BIURET

Laboratorium Biokimia Pangan Protein I (Uji Biuret)



I PENDAHULUAN

Bab ini akan menguraikan mengenai : (1) Latar Belakang Percobaan, (2) Tujuan Percobaan, (3) Prinsip Percobaan, dan (4) Reaksi Percobaan.

1.1. Latar Belakang Percobaan Peptida adalah polimer yang mengandung 2 hingga 50 asam amino, yang dihubungkan satu sama lain dengan ikatan kovalen yang disebut ikatan peptida. Ikatan peptida menghubungkan gugus amin dan gugus karboksil secara kovalen. Ikatan peptida lebih pendek dan lebih kuat daripada ikatan tunggal C-C, tetapi lebih lemah dibandingkan dengan ikatan rangkap C=C. Dalam setiap pembentukkan ikatan peptida akan dibebaskan satu molekul air sehingga reaksi pembentukkan protein ini disebut reaksi polimerisasi kondensasi. Sebagaimana asam amino, peptida merupakan senyawa yang bersifat zwitterion dan tidak memiliki muatan pada titik isoelektriknya (Kusnandar, halaman 223, 2010). 1.2. Tujuan PercobaanTujuan dari percobaan Uji Biuret adalah untuk mengetahui adanya ikatan peptida dalam suatu protein.

1.3. Prinsip PercobaanPrinsip percobaan dari Uji Biuret adalah berdasarkan penambahan NaOH dan CuSO4 sehingga menghasilkan senyawa berwarna ungu.

1.4. Reaksi Percobaan O II HOOC-CH-NH-C-C-NH2 + CuSO4 + NaOH I R Senyawa peptida

H O H I I I HCOO-C-NH-C-C-NH2 I I I R OH R Senyawa biru violet Gambar 1. Reaksi Percobaan Uji Biuret

II METODE PERCOBAAN

Bab ini menguraikan mengenai : (1) Bahan yang Digunakan, (2) Pereaksi yang Digunakan, (3) Alat yang Digunakan, dan (4) Metode Percobaan.

2.1 Bahan yang DigunakanBahan yang digunakan dalam Uji Biuret adalah bubur bayi, sari kacang hijau, sosis, jagung dan smoke beef.

2.2 Pereaksi yang DigunakanPereaksi yang digunakan dalam Uji Biuret adalah CuSO4 dan NaOH 2 N.

2.3 Alat yang DigunakanAlat yang digunakan dalam Uji Biuret adalah pipet tetes dan tabung reaksi.

2.4 Metode Percobaan

Gambar 2. Metode Percobaan Uji Biuret

III HASIL PENGAMATAN

Bab ini akan menguraikan mengenai : (1) Hasil Pengamatan dan (2) Pembahasan.

3.1. Hasil Pengamatan

Gambar 3. Hasil Pengamatan Uji Biuret

Tabel 1. Hasil Pengamatan Uji BiuretSampelPereaksiWarnaHasil 1

Sebelum ditambah sampelSetelah ditambah sampel

I (Sari Kacang Ijo)CuSO4 1% dan NaOH 2 NPutih kuningUngu +

D (sosis)Merah JambuUngu +

A (bubur bayi)Kuning hijauJingga +

E (smoke beef)KecoklatanUngu +

K (Jagung)Putih keruhUngu+

Sumber : Adwin Ismail Kelompok G, Meja 4, 2014.

Ket : (+) = Mengandung ikatan peptida ( - )= Tidak mengandung ikatan peptida

3.2 PembahasanDari hasil percobaan Uji Biuret yang telah dilakukan, maka dapat diketahui bahwa seluruh sampel yaitu bubur bayi, sari kacang ijo, sosis jagung, dan smoke beef mengandung ikatan peptida. Hasil yang didapat sesuai dengan hasil yang seharusnya.Biuret adalah senyawa dengan dua ikatan peptida yang terbentuk pada pemanasan dua molekul urea. Ion Cu2+ dari pereaksi Biuret dalam suasana basa akan bereaksi dengan polipeptida atau ikatan-ikatan peptida yang menyusun protein membentuk senyawa kompleks berwarna ungu atau violet. Reaksi ini positif terhadap dua buah ikatan peptida atau lebih, tetapi negatif untuk asam amino bebas atau dipeptida (Poedjiadi, halaman 122, 2005)Larutan protein dibuat alkalis dengan NaOH kemudian ditambahkan larutan CuSO4 encer. Uji biuret dilakukan untuk menunjukkan adanya senyawa-senyawa yang mengandung gugus amida asam (-CONH2) yang berada bersama gugus amida asam yang lain atau gugus yang lain seperti -CSNH2; -C(NH)NH2; -CH2NH2; -CRHNH2; HOHCH2NH2. Dengan demikian uji biuret tidak hanya untuk protein tetapi zat lain seperti biuret atau malonamida juga memberikan reaksi positif yaitu ditandai dengan timbulnya warna merah-violet atau biru-violet (Sudarmadji, halaman 145, 2010).Warna ungu terjadi karena kompleks ikatan peptida dengan tembaga, semakin banyak ikatan peptida maka semakin pekat warna ungu yang terbentuk (Winarno, halaman 78, 2004).Fungsi pereaksi NaOH dan CuSO4 adalah untuk membuat suasana larutan menjadi basa sehingga dihasilkan suatu senyawa kompleks berwarna ungu sebagai deteksi atau penentuan kuantitatif peptida dalam larutan protein, tetapi tidak untuk asam amino bebas. Pada uji Biuret, larutan pereaksi yang telah ditambahkan sampel tidak boleh dikocok karena akan membuat ikatan peptida terputus sehingga ikatan peptida yang ada dalam suatu protein tidak akan teridentifikasi. Faktor yang dapat mempengaruhi putusnya ikatan peptida adalah pemanasan, pH, perlakuan fisik, dan perlakuan mekanis.Dalam uji Biuret ini, yang pertama kali disiapkan adalah peraksinya lalu sampel dimasukkan ke dalam pereaksi yang telah siap. Hal ini bisa dilakukan sebaliknya asalkan larutan pereaksi telah dipersiapkan terlebih dahulu. Peptida tersusun oleh suatu rantai panjang asam-asam amino yang saling berhubungan oleh adanya ikatan peptida, yang terbentuk diantara gugusan karboksil suatu asam amino dengan gugusan amino lainnya. Satu molekul air akan terkeluarkan pada pembentukan suatu ikatan peptide. Sintesis ikatan peptida dalam sel merupakan suatu mata rantai reaksi yang sangat kompleks (Almatsier, halaman 100,1996).

IV KESIMPULAN DAN SARAN

Bab ini akan menjelaskan mengenai : (1) Kesimpulan dan (2) Saran.

4.1 KesimpulanDari hasil percobaan Uji Biuret yang telah dilakukan, maka dapat diketahui bahwa seluruh sampel yaitu bubur bayi, sari kacang ijo, sosis jagung, dan smoke beef mengandung ikatan peptida. Hasil yang didapat sesuai dengan hasil yang seharusnya.

4.2 SaranDisarankan agar praktikan melakukan praktikum dengan sungguh-sungguh dan berkonsentrasi penuh agar tidak terjadi kesalahan dalam pengamatan. Pemahaman akan prosedur percobaan sangat diperlukan agar praktikum berjalan lancar.

DAFTAR PUSTAKA

Almatsier, Sunita. 1996. Prinsip Dasar Ilmu Gizi. Gramedia Pustaka Utama, Jakarta.Kusnandar, Feri. 2010. Kimia Pangan Komponen Makro. Penerbit Dian Rakyat, Jakarta.Poedjiadi, Anna. 2005. Dasar-dasar Biokimia. Universitas Indonesia, Jakarta.Sudarmadji, Slamet dkk. 2010. Analisa Bahan Makanan dan Pertanian. Liberty Yogyakarta, Yogyakarta.

Documents

BIURET