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Centre de Recherches Biologiques
et d'Expérimentations Cutanées
Etude 19E4523
Mise en évidence de l’activité hydratante et de l’action sur la réparation de la barrière cutanée et sur la différenciation
cutanée d’une eau à partir d’explants de peau ex vivo
Selon le plan d’étude n° D19-248
Produit testé P : Eau ionique produite grâce au dispositif SUBLIO IONIC WATERBOX
Donneur d’ordre SUBLIO FRANCE
8 Rue René Coty85018 La Roche-sur-Yone-mail : [email protected]
Installation d’essai Laboratoire BIO-EC
1, Chemin de Saulxier 91160 Longjumeau FRANCE
Tél.+(33)1 69 41 42 21 Fax+(33)1 69 41 61 65 Contact [email protected] Contact www.bio-ec.fr
Directeur d’étude L. Peno-Mazzarino
Date de fin d’étude 23 Septembre 2019
Mise en évidence de l’activité hydratante et de l’action sur la réparation de la barrière cutanée et sur la différenciation cutanée d’une eau à partir d’explants de peau ex vivo.
Etude 19E4523 SUBLIO page 2 sur 56
FE-H-153-03 du 13/11/2015 selon la procédure PR-Q-003
Plan chronologique
Statut BPL Non BPL
Date de début de l’étude (date de signature du plan d’étude par le
directeur d’étude) 05 juillet 2019
Début de la phase technique de l’étude
18 juillet 2019
Responsable Phase ex-vivo
C. Durand
Date Signature
Responsable Phase histologie
C. Delpy
Date Signature
Responsable Phase expertise
L. Peno-Mazzarino
Date Signature
Fin de la phase technique de l’étude
13 septembre 2019
23.09.2019
23.09.2019
23.09.2019
Mise en évidence de l’activité hydratante et de l’action sur la réparation de la barrière cutanée et sur la différenciation cutanée d’une eau à partir d’explants de peau ex vivo.
Etude 19E4523 SUBLIO page 3 sur 56
FE-H-153-03 du 13/11/2015 selon la procédure PR-Q-003
SOMMAIRE
BUT DE L’ETUDE ......................................................................................................................................... 4
MATERIEL ET METHODES ........................................................................................................................... 4
1. Schéma de l’étude .............................................................................................................................. 4
2. Produit testé ....................................................................................................................................... 4
3. Préparation des explants .................................................................................................................... 4
4. Délipidation ........................................................................................................................................ 4
5. Utilisation du système Sublio Ionic Waterbox ................................................................................... 5
6. Répartition des explants ..................................................................................................................... 6
7. Application du produit........................................................................................................................ 6
8. Prélèvements ...................................................................................................................................... 6
9. Traitements histologiques .................................................................................................................. 6
9.1. Contrôle de la viabilité cellulaire .................................................................................................... 7
CONTEXTE SCIENTIFIQUE ........................................................................................................................... 8
1. Filaggrine ............................................................................................................................................ 8
2. Involucrine .......................................................................................................................................... 9
3. AQP3 ................................................................................................................................................. 10
RESULTATS & DISCUSSION ....................................................................................................................... 11
1. Viabilité cellulaire ............................................................................................................................. 11
2. Filaggrine .......................................................................................................................................... 14
3. Involucrine ........................................................................................................................................ 16
4. AQP3 ................................................................................................................................................. 17
CONCLUSION ............................................................................................................................................ 18
ANNEXES ................................................................................................................................................... 20
1. Viabilité cellulaire ............................................................................................................................. 20
2. Filaggrine .......................................................................................................................................... 33
3. Involucrine ........................................................................................................................................ 42
4. AQP3 ................................................................................................................................................. 46
DEVIATIONS .............................................................................................................................................. 52
ATTESTATIONS QUALITE ........................................................................................................................... 52
ARCHIVAGE DE L’ETUDE ........................................................................................................................... 54
RESUME DE L’ETUDE ................................................................................................................................ 55
Mise en évidence de l’activité hydratante et de l’action sur la réparation de la barrière cutanée et sur la différenciation cutanée d’une eau à partir d’explants de peau ex vivo.
