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7/23/2019 Como Extraer Colesterol de Los Cálculos Biliares
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Como extraer colesterol de los cálculos biliares
http://es.wikihow.com/extraer-colesterol-de-los-c%C3%A1lculos-biliares
El colesterol es un esteroide orgánico natural que constituye un componente
estructural de las membranas celulares de los mamíferos y les proporciona propiedades de permeabilidad y fluidez. Además, el colesterol es un
precursor importante para la síntesis de los ácidos biliares, hormonas de
esteroides y algunas vitaminas liposolubles. El colesterol se encuentra en la
médula, cerebro y el tejido nervioso.!"
#a vesícula biliar concentra la bilis producida por el hígado y la libera
durante la digesti$n. #a vesícula biliar también act%a como una reserva para
el colesterol libre, lo cual puede precipitarse y formar cálculos o piedras, si
la concentraci$n del colesterol en la bilis pasa de un nivel crítico. #a
acumulaci$n de cálculos biliares puede dar lugar a irritaci$n de la vesícula,
asociada con dolor, náuseas y v$mitos. &ambién puede obstruir un conducto
biliar dando lugar a complicaciones que necesiten de cirugía 'conocido
como colecistectomía( para quitar la vesícula con sus cálculos. )iguiendo
los pr$*imos pasos te ayudaremos a e*traer colesterol de los cálculos
biliares.
1.
1. Obtén cálculos biliares. En algunos hospitales es posible pedir cálculos biliares del
departamento de cirugía o de patologías
2. Coloca los cálculos entre hojas de papel [2] y aplástalos suavemente
con un martillo.
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3. Lava los cálculos con lejía (en una solucin de hipoclorito de sodio
!"# para esterili$arlos.
%. &esa los cálculos aplastados. Apunta el peso porque será importante
más adelante para estimar la cantidad de solente.
!. 'ade los cálculos aplastados a un recipiente de reaccin de vidrio.
). 'ade 2*butanona (tambi+n conocido como metiletilcetona#, - ml
(i/ual 0ue - cc# por cada /ramo de cálculos biliares aplastados, al
recipiente de reaccin y calienta hasta hervir a 1ue/o lento. "emuee.
#a soluci$n tendrá un color entre amarillo sucio marr$n por la bilirrubina& el
pi'mento de la bilis.
(. Filtra la solución caliente por un disco de papel de filtro en un embudo hacia
un recipiente limpio. +tiliza un sistema de filtraci$n al vacío para facilitar el
proceso. Enjuaga el recipiente de reacci$n con una cantidad pequea de -butanona
caliente y transfiere el lavado al embudo. El colesterol se disolverá completamente
en el solvente de -butanona, mientras las impurezas insolubles 'bilirrubina en su
mayoría, un metabolito de hemoglobina que da los cálculos biliares su color
marr$n( se quitarán por filtraci$n durante el proceso de e*tracci$n.
o )i el filtrado 'el eluato( queda con un color fuerte, aade carb$n vegetal y
vuelve a filtrar.
/. 'ade metanol (ojo el metanol es mu t$xico) al *ltrado& unos ! ml +! cc)
por 'ramo de cálculos biliares aplastados.
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,. Calienta el ltrado hasta 0ue hierva. Aade a'ua 'ota a 'ota hasta
conse'uir que sea un poco turbio. l colesterol es mu soluble en -butanona&
menos soluble en metanol e insoluble en a'ua. Aadir el a'ua como
precipitante en la soluci$n audará a saturar la soluci$n con colesterol para lacristali0aci$n. l metanol es necesario para actuar como medio entre los
solentes: la -butanona a'ua no son miscibles untos& pero el metanol s2 lo
es tanto con a'ua como con -butanona.
1. 4uita la solucin del calor con cuidado. nuele el contenedor de
reacci$n caliente con una protecci$n de al'od$n o tipo toalla& utili0ado como
aislamiento& para que se en4r2e más despacio& hasta que lle'ue a temperatura
ambiente.
11. Cuando est+ a temperatura ambiente, desenvuelve el contenedor y
en1ría en hielo. sto permitirá la cristali0aci$n de más colesterol de la
soluci$n.
