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Red de Comunicación e Integración Biomédica Red CIB 13 de agosto del 2009 UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE CIUDAD JUÁREZ INSTITUTO DE CIENCIAS BIOMÉDICAS DEPARTAMENTO DE CIENCIAS BÁSICAS CUANTIFICACIÓN DE COLIFORMES FECALES EN LODOS RESIDUALES DURANTE EL PROCESO DE SECADO SOLAR POR CYNTHIA FIGUEROA HERNÁNDEZ DIRECTORA DE TESIS DRA. ALMA DELIA COTA ESPERICUETA [email protected] TESIS LICENCIATURA EN QUÍMICA CIUDAD JUÁREZ, CHIH. NOVIEMBRE, 2007 Autor de correspondencia

CUANTIFICACIÓN DE COLIFORMES FECALES EN … Licenciatura/Química...2.2.2 Coliformes fecales y su determinación microbiológica ... Sólidos totales (ST): Son los materiales residuales

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Page 1: CUANTIFICACIÓN DE COLIFORMES FECALES EN … Licenciatura/Química...2.2.2 Coliformes fecales y su determinación microbiológica ... Sólidos totales (ST): Son los materiales residuales

Red de Comunicación e Integración Biomédica Red CIB

13 de agosto del 2009

UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE CIUDAD JUÁREZ

INSTITUTO DE CIENCIAS BIOMÉDICAS

DEPARTAMENTO DE CIENCIAS BÁSICAS

CUANTIFICACIÓN DE COLIFORMES FECALES EN LODOS

RESIDUALES DURANTE EL PROCESO DE SECADO SOLAR

POR

CYNTHIA FIGUEROA HERNÁNDEZ

DIRECTORA DE TESIS

DRA. ALMA DELIA COTA ESPERICUETA

[email protected]

TESIS

LICENCIATURA EN QUÍMICA

CIUDAD JUÁREZ, CHIH. NOVIEMBRE, 2007

✣ Autor de correspondencia

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CUANTIFICACIÓN DE COLIFORMES FECALES EN LODOS RESIDUALES

DURANTE EL PROCESO DE SECADO SOLAR

POR

CYNTHIA FIGUEROA HERNÁNDEZ

TESIS

_____________________________________________________ DRA. ALMA DELIA COTA ESPERICUETA DIRECTORA DE INVESTIGACIÓN _____________________________________________________ M. en C. KATYA AIMEÉ CARRASCO URRUTIA COORDINADORA DEL PROGRAMA DE QUÍMICA _____________________________________________________ DR. GILBERTO REYES LEAL JEFE DEL DEPARTAMENTO DE CIENCIAS BÁSICAS _____________________________________________________ M.C. HUGO SALVADOR STAINES OROZCO DIRECTOR DEL INSTITUTO DE CIENCIAS BIOMÉDICAS

FECHA:____________________________________

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DEDICATORIA

A Dios.

A mis padres, el Lic. Gerardo Figueroa y Gloria Hernández

quienes en todo momento me brindaron su amor, comprensión,

ayuda, apoyo incondicional y más.

A mi hermana Jessica, que además de ser mí mejor amiga,

siempre me ofreció su compañía y ayuda.

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AGRADECIMIENTOS

Agradezco al ICB por haber apoyado en la construcción del dispositivo experimental

y el sistema automático de control, a PROMEP por el financiamiento de los

reactivos, a la JMAS y PTAR zona Norte por la facilitación del material de

experimentación.

En agradecimiento muy especial y con toda mi más grande admiración a un gran

ejemplo a seguir; la Dra. Alma Delia Cota Espericueta, por su asesoría, enseñanza y

apoyo durante la realización de esta investigación.

A mis compañeros y amigos del Laboratorio de Ciencias Ambientales: Claudia Avítia,

Edgar Espinoza, Diego Fayett, Gilberto Lares y Fabiola Sotelo quienes junto

conmigo formaron parte de este proyecto y a quienes agradezco su valiosa

colaboración para la realización de mi investigación, pero sobre todo por haberme

dejado una gran enseñanza como lo es el trabajo en equipo.

A mis primos Benelia, Beto, Kevin y Masthay; los mejores y más locos amigos que

alguien pueda tener… y a quienes les agradezco profundamente que siempre me

hayan brindado su fiel e incondicional amistad en los buenos y no tan buenos

momentos compartidos.

A mis dos grandes amigas Karina López y Lilia Salas, de las cuales me siento muy

orgullosa por todo lo que han logrado y con las cuales estaré siempre agradecida por

todos estos años de amistad.

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A Roman; gracias por tu tiempo y paciencia. Me siento muy afortunada por haber

tenido la oportunidad de conocerte y te agradezco de todo corazón la ayuda y apoyo

que me brindaste durante todo este tiempo. Eres una persona muy especial para mí.

A mi maestra y compañeros de Tesis III, a la Dra. Laura De la Rosa por su apoyo y a

Karys, Ferni, “Karolina”, Memo, Indira, Gil, Mukthar, Mike, Claudia, Griselda y

Carlos, con quienes compartí muchos momentos de tensión y estrés “al 100” pero que

con su amistad, paciencia y buen humor hicieron de esos días aún mejores.

A mis profesores: Dra. Alma Cota; M.C Laura Santana; Dra. Alba Corral; Dra.

Laura De la Rosa; M.C Katya Carrasco; Dr. Gilberto Reyes; I.Q Paty Ramírez; I.Q

Zulema Poncio; Ing. Luis Carlos Olivares; Q.B.P Ana Rosa Alvarado; Q. Armando

Márquez; Q.B. Rosa Emma Vásquez; Q.B.P Julio César Del Hierro; Dr. Emilio

Álvarez; M.C Jesús Ángel Araujo; M.C Jorge Baylón; Q. Laura Apodaca; M.V.Z.

Jorge González; Q.B.P Araceli Salazar; Q.B.P Cynthia Silva; Q.B.P Sara

Hernández; Q.F.B Ma. Elena Morales; I.Q Lorenza Holguín; Ing. Hugo Merino;

Ing. Guillermo Barraz; Ing.Baltazar Corral; Dr. Jorge Álvarez; Lic. Liliana

Jáuregui; Q.B.P Paty Olivas; Ing. Alberto Borrego; Ing. Alfredo Acosta; Ing. Ramón

Ramírez, Lic. Liliana Ramos, Profr. Gerardo González, Lic. Cutberto Alzatre; Lic.

Raúl Carrillo.

A quienes les doy las gracias por todas sus enseñanzas y ayuda brindada a lo largo de

estos cuatro años de formación académica.

Y a todas esas personas tan especiales para mí que participaron de forma directa o

indirectamente en la realización de este trabajo y a quienes sinceramente les

agradezco de todo corazón su apoyo.

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RESUMEN

La alta producción de lodos generados en plantas tratadoras de aguas

residuales (PTAR) de Ciudad Juárez representa una gran problemática

ecológica, social y tecnológica, debido a su mal manejo, procesamiento y

disposición final. Los lodos son sustancias de carácter nocivo para la salud de

los seres vivos y de los ecosistemas; además de poseer entre el 60 y 90 %

dependiendo de las tecnologías utilizadas. Estos lodos contienen organismos

patógenos que como Salmonella spp, huevos de helminto, coliformes fecales

y sustancias tóxicas como metales pesados. Diversas enfermedades

gastrointestinales pueden ocurrir por la dispersión de patógenos ocasionada

por la acción del viento y vectores. La utilización de tecnologías de secado

solar constituye una alternativa económica y tecnológicamente viable para la

eliminación del agua y altos contenidos de microorganismos patógenos. Para

contribuir en la solución de esta problemática, los lodos de la PTAR Norte de

Juárez fueron procesados en un secador solar con el propósito de buscar

mejores mecanismos de manejo y disposición. En este estudio se

cuantificaron coliformes fecales en los lodos durante el proceso solar. La

metodología utilizada para la cuantificación fue adoptada de la Norma Oficial

Mexicana NOM-004-SEMARNAT-2002. Las variables como la humedad,

temperatura, pH y radiación demostraron ser factores importantes para el

crecimiento y sobrevivencia de las bacterias. Se observó un comportamiento

de secado del tipo exponencial, a los 4 días de residencia se eliminaron el

98.5 % de los patógenos, de una concentración inicial de 4x106 NMP/g de lodo

seco de coliformes fecales.

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TABLA DE CONTENIDO

Página

Introducción ................................................................................... 1

Capítulo 1 ................................................................................... 2

1.1 Antecedentes ................................................................... 2

1.2 Hipótesis .......................................................................... 8

1.3 Objetivos .......................................................................... 8

Capítulo 2 ................................................................................... 9

2.1 Materiales ........................................................................ 9

2.1.1 Dispositivo experimental y su operación ......................... 9

2.1.2 Punto generador de la muestra ....................................... 11

2.2 Métodos ........................................................................... 12

2.2.1 Muestreo dinámico .......................................................... 13

2.2.2 Coliformes fecales y su determinación microbiológica .... 13

2.2.3 Contenido de agua en lodos ............................................ 15

2.2.4 Preparación de soluciones .............................................. 15

2.2.5 Preparación de diluciones ............................................... 16

2.2.6 Identificación de colonias de coliformes fecales .............. 18

2.2.7 Análisis cuantitativo ......................................................... 18

2.2.8 pH de lodos ..................................................................... 19

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Capítulo 3 ................................................................................... 20

3.1 Resultados y discusión .................................................... 20

3.1.1 Remoción de agua en lodos ............................................ 20

3.1.2 Eliminación de coliformes fecales ................................... 22

3.1.3 Coliformes fecales vs pH de lodos .................................. 24

3.1.4 Radiación solar de durante el secado solar .................... 25

3.2 Conclusiones ................................................................... 26

3.3 Recomendaciones ........................................................... 27

3.4 Plan de difusión ............................................................... 28

Literatura citada ................................................................................... 29

Anexo 1. Relatoría de la problemática de lodos.. ................................. 31

Anexo 2. Tabla del NMP ....................................................................... 37

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ÍNDICE DE FIGURAS

Figura Página

1 Estadística de la problemática de contaminación respecto a

lodos generados en las PTAR de Ciudad Juárez.. .................... 6

2 Dispositivo experimental de secado solar.................................. 10

3 Procesos térmicos de secado solar .......................................... 11

4 Esquema de la preparación de diluciones ................................ 17

5 Porcentaje de humedad contenida en lodos

durante el secado solar ............................................................. 21

6 Concentraciones de coliformes fecales durante

el secado solar ........................................................................... 23

7 Radiación solar de lodos durante el secado solar ..................... 25

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ÍNDICE DE TABLAS

Tabla Página

I Clasificación de biosólidos respecto a sus límites

máximos permisibles ................................................................. 4

II Clasificación de biosólidos de acuerdo a su aprovechamiento . 4

III Indicadores comunes de contaminación fecal ........................... 14

IV Temperaturas del lodo y radiación incidente ............................. 24

V Valores de pH de los lodos ........................................................ 24

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GLOSARIO

Agua destilada: Agua que ha sido depurada mediante calentamiento hasta

evaporación y condensada después en otro envase, para obtener agua liquida

libre de solutos no volátiles.

Aguas residuales: Las aguas de composición variada provenientes de las

descargas de usos municipales, industriales, comerciales, de servicios,

agrícolas, pecuarios, domésticos, incluyendo fraccionamientos y en general de

cualquier otro uso, así como la mezcla de ellas.

Almacenamiento: Acción de mantener en un sitio los lodos y biosólidos,

hasta su aprovechamiento o disposición final.

Aprovechamiento: Es el uso de los biosólidos como mejoradores o

acondicionadores de los suelos por su contenido de materia orgánica y

nutrientes, o en cualquier actividad que represente un beneficio.

Atracción de vectores: Es la característica de los lodos y biosólidos para

atraer vectores como roedores, moscas, mosquitos u otros organismos

capaces de transportar agentes infecciosos.

Bacilos: Cualquier bacteria en forma de bastón.

Biosólidos: Lodos que han sido sometidos a procesos de estabilización y que

por su contenido de materia orgánica, nutrientes y características adquiridas

después de su estabilización, puedan ser susceptibles de aprovechamiento.

Coliformes fecales: Bacterias patógenas presentes en el intestino de

animales de sangre caliente y humanos. Bacilos cortos Gram negativos no

esporulados, también conocidos como coliformes termotolerantes. Pueden

identificarse por su tolerancia a temperaturas de 44 a 45 °C. Tienen la

capacidad de fermentar la lactosa a temperatura de 44 °C. Incluyen los

géneros de Escherichia y algunas especies de Klebsiella.

Dilución: Técnica de laboratorio en la cual se disminuye la concentración de

una sustancia, en una serie de cantidades proporcionales.

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Disposición final: La acción de depositar de manera permanente lodos y

biosólidos en sitios autorizados.

Estabilización: Son los procesos físicos, químicos o biológicos a los que se

someten los lodos para acondicionarlos para su aprovechamiento o

disposición final para evitar o reducir sus efectos contaminantes al medio

ambiente. La estabilización alcalina es el proceso mediante el cual se añade

cal viva (óxido de calcio) a la masa de lodos y biosólidos para elevar el pH.

Esterilización: Técnica para la destrucción de microorganismos utilizando

calor, agua, productos químicos o gases.

Gram-negativo: Que presenta el color rosado de la contracoloración utilizada

en el método de Gram de tinción de microorganismos. Esta propiedad es un

método fundamental para identificar organismos en microbiología.

Límite máximo permisible: Valor asignado a un parámetro, el cual no debe

ser excedido por los lodos y biosólidos para que puedan ser dispuestos o

aprovechados.

Lodos: :Son sólidos con un contenido variables de humedad, provenientes

del desazolve de los sistemas de alcantarillado urbano o municipal, de las

plantas potabilizadoras y de las plantas de tratamiento de aguas residuales,

que no han sido sometidos a procesos de estabilización.

Medio de cultivo: Es una sustancia que proporciona un ambiente nutritivo

para el crecimiento de microorganismos ó células.

Microorganismos: organismo de tamaño inferior al poder de discriminación

del ojo (0.1mm) y cuya observación requiere el uso de técnicas microscópicas.

Muestra: Pequeña porción extraída o seccionada de una sustancia

cualquiera, a fin de poder examinar sus características.

Parásito: Organismo animal o vegetal que vive sobre o dentro de un individuo

de otra especie.

Patógeno: Todo microorganismo capaz de producir enfermedad.

Periodo de incubación: Es tiempo entre la exposición a un organismo

patógeno y el comienzo de los síntomas de enfermedad. Tiempo necesario

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para inducir el desarrollo el embrión a partir de un huevo o el desarrollo y la

replicación de células titulares ó microorganismo en un medio de cultivo.

pH: Escala que representa la acidez relativa (o alcalinidad) de una solución,

en la que un valor de 7.0 es neutro, por debajo de 7.0 es ácido y por encima

de 7.0 es alcalino. El valor numérico del pH es igual al logaritmo negativo de la

con concentración de iones hidronio expresada en moles por litro.

Salmonella spp.: Bacilos mótiles por sus flagelos perítricos, que fermentan

de manera característica glucosa y manosa sin producir gas, pero no

fermentan lactosa ni sacarosa. La mayoría fermentan sulfuro de hidrógeno

(H2S).

Sólidos totales (ST): Son los materiales residuales que permanecen en los

lodos y biosólidos, que han sido deshidratados entre 103 a 105 °C, hasta

alcanzar un peso constante y son equivalentes en base a peso seco.

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1

INTRODUCCIÓN

En Ciudad Juárez, el manejo y la disposición de los lodos generados en

plantas tratadoras de aguas residuales (PTAR) representan una problemática

ecológica y social; además de la tecnológica. Los lodos están compuestos de

sustancias de carácter ofensivo para la salud de la población debido a su

toxicidad. La alta producción diaria de 215 ton de estos residuos hace difícil y

costoso el manejo, el procesamiento y la disposición final. Actualmente, estos

lodos tienen como destino final predios de la Junta Municipal de Agua y

Saneamiento (JMAS) en las afueras de la Ciudad para su secado a la

intemperie. Esta práctica ha ocasionado una gran contaminación ambiental

por olores fétidos y dispersión de patógenos por el viento. Los lodos contienen

elevadas cantidades de agua; una relación aproximada de volumen entre

material seco y agua es de 20 a 80 %. En lo particular, la Ciudad tiene dos

PTAR principales, las plantas Norte y Sur; de estas ninguna cuenta con un

sistema de secado de lodos. Para ciudades en desarrollo, como lo es Ciudad

Juárez, es primordial tratar la mayoría de las aguas residuales; sin embargo,

esto traería como consecuencia un drástico incremento en la producción de

lodos, suscitando un problema ambiental de gran magnitud por contaminación

hacia los ecosistemas y la salud humana. El objetivo principal de este trabajo

fue identificar y cuantificar coliformes fecales en lodos residuales generados

en la PTAR Norte durante el proceso de secado solar; paralelamente a

determinar la efectividad de eliminación de agua con dicho sistema alterno. El

secador solar representa una alternativa potencial para reducir volumen de

lodos y para darle un mejor aprovechamiento a los biosólidos.

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PORTADA

TABLA DE CONTENIDO

CAPÍTULO 1

En este capítulo se describirá la problemática ecológica, social y tecnológica

ocasionada por la alta producción de lodos en las PTAR de Ciudad Juárez.

Actualmente, en esta ciudad, no se cuenta con un sistema adecuado para el

secado de los lodos. Con este estudio se busca demostrar la eficacia

tecnológica y económica para la reducción de volumen y para la aniquilación

de patógenos mediante un secador solar.

1.1 Antecedentes

Actualmente en México, la mayoría de los lodos provenientes de las PTAR

terminan mezclados con tierra y depositados en rellenos sanitarios para su

degradación posterior (BECC, 2004). Sin embargo, los lodos pueden ser

aprovechados para la producción de biogás mediante procesos anaerobios o

utilizados como fertilizantes en actividades agrícolas productivas (Llamas et

al., 2004). Según la Norma Oficial Mexicana NOM-004-SEMARNAT-2002, los

biosólidos se definen como lodos que han sido sometidos a procesos de

estabilización y que por su contenido de materia orgánica, nutrientes y

características adquiridas después de su estabilización, pueden ser

susceptibles de aprovechamiento (SEMARNAT, 2002). Los biosólidos pueden

ser aplicados a tierras agrícolas, forestales y tierras no tratadas (Metcalf &

Eddy, 2003). La materia orgánica es una excelente opción para suelos con

deficiencia de nutrientes para favorecer los cultivos (Maboetaetal.,2002).

La aplicación de biosólidos en suelos podría ser una buena opción para su

depósito final, transformando un desecho en un buen recurso. En el estado de

California en E.U.A., con frecuencia se aplican biosólidos a terrenos agrícolas;

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cumpliendo siempre las normas descritas por el Control de Recursos del

Estado de California. Estas normas prohíben la aplicación de biosólidos a

sitios sensibles como residencias, carreteras, zonas acuíferas, pozos y límites

apropiados (Metcalf & Eddy, 2003). En Cataluña, España, los lodos de PTAR

también son utilizados como fertilizante en la agricultura (Abad et al., 2005).

