Embed Size (px)
Citation preview
PRUEBAS
CRUZADAS LINFOCITARIAS Por Microlinfotoxicidad
CÓDIGO: CDED-060
DONADOR VIVO
PRUEBAS CRUZADAS LINFOCITARIAS
DONADOR VIVO
La prueba cruzada es unos de los procedimiento más importantes y necesarios en el trasplante
de órganos, con un alto valor pronóstico positivo sobre la perdida de injerto.
El seguimiento de pacientes en lista de espera para trasplante renal requiere la determinación
de la presencia de anticuerpos anti-HLA específicos frente al donante inmediatamente antes del
trasplante, ya que, estos anticuerpos pueden dar lugar a un rechazo hiperagudo.
Para evaluar la presencia de anticuerpos específicos frente al donante, inmediatamente antes
del trasplante se debe realizar una prueba cruzada entre el suero del receptor y las células del
donante.
Metodología: Microlinfotoxicidad dependiente de
complemento
Equipo: NA
Reporte de resultados:
Prueba cruzada positiva. Prueba cruzada negativa. Tipo de muestra: DONADOR: Sangre total ACD: 8mL/Sangre total EDTA 2 tubos llenos. RECEPTOR: Suero: 2mL. Conservado entre 2.8 °C. Conserve las muestras a temperatura ambiente. Envíe la muestra dentro de las primeras 24Hrs después de la toma.
Tiempo de entrega: 1 día hábil.
Costo: Solicite una cotización con el asesor comercial.
Servicio personalizado DENATBIO
Asistencia técnica directa.
Recolecciones el mismo día de la solicitud directo en sus
instalaciones sin cargo extra.
Principio del método:
Reacción antígeno-anticuerpo con fijación de complemento, donde los linfocitos del potencial donador sirven como blan-co para el suero del receptor. La reacción se evidencía con el uso de un colorante vital considerando el porcentaje de célu-las muertas.
Mediante está técnica, se determina la presencia de anticuer-pos citotóxicos (fijadores de complemento: IgM e IgG) frente a moléculas presentes en la superficie de los linfocitos. Los linfocitos viables son incubados con anticuerpos fijadores de complemento. Si los linfocitos expresan un antígeno recono-cido por anticuerpos específicos (del paciente “receptor”), la región Fab del anticuerpo unido al antígeno forma un com-plejo antígeno-anticuerpos. Después de la formación de este complejo, el complemento es adicionado. La molécula C1q y Ca++ del complemento se unen a la región FC del anticuerpo. Para unir una molécula de C1q son requeridos dos anticuer-pos IgG o un anticuerpo IgM. La unión de C1q al complejo antígeno-anticuerpo inicia la cascada del complemento que promueve finalmente la lisis celular. En una reacción negati-va, los linfocitos “sobreviven”, mientras que es una reacción positiva, los linfocitos “mueren”.
Adicional a la técnica clásica, se ha adicionado una variante que consiste en tratar los sueros con ditiotreitol (DTT) para eliminar posibles falsos positivos por la presencia de anti-cuerpos no relevantes en el trasplante.
Avenida Arneses 335 interior 2 colonia Valle del Sur, C.P. 09819, Iztapalapa, Ciudad de México. [email protected]; [email protected]
Tels. 55) 8437-1148 & (55) 8437-1149. www.denatbio.mx