Etude 19E4523 SUBLIO page 4 sur 56
FE-H-153-03 du 13/11/2015 selon la procédure PR-Q-003
BUT DE L’ETUDE
Cette étude a pour but de mettre en évidence l’activité d’une eau hyperpolarisée sur la réparation de la barrière cutanée, l’hydratation et la différenciation à partir d’explants de peau ex vivo.
Cette activité est évaluée par : - Un contrôle de la viabilité ;- Un immunomarquage de la filaggrine- Un immunomarquage de l’involucrine- Un immunomarquage de l’aquaporine-3 (AQP3)
MATERIEL ET METHODES
1. Schéma de l’étude
J0 J1 J2 J3 J4 J5 J6 J7 J8 J9 J10 J11
18-juil. 19-juil. 20-juil. 21-juil. 22-juil. 23-juil. 24-juil. 25-juil. 26-juil. 27-juil. 28-juil. 29-juil.
Jeudi Vendredi Samedi Dimanche Lundi Mardi Mercredi Jeudi Vendredi Samedi Dimanche Lundi
2. Produit testéLe donneur d’ordre a fourni le produit suivant:
Produit P : Eau ionique produite grâce au dispositif SUBLIO IONIC WATERBOX.L’eau ionique a été produite à partir de l’eau du réseau de distribution d’eau de laville de Longjumeau (eau du robinet).
3. Préparation des explants39 explants de 12±1 mm de diamètre (dont 15 délipidés), ont été préparés à partird’une plastie d’une femme de type caucasien âgée de 43 ans (référence P2175-AB43).Les explants ont été mis en survie en milieu BEM (BIO-EC’s Explants Medium) à37°C en atmosphère humide, enrichie de 5 % de CO2.
4. DélipidationA J0, une zone délimitée de la plastie a été délipidée par application d’un mélangeéther/acétone (1 :1) à la surface de la peau pendant 2 fois 2 minutes, puisessuyée. Sur cette zone, 15 explants notés « D », de 12±1 mm de diamètre, ontété préparés et mis en survie comme indiqué précédemment.
Délipidation
Prélèvement Application produit
Mise en évidence de l’activité hydratante et de l’action sur la réparation de la barrière cutanée et sur la différenciation cutanée d’une eau à partir d’explants de peau ex vivo.
Etude 19E4523 SUBLIO page 5 sur 56
FE-H-153-03 du 13/11/2015 selon la procédure PR-Q-003
5. Utilisation du système Sublio Ionic Waterbox
Photo représentant la version du SUBLIO IONIC WATERBOX en modèle réduit destiné à la conduction des études par BIO-EC.
1. De façon continue (24/24h), s’assurer que le filtre à eau (b) soit bien placé verticalement et que le générateur (c) soit constamment allumé avec le sélecteur en position 5.
2. Ouvrir la vanne d’induction d’eau (a) en la tournant vers le bas pour mettre le réacteur de traitement du système SUBLIO sous pression du réseau.
3. Préalablement à l'utilisation de l'eau ionique pour l’étude, purger le système d'environ 1 L d’eau en ouvrant franchement la vanne d'arrêt (d).
4. Fermer la vanne d’arrêt d’eau (d) et attendre 15 minutes pour effectuer le prélèvement de l’eau ionique destinée à l’étude.
5. Effectuer le prélèvement souhaité de l'eau ionique à l’aide d’un flacon stérile.
6. Fermer la vanne d’induction d’eau pour alimentation du système (a).7. Ouvrir d’environ un quart la vanne d’arrêt de sortie de l’eau ionique (d)
pendant 2 secondes afin d’éliminer la pression résiduelle.
NB : Répéter les étapes 1 à 7 pour chaque traitement.
Application produit
Mise en évidence de l’activité hydratante et de l’action sur la réparation de la barrière cutanée et sur la différenciation cutanée d’une eau à partir d’explants de peau ex vivo.
