ��-�� �� ����� � � � ���� �$������� ������� #������ ��� �10 ����� %6� �� ��� &''0) �� �� ��� � � ���� �� ������ �10 ���� �� ���� ��� ��� ��-�� 9��� ����� ������� �10����� � ���� ��� ���# �� ������� �����-� ������ 5������ � �������� � ��� ��� ����� ���� �� ����� �+���� ��/� ��� %6� �� ���&''0" 9� � �� ��� &'':)

1��� #� ����������.� � ���� ������ �� ��� � � � � �10����� �� ��� �����$�� ����� �� � � #� ������ ��� �� ��$������� ������ ��� � ��� ����+���#�� ����� !��� ������ ���#� ��� �-�� � �������� #��� ��� ����� ������ ;16< &3�=;�� >: %6���� �� ��� &''0)� �� ���� ��� ��� �+ � � ��� �����$��+����� �� ������ �� ������� � ���� �� �� �������� � ���� ��������� ��� ����� ������ !��������� #� ���� ����� ���� �� ��0 ����� ;�4+���� &� ��0��&

��!?6��@� ��� �?!1<��

�� ��� ��� � � ����� �� �� ��� 4AB7@=3�4�C ������ ����%�������� ���� 4������ 6����� ;�������� ���� )� &5:2 � � � B5> #� ����� � 7�@7=�� �4�C ����� 225:2 � ���� #��� ����� ��� &2 � �����=���� ������ � � ��� � ������

9�� ������� �� ������� � � ����� � �� ���� ���#�� %� ��� ) #��� ���� �� ��������� ��������� %8�� �� ��� &''() ���� #+4AB7@=3�4�C���� #��� ��� ������ ��� ���� � ������ #��� ��������� #��� � ��$��� ��#�$ � � ���� ������ ��� � #��� ��������� �� ���� ( %������ ) � � 3%� ��� ) ����� �������� ���#�� � ����� ��� ��� ������� #��� �� -���� ���� � ������ �� � ��� %� ��� ���+�,) ������ �������������� �� � � ���������������

2 !���� �������� �� ��� ����� �� 8���+�D 6��� #��� ������������ ��� ������ ��� �� ����� 4AB7@=3�4�C ���� � � ��� �� ������ ������� ������������� �� �� ��� � ������� ��� �������.���� � ��� ��������� ���� 4�4�� � � #��� � �����%�!)+�������� ���� �

�� ������ �������� 9������ 20� &'''" ������� ����� 2� 2(((" ����������� ��������� 9������ 2>� 2(((

6���� � ��/���� ��E �� ������� ����� �������� � �� ������������������� � �������� ������ �� ������ �� ����������+����� ������� 'A&5>A&(� ����

����������� E �10 ����� � ��� �������� 0 �����

((22+2(2F=((=G&A (( H 4�������� � 2((( �� !�� ������� ��� � ����������� ������������ � �

+343

�������� �� ���� ������� #�� �� ������� � � I�8 �� %�������� �� @� ������4�) ���� ����+�D 6�� �� � ��� ����� ��� �����#� � ��� �� �������J��������� !�� ���� ������� #�� ������ � � �#� ������� -����� #��� ������� ���� ����� �������� -����� #��� ����� �� #��� ������������ -���+���� ����� ������ ������� ���� ����+�D 6�� �� ������ � ��� �� ������ ����� ��� !� ����� ����� ����+�D 6�� %2��) #�� � ������ � 2( �� ��A( �� ���%�����$�������)+��� ������ � %!���) %�1 > 0)� &( �� ��4�2�&A( �� 4�� & ( �� �+��� ��� �+A�+������������� & ( �� �+�� ��� �������������� & ( �� �!!8� &((�4� �� K028L�+������ � ������������%0((( 4� ��� ����)� &((�� �����%�!) ��� ��� &( �� ��������������� &( ��� 6���� %8������� ������ � *�)� � � 2( � �� ��@, ���������� ��������� %M���� 76@� M����������� ��) ��� 3( �� �� 0B�4 %����� ��� &''2) !�� � ���������� ��������� #��� ������� ���������������� �� � ��� �������$ M+A( ���� %8��������� ���������#��� ) �����$������� &� &(3 ������� � � ������ #��� ������ � �

����� �� 1������.���� #�� ��������� �� :2�4 #��� �#� ������� � ������%2� &(3 ��� ��� �� � �������.���� ������ )� � � #�� �����#�� ��#���� � #��� ( &� ����� �������=�������� ����� %��4) %&A( �� ��4��&A �� �������� �������) � � ( &N ����� ������� ������ %���) �� A(�4 ����� �#� �� �� �� ������� �� ����� � �� ��� ������ �������.�� �����������#��� ���� ����� �� � ��� ����� ��� #��� ��������� � � ����� ����� ����� #��� �$����� �������� �� 7�������� ������� %�������� �) �����#� � ����� �������J� ��������

�� �'����� ��� ����� !�� �������� ��/� ��� �� ��� ����� ����� #��� ������� �� �� ��� �����$� ���� +����� �� ������ %�� ����� ��� &'BB) �� � �����+���� ��� ��� �� � �������� ��� 7��7?�! ������������� %!������ ����� ���� ) !�� �������� ��/� �� �� ��� � �������� � ����� #�� ������� �� �� ��/� �� � ���� ���� �� ������� � ������ � �# ��/� ��� #�� ��������� #��� ��� 7@��! ������ �������

�������� !��� ����� 9�� ������ ���� � ������� �� � ����� %����� �� �� !����� ���� )� ����� 6��� #��� �������� ���� ��������� ������ � ���� #��� �$����� ���� ����� 4AB7@=3�4�C ���� �� �� �� ��� ���� ��� & �� ��� :2 � � ��� ������ ������ ������� � ���� �������J� ������� ����� � !� ���������� �� ����� 6�� #������������������ � & AN ������������ ��� #��� 6�� �������� #������������ � � #��� ��� ������� �� ������������ -���� �� ������������������ %!������ &'>0) !�� ���+�� ��� ����� ���� #�� �������#��� 028 �� � ��$� �������� �� ��� ����� � ������ %9�� ���� � �,�������� � &'>0) � � ��� �� � ����� 1������.���� � � #���� � #���������� �� ��� ���� ������ ��� ���� �� ����� � �� ��������� ����� !�� -����� #��� ����/� ��� ���������.�� #��� ��� ��������������+0+��������� ��������� ��� ����� �� ��� 028+� �+������� ����� ��������%A�+!MM!4�44�!MM!�MM4�4MM4M�4!�44�!4M���M!!+�!)������� ���� &>� �6�� %6�� �� �� ��� &'>:)

5���� ��� �� �� �)�� ����� O� ������� �� ��� �����-� �6����� ������� �������� �� ������ ���� #�� ������� �� #��� � 7������� �� ���.�� 7�� 2((( %9���F� !����) %���� �� ��� &''B) ��� ����� #��� ������.�� ��� ��� ���� ��� � �� 6�� �� ������� � � ��� �������� �����

� ���� 6% 7��� ���� �� �� �� � �'����� ��#�$��+� (�)* +,�� (� ./� ��� (�)* 6/�%��� ����� ������� ��� ������ !�� �����$��+����+� �� �10 ����� �� ��$�� ������ �� �� ��� ����� ������� �� ��$���.� ��� ����

� ���� +% &�� ���� ���� ����� � �'����� �� #�$��+% ��/� ��� � ��������$�� ����� � �������� �� � �� ��� �10 ����� ��� ��$�� !�� �������� ��/� �� #�� ���������� � ��7�� ?�7@� � � M� 7� ����������� � � ��� �������� ���� �� �>A'23

,<@ &&:� �< A ��; 2((( ����� �<,?@ M?�? 4<�!�����M �� �10 �<���� +34+

�� &>� �6�� � ���� ������ 9������ ���� ��� ������ ����� #�� ������.���� ��� ��$��� ����� �� ��� ��� ������ �������� �� ��� '

�� �� ��!� � 1�� �� �� ���� �������.���� #�� ��������� � 7�@7=�� �4�C ����� ������ 4AB7@=3�4�C ���� ���� #���� ��� ������� � #�� �������� ��� �� �� � ���� � ��� ��� � ��� ���� ����������#���� � �������� #��� ��� � ������ ��� ��� ������.���� �� ��� ������� %������ ��� &''B) 7�@7=�� �4�C ���� 225:2 � ��� #��� �����-��� � � ��������� ��� � #��� ���� �������� �� ��� ������������� �� � �� ����� �� ����� �� ���� �������� ������ � !�� ��� ������� #��� -$�� � :N���������������� � � �������� � �����- ������� � �� ��� ������������� 9���+���������� ������ � #��� �� ��� � ���� �+����������� ������

0A�+�!8+������� 6�� ������ #��� �� �����.�� ���� �� ����.�� ���������������� ������ � ��� A� � ���� � ����� � ��� �������� ���� � ����� �� � ��� 0� � ���� � ����� �� � ��� � �������� � � F�� � �������� ����� ����.���� �� � ���� �� � � �� �� ���������� ������������

�� ���� �������.���� � ������ #�� ��������� ������� � �� ��� ��������������� ��������� %8�#��� � � 6������ &''() 7���P�� �������- �.�� � ��������� �.�� ������ � #��� ���������� � ������ � ������� ������ � ���� ���������� 1������.���� #�� ��������� �� AA�4 ��� 22 � #��� 0A�+������� 6�� ������ �� 2� &(B ��� ��� �� ����� ������� � #��� 6���� �� � #���� � � ( &� ��4� ������ � #��� ������ � ���� �!7+2������ � � �$����� �� :�4 ��� 2> � !���� ������ � #��� �� ������� ��#��� ������$���

����� �� �� #�$��+ ����� � ������� �� ���� 9��+�� ��� ��������� �� ��� � � � � ���� ���� � ����� #�� ������� � �� �������� �$������� ������� �����0 %�����0+ �����) %� ������� � @���� !���������� ��) !� �$����� ��0��& ������ ������ �� ����� 4<�& �����%A� &(A) #��� ��� ������� �� 2(�� �����0+ ����� �� �� ���� �����0������� � �� ��� ������ ��������� ��������� %*����� �� ��� &'B') !��������� #��� ���������� � � ����� ������� #��� ��� � #����� ���� � ������

��� !��� ��� �����!���� �� �� ������-� � ������ �� ��0��& #��������� � ������� �� ��� �.� � #��� � �� ������ ��������4��@,�6?O6�?@� �������� �� � �� �/� ��� � ������/� ��� !�� ��� �.���� �������� #�� �� ��������� ���������%6��� �� ��� &'>:) !�� � ������ #�� ���-�� �� ��- ����������������� �� � ��� �� ������ ������� ������ �� ������������������ %7�� ���� �� ��� &'>() 9�� ��� ������� �� 4<�& ����������$������ � ��0��& ������ � ���� ��� ��� � � � ��� %��� 03) � ������� %��� 22) ��� � #��� ������ �.�� � � �� ���� � ����� K&N !���� F+&((� A( �� ��4�� &( �� !��� %�1 B 3)� A �� ������ ������ ������������ ����L� � � ������ �� ����� � #��� AN �+������������ ��"

������� %2((��) #��� ��C����� �� ���+�������������� ������������������� � � ������ � � ��� ��� #��� ��� ������� � �� ������������ -���� !�� -���� #�� ���������� � !���+������� ���� �%!7�) K2( �� !��� %�1 B A)� &A( �� ��4�L �� ��� � � ( &N !#�� 2(� � &(N � ��� ����� � � #����� #��� !7� �� ��� � � ( &N !#�� 2( 8������ � ������ #�� ��� �� ( &N ���=���� � � �������� #�� ���������#��� ( &N �����������+����$�����+�� C����� ���� � �������� ��M %�����4��� ���� ) � !7� #��� ( &N !#�� 2( � � &(N � ��� ���� �� ���� �� ��� �������� ���� �� ������ %��������� ���� ��� 1������� �@)

6?��@!�

&�� ���� ���� �� �� �� � �'����� �� ������ ��� ���� � � ����� ����� � ����� � �� �� #�$ ���� � �����$�������&� &(3 � ���� �� � ���/�� �� ��� ���� ������� �������� �������� ��� � �� ��� � ��� ����� %� ��� ���+�,) #��� ������� ����������� �� #��� ���� ������ �� ��� � ��� � � ������ ������ < ��� ��� ��� �� �������� ����.� � ���� ���� �/�� ��� � B�+&� �� ��� ��� � ���� �� 3(( �� �� � �� ������� � ����� � ����� � ���� � � ���� �10 ����� !��� � ���� �� ��� �� � 0� ���� ���� �����#���� � ������� ������ ��� �� �� ��� �� �� ��� ��� A� ����� ���� � �� ������� ��� �$��� ���� � ��� ��� ������ �������� �� � �� �������� #�� ���� �� � �� �� �$������� � ��� ��� �� �� ������ ���� ���� !�� �� ������� ��� A� � � �� ��� �� �� #� ����� �� ������� � ��� ��� � � ��� �� ��������� �� � ���� �������� ������ �� �������� � ��� ���� ��� � B�+& 7� ���� ������������ ���+�� ��� ���� ��/� �� #�� ������� �� ���� ���� ���������� � #�� �� � �� � ���� � ��������� ��������� ������ *������ ����� �� ���� �� � �� �����

!�� ����� ���� �� ��� �� � �� ��� �� � ��� ����� � ��������� ���� � #��� � ������ � � ���� �� �������� :2 #��� ��� �� ��� �� ��� ������ � ������� ��/� �� %�.��� &'>3) � � � ��#��� � !�� ���� ���� �� �������� &(32 !�� ��!���������� ������ ��� �� #�� ������� �� �������� &2(:� 20 ��������� ������� ���� ��� ���� %�) 6�� ��/� �� !�� ������ �� ��� ��� ����� � ����� �� ��� ���� ��������� ������� �� 0:( ������� #��� � �������� #����� �� 0B ��� %� � +) !�� � ������ �� ��� ������ ��� � ���� ��/� �� ���#�� � �10����� �� ��� �����$�� ����� � %��� � ����� 2>&50:() �� ��12 � � ��������� �������� ����� � %4��� �� ��� &''A) ���+��������� ����� ������ �� ������ � � ����������� ����� ���� #��������� ��� ����� �� �� � ��� ������� � ����� �� ����������������� ��/� ��

� ���� $% ��� � � ����� �� #�$��+� (�)* +,�� ��� (�)* 6/� ��� ��� �������� ����� ��� ����� ����� �% !�� �� ������ �� �������� ��� ���� ����� �� ��� � ���� ����� !�� ����� ���� ��� ���� ��� ;16< &3� ���#�� ���� ����� �� ���� ��� �+����� �� ����� � %������������) � � �����$��+����� �� ����� � %����� �����) ��� ��� ����� � ���� ������ �� ������ ��� � ����� ������ � � ������� � � ����� ��������� ����� �����#� � ��� ��� �+����� �� ����� �� �������� ���#�� ;16< &3� � � ;96< 2:� %�����+������� �����)

� ���� /% �� ��0�� � �� ������ �� #�$ ���� � �� #�$��+ ��� ���������� �� #�$0���� �0����� � �� ����� �% !�� ��� � ���� �� ��� -��������� �� ���� ��/� �� �� ���� � ���� ������ 6������ ���� ��� ��� ����� ��� ������ ������ �� ��� ���� � ��� ��/� �� �� ��$���.� ���� �� �

+346 �<� �� �� !1? �<�6��@ <9 ��,?�!�M�!�,? �?6��!<@<M;