En Suecia, en el 2004, el gobierno aprobó un estudio sobre la recirculación de

biosólidos y lodos residuales para su aprovechamiento, para contribuir a una

sociedad sustentable. Se realizó un estudio en ocho PTAR, a las cuales, se

les aplicó un método de tratamiento para la detección de bacterias zoonóticas

de importancia para el ciclo ecológico en lodos. Así mismo, se determinaron

patógenos que representan riesgos cuando son utilizados en la agricultura sin

un tratamiento previo de estabilización (Sahlström et al., 2004). Los lodos

provenientes de las industrias también pueden ser aplicados como fertilizante

de suelos, debido a su alto contenido de materia orgánica y nutrientes

esenciales para los suelos (Edson et al., 2006). La aplicación de biosólidos en

suelos forestales tiene algunas ventajas como el que sus cosechas no son

comestibles y por lo tanto minimizan el contacto y exposición humana,

también que estos lugares se encuentran a las fueras y lejos de la población,

además de que los lodos pueden ser aplicados en cualquier época del año.

Una desventaja es el alto contenido de material tóxico que representa un

riesgo de contaminación ambiental (Benbrahim et al., 2006).

El uso de los biosólidos en actividades productivas depende directamente de

su calidad en términos de ciertos contaminantes. La NOM-004-SEMARNAT-

2002 se refiere a lodos y biosólidos; y presenta las especificaciones y límites

máximos permisibles de contaminantes para su aprovechamiento y

disposición final. En la Tabla I se presenta la clasificación de los biosólidos en

función de límites máximos permisibles de metales pesados, huevos de

helminto, Salmonella spp. y coliformes fecales; y en la Tabla II se presenta el

tipo de usos permitidos de los biosólidos tomando como referencia la

clasificación mostrada en la Tabla I.

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Tabla I. Clasificación de biosólidos respecto a límites máximos permisibles de metales pesados, parásitos y patógenos. Tabla adaptada de la NOM-004-SEMARNAT 2002.

Contaminante Clasificación

Metales Pesados determinados en forma total

Excelente mg/kg ST

Bueno mg/kg ST

Arsénico 41 75 Cadmio 39 85 Cromo 1200 3000 Cobre 1500 4300 Plomo 300 840 Mercurio 17 57 Níquel 420 420 Zinc 2800 7500 Patógenos (NMP/g ST♣) A B C Coliformes fecales < 1000 < 1000 < 2 000 000 Salmonella spp. < 3 < 3 < 300 Parásitos (huevos/g ST) A B C Huevos de helminto < 1 < 10 < 35

Tabla II. Clasificación de biosólidos de acuerdo a su aprovechamiento (SEMARNAT, 2002).

Tipo Clase Aprovechamiento

Excelente A • Usos urbanos con contacto público

directo durante su aplicación. • Los establecidos para clase B y C.

Excelente o bueno B

• Usos urbanos sin contacto público directo durante su aplicación.

• Los establecidos para clase C.

Excelente o bueno C

• Usos forestales. • Mejoramiento de suelos. • Usos agrícolas.

El alto contenido de agua en los lodos, entre 60 y 90 %, exige la aplicación de

procesos de secado, para facilitar su manejo y disposición y además para

reducir los altos costos por los grandes volúmenes manejados. Existen

diferentes sistemas para este propósito entre los que se encuentran

secadores convencionales basados en la quema de combustibles fósiles ♣ ST se refiere a Sólidos Totales

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como el gas natural o el combustóleo (Llamas et al., 2004); el secado a la

intemperie y sistemas solares de secado. En lo particular, los secadores

solares presentan ventajas técnicas y económicas ya que son sistemas de

bajo costo de inversión y operación; además, son aptos para el manejo de

grandes volúmenes de lodos y no requieren gente especializada para su

operación (Cota et al., 2006; Luboschik, 1999). La desventaja es que

requieren de grandes áreas de captación solar.

De acuerdo a la revisión bibliográfica realizada, referente a secadores solares

de lodos residuales, no se encontraron estudios de la caracterización química,

fisicoquímica y toxicológica durante el secado de lodos utilizando un sistema

solar. En 1999 Luboschik presentó los aspectos tecnológicos de eliminación

de agua y el beneficio económico. En el presente estudio se busca generar

información respecto a la operación del secador solar y su caracterización

toxicológica.

En el 2004, la PROFEPA efectuó una relatoría de la problemática de los lodos

residuales de las PTAR en Ciudad Juárez (Anexo 1).

En la Figura 1 se presentan los resultados de una investigación referente a

diferentes problemáticas derivadas del manejo y disposición de los lodos. La

información de la Figura 1 fue clasificada a partir de los 134 artículos que

fueron publicados por los diarios Norte y Diario de Juárez entre el 2002 y el

2007. Esta gráfica refleja la queja social. La mala disposición de lodos a la

intemperie, fue un problema recurrente en todos los años de la investigación,

este problema se maximizo en el 2003 y el 2004. Las consecuencias a esta

práctica son la contaminación al suelo y dispersión de microorganismos

patógenos y olores desagradables. En el Valle de Juárez también se

mostraron inconformidades por parte de los agricultores, ya que sus tierras de

cultivo estuvieron siendo utilizadas como depósitos de lodos de las PTAR, es

por eso que manifestaron su desconcierto a las autoridades municipales en su

mayoría en el año 2002. Desde el año 2002 hasta el 2007 se reportaron varios

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6

artículos donde se contemplaron posibles daños a la salud; como resultado de

distintos laboratorios de Ciudad Juárez. Las PTAR fueron el blanco de la

queja social donde se involucraron diferentes aspectos relacionados al manejo

y la disposición final. La JMAS también contribuyó de manera conflictiva en el

año 2004 al hacer caso omiso de inspecciones realizadas por la PROFEPA.

Figura 1. Problemática de contaminación respecto a lodos generados en la PTAR de Ciudad

Juárez. Información compilada de los diarios locales Norte y Diario de Juárez desde el año

2002 al 2007.

También publicaron diferentes artículos referente al tratado internacional que

se dictamino en esta frontera para llegar a un acuerdo para la disposición de

los lodos, cabe mencionar que en el 2005 se rechazó este tipo de acuerdos

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por parte de los E.U.A., debido a la falta de propuestas y de caso omiso por

parte de las PTAR. También se publicaron en estos diarios, en su mayoría en

el año 2004, quejas por parte de los vecinos de fraccionamientos aledaños a

la PTAR Norte debido a los olores desagradables emanados de ese lugar.

A la par se publicaron casos de los incendios constantes en el Relleno

Sanitario provocados por la producción de metano debido al mal proceso de

estabilización y secado. Por otra parte la PROFEPA se encargó de realizar

varias inspecciones en las PTAR encontrando varias irregularidades e

incumplimientos en cuanto a manejo y disposición de los lodos así como la

falta de seguimiento de las normas dictaminadas por la SEMARNAT, en su

mayoría en el año 2004, recibiendo caso omiso por parte de las PTAR.

Un problema adicional a los lodos es el desarrollo de focos de infección.

Diversas enfermedades gastrointestinales pueden ocurrir por dispersión de

patógenos debido a la acción del viento y atracción de vectores. De acuerdo a

la NOM-004-SEMARNAT-2002 los microorganismos pueden ser estabilizados

o aniquilados, en lodos no estabilizados al reducir la humedad hasta en un 90

%. La utilización de un secado solar constituye una alternativa económica y

tecnológicamente viable para la eliminación del agua y microorganismos

patógenos en lodos. Para contribuir en la solución de esta problemática de

contaminación ambiental, se ha construido un secador solar con el propósito

de mejorar los mecanismos locales de manejo y disposición de los lodos. El

dispositivo experimental está localizado en las instalaciones del Instituto de

Ciencias Biomédicas de la Universidad Autónoma de Ciudad Juárez (ICB-

UACJ). En este estudio se identificaron y cuantificaron coliformes fecales

presentes en los lodos durante el secado solar como parte de un estudio

toxicológico y para determinar la potencialidad de uso en actividades

agrícolas.

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8

1.2 Hipótesis

Al finalizar el proceso de secado solar, los lodos procesados son

deshidratados en un 90 % y con ello ocurre la eliminación de coliformes

fecales al 99 %.

1.3 Objetivos

El objetivo general de este estudio es identificar y cuantificar organismos

coliformes fecales durante el proceso de secado solar de los lodos generados

en la PTAR zona Norte de Ciudad Juárez, mediante la técnica de tubos de

fermentación múltiple. Para el llevar a cabo del objetivo general del estudio se

deberá cumplir con los objetivos particulares de: (1) iniciar la operación del

dispositivo experimental de secado solar; (2) estandarizar la técnica

microbiológica de análisis y (3) cuantificar los coliformes fecales durante el

proceso de secado.

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PORTADA

TABLA DE CONTENIDO

CAPÍTULO 2

Un prototipo experimental de secado solar fue construido para proponer una

solución parcial al problema de lodos generados en las PTAR en Ciudad

Juárez. Este dispositivo se encuentra instalado en el Instituto de Ciencias

Biomédicas de la Universidad Autónoma de Ciudad Juárez (ICB-UACJ). En

este estudio, se cuantificaron coliformes fecales en los lodos durante el

proceso de secado solar. La determinación de las bacterias se realizó

mediante la técnica microbiológica de tubos de fermentación múltiple o

comúnmente llamada técnica del número más probable (NMP). Todas las

determinaciones se realizaron en el Laboratorio de Ciencias Ambientales del

ICB-UACJ.