Etude 19E4523 SUBLIO page 6 sur 56
FE-H-153-03 du 13/11/2015 selon la procédure PR-Q-003
6. Répartition des explantsLes explants ont été répartis en 6 lots comme suit:
Lot Désignation Traitement Nb d’explants Arrêt
T0 Témoin plastie - 3 J0
D0 Témoin délipidation Ether / Acétone 3 J0
T Témoin non traité - 9 24h, J6, J11
P Produit P P 12 3h, 24h, J6, J11
D Délipidation Ether / Acétone 6 3h, 24h
DP Délipidation + produit P Ether/Acétone + P 6 3h, 24h
7. Application du produitA J0 (immédiatement après délipidation), J1, J4, J6 et J8, le produit P a étéappliqué en topique, à raison de 2 µl par explant (2 mg/cm2) et étalés à l’aided’une spatule. Après application du produit P, les explants restent 2h àtempérature ambiante. Les explants ont ensuite été en culture à 37°C dans lesconditions décrites auparavant.Les explants des lots T n’ont reçu aucun traitement, excepté le renouvellement dumilieu de culture.Le milieu de culture a été renouvelé pour moitié (1 ml par puits) à J1, J4, J6 et J8.
Conformément aux dispositions prévues dans le plan d’étude, les jours detraitement et d’arrêts ont été ajustés au planning des jours ouvrés.
8. PrélèvementsA J0, les 3 explants des lots T0 et D0 (immédiatement après la délipidation) ontété prélevés et coupés en deux. Une partie a été fixée dans une solution de formoltamponnée, et l’autre a été congelée à –80°C.A 3h et 24h après délipidation, J6 et J11, les 3 explants de chaque lot ont étéprélevés et traités de la même façon qu’à J0.
9. Traitements histologiquesAprès 24h dans le formol tamponné, les prélèvements ont été déshydratés etimprégnés en paraffine à l’aide d’un automate de déshydratation Leica PEARL. Ilsont été mis en bloc à l’aide d’une station d’enrobage Leica EG 1160.Des coupes de 5 µm ont été réalisées à l’aide d’un microtome type Minot, LeicaRM 2125 et montées sur des lames de verre histologiques Superfrost®.Les observations microscopiques ont été réalisées en microscopie optique, àl’aide d’un microscope Leica type DMLB ou Olympus BX43, en utilisant un objectif40x. Les prises de vue ont été réalisées avec une caméra Olympus DP72 et lelogiciel Cell^D.
Mise en évidence de l’activité hydratante et de l’action sur la réparation de la barrière cutanée et sur la différenciation cutanée d’une eau à partir d’explants de peau ex vivo.
Etude 19E4523 SUBLIO page 7 sur 56
FE-H-153-03 du 13/11/2015 selon la procédure PR-Q-003
9.1. Contrôle de la viabilité cellulaire La viabilité cellulaire des structures épidermiques et dermiques a été observée sur coupes en paraffine après coloration au trichrome de Masson variante de Goldner. Elle a été évaluée par un examen microscopique.
Lots concernés : tous.
9.2. Immunomarquage de la filaggrine La filaggrine a été marquée sur coupes en paraffine avec un anticorps monoclonal anti-filaggrine (Santa Cruz, ref. sc-66192, clone AKH1), dilué au 1/500ème dans du PBS-BSA 0,3%-Tween 20 à 0,05% pendant 1h à température ambiante, et révélé en AlexaFluor 488 (Lifetechnologies, ref. A11001). Les noyaux ont été contre-colorés à l’iodure de propidium. L’immunomarquage a été réalisé en utilisant un automate d’immunomarquage (Dako, AutostainerPlus) et évalué par un examen microscopique.
Lots concernés : T0, D0, T(24h), P(24h), D(3h, 24h), DP(3h, 24h), soit 24 explants.
9.3. Immunomarquage de l’involucrine L’involucrine a été marquée sur coupes en paraffine avec un anticorps monoclonal anti- involucrine (Novus Biologicals, réf. NB100-2727, clone SY5), dilué au 1/100ème dans du PBS-BSA 0,3% pendant 1 nuit à température ambiante avec un système amplificateur biotine/streptavidine et révélé en VIP, un substrat violet de peroxydase (Vector SK-4600). L’immunomarquage a été évalué par observation microscopique.
Lots concernés : T0, T(J6), P(J6), soit 9 explants.
