Collembola szaporodásának vizsgálata vegyi anyaggal

szennyezett talajokon

Bevezetés

• A vizsgálat célja, annak meghatározása, hogy szennyezett talaj hogyan befolyásolja a collembola (ugróvillások) szaporodási képességét

• Az ugróvillások ökológiailag fontos fajok a talaj szennyezettségének meghatározásánál.

• A szennyezett talajok ökotoxikológai tesztelésére igen alkalmasak, mert nagyon érzékenyek a talajlevegő szerves szennyezőanyagaira.

• A collembola szinte minden talajtípusban előfordul, gyakran 105 db is található m2-enként.

• Kedveli a humuszban gazdag talajokat.

A vizsgálat elve

• Szerves anyaggal szennyezett (OECD előírás) mesterséges talajon vizsgáljuk a collembola szaporodását.

• Az értékelést: 2 hét, majd 3 hét elteltével végezzük.

• A talaj szennyezettségét a felnőtt állatok halálozási és szaporodási %-ával határozzuk meg.

A vizsgálat kritériumai

• A kontroll felnőtt ugróvillások halálozási %-a a vizsgálat végén nem haladhatja meg a 20%-ot.

• A vizsgálat végén a fiatal állatok száma vizsgálati edényenként nem haladhatja mega 100-at.

• A variációs együttható számításánál a fiatal állatok számának 30%-nál kevesebbnek kel lennie.

• A referencia anyagot időközönként meg kell vizsgálni.• A referencia anyagban a bórsav nem lehet több 100

mg/kg száraz talajra vonatkoztatva, mert akár 50%-al is csökkentheti az állatok szaporodási képességét.

A vizsgálat leírása

• Vizsgálati edények, eszközök:– A vizsgálati edények 30 g nedves talaj

befogadására legyen képes– A vizsgálati edény anyaga lehet üveg, vagy

nem toxikus műanyag,– A vizsgálati edény mélysége 2-3 cm, – A vizsgálati edény fedele legyen átlátszó, és

biztosítsa a talaj párolgását, légcseréjét, csökkentse a víz párolgását,

A vizsgálat leírása

• Szükséges berendezések– Szárítószekrény,– Sztereó mikroszkóp– pH mért és luxmérő– Megfelelő pontosságú mérleg– Hőmérséklet szabályozózó– Páratartalom szabályozózó berendezés– Inkubátor szoba hőmérsékletét szabályozó

berendezés– Csipesz, vagy kis szívó légáram készülék

A vizsgálat leírása

• A vizsgált talaj:• Módosított OECD mesterséges talaj, szerves

anyag tartalma 5%– 5% tőzegmoha tőzeg, levegőn szárított

finomra őrölt– 20% kaolin (kaolin tartalom min 30%)– 74% ipari homok 1% CaCO3 analitikai tisztaságú

A vizsgálat leírása

• Előkészítés:– Az összetevők összekeverése, (laboratóriumi

mixer)– A talajt nevesítése ionmentes vízzel –

optimum 40–60%– pH meghatározása, beállítása– Talaj szennyezése – vizsgálandó szerves

oldószerrel, peszticiddel

Vizsgálati eljárás

• Körülmények:– A vizsgálati középhőmérséklet 20 ± 1 °C

hőmérséklet tartományban 20 ± 2 °C,– A világos sötét ciklus (12 óra világosság, 12 óra sötét)– Megvilágítás erőssége 400 és 800 lux az edény

falán,– Egyenletes talajnevesség biztosítása fogyás 2%,– Páratartalom 80%– pH-t elején végén mérni kell

Vizsgálati eljárás• Mérések

– Minden vizsgálati edénybe 30 g friss vizsgálati talaj kerüljön– Az oldószer vagy diszpergálószer koncentrációja minden

vizsgálati edényben ugyan az legyen– Az ugróvillásokat kis szívó berendezéssel áthelyezzük a vizsgált

talajra (10 hím 10 nőstény)– Kb. 2–3 mg granulált sütőélesztőt – élelmiszer forrás- adjunk az

állatkáknak– Az vizsgálati edényeket behelyezzük az inkubátorba– A 21. napon az állatokat megszámoljuk (nemenként, a nőstények

nagyobbak)– 9 – 12 napos ivadékokat is megszámoljuk– 28. napon távolítsuk el a talajból az állatokat– Számoljuk meg az elpusztult állatokat– A vizsgálat végén statisztikai módszerrel határozzuk meg

eredményt

Eredmények értékelése• A reprodukciós teljesítmény a fő

végpont (pl. utódok száma)• A statisztikai elemzés, pl. ANOVA

eljárás • Összehasonlító elemzés Student t-

próba, Dunnett's vagy Williams "teszt• A túlélő felnőttek számának

dokumentálása• LCX, ECx-érték meghatározása,

statisztikai módszerekkel (pl. logisztikai vagy Weibull funkció, vágott Spearman- Karber módszer, vagy egyszerű interpoláció).

• EC50 vagy bármely más ECx meghatározása

• Ökotoxicitás meghatározása

A vizsgálat végén a túlélő collembolák

Készítette: Vlaj Lajosné hallgató

– Gazdaság és Társadalomtudományi Kar/mérnöktanár– I. éves levelező Tanári mesterszak (MA)– Gruiz Katalin: Környezettoxikológiai című tárgyához évközi

feladatként

Budapest, 2011. 04. 07.

Forrás: Collembolan Reproduction Test in Soil www.oecd.org • http://www.google.hu/search?q=collembolans&hl=hu&sa=G&prmd=

ivns&tbm=isch&tbo=u&source=univ&ei=QBmeTa3hAtH3sgbTxIGlBA&ved=0CGQQsAQ&biw=1259&bih=606