� ������ � ��� �������� ��� ��������� ��/� ��� ������������ ��0��& �� :3N ��� ����� �� ����� ;16< &3� �� ��� ��� ����� ����� %� � 6) !���� �#� ������ � �� ��� � � �10 ����� �� ��� �����$�� ����� �� � � ����� ����� � ���# ������/� �� ��� ���� �� A(N � ����� ���������� �������������� #�� �������� �� ��� ��� � ����� � � ���� ����� �#���� �� ��� ���� & �� 2(' ��� � ������ ��0��& ���#� � A0N��� ���� #��� ;16< &3� %� � $) ���������� �� ������ ������������ #��� �#� ����� ����� ������ �� ;�� >: %;113)%6���� �� ��� &''0) � � ;96< 2:� %;9�:)� ���� �� ��������$��+����� �� �10 ����� � � ��� ��� �+����� �� ������ %� � 6� $) !�� ���� �� � �� ��� ��0��& �10 ����� #����10 ����� � �� � � ����� ������ � �������� ��� ���������� ���� �� �� #��� ����� �� ;16< &3� %A(N)� ;�� >: %A(N)�;96< 2:� %:>N)� M��2 %:>N)� ;M0� %:BN)� � � ����� � 4%:BN) %� � /)

� 7@��! ������ �������� ������� �������� ��/� ��� �� ������ ��� ���� � � � ��� � � ������ � ��� ����� �� �� ��� ������� � � ��� � ������ ������ �� ������� � ��� �� ���� � ��

!� ������� � ��� ����� ���������� �� ��0��&� ������ �������.���� � ������ #�� ��������� #��� ������ ���� �����6��� ,��� �� � ��������������� �$������ 2& �� #��� � � �� ����� � ����� #�� ����� �� ����� ������� ������ ������ �������� ������ � ���� ����� ��� ������� ��� ����� � � �� � ��# /� ������ ��� � ��� ���+�� ��� ����� ���� �� � ������� � �� �#� ��� ������� #��� �������� � ��� ������ �������$��� ��� �$���� ��� ����� � � �������� ����� %� � 4) !��/� ���� �� ��� �#� ��� ������� ������ ��� � ��� ������ !���$������� �� ��� & 3 �� ��� ������ �������� � ���� �������$��� ��� #��� ��� �$������ �� ����� � � �������� ����� � �� ������ ��� & 0 �� ��� ������ #�� ���������� �� �� � � ��������������� �� �������� ����� � ����� �� ���� � ��� � � ���� ��� � � ���� �� �� � �� ���������� � ��� ���������#������ �� #�� ���������� � ��� ���� � ������ ����� � � ������ !�� � ���� ����� ���� ����� �� � ��������� &223 ��������� � � �� ��� � � +����� ����� ���� ���� � � ��� A�+ ��� ������ ����� �� #��� �� �� �� �� ��/� ��� ���������� ������ � ��� 0�+ ��� ������ ����� �� �� ������������� ������ ���� ����� �������� �� �� ��� & 0 �� ��� ������ !�� & 3 �� ��� ������ ��� �� � ����� ������� ������� ���� ����� ����� �� � &����� �� �� ������ ������� �� � � ���� ����� � ���

������ ���� ��� �� ��� �� � ����� !� ������ ������� ��������� �� ����� ��� ������ �$������� � ���� ��� ��� � ������� ������ ������ ���� � ������ #�� ��������� #��� ��� �����6��� �$������� ���� ��� ������ ��� �� ���� �� �� � � ������� & �� :2 � ��� !�� �������.���� ������ ��� ���# � � � ,� � � ����� ������.���� ��� �������� 6�� ����� �� ���������� � � � 8 !��� ������ ������� �� �#� ��� ������ �� �������#�� !�� �$������� �� ����� �6�� ��������� �����#�� ���

���� ���#�� ������ � ������ � ��� �-�� ��� ��� � ��� -��� � ��� #��� ��� ���� �� ��� '� � � ��� � � �� ��� ��� �������� ��� ���� ������ � ������ � � � ����� � ��� ������ %� ��� �+���) ���� � ��� ������ �� �6�� ��������� � ������� ��� � ������ � � ���� � ��� ������ %� ��� �,+,�) �� ��� ���� � ����� � ���� ���� � � ��� ������ ��� �6�� ��������� �������� ���� �� ��� 00 ������ ������ �� ������� � ��� ������ �� � ���� ��� !�

������� � ��� ������.���� �� ����� ��� ������� � ��� � #� � ���.����� ������� ���� ��� 22 �� ��� :2� #���� �������� ��� �� ������� � ���� ����� !�� ��� ������� �� ����� �������� �� �� �������� � ���� ��� � ��� ������ ����� %��� 22) �� � ��� ��� %��� 2B) � �$��� ���� �� ������ � � � ��� , � � ,��� �� � ���� ��� 02 �� ��� 0'� ��� ���� �� #���� ��� ��������� �������� ��� ������ �������� ������� � � �$������� �� �������� ������� � ��� ���� ���� � ���� � ��� �����$ ����� � � ��� ���������� �� ������ � ��� ���� ������ � �� ���� ������ %�6�)� � � �������� ������ %<6�) � ��� ��#�� ���� %��� ��� � ������ ) �� ����������� %� � .�� �� � �) !���� �$������� ������ �� �� ���������� ��� ���#�� ����� �� ��� ���� ����� � ��� ������ ����� %��� :2)� ��� ��� #��� �������� � ��� �������� � ������������ %���� �� ���# ) ��� � ��� ����+���#�� ������ ����������� ��� #��� �� �������� � ����� ��� ����� � �� ��� �� ������������� �������� ��� �� �#��� ��� �� � � ��� ����� � �� ������� �������� � �������� ��� �� ��� ��� ���� �� ����� �%� � .�� �) #�$��+ ����� � �������� � ��� ���� � ���� !�

9����� !���� �� � ������ #�� ������ � ������� ���� �� ��� ������ ������� �������� �� � �� ������� 22&5203 �� ��0��& *����� ������ � � ������ ���� ������� ���� ���� � ������ ��������� �.� � � �������� �� � �������� �� � �� � �������� #������� 0B ��� � 4<�& ����� �����$������ � ��0��& �� �������� �$������� ������ %���� �� ���# )� � ������ � ���� ���� � ������ ��������� �� ������ � #��� ��0��& !��� #� ��������� � *����� ������ � ���� #��� ��� ������� �������� ���� ������ � � � ��� ��� � � � ��� �� �� � ���� � ��+��0��& � ������ �� ���# � � � :� ���� � ������ ������� ����� �.�� � � �� � � ��� ��� ��� �������� ���� �� �������� � � ��� � � ������ ��� � !�� ������ �

� ���� 4% ������ ������ �� ��� !� �������� � ��� �� ���� � ��%!���� 6�� %&(��) ���� ��� � ������� ���� ������ #�� ������������������� ������� �� ������������ -����� � � �������.�� �� 028+������� ���+�� ��� ����� ���� ����� !�� ���� #�� ����/� ��� ���������.�� #��� �����������������+0+��������� ��������� ��� %M�8�1) ����� !�� 6��������� ��� � ������� �� ��� �����

� ���� ,% ������ ������ �� ������� �� � � ���� ����� � ���������� ��� �� ��� �� � �����% !���� 6�� %&(��) �������� ���� ���������� ��� �� �� � ���� ��� & �� ��� :2 #�� �������.�� #��� ����� ���������� !�� ���� #�� ����/� ��� ���������.�� #��� ��� 028+� �+������������ �������� ������� ���� &>� �6�� �����

� ���� 8% 5���� ��� �� �� �)�� ����� �� ������% !�� ������ �����#��� ��� �� #��� 7������� � � ���.�� 7�� 2((( � � ��� ������ � �����#��� ������.�� �� ��� �������� ����� �� &>� �6��� #���� #�� ������.���� ��� ��$��� ����� �� ��� ��� ������ �������� �� ��� '

,<@ &&:� �< A ��; 2((( ����� �<,?@ M?�? 4<�!�����M �� �10 �<���� +34$

�������� ��.� �� ��� ������ #�� �����$������� 0B ��� � � #����� ���� � #��� ���� ��������� ���� ��� ��� � ���� ��/� �� ����0��&

���4����<�

� ���� ����� #� ��������� �� ��� ���� ��� �� �� �$������� � ��� ���� � ��� ���� �������� �� ��� ������� ���� ����� � � �� ���� ���� ������� �� � ������ #� ��� ��-�� � ���� � ���� ���� ���� �10+����� +�� ��� � � ������ ������ ��0��& ������� ���� �$������ �� ���� ������� ��� #��� �$������� �� ��� ��� ������� � ���� ������ � ������� � ��� �$������� ������ �� ��� ��� ������� � ���� ��� #�� �$��� �� ��� ���� ����+���#�� ����� 8��������� ����+���� ���� ������ �����+����� �=������ � ������ � � � 1��+&� ��� �� #���� ���� ��� +����+��������+�����-� �� ��� ���� ��� ���# �� ��

�$������� �����#� � ��� ����+���#�� ����� %*��� �� ��� &''("1� �� ��� &'':" ���� �� ��� &''B� &''>) !���� ��� ������� #����������� � �� � ��� ��� � � ���� � ��� ������ �� �� � ��������� � ������ � � � ����� � ��� ������ 1��� �� #�� ���# ���� ��� �$������� ������ �� ����� ��� ������� ���� ��� �� � �����+�����+���� �� � �� �� ������� ����� �� #�� �� � ���� ����� ��� ������ �� �� #����� �������� � ��� ������ ������� � � � ����� � ��� %� ��� �+���) ������ !���� ������ ���� ������ ����� ��� ����������� ���� ��� ��� ������� ��� ������ ���� �$������� � ��� ���� �������� �������� ��� ����+���#�������� #��� �$������� ������ � � ��$��� � ��� � ��� ������ � � �� ��� � ��� ������ � � ������ ������ �� �����������.���� �$������ �� ���#�� ���� ��� ��� ������� ����$������� ������� � ��� � ��� ���� ��������� �� ��� ��� � ����� � ��� ������ � �� ������ � ��� ���� ��������� �� ��������� � ������ � � � ����� � ��� ������� ��� ����� ��� �������#��� ����������� #���� ��� ���� ��� � ����� �� ���� ��#�$������� ������

!�� ���� ����� �� ����������.�� �� ����� ������������ � ���+��� �� � ������E ����� � %������ )� ���#�� %� ��� )� � � ��������� %������ ) ��� � ��� ������ ������ ��� ����� � ������ ������� ���� ������ � ����� ���$����� �� ��� ����+� � � ��� ���� � �������� � ��� ������ ���� ������� ������� ��� � � ���� ������������ ���� ����� � �� ���� #��� ��� �� ��� ������ ��������� � � ��# ���#�� �� ����������� � ���������� ����� ��������� � ��������� ������ ������� 8��������� �������� ������ �������� � � ��#+�������+ ���� ������ ������ �������� ����� ���� ��� ���# ���� ������� �� � ��� � ���� ���#�� � �������� ��������� %�������� ��� &'>:)� ������� � ���� ��� ������ ������� �������� ���� ������ ������ ��� � ��� +���� ������� ������ �� ��� ������������������ ��� � ��� ����+���#�� ����� !��������� �� �� �����������.���� ������ ���� ������ � ���� ����� �6�� �� �$�������������� � ��� � ��� ��������� ���������� ����� �� ��� ���� ���� ����

� ���� .% ������ ������ �� ��� !� �������� ������� �� � ���� ���% �� ���� �������.���� #����������� � ���� ��� �� ��� 03 �������� �� ��� � ��� ,� 7����� -��� %�� �� �) � � ���� -���%� � �) ���#� �� �� ����� �� ������ � %�� �) 1������ �-����� � �� %�) � � %) ���� ���� �������� ������� #��� �������� � ��� ���� ��� � ���+� � ��� �����$ ���� %�)� � � ���� ������ �6�� � �<6� � ��� ��#�� ���� �� ��� �������� � � ��� ,�� #������ ��� ������� ���� ���� � ��� �� � ��������� #�� �� �� ����� ���������� �� ������ ������+ �.�� �������� %) �� �� ����� ������� � �� +��� ��� �� %�� ) ���� ���� %�� �) &((��" %�)A(��

� ���� :% #�$��+ ����� � ��� !� �������� � ���� � ����% ?$�������� ��� �� %���� �) � � ������ %���� �) � � � ��� %���� �) ��� � #�����C����� �� *����� ������ � #��� ��- ��� ���-�� � ��+��0��& � ������ ����� �� �������� #����� ������� ��� ���� � ��� ����

+34/ �<� �� �� !1? �<�6��@ <9 ��,?�!�M�!�,? �?6��!<@<M;

������ �6�� � � <6� � ������ ���� ��0��& ��� �� �� ����������#��� � ��� � ����� � ������� ��� ��� ������� � ������ ��� �-�� ������ � ��� � ��� �����

!���� #�� � �������� �� � ���� ���� ���#�� ��� ������� �������� ����� �6�� � � ��� ������ �������� � ��� ��� � � ��� �� � ����� ��� ������ #�� �������� � ��� ��� �� �� �������� �� ��� � ��� ��� �� *����� ���� ���� !��� �������� �� ��� �� �$���� ��� ���� �� � ���� ��-��� � �$������������ �� ��0��& ���� ��� ��� ����� �������� �� ��� ���� ��� �� �� ��� ������ �� �� ��C��������� ��� � ��� ����� �6�� ��� ������ ��-��� �� � �=�� � ������ �� ���� � ��� �#� ������� � ������ !�� ������ �� ������ �������������� ������ ���� �� ������ ��� ������ ���������� � ��� ��� ��� ��0��& ������ #�� �������� � ��� ��������� ���� ��� ����� ���������� ������ �� ���� � ��� ��� %���� �� ���# )�� ������ � ���� ����� ��� �� ��� ������ ���� � ��� ���

� � ������� ����� �#� �� �� #��� ��� ��-�� ���� ������ � ������ ��� ������� #��� �������� �� � ������ ��� �-�� ��� ��� �������� %6���� �� ��� &''0) <� ����� �� #�� ���# ���� ��������� ��� � ���� ��/� �� �� � � ! ������ � ���� ��� ����#��� ���� �� ����� ��"# �$� %� � 6) 6��� ���� ��� �������� �������� ��/� �� �� ��� ����� �� ��� ��� ��� ��������%��#�� �� ��� &''B) < ��� ����� �� ���� � �������� � #� ������ -���� ���� ��"# �$� � � � � ! ��� ��� ����� �� �� !��������� ;�� >:� ���� ;16< &3�� �� ������� ���� � �� :3>������� ������ ��� ��� 0'A ������� �������� ��������� ������� �� #� ����� �� ���� ������ �� ;16< &3�=;�� >: �����������

��0��& #�� �� � �� �� ���������� ��������� #��� ;16<&3�=;�� >: �� ���� ��� ��� �+ � � ��� �����$��+����� �� ������ �"��� ��� ���� �� ��� ��� � ����� � �� ��� �-�� � %A0N)� �� �� ���� ����� �����$��+����� �� �10 ����� %A(N) %� � $)� ������� � �������� ��� �+����� �� ������ �� #��� �� ��� �10 ����� ���������� ������ � ���� � ���� �� ����� 9���������� #� �� �� ����� ����� ������ � ;96< 2:�� �� ��� � � � � �10 ����� � ����#� � ���� ��� ���� #��� ��0��& � � ;16< &3�=;�� >: � ���������� ;96< 2:� ���#�� ������ ��� ���� %3(N) #��� ;16<&3�=;�� >:� � � ��� � ������� ��� �+����� �� ����� ������� ������� �������� � ��0��& � � ;16< &3�=;�� >: � ������� �� ������$��+����� �� �10 ����� %� � 6� $) !���� �10 ����� ��������� ��� ������� ��� ���� #��� � � � ����� ��� � ������������ �������� �10 ����� � � ������� � ����� ��� �+����� �� ����� � ���� �� �� ����� ������ � � � ����� ������ � !���� ���������� � � ������ ���� ��0��&� ;16< &3�=;�� >:� � �;96< 2:� ��� �� ������ � ������ ���� ����� � ������� ���� � ������������ ����� � � ����� 9���������� ��0��& �� ������ �� �� ����� ������� �� ��� ����� ������ ;16< &3�=;�� >:�������� � ���� ���� ������ �� �������� �������� � � �������+ ����� ���� ��������� � ���� ����� �� ��� �������� �� ����+������� ���#��

;�� >: ��� ��� ���# �� ��� ������� �� ��� �� � �� �� � ���� ���� ��� ������� �� ��������� ������� ��� � ������ � ����$������� �� ��� ��� ������� ��� � ������� %6���� �� ��� &''0) !������������� ���� ;�� >: � � ;96< 2:� ��� ������� �� ��� ����������� ��#����� � ������� ���� ��� � ���� �� ;�� >: �� ������ �� ���������� ��� �� ;96< 2:� � ������� ���� � ���� ����� �������� ������� #��� �������� �� � ������ ��� � ��� ����������� ������� ��� ����� � ���� ��� � � � ����� �$������� ����� ��� � ���� ��� �������� � ���� ������ �� ������� �������� 1����������������� � ��� ���� ��� ��� ��� ������-�� � �� �#� ������ � � �����#�� ��� ���� � ��� ������ ��������� �����$ ����� ������������������� #������ � ��� ���� ���� ��� ��������� ���������� ����� ������� ������� ����� � ����� ���������� �� ��� �� ���� �������.���� ���� ������� ���� ����� ��� ������� ��� �$������� � ��� ���� ��������� �6�� � � ��� <6� � ��� ��� ��� � ������ �� ��� �������� �� #����� � ��� ���� ��� ��� � ��� ��� � � ���� � ��� ������� � ������ ����� ��0��& ��� �� � ������ � ��� ��������� � �� ��� � ��� ������������ 9���������� ��� - �� � ���� ��� ��� ������� ��� �����$������� � ��� ����+������������� ������ �� ��� ���� ��������������� ���� ��0��& ����� � ������ ���� � ��� � ������� �� ���������������� !�� ��� � ���� ��/� �� ������� ���� �� �� �

����������� ������ � � � � ����� ��� ��� �������������� ���������� ��� ����� �� �� ��0��& � ��� ��������� �� ��� �� �������� ���������� ����� � ������ �10 ����� � ���� ��� �� � � ��� ������ ������� �� ������� �� �� � ������ � ���� �� �������� � � � 6�� �� � � �������� �$��� �� %8�#�� � � M����&''2) � ������� � ����� �10 ����� � ���� ��� ��� ��-�� � ������� ������������ ������ �� � ���� � ������� � ����� &� � � � ���� +�� �� � ������ ���� ������ �78+&� ������� � ���� ��������� �� � ������ � ������� � ��� � �������� � �� ��� ��� ��������� #��� ��� ����������� %� � �� ��� &'>B" 6���#�� �� ���&'>'" ���� �� ��� &''()

!�� ������� ���� �� ��0��& �� ��� ������������ ������ ����� � ���� ������� �� 8������ ������ ���� ���� ������� ���� �10����� �� �� �����-����� �� ��� ������ �� ��� � � ��� ����� �+��������� %6� �� ��� &''0" 9� � �� ��� &'':) � ����� ��� ����� �#�+������ ������ �������� ��� �������� ��� �$���� �� �� � ��0��& �10+����� +�� �� � ������ %� ����� �������� ����) !������������ ����������.���� �� ���� �� �� � ������ #��� �� �� ������� �� � ��� � � ������ � ����� � �� ��� � ���� �� ��0��&

6?9?6?�4?�

���� �� ��� � ��� �E �������� � � ����������.���� �� ���� ����+����� �=������ ������� � % &��� ���� 2B2E0(A&250(A&>� &''B

���� �� ��� � ��� �E 1��� �������� ��� � ���� � ��� +�����-� ������ � ��8&0 %������ '������� &&&E>(:5>('� &''>

7�� ���� 76� 9����� �� ������� ��� 8���� 6@E ���������� � ���� �����E� ������ ��� �P������ � ���� � � #��� ���� � ������ ��� "�� ����� 30E&5:A� &'>(

4� ���� @4� ���� 6� 4���� ��� 4� ���#���� 7� M��.�� � �� ������� 6� ��������E < ���� �� � � ��� �� ��� ������ ���� 3:E2>&50(2� &''&

4��� M7� 6� 6� 7�������� �E ������ �� �� � ����� � � ��� �� ��� ������ ������ � ���� >(E20B52:>� &''A

���� �M� ������� � �� I� I� 7������ �E 1������� �� � ����� ���� +�� �� ������� �� ��� �� ��� ������ ������ � � � ����� +� (����� 0:0E2>>52'(�&''(