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1. 5eco/e el colesterol por ltracin. l resultado será 'randes placas
cristalinas sin color a'uas de colesterol& un (!% del material inicial +los
cálculos biliares). 5uarda el *ltrado. 6i deseas un rendimiento maor& es
posible obtener un se'undo producto de menor pure0a si hieres el *ltrado&
aades a'ua 'ota a 'ota repites el proceso de cristali0aci$n.
• #lea a cabo este proceso en un sitio con buenaentilaci$n.
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• 7ieles eleados de colesterol en una alta proporci$nde #8# +colesterol malo) con respecto a 98# +colesterolbueno) resulta en la deposici$n del colesterol en laes2cula biliar +que puede dar lu'ar a cálculos biliares)
en las paredes de las arterias +como un placa queimpide el uo de la san're conllea alendurecimiento de las arterias& un proceso conocidocomo arteriosclerosis).;1<
adertencias
• #lea a cabo este proceso en un sitio con buenaentilaci$n.
• 7ieles eleados de colesterol en una alta proporci$nde #8# +colesterol malo) con respecto a 98# +colesterolbueno) resulta en la deposici$n del colesterol en laes2cula biliar +que puede dar lu'ar a cálculos biliares) en las paredes de las arterias +como un placa queimpide el uo de la san're conllea alendurecimiento de las arterias& un proceso conocido
como arteriosclerosis).;1<
Cosas que necesitas
• +nos cálculos biliares
• #ejía
• +na báscula
• +n recipiente de reacci$n de vidrio
• -0utanona
• 1etanol
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• Agua
• +na placa caliente
• +n equipo de filtraci$n 'embudo, un disco de papel de filtro, uncontenedor limpio, un sistema para filtrar al vacío(.
• 2arb$n vegetal 'opcional(
"e4erencias
3eferencias
1. = 1& 1&1 >. #. ?illiamson& @acroscale and @icroscaler'anic xperiments& nd d. 1,,B& 9ou'hton @iin&Doston. p3 "e. 1/,/
. = @ao& 8.?.& Eike& ".@.& Dutcher& 6.6. and Frumper&E.>. @icroscale Fechniques 4or the r'anic #aboratorG?ile: 7ew Hork& 1,,1
3. = 6chwet0 et al. +1,,1). I8eelopmental toxicit o4inhaled methl ethl ketone in 6wiss miceI. Jund. Appl. Foxicol. 1K: (BL(BM. doi:1.11K/(-!,+,1),1K-K
B. = http://www.incb.or'/pd4/e/list/red.pd4 the Nnited7ations Conention A'ainst Ollicit FraPc in 7arcotic8ru's and Eschotropic 6ubstances
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https://books.'oo'le.com.pe/booksQidReuFJ6!rM1'CSp'REA,Slp'REA,SdqROsolateTCholesterolT4romT5allstonesSsourceRblSotsRtuUrh(dpF6Ssi'ROV9AmH6ddVdJlWBM@sKrWuwHShlResSsaRWSeiR45haU4WDp>EA6N,o8BCXSedRC8NXKAwAwYRonepa'eSqROsolate%Cholesterol%4rom%5allstonesS4R4alse
SECRECION E !I"IOS #I!I$RES % !I&O'ENESIS+JO6OEAF#5ZA 8 #A #OFOA6O6 DO#OA")
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@C-31-A
8r. Vuan Jco. @iquel E.
8epartamento de 5astroenterolo'2a
Jacultad de @edicina
Eonti*cia Nniersidad Cat$lica de Chile
Ob(eti)os principales4
! 2onocer la relevancia, origen y mecanismos de secreci$n hepática de lípidos biliares'colesterol, sales biliares y fosfolípidos(.
- 2onocer la composici$n y las funciones fisiol$gicas de la secreci$n biliar.
5 2onocer los mecanismos fisiopatol$gicos involucrados en la formaci$n de cálculos enla vesícula biliar y la composici$n química de los cálculos.
6 2omprender la relevancia epidemiol$gica, las consecuencias e implicancias clínicas
generales de la colelitiasis.
