Upload
others
View
5
Download
0
Embed Size (px)
Citation preview
Diagnostikk av HIV-infeksjon
Anne-Marte Bakken Kran Førsteamanuensis, konst. overlege
Mikrobiologisk avd.
OUS, Ullevål
https://no.wikipedia.org/wiki/R%C3%B8de_sl%C3%B8yfe
HIV diagnostikk
• Primærdiagnostikk: Hvilke tester har vi og når skal de brukes?
• Analysestrategier
• Hva bør almenpraktikere kunne om HIV-diagnostikk – og hvorfor?
Hva bør almenpraktikere kunne om HIV-diagnostikk – og hvorfor?
• Husk å teste for HIV!
• Hva når en prøve ikke er negativ?
• Ha en plan for informasjon og henvisning
• Kjenne til tilgjengelig test-tilbud
HIV diagnostikk i Norge
• Ca 130 000 HIV tester/år på klinisk indikasjon
• Screening av ca 65 000 gravide/år
• Screening av ca 100 000 blodgivere/år
• Av ca 300 000 analyserte primærprøver:
– 200-300 nye tilfeller pr år
– Falske negative
– Falske positive: Uspesifikke reaksjoner
Hensiktsmessig diagnostikk
• Trinn 1: Screeningtest
– Høyt antall analyser (rask, rimelig, lite arbeidskrevende)
– Hovedmål: Få falske negative
– «Bivirkning»: En del falske reaktive
• Trinn 2: Konfirmasjonstest
– God spesifisitet
– Kan være dyrere og mer arbeidskrevende
Antall analyser pr år (Ullevål): Ca 70 000 Antall reaktive: ca 300 (ca 0.4%)
HIV diagnostikk
Hvilke tester har vi og når skal de brukes?
Klinisk forløp ubehandlet HIV-infeksjon
Fauci, A. S. et. al., Ann Intern Med 1996;124:654-663
Diagnostikk: tidslinje for antigen og antistoff
www,depts.washington.edu: University of Washington 2007
Aktuelle analyser
• Diagnostikk av ny infeksjon – EIA/CMIA (Ag/As påvisning)
– Antistoff konfirmasjonstester (Western Blot, rekombinante
immunoblot assay el.l.) – ELISA antigenpåvisning med nøytralisasjon – Nukleinsyrepåvisning (kvalitativ), for eksempel provirus – Hurtigtester
• Erkjent HIV-infeksjon (klinisk oppfølging)
– HIV-1 RNA RT-PCR (kvantitativ) – Resistensundersøkelse – Kvantitering av CD4+ T celler
Virusantigen bundet til overflate
Antistoffpåvisning
HIV kombinasjonstest (EIA/CMIA): Påviser antigen OG antistoff
HIV-1 og HIV-2 antigener HIV-1 antistoff
EIA/ELISA/CMIA
• Kombinasjonstester (Ag / As)
– p24 Ag
– IgM og IgG mot ulike env Ag, både HIV-1 og HIV-2
• Prøvemateriale: Serum (evt plasma)
Reaktiv etter smitte (tidligst) ca:
10 dager -3 uker (kan gå opptil 2-3 mnd)
•”Frikjent”: Negativ Ag/As-undersøkelse 3 mnd etter eksponering
Aktuelle analyser
• Diagnostikk av ny infeksjon – EIA/CMIA (Ag/As påvisning)
– Antistoff konfirmasjonstester (Western Blot)
– Nukleinsyrepåvisning (kvalitativ), for eksempel provirus
– Hurtigtester?
• Erkjent HIV-infeksjon (klinisk oppfølging) – HIV-1 RNA RT-PCR (kvantitativ)
– Resistensundersøkelse
– Kvantitering av CD4+ T celler
BioRad
Western blot
Utvikling av viruskomponenter og antistoffer
Diagnostikk av HIV-infeksjon
• >2-3 mnd etter smitteeksponering – HIV Combo-test (Ag/As): REAKTIV – Konfirmasjonstest (Western Blot): POSITIV
• Tidlig diagnostikk:
– HIV Combo-test (Ag/As): REAKTIV • Kan bli reaktiv allerede 2-3 uker etter smitte
– Konfirmasjonstest (Western Blot): INKONKLUSIV/NEGATIV
– MÅ AVKLARES! HIV ELLER USPESIFIKK REAKSJON?