9.4. Immunomarquage d’AQP3 L’aquaporine 3 (AQP3) a été marquée sur coupes paraffine avec un anticorps polyclonal anti-AQP3 (Chemicon, réf. AB3276), dilué au 1/1000ème dans du PBS-BSA 0.3%-Tween 20 0,05% pendant une heure à température ambiante avec un système amplificateur biotine/streptavidine, révélé en VIP, un substrat violet de peroxydase (Vector SK 4600). L’immunomarquage a été réalisé à l’aide d’un automate pour les immunomarquages (Autostainer, Dako) et évalué par observation microscopique.
Lots concernés : T0, T(J6, J11), P(J6, J11), soit 9 explants.
Mise en évidence de l’activité hydratante et de l’action sur la réparation de la barrière cutanée et sur la différenciation cutanée d’une eau à partir d’explants de peau ex vivo.
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FE-H-153-03 du 13/11/2015 selon la procédure PR-Q-003
CONTEXTE SCIENTIFIQUE
1. Filaggrine
La filaggrine est synthétisée initialement sous forme de son précurseur, la pro-filaggrine, une protéine d’environ 400 kDa hautement phosphorylée et insoluble et qui représente le constituant principal des grains de kératohyaline de la couche granuleuse. Pendant la phase tardive de la différentiation épidermique, la pro-filaggrine est déphosphorylée et clivée, par la caspase-14, en plusieurs monomères de filaggrine (Fig.1). La filaggrine se lie ainsi aux filaments intermédiaires de kératine, en participant à leur agrégation en macrofibrilles et à la formation de l’enveloppé cornée. Au niveau de la zone intermédiaire du stratum corneum, les monomères de filaggrine sont ensuite protéolysés. Cette protéolyse participe à la formation d’un complexe très hygroscopique, le facteur naturel d’hydratation (Natural Moisturing Factor ou NMF). Le NMF permet le maintien de l’hydratation de la couche cornée et la souplesse de la peau.
Figure 1. En (a) mécanismes moléculaires impliqués dans la protéolyse de la pro-filaggrine pendant le programme de différentiation terminale épidermique (Sandllands et al., 2009 Journal of Cell Science 122, 1285-1294) et en (b) immunomarquage de la filaggrine révélé en FITC.
Mise en évidence de l’activité hydratante et de l’action sur la réparation de la barrière cutanée et sur la différenciation cutanée d’une eau à partir d’explants de peau ex vivo.
Etude 19E4523 SUBLIO page 9 sur 56
FE-H-153-03 du 13/11/2015 selon la procédure PR-Q-003
2. Involucrine
L’involucrine une protéine structurale localisée au niveau de l’épiderme supérieur. Elle est synthétisée initialement au niveau du stratum spinosum et ensuite réticulée par les transglutaminases au niveau du stratum granulosum. L’involucrine est une composante essentielle de l’enveloppe cornée (Fig. 2), la coque rigide et insoluble entourant les cornéocytes. En recherche dermo-cosmétique, elle est utilisée comme marqueur de la différentiation terminale des kératinocytes.
Figure 2. Représentation schématique de l’enveloppe cornée et immunomarquage typique de l’involucrine (Adapté à partir de Candi et al., 2005. The cornfied envelope: a model of cell death in the skin. Nat Rev Mol Cell Biol. 6: 329-340). In (b), Immunomarquage de l’involucrine révélé en VIP. Abbreviations : SC, stratum corneum; E, Epiderme; d, derme; sPRP, small prolin-rich proteins.
(a) (b)
SC
d
E
Mise en évidence de l’activité hydratante et de l’action sur la réparation de la barrière cutanée et sur la différenciation cutanée d’une eau à partir d’explants de peau ex vivo.