I SECRECION E !I"IOS #I!I$RES
' 6ntroduccin
El hígado es un $rgano central en el metabolismo del colesterol corporal y el %nico $rgano
capas de secretar hacia el medio e*terno, vía secreci$n biliar, cantidades significativas decolesterol, ya sea como colesterol libre o mediante su conversi$n a sales biliares. El
colesterol es una molécula esteroidal fundamental en la estructura de las células
'membranas celulares( y sirve como sustrato para distintas moléculas que cumplenfunciones biol$gicas muy relevantes 'e.j. hormonas esteroidales, vitamina 7, sales biliares(.
7ado que el colesterol es a su vez una molécula altamente insoluble en agua y es t$*ica
para la célula cuando está en e*ceso, se requieren mecanismos que regulen finamente su balance corporal e intracelular, como también su transporte en fluidos corporales 'plasma y
bilis(. Alteraciones en la regulaci$n de este balance metab$lico llevan al desarrollo de
enfermedades altamente prevalentes en nuestra poblaci$n, como lo es la aterosclerosis
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'precipitaci$n de colesterol en las paredes arteriales( y la colelitiasis 'precipitaci$n de
colesterol en la vía biliar(.
7 8ecrecin hepática de colesterol biliar
l h2'ado capta en 4orma mu e*ciente el colesterol lipoproteico tantode ori/en diet+tico +transportado en el plasma en quilomicrones& rX@)como de ori/en end/eno proeniente de los $r'anos peri4[ricos +e.m\sculos teido 'raso) 2a receptores lipoproteicos espec2*cos+receptores de rX@& #8#& 98#) tiene la capacidad +al i'ual que todac[lula) de sinteti0ar colesterol de novo a partir de acetato +colesterol
de neosíntesis). l colesterol dentro del hepatocito +tanto elproeniente de lipoprote2nas como de neos2ntesis) tiene distintasposibilidades de destinaci$n: a) puede ser esteri*cado para ser
almacenado en 'otas de 'rasa o ser incorporado a part2culaslipoprot[icas U#8# para secreci$n hacia el plasmaG la en0ima clae enesta 2a metab$lica es denominada ACAF +acyl-coenzyme A:cholesterol
acyltransferase)& b) puede ser incorporado a la membrana plasmática/o membranas de or'anelos intracelulares& c) puede ser destinado as2ntesis de sales biliares +6D) para su posterior secreci$n biliarG las
en0imas limitantes de esta 2a metab$lica son la colesterol (-α-
hidroxilasa +Cp(a1) la oxsterol (-α-hidroxilasa +Cp(b1)G esta 4unci$nmetab$lica s$lo ocurre en el h2'ado& d) puede ser secretado como
colesterol libre hacia la bilis& unto a 6D 4os4ol2pidos. stas 2asmetab$licas del colesterol en el h2'ado se 'ra*can en la /ura -. 8eesta 4orma el h2'ado es un $r'ano clae en censar re'ular los nielesde colesterol en el plasma es la principal 2a de excreci$n o escape demol[culas esteroidales en nuestro or'anismo.
l colesterol hepático que será secretado hacia la bilis& debe primero serdestinado ectorialmente hacia el polo canalicular del hepatocitoG unae0 alcan0ado este compartimento celular& debe salir hacia el lumenbiliar +canal2culo biliar) ser mantenido en una soluci$n estable. 7o está
a\n del todo claro los mecanismos responsables de la destinaci$n delcolesterol hacia el polo canalicular como esta mol[cula alcan0a ellumen biliar. #o que s2 sabemos es que la secreci$n biliar de colesterolrequiere como 4uer0a impulsora indispensable la secreci$n concomitantede los otros dos l2pidos biliares& sales biliares 4os4ol2pidos +/ura 2). 6ise bloquea hipot[ticamente la secreci$n de sales biliares /o de4os4ol2pidos& el h2'ado será incapa0 de secretar colesterol hacia la bilis.