9�� ���� �8� ,�������� 7E � ���� �/� ��� ����������� � ��� ���������� � �� ������ ������ �� �� ���� �����-� �������� ���� &������ &02E35&0�&'>0

9� � 8� �����. ;� M�� �� �� ��E � �10 ����� � � ����� �+���� ��/� �� �������� � �������� ���#�� �#� ����� � �� �� ��� ��������� ���81 �$�����������$ % &��� ���� 23'E&0BA25&0BAA� &'':

1� �1� ����#��� �� � ���� 4� 1�������� ;� �� � ;� ����� �� ���� !E�������� � � ����������.���� �� � ���� ���� ��������+�����-� �� �� 1���+& %������ '������� &(2EB&35B2(� &'':

��� �E !�� ���������� � � ���� ������� �� ��� ���� ��������E ���� � ���� ��� ����)� &����*��� 0>EA&53B� &''(

������ 4�� 1�� � �� <����� 69E � ����� �� ���� ���#�� �� ����� ����� �������� ������ ������� ����� (����� 0&&EA3(5A32� &'>:

� � M� �� ?�� 1����� ��E !�� ����� ���� �� ��� �������� ����� �7 �� ����� �� ����� +���� � � � +����� +���� ��/� ��� +��� (��� ��� �� , �>:E3B2(53B2:� &'>B

��� �� 7��������� �� ������� !�E 9+��� �� E � �� � �$������� �� ���� ������ � ���P��� ����� � ����� � �������� ������ ���� �������� ���� ���� ������� � � ����� �$�� ��� ���� 3'E'A5&&(� &''2

��� 4�� � ����� �� ���� �9� ?���� 4� 8�#�� !E �12 � � �10 ����� �E����� �� ���� �� ���� � �������� � �� ����������� ��� ��� � ������ � ������2A2E33>53B:� &''&

�.�� �E 8�� � ������ � ��- � � ��/� �� P� �� � ��� ��M � ������� ���� ������������ ��� ������ �� ��������� ��������� ���� ::E2>052'2� &'>3

����� 7� 7�������� �E ��� ���� � ������ �12 � � �10 ����� � ����� ���� &���0E>5&0� &''0

��#�� 1*� ������� � 7��� �� �� ��E <������# �� ��� ����� �� ��� (����� �--� 0>BE&B�+3A�� &''B

8�� 6� ��� �� @� � 6?E !����� ��� �� ��� � � � ������� �� ���� ���#�� &� %'������� &22EBBB5B>:� &''(

8�#�� !� M��� M�E �12 � � �10 ����� �E ���� ������� �� � ���� ����B&E0A'5032� &''2

8�#��� 74� 6����� M?E 4����� ����+���� � � �����#�� � ��� ��� �� ���������$������ � � � ���������� -���� � �� � �)&# % 'E&:>A5&:'0� &''(

6�� �� 9� ������ 7� 7���������� �8E 4������� �������� ��/� �� �� ���� &> ��6�� �� �E ��������� #��� ����� ��������� �������� .�& ���� &3BE230523>� &'>:

6� 6� ����� 7�� 4�������� 8� 7�������� �E ��� ��-����� �� � �� +��� � ��������� �+���� ���� �10 �� �� � ���� ������ 2A'E&&AB5&&3&� &''0

6���� ,� ���� ��� ����� ,� @����� �� ������� �E ��� ��-����� �� �#� ������� ������ ������� �� �� �� �������+���$���� �� ��� �6M: ���� � ����������,��� �� ������������ ���������� ����� 'E&&&&5&&2(� &''0

6���#�� �69� ���� ���� ��?� 7� ���� �@E ���������� � ������ � ������ � (����� 0:2E32:� &'>'

6��� �6� 4�� � 4� !������ ��� @� ������ 4�� ��� ��� �6� ���� ��� 8�� ;���

,<@ &&:� �< A ��; 2((( ����� �<,?@ M?�? 4<�!�����M �� �10 �<���� +344

�1E �� ������ �������� �������� �� � �� ������ �� ��� ������ ������ �����-�� �������� % &��� ���� 2A'E>(0B5>(:(� &'>:

�� ��� 9� ������ �� 4���� �6E ��� ��/� �� � #��� ���� +����� ��� �� �������� +��� (��� ��� �� , � B:EA:305A:3B� &'BB

!����� 8�E 1������.���� �� �� ����� 6�� ��� ������� �� ������ �� ����������������� )��� ��/���� &((E2AA5233� &'>0

*����� �� 8������� �� ���������� �� �$�� 6� ����� M� 4���� @E ���+����������� ���� �� ��� ��� � � ����������������� ������� ���� � �� �������� ����� +��� (��� ��� �� , � B3E&0B05&0B3� &'B'

*��� @� ����� �� 1��.� ����� �� ,����� ME ���� �+���� ���� ���� ���� ������ �� � �$������� � ��� � ���� � � ��� ��� � ��� ���� ����� % &��� ����23AE2&0BA52&0>(� &''(

+34, �<� �� �� !1? �<�6��@ <9 ��,?�!�M�!�,? �?6��!<@<M;