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FE-H-153-03 du 13/11/2015 selon la procédure PR-Q-003
3. AQP3
Les aquaporines (AQPs) sont une famille de protéines intégrales membranaires,de petite taille et hydrophobiques, impliquées dans le transport de l’eau à traversla membrane plasmique (Fig. 4). Jusqu’alors, 13 gènes codant pour 12 AQPs ontété identifiés chez les mammifères, qui ont été regroupés en deux groupes sur labase de leur perméabilité. Les AQPs sont exprimées chez une grande variété decellules, y compris les kératinocytes.L’aquaporine de type 3 (AQP3) est un transporteur membranaire spécifique pourl’eau et le glycérol et est normalement exprimée au sein de l’épiderme. Plusieursfacteurs, tels que certaines pathologies cutanées, tel que l’eczéma atopique,certains agents, notamment le rétinol ou encore des agents abiotiques tels que lesUVs peuvent affecter l’expression de l’aquaporine 3.
Figure 4. Rôle biologique de l’AQP 3 (a) et immunomarquage de l’AQP3 révélé en fastred (b).
(a) (b)
d
SC
Mise en évidence de l’activité hydratante et de l’action sur la réparation de la barrière cutanée et sur la différenciation cutanée d’une eau à partir d’explants de peau ex vivo.
Etude 19E4523 SUBLIO page 11 sur 56
FE-H-153-03 du 13/11/2015 selon la procédure PR-Q-003
RESULTATS & DISCUSSION
1. Viabilité cellulaire
La viabilité cellulaire de tous les lots est montrée ci-dessous :
Lot Viabilité cellulaire
Commentaires Epiderme Derme
T0 B B Stratum corneum (SC) faiblement épais
et modérément feuilleté
D0 AB B SC faiblement épais
et modérément feuilleté
P3h B B SC modérément épais et modérément feuilleté
D3h B B SC faiblement épais et faiblement feuilleté
DP3h B B SC faiblement épais et faiblement feuilleté
T24h B B SC modérément épais et modérément feuilleté
P24h B B SC modérément épais et modérément feuilleté
D24h B B SC très faiblement épais et très faiblement feuilleté
DP24h B B SC très faiblement épais et très faiblement feuilleté
TJ6 AB B SC modérément épais et modérément feuilleté
PJ6 AB B SC assez nettement épais et assez nettement feuilleté
TJ11 AB B SC assez nettement épais et assez nettement feuilleté
PJ11 AB B SC nettement épais
et assez nettement feuilleté
Légende de la morphologie : B= Bonne, AB= Assez bonne, TLA= Très légèrement altérée, LA= Légèrement altérée, MA= Modérément altérée, ANA= Assez nettement altérée, NA= Nettement altérée, TNA= Très nettement altérée
Mise en évidence de l’activité hydratante et de l’action sur la réparation de la barrière cutanée et sur la différenciation cutanée d’une eau à partir d’explants de peau ex vivo.
Etude 19E4523 SUBLIO page 12 sur 56
FE-H-153-03 du 13/11/2015 selon la procédure PR-Q-003
A J0,
Sur le lot témoin T0, la viabilité cellulaire est bonne dans l’épiderme et dans le derme. Le stratum corneum (SC) est faiblement épais et modérément feuilleté.
La délipidation D (D0) n’induit pas de modification de la viabilité des cellules de
l’épiderme et du derme, ni de modification de l’aspect du stratum corneum,
comparé à T0.
A 3h,
Effet du produit sur la viabilité cellulaire, après 3h, comparé à T0 :
- Le produit P n’induit pas de modification de la viabilité cellulaire mais
augmente légèrement l’épaisseur du SC.
La délipidation D après 3h (D3h) n’induit pas de modification de la viabilité des
cellules de l’épiderme et du derme, mais diminue légèrement l’aspect feuilleté du
stratum corneum sans modifier son épaisseur, comparé à T0.
Effet du produit sur la viabilité cellulaire, comparé à D3h :
- Le produit P n’induit pas de modification de la viabilité cellulaire ni de l’aspect
du SC.
A 24h,
Sur le lot témoin T24h, la viabilité cellulaire est bonne dans l’épiderme et dans le derme. Le stratum corneum (SC) est modérément épais et modérément feuilleté.
Effet du produit sur la viabilité cellulaire, comparé à T24h :
- Le produit P n’induit pas de modification de la viabilité cellulaire ni de l’aspect
du SC.
