ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA Y ANTIPARASITARIA IN VIVO DEL EXTRACTO DEL SYZYGIUM AROMATICUM “CLAVO DE OLOR” EN CUYES DESTETADOS

ANTIMICROBIAL AND ANTIPARASITIC ACTIVITY IN VIVO OF SYZYGIUM AROMATICUM EXTRACT "CLOVE" IN GUINEA PIGS AT WEANING

Luis Linares 1, Junior Nina*1, Virginia Linares 1, Gilmar Mendoza 2 , Melissa Bocanegra , Victor Pretel 1, Carmen Alva1,

1 Institución de Investigación Eco - Agropecuaria Uku Pacha2 Escuela de Zootecnia - Universidad Nacional de Trujillo

RESUMEN

En la presente investigación se determinó la actividad antimicrobiana y antiparasitaria del extracto

del Syzygium aromaticum “clavo de olor” en cuyes destetados. Se utilizaron 30 animales

destetados en un diseño complemente al azar con 3 tratamientos (T0: Aplicación de 0.03 ml de

Suero fisiológico, T1: Dosificación oral de 25 mg / kg PV de Sulfadimidina+Trimetroprima, T2:

Dosificación con 0.5 ml de extracto de Syzygium aromaticum. Para el recuento de ooquistes de

Eimeria caviae y de Enterobacterias se recogieron heces y se realizaron hisopados rectales antes

de la aplicación y 7 días después. El análisis estadístico incluyó el análisis de varianza y la prueba

de Duncan (α=0.05). T1 redujo las Enterobacterias fecales de 6.0±1.73 a 0.63±0.37 x106 UFC / g

de heces, mientras que T2 de 5.0±1.52 a 0.54±0.44 x10 6 UFC / g de heces, existiendo diferencias

altamente significativas en comparación T0 (p<0.01).T1 obtuvo la mayor reducción de Eimeria

caviae en heces, disminuyendo de 90035.89±36627.28 a 1462.4±872.44 ooquistes/ g de heces

(98.38%), superando a T2 que redujo de 85896.57±55531.54 a 5755.49±3727.93 ooquistes/g

heces (93.30%; p<0.05). Ambos redujeron significativamente la excreción de Eimeria caviae en

comparación con T0 (p<0.01). El costo por dosis fue menor en T2 (S. /0.04) comparado a T1

(S/.0.08). El costo de reducir 10000 ooquistes de Eimeria caviae, fue menor en T2 que en T1

(S/.0.005 y S/.0.009). El extracto de clavo de olor vía oral se presenta como en una alternativa

eficaz y económica en el control de enfermedades entéricas y Eimeria caviae en cuyes.

Palabras claves: Actividad antimicrobiana, antiparasitaria, Syzygium aromaticum, cuyes

ABSTRACT

In the present study was assessed antimicrobial and antiparasitic activity of the Syzygium

aromaticum "clove" extract in weaned guinea pigs. 30 animals were used in a randomized design

with 3 treatments (T0: Application of 0.03 ml of saline, T1: oral dosage of 25 mg Sulfadimidine +

trimethoprim / kg BW, T2: Dosing with 0.5 ml of Syzygium aromaticum extract. For counting of

oocysts of Eimeria caviae and Enterobacteriaceae were collected feces and rectal swabs before

and 7 days after application. Statistical analysis included analysis of variance and Duncan test (α =

0.05). T1 reduced fecal Enterobacteriaceae of 6.0 ± 1.73 to 0.63 ± 0.37 x 106 CFU / g of feces,

whereas T2 of 5.0 ± 1.52 to 0.54 ± 0.44 x 10 6 CFU / g of feces, there were highly significant

differences compared to T0 (p <0.01) . T1 had the highest reduction of Eimeria caviae in feces,

decreasing from 90035.89 ±36627.28 to 1462.4 ± 872.44 oocysts / g of feces (98.38%), better

than T2 that reduced from 85896.57± 55531.54 to 5755.49 ± 3727.93 oocysts / g feces (93.30 %,

P<0.05). Both significantly reduced the excretion of Eimeria caviae compared to T0 (p <0.01).

