Bioquimica II 2011

F A C U L T A D D E C I E N C I A S D E L A S A L U DC A R R E R A D E M E D I C I N A

RED NACIONAL UNIVERSITARIA

Facultad de Ciencias de la SaludCarrera de Medicina

CUARTO SEMESTRE

SYLLABUS DE LA ASIGNATURABIOQUIMICA II

Elaborado por los Doctores:

Dra. Rosario Clouzet

Gestión Académica 2011

U N I V E R S I D A D D E A Q U I N O B O L I V I A

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UDABOLUNIVERSIDAD DE AQUINO BOLIVIA

Acreditada como PLENA mediante R. M. 288/01

VISION DE LA UNIVERSIDAD

Ser la Universidad líder en calidad educativa.

MISION DE LA UNIVERSIDAD

Desarrollar la Educación Superior Universitaria con calidad y Competitividad al servicio de la sociedad.

Estimada(a) estudiante:

El syllabus que ponemos en tus manos es el fruto del trabajo intelectual de tus docentes, quienes han puesto sus mejores empeños en la planificación de los procesos de enseñanza para brindarte una educación de la más alta calidad. Este documento te servirá de guía para que organices mejor tus procesos de aprendizaje y los hagas mucho más productivos. Esperamos que sepas apreciarlo y cuidarlo.

Aprobado por: Fecha: marzo 2011

SELLO Y FIRMAJEFATURA DE CARRERA


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SYLLABUS

I. OBJETIVOS GENERALES DE LA ASIGNATURA.

Describir las características y las estructuras de compuestos biológicamente activos, como carbohidratos su ingestión y conversión en fuente de energía inmediata.

Identificar compuestos como los relacionados a los Lípidos, Colesterol y el esqueleto carbonatado que da origen a muchos compuestos, como la vitamina D3, los ácidos Biliares, hormonas corticales y sexuales.

Vincular la teoría y la práctica, con una actitud activa ante el aprendizaje, mediante el desarrollo del método de estudio basado en la observación de la práctica de laboratorio.

II. PROGRAMA ANALITICO DE LA ASIGNATURA.

UNIDAD ITEMA 1.-

1.1. Introducción de la materia1.2. Importancia de la Bioquímica en Medicina1.3. Interés central de la ciencia de la salud1.4. Aplicación Medica de la Bioquímica

TEMA 2.-Vitaminas Hidrosolubles2.1. Estructura química y función de las vitaminas hidrosolubles2.1. Tipos de vitaminas hidrosolubles2.3. Digestión y absorción de las vitaminas2.4. Función de las vitaminas en la nutrición2.5. Alteración de las vitaminas

TEMA 3.-Vitaminas Liposolubles3.1. Estructura química y función de las vitaminas hidrosolubles3.2. Tipos de vitaminas hidrosolubles3.3. Digestión y absorción de las vitaminas3.4. Función de las vitaminas en la nutrición


Asignatura: BIOQUIMICA IICódigo: MED – 401 Requisito: MED – 301 Carga Horaria: 80 horas / SemestreHoras Teóricas:Horas Prácticas:Créditos: 4

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3.5. Alteración de las vitaminas

TEMA 4.-Generalidades del Metabolismo4.1. Funciones del metabolismo4.2. Tipos de metabolismo4.3. Metabolismo de las micromoleculas4.4. Metabolismo de las macromoléculas4.5. Digestión de las proteínas4.6. Absorción de los aminoácidos

TEMA 5.- Aminoácidos y Proteínas5.1. Formación de los aminoácidos 5.2. Estructura de las proteínas5.3. Requerimiento diario de estos nutrientes 5.4. Principales patologías ligadas a su deficiencia

UNIDAD IITEMA 6.-

Generalidades de las Hormonas6.1. Acción general de las hormonas 6.2. Acción especifica de las hormonas 6.3. Acciones químicas en el organismo 6.4. Efectos en la salud

TEMA 7.-Hormonas de la Hipófisis7.1. Hormonas de la Adenohipofisis 7.2. Hormonas de la Pars Intermedia 7.3. Hormonas de la Neurohipofisis 7.4. Función en el Organismo

TEMA 8.-Acción Hormonal Específica en cada Órgano8.1. Hormonas de la Paratiroides8.2. Hormonas de la Tiroides 8.3. Hormonas del Páncreas 8.4. Hormonas de la Suprarrenales8.5. Hormonas Sexuales 8.6. Función de cada una de ellas

TEMA 9Estructura y Función de los Ácidos Nucleicos 9.1. Estructura del ADN9.2. Estructura del ARN9.3. Función de cada uno9.4. Aporte en la genética moderna

TEMA 10.-


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Bases Química y Genética en las Enfermedades10.1. Consideraciones de la enférmeles desde el punto de vista químico10.2. Bases moleculares de las enfermedades 10.3. Tratamiento de enfermedades genéticas10.4. Efecto de la genética en las enfermedades del futuro

TEMA 11.-La Clínica y el Laboratorio 11.1. Aplicaciones medicas del laboratorios11.2. Interpretación clínica del laboratorio11.3. Exámenes de rutina en medicina 11.4. Exámenes específicos 11.5. Importancia del laboratorio en le tratamiento 11.6. Control y Evaluación de enfermedades mediante el laboratorio


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III. ACTIVIDADES PROPUESTAS PARA LAS BRIGADAS UDABOL

i. Tipo de asignatura para el trabajo social.Asignatura de Apoyo, tipo B.

ii. Resumen de los resultados del diagnóstico realizado para la detección de los problemas a resolver en la comunidad.

De acuerdo a situaciones identificadas en diferentes poblaciones aledañas a la ciudad de Santa Cruz de la Sierra y a la demanda social de la problemática sobre salud pública y preocupación de la población por falta de recursos e información y apoyo sobre sus necesidades básicas es que se plantea el siguiente proyecto tanto de servicio a la comunidad como de apoyo y orientación a la misma. Por cuanto el proyecto “Determinación del Coagulograma en los pobladores de las regiones de El Torno y Jorochito” los cuales tratarán de dar orientaciones integrales a mediano plazo para mejorar la calidad de los pacientes identificados y posterior comunicación a otros emblemas de salud para la prestación y atención correspondiente. El proyecto además tiene contemplado la “Tipificación de Grupos sanguíneos y Factor Rh” en las poblaciones establecidas, con el fin de brindar un apoyo más a los comunitarios.

iii. Nombre del proyecto al que tributa la asignatura.

“Determinación del Coagulograma en los pobladores de las regiones de El Torno y Jorochito”. “Tipificación de Grupos sanguíneos y Factor Rh” en las poblaciones mencionadas.

iv. Contribución de la asignatura al proyecto.

De acuerdo al contenido programático de la asignatura y su vinculación con el proyecto la contribución consistirá en coadyuvar a otras asignaturas inmersas en el proyecto.

v. Actividades a realizar durante el semestre para la implementación del proyecto.

Trabajo a realizar por los estudiantes

Localidad, aula o laboratorio

Incidencia social Fecha.

Organización de actividades del proyecto

Aula Después del primer parcial

Inspección y contactos con autoridades de Salud de la comunidad a seleccionar

Localidad Piloto Concientización sobre la necesidad de conocer medidas que ayuden en la mejor calidad de vida de las personas enfermas.

Después del segundo parcial


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IV. EVALUACIÓN DE LA ASIGNATURA.

● PROCESUAL O FORMATIVA.

A lo largo del semestre se realizarán 2 tipos de actividades formativas:Las primeras serán de aula, que consistirán en clases teóricas, exposiciones, repasos cortos, trabajos grupales. De laboratorio como las actividades prácticas concernientes a la asignatura así como el adiestramiento para las Brigadas a realizar. Las segundas serán actividades de “aula abierta” que consistirán en la participación del alumnado en las actividades de trabajo social en los proyectos “Determinación del Coagulograma en los pobladores de las regiones de El Torno y Jorochito” y “Tipificación de Grupos sanguíneos y Factor Rh” en las poblaciones mencionadas. Vinculando los contenidos de la asignatura de forma indirecta al proyecto mediante los hallazgos de alteraciones patológicas en los comunitarios y el conocimiento del grupos sanguíneo.El trabajo, la participación y el seguimiento realizado a estos dos tipos de actividades se tomarán como evaluación procesual calificándola entre 0 y 50 puntos independientemente de la cantidad de actividades realizadas por cada alumno.La nota procesual o formativa equivale al 50% de la nota de la asignatura.

● DE RESULTADOS DE LOS PROCESOS DE APRENDIZAJE O SUMATIVA (examen parcial o final)

Se realizarán 2 evaluaciones parciales con contenido teórico y práctico sobre 50 puntos cada una. El examen final consistirá en un examen escrito con un valor del 50% de la nota y la presentación de los informes y documentos de los proyectos con el restante 50%.