La délipidation D (D24h) n’induit pas de modification de la viabilité des cellules
de l’épiderme et du derme, mais diminue modérément l’épaisseur et l’aspect
feuilleté du stratum corneum, comparé à T24h.
Effet du produit sur la viabilité cellulaire, comparé à D24h :
- Le produit P n’induit pas de modification de la viabilité cellulaire ni de l’aspect
du SC.
Mise en évidence de l’activité hydratante et de l’action sur la réparation de la barrière cutanée et sur la différenciation cutanée d’une eau à partir d’explants de peau ex vivo.
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FE-H-153-03 du 13/11/2015 selon la procédure PR-Q-003
A J6,
Sur le lot témoin TJ6, la viabilité cellulaire est assez bonne dans l’épiderme et bonne dans le derme. Le stratum corneum (SC) est modérément épais et modérément feuilleté.
Effet du produit sur la viabilité cellulaire, comparé à TJ6 :
- Le produit P n’induit pas de modification de la viabilité cellulaire mais
augmente légèrement l’épaisseur et l’aspect feuilleté du SC.
A J11,
Sur le lot témoin TJ11, la viabilité cellulaire est assez bonne dans l’épiderme et bonne dans le derme. Le stratum corneum (SC) est assez nettement épais et assez nettement feuilleté.
Effet du produit sur la viabilité cellulaire, comparé à TJ11 :
- Le produit P n’induit pas de modification de la viabilité cellulaire mais
augmente légèrement l’épaisseur du SC sans modifier son aspect feuilleté.
Mise en évidence de l’activité hydratante et de l’action sur la réparation de la barrière cutanée et sur la différenciation cutanée d’une eau à partir d’explants de peau ex vivo.
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2. FilaggrineL’expression de la filaggrine à la base du stratum corneum sur tous les lots estmontrée ci-dessous :
TF F M AN N TN Fo
T0
D0
D3h
DP3h
T24h
P24h
D24h
DP24h
TF F M AN N TN Fo
TF=Très Faible F=Faible M =Modéré AN=Assez Net N=Net TN=Très Net Fo=Fort
A J0,
Sur le lot témoin T0, le marquage de la filaggrine est faible à la base du stratum corneum (SC).
La délipidation D (D0) n’induit pas de modification de l’expression de la filaggrine,
comparé à T0.
La délipidation D après 3h (D3h) induit une légère diminution de la filaggrine,
comparé à T0.
Effet du produit sur l’expression de la filaggrine, comparé à D3h :
- Le produit P induit une augmentation modérée.
Le produit P induit donc une protection complète contre la répression de
la filaggrine induite par la délipidation.
A 24h,
Sur le lot témoin T24h, l’expression de la filaggrine est modérée à la base du stratum corneum (SC).
Effet du produit sur l’expression de la filaggrine, comparé à T24h :
Le produit P n’induit pas de modification
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La délipidation D (D24h) induit une diminution modérée de la filaggrine, comparé
à T24h.
Effet du produit sur l’expression de la filaggrine, comparé à D24h :
- Le produit P induit une augmentation assez nette.
Le produit P induit donc une protection complète contre la répression de
la filaggrine induite par la délipidation.
Mise en évidence de l’activité hydratante et de l’action sur la réparation de la barrière cutanée et sur la différenciation cutanée d’une eau à partir d’explants de peau ex vivo.
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3. Involucrine
L’expression de l’involucrine dans la couche granuleuse de l’épiderme sur tous les lots est montrée ci-dessous :
TF F M AN N TN Fo
T0
TJ6
PJ6
TF F M AN N TN Fo
TF=Très Faible F=Faible M =Modéré AN=Assez Net N=Net TN=Très Net Fo=Fort
A J0,
Sur le lot témoin T0, le marquage de l’involucrine est assez net à net dans la couche granuleuse de l’épiderme.
A J6,
Sur le lot témoin TJ6, l’expression de l’involucrine est assez nette à nette dans la couche granuleuse de l’épiderme.