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C 8ecrecin hepática de sales biliares (87#
#as 6D son deter'entes corporales naturales se sinteti0anexclusiamente en el h2'ado a partir de colesterol mediante una cascadaen0imática. l h2'ado sinteti0a ácido c$lico quenodeoxic$lico+denominadas 6D primarias)& las que son conu'ados con aminoácidos'licina o taurina. #as 6D son transportadas hacia el polo canalicular delhepatocito secretadas hacia la bilis contra una 'radiente deconcentraci$n mediante la acci$n de un transportador de membranadenominado D6E +bile salt export protein). #as 6D secretadas hacia labilis son la principal 4uer0a osm$tica +solutos con capacidad osm$tica)para la secreci$n de a'ua hacia el lumen biliar la mantenci$n del uo
biliar. #a secreci$n de colesterol lecitina es a su e0 dependiente de lasecreci$n de sales biliares& dada la capacidad deter'ente +puedensolubili0ar l2pidos como colesterol lecitina) de estas mol[culas. #assales biliares secretadas hacia la bilis alcan0an el intestino en el 2leondistal son recaptadas e*cientemente por un receptor ileal espec2*co+Obat)& lleadas por 2a portal al h2'ado donde son recapturados en 4ormamu e*ciente por un transportador ubicado en el polo sinusoidal delhepatocito +7FCE) para ser nueamente secretado hacia la bilis. 8e esta4orma las 6D pasan a 4ormar parte de lo que se denomina la circulación
enterohepática de SB +/ura 3). 7ormalmente& casi la totalidad de lamasa de 6D en el or'anismo +denominado pool de 6D) está con*nado ala circulaci$n enterohepática de 6D. #as 6D expuestas a las bacteriasintestinales pueden su4rir deconu'aci$n +remoci$n de aminoácidos) odehidroxilaci$n& 4ormando las denominadas 6D secundarias +deoxic$lico&litoc$lico). #as 6D& ademásde ser productos *nales de de'radaci$n delcolesterol& cumplen importantes 4unciones metab$licas como poreemplo: a. mantener el uo biliar& b. solubili0ar el colesterol biliar& c.
solubili0ar emulsionar nutrientes liposolubles +colesterol& 'rasas&itaminas liposolubles) permitiendo su absorci$n intestinal.
9 8ecrecin hepática de 1os1olípidos
#os fosfolípidos constituyen los segundos solutos de la bilis desde un punto de vista
cuantitativo. El hígado secreta casi e*clusivamente fosfatidilcolina 'o lecitina(, lo que
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refleja un mecanismo de selecci$n altamente específico por parte del hepatocito. #a lecitina
destinada a secreci$n biliar se origina fundamentalmente de neosíntesis hepática 'síntesisen el retículo endoplásmico de hepatocitos( y una fracci$n menor parece originarse de
lipoproteínas plasmáticas de alta densidad '87#(. #a lecitina es transportada hacia la
membrana canalicular del hepatocito y secretada hacia la bilis por un mecanismo facilitado
por una proteína que se e*presa en el canalículo biliar, denominada 1735. Esta proteínafacilita la transferencia específicamente de lecitina desde el citoplásma hacia el lumen del
canalículo biliar, desde donde este lípido es e*traído hacia la bilis por el efecto detergente
de las sales biliares presentes en el canalículo biliar. 9or lo tanto, la secreci$n de lecitinadepende por una parte de una adecuada funci$n de esta proteína 1735 y por otra parte, de
la secreci$n de sales biliares 'fi*ura +(.
II CO,"OSICION E !$ #I!IS % SO!-#I!I$CION E! CO!ES&ERO!
#I!I$R.
#a bilis es un fluido complejo generado por la secreci$n hepática 'hapatocitos( ymodificado 'secreci$n, absorci$n( por la vía biliar 'colangiocitos( en su tráfico desde el
hepatocito hacia la vesícula biliar y el intestino. )us principales solutos son las sales
biliares ':/;(, lecitina '--;(, colesterol libre '6;(, proteínas '6,<;( y bilirrubina '=,5;(.7ado que el colesterol es una molécula prácticamente insoluble en agua, la presencia de
sales biliares y lecitina en la bilis es fundamental para mantener en soluci$n al colesterol
biliar. En condiciones fisiol$gicas esto se logra formando complejos moleculares donde seasocian estos tres lípidos en relaciones de concentraci$n 'relaci$n molar( definidas que le
dan estabilidad en una soluci$n acuosa. Estos complejos moleculares son denominados
micelas mi*tas 'sales biliares, lecitina, colesterol( y vesículas o liposomas 'lecitina ycolesterol(. )e cree que en el canalículo biliar el colesterol es transportado casi
e*clusivamente en vesículas y luego a medida que la bilis se concentra e incrementa la
concentraci$n relativa de sales biliares, predomina el transporte en estructuras micelares.