V. BIBLIOGRAFÍA

BLANCO Antonio, “Química Biológica”, Editorial El Ateneo, 6ª Edición, Argentina, 1997

BALCELLS Alfonso, “La Clínica y el Laboratorio”, Editorial Masson, 17ª Edición, México, 1997

CARDELLA Lidia, “Bioquímica Médica”, Editorial Ciencias Médicas, Cuba, 1999 GAW Allan, “Bioquímica Clínica”, Edit. Harcourt S.A., 2° Edición, España, 1999 LEHNINGER Albert, “Bioquímica”, Editorial Omega, 2ª Edición, España, 1995 MATHEWS Christopher, “Bioquímica”, Editorial Mc Graw Hill, 2ª Edición,

España, 1999 MURRAY Robert, “Bioquímica de Harper, Editorial Manual Moderno, 15ª

Edición, México, 2001 RAMOS José Antonio, “Bioquímica Bucodental”, 1° Edición, Editorial Síntesis.

S.A., España, 1996 STRYER Lubert, “Bioquímica”, Editorial Reverté, 5° Edición, España, 2003


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VII. PLAN CALENDARIO.

SEMANA ACTIVIDADES ACADÉMICAS OBSERVACIONES

1ra. Tema I 11/Ago – 16/Ago

2da. Tema I 18/Ago – 23/Ago

3ra. Tema II 25/Ago – 30/Ago

4ta. Tema III 1/Sep – 6/Sep

5ta. Tema III 8/Sep – 13/Sep

6ta. Primera Evaluación Parcial Tema IV 15 Sep – 20/Sep

7ma. Primera Evaluación Parcial Tema V 22Sep – 27/Sep

Exámenes Extemporáneos

8va. Tema V 29/Sep – 4/Oct

9na. Tema V 6/Oct – 11/Oct

10ma. Tema VI 13/Oct – 18/Oct

11ra. Tema VI 20/Oct – 25/Oct

12da. Segunda Evaluación Parcial Tema VII 27/Oct – 1/Nov

13ra. Segunda Evaluación Parcial Tema VIII 3/Nov – 8/Nov


14ta. Tema VIII 10/Nov – 15/Nov

15ta. Tema IX 17/Nov – 22/Nov

16ta. Tema X 24/Nov – 29/Nov

17ma. Tema XI 1/Nov – 6/Dic

18va Evaluación final 8/Dic – 13/Dic

19va Evaluación final 15/Dic – 20/Dic


20ma Exámenes de segunda instancia 22 y 23 Dic


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PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD

GUÍA DE INVESTIGACIÓN PRÁCTICA - GIP # 1

TEMA 1

TITULO: OBSERVACIÓN DE CÉLULAS SANGUÍNEAS

FECHA DE ENTREGA: 2ª semana

FUNDAMENTOLa sangre es considerado un tejido vital para la vida con múltiples funciones que van desde la oxigenación de las demás células de nuestro cuerpo hasta el mantener integro nuestro organismo evitando que nosotros perdamos nuestras células indispensables para la vida, así como el evitar la proliferación microorganismos nocivos para nuestra salud como son los parásitos, bacterias, virus y otros. Al microscopio se verán con un dominio predominante los glóbulos rojos, hematíes o eritrocitos, no tienen núcleo y son más delgados por el centro que por los bordes. Los glóbulos blancos o leucocitos se identifican fácilmente por la presencia de núcleo, teñido de color intenso. Hay varias clases de leucocitos: Linfocitos de tamaño aproximado al de los glóbulos rojos, tienen un solo núcleo que ocupa casi todo el glóbulo. Monocitos, son los leucocitos mayores, poco frecuentes normalmente, núcleo grande, redondo, son los más móviles y su función principal es la fagocitosis. Polimorfonucleares núcleo fragmentado, pueden ser eosinófilos, con abundantes granulaciones teñidas de color naranja, neutrófilos y basófilos. Y por último las plaquetas, pequeños fragmentos celulares con membrana poco definida.

OBJETIVOSMediante el uso del microscopio observar y describir la presencia de células por tinción de Giemsa como parte del tejido sanguíneo

MATERIALES - Microscopio - Portaobjetos - Mechero de alcohol - Lanceta estéril - Cubeta de tinción- Frasco lavador - Alcohol Metilico- Colorante Giemsa

PROCEDIMIENTO- Con la lanceta estéril realizar una punción en un pulgar. - Depositar una gota de sangre en la parte central de un portaobjetos. - Colocar un portaobjetos como indica el dibujo y deslizarlo sobre toda la superficie del

porta de manera que se pueda obtener una fina película de sangre.- Colocar el frotis de sangre sobre la cubeta de tinción y añadir unas gotas de alcohol

metílico y dejar que el alcohol se evapore para fijar la preparación. - Cubrir por 15 minutos con colorante Giemsa diluido 1:10 toda la muestra de sangre

previamente fijada


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- Lavar suavemente dejando escurrir el agua sobre la preparación - Dejar secar aireando el porta o bien al calor muy lento de la llama del mechero. - Observar al microscopio con aceite de inmersión con objetivo x 100- Dibuje las células que usted observe al microscopio

CONCLUSIONES:

EVALUACIÓN:

CUESTIONARIO1. Describa las características morfológicas y funcionales de los leucocitos

2. Cuál es la función que cumplen los eritrocitos y plaquetas en nuestro organismo

3. Qué características debe cumplir un microorganismo para ser considerado “célula”

4. ¿Por qué los Eritrocitos y las plaquetas son considerados células?


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GUÍA DE INVESTIGACIÓN PRÁCTICA - GIP # 2

TEMA 2

TITULO: FENOTIPAJE SANGUINEO

FECHA DE ENTREGA: 3ª semana

FUNDAMENTACIÓN La determinación de grupos sanguíneos del sistema ABO y Rh (Antígeno D) se efectúa enfrentado los hematíes problemas con antisueros de especificidad conocida Anti-A, Anti-B, Anti-AB y Anti-D. La presencia o ausencia de aglutinación o hemólisis de los hematíes ensayados frente a cada uno de los Antisueros, es indicativa de la presencia o no de los correspondientes Antígenos Eritrocitarios. Los mismos se manifiestan de acuerdo a las leyes de la herencia mendeliana.

OBJETIVOSRealizar la Fenotipificación de grupo sanguíneo mediante el empleo de hemoclasificadores

MATERIALES

- Placas de vidrio para determinación de grupo sanguíneo- Lancetas- Mezcladores- Pipeta Pasteur- Guantes de látex.- Hemoclasificadores Anti-A, Anti-B y Anti-D

PROCEDIMIENTO

1. Masajear previamente el dedo anular a fin de que se observe mejor irrigación sanguínea2. Realizar asepsia del pulpejo del dedo usando torundas con alcohol yodado3. Utilizando una lanceta realizar un pinchazo en la región media entre el borde lateral y el

pulpejo del dedo anular4. Presionar varias veces hasta obtener 3 gotas de sangre, las cuales se depositaran sobre

una placa de vidrio en diferentes lugares 5. Inmediatamente colocar una gota de reactivos hemoclasificadores Anti-A, Anti-B y Anti-D,

a las diferentes gotas de sangre 6. Mezclar suavemente ambas gotas, muestra de sangre y reactivo hemoclasificador7. Examinar si hay o no aglutinación.


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8. Anotar los resultados que serán definitivos, si es que no existen dudas en la interpretación.

Rvo Anti-A Rvo Anti-B Grupo Sanguíneo

-- -- O+ -- A-- + B+ + Ab

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS- Reacción Negativa. Ausencia de aglutinación, la reacción Antisueros/Hematíes denotan

una suspensión homogénea, luego de resuspendidos por agitación suave.- Reacción Positiva. Presencia de aglutinación, la reacción Antisueros/Hematíes denotan

agregación grosera entre si una vez resuspendidos por agitación suave, visibles a simple vista.

RESULTADO

CONCLUSIONES

CUESTIONARIO

1. ¿Por qué es recomendada la determinación de grupo sanguíneo en tubo como confirmatorio, en relación a la placa?

2. ¿Por qué generalmente sólo se identifica el sistema ABO y el Rh?3. Menciona 10 sistemas sanguíneos diferentes a los identificados por rutina4. ¿Cuándo y por qué es importante la identificación de todos los grupos sanguíneos

clínicamente significativos?


Rvo. Anti-D Presencia Antigeno “D”-- Negativo+ Positivo

Paciente Anti-A Anti-B Grupo Sanguíneo Anti-D Rh “D”Nº 1Nº 2Nº 3Nº 4

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FUNDAMENTACION TEÓRICA El fenómeno de la coagulación enfrenta muchas teorías, la mas sencilla es la que divide el fenómeno de la coagulación en dos fases.PRIMERA FASE Protombina + tromboplastina + Ion Calcio +Factor V = TROMBINASEGUNDA FASE TROMBINA + Fibrinogenpo = FIBRINA o formación del coaguloEn el fenómeno de la coagulación intervienen numerosos factores los cuales para su estudio se dividen e 2 grandes grupos.1.- Los factores PLASMÁTICOS2.- Los factores Plaquetarios

LOS FACTORES PLASMÁTICOS SON:FACTOR I FIBRINOGENO FACTOR II PROTROMBINAFACTOR III TROMBOPLASTINAFACTOR IV ION CALCIOFACTORI V PROACELERINAFACTOR VII PROCOMBERTINAFACTOR VIII ANTIHEMOFILICO AFACTOR IX ANTIHEMOFILICO BFACTOR X FACTOR DE STUARTFACTOR XI ANTIHEMOFILICO CFACTOR XII FACTOR DE HAGENAMFACTOR XIII FACTOR ESTABILIZANTE DE LA FIBRINA

Entre los factores Plaquetarios tenemosFactor I Acelerador de la conversión de la Protombina en trombinaFactor II Acelerador de la conversión del fibrinogeno en FibrinaFactor III Trombo plásticoFactor IV AntiheparinicoEn El laboratorio existen numerosas pruebas que permiten conocer si estos factores de la coagulación se encuentran en cantidades normales en la sangre, permitiéndonos conocer las alteraciones que se presentan durante este fenómeno.


GUIA DE INVESTIGACION PRACTICA - GIP # 3

TEMA 3

TITULO: Tiempo de Coagulación

FECHA DE ENTREGA: 4ª semana de clases

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II.- PRÁCTICA

TIEMPO DE COAGULACION

OBJETIVOS.- Determinar el tiempo de coagulación de un organismo por el Método de Lee White

MATERIALED

3 Tubos de hemólisis rotulados 1 2 y T (testigo) Jeringa de extracción Sanguínea Ligadura Algodón Alcohol Yodado1 Baño Maria a 37 ºCReloj Segundero CronometroMétodos y procedimientos

1. Extraer 3 ml de Sangre y repartirla equitativamente a 1 ml en cada uno de los tubos

2. Introducir los tubos al B.M a 37ºC3. A los 3 Minutos de obtenida la sangre controlar la coagulación en el tubo Nº 1

inclinando ligeramente el mismo4. repetir lo mismo cada 30 segundos hasta que se coagule la sangre en el tubo

Realizar la misma técnica con el tubo Nº 2 5. Una vez coagulada la sangre en el tubo Nº 2, proceder exactamente igual con el

tubo testigo.6. Cuando coagula el tubo testigo recién se obtiene el tiempo de coagulación7. EL VALOR NORMAL ES DE 5 A 10 MINUTOS, AUNQUE ALGUNOS AUTORES

COMO HOUSAY DAN VALORES COMPRENDIDOS HASTA 15 MINUTOS.

RESULTADOSEl tiempo de coagulación puede estar alterado por deficiencia de alguno de los factores plasmáticos de la coagulación, por el uso de anticoagulantes y en los estados de desfibrinación o coagulopatiasAsí tenemos en la hemofilia clásica que constituye un ejemplo típico en la que la coagulación puede tardar mas de una hora.Debido a presencia de algún anticoagulante circulanteEn las hipoprotrobinemias ocasionadas por la falta de vitamina K (Naptaquinonas), en el recién nacido debido a una absorción deficiente de Vitamina K por obstrucciones hepáticas, diarreas prolongadas. Por exceso de Antitrombina, en el Shock anafiláctico o después de la administración terapéutica de Heparina , Dicumarol.

Conclusiones

Evaluación


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1. A que se llama coagulación

…………………………………………………………………………………

2. Cuales son los 13 factores de la

coagulación………………………………………………

3. Que es la Heparina…………………………………………………

4. que otros anticoagulantes

existen…………………………………………………………………………………

5. Investigue sobre la Hemofilia

…………………………………………………………………………………

6. Con que objeto se mide el tiempo de

coagulación……………………………………………………

7. Que son las Proteinas

Plasmáticas……………………………………………………………………

8. Que es el

Fibrinogeno………………………………………………………………………………

…

9. Que tiene que ver la Vitamina K………………………………………………………

10. Que función cumple el Ion

Calcio…………………………………………………………………………………

………………………………….. ………………………………….. Firma y sello del catedrático Firma del estudiante

BIBLIOGRAFÍA 1.- A BLANCO química biológica 7 edición. Editorial el Ateneo 20002.- M.A. JIMÉNEZ TEBAR Formula y Nomenclatura de Química Orgánica. Edunsa Ediciones y Distribuciones Universitarias S.A. Barcelona 1993.4.- D.K.GRANNER, R K, MURRAT, P,A, MAYES. V.W. RODDWELL. Bioquímica de Harper 16 Edición, Editorial Manual Moderno México 20015.- LEHNINGER Bioquímica, Editorial Omega Barcelona 20016.- MURRIA MAYES METER Bioquímica ilustrada Harper Editorial Manual Moderno 2002 México7.- ROBERTIS E.D.P. Y ROBERTIS E.M.F Biología Molecular y celular Editorial el Ateneo Buenos Aires 19958.- SOLANGE BENTO FARRA Secretos y Misterios del ADN, editorial Sarvier San Pablo 2002


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9.-ANTONIO BLANCO Química Biológica Edito 200110.-BLOOMFIELD , MOLLY Química de los organismos Vivos Edit America 1997;


FUNDAMENTACION TEÓRICA El fenómeno de la coagulación enfrenta muchas teorías, la mas sencilla es la que divide el fenómeno de la coagulación en dos fases.PRIMERA FASE Protombina + tromboplastina + Ion Calcio +Factor V = TROMBINASEGUNDA FASE TROMBINA + Fibrinogenpo = FIBRINA o formación del coagulo

II.- PRÁCTICATIEMPO DE SANGRÍA OBJETIVOS Determinar el tiempo de sangría, siguiendo la técnica,MATERIAL

Lancetas de punciónReloj segundero, CronometroPapel filtro Métodos y procedimientos

8. Realizar la asepsia del lóbulo de la oreja con una torunda de algodón empapada

en alcohol, o alcohol yodado.

9. Realizar la punción con la lanceta de manera de hacer un corte ni muy pequeño

ni muy grueso

10. Limpiar con un pedazo de papel filtro la primera gota,



TEMA 4

TITULO: TIEMPO DE SANGRÍA


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11. a partir de este momento controlar cada 30 segundos presionando con el papel

la herida

12. Esperar a que cese la hemorragia

ResultadoVALORES NORMALESAlrededor de 3 a 4 minutos según un método sencillo o de 2 a 5 según DUKEEl tiempo de Sangría esta alterado en los siguientes casos.Deficiencia de PlaquetasAlergias medicamentosas, por ejemplo alergia al yodo, quinina, belladona o por picadura de insectos.En las infecciones como el sarampión, escarlatina, tifus, tuberculosisEn la púrpura trombocitopenica fulminante de los niñosConclusiones

Evaluación

1. Analice por que la importancia de tomar el tiempo de sangría

2. Que medidas tomaría si el tiempo de sangría es superior a 6 minutos

3. Que es la púrpura trombocitopenica

4. Que es la insuficiencia hepática

5. Investigue sobre alergias medicamentosas


BIBLIOGRAFÍA 1.- A BLANCO química biológica 7 edición. Editorial el Ateneo 20002.- M.A. JIMÉNEZ TEBAR Formula y Nomenclatura de Química Orgánica. Edunsa Ediciones y Distribuciones Universitarias S.A. Barcelona 1993.4.- D.K.GRANNER, R K, MURRAT, P,A, MAYES. V.W. RODDWELL. Bioquímica de Harper 16 Edición, Editorial Manual Moderno México 20015.- LEHNINGER Bioquímica, Editorial Omega Barcelona 20016.- MURRIA MAYES METER Bioquímica ilustrada Harper Editorial Manual Moderno 2002 México


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7.- ROBERTIS E.D.P. Y ROBERTIS E.M.F Biología Molecular y celular Editorial el Ateneo Buenos Aires 19958.- SOLANGE BENTO FARRA Secretos y Misterios del ADN, editorial Sarvier San Pablo 20029.-ANTONIO BLANCO Química Biológica Edito 200110.-BLOOMFIELD , MOLLY Química de los organismos Vivos Edit America 1997;


FUNDAMENTACION TEORICAOtro de los métodos de Laboratorio para la investigación de los factores de la coagulación es el tiempo de Pro trombinaLa tromboplastina es una solución de extracto de cerebro de conejo liofilizado e incubado a una temperatura de 37 º C; las casa comerciales preparan solución de TROMBOPLASTINA con cloruro de Calcio Cl2Ca incorporado.

II.- PRÁCTICATIEMPO DE PROTROMBINAOBJETIVOS .- Determinar el tiempo de pro trombinaMATERIAL

Tromboplastina Solución de Cloruro de Calcio Cl2Ca 40 Molar Plasma

sanguíneo Baño Maria a 37 ºC reloj segundero Cronometro jeringa extracción

sanguínea, torundas de algodón empapadas en alcohol.

Métodos y procedimientos13. Colocar 0,2 ml de tromboplastina con Cloruro de Calcio en un tubo de Hemólisis



TEMA 5

TITULO: TIEMPO DE PROTROMBINA


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14. depositar en el Baño Maria a 37 ºC durante 3 minutos

15. Realizar lo mismo con el plasma obtenido

16. Tomar 0,1 ml de plasma y depositarlo en el tubo que contiene la Tromboplastina

17. Inmediatamente empezar a controlar la formación de un coagulo y medir el

tiempo

Resultados

VALOR NORMAL.- El tiempo normal de protrombina es de 12 a 14 segundos.Se alarga normalmente y en pequeña proporción en pacientes que presentan sudoración profusa por altas temperaturas del ambiente.Patológicamente por las siguientes causas:Por deficiencia de vitamina K, en el recién nacido, por deficiente absorción de la misma Vitamina, enfermedades hepáticas ; Por ausencia de FIBRINOGENO :por deficiencia de los factores de la coagulación V, VII, XPor acción de ciertos inhibidores de la coagulación

Conclusiones

Evaluación

1. Que es el tiempo de PROTROMBINA

2. Como se prepara una solución de Cl2Ca 40 Molar

3. Que reactivos comerciales conoces como TROMBOPLASTINA (investigue)

4. Con que fin se realiza esta prueba

5. Cuales son las pruebas de rutina que pide un medico

6. Que determinaciones toma como Medico con una Protrombina de 25 segundos


BIBLIOGRAFÍA 1.- A BLANCO química biológica 7 edición. Editorial el Ateneo 20002.- M.A. JIMÉNEZ TEBAR Formula y Nomenclatura de Química Orgánica. Edunsa Ediciones y Distribuciones Universitarias S.A. Barcelona 1993.4.- D.K.GRANNER, R K, MURRAT, P,A, MAYES. V.W. RODDWELL. Bioquímica de Harper 16 Edición, Editorial Manual Moderno México 2001


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5.- LEHNINGER Bioquímica, Editorial Omega Barcelona 20016.- MURRIA MAYES METER Bioquímica ilustrada Harper Editorial Manual Moderno 2002 México7.- ROBERTIS E.D.P. Y ROBERTIS E.M.F Biología Molecular y celular Editorial el Ateneo Buenos Aires 19958.- SOLANGE BENTO FARRA Secretos y Misterios del ADN, editorial Sarvier San Pablo 20029.-ANTONIO BLANCO Química Biológica Edito 200110.-BLOOMFIELD , MOLLY Química de los organismos Vivos Edit America 1997;


FUNDAMENTACION TEORICAEse define como recuento de glóbulos blancos al numero de LEUCOCITOS que existen por mm3 de sangre; en el adulto hombre y mujer el numero oscila entre 8,000 a 10,000 G.B x mm3. en el niño al nacer es de 10,000 a 15,000 GB x mm3. Los Valores Normales de los Glóbulos Blancos pueden sufrir variaciones numerosas recibiendo un nombre particular en cada caso.

LEUCOCITOSISEs el aumento del numero de leucocitos en relación a los valores normales. Generalmente se dice que hay leucocitosis cuando se obtiene valores superiores a a los 10,000 o 12,000 GB x mm3.Las leucocitosis pueden deberse a muchos factores, además de los patológicos; se produce Leucocitosis después de ejercicios violentos, Posterior al parto, en los ataques de Epilepsia, después de la inyecciones de adrenalina, en reacciones



TEMA 6

TITULO: RECUENTO de LEUCOCITOS O GLOBULOS BLANCOS


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emocionales de ansiedad, dolor, y anoxia, normalmente hay una ligera leucocitosis durante el embarazo.En sujetos normales hay una variación del numero de GB durante el día, siendo bajos en la mañana y aumentando progresivamente durante el transcurso del día alrededor de 2000 x mm3.Entre las causas patológicas que producen leucocitosis podemos citar todos los procesos infecciosos agudos ocasionados por microorganismo piogenos y no piogenos, en las leucemias, la fiebre reumática, la septicemia, varicela, sarampión, endocarditis bacteriana sub. aguda, APENDICITIS, PERITONITIS, otitis, amigdalitis, colecistitis.LEUCOPENIA.- Se denomina a la disminución del numero de Glóbulos Blancos con respecto a los valores normales y con cifras inferiores a 5.000 GB x mm3 se considera LEUCOPENIA.Las causa de LEUCOPENIA es característica de ciertas infecciones, fiebre tifoidea, fiebre ondulante, muchas enfermedades por virus y riketsias, rubéola, hepatitis, infecciones por protozoarios como el KALA-AZAR.Otras causas de leucopenia en la cirrosis hepática, anemia perniciosa, leucemia aleucemica, anemia aplasica, exposición prolongada a rayos x, acción de Fármacos de las leucemias Cáncer. Otros fármacos que producen leucopenia como efecto secundario Cloranfenicol, fenilbutazona, antitiroideos y anticonvulsivosEste recuento de Glóbulos blancos se realiza con la pipeta de TOMA llamada así por aproximadamente a las dos terceras partes de su altura lleva un ensanchamiento o bulbo que sirve para favorece la mezcla de la sangre con el liquido de dilución. El extremo largo de la pipeta se halla dividida en 10 partes iguales presentando a la mitad de la graduación 0,5 y la graduación 1, donde empieza la dilatación, por encima del bulbo la numeración 11.Se aspira sangre hasta la marca 0,5, luego se aspira liquido de dilución hasta la marca 11, se agita la pipeta durante 2 minutos obteniéndose una dilución de 1 /20.El liquido de dilución que se utiliza es el liquido de TURK una solución de ácido acético al 3% disuelto en agua destilada, la que tiene pequeñas cantidades de azul de metileno, únicamente para darle color al reactivo. El liquido de Turk tiene la propiedad de destruir a los Glóbulos Rojos, para poder observar así a los glóbulos blancos

II.- PRÁCTICARECUENTO DE GLÓBULOS BLANCOSOBJETIVOSRealizar un conteo de Glóbulos Blancos en Laboratorio, para determinar Leucocitosis, leucopenia, MATERIALPipeta de TOMA ; Solución de Turk, Cámara de Neubahuer, Manguera de aspiración, Sangre recién extraída, Microscopio, Jeringas, Torundas, Alcohol, Tinción de observación de frotis sanguíneo.Métodos y procedimientos

18. Realizar la extracción sanguínea en un tubo de ensayo (sangre con

anticoagulante)

19. Cargar la pipeta de TOMA ( aspirando con la manguerita hasta la marca 0,5)

20. Cargar el diluyente o solución de Turk.


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21. Agitar o dar vueltas la pipeta de toma

22. Eliminar las 2 primeras gotas de la pipeta de toma y cargar la cámara de

neuwawer

23. Proceder al conteo dentro de la misma con el lente de 10

Resultados

Para los cálculos se toma en cuenta la dilución, el volumen, y el numero de

cuadrados en el que se ha efectuado el conteo aplicando la siguiente formula B x

10 x 20 / 4 = 50 B= Nº de células blancas. 10 = Volumen 20= Dilución 4 Nº de

cuadros. En la practica para obtener el resultado por mm3 de sangre se multiplica el

numero de células contadas por 50.

Conclusiones

Evaluación1. Que es una Leucocitosis2. Que es una Leucopenia3. Que es el liquido de Turk4. A que se llama Leucocitos5. Explique y haga un dibujo de como es la cámara de Neuwawer6. Haga un esquema y dibuje la Pipeta de Toma7. Que acción tiene el Ácido acético en la sangre8. Para que nos sirve conocer esta técnica9. Que otros métodos existen actualmente para el recuentro de Leucocitos10. Cual es la dilución de la sangre dentro de la pipeta de Toma


BIBLIOGRAFÍA

1.- A BLANCO química biológica 7 edición. Editorial el Ateneo 20002.- M.A. JIMÉNEZ TEBAR Formula y Nomenclatura de Química Orgánica. Edunsa Ediciones y Distribuciones Universitarias S.A. Barcelona 1993.


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4.- D.K.GRANNER, R K, MURRAT, P,A, MAYES. V.W. RODDWELL. Bioquímica de Harper 16 Edición, Editorial Manual Moderno México 20015.- LEHNINGER Bioquímica, Editorial Omega Barcelona 20016.- MURRIA MAYES METER Bioquímica ilustrada Harper Editorial Manual Moderno 2002 México7.- ROBERTIS E.D.P. Y ROBERTIS E.M.F Biología Molecular y celular Editorial el Ateneo Buenos Aires 19958.- SOLANGE BENTO FARRA Secretos y Misterios del ADN, editorial Sarvier San Pablo 20029.-ANTONIO BLANCO Química Biológica Edito 200110.-BLOOMFIELD , MOLLY Química de los organismos Vivos Edit America 1997;


FUNDAMENTACION TEÓRICA.Normalmente no debe existir glucosa en la orina debido a que la glucosa que llega a los tubulos renales a través de la circulación sufre un proceso de reabsorción y pasa nuevamente a la circulación sin llegar a atravesar los glomérulos renales. La reabsorción que sufre la glucosa a nivel de las células renales se debe a que en el interior de dichas células la glucosa sufre un proceso de Fosforilacion semejante al que se lleva en el intestino. La glucosa se fosforiliza a un valor de 170 mg% de glucosa en sangre, cuando en la sangre existen valores superiores a 170 mg% se



TEMA 7

TITULO: GLUCOSURIA


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excede la capacidad de Fosforilacion, por lo que el excedente de glucosa que no se fosfata atraviesa las células renales y es eliminada a través de la orina.El grupo funcional orgánico CHO que se encuentra en la glucosa tiene propiedades reductoras. Aprovechando esta propiedad que tienen los carbohidratos es utilizamos un reactivo que fácilmente se reduce de Sal cúprica (AZUL) a Sal cuprosa (Roja) por la acción reductora de este grupo funcional. El Reactivo recibe el nombre de Licor de Fehling o Reactivo de Fehling. Consta de 2 soluciones una solución A de sulfato cuprico azul y otro frasco de solución B o solución alcalina que se mezclara en el momento de su uso.