Avklare inkonklusiv WB • Rene Ag tester (med nøytralisasjon)
– Påviser p24
– Prøvemateriale: Serum (evt plasma)
– Kan gjøres i samme serumprøve som WB
• Provirus – Bedre sensitivitet
– Prøvemateriale EDTA fullblod (Må ta ny prøve)
• Kontrollprøve (WB) etter 2-3 uker vil alltid* avklare!
* Nesten alltid Kan ikke utelukke HIV-infeksjon
Avklare inkonklusiv WB • Rene Ag tester (med nøytralisasjon)
– Påviser p24
– Prøvemateriale: Serum (evt plasma)
– Kan gjøres i samme serumprøve som WB
• Provirus – Bedre sensitivitet
– Prøvemateriale EDTA fullblod (Må ta ny prøve)
• Kontrollprøve etter 2-3 uker vil alltid* avklare!
* Nesten alltid
HVA ER HIV PROVIRUS?
HIV-1 DNA PCR (Provirus)
• Påvise HIV integrert i infiserte celler (proviralt DNA )
• Prøvemateriale: EDTA blod (holdbar 3 døgn)
• Indikasjoner:
– Avklare inkonklusive western blot
– Tidlig diagnostikk
– Kan påvises selv ved ikke påvisbart HIV RNA i plasma
– Avklare vertikal smitte
KUN SPESIELLE INDIKASJONER
HIV-1 RNA kvantitering
• Oppfølging av erkjent HIV-infeksjon
• Måler virusmengde i plasma
• Verktøy i klinisk oppfølging
IKKE PRIMÆRDIAGNOSTIKK!!
Hurtigtester
• Svar med en gang – Må være forberedt på å håndtere svaret der og da
• Dårligere sensitivitet enn serologi – NB vindusfase! • Ta alltid serumprøve i tillegg!
• Best prediktiv verdi når testene anvendes på risikogrupper
• Prosjekter i gang: Olafiaklinikken, Brynsenglegene
(kveldstilbudet), Sjekkpunkt (tilbud utenfor ordinært helsevesen)
Hva bør almenpraktikere kunne om HIV-diagnostikk – og hvorfor?
• Husk å teste for HIV!
• Hva når en prøve ikke er negativ?
• Ha en plan for informasjon og henvisning
•
Risikogrupper Gravide Symptomer Alminneliggjøring Lav terskel – redusere stigma? Test and treat
Hva bør almenpraktikere kunne om HIV-diagnostikk – og hvorfor?
• Husk å teste for HIV!
• Hva når en prøve ikke er negativ?
•
•
De fleste reaktive viser seg å være uspesifikke! Utvidet testing - som regel også kontrollprøve Endelig avklaring kan ta 3 uker (etter ny prøve) Telefonkontakt med laboratoriet er nyttig Forklare! Forklare! Forklare! Pasienten blir engstelig.
Hva bør almenpraktikere kunne om HIV-diagnostikk – og hvorfor?
• Husk å teste for HIV!
• Hva når en prøve ikke er negativ?
• Ha en plan for informasjon og henvisning
•
Hva hvis prøven er positiv?
• Vi ringer dere om svaret!
• Innkalle pasienten, informere
• Henvise infeksjonsmedisinsk avd.
– Ring og avtal tid. Får time veldig raskt!
• Smitteoppsporing
• Ny serumprøve (utelukke prøveforbytting)
• Prøve til resistens (MSIS overvåkning)
Oppsummert:
• Serumprøve for diagnostikk
• EIA (Ag/As) kombinasjonstest • Høy sensitivitet (NB! Diagnostisk vindu) • Mange uspesifikke reaksjoner
• Hvis reaktiv: Konfirmasjonstest
• Hvis inkonklusiv: Kontrollprøve etter 2-3 uker avklarer!
• Ring laboratoriet ved spørsmål!
Bokanbefaling:
Forfatter: Overlege Åse Haugstvedt ved Olafiaklinikken