The cost per dose was lower in T2 (S. / 0.04) compared to T1 (S/.0.08). The cost of reduce 10,000

Eimeria caviae oocysts was lower in T2 than in T1 (S/.0.005 and S/.0.009). The clove extract

orally presented as a cost-effective alternative to control enteric diseases and Eimeria caviae in

guinea pigs. Keywords: Antimicrobial, antiparasitic, Syzygium aromaticum, guinea pigs

INTRODUCCION

Los aceites esenciales y extractos vegetales cubren un amplio espectro de efectos farmacológicos

mostrando diversas propiedades como antiinflamatorios, antioxidantes, anticancerígenos y

biocidas en contra de una amplia gama de microorganismos como bacterias, hongos, virus,

protozoarios, insectos y plantas (Kalemba and Kunicka 2003). El aceite esencial de clavo de olor

contiene de 85 a 95% de eugenol y acetileugenol; adicionalmente, α y β cariofilenos y pequeñas

cantidades de ésteres, cetonas y alcoholes (Pilco y otros, 2009). La presencia de compuestos

fenólicos como el timol, el carvacrol y el eugenol sugieren su actividad bactericida, la cual se ve

favorecida por la naturaleza ácida de su grupo hidroxilo el cual forma un puente de hidrógeno con

un sitio activo enzimático (Kalemba and Kunicka 2003) .

MATERIALES Y METODOS

En el presente trabajo se utilizaron 30 animales destetados de pesos homogéneos (15-18 días) en

un diseño complemente al azar con 3 tratamientos y 10 repeticiones (T0: Aplicación de 0.03 ml

de Suero fisiológico, T1: Dosificación oral de 25 mg / kg peso vivo de Sulfadimidina +

Trimetroprima , T2 : Dosificación con 0.5 ml de extracto de Syzygium aromaticum . Para la

obtención del extracto de clavo de olor, se utilizó la destilacion por arrastre de vapor obteniendo

204.5 ml de hidrolato de clavo de olor de 250 gramos de botones florales secos de Syzygium

aromaticum . Se recogieron heces previas a la aplicación, y 7 días después para los recuentos

parasitológicos a través del método de flotación en solución salina saturada y posterior conteo en

cámara de Mac Master. Para el análisis microbiológico se tomaron muestras rectales mediante

hisopos estériles antes del tratamiento y a los 7 días del mismo y se remitieron en condiciones de

refrigeración al laboratorio para su cultivo. En el análisis estadístico se realizó el análisis de

varianza y la prueba de Duncan (α=0.05).

RESULTADOS Y DISCUSION

Actividad antimicrobiana in vivo: Los tratamientos con Sulfamidina + Trimetroprima y de

extracto de clavo de olor redujeron significativamente el número de UFC de entero bacterias por

gramo de heces en cuyes destetados 7 días post aplicación (Figura 1).

Figura 1 . Número de UFC de enterobacterias / g de heces de cuyes destetados pre y post aplicación del extracto de clavo de olor y de Sulfadimidina + Trimetroprima.

En el caso del primero se observo una reducción de 6.0 ±1.73 a 0.63 ± 0.37 x 10 6 UFC / g de

heces , y en el segundo de 5.0 ±1.52 a 0.54 ± 0. 44 x 10 6 UFC / g de heces (p<0.01). El testigo

mantuvo niveles similares pre y post aplicación con 5.50 ±1.60 y 3.87± 1.16 x 10 6 UFC / g de

heces, respectivamente. Estos resultados son respaldados por Lee y Son (2004) , quienes

reportaron que el extracto de clavo , redujo significativamente in vitro enterobacterias tales como

E.coli, Salmonella typhymurium y otras como Staphylococcus aureus. Resultados similares fueron

reportados por Kim (2011) , que al probar 13 extractos vegetales , encontró que el Syzygium

7 dias post-aplicaciónPreaplicación

Nu

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0,000,54

5,00

0,63

6,00

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5,50

Barras de error: +/- 1 DT

Extracto de clavo de olor

Sulfadimidina+Trimetroprima

Testigo

Tratamientos

7 dias post aplicación Preaplicación

Med

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el

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120.000,00

100.000,00

80.000,00

60.000,00

40.000,00

20.000,00

0,00

Barras de error: +/- 1 ET

Hidrolato de clavo de olor

Sulfamidina + Trimetroprima

Testigo

Tratamiento

aromaticum presentó el mayor efecto inhibidor ante Salmonella typhymurium , el patógeno más

común y de mayor impacto en la producción de cuyes .