II.- PRÁCTICAOBJETIVOSDeterminar Glucosa en orina por el método de Fehling, en pacientes que se sospecha puedan eliminar GlucosaMATERIAL Orina, Reactivo de Fehling, Pipetas de 5 ml, goteros, tubos de ensayo, Baño Maria, pinzas de Madera, Solución de Glucosa pura como reactivo testigo.Métodos y procedimientos

1) Cargar un tubo de ensayo con 1 ml de orina

2) Añadir al mismo 1 ml de solución A (Licor de Fehling)

3) Añadir al mismo 1 ml de solución B (Licor de Fehling)

4) Agitar este tubo y llevar a Baño Maria

5) Esperar anotar los cambio que se observa

6) Realizar los mismos pasos con una solución de Glucosa sirve como testigo

Resultados

Si el tubo de ensayo en el baño María, cambia de color azul a color rojo ladrillo , la

prueba se considera como positiva, esto se comprueba con el tubo testigo de

glucosa pura anidra que llevo el mismo tratamiento

Conclusiones

Evaluación1. Que es Glucosuria2. Que es Glicemia3. Explique en un ensayo corto científico por que se elimina Glucosa por Orina4. Como puedo medir esta glucosa eliminada por orina5. Que diagnostico piensa si Ud. ve una prueba positiva de Glucosuria6. Cual es el fundamento del cambio de color de este reactivo7. que composición tiene el Licor de Fehling8. Como puedo confirmar este diagnostico , con que otras pruebas de laboratorio9. Existen parientes con diabetes en su familia, abuelos, tíos hermanos, se hicieron esta prueba?


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BIBLIOGRAFÍA

1.- A BLANCO química biológica 7 edición. Editorial el Ateneo 20002.- M.A. JIMÉNEZ TEBAR Formula y Nomenclatura de Química Orgánica. Edunsa Ediciones y Distribuciones Universitarias S.A. Barcelona 1993.4.- D.K.GRANNER, R K, MURRAT, P,A, MAYES. V.W. RODDWELL. Bioquímica de Harper 16 Edición, Editorial Manual Moderno México 20015.- LEHNINGER Bioquímica, Editorial Omega Barcelona 20016.- MURRIA MAYES METER Bioquímica ilustrada Harper Editorial Manual Moderno 2002 México7.- ROBERTIS E.D.P. Y ROBERTIS E.M.F Biología Molecular y celular Editorial el Ateneo Buenos Aires 19958.- SOLANGE BENTO FARRA Secretos y Misterios del ADN, editorial Sarvier San Pablo 20029.-ANTONIO BLANCO Química Biológica Edito 200110.-BLOOMFIELD , MOLLY Química de los organismos Vivos Edit America 1997;



TEMA 8

TITULO: DETERMINACIÓN DE LA GLICEMIA SANGUÍNEA Fotocolorimetrico y por el GLUCOMETRO


FUNDAMENTACION TEORICANumerosas determinaciones bioquímicas de la sangre, se encuentran basadas en reacciones colorimétricas, para lo cual se utiliza aparatos especiales conocidos con el nombre de foto colorímetros o fotómetros colorimétricos.


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Numerosas sustancias tienen la propiedad de poseer un color propio o bien de adquirirlo por el agregado de un determinado reactivo. Las reacciones colorimétricas se basan en la propiedad que tiene las substancias de dejar pasar la luz a través de una solución coloreada. En todas las determinaciones fotocolorimetricas se utiliza soluciones patrones o soluciones testigo de concentración conocida, con la que se efectúa una serie de cálculos o curvas de calibración que nos van a permitir la concentración de la sustancia que estamos determinando. La transmisión de onda está comprendida entre 400 a 700 milimicrones, en una coloración que va de del azul al rojo. Todas las determinaciones calorimétricas siguen la Ley de Baer que es la relación que existe entre la concentración de la sustancia y la transmisión de la onda. Existen numerosas clases y marcas de foto colorímetros y espectrofotómetros , siendo imposible describir cada uno de ellos. Existen la ventaja que cada casa comercial junto con el aparato elabora un manual de instrucciones sobre el manejo y el funcionamiento, además incluye las técnicas adecuadas para cada aparato. Las partes más importantes de que consta un foto colorímetro son:

1- Filtros de color, que pueden ir incluidos en el mismo aparato, haciéndolos rotar por medio de un tornillo especial o puede encontrarse en forma de placas individuales. El color varia del azul , al verde, y al rojo, teniendo cada uno una numeración especial de acuerdo a su tonalidad

2- Calda de luz, que es donde se encuentra la lámpara fotocolorimetrica.3- Caldas o cubetas que sirven para introducir os tubos fotocolorimetricos que contiene

la solución a analizar, se encuentra situados por delante de la cámara de luz.4- Tornillos macro y micro que sirven para llevar el aparato a Cero, o sea graduarlo

según que las determinaciones sean macro o micrométricas.5- Escala graduada. Consta de una aguja que mueve en toda la extensión de la misma

garcías a un tornillo que se encuentra situado por delante de la misma y que sirve para recorrer l aguja y llevaría a la graduación correspondiente. En algunos fotocolorimetros la escala graduada posee graduaciones que corresponden al porcentaje de actividad y a la densidad óptica.

6- Interruptor que sirve para prender y apagar el aparato. Los fotocolorimetros son aparatos sumamente delicados y costosos, debiendo tenerse mucho cuidado en el manejo. Cuando no se lo usa debe tapar con una funda de plástico o de una tela que no deje pelusa. Es necesario utilizar un estabilizador de la corriente a fin de que las oscilaciones de la luz debido al alza o a la disminución del voltaje quemen la lámpara fotocolorimetrica , por otra parte cuando se produce estas alteraciones durante la determinación estas susceptibles de dar resultados erróneos. La lámpara del foto colorímetro debe encontrarse prendida por lo menos unos cinco minutos antes de la determinación a fin de que el filtro que se va utilizar tome la temperatura adecuada.

Se recomienda siempre tener la precaución de llevar la aguja a cero antes de apagar el aparato, lo mismo debe hacerse cuando se va a cambiar el filtro color.

II.- PRÁCTICADETERMINACIÓN DE GLICEMIA (METODO FOTOCOLRIMETRICO) Y POR EL GLUCOMETROOBJETIVOS Determinar los valores normales de Glicemia. Glucosa en sangre por los métodos Fotocolorimetrico y por el Glucómetro

MATERIAL


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Tubos de ensayo, Foto colorimetro, espectrofotometro, reactivos de Wiener, Glucosa pura, Jeringa, Sangre venosa, Paciente en ayunas.

Métodos y procedimientos

DETERMINACIÓN DE LA GLUCOSA METODO DE WIENERFundamento La glucosa reacciona específicamente con la ( toluidina, una amina aromática primaria) , en medio acético y por la acción del calor, originando una mezcla a partes iguales de glicosilamina y base de Schiff. El color obtenido se lo determina filtro Nº 63 67REACTIVOSREACTIVOS CROMOGENICO Solucion 990 mol/L de acetato o-tuluidina y 20 mol/L de tooca r bamidaen ácido acético al 88% con catalizador. Estable a temperatura ambiente.ESTÁNDAR 4 ml de solución estabilizada de glucosa de una concentración igual a 1 g/ L. Estable a temperatura ambiente .MUESTRA SANGUINEA Puede usarse suero o plasma. Cuando se usa plasma, se aconseja utilizar como anticoagulante EDTA y fluoruros.TECNICA En tres tubos fotocolorimetrica marcados B (blanco) , S ( Standard ) y D ( desconocido ) colocar :Agua destilada B S DStandard 20 ml - -Muestra - 20 ml -Reactivo 2.5 ml 2.5 ml 2.5 ml

Llevar los tubos al baño de agua hirviente durante 4 y medio a 5 minutos. Retirar y colocar en agua fría de 2 a 5 minutos. Leer en foto colorímetro filtro rojo Nº 67, llevando al aparato a cero con el blanco. El color es estable durante 45 minutos.

Resultados

CÁCULO Se usa la siguiente fórmula:

Glucosa g / L = D x F F = 1.00 g / L ________ SConclusiones

1. Evaluación2. Diferencia entre Glicemia y Glucosuria3. Que es un espectrofotómetro, o un foto colorímetro4. Cual es el valor normal de Glucosa en un Paciente5. Que hipoglucemia


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6. Que es hiperglucemia7. Cuando debo pedir un examen de Glicemia8. Que es Polidipsia, Polifagia, Poliurea9. En caso de no realizar la prueba fotocolorimetrica que otro método puedo utilizar10. Que es el Glucómetro11. Que otros métodos existen a parte del Fotocolorimetrico, el glucómetro. Actualmente 2006


BIBLIOGRAFÍA

1.- A BLANCO química biológica 7 edición. Editorial el Ateneo 20002.- M.A. JIMÉNEZ TEBAR Formula y Nomenclatura de Química Orgánica. Edunsa Ediciones y Distribuciones Universitarias S.A. Barcelona 1993.4.- D.K.GRANNER, R K, MURRAT, P,A, MAYES. V.W. RODDWELL. Bioquímica de Harper 16 Edición, Editorial Manual Moderno México 20015.- LEHNINGER Bioquímica, Editorial Omega Barcelona 20016.- MURRIA MAYES METER Bioquímica ilustrada Harper Editorial Manual Moderno 2002 México7.- ROBERTIS E.D.P. Y ROBERTIS E.M.F Biología Molecular y celular Editorial el Ateneo Buenos Aires 19958.- SOLANGE BENTO FARRA Secretos y Misterios del ADN, editorial Sarvier San Pablo 20029.-ANTONIO BLANCO Química Biológica Edito 200110.-BLOOMFIELD , MOLLY Química de los organismos Vivos Edit America 1997;


TEMA 9

TITULO: DETERMINACIÓN DE UREA NH2-C=O-NH2

FECHA DE ENTREGA: 11ª Semana de clases

FUNDAMENTACION TEÓRICALa Urea NH2-C=O-NH2 es el principal producto del catabolismo proteico, químicamente es una carbamida que tiene un peso molecular de 60 gr/ml, es una



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molécula pequeña donde el nitrógeno representa aproximadamente el 50 % de su peso total.Se presenta como un polvo blanco, completamente soluble en el agua que atraviesa fácilmente las membranas celulares y capilares. Desde el punto de vista farmacológico actúa como diurético suave.La Urea consttuye el principal producto del catabolismo proteico, se enfoca el interés en su metabolismo, en su absorción, transporte, almacenamiento, y excreción de las proteinas y de los aminoácidosLas proteinas son introducidas al organismo mediante la alimentación sufren una transformación enzimatica a lo largo del tubo gastrointestinal hasta degradarse a polipetdidos pequeños y aminoácidos los cuales luego de atravesar las vellosidades intestinales llegan al hígado donde van a sufrir una nueva transformación.En el hígado los aminoácidos sufren dos procesos1.- DESAMINACION.2.- TRASAMINACIONEn ambos casos se libera NH3 ( amoniaco) que va a constituir el compuesto fundamental para la formación de la Urea.

SÍNTESIS DE LA UREA.- En la síntesis de la Urea interviene 4 aminoácidos que son Argirina, citrulina, Ontina y el ácido aspartico

Sintetizamos el ciclo de la urea conocido con el nombre de CICLO de Krebs HENSELEID en los siguientes pasos.1.- El NH3 se une con el CO2 y el ATP en presencia de la enzima sintetasa de fosfato de carbamilo para forma el FOSFATO DE CARBAMILO.2.- El fosfato de carbamilo reacciona con la Ornitina en presencia de la enzima sintetaza de Ornitina para formar la Citrulina.3.- La citrulina reacciona con el ácido aspartico en presencia de la enzima arginosuccinica para formar el ácido argino succínico.4.-el ácido argino succínico es atacado por la enzima argino succinasa originando argirina y ácido fumarico.5.-La argirina es atacada por la enzima arginasa, formando Urea y Ornitina la que iniciara nuevamente el ciclo.La formación de urea constituye un proceso fisiológico sumamente rápido y eficaz que permite utilizar grandes cantidades de NH3, que es en un compuesto toxico ya que diluciones hasta de 1 en 70.000 ocasiona la muerte de los mamíferos.La Urea como tal no es toxica, se encuentra contenida en diversos líquidos Biológicos siendo eliminada por medio de la orina con suma facilidad.Los aminoácidos a nivel del intestino son atacados por las bacterias intestinales originando NH3, el que por medio del sistema porta llega al hígado donde va a ser utilizado para sintetizar Urea, cuando existen alteraciones anatómicas y funcionales del Hígado, el NH3 no penetra en el tejido hepático, por lo que retorna a la sangre, como presenta una gran afinidad por el tejido Nervioso va a localizarse a nivel del sistema cerebral ocasionando el cuadro patológico, conocido con el nombre de SHOCK HIPERUREMICO, COMA UREMICO que se caracteriza por onnibulaciones, alteraciones mentales, produciéndose trastornos graves que pueden ocasionar la muerte

La urea constituye la fracción de nitrógeno no proteico mas importante en la mayoría de los líquidos biológicos. En el hombre es el principal producto final del metabolismo proteico.


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Se produce en el Hígado y es excretado por la orina a través de los riñones.Una elevación de la concentración serica de urea, se interpreta generalmente como una posible difusión renal. Sin embargo, no debe dejarse de lado el hecho de que los valores séricos de urea se encuentra íntimamente relacionados con la dieta y el metabolismo proteico, por lo que cualquier alteración en estas variedades se traducirán en un cambio de la concentración de urea en suero.Fundamentos del Método:La ureasa descompone específicamente la urea produciendo dióxido de carbono y amoniaco. Este reacciona en medio alcalino con salicilato e hipoclorito para dar indofenol color verde.

II.- PRÁCTICADETERMINACIÓN DE UREA SANGUINEAOBJETIVOS Determinar fotocolorimetricamente la cantidad e Urea presente en el organismo humanoMATERIAL


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Espectrofotómetro Micro pipetas y pipetas

para medir los volúmenes indicados.

Baño María

Tubos de ensayo Vasos precipitados Jeringas, Guantes,

Torundas

.Muestra

Suero, Plasma u Orina


Técnicas para Suero o Plasmaa)En tres tubos B (Blanco), D (desconocido) y S (Estándar ) Colocar:

B S D

Standard - 10 ul -

Suero o Plasma - - 10 ulReactivo 1 + Ureasa 1ml 1ml 1mlMezclar: Incubar 5 minutos a 37º C o 10 minutos a temperatura Ambienté luego agregar Reactivo 2 1ml 1ml 1mlMezclar: Incubar 5 minutos a 37 oC o 10 minutos a temperatura Ambiente. Leer en espectrofotómetro a 570 nm.

Valores de ReferenciaLos valores normales esperados en son: Suero o Plasma: 0,10 – 0,45 g / l 0,30 g% en suero 0,40 g% 30 mg % 40 mg% Limite máximo 50 mg%

ResultadosDesde el punto de vista clínico tiene importancia únicamente el aumento de la urea sanguínea, la que recibe el nombre de Hiperuremia ( hiper azotemia .) La Hiperuremia se presenta en la insuficiencia renal orgánica.Hiperuremia RENAL AGUDA Y CRÓNICA

Hiper Uremia AgudaAcompañada de anuria, oliguria, generalmente se alcanzan cifras muy elevadas de urea, sin embargo la mayor parte de los casos son fácilmente reversibles, volviéndose fácilmente a los valores normales. Se presenta en los siguientes casos1.- En la glomérulo nefritis aguda, en la cual la reacción Xantoproteica es negativa, debido que no hay retención de compuestos aromáticos.2.- En la Necrosis maligna anurica que se presenta en ciertas alteraciones que pueden ser ocasionadas por reacciones tras funcionales.3.-En Necrosis de tejido renal, por intoxicación con cloruro de mercurio u otro toxico.4.- En obstrucción por calculo renal o inflamación de la próstata


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Hiperuremia CRÓNICA.- esta va acompañada de una eliminación normal de la orina o incluso una poliurea compensadora. Los valores altos de la urea son de tipo irreversible, presentándose en todas las alteraciones crónicas del riñón. Se presenta en los siguientes casos1.- En la Glomérulo nefritis crónica, la que se diferencia de la aguada por que la reacción Xantoproteica es positiva.2.- En la esclerosis renal secundaria.3.- En intervenciones quirúrgicas.4.-en Mielomas múltiple de riñón.

HIPER UREMIA EXTRA RENAL.Este tipo de uremia no va acompañada de una alteración renal orgánica, aunque en ciertos casos puede presentarse una alteración renal funcional, se presenta en los siguientes casos:1.- Insuficiencia circulatoria, donde existe una deficiente irrigación de la sangre del riñón2.- Insuficiencia cardiaca congestiva que es una de las causas mas frecuentes de hiper uremia extra renal.3.-insuficiencia cardiaca periférica4.- Deshidratación cloropenica, es decir por deficiencia de cloro ocasionada por vómitos, diarreas, lavados gástricos, en este caso la Hiperuremia ce por la administración de cloro.5.- en el coma diabéticoen los TEC Traumatismos encéfalo craneanos

Conclusiones

Evaluación

1. Que es la Urea , cuales son los valores normales de Urea

2. A partir de que aminoácido se realiza el ciclo de la Urea

3. A que se denomina HIPEUREMIA

4. Que es hiper uremia extra renal

5. que significa las palabras anuria, poliurea, glucosuria

6. Explique el coma diabético

7. Que valores considera normales de urea

8. es lo mismo hablar de 30 mg% a 40 mg% que 0,30 g/ litro a 040 gr/lt

9. Diferencie Hiperuremia aguda de crónica

10. que significa afinidad por el tejido Nervioso

…………………………….. ………………………………….. Firma y sello del catedrático Firma del estudiante

BIBLIOGRAFÍA 1.- A BLANCO química biológica 7 edición. Editorial el Ateneo 2000


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2.- M.A. JIMÉNEZ TEBAR Formula y Nomenclatura de Química Orgánica. Edunsa Ediciones y Distribuciones Universitarias S.A. Barcelona 1993.4.- D.K.GRANNER, R K, MURRAT, P,A, MAYES. V.W. RODDWELL. Bioquímica de Harper 16 Edición, Editorial Manual Moderno México 20015.- LEHNINGER Bioquímica, Editorial Omega Barcelona 20016.- MURRIA MAYES METER Bioquímica ilustrada Harper Editorial Manual Moderno 2002 México7.- ROBERTIS E.D.P. Y ROBERTIS E.M.F Biología Molecular y celular Editorial el Ateneo Buenos Aires 19958.- SOLANGE BENTO FARRA Secretos y Misterios del ADN, editorial Sarvier San Pablo 20029.-ANTONIO BLANCO Química Biológica Edito 200110.-BLOOMFIELD , MOLLY Química de los organismos Vivos Edit America 1997;



TEMA 10

TITULO: DETERMINACIÓN DE COLESTEROL SANGUINEO


FUNDAMENTACION TEÓRICAEl Colesterol es un lípido simple que deriva de los Esteroles, se encuentra normalmente en la sangre en la proporción de 150 a 250 mg %Su presencia en el organismo tiene un doble origen, exógeno y endógeno.El origen exógeno se refiere al colesterol que es introducido mediante la alimentación, principalmente a base de grasas, huevos, jamones, mantequillas, etc. El origen endógeno se refiere al colesterol que es sintetizado en el organismo, siendo el principal órgano sintetizador el hígado y siguiéndole en importancia la piel, el bazo, los riñones y las arterias. La cantidad de colesterol que se sintetiza en el hígado oscila de 1.5 a 2 gramos y en los tejidos extrahepaticos de 0.5gramos en las 24 horas o sea que normalmente se sintetiza mayor cantidad de colesterol del que introduce mediante la alimentación El colesterol tiene tendencia a depositarse en las paredes arteriales. Esta propiedad y el hecho de que las paredes arteriales sinteticen colesterol, ha cobrado gran importancia y ha sido objetivo de numerosos estudios ya que se ha demostrado que puede ser una e las causas para originar la arteriosclerosis o ateroesclerosis, que se caracteriza por el endurecimiento de las paredes


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arteriales la que pierden su flexibilidad natural por lo que la sangre es enviada con dificultad a todo el organismo y principalmente al cerebro. El colesterol tiene gran importancia por ser el precursor de compuestos de gran interés fisiológico como ser: las hormonas corticales y sexuales , los ácidos y sales biliares y la vitamina “·D”. es eliminado del organismo por medio de la materia fecal al estado de coprosterol y por medio de los ácidos y sales biliares.

Las Lipoproteínas plasmáticas son partículas esféricas que contienen cantidades variables de colesterol, triglicéridos fosfolípidos y proteínas. Estas partículas solubilizan y trasportan el colesterol en el torrente sanguíneo.La proporcion relativa de proteina y lípido determina la densidad de estas lipoproteínas.La función principal de estas lipoproteínas de alta densidad en el metabolismo lipidito es la capacidad y trasporte de colesterol desde los tejidos perifericos al higado en un proceso conocido como trasporte reverso de colesterol.( mecanismo cardioprotectivo).El DHL colesterol bajo, esta asociado con un alto riesgo de enfermedades cardiacas. Por este motivo la determinación de HDL colesterol es una herramienta util en la identificación de individuos de alto riesgo.

Fundamento del MétodoLas lipoproteínas de alta densidad (HDL) se separan precipitando selectivamente las lipoproteínas de baja y muy densidad (LDL y VLDL) mediante el agregado de sulfato dextran de PM 50.000 en presencia de iones Mg++.En el sobrenadante separado por centrifugación, quedan las HDL y se realiza la determinación del colesterol ligado a las mismas, empleando el sistema enzimático Colesterol oxidasa / Peroxidasa con colimetria según Trinder (fenol/4-Aminofenazona).

II.- PRÁCTICAOBJETIVOS:

Determinar el colelesterol sanguíneo bioquímicamente

MATERIAL Espectrofotómetro Micro pipetas y pipetas

para medir los volúmenes indicados.

Baño María

Tubos de ensayo Vasos precipitados Jeringas, Guante,

Torundas.


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Reactivos Suero

Métodos y procedimientos1. Poner en un tubo de ensayo 0,5 ml (500ul) de muestra,2. agregar 50 ul de reactivo Precipitante. Homogeneizar agitando

(sin verter) durante 20 segundos y dejar 30 minutos en refrigerador o 15 minutos en baño de agua a 10 oC no colocar en congelador.

3. Centrifugar 15 mit. A 3000 r.p.m. Usar el sobrenadante liquido como muestra y repartir en tre tubos de ensayo marcados de la siguiente manera. B S D

Sobrenadante - - 100 ul

Standard - 20 ul -Reactivo de Trabajo 2 ml 2 ml 2ml

Mezclar e incubar 15 minutos a 37 oC retirar del baño y enfriar. Leer a 505 nm en espectrofotomeyro o en colorimetro con filtro verde ( 490 – 530 nm), llevando a cero con el blanco.

Valores de ReferenciaLos valores normales esperados para HDL colesterol son los siguientes:

Hombres: 0,30 – 0,70 g/lMujeres: 0,30 – 0,85 g/l

Resultados

Conclusiones

Evaluación1. Que es el colesterol, dibuje su formula2. como se determina el colesterol en sangre3. Como se forma el colesterol endógeno4. Que complicaciones trae el aumento del colesterol5. Cual es el colesterol malo el LDL o el HDL (investigue)6. Cual es el valor normal de Colesterol Total, LDL, HDL, y triglicéridos7. Que es el 7 dihidrocolesterol8. De donde proviene la Vitamina D29. Que sustancia es activada por la influencia de los rayos infrarrojos10. Por que ingresamos al laboratorio, a verificar que...................?


BIBLIOGRAFÍA 1.- A BLANCO química biológica 7 edición. Editorial el Ateneo 20002.- M.A. JIMÉNEZ TEBAR Formula y Nomenclatura de Química Orgánica. Edunsa Ediciones y Distribuciones Universitarias S.A. Barcelona 1993.4.- D.K.GRANNER, R K, MURRAT, P,A, MAYES. V.W. RODDWELL. Bioquímica de Harper 16 Edición, Editorial Manual Moderno México 20015.- LEHNINGER Bioquímica, Editorial Omega Barcelona 20016.- MURRIA MAYES METER Bioquímica ilustrada Harper Editorial Manual Moderno 2002 México7.- ROBERTIS E.D.P. Y ROBERTIS E.M.F Biología Molecular y celular Editorial el Ateneo Buenos Aires 19958.- SOLANGE BENTO FARRA Secretos y Misterios del ADN, editorial Sarvier San Pablo 20029.-ANTONIO BLANCO Química Biológica Edito 200110.-BLOOMFIELD , MOLLY Química de los organismos Vivos Edit America 1997;


TEMA 11

TITULO: determinación de Ácido Úrico


Fundamentacion teóricaEl ácido úrico proviene de la degradación de las purinas, compuestos orgánicos que se hallan formando una parte fundamental de los ácidos nucleicos y desoxirribonucleicos. El ácido úrico construye el principal producto del catabolismo de las purinas en El hombre y en los mamíferos superiores ,En seres inferiores es atacado por la enzima uricaza siendo transformado en alantoína que se elimina por medio de la orina.


En el hombre la mayor parte del ácido úrico que se forma proviene de la degradación de la guanosina. El ácido úrico tiene una reacción francamente ácida, es poco soluble en el agua, se disuelve en una proporción de 6.5 g/100 ml. En el plasma sanguíneo debido al PH de la sangre tiene la propiedad de combinarse con diversos cationes, formando sales monoalcalinas que tiene una solubilidad mayor a la del ácido puro, aproximadamente de 20 a 25 gr/º. El ácido úrico que se encuentra circulando en la sangre tiene un doble origen: endógeno y exógeno. El origen endógeno es que el que se produce debido a la degradación de los aminoácidos y de las nucleoproteínas en el interior del organismo. El origen exógeno se refiere al ácido úrico que penetra al organismo por medio e la alimentación, ya que existen cierto grupo de sustancias que se caracterizan por su gran riqueza en ácido úrico, como por ejemplo: los casos , y los riñones principalmente, los cuales se los conoce con el nombre de genérico de ureinas . El ácido úrico es eliminado del organismo a través de la orina. Ya sea al estado de ácido úrico puro o de sales conocidas con el nombre de uratos. Su solubilidad en la orina es relativamente mediana, en las orinas muy ácidas pero en las orinas alcalinas o neutras es muy grande, aproximadamente de 100 a 110 gr%º.La acumulación de este ácido Úrico en nuestro organismo se conoce como la enfermedad de los ricos o la llamada GOTA, que se caracteriza especialmente por producir unos dolores agudos, como agujas que pinchan en el dedo gordo del pie, y que deja al paciente adolorido profundamente e incapacitado de realizar ninguna labor, postrado en espera de bajar este ácido. DETERMINACIÓN FOTOCOLORIMETRICA DEL ÁCIO URICO.METODO DL URICOSTALFUNDAMENTO El suero se desproteiniza por la acción del ácido tunstico. El líquido claro obtenido de la desproteinización contiene ácido úrico, el que reacciona con el reactivo fosfo-litio-tungsteno con el que forma un complejo de tungstato de ácido úrico, de color azul, cuya intensidad es directamente proporcional a la cantidad de ácido úrico presente en el suero.

REACTIVOS1. Ácido tunsgtico pre-formado.2. Reactivo nº 1- Contiene: 1.84 mol/litro de CO3Na2, este reactivo en la época del invierno

se lo debe conservar en estufa a 37ºC, si presentara precipitaciones por efecto del frío, se debe introducir el frasco a un recipiente que contenga agua a 37ºC hasta disolución completa.

3. Reactivo nº 2- Se halla constituido por partes equimoleculares de ácido fosfórico y ácido tungstico a los que se añade 294 mililitros de SO4 Li2.

4. Muestra- Está representada por suero sanguíneo, se aconseja separar el suero del coágulo antes de las horas de obtenida la sangre.

El ácido úrico es un metabolito de las purinas, ácidos nucleicos y nucleoproteínas.Habitualmente la concentración de acido urico en suero varia de un individuo a otro de acuerdo a varios factores tales como: sexo, dieta, origen étnico, constitución genética, embarazo. Niveles anormales de ácido úrico en suero son índice de desorden en el metabolismo de las sustancias que lo originan o de defecto en su eliminación.

Fundamentos del métodoEl acido urico de la muestra desproteinazada con acido tusgstico preformado, reacciona en medio alcalino de carbonato sodico con el reactivo fosfo-litio-túngstico,

produciendo un color azul, que es proporcionado a la concentración de ácido úrico de la muestra, y se mide colorimetricamente.

II.- PRÁCTICADETERMINACIÓN DE ACIDO URICOOBJETIVOS Determinar el ácido Úrico normal del organismo

MATERIAL Espectrofotómetro Micro pipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados. Baño María Tubos de ensayo de centrifuga Vasos precipitados Jeringas, Guantes, Torundas. Suero

Muestra


En tres tubos de ensayo debidamente marcados colocar.

Desproteinizado - - 2,5 ml

Agua destilada 2,5 ml 5 ml -

Standard - 50 ul 2mlReactivo 1 0,5 ml 1 ml 0,5 mlReactivo 2 0,5 ml 1 ml 0,5 ml

Mezclar por inmersión y colocar en bañó de agua entre 22 y 28 ºC. Entre 30 y 45 minutos después, leer en espectrofotómetro a 660 nm, llevando al equipo a cero con el blanco.

ResultadosValores de referenciaSuero:Hombres :35 a 70 mg/ IMujeres 25 a 60 mg / l

Conclusiones

Evaluación

1. Que es el ácido úrico explique el origen endógeno y exógeno2. Por que llaman al ácido Úrico Gota3. A que se llama degradación de las purinas4. Que es la guanosina5. Que medicamentos existen para disminuir la Gota o acumulación de ácido Úrico6. Cual el fundamento de hacer una medición fotocolorimetrica7. Que significa desproteinisar la sangre 8. Que color da el Desproteinizado de ácido úrico9. Que significa la eliminación de Uratos por orina

10. A que se viene al laboratorio de Bioquímica Clínica

……………………………….. ………………………………….. Firma y sello del catedrático Firma del estudiante

BIBLIOGRAFÍA 1.- A BLANCO química biológica 7 edición. Editorial el Ateneo 20002.- M.A. JIMÉNEZ TEBAR Formula y Nomenclatura de Química Orgánica. Edunsa Ediciones y Distribuciones Universitarias S.A. Barcelona 1993.4.- D.K.GRANNER, R K, MURRAT, P,A, MAYES. V.W. RODDWELL. Bioquímica de Harper 16 Edición, Editorial Manual Moderno México 20015.- LEHNINGER Bioquímica, Editorial Omega Barcelona 20016.- MURRIA MAYES METER Bioquímica ilustrada Harper Editorial Manual Moderno 2002 México



TEMA 12

TITULO: DETERMINACIÓN DE LA CREATININA EN SANGRE


FUNDAMENTACION TEÓRICALa Creatinina es un compuesto nitrogenado que se encuentra contenida en gran proporción en el músculo donde desempeña un papel importante en el fenómeno de la contracción muscular.Es un compuesto nitrogenado que se obtiene a partir de la degradación de las proteinas interviniendo en su formación 3 aminoácidos. GLICINA, ARGIRINA, METIONINA.El paso inicial consiste en que al reaccionar la glicina con la argirina origina el compuesto conocido con el nombre de GLICOCIAMINA, la que al unirse a la metionina forma la CREATINA.La CREATINA no se elimina del organismo al estado de creatina pura si no como su anhídrido conocido con el nombre de CREATININA.

Solo en el hombre adulto la orina contiene CREATININA. En La mujer adulta en la época del embarazo y de la lactancia y en el niño en ambos sexos, la orina contiene creatina y CREATININA.La cantidad de Creatinina que se encuentra circulando en la sangre es independiente del peso del individuo y de la masa muscular.En la actualidad juntamente con la UREA la Creatinina constituye uno de los principales productos del catabolismo PROTEICO; su determinación reviste gran importancia para determinar la gravedad de la lesión RENAL.La Creatinina se elimina muy fácilmente del organismo y su determinación tanto como para el diagnostico y el pronostico de ciertas enfermedades tiene gran importancia, encontrándose principalmente relacionada con el aumento de la urea el acido URICO. Las alteraciones mas importantes de la CREATININA se presentan en los siguientes casos:1. Nefropatias cuando se alcanzan valores superiores a 5 mg% el pronostico es fatal a corto

plazo esto solo se presenta cuando las enfermedades renales se encuentran sumamente avanzadas

2. En una nefritis aguda existe un aumento de la Creatinina pero es fácilmente reversible.3. En las enfermedades cardiacas avanzadas4. En obstrucciones reales, alteraciones de la próstata. O por presencia de cálculos renales y

uréteres tapados.5. En el Gigantismo y la acromegalia

II.- PRÁCTICA DETERMINACIÓN DE CREATININA SANGUINEAOBJETIVOS .- Determinar la cantidad de creatinina presente en la sangre

MATERIAL:1) Reactivo Nº 1 Ácido Pícrico2) Reactivó Nº 2 Solución Buffer de Glicina en NaOH3) Solución testigo de Creatinina 20 mg/Litro de Creatinina pura estable4) Muestra sanguínea SUEO FRESCO ( Sangre sin anticoagulante)

METODOLa Creatinina reacciona con el picrato alcalino , previa desproteinizacion del suero con el ácido pícrico, se forma una coloración estable que se la determina fotocolorimetricamente con el filtro color verde Nº 53.1. Colocar en un tubo de ensayo 1,5 ml de suero y 7,5 ml del reactivo Nº1, mezclar ,

reposar 10 minutos2. Centrifugar a 3000 rpm 5 minutos3. Prepara 3 tubos de ensayo (B) Blanco (S) STANDART (D)Desconocido B S D Sobrenadante 6 mlStandart 1 mlAgua 3,5 ml 2,5 mlReactivo Nº 1 3,5 ml 3,5 mlReactivo Nº 2 1 ml1 1 ml 1 mlMezclar los tubos por inversión dejar reposar entre 20 y 30 minutos luego proceder a su lectura en el foto colorímetroPara los cálculos se utiliza la siguiente formula

Creatinina mg /lt = D x f Factor 20/Standart

RESULTADOS

VALORES NORMALES Los valores normales en Suero son de 0,8 mg % a 1,4 mg%ORINA 0,9 mg % a 1,5 mg %Clearence de Creatinina 80 a 140 mg % 125 mg% termino medioAlgunos autores coinciden en que el termino medio de la Creatinina puede oscilar entre 1 y 2 mg%, encontrándose mas en el hombre que en la mujer debido a la masa muscular.

CONCLUSIONES

EVALUACIÓN1. Que es La Creatinina2. Como se forma la Creatinina3. Que es la Creatina4. En que enfermedades suele estar aumentada la Creatinina5. En un caso de Insuficiencia Renal como están los valores de Creatinina6. Como se determina la cantidad de Creatinina en sangre7. Que es el asido Pícrico8. Que otros usos se le da al ácido pícrico9. Ultimas técnicas de investigación de la Creatinina10. Esta dosificación para que le sirve en el transcurso de su carrera

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BIBLIOGRAFÍA 1.- A BLANCO química biológica 7 edición. Editorial el Ateneo 20002.- M.A. JIMÉNEZ TEBAR Formula y Nomenclatura de Química Orgánica. Edunsa Ediciones y Distribuciones Universitarias S.A. Barcelona 1993.4.- D.K.GRANNER, R K, MURRAT, P,A, MAYES. V.W. RODDWELL. Bioquímica de Harper 16 Edición, Editorial Manual Moderno México 20015.- LEHNINGER Bioquímica, Editorial Omega Barcelona 20016.- MURRIA MAYES METER Bioquímica ilustrada Harper Editorial Manual Moderno 2002 México7.- ROBERTIS E.D.P. Y ROBERTIS E.M.F Biología Molecular y celular Editorial el Ateneo Buenos Aires 19958.- SOLANGE BENTO FARRA Secretos y Misterios del ADN, editorial Sarvier San Pablo 20029.-ANTONIO BLANCO Química Biológica Edito 200110.-BLOOMFIELD , MOLLY Química de los organismos Vivos Edit America 1997;

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Bioquimica II 2011