Effet du produit sur l’expression de l’involucrine, comparé à TJ6 :
- Le produit P induit une légère augmentation
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4. AQP3
L’expression de l’aquaporine 3 (AQP3) dans l’ épiderme sur tous les lots est montrée ci-dessous :
TF F M AN N TN Fo
T0
TJ6
PJ6
TJ11
PJ11
TF F M AN N TN Fo
TF=Très Faible F=Faible M =Modéré AN=Assez Net N=Net TN=Très Net Fo=Fort
A J0,
Sur le lot témoin T0, le marquage de l’AQP3 est net à très net dans l’épiderme.
A J6,
Sur le lot témoin TJ6, l’expression de l’AQP3 est nette à très nette dans l’épiderme.
Effet du produit sur l’expression de l’AQP3, comparé à TJ6 :
- Le produit P induit une diminution légère
A J11,
Sur le lot témoin TJ11, l’expression de l’AQP3 est assez nette dans l’épiderme.
Effet du produit sur l’expression de l’AQP3, comparé à TJ11 :
- Le produit P induit une diminution assez nette
Mise en évidence de l’activité hydratante et de l’action sur la réparation de la barrière cutanée et sur la différenciation cutanée d’une eau à partir d’explants de peau ex vivo.
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FE-H-153-03 du 13/11/2015 selon la procédure PR-Q-003
CONCLUSION
Selon les conditions expérimentales décrites ci-dessus et comparé au lot témoin T ou au lot délipidé D à J0, 3h, J1, J6 ou J11:
Variation vs T ou D Produit P
Viabilité cellulaire
Vs T0, après 3h
viabilité Epaisseur SC
Vs D3h viabilité SC
Vs T24h viabilité SC
Vs D24h viabilité SC
Vs TJ6
viabilité Epaisseur SC
Aspect feuilleté SC
Vs TJ11 viabilité
Epaisseur SC
Filaggrine
Vs D3h
Vs T24h
Vs D24h
Involucrine Vs TJ6
AQP3
Vs TJ6
Vs TJ11
Diminution Augmentation Aucune variation
Légère
Moderée
Assez nette
Nette
Très nette
Forte SC Stratum corneum
Mise en évidence de l’activité hydratante et de l’action sur la réparation de la barrière cutanée et sur la différenciation cutanée d’une eau à partir d’explants de peau ex vivo.
Etude 19E4523 SUBLIO page 19 sur 56
FE-H-153-03 du 13/11/2015 selon la procédure PR-Q-003
Restauration de la barrière cutanée
La délipidation de la surface cutanée entraine une altération de la fonction barrière. En réponse, la peau tente de restaurer la fonction barrière, notamment, en dégradant la filaggrine pour augmenter les NMF (natural moisturizing factors) qui sont capables de fixer une grande quantité d’eau et assurer une bonne hydratation du stratum corneum. Lorsque le produit « eau ionique produite grâce au dispositif SUBLIO IONIC WATERBOX » (P) est appliqué après la délipidation, la filaggrine n’est pas dégradée. Donc, le produit « eau ionique produite grâce au dispositif SUBLIO IONIC WATERBOX » (P) a compensé ou restauré rapidement la fonction barrière, rendant inutile la dégradation de la filaggrine. L’eau ionique produite grâce au dispositif SUBLIO IONIC WATERBOX a
un excellent effet réparateur de la barrière cutanée.
Activité sur la différenciation Après 6 jours d’application, le produit « eau ionique produite grâce au dispositif SUBLIO IONIC WATERBOX » (P) induit une augmentation de l’involucrine. Il améliore la formation des enveloppes cornées nécessaire au cours de la différenciation et la formation du stratum corneum. L’eau ionique produite grâce au dispositif SUBLIO IONIC WATERBOX a
un effet notable et positif sur la formation et le renforcement du stratum corneum.
Activité hydratante Après 6 et 11 jours de traitement, le produit « eau ionique produite grâce au dispositif SUBLIO IONIC WATERBOX » (P) améliore notablement l’épaisseur et l’aspect feuilleté du stratum corneum, traduisant un meilleur état d’hydratation du stratum corneum. Après 6 et 11 jours d’application, le produit « eau ionique produite grâce au dispositif SUBLIO IONIC WATERBOX » (P) réduit l’AQP3. Cependant, il favorise la réparation de la fonction barrière (filaggrine après délipidation), améliