UJI ANTIBAKTERI DAN DAYA INHIBISI EKSTRAK KULIT KACANG TANAH

TERHADAP AKTIVITAS ENZIM XANTIN OKSIDASE

Listiyana Candra Dewi, Subandi, dan Suharti

Jurusan Kimia FMIPA Universitas Negeri Malang E-mail: elcandra.dewi@gmail.com; sbd_um@yahoo.co.id; s.suharti@gmail.com

ABSTRAK: Penelitian dilaksanakan untuk mengetahui jenis senyawa metabolit sekunder, kemampuan antibakteri, dan daya inhibisi ekstrak kulit kacang tanah terhadap xantin oksidase. Tahapan

penelitian meliputi ekstraksi, uji fitokimia, uji antibakteri, dan uji daya inhibisi. Ekstrak kulit ari kacang

tanah mengandung tanin, polifenol, flavonoid, alkaloid, dan terpenoid. Kandungan ekstrak kulit luar

kacang tanah mirip dengan ekstrak kulit ari kecuali tanin. Pada konsentrasi 100 ppm, aktivitas

antibakteri ekstrak kulit kacang tanah hampir sebanding dengan Amoxicillin. Daya inhibisi ekstrak kulit

ari dan kulit luar kacang tanah 100 ppm setara dengan 12 ppm dan 14 ppm Allopurinol..

Kata kunci: Antibakteri, inhibisi xantin oksidase, ekstrak kulit kacang tanah

Obat penyakit asam urat pada umumnya adalah allopurinol. Penggunaan Allopurinol

dalam jangka panjang dapat memberikan efek samping dan reaksi alergi seperti kemerahan

pada kulit, demam, menggigil, peningkatan jumlah sel darah putih di atas nilai normal

(leukopenia atau leukositosis), peningkatan kadar eusinofil di dalam darah (eusinofilia), nyeri

sendi (artralgia) dan gatal-gatal (Johnstone, 2005:4). Adanya efek samping tersebut

menyebabkan para peneliti berusaha mencari obat penyakit asam urat yang lebih alami

dengan tujuan meminimalkan efek samping yang mungkin ditimbulkan pada penggunaan

jangka panjang. Adanya mitos bahwa air rebusan kulit kacang tanah dapat mengobati

penyakit asam urat perlu dibuktikan secara ilmiah.

Owen, et al (2003:713) menyatakan luteolin yang terdapat di dalam biji zaitun dapat

menghambat pembentukan senyawa asam urat karena kemampuannya dalam menginhibisi

aktivitas dari enzim xantin oksidase. Selain di dalam biji zaitun, Daigle, et al (1988:1179)

menyatakan bahwa luteolin banyak terdapat pada kulit luar kacang tanah yang telah matang.

Hal ini dapat dijadikan acuan bahwa kulit luar kacang tanah yang telah masak diduga dapat

ditingkatkan pemanfaatannya sebagai obat alternatif untuk penyakit asam urat karena

mengandung senyawa luteolin.

Selain penyakit asam urat, gangguan kesehatan lain yang kerap terjadi adalah infeksi

yang disebabkan oleh bakteri. Pengobatan yang umum dilakukan adalah mengonsumsi

antibiotik. Namun permasalahan terjadi karena beberapa mikroba saat ini telah bersifat

resisten sehingga dosis penggunaan antibiotik harus ditingkatkan. Peningkatan dosis

antibiotik akan memberikan efek samping kepada penderita infeksi seperti kerusakan hati dan

ginjal, tremor, dan penurunan jumlah sel darah putih. Hal tersebut memicu para peneliti untuk

mencari alternatif lain selain menggunakan antibiotik untuk mengobati infeksi.

Nitiema et al (2012:185) menyatakan bahwa senyawa fenolik yang banyak terdapat di

bahan alam diketahui memiliki kemampuan untuk menghambat pertumbuhan bakteri. Win et

al (2011:1638) menyatakan bahwa kulit luar dan kulit ari kacang tanah mengandung 27,59

mg Gallic Acid Equivalent (GAE) /g dan 91,74 mg GAE/g senyawa fenolik.Hal ini dapat

dijadikan acuan bahwa kulit ari dan kulit luar kacang tanah diduga dapat ditingkatkan

pemanfaatannya sebagai antibiotik alami untuk mengobati infeksi oleh bakteri karena

mengandung senyawa fenolik.

Berdasarkan pada permasalahan yang timbul di dalam masyarakat akibat penggunaan

Allopurinol dan antibiotik, maka diperlukan suatu penelitian untuk menemukan obat alternatif

pengganti. Tujuan dari pelaksanaan penelitian ini adalah mengetahui jenis senyawa metabolit

sekunder, kemampuan antibakteri relatif terhadap antibiotik, dan daya inhibisi ekstrak etanol

kulit kacang tanah terhadap aktivitas enzim xantin oksidase relatif terhadap allopurinol

METODE

Tahapan yang dilakukan adalah penentuan kadar air, ekstraksi, dan uji fitokimia kulit

kacang tanah; uji antibakteri ekstrak kulit kacang tanah terhadap bakteri E.coli dan S.aureus,

isolasi dan uji aktivitas enzim xantin oksidase dari 250 mL susu sapi segar, dan uji daya

inhibisi ekstrak kulit kacang tanah terhadap aktivitas enzim xantin oksidase. Sampel yang

digunakan adalah kulit luar dan kulit ari kacang tanah.

Penentuan Kadar Air, Ekstraksi dan Uji Fitokimia Kulit Kacang Tanah

Penetuan kadar air sampel dilakukan berdasarkan pada metode dari AOAC (1984)

yaitu dengan memanaskan sampel pada pada suhu 105oC. Setiap 10 menit cawan beserta

isinya didinginkan di dalam desikator dan ditimbang massanya. Persen kadar air dihitung

dengan persamaan:

Ekstrak kulit kacang tanah diperoleh dengan cara merendam (maserasi) serbuk kering

kulit luar dan kulit ari kacang tanah dengan etanol 70%. selama 6 jam sambil sesekali diaduk

kemudian dibiarkan selama 24 jam. Maserat yang diperoleh kemudian dikentalkan dengan

menggunakan rotary vacuum evaporator. Ekstrak kental kemudian ditimbang dan dihitung rendemennya dengan rumus:

( )

Prosedur uji fitokimia merujuk pada Mustarichie (2011: 19-20). Uji fitokimia

dilakukan dengan cara menggunakan pereaksi warna kecuali uji saponin. Uji tanin dilakukan

dengan menetskan larutan gelatin pada sampel sedangkan uji polifenol dilakukan dengan cara

menetesi sampel dengan FeCl3. Uji Flavonoid dilakukan menggunakan metode Wilstater, uji

saponin dilakukan dengan metode Forth, uji terpenoid dilakukan dengan uji Salkowski, dan

uji alkaloid dilakukan dengan metode Wagner, Mayer, dan Dragendorff..

Uji Antibakteri Ekstrak Kulit Kacang Tanah Terhadap Bakteri E.Coli dan S.Aureus

Uji antibakteri dilakukan dengan menggunakan metode difusi agar. Media padat yang

masing-masing telah mengandung bakteri E.Coli dan S.Aureus ditempeli dengan kertas

cakram yang telah jenuh dengan larutan sampel 100ppm.. Aktivitas antibakteri ditunjukkan

oleh diameter zona bening yang terbentuk di sekitar kertas cakram. Aktivitas antibakteri

sampel dibandingkan dengan Tetracycline, Ampicillin, dan Amoxicillin

Isolasi Dan Uji Aktivitas Ektrak Kasar Enzim Xantin Oksidase dari Susu Sapi Segar

Isolasi xantin oksidase yang diperoleh dari susu sapi segar secara keseluruhan

dilakukan pada suhu 4-10o C dengan teknik presipitasi menggunakan (NH4)2SO4 pada

kejenuhan 40% . Uji aktivitas enzim dilakukan dengan mengukur serapan pembentukan asam

urat menggunakan spektrofotometer UV-Vis pada 290 nm tiap 10 menit hingga konstan atau nilai absorbansi mencapai 0,8. Nilai absorbansi yang diperoleh dikonversikan menjadi

konsetrasi asam urat menggunakan hukum Lambert- Beer dengan nilai asam urat pada 290 nm pH 7,5 sebesar 12,2 mM

-1 cm

-1 (Bergmeyer: 1974)

. Konsentrasi

asam urat yang diperoleh

dibuat grafik konsentrasi vs waktu. Aktivitas enzim ditunjukkan oleh nilai a pada persamaan

garis pada grafik.

Uji Daya Inhibisi Ekstrak Kulit Kacang Tanah Terhadap Aktivitas Xantin Oksidase

Uji daya inhibisi enzim dilakukan dengan mengukur serapan pembentukan asam urat

menggunakan spektrofotometer UV-Vis pada 290 nm. Aktivitas enzim pada penambahan

sampel yang diperoleh dibandingkan dengan aktivitas enzim tanpa penambahan sampel

sebagai blanko. Daya inhibisi dihitung dengan rumus:

% Inhibisi =

x 100%

HASIL

Penentuan Kadar Air, Ekstraksi dan Uji Fitokimia Ekstrak Kulit Kacang Tanah

Data hasil penentuan kadar air dan rendemen hasil ekstraksi ekstrak kulit ari dan

ekstrak kulit luar kacang tanah ditunjukkan oleh Tabel 1 sedangkan hasil uji fitokimia

ditunjukkan oleh Tabel 2.

Tabel 1. Perolehan Rendemen Ekstrak Kulit Kacang Tanah

Sampel Massa Kulit

(g)

Massa Ekstrak

(g)

Kadar Air

(%)

Rendemen

(%)

Kulit Ari 18,67 2,47 11,67 14,978

Kulit Luar 100 0,99 9 1,088

Tabel 2. Hasil Uji Fitokimia Ekstrak Etanol Kulit Kacang Tanah

Sampel Golongan senyawa

Saponin Tanin Polifenol Flavonoid Alkaloid Terpenoid

Kontrol (+) + + + + + +

Kontrol (-) - - - - - -

EKA - + + + + +

EKL - - + + + +

Uji Antibakteri Ekstrak Kulit Kacang Tanah Terhadap Bakteri E.coli dan S.aureus

Data hasil pengukuran diameter zona bening pada uji antibakteri ditunjukkan oleh

Tabel 3 dan nilai kesetaraan aktivitas antibakteri ekstrak kulit kacang tanah terhadap

Tetracycline, Ampicillin, dan Amoxicillin ditunjukkan oleh Tabel 4

Tabel 3. Aktivitas Antibakteri Ekstrak Kulit Kacang Tanah dan Beberapa Antibiotik

Sampel Diameter zona bening (mm)

E. coli S. aureus

Ekstrak Kulit Ari 9,0 8,3

Ekstrak Kulit luar 7,3 9,3

Tetrasiklin 34,0 29,7

Ampicillin 14,0 11,7

Amoxicillin 9,7 9,0

Tabel 4. Aktivitas Antibakteri Ekstrak Kulit Kacang Tanah Relatif Terhadap Antibiotik Pembanding

Sampel

Kesetaraan kemampuan antibakteri (ppm)

E.coli S. aureus

Tetra Amp Amox Tetra Amp Amox

EKA 26,47 64,29 92,78 27,95 70,94 92,22

EKL 21,47 52,14 75,26 31,31 79,49 103,33

Keterangan: EKA : Ekstrak Kulit Ari Tetra : Tetracycline

EKL : Ekstrak Kulit Luar Amp : Ampicillin

Amox : Amoxicillin

Isolasi dan Uji Aktivitas Ektrak Kasar Enzim Xantin Oksidase dari Susu Sapi Segar

Data absorbansi pembentukan asam urat pada 290 nm ( : 12,2 mM-1 cm-1 ; pH 7,5) dan nilai konversi ke dalam satuan konsentrasi asam urat ditunjukkan oleh Tabel 5. Grafik

konsentrasi asam urat vs waktu ditunjukkan oleh Gambar 1 dan dengan grafik tesebut dapat

diketahui aktivitas enzim xantin oksidase seperti yang ditunjukkan pada Tabel 6.

Tabel 5 Data Konversi Absorbansi Asam Urat

Waktu Absorbansi Konsentrasi Asam Urat (mol/mL)

Supernatan Residu Supernatan Residu

0 0,2475 0,2618 0.0203 0.0215

10 0,2695 0,3861 0.0221 0.0316

20 0,3091 0,5214 0.0253 0.0427

30 0,3278 0,6336 0.0269 0.0519

40 0,3641 0,737 0.0298 0.0604

Gambar 1. Grafik Uji Aktivitas Enzim

y = 0.0003x + 0.022 R = 0.989

y = 0.0011x + 0.024 R = 0.997

0

0.01

0.02

0.03

0.04

0.05

0.06

0.07

0 10 20 30 40 50

Ko

nse

ntr

asi

asa

m u

rat

(m

ol/

mL

)

Waktu (menit)

Supernatan

Residu

Linear (Supernatan)

Linear (Residu)

Tabel 6 Aktivitas Enzim Xantin Oksidase

Larutan Enzim Unit aktivitas(unit/mL) Volume Larutan

(mL) Aktivitas Total (unit)

Supernatan 0,0003 125,9 0,038

Residu 0,0011 250 0,275

Uji Daya Inhibisi Ekstrak Kulit Kacang Tanah Terhadap Aktivitas Xantin Oksidase

Data penurunan aktivitas enzim saat penambahan ekstrak kulit kacang tanah

ditunjukkan oleh dan besar daya inhibisi ditunjukkan oleh Tabel 7. Nilai kesetaraan Daya

Inhibisi Ekstrak Kulit Kacang Tanah 100 ppm Relatif Terhadap Allopurinol 10 ppm

ditunjukkan oleh Tabel 8.

Tabel 7. Penurunan Aktivitas Enzim Setelah Penambahan Inhibitor dan Daya Inhibisi Terhadap Xantin

Oksidase

Inhibitor

Aktivitas enzim dengan penambahan

inhibitor (unit/ mL) Daya Inhibisi (%)

0 mL 0,3 mL

Allopurinol 10 ppm 0,0011 0,0006 45,45

Ekstrak Kulit Ari 100 ppm 0,0011 0,0005 54.54

Ekstrak Kulit Luar 100 ppm 0,0011 0,0004 63,64

Tabel 8 Daya Inhibisi Ekstrak Kulit Kacang Tanah 100 ppm Relatif Terhadap Allopurinol

Sampel Kesetaraan daya inhibisi dengan

Allopurinol

Ekstrak Kulit Ari 12,5 ppm

Ekstrak Kulit luar 15 ppm

PEMBAHASAN

Penentuan Kadar Air dan Ekstraksi Kulit Kacang Tanah

Berdasarkan data pada Tabel 1, kadar air kulit ari dan kulit luar kacang tanah masing-

masing sebesar 11,67% dan 9%. Hasil tersebut menunjukkan bahwa kulit ari kurang baik

disimpan dalam jangka waktu yang cukup lama jika dibandingkan dengan kulit luar kacang

tanah, karena berdasarkan (Winarno 1997) jika kadar air dalam suatu bahan kurang dari 10%

maka kestabilan optimum bahan dapat dijamin karena pertumbuhan mikroba dapat dikurangi.

Proses ekstraksi dilakukan dengan metode maserasi menggunakan pelarut etanol 70%.

Proses maserasi ini dilakukan dengan merendam sampel dalam pelarut disertai dengan

pengocokan untuk melemahkan membran dan dinding sel sehingga zat-zat yang terkandung di

dalam sampel akan terlarut (Astuti, 2006:215).

Pemilihan etanol 70% sebagai pelarut bertujuan untuk mengekstraksi senyawa-

senyawa yang bersifat polar dan non polar. Keberadaan air dalam pelarut akan membantu

mengekstrak senyawa-senyawa yang besifat polar, sedangkan etanol yang memiliki rantai

hidrokarbon pendek akan membantu dalam mengekstrak senyawa-senyawa yang cenderung

bersifat non polar. Etanol 70% mampu mengestrak senyawa polifenol dan senyawa

flavonoid lebih banyak daripada etanol dengan kemurnian yang tinggi (Bimakr, 2010:6).

Selain itu, sebagian besar senyawa-senyawa yang terekstrak dalam etanol juga merupakan

senyawa yang mampu menghambat pertumbuhan mikroorganisme.

Uji Fitokimia Ekstrak kulit Kacang Tanah

Identifikasi senyawa metabolit sekunder menggunakan teh hijau sebagai kontrol

positif sedangkan untuk uji terpenoid menggunakan ekstrak etanol buah mahkota dewa.

Berdasarkan pada data dalam Tabel 2, perbedaan komposisi senyawa metabolit sekunder

antara ekstrak kulit ari dan ekstrak kulit luar kacang tanah terletak pada kandungan tanin.

Ekstrak kulit ari mengandung tanin sedangkan ekstrak kulit luar kacang tanah tidak

mengandung tanin. Kedua sampel mengandung polifenol, flavonoid, alkaloid, dan terpenoid

namun tidak mengandung saponin.

Uji Antibakteri Ekstrak Kulit Kacang Tanah Terhadap Bakteri E.coli dan S.aureus Berdasarkan data hasil pengukuran diameter zona bening pada Tabel 3, tampak

bahwa ketiga antibiotik dan ekstrak kulit ari mampu menghambat bakteri E.coli lebih baik

dibandingkan dengan S. aureus.Hal ini disebabkan oleh perbedaan struktur dinding sel antara

E.coli dan S.aureus. Bakteri S.aureus sebagai bakteri Gram positif memiliki struktur dinding

sel yang lebih tebal dan kaku dibandingkan dengan E.coli sebagai bakteri Gram negatif .

Dinding sel S. aureus 90% tersusun atas peptidoglikan sedangkan dinding sel E coli hanya

tersusun atas 10 % peptidoglikan. Selebihnya berupa polisakarida, protein, dan lipid.

Perbedaan ketebalan dinding sel inilah yang menyebabkan senyawa-senyawa antibakteri lebih

sukar masuk ke dalam sel S.aureus dan menghambat petumbuhannya.

Dari hasil uji fitokimia diketahui bahwa kedua sampel mengandung flavonoid dan

ekstrak kulit ari mengandung tanin. Kedua golongan senyawa ini merupakan senyawa fenolik

yang diketahui mampu menghambat pertumbuhan bakteri (Onwukaeme. 2007:729). Cushnie

(2005:351) menyatakan bahwa flavonoid menghambat pertumbuhan bakteri melalui tiga

mekanisme yaitu menghambat sintesis asam nukleat, menghambat aktivitas membran

sitoplasma, dan menghambat pembentukan energi dalam proses metabolisme.Berbeda halnya

dengan flavonoid, kemampuan tanin dalam menghambat pertumbuhan bakteri disebabkan

oleh karakter tanin yang mampu berikatan dengan ion logam dan protein (Akiyama et al,

2001:489) .

Ekstrak kulit luar kacang tanah yang tidak mengandung tanin berdampak pada

kemampuannya dalam menghambat bakteri E.coli. Ekstrak kulit ari yang mengandung tanin

memiliki aktivitas antibakteri terhadap E.coli lebih tinggi daripada ekstrak kulit luar. Hal ini

disebabkan kemampuan tanin dalam berikatan dengan protein akan berdampak pada

metabolisme bakteri. Selain itu, tanin yang mampu berikatan dengan ion logam akan

membentuk khelat dengan ion Fe dan Ca. yang berperan penting dalam proses metabolisme

bakteri. Khelat antara tanin dengan Fe akan bersifat racun terhadap membran sehingga dapat

menyebabkan kematian pada bakteri (Akiyama et al, 2001:489).

Secara keseluruhan, diameter zona bening yang dibentuk oleh ekstrak kulit ari dan

kulit luar kacang tanah lebih kecil daripada Tetracycline, Ampicillin, dan Amoxicillin .

Pengecualian terjadi pada diameter zona bening ekstrak kulit luar kacang tanah terhadap

S.aureus yang sedikit lebih luas daripada Amoxicillin. Hal ini dapat disebabkan kemiripan

mekanisme penghambatan pertumbuhan bakteri antara Amoxicillin dengan senyawa flavonoid

pada ekstrak kulit luar kacang tanah. Kedua senyawa tersebut menghambat aktivitas membran

sitoplasma sehingga proses pembentukan dinding sel bakteri (peptidoglikan) menjadi

terhambat. Hal ini akan menurunkan kemampuan bakteri untuk bertahan hidup dan

menyebabkan bakteri cenderung mengalami lisis (Anonim, 2012:6)

Data pada Tabel 4 menunjukkan bahwa sebagian besar kemampuan ekstrak dalam

menghambat bakteri uji berada di bawah antibiotik pembanding atau setara dengan

kemampuan antibiotik pembanding yang memiliki konsentrasi < 100 ppm. Kemampuan

aktivitas antibakteri dari kedua ekstrak yang lebih rendah dibandingkan dengan antibiotik

pembanding disebabkan oleh banyaknya senyawa yang terdapat di dalam ekstrak. Senyawa-

senyawa tersebut dapat berupa senyawa yang memiliki kemampuan untuk menghambat

pertumbuhan bakteri seperti senyawa gologan tanin dan flavonoid dan senyawa yang

membantu pertumbuhan bakteri seperti protein dan karbohidrat. Hal ini akan menyebabkan

proses penghambatan pertumbuhan bakteri menjadi kurang maksimal.

Isolasi dan Uji Aktivitas Ektrak Kasar Enzim Xantin Oksidase dari Susu Sapi Segar

Penggunaan susu sapi segar sebagai sumber utama enzim dikarenakan

susu sapi lebih mudah didapat dibandingkan dengan susu kambing dan mamalia lainnya.

Selain itu, untuk analisis in vitro mengenai pembentukan asam urat, karakteristik enzim

xantin oksidase yang diperoleh dari susu sapi lebih baik jika dibandingkan dengan enzim

xantin oksidase yang diperoleh dari susu kambing. Kompleks ES xantin oksidase dari susu

kambing kurang stabil jika dibandingkan dengan kompleks ES xantin oksidase dari susu sapi.

Hal ini menyebabkan enzim xantin oksidase dari susu kambing tidak dapat membentuk

produk (Evans, et al. 2005:5)

Hasil pengukuran absorbansi asam urat tiap 10 menit pada 290 nm dan konversi menjadi konsentrasi asam urat ditunjukkan oleh Tabel 5 dan grafik konsentrasi asam urat vs

waktu ditunjukkan oleh Gambar 1. Berdasarkan pada persamaan garis dalam grafik, diperoleh

nilai aktivitas enzim pada supernatan sebesar 0,0003 U/mL dan residu sebesar 0,0011 U/mL.

Hal ini menunjukkan kenaikan absorbansi pembentukan asam urat tiap menit setara dengan

sekitar 0,0003 mol asam urat menggunakan xantin oksidase dari supernatan dan 0,0011

mol asam urat menggunakan xantin oksidase dari residu.

Diketahui bahwa volume supernatan yang diperoleh pada proses isolasi sebesar 125,9

mL dan volume pelarutan residu dalam buffer sebesar 250 mL. Berdasarkan data yang

dutunjukkan oleh Tabel 6, aktivitas total enzim tertinggi terletak pada residu. Hal ini

menunjukkkan bahwa enzim xantin oksidase yang diperoleh telah terendapkan pada proses

penambahan ammonium sulfat kejenuhan 40%. Data pada Tabel 6 menunjukkan bahwa di

dalam supernatan terdapat 0,038 unit dan di dalam residu terdapat 0,275 unit enzim xantin

oksidase dengan pengertian bahwa 1 unit enzim xantin oksidase akan mengubah 1mol xantin

menjadi asam urat/menit pada pH 7,5 suhu 25oC.

Uji Daya Inhibisi Ekstrak Kulit Kacang Tanah Terhadap Aktivitas Xantin Oksidase

Kemampuan ekstrak dalam menginhibisi dapat dilihat dari perubahan aktivitas enzim

xantin oksidase dengan dan tanpa adanya inhibitor. Berdasarkan data pada Tabel 7, tampak

terjadi proses penurunan pembentukan asam urat yang dapat dilihat dari penurunan aktivitas

enzim saat penambahan inhibitor. Besar daya inhibisi ekstrak kulit ari dan ekstrak kulit

kacang tanah 100 ppm masing masing sebesar 54,54% dan 63,64%

Senyawa di dalam ekstrak kulit kacang tanah yang mampu menghambat aktivitas

enzim xantin oksidase diduga berasal dari golongan flavonoid. Beberapa penelitian

menyatakan bahwa golongan senyawa ini mampu menghambat aktivitas xantin oksidase

dengan baik. Lin, et al (2002:171) menyatakan bahwa struktur dari flavonoid menyebabkan

golongan senyawa ini berpotensi sebagai inhibitor kompetitif bagi xantin oksidase. Namun

tidak semua senyawa golongan flavonoid dapat berperan sebagai inhibitor enzim xantin

oksidase. Senyawa- senyawa golongan flavonoid yang memiliki ikatan rangkap pada atom C2

dan C3 cenderung memiliki kemampuan berperan sebagai inhibitor. Selain itu, keberadaan

gugus hidroksil pada C5 dan C7 , serta gugus karbonil pada C4 dapat membentuk ikatan

hydrogen dan berperan dalam interaksi inhibitor dengan sisi aktif enzim xantin oksidase.

Daya inhibisi dari ekstrak kulit kacang tanah selanjutnya dibandingkan dengan daya

inhibisi Allopurinol untuk mengetahui kesetaraan daya inhibisi ekstrak terhadap Allopurinol.

Data pada Tabel 8 menunjukkan bahwa daya inhibisi ekstrak kulit ari 100 ppm setara dengan

Allopurinol 12 ppm dan ekstrak kulit luar kacang tanah 100 ppm setara dengan Allopurinol

14 ppm. Selain bertujuan untuk mengetahui kesetaraan daya inhibisi ekstrak terhadap

Allopurinol, juga dilakukan perhitungan kesetaraan daya inhibisi ekstrak terhadap 1 tablet

Allopurinol. Hal ini bertujuan untuk mengetahui perkiraan massa ekstrak atau kulit kacang

tanah yang diperlukan agar daya inhibisinya sebanding dengan 1 tablet Allopurinol.

Pada penambahan Allopurinol 10 ppm, daya inhibisi mencapai 45,45%. Massa tiap

tablet Allopurinol adalah 0,3 gram dan di dalamnya mengandung 100 mg senyawa

allopurinol. Agar kemampuan inhibisi kulit ari sebanding dengan 1 tablet Allopurinol, dari

hasil perhitungan diperlukan sekitar 2,5 g ekstrak atau 18.90 gram kulit ari. Untuk kulit luar

kacang tanah diperlukan sekitar 2,143 g ekstrak atau 216,46 g kulit luar agar daya inhibisinya

sebanding dengan 1 tablet Allopurinol.

Dari hasil penelitian yang dilakukan, maka dapat dikatakan ekstrak kulit ari dan kulit

luar kacang tanah cukup efektif dalam berperan sebagai penghambat pembentukan asam urat.

Namun diperlukan penelitian dengan menggunakan enzim xantin oksidase murni untuk

mengetahui efektivitas dari kulit kacang tanah dengan lebih tepat. Ekstrak kasar enzim

memungkinkan masih terdapat enzim-enzim lain selain enzim xantin oksidase yang juga ikut

terendapkan pada penambahan ammonium sulfat dengan kejenuhan 40%. Hal ini akan

mengganngu interaksi antara inhibitor dengan enzim xantin oksidase.

PENUTUP

Kesimpulan

Berdasarkan hasil penelitan maka dapat diambil kesimpulan sebagai berikut: (1)

Berdasarkan uji fitokimia, ekstrak kulit ari kacang tanah mengandung senyawa metabolit

sekunder golongan tanin, polifenol, flavonoid, alkaloid, dan terpenoid, sedangkan ekstrak

kulit luar kacang tanah mengandung senyawa metabolit sekunder golongan polifenol,

flavonoid, alkaloid, dan terpenoid. (2) Pada konsentrasi yang sama, ekstrak kulit kacang tanah

memiliki aktivitas antibakteri terhadap E.coli lebih rendah dibandingkan aktivitas antibakteri

Tetracycline , Ampicillin dan Amoxicillin . Aktivitas antibakteri ekstrak kulit kacang tanah

terhadap S.aureus berada di bawah kemampuan aktivitas antibakteri Tetracycline , Ampicillin

dan Amoxicillin sedangkan ekstrak kulit luar kacang tanah memiliki aktivitas antibakteri

terhadap S. aureus yang hampir setara dengan Amoxicillin. (3) Daya inhibisi ekstrak kulit ari

dan kulit luar kacang tanah 100 ppm masing-masing sebesar 54,54 % dan 63,64% setara

dengan 12 ppm Allopurinol untuk kulit ari dan 14 ppm Allopurinol untuk kulit luar kacang

tanah

Saran

Berdasarkan kesimpulan dari hasil penelitian, maka saran yang diajukan dirumuskan

sebagai berikut: Diperlukan penelitian lebih lanjut mengenai (1) kemampuan ekstrak kulit

kacang tanah dalam menghambat enzim xantin oksidase secara in vivo, (2) identifikasi jenis

senyawa di dalam kulit ari dan kulit luar kacang tanah yang berperan sebagai senyawa

antibakteri, (3) identifikasi jenis senyawa di dalam kulit ari dan kulit luar kacang tanah yang

berperan sebagai inhibitor enzim xantin oksidase.

DAFTAR RUJUKAN

Akiyama, H., Fuji, K., Yamasaki, O., Oono, T & Iwatsuki, K. 2001. Antibacterial Action of

Several Tannins Against Staphylococcus auerus. Journal of Antimicrobial

Chemotherapy, 48: 487-491

Anonim. 2012. Amoxicillin. (Online),

(http://www.hipra.com/wps/wcm/connect/abea74004492bea4a0dab1b1192e3c88/a

moxicillin.pdf),(diakses 25 Desember 2012

Astuti, A., Pranowo, D., dan Puspitasari, S. D. 2006. Uji Sitotoksisitas Ekstrak Daging Dan

Biji Buah Phaleria macrocarpa (Scheff.) Boerl Terhadap Sel Mononuklir Normal

Perifer Manusia. Indo. J. Chem. 6 (2), 212 218. Bimakr, M. 2010. Comparison of Different Extraction Methods for The Extraction of Major

Bioactive Flavonoid Compounds from Spearmint (Mentha Spicata L.) Leaves.

Food Bioprod Process. 2010: 1-9.

Cao, H., Pauff, J. M. & Hille, R. 2010. Substrate Orientation and Catalytic Specificity In The

Action of Xanthine Oxidase. Journal of Biological Chemistry, 285 (36): 28044-

28053.

Cushnie, T. P. T, dan Lamb, A. J. 2005. Antimicrobial activity of flavonoids. Journal of

Antimicrobial Agents 26: 343356, Daigle, D. J., Conkerton, E. J., Sanders, T. H. & Mixon, A.C. 1988. Peanut Hull Flavonoids:

Their Relationship with Peanut Maturity. Journal of Agricultural and Food

Chemistry, (Online), 36 (6): 1179-1181,

(http://pubs.acs.org/doi/abs/10.1021/jf00084a013), diakses 31 Desember 2011.

Evans, C., Mohammed, A., Vunchi & Patience, O. 2005. Comparism of Xanthine Oxidase

Activities in Cow and Goat Milk. Biokemistri, 17 (1): 1-6.

Harborne, J. B. 1987. Metode Fitokimia: Penuntun Cara Modern Menganalisis Tumbuhan.

Bandung: ITB

Ho, C. Y. & Clifford, A. J. 1976. Digestion and Absorption of Bovine Milk Xanthine Oxidase

and Its Role as an Aldehyde Oxidase. JN the journal of Nutrition 106: 1600-1609.

Johnstone, A. 2005. Gout The Disease and NonDrug Treatment. Hospital Pharmacist, 12:391394.

Lin, C. M., Chen, C. S., Chen, C. T., Liang, Y. C. & Lin, J. K. 2002. Molecular Modeling of

Flavonoid that Inhibits Xanthine Oxidase. Biechemical and Biophysical Research

Communications. 294 : 167-172

Mustarichie, R., Musrifoh, I. & Levita, J. 2011. Metode Penelitian Tanaman Obat. Bandung:

Widya Padjadjaran.

Nitiema, L. W., Savadogo, A., Simpore. J., Dianou, D., dan Traore, A. S. 2012. In vitro

Antimicrobial Activity of Some Phenolic Compounds (Coumarin and Quercetin)

Against Gastroenteritis Bacterial Strains, International Journal of Microbiological

Research 3 (3): 183-187.

Onwukaeme, D. N., Kuegbvweha, T. B. and Asonye. C. C. 2007. Evaluation of

Phytochemical Constituents,Antibacterial Activities and Effect of Exudate of

Pycanthus Angolensis Weld Warb (Myristicaceae) on Corneal Ulcers in Rabbits.

Tropical Journal of Pharmaceutical Research, 6 (2): 725-730.

Owen, R. W., Haubner, R., Mier. W., Giacosa. A., Hull, W. E.,Speigelhalder, B. & Bartsch,

H. 2003. Isolation, Structure Elucidation and Antioxidant Potential of The Major

Phenolic and Flavonoid Compounds in Brined Olive Drupes. Food and Chemical

Toxicology, 41 (2003): 703-717.

Win, M. M., Hamid, A. A., Baharin, B. S., Anwar, F., Sabu, M. C., dan Dek, M. S. P. 2011.

Phenolic Compounds And Antioxidant Activity Of Peanuts Skin, Hull, Raw Kernel And Roasted Kernel Flour, Pak. J. Bot., 43(3): 1635-1642

Winarno F. G. 1997. Kimia Pangan dan Gizi. Jakarta: Gramedia Pustaka Utama.