El fluido biliar es más estable desde un punto de vista termodinámico cuando el colesterol presente es solubilizado en micelas mi*tas. 2uando e*iste un e*ceso relativo de colesterol
en la bilis se habla de una bilis sobresaturada '> índice colesterol?sales biliares@lecitina(.
En estas condiciones la bilis se vuelve inestableB siendo las micelas mi*tas más ricas encolesterol y persisten en la bilis vesículas o liposomas ricos en colesterol. En estas
condiciones el colesterol tiende a salir de una fase soluble estable, a una fase insoluble
inestable y precipitar.
III. "$&O'ENI$ E !$ !I&I$SIS #I!I$R
$. Rele)ancia de la enfermedad por cálculos )esiculares /colelitiasis0.
#a presencia de cálculos en la vesícula biliar es una enfermedad muy frecuente en los
países occidentales. Esta enfermedad alcanza una frecuencia especialmente elevada enalgunas poblaciones de América, en particular en nuestro país. En 2hile, más del :=; de
las mujeres y más del 5=; de los hombres sobre <= aos han tenido o son portadores de
cálculos en la vesícula biliar. 9or esta raz$n, la operaci$n abdominal más frecuenterealizada en los servicios de cirugía en 2hile es la cirugía destinada a tratar los cálculos
vesiculares 'colecistectomía(. #a litiasis vesicular es a su vez el principal factor de riesgo
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para desarrollar cáncer de la vesícula biliar, la complicaci$n más grave de la litiasis
vesicular. El cáncer de la vesícula biliar es la principal causa de muerte por cáncer en lasmujeres 2hilenas y la cuarta causa de muerte por cáncer en hombres. &odo esto hace que la
colelitiasis sea una enfermedad que genera un gran impacto de morbilidad y de costos
directos e indirectos generados por esta enfermedad en el sistema de salud en 2hile.
#. Composición u2mica de los cálculos )esiculares
#a composici$n química de los cálculos se estima analizando mediante diferentesmetodologías los componentes específicos de los cálculos secos y triturados. En occidente
y en 2hile, el /= a C=; de los cálculos son de colesterolD esto quiere decir que más del <;
de su peso seco es colesterol libre. Apro*imadamente un !=; de los casos son decomposici$n mi*ta 'de colesterol y pigmento( y un <; son pigmentarios 'más del /=; de
su peso seco es bilirrubinato de calcio fundamentalmente(.
El desarrollo de cálculos pigmentarios en la vía biliar, menos frecuentes de ver, obedecen a
mecanismos patogénicos muy diferentes a los cálculos de colesterol . )e postula que su patogenia se debe a la deconjugaci$n de la bilirrunina secretada a la bilis, por presencia de
bacterias que han colonizado la vía biliar y que contienen una enzima denominada β
Flucuronidasa capaz de deconjugar la bilirrubina biliar. #a bilirrubina noconjugada es
menos soluble en agua y precipita formando complejos con el cálcio presente en la bilis,formando agregados insolubles de 0ilirrubinato de 2alcio. 9or ello, los cálculos
pigmentarios son más frecuentes de ver en condiciones donde se ve facilitada la
colonizaci$n o infecci$n cr$nica de la vía biliar por bacterias de origen entérico. 9or ser poco frecuentes en nuestro medio, no nos referiremos mayormente a este tipo de cálculos.
C. Fases de la formación de cálculos biliares de colesterol.
)e reconoce que la formaci$n de colelitiasis por cálculos de colesterol es en m%ltiplesetapas probablemente sucesivas y sobrepuestas 'fi*ura 3(. )e requiere inicialmente la
formaci$n de una bilis sobresaturada de colesterol en forma sostenida en el tiempo '1ra
fase(. Esta etapa inicial indispensable es causada porque el h2*ado hipersecreta colesterol
y no por un defecto o menor secreci$n de sales biliares o lecitina. 9or lo tanto, la colelitiasis
de colesterol debe ser entendida como un defecto hepático en el metabolismo del colesterol. Go está claro a%n cual o cuales son los mecanismos que condicionan esta situaci$n, pero
e*isten evidencias que sugieren que puede estar determinada tanto por factores genéticos
'uno o más genes( y por factores ambientales 'ej. dieta, balance energético(. #os factoresde riesgo clínicos que favorecen el desarrollo de colelitiasis se asocian efectivamente a
estados de mayor secreci$n de colesterol biliar '&abla 1(.
)in embargo, la presencia de una bilis sobresaturada es frecuente en el ser humano adulto, yno necesariamente lleva al desarrollo de cálculos. )e requiere una 4da fase donde el
colesterol cristaliza y precipita 'denominada fase de nucleaci$n o cristalizaci$n( formando
pequeos cristales o HmicrocálculosH visibles a microscopía $ptica. )e ha postulado que
esta fase puede ser facilitada por mayores niveles de saturaci$n de colesterol biliar, mayor tiempo de retenci$n 'estasia( de la bilis inestable en la vesícula 'ayuno prolongado por
ejemplo( y?o proteínas biliares que pueden facilitar este proceso de cristalizaci$n del
colesterol biliar 'ej. mucina o mucus secretado por el epitelio biliar(. Además, para formar
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cálculos visibles macrosc$picamente, estos cristales de colesterol deben crecer y agregarse
en forma progresiva '5ra fase de crecimiento(D esta tercera etapa es de velocidad muyvariable y puede tomar semanas, meses o generalmente aos.
. Rol de la )es2cula biliar en la formación de cálculos de colesterol
#a vesícula biliar cumple una funci$n de reservorio de bilis durante los períodos de ayuno.
7urante ese tiempo la vesícula biliar se llena de bilis para luego absorber activamente agua
y electrolitos, concentrando los solutos biliares 6 a vecesD una fracci$n de colesterol ylecitina '!<-=;( puede ser absorbida también por el epitelio biliar. #uego, frente a la
ingesti$n de nutrientes la vesícula biliar se contrae activamente y vacía su contenido al
colédoco y desde ahí al duodeno. Irente a la presencia de una bilis litogénica'sobresaturada de colesterol y con cristales de colesterol(, la vesícula biliar e*perimenta
cambios morfol$gicos y funcionales notorios que van a favorecer a su vez la formaci$n de
cálculos 'fase dos 6 tres(. 9or esta raz$n la gran mayoría de los cálculos de la vía biliar se
forman y residen en la vesícula biliar 'más del C<; de las veces(.#a bilis litogénica produce los siguientes cambios en la vesícula biliar4
! Jncrementa su tamao y peso 'mayor grosor de la pared vesicular(.
- )e llena menos eficientemente en los períodos de ayuno, y disminuye su capacidadcontractil posterior a las comidas 'disminuye el vaciamiento de su contenido(.
5 Jncrementa la secreci$n de mucus 'mucina( y otras proteínas.
6 E*iste inflamaci$n cr$nica y a veces fibrosis de su pared.Estos cambios son progresivos pero se inician en etapas iniciales de la enfermedad, y son
una consecuencia o respuesta de este $rgano a la presencia de una bilis litogénica en forma
sostenida. El colesterol biliar en e*ceso pareciera ser el principal factor inductor de estoscambios 'recordar que el colesterol libre e*cesivo es t$*ico para las células(. &odos estos
cambios de la vesícula biliar tienden a favorecer la cristalizaci$n del colesterol biliar,
agregaci$n y crecimiento de los cálculos, al e*istir mayor tiempo de residencia de
colesterol precipitado 'cristales( en su lumen. #a secreci$n incrementada de mucinafavorece más este proceso formando una matriz mucinosa, viscosa y adherente 'sustrato
inmovil( en la cual los cristales de colesterol pueden adherirse y crecer 'fi*ura 7(.