Actividad antiparasitaria : El tratamiento con Sulfamidina + Trimetroprima obtuvo la mayor

reducción de ooquistes de Eimeria caviae por gramo de heces, disminuyendo de 90035.89 ±

36627.28 a 1462.41 ± 872.44 ooquistes/ g heces a los 7 días después de la aplicación siendo

significativamente mayor al tratamiento con clavo de olor que redujo de 85896.57 ± 55531.54 a

5755.49 ± 3727.93 ooquistes/ g heces (p<0.05) (Figura 1).

Figura 2. Número de ooquistes de Eimeria caviae / g de heces de cuyes destetados pre y post

aplicación del extracto de clavo de olor y de Sulfadimidina + Trimetroprima

Ambos tratamientos disminuyeron significativamente la excreción fecal de Eimeria caviae en

comparación con el tratamiento testigo, que mantuvo niveles similares pre y post aplicación

(66907.14 ± 24899.83 y 49669.31± 29407.37 ooquistes/ g heces). Estos resultados concuerdan con

los obtenidos por Remmal et al. (2011), quienes evaluaron la actividad antiparasitaria de 10

extractos vegetales ante Eimeria sp, reportando la mayor eficacia para el extracto de clavo de

olor. Este efecto se dio a través de la lisis de la membrana de la cubierta del oocisto.

Análisis económico: Al analizar la eficacia de ambos tratamientos se observó que el mayor

porcentaje de reducción lo obtuvo el tratamiento con Sulfadimidina + Trimetroprima llegando al

98.38 %, en comparación al tratamiento con extracto de clavo de olor que alcanzo el 93.30% de

reducción (Tabla 1). Referente a los costos por dosis, se determinó un costo de S/. 0.08 para el

tratamiento con Sulfadimidina+Trimetroprima y de S./ 0.04 para el extracto de clavo de olor.

Asimismo relacionando el numero de ooquistes que redujeron ambos tratamientos y el costo de

cada dosis se calculó el costo de reducir 10000 ooquistes de Eimeria caviae, siendo de S. /0.009

para el caso de la Sulfadimidina + Trimetropima y S. /0.005 para el extracto de clavo.

Tabla 1. Eficacia antiparasitaria y evaluación económica del tratamiento con

Sulfadimidina + Trimetropima y extracto de clavo.

  Sulf+ Trimetoprima Extracto de clavoPreaplicación (ooquistes /g heces) 90035.89 85896.57Post aplicación (ooquistes /g heces) 1462.41 5755.49Reduccion (ooquistes /g heces) 88573.48 80141.08% Reduccion 98.38 93.30Costo de una dosis S/. 0.08 0.04Costo de reducir 10000 ooquistes /g heces S./ 0.009 0.005

CONCLUSIONES

El tratamiento con extracto extracto de Syzygium aromaticum redujo significativamente la

excreción de ooquistes de Eimeria caviae (93.30 %), aunque ligeramente en menor grado que la

Sulfadimidina + Trimetroprima (98.38 %) 7 días post aplicación. El costo por dosis fue menor

en el tratamiento con extracto de clavo de olor (S. /0.04) comparado al de Sulfadimidina (S/.

0.08). De la misma manera el costo de reducir 10000 ooquistes de Eimeria caviae, fue menor en el

primero (S/.0.005 y S/. 0.009 respectivamente). El extracto de clavo de olor vía oral se presenta

como en una alternativa eficaz y económica en el control de enfermedades entéricas y Eimeria

caviae en cuyes.

REFERENCIA BIBLIOGRAFICAS

Remmal A.  Achahbar S, BouddineL, Chami N, Chami F .2011. In vitro destruction of Eimeria oocysts by essential oils. Veterinary Parasitology 182 (2) 121-126

Kim SY, Kang DH, Kim JK, Ha YG, Hwang JY, Kim T, Lee SH. 2011 Antimicrobial activity of plant extracts against Salmonella Typhimurium, Escherichia coli O157:H7, and Listeria monocytogenes on fresh lettuce. J Food Sci.  76 (1) 43-49

Lee, O.H.;Son, J.Y.2004. Antimicrobial Activity of Clove Extract by Extraction Solvents.Journal of The Korean Society of Food Science and Nutrition 33(3) 494-499

Kalemba, D. and A. Kunicka (2003). "Antibacterial and antifungal properties of essential oils." Curr Med Chem 10(10): 813-29.