2.1 Materiales

2.1.1 Dispositivo experimental y su operación

El secador solar consta de una estructura de hierro forjado con semejanza a

una casa de dos aguas, cuyas paredes están formadas por un material

transparente a la radiación solar. El dispositivo cuenta con un área de

captación solar de 4.5 m2 y está constituido por el lecho del material, los

sistemas de ventilación y extracción; sistemas automáticos de control y

adquisición de datos y además, para facilitar el muestreo, está provisto de seis

ventanillas laterales. En la Figura 2 se muestra el dispositivo experimental y

sus componentes.

La radiación solar ingresa al dispositivo secador a través de su cubierta

transparente; parte de dicha energía es absorbida por el lodo residual. Debido

al efecto invernadero, causado por la selección de materiales y la

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hermeticidad del sistema, las temperaturas del lodo y del aire interno tienden a

incrementarse. El aumento de temperatura propicia la difusión del agua desde

la superficie del lodo hacia el aire contenido en la cámara. La presión de vapor

en el aire se eleva cuando aumenta la cantidad de agua contenida en éste.

Para acelerar el secado se debe impedir el equilibrio entre las presiones de

vapor; por lo tanto, el aire debe ser evacuado mediante un extractor. Entre

más alejado se encuentre el aire de la saturación, mayor es el potencial para

el transporte de masa. Por otro lado, entre más caliente se encuentre el

sistema, el transporte de vapor es mayor. Para homogenizar temperatura y

humedad, el dispositivo cuenta con un sistema de ventilación el cual se activa

bajo condiciones preestablecidas. Cuando el sistema se encuentra libre de

humedad debido a la extracción, éste regresa a su estado de sistema cerrado

respecto a masa e inicia un nuevo ciclo de evaporación (Cota et al., 2007,

2006). La Figura 3 simplifica los procesos térmicos implicados en el secado

solar.

Figura 2. Dispositivo experimental de secado solar de lodos residuales.

Cubierta transparente

Ventiladores Extractor Barométrico

Ventanillas para muestreo

Lecho de secado

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Figura 3. Esquema de los procesos térmicos en el secado solar.

Los sistemas de ventilación y extracción están compuestos por dos

ventiladores de 1/4 hp y un extractor barométrico de 1/3 hp. Los ventiladores y

el extractor son activados cuando las diferencias de temperaturas y

humedades absolutas interna y externa de la cámara son mayores o iguales a

10 °C para ventilación y 38 g de agua/kg de aire seco para extracción,

respectivamente.

2.1.2 Punto generador de la muestra

El lodo residual a procesar fue obtenido de la PTAR Norte de Ciudad Juárez.

En esta planta, a la fecha, se está practicando un tratamiento primario

avanzado a las aguas residuales domésticas e industriales. La planta tiene

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una capacidad de limpiar 2.5 m3/s recibiendo de 1.6 a 1.8 m3/s. El proceso de

tratamiento se constituye a grandes rasgos de un desbaste grueso, seguido

por uno fino; posteriormente, pasa a un desarenador y desengrasador cuyos

subproductos son lodos de arena y de grasa; enseguida, el agua se lleva a un

tanque en donde se realiza la desestabilización fisicoquímica de la materia

orgánica con cloruro férrico; y por último, se realiza la desinfección en tanques

de contacto de cloro. Por otro lado, a los lodos generados en el reactor se les

agrega óxido de calcio para elevar el pH a 12 y así detener el crecimiento de

microorganismos como bacterias, virus y parásitos. Estos lodos son

transportados a un predio de la JMAS afuera de la Ciudad y depositados

sobre el suelo natural para ser secados naturalmente a la intemperie.

2.2 Métodos

Debido a las características nocivas del material a tratar, se siguieron

rigurosamente diversas medidas de seguridad. Entre el equipo de seguridad

utilizado durante la recolección, el manejo y el procesamiento se encuentran

guantes de látex, overoles de protección, mascaras con filtros de carbón

activado, lentes de seguridad y cubre bocas, para evitar cualquier infección.

Además, el área de trabajo fue lavada y desinfectada, así también el material

utilizado por los analistas, antes y después del contacto con los lodos.

Una muestra de 200 kg de lodo fisicoquímico se obtuvo del tanque de

almacenamiento de lodos de la PTAR Norte. La muestra fue transportada en

dos tambos de plástico de 100 L con tapas de seguridad hasta el área de

experimentación para su inmediato procesamiento. El mecanismo de llenado

se facilitó con el diseño de los rodillos; ya que permitieron extraer la charola

del dispositivo para depositar fácilmente el material nocivo en la cámara de

secado. Se registraron los tiempos de recolección y de inicio de la operación

del secado.

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2.2.1 Muestreo dinámico

Al inicio del experimento ( ), los lodos se colocaron en el lecho de

secado y se tomó la primer muestra. La toma de muestra se realizó a

diferentes tiempos de residencia.

La muestra fue tomada directamente del secador. En el lecho de secado se

trazaron seis bloques imaginarios y de cada una de las seis ventanillas se

tomaron aproximadamente 186 g de lodo utilizando una pala de plástico

estéril; con la mezcla de ellas se formó una muestra compuesta de 1 kg,

aproximadamente. El lodo fue depositado en dos frascos de vidrio estériles,

de boca ancha y tapón de rosca, con capacidad de 1 L. Posteriormente, la

muestra fue transportada en una hielera hacia el cuarto frío, el cual fue

mantenido a una temperatura de 4 ºC. A partir de la toma de muestras, los

tiempos de conservación en refrigeración no fueron mayores a 24 h para el

inicio del análisis.

Debido a que el proceso de secado solar es altamente dependiente de las

condiciones incontrolables del clima; y por otro lado, el análisis de coliformes

fecales es costoso y requiere de largos tiempos de procesamiento, fue poco

práctico predeterminar los tiempos de muestreo. Dichos tiempos fueron el

resultado de la observación del clima y optimización de recursos analíticos.

2.2.2 Coliformes fecales y su determinación microbiológica

Algunos organismos patógenos que se encuentran presentes en las aguas

residuales y posteriormente concentrados en los lodos, son excretados por los

seres humanos y algunos animales infectados con algún tipo de enfermedad

patogénica. Las bacterias patógenas de los seres humanos causan

principalmente enfermedades en el tracto gastrointestinal como tifoidea, fiebre

paratifoidea, disentería, diarreas severas y cólera por lo que son responsables

de miles de muertes cada año en áreas donde no exista una sanitización

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(Mims et al., 2003). Cada persona elimina a través de las heces fecales

alrededor de 100 a 400 billones de coliformes fecales al día (Metcalf & Eddy,

2003).

En la Tabla III se resumen algunos de los organismos que han sido

propuestos como indicadores de contaminación fecal. Las bacterias que

pertenecen al grupo de los coliformes fecales tienen la capacidad de

fermentar lactosa por medio de una acidificación en el medio y producir

dióxido de carbono (CO2) a una temperatura de 44.5 °C en un periodo de 24 h

(Madigan et al., 2004; Metcalf & Eddy, 2003; Perry et al., 1999; Levett, 1990).

Tales características microbiológicas fueron aprovechadas en el presente

estudio para cuantificar estas bacterias, mediante la implementación de la

metodología citada en el Anexo 2; y la cual fue extraída fue extraída de la

Norma Oficial Mexicana NOM-004-SEMARNAT-2002 y es referida a lodos y

biosólidos.

Tabla III. Indicadores comunes de contaminación fecal (Metcalf & Eddy, 2003).

Organismo indicador Características

Coliformes totales

Bacilos gram negativos fermentadores de lactosa y producción de gas a 35 °C de 24 a 48 h. Incluye los géneros de Escherichia coli, Klebsiella, Enterobacter y Citrobacter.

Coliformes fecales Producen gas a 44.5 °C en 24 h. Incluye los géneros de Escherichia coli (aprox. 90 %), Klebsiella,y Citrobacter.

Klebsiella Coliformes totales, termotolerantes con crecimiento a 35 °C en 24 h.

Escherichia coli Es el coliforme más representativo del grupo fecal.

Bacteroides Organismos anaerobicos indicadores específicos de contaminación humana.

Streptococo fecal Utilizado para determinación de contaminación fecal reciente.

Enterococo Organismo presente a concentraciones bajas pero resistente en aguas de mar.

Clostridium perfringens Organismo esporulado anaeróbico persistente

P. aeruginosa y A. hydrophyla Organismos presentes en aguas residuales domésticas en concentraciones altas.

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El medio A-1 (BD Difco, Lote 6299490) fue utilizado para la prueba directa

específica en la cuantificación de coliformes fecales. Este medio está

constituido a base de lactosa, triptona, cloruro de sodio, salicina y Triton X-

100. La lactosa es un disacárido el cual es el ingrediente principal del medio

de cultivo, actúa como fuente de carbono para estas bacterias y en

combinación con la salicina provee de energía para el crecimiento de los

microorganismos. El cloruro de sodio sirve para mantener el balance osmótico

dentro del medio y la peptona aporta a las bacterias nitrógeno, vitaminas,

minerales y aminoácidos esenciales para su crecimiento en este medio. El

Triton X-100 actúa como surfactante.

Los pasos principales para determinar el número de coliformes fueron 1)

determinación del contenido de agua en el lodo, 2) preparación de soluciones,

3) preparación de diluciones, 4) inoculación, 5) incubación, 6) identificación de

colonias y 7) cuantificación por la técnica del NMP.

2.2.3 Contenido de agua en lodos

Una vez tomada la muestra, a ésta se le determinó el contenido de sólidos

totales (ST) antes de ser analizada. Treinta gramos de muestra fueron

colocados en una estufa a 105 oC hasta lograr peso constante. El contenido

de agua resultó de calcular las diferencias entre los pesos de la muestra

húmeda y la seca. De acuerdo a la técnica de análisis, se requieren de 4 g de

ST, los cuales son calculados con la Ecuación 1.

Ecuación 1

2.2.4 Preparación de soluciones

Para la inoculación de la muestra, se requirió de un medio lactosado. Se

pesaron 31.5 g de medio A-1 en polvo y se disolvió en agua destilada

mediante calentamiento en una parrilla y fue aforado a 1 L. Después se

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verificó que el pH que fuera de 6.9 ± 0.1, en caso contrario fue ajustado con

una solución de hidróxido de sodio (NaOH) (CTR Scientific, Lote 56CAC-

230104) 0.1 N. Posteriormente, se distribuyeron volúmenes de 10 mL en

tubos de ensayo con tapón de rosca y con campana de Durham. Se

esterilizaron♣* en autoclave a 121 °C durante 15 min. El medio sobrante fue

almacenado en oscuridad a temperatura ambiente durante no más de 7 días,

para uso posterior.

El agua utilizada para realizar diluciones de la muestra de lodo se preparó a

partir de las soluciones madre amortiguadoras A y B, elaboradas a base de

fosfato monopotásico (KH2PO4) (J.T. Baker®, Lote 3818-01) y cloruro de

magnesio (MgCl2.6H2O) (CTR Scientific, Lote 440BSOK) respectivamente. El

agua de dilución consiste de 1.25 mL de la solución madre amortiguadora A

y 5 mL de la solución madre amortiguadora B aforadas a 1 L con agua

destilada.

La preparación de solución madre amortiguadora A consistió en disolver

34.00 g de fosfato monopotásico (KH2PO4) en 500 mL de agua destilada,

ajustando el pH a 7.2 ± 0.2 con una solución de hidróxido de sodio (NaOH) 1

N y se aforó a 1 L. Para la preparación de solución madre amortiguadora B,

se pesaron 8.10 g de cloruro de magnesio (MgCl2.6H2O) y fueron disueltos en

500 mL de agua destilada y se aforó a 1 L. Ambas soluciones fueron

esterilizadas.

2.2.5 Preparación de diluciones

De acuerdo al origen residual de los lodos, estos contenían altas

concentraciones de masa bacteriana al momento en que la primera muestra

fue recolectada, valores típicos oscilan alrededor de 1x108 NMP por gramo

seco. La primera dilución de lodo a 10-1 fue obtenida al mezclar M4gST. Dicha

mezcla fue colocada en un matraz Erlenmeyer de 250 mL y 36 mL de agua de ♣ Todo proceso de esterilización mencionado en este documento fue realizado en una autoclave All American, 25X-1, a una temperatura de 121 °C, 15 psi, por 15 min.

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dilución la cual fue previamente esterilizada y fue mezclada durante 3 min en

un agitador orbital (Barnstead Lab-Line), a una velocidad de 800 rpm para

disolver la muestra.

Para las diluciones sucesivas, se distribuyeron volúmenes de 9.0 mL de agua

de dilución en tubos de ensayo con tapón de rosca, proceso seguido por la

esterilización. Los tubos fueron almacenados a temperatura ambiente.

Las diluciones se prepararon tomando inóculos de 1 mL, utilizando diluciones

seriadas de submúltiplos de 10 a partir de la dilución de 10-1. Se transfirió 1

mL a los tubos que contenían 9.0 mL de agua de dilución, obteniendo la

dilución 10-2, realizando el mismo procedimiento hasta obtener la dilución

deseada de 10-10. La Figura 4 esquematiza la preparación de diluciones.

Figura 4. Esquema de la preparación de diluciones.

Para la determinación de la concentración del lodo, fue necesario realizar una

serie de diluciones y cuantificar por la técnica del Número más Probable. A

medida que fue disminuyendo el contenido de agua en el lodo durante el

secado, se esperó que también disminuyera el número de coliformes debido a

que las condiciones para el crecimiento y sobrevivencia de las bacterias son

menos favorables; por lo tanto, el rango de diluciones utilizado fue

decreciendo para optimizar recursos y tiempo de análisis.

Cada una de las diluciones fué homogeneizada perfectamente agitando cada

uno de los tubos 25 veces en 7 s, haciendo un arco con la muñeca de 30 cm

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de arriba hacia abajo. Siempre se realizaron las agitaciones de la misma

manera para disminuir los errores. Para cada dilución se utilizó una punta

estéril y una micropipeta con volumen ajustado a 1000 µL manteniéndola

siempre en posición vertical.

2.2.6 Identificación de colonias de coliformes fecales

Para la determinación de los coliformes fecales se adicionó 1 mL de cada una

de las diluciones preparadas por triplicado en series de cinco tubos, los cuales

contenían 10 mL del medio A-1 correctamente etiquetados. Éstos fueron

incubados por 3 h a 35 ± 0.5 °C en un horno (Shel Lab) controlado mediante

recirculación de aire caliente. Para terminar el proceso de incubación, los

tubos fueron transferidos a un baño de agua (Isotemp 115, Fisher Scientific) a

44.5 ± 0.2 °C hasta completar 24 h.

La presencia de gas en cualquiera de los tubos a las 24 h de incubación,

correspondió a una reacción positiva indicando la presencia de bacterias

coliformes de origen fecal.

2.2.7 Análisis cuantitativo

La técnica de cuantificación de coliformes fecales se basa en el principio de

que en las bacterias presentes en una muestra pueden ser separadas por

agitación, generando una suspensión de células bacterianas distribuidas de

manera uniforme formando una turbidez característica o producción de gas

(Collins et al., 1995). A través de varias diluciones de la muestra se obtuvieron

inóculos con al menos una célula que incitaron un crecimiento en el medio de

cultivo, dando como resultado varios tubos positivos en cada serie. Los

diversos resultados positivos y negativos permitieron realizar las adecuadas

estimaciones y cálculos de la densidad bacteriana por medio de la técnica del

número más probable (NMP).

La determinación del NMP de coliformes fecales se calculó a partir de la tabla

del NMP ó tabla de Hoskins, presentada en el Anexo 2. Esta contiene un

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código que está compuesto por los tubos que se obtuvieron con resultados

positivos en el medio A-1. Los valores en la tabla son representados para

límites de confianza 95 % para cada una de las combinaciones de cinco series

de tubos positivos (Clesceri et al., 1998). La concentración de los coliformes

fecales fue expresada como NMP de coliformes por g de lodo seco. Para la

conversión de NMP/100 mL a NMP/g de lodo seco, se realizaron mediciones

de densidad para todas las muestras.

2.2.8 pH de lodos

Por otra parte, se realizaron mediciones de pH en el lodo para identificar

alguna correlación con la cantidad de microorganismos presentes en los

lodos. El pH se obtuvo de un extracto líquido del lodo. Para la obtención del

extracto se mezclaron 500 g de lodo húmedo con 100 mL de agua destilada.

La mezcla se homogeneizó con espátula hasta formar una pasta y se dejó

reposar por 24 h. Esta última fue filtrada en un embudo Büchner con papel

filtro Whattman # 40, y utilizando un matraz Kitazato de 500 mL, el cual fue

conectado a una bomba de vacío. Se obtuvieron 100 mL de extracto en

aproximadamente 5 h. Los valores de pH fueron medidos directamente con un

potenciómetro (Termo, CORNING).

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PORTADA

TABLA DE CONTENIDO

CAPÍTULO 3

En el presente capítulo se muestran los resultados obtenidos de la

cuantificación de coliformes fecales durante el proceso de secado solar. Estos

son discutidos en términos de variables de humedad, radiación solar,

temperatura y pH en los lodos.

3.1 Resultados y discusión

3.1.1 Remoción de agua en lodos

En la Figura 5 se presenta la cantidad de agua contenida en los lodos en

porcentaje, en función del tiempo de residencia dentro del secador. En esta

gráfica se incluyen los resultados de dos experimentos: el experimento 1 se

realizó en el verano del 2007 (30 de Junio-19 de Julio), periodo en el cual se

presentaron mayormente nublados; y el experimento 2, en otoño del 2007 (11

de Octubre-18 de Octubre). Para el experimento 1 se muestran resultados de

humedad del lodo dentro (♦) y fuera (◊) del secador. Al inicio de este

experimento, el lodo proveniente de la PTAR presentó un 86.2 % de agua. Se

debe observar que el decaimiento del contenido de agua durante el secado en

el dispositivo siguió un comportamiento exponencial. Se logró una remoción de

humedad del 43 % en las primeras 194 h de procesamiento. Las condiciones

climáticas de nublados constantes por las tardes, generalmente a partir del

medio día, evitaron el secado rápido del material. La asíntota de eliminación de

agua se cuantificó prácticamente en un 6.6 % a las 269 h y en 4.4 % a las 451

h. También se calculó el porcentaje de humedad del lodo fuera del dispositivo,

esto para comparar la eficacia del secado de los lodos dentro del secador solar.

En las 55 h iniciales del proceso no se experimentaron olores desagradables en

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el área circundante al dispositivo experimental; por lo que se decidió realizar

una comparación de la efectividad de eliminación de agua dentro y fuera del

secador a partir de este tiempo. Además, para tomar esta decisión se consideró

que por ser época de verano, hubo poca asistencia de estudiantes al ICB-

UACJ. Los resultados del secado a la intemperie demostraron la eficacia del

dispositivo experimental. En 164 h de secado externo, sólo se logró remover el

20.2 % de agua, siendo este la mitad del porcentaje comparado con el secado

del lodo dentro del dispositivo. Al inicio del experimento 2 (■), el lodo contenía

un 90.4 % de agua. En esta ocasión se logró una remoción de humedad del

98.6 % a las 95 h presentando un marcado decaimiento de tipo exponencial.

Figura 5. Porcentaje de humedad contenida en los lodos residuales de PTAR durante el proceso de secado solar.

Al comparar los resultados de ambos experimentos, se observó que en el otoño

hubo más facilidad para la remoción de agua, debido a las condiciones

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climáticas favorables de días despejados; se observó una velocidad de secado

casi tres veces mayor que la del experimento 1 (♦).

3.1.2 Eliminación de coliformes fecales

En la Figura 6 se presentan las concentraciones de coliformes fecales en los

lodos residuales en escala logarítmica en función del tiempo de residencia, para

los dos experimentos. En el experimento 1 (♦), la muestra proveniente de la

PTAR presentó una concentración inicial de 3.87x106 NMP/g de lodo seco. El

lodo se colocó en el secador a las 12 del día. A las primeras siete horas de

secado y experimentando una incidencia de energía solar alta de 4.5 kW-h/m2

en 5 h para el día 1, se observó una remoción del 4.2 % de agua y con ello se

logró una eliminación del 65.4 % de coliformes fecales. Esto significa que al

inicio de la corrida experimental se alcanzaron temperaturas por encima de los

50 °C, temperaturas a las cuales los coliformes no sobreviven. Al día siguiente,

se experimentó una radiación de 4.6 kW-h/m2 en nueve horas de luz solar, es

decir mucho menos radiación. Las condiciones climáticas de nublados

constantes que se presentaron, no fueron adecuadas para el secado, así

tampoco para la eliminación de patógenos ya que se mantuvieron temperaturas

de incubación (35 a 44 °C) en el lodo, aunado a que existieron condiciones

favorables de humedad, como se mostró en la Figura 5. En consecuencia,

contrario a los objetivos del proyecto, a las 24 h de experimentación aumentó la

cantidad de microorganismos en un 7.0 % respecto a los medidos en las

primeras siete horas. A medida que transcurrió el experimento, se observó una

eliminación drástica en el número de bacterias en un 98.5 % a las 103 h de

residencia del lodo, con una concentración de 8.9x104 NMP/g de lodo seco, lo

cual indica que en este tiempo el lodo alcanzó una clasificación C para la NOM-

004-SEMARNAT-2002, respecto sólo a coliformes fecales. El potencial de

eliminación de altos contenidos de coliformes fecales fue verificado al medir la

concentración de patógenos a las 450 h. Se obtuvo una presencia menor de 1.6

NMP/g de lodo seco, indicando la clasificación A respecto a coliformes. Al inicio

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del experimento 2 (■), el lodo proveniente de la PTAR contenía una masa

bacteriana de coliformes fecales de 3.25x106 NMP/g de lodo seco. En los

primeros tres días se mantuvo la concentración de patógenos del orden de 106;

para el cuarto día comenzaron a disminuir rápidamente. A las 95 h se obtuvo

concentración de coliformes de 1800 NMP/g de lodo seco. En los primeros tres

días de experimentación se cuantificó el crecimiento de bacterias debido a las

condiciones favorables de humedad, temperatura y pH en el lodo.

Figura 6. Concentración de coliformes fecales en lodos residuales durante el secado solar.

Durante el experimento 2, las temperaturas en el lodo fueron generalmente de

incubación debido a la baja incidencia de radiación solar típica de otoño. En la

Tabla IV se muestran las temperaturas del lodo y la radiación incidente en el

secador integrada en el tiempo de experimentación para el experimento 2. Se

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puede observar que todos los días de este experimento fueron muy parecidos

en términos de radiación.

3.1.3 Coliformes fecales vs pH de los lodos

En la Tabla V se muestran los valores de pH obtenidos del extracto de los

lodos para los dos experimentos. Todos los valores de pH se mantuvieron

dentro del rango de 6 a 7.2. De acuerdo a lo reportado por diversos autores

(Madigan et al., 2004; Metcalf & Eddy, 2003; Perry et al., 1999; Levett, 1990),

este pH resulta favorable para el crecimiento de los coliformes fecales. Por lo

tanto, el pH no contribuyó para la eliminación de los coliformes fecales,

únicamente favoreció las condiciones de incubación y multiplicación.

Tabla IV. Insolación durante la experiencia 2 y temperatura del lodo residual a lo largo del día. Temperatura del lodo ( °C )

Día Insolación

kW-h/m2 08:00 09:00 10:00 11:00 12:00 13:00 14:00 15:00 16:00 17:00 1 4.7 20.3 22.7 33.6 34.3 32.8 35.0 33.4 33.5 36.0 34.5 2 4.6 21.0 21.0 33.0 36.0 38.3 38.4 34.2 32.5 33.0 34.1 3 4.8 25.0 25.0 25.0 34.0 36.0 35.1 31.3 31.0 32.63 29.6 4 4.7 14.7 14.7 28.3 30.7 29.4 32.1 27.3 26.1 27.1 28.3 5 4.6 16.1 16.1 18.0 22.3 24.9 34.2 35.0 34.6 32.4 32.4

*Insolación es la cantidad de radiación solar incidente por metro cuadrado durante un día.

Tabla V. Valores de pH de los lodos durante los dos experimentos.

Muestra Exp 1 Exp 2 1 6.8 6.6 2 6.5 6.3 3 6.2 6.6 4 6.1 6.4 5 6.0 7.2 6 6.0 -

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3.1.4 Radiación solar durante el secado solar

En la Figura 7 se observa la relación entre la radiación solar incidente en el

secador solar observada en los dos experimentos. El comportamiento general

de la incidencia de radiación durante el primer día sobre la superficie terrestre

corresponde a una campana de Gauss; donde el máximo ocurre al medio día

solar y se mantiene en cero durante las horas sin sol.

Figura 7. Radiación solar experimentada durante el secado solar de lodos.

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En el experimento 1, predominaron los días nublados; sólo el primer día fue

un día típico despejado de verano. El primer día de experimentación la

incidencia de radiación fue muy alta con un día completamente despejado. Lo

cual favoreció la eliminación de agua en un 4.2 % y un 34.6 % para coliformes

fecales. Sin embargo, de manera desfavorable, se presentaron bajas

incidencias de radiación solar debido a los constantes nublados para los

siguientes días del experimento 1 (▲), lo que provoco una menor velocidad en

el secado del los lodos dentro del dispositivo.

Por otra parte, también se muestra una curva de la incidencia de radiación

promedio durante el experimento 2 (♦); el cual se caracterizó por presentar

días claros constantes típicos de otoño. Esta curva muestra valores menores

que para el primer día del experimento 1, pero mayores que para la incidencia

obtenida en días nublados. La incidencia de radiación obtenida en el

experimento 2, fue alta y se mantuvo constante durante la experimentación,

favoreciendo así a la remoción de agua en un 98.0 % a los 5 días y una

eliminación del 99.9 % de coliformes fecales.

3.2 Conclusiones

• El secador solar de lodos residuales resultó ser técnicamente viable

para la remoción de agua y eliminación de altas concentraciones de bacterias

patogénicas.

• Los resultados demostraron un comportamiento de secado del tipo

exponencial. La efectividad de remoción de agua (80-90 %) del secador solar

de lodos residuales con altos contenidos de agua, depende de las condiciones

climatológicas de las estaciones del año. Se espera que la mayor eficiencia de

secado, siempre ocurra con altas incidencias de radiación solar en época de

verano; sin embargo, esta época también incluye lluvias y nublados

frecuentes. Para esta temporada, se experimentaron tiempos de secado

mayores. En el otoño se aumentó la velocidad del secado del lodo, casi tres

veces más en la época de nublados.

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• A pesar de las diversas variaciones que se estuvieron presentando

durante el experimento con respecto al crecimiento de las bacterias, se

observó una eficiencia del dispositivo, representado un notable decaimiento

exponencial en el contenido de patógenos desde el orden de 106 NMP/g de

lodo seco hasta concentración final de coliformes fecales menor de 1.60

NMP/g de lodo seco para el experimento 1 y para el experimento 2, hasta una

concentración final de 1.80x103 NMP/g de lodo seco. De acuerdo a la

clasificación de biosólidos respecto a límites máximos permisibles para

coliformes fecales (SEMARNAT, 2002) estos lodos se clasifican como clase A

de tipo excelente o bueno, respecto sólo a coliformes fecales.

• Los coliformes se reprodujeron dentro del secador solar cuando la

humedad del lodo se encontró por arriba del 70.0 %, esto debido a que es una

condición propicia para su multiplicación. Además de que el pH y las

temperaturas fueron adecuados en el medio.

• Las variables como la humedad, temperatura, pH, nutrientes y radiación

solar fueron factores importantes para el crecimiento y remoción de los

coliformes fecales. Después de tres días de experimentación, las condiciones

combinadas de los factores provocó la disminución acelerada de los

coliformes fecales para los dos experimentos.

3.3 Recomendaciones

• Se recomienda el uso de secadores solares para contribuir a la solución

de contaminación ambiental causada por los lodos residuales, mejorando con

esto sus mecanismos actuales de manejo y disposición.

• Es necesario completar el análisis de calidad del lodo tratado con el

secador solar con respecto a sus contaminantes como metales pesados,

Salmonella spp. y huevos de helminto para verificar su posible

aprovechamiento de acuerdo a la NOM-004-SEMARNAT-2002.

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• Se sugiere hacer un estudio económico para validar y justificar el uso e

implementación de secadores solares de lodos residuales en Ciudad Juárez.

• Se recomienda hacer más experimentación en otras estaciones del

año, para conocer los factores climáticos característicos que puedan favorecer

la aceleración en el secado de los lodos.

• Es necesario contar con un sistema automático de mezclado del lodo

durante el día para optimizar el secado.

3.4 Plan de difusión

• Dar a conocer los resultados obtenidos durante la experimentación, a la

JMAS, Gobierno del Estado de Chihuahua, al gobierno del Municipio de

Ciudad Juárez, a empresas particulares generadoras de lodos y al público en

general, para crear una concientización y conocimiento acerca del uso de

secadores solares.

• El proyecto fue presentado en dos Congresos Nacionales: Semana

Nacional de Energía Solar XXX y XXXI, con la publicación de las respectivas

memorias en extenso. Además, un artículo internacional está en proceso de

revisión.

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PORTADA

TABLA DE CONTENIDO

LITERATURA CITADA

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PORTADA

TABLA DE CONTENIDO

ANEXO 1

Relatoría de la problemática de los lodos residuales de las plantas tratadoras Norte y Sur de Ciudad Juárez, Chihuahua (PROFEPA, 2004).

Antecedentes

• Al certificarse el financiamiento de las plantas tratadoras por parte de la COCEF/BANDAN se exigió se tuviera una solución para el deposito final de los lodos residuales. Al existir la imposibilidad material para financiar un proyecto de deposito final se llego a un acuerdo de “ buena fe “ entre el Gobierno Municipal de Juárez y el órgano operador del Gobierno del Estado (Junta

• Municipal de Agua y Saneamiento). Siendo este que la JMAS trataría los lodos para estabilizarlos y así poderlos disponer finalmente en el Relleno Sanitario Municipal.

• La Junta Municipal de Agua y Saneamiento de Ciudad Juárez y sus concesiones aplican el tratamiento primario avanzado de desestabilización de partículas coloidales por medio de sulfato de aluminio las aguas residuales domesticas e industriales que se generan en la ciudad, para lo cual, tiene dos plantas de tratamiento denominadas Planta Norte y Planta Sur. La Planta Norte y esta ubicada en calle Pascual Ortiz No. 1155 No. 1105, colonia Satélite y tiene una capacidad de 2.5 m3 /seg. recibiendo 1.6 a 1.8 m3 /seg. De agua residual del norte de la ciudad. La Planta Sur esta en Rió Candemeño No. 1105, col. Zaragoza, Distrito Bravo, que recibe 1m3 /seg. De las aguas residuales provenientes del sur de la ciudad. El proceso de tratamiento se constituye a grandes rasgos de un desbaste (cribado) grueso, seguido de un desbaste fino y posteriormente pasa a un desarenador –desengrasador del cual se obtienen lodos de arena y lodos de grasa, enseguida se lleva a un reactor en donde se realiza la desestabilización de la materia orgánica con sulfato de aluminio, y por ultimo se realiza la desinfección por medio de cloro. Los lodos residuales, generados por dicho tratamiento, son deshidratados y posteriormente se les agrega oxido de calcio (Cal) para estabilizar el pH a 12. Estos lodos son depositados sobre el suelo natural para ser secados y después son llevados al Relleno Sanitario de Ciudad Juárez.

• Desde hace 3 años aproximadamente, previo un tratamiento de estabilización y secado a la

• intemperie, los lodos residuales se estuvieron depositando en el Relleno Sanitario de Ciudad Juárez, en donde se recibían 6,000 metros cúbicos por mes. En el Relleno Sanitario Municipal la disposición de los lodos se realizaba apilando los mismos Generando una profundidad de 35 metros. El costo del manejo dentro del Relleno Sanitario de 216,000 mts3 aproximadamente ha sido cubierto en su totalidad por el Gobierno Municipal. La JMAS cobra una tarifa para saneamiento con la que cubre el costo de estabilización y transporte de los lodos y el tratamiento del agua, sin pagar por la disposición final. La JMAS tiene subcontratadas a empresas particulares para el tratamiento de las aguas y los lodos (Degremont y sus filiales ).

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Contingencia

• El día 27 de octubre la Procuraduría Federal de Protección al Ambiente Delegación Chih. realizo visita de inspección a raíz de contingencia ambiental, a las Plantas Tratadoras Norte y Sur, debido a que los lodos residuales generados por dichas plantas y depositados en el relleno sanitario, comenzaron a incendiarse. La PROFEPA solicito tanto a las plantas como al Relleno Sanitario la certificación de no peligrosidad por parte de la SEMARNAT de los lodos generados por las plantas de tratamiento Sur y Norte, obligada en Términos del Articulo 150 de la Ley General de Equilibrio Ecológico y la Protección al Ambiente y Artículos 5 y 6 de su Reglamento, así como con la Norma Oficial Mexicana NOM-004-SEMARNAT-2002, misma que no se presento y se declaro no contar con ella. Para verificar la PROFEPA si estos residuos eran o no peligrosos, toda vez que se carecía de dicha autorización, durante las diligencias complementarias durante la primera semana de Noviembre de 2003 se tomaron muestras de los lodos crudos y tratados, así para su posterior análisis CRIT (corrosividad, ractividad, inflamabilidad y toxicidad en compuestos orgánicos e inorgánicos), los análisis se llevaron a cabo en el Laboratorio Regional de Ciudad Juárez y en el Laboratorio de la Zona Metropolitana del Valle de México, conforme a lo lineamientos establecidos en la norma oficial Mexicana NOM-052-SEMARNAT/93 que establece las características de los residuos peligrosos, el listado de los mismos y los limites que hacen a un residuo peligroso por su toxicidad al ambiente.

• Así mismo el día 27 de octubre se inspeccionaron los lodos en el Relleno Sanitario Municipal y se constato que se recibían los lodos de forma no controlada al no solicitar el certificado de no peligrosidad y comprobantes de estabilización de los lodos confinados.

Normatividad a Revisar durante la Inspección

El articulo 150 de la Ley General del Equilibrio Ecológico y la Protección al Ambiente menciona que los materiales y residuos peligrosos deberán ser manejados con arregló a la presente Ley, su reglamentó y las normas oficiales mexicanas que expida la secretaria…

El Articulo 5 del Reglamento de la LGEEPA en materia de residuos peligrosos menciona que serán responsables del cumplimiento de las disposiciones del reglamento y de las normas técnicas ecológicas que de el se deriven, el generador de residuos peligrosos así como las personas físicas o morales, publicas o privadas que manejen, importen, o exporten dichos residuos.

El Articulo 6 del Reglamento de la LGEEPA en materia de residuos peligrosos menciona que para efecto de lo dispuesto en el articulo anterior, las personas físicas o morales o publicas o privadas que con motivo de sus actividades generen residuos, están obligadas a determinar si estos son peligroso.

La Norma Oficial Mexicana NOM-052-SEMARNAT/93 establece las características de los residuos peligrosos, en el listado de los mismos y los limites que hacen a un residuo peligroso por su toxicidad al ambiente, la cual estipula en su numeral 5 la clasificación de la designación de los residuos para determinar si son o no peligrosos, además de establecer en su numeral 5.5.4 que un residuo se considera peligroso por su toxicidad al ambiente, cuando presenta la propiedad de tener concentraciones mayores a los limites máximos permisibles señalados en las tablas 5, 6 y 7 del anexo 5 de la misma de acuerdo a la prueba de extracción de toxicidad (extracto PECT) conforme a la Norma Oficial Mexicana NOM-053-SEMARNAT/93.

La Norma Oficial Mexicana NOM-053-SEMARNAT/93 establece el procedimiento para llevar a cabo la prueba de extracción para determinar los constituyentes que hacen a un residuo

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peligroso por su toxicidad al ambiente. Esta norma describe la metodología a seguir para la realización de la prueba de Extracción de Constituyentes Tóxicos (extracto PECT), y así poder efectuar el análisis fisicoquímico completo de presuntos residuos peligrosos y su caracterización, así como determinar si se encuentra en los mismos los constituyentes regulados en la norma NOM-052-SEMARNAT/93.s

La Norma Oficial Mexicana NOM-004-SEMARNAT-2002 de lodos y biosolidos que establece las especificaciones y limites máximos permisibles de contaminantes para su aprovechamiento y disposición final, menciona en el numeral 4.1 de especificaciones, que las personas físicas o morales interesadas en llevar a cabo el aprovechamiento o disposición de los lodos (definidos en esta Norma como sólidos con un contenido variable de humedad, provenientes del desazolve de los sistemas de alcantarillado urbano y o municipal, de las plantas potabilizadoras y de las plantas de tratamiento de aguas residuales, que no han sido sometido a proceso de estabilización) deberá recabar la “constancia de no peligrosidad” en términos el tramite SEMARNAT-07-007.

Resultado de las Muestras

• Al realizar la revisión de los resultados emitidos por las áreas técnicas del Laboratorio Regional de esta procuraduría, se observa que las muestras analizadas resultaron no residuos peligrosos de acuerdo a lo establecido en la Norma Oficial Mexicana NOM-052-SEMARNAT/93. sin embargo es importante observar que el pH en las muestras del relleno sanitario resulto 9.30 y en una muestra de lodos deshidratados en el terreno adjunto a la planta tratadora Sur fue de 10.26. lo que indica que el proceso de estabilización de los lodos puede no estar cumpliendo con los criterios de permanencia mínimo de 11.5 unidades de pH para garantizar la inactividad bacteriana (NOM-004-SEMARNAT-2002). De acuerdo a los resultados obtenidos por el laboratorio, los lodos generados por las plantas tratadoras Norte y Sur, no presentan características fisicoquímicas peligrosas que puedan afectar toxicologicamente al entorno ambiental. Sin embargo ya que no se tiene evidencia de cómo se esta llevando a cabo al tratamiento de estabilización de los lodos (ya que no se presentaron bitácoras) aunado a una disposición final en el Relleno sanitario no controlada se recomienda: El monitoreo y caracterización toxicologica constante de los efluentes que se procesan y los lodos generados en las plantas para un mayor control de estos y el cumplimiento a la Norma Oficial Mexicana NOM-004-SEMARNAT-2002, obtenga la constancia de no peligrosidad para poder llevar a cabo el confinamiento final de los lodos.

Causante de la Contingencia

• Al contar con evidencia de que posiblemente el proceso de estabilización no esta homogenizado al contar con diferentes niveles de pH y haber observado la forma vertical de disposición de los lodos en el relleno sanitario, se deduce que un posible causante del incendio es la generación de metanos por la actividad bacteriana permitida por un bajo pH combinado con disposición vertical.

• Al conocer que las muestras tomadas no presentaban características de peligrosidad CRETI y con conocimiento de que el generador había iniciado semanas atrás el procedimiento para obtener el certificado de no peligrosidad de la Dirección General de Gestión Integral de Materiales y Actividades Riesgosas se hicieron por parte de esta delegación las gestiones necesarias para la agilización del otorgamiento de la constancia de no peligrosidad, con el objetivo de coadyuvar a solucionar un problema comunitario binacional. Ya que los lodos se depositaban en terrenos contiguos a las tratadoras que se encuentran rodeadas de áreas residenciales y la frontera con Estados Unidos. Los moradores de esta zona se quejan de los olores que brotan de las tratadoras.

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Medidas de Urgente Aplicación

El día seis de noviembre de 2003, se dictaron los Acuerdos de Medidas de Urgente Aplicación No. CI0402VI2003 y CI0404VI2003 (anexos), correspondientes a Agua Process, S.A. de C.V. Plantas Sur y Norte y al relleno Sanitario, respectivamente, dichas medidas fueron dictadas a raíz de que la plantas de tratamiento carecían la autorización de descaracterización de los lodos como residuo peligrosos por parte de la Secretaria.

Organismo Operador de las Plantas Agua Process S.A. de C.V.

1. Presentar la concesión para la construcción, operación y mantenimiento de la planta de aguas residuales otorgada por la Junta Municipal de Aguas y tratamiento de aguas residuales Saneamiento de Ciudad Juárez.

2. Agilizar el tramite de descaracterizacion de lodos generado del tratamiento físico químico de aguas residuales ante SEMARNAT.

3. Establecer un procedimiento eficiente de estabilización de lodos generados del tratamiento de aguas residuales y una bitácora de control de lodos y biosolidos así como presentar un programa calendarizado para realizar la estabilización.

4. 4 El predio de almacenamiento temporal de los lodos deberá ser habilitado para que no existan infiltraciones al subsuelo y contar con sistema de recolección de lixiviados.

5. Gestionar ante la SEMARNAT un sitio de disposición final de los lodos generados o en su caso enviarlos a un confinamiento autorizado por la Secretaria.

Relleno Sanitario

1. Abstenerse de recibir los lodos generados de las plantas tratadoras de agua residuales sin que tengan la descaracterizacion (constancia de no peligrosidad) por la Dirección General de Manejo Integral de Contaminantes de la subsecretaria de Gestión para la protección ambiental de la SEMARNAT.

2. Deberá establecerse un control de recibimiento de los lodos generados del tratamiento físico-químico de las plantas tratadoras de aguas residuales que tengan la constancia de no peligrosidad para cerciorarse que los lodos están debidamente estabilizados y que ayuden a controlar la atracción de vectores y que reduzcan los riesgos de contingencias ambientales.

• El Relleno Sanitario Municipal dio cumplimiento a las medidas de urgente aplicación al abstenerse de recibir los lodos generados de las plantas tratadoras y presentar la constancia de no peligrosidad para los lodos recibidos. Así mismo manifestó que el mecanismo para la recepción de los lodos será el de revisar el camión donde se contengan los lodos secos con el mismo peso y volúmen.

• Agua Process S.A. de C.V. presento algo de la documentación requerida. Sin embargo cabe señalar que en cuanto a la constancia de no peligrosidad aunque esta fue presentada la misma estaba a nombre de la JMAS y estableciendo la descaracterizacion únicamente para 50 montículos de lodo de 6 mts3. lo anterior presento la necesidad de definir quien es el responsable de la generación de los residuos ante la autoridad, decidiéndose que el generador, en este caso es Agua Process S.A. de C.V. al ser la empresa subcontratada para el tratamiento de las aguas y la estabilización de los lodos. No instalaron el liner para evitar la infiltración al subsuelo y no han realizado tramites ante SEMARNAT para otro distinto final.

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• Se tiene conocimiento de que Agua Process S.A. de C.V. dejo de existir y ahora el operador de las plantas tratadoras es Degremont de México, S.A. de C.V. lo que pone en riesgo la conclusión de los procedimientos.

• Se tuvo una reunión con Degremont antes Agua Process y la JMAS. Se llego a un acuerdo de que acataran las medidas correctivas derivadas de la resolución y Degremont asumirá la responsabilidad. Asimismo solicitara la conmutación aceptando entrar al programa de certificación industrial.

Complicaciones Posteriores

• No se ha llegado a un acuerdo entre el Gobierno Municipal y la JMAS para la recepción de los lodos en el relleno sanitario. Es importante conocer que existen otros conflictos de interés además del cobro por el manejo de los lodos, la JMAS tiene un adeudo de predial, el municipio tiene un adeudo de agua, existe una controversia constitucional sobre el derecho municipal para administrar el órgano operador de agua. Además existe la instrucción por parte de la PROFEPA de abstenerse de recibir lodos no caracterizados y sin seguimiento a los procedimientos de estabilización.

• Al no contar con un lugar para disponer de los lodos, estos se han estado acumulando en los terrenos continuos a las tratadoras generando los problemas comunitarios y binacionales antes mencionados. La JMAS sacó los lodos de este lugar y los llevo a un predio particular localizado fuera del centro de población urbana, desmontando la zona de vegetación nativa y contando según se manifiesta con el permiso del Estado para tal hecho y sin haber solicitado cambio de uso de suelo a SEMARNAT.

• Nos encontramos en una etapa de leyes rectoras. Por una parte la LGEEPA y por otra las atribuciones que marca la ley general para la prevención y gestión integral de los residuos. Esta realidad crea confusión en cuanto al ámbito de competencia de cada una de las autoridades.

• Se levantó acta circunstanciada en el lecho de secado el día 10 de marzo de 2004, levantándose las muestras de los lodos para proceder a su análisis biológico y CRETI. En metales pesados se encontró no peligrosidad y el análisis biológico lo realizo un laboratorio externo acreditado encontrando por el procedimiento NOM 004 ninguna presencia de patógenos y bajo el procedimiento de la NOM 052 se encontró la presencia de salmonelosis.

• El particular, dueño del predio y transportista, del lecho de secado tuvo un acercamiento y atendió la inspección de buena manera y de forma voluntaria la diligencia de inspección en materia forestal.

Escenarios Futuros

Objetivo final: Resolver un problema que data desde el origen de las plantas tratadoras de agua en Ciudad Juárez, Chihuahua:

1. Establecer un seguimiento efectivo a la estabilización de los lodos para dar cumplimiento a la NOM-004 y NOM-052, dejando un antecedente de manejo responsable antes de transferir la responsabilidad total del manejo de los lodos al gobierno estatal.

2. Que se obtenga por parte de las plantas tratadoras una certificación de descaracterizacion para el proceso de estabilización de los lodos residuales.

3. Que se de destino final adecuado y seguro a los lodos generados por las plantas tratadoras.

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PORTADA

TABLA DE CONTENIDO

Anexo 2

Tablas del NMP y sus límites de 95% de confianza para diversas combinaciones de resultados positivos para cinco tubos usados en la

técnica de los tubos de fermentación múltiple (Clesceri, 1998).

No. de tubos con reacciones positivas

(10.0 mL, 1.0 mL, 0.1 mL)

Índice de NMP por 100 mL

Límite Confiable 95%

0 0 0 <2 - - 0 0 1 2 1.0 10 0 1 0 2 1.0 10 0 2 0 4 1.0 13 1 0 0 2 1.0 11 1 0 1 4 1.0 15 1 1 0 4 1.0 15 1 1 1 6 2.0 18 1 2 0 6 2.0 18 2 0 0 4 1.0 17 2 0 1 7 2.0 20 2 1 0 7 2.0 21 2 1 1 9 3.0 24 2 2 0 9 3.0 25 2 3 0 12 5.0 29 3 0 0 8 3.0 24 3 0 1 11 4.0 29 3 1 0 11 4.0 29 3 1 1 14 6.0 35 3 2 0 14 6.0 35 3 2 1 17 7.0 40 4 0 0 13 5.0 38 4 0 1 17 7.0 45 4 1 0 17 7.0 46 4 1 1 21 9.0 55 4 1 2 26 12 63 4 2 0 22 9.0 56 4 2 1 26 12 65 4 3 0 27 12 67 4 3 1 33 15 77 4 4 0 34 16 80

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5 0 0 23 9.0 86 5 0 1 30 10 110 5 0 2 40 20 140 5 1 0 30 10 120 5 1 1 50 20 150 5 1 2 60 30 180 5 2 0 50 20 170 5 2 1 70 30 210 5 2 2 90 40 250 5 3 0 80 30 250 5 3 1 110 40 300 5 3 2 140 60 360 5 3 3 170 80 410 5 4 0 130 50 390 5 4 1 170 70 480 5 4 2 220 100 580 5 4 3 280 120 690 5 4 4 350 160 820 5 5 0 240 100 940 5 5 1 300 100 1300 5 5 2 500 200 2000 5 5 3 900 300 2900 5 5 4 1600 600 5300 5 5 5 ≥1600 -- --