Embed Size (px)
Citation preview
Facultad de Ciencias BiológicasBIO252
Morfología y Agrupaciones Bacterianas
Profesor:Mario [email protected]
Eucariontes y Procariontes
Los organismos procariontes carecen de sistemas de endomembranas
Procariontes
20 µm
Bacilos en la punta de un alfiler
¿Qué tan pequeños son los microorganismos?
¿Qué tan pequeños son los microorganismos?
Resolución es la capacidad de detectar
dos puntos como independientes
Microscopio de Van Leeuwenhoek
Microscopio de Hooke
Microscopio óptico
Microscopía
Microscopio electrónico
Microscopía óptica
Campo claro (luz)
Campo oscuro
Fluorescencia, etc.
Aumento efectivo: 1.000 veces
Microscopía
Microscopía
Microscopía electrónica
Transmisión (en 2D)
Barrido (3D)
Aumento efectivo: 1.000.000 de veces
Campo claro
Es descendiente de los microscopios primitivos
La muestra a observar debe ser fina para que pueda ser atravesada por la luz
Generalmente se utilizan tinciones porque el campo claro no produce contraste
Microscopía óptica
Campo oscuro
El objetivo recibe la luz reflejada
La muestra se ilumina con luz fuerte indirecta
Permite observar células sin teñir y resulta especialmente útil para células vivas
Contraste fase
El objetivo recibe la luz refractada o difractadaLa muestra es iluminada por la luz que atraviesa un diafragma anular
Permite observar con mayor nitidez estructuras celulares y muestra con claridad la cubierta externa
Microscopía óptica
Fluorescencia
Permite marcar estructuras específicas o células determinadas con fluoróforos (emiten luz cuando son excitados)
Bacterias
Células de ratón
Microscopía óptica
Neurona
Transmisión
Virus
Es análogo al microscopio óptico de campo claro pero utiliza electrones en vez de luz
Microscopía electrónica
Barrido
Permite tomar imágenes tridimensionales porque capta los electrones que rebotan en las células cubiertas con una delgadísima película de un metal denso
Bacilos
Microscopía electrónica
Levaduras
Bacterias
Microscopía óptica. Tinciones simples
Creada por el danés Hans Christian Gram en 1884
Es capaz de dividir a la gran mayoría de las bacterias en dos grupos según sus propiedades de tinción
Corresponde a la tinción más importante en la microbiología
Indicada para la observación de morfología y agrupación bacteriana
Fundamental en la identificación de agentes etiológicos
Microscopía óptica. Tinciones diferenciales. GRAM
Gram (-)
Gram (+)
Tinción de Gram
Gram (-) Gram (+)
La pared celular define a las bacteriasGram (+) y (-)
Mycobacterium
Se calienta una solución fucsina básica, la cual penetra a la célula con la ayuda de fenolSe decolora con solución con ácido – alcohol y se agrega una tinción de contraste (azul de metileno)Sólo las bacterias ácido – alcohol resistentes retienen el color rojo
También llamada tinción de ácido – alcohol resistencia
Tinciones diferenciales.Ziehl-Nielsen
Tinciones especiales.Negativa de Cápsula
Se realiza con tinta chinaEn este caso se tiñe todo menos la cápsula
Se realiza con verde malaquita (el cual presenta afinidad por las esporas) y una tinción de contraste.
Tinciones especiales.Esporas
Principales morfologías bacterianas
Esférica(Cocos, cocáceas)
Microscopía electrónica de barrido
Microscopía óptica; tinción de Gram
Staphylococcus aureus
Principales morfologías bacterianas
Cilíndrica alargada(Bacilos)
Bacillus subtilis
Escherichia coli
Principales morfologías bacterianas
Cilíndrica curva(Bacilos curvos)
Vibrio cholerae
Principales morfologías bacterianas
Espiral(Espirilos, espiroquetas) Alargada
(Filamentosas)
Treponema pallidum Actinomyces israeli
Principales morfologías bacterianas
Planos de división celular definen la agrupación bacteriana
Agrupaciones bacterianas
Cadena(del griego: Strepto)
Streptococcus pyogenes
Principales agrupaciones bacterianas
Racimo(del griego: Staphylo)
Staphylococcus aureus
Principales agrupaciones bacterianas
Pares(Diplo)
Agrupaciones pequeñas y empacadas
(Tétradas, octetos)
Neisseria gonorrhoeae Sarcina lutea
Principales agrupaciones bacterianas
Morfología
Estructura Involucrada: Pared Celular
Ejemplos:
Cocáceas
Bacilos
Vibrios
Espirilos
Agrupación
Proceso Involucrado: División Celular
Ejemplos:
Cadenas
Racimos
Duplas
Tétradas, Octetos
Identificación del agente etiológico
Tratamiento
1era Etapa en el Diagnóstico Microbiológico
Identificación
Siembra y aislamiento:
Tubos. Medio líquido y sólido:Sólo siembra
Placas. Medio Sólido:Siembra y aislamiento
Morfología macroscópica
Siembra y aislamiento:
Morfología macroscópica
S. aureus
S. aureus
S. aureus
S. aureus
Colonias deS. aureus
Morfología macroscópica. Colonia bacteriana.
Morfología de colonias:
Morfología macroscópica
Colonias: Agrupación bacteriana producida por la división sucesiva de una bacteria original. La colonia se observa a simple vista.
Bacterias teñidas con Tinción Gram. Se observan microscópicamente.
Observación Macroscópica
Observación Microscópica
Morfología microscópica v/s macroscópica
Cultivo puro
Morfología de colonia y de tinción de Gram
PropiedadesBioquímicas
PropiedadesAntigénicas
Característicasde crecimiento
Fermentación de glucosaUtilización de citratoProducción de H2S
etc.
Reacciones serológicasAnticuerpos específicos
TemperaturaAerobiosis
Anaerobiosisetc.
Identificación
Características genéticas o moleculares
Porcentajede G+C
Homología en la secuencia del genoma
PropiedadesBioquímicas
PropiedadesAntigénicas
Característicasde crecimiento
Codones utilizados para codificarlos distintos aminoácidos.
TTA, TTG, CTT, CTC, CTA y CTGLeucina
Principalmente aquellos que codifican
para RNA ribosomales
Identificación
Análisis MICRO
GRAM NEGATIVO GRAM POSITIVO
FORMA BACILAR FORMA NO BACILAR
AERÓBICO ESTRICTO
ANAEROBIOFACULTATIVO
NO FERMENTALACTOSA
FERMENTALACTOSA
CITRATOPOSITIVO
CITRATONEGATIVO
INDOL POSITIVO
INDOL NEGATIVO
Escherichia coli
Análisis MACRO
subtipificación
Análisis genético –moleculares
Identificación
Gram (+) Gram (-)
La pared celular define a las bacterias Gram (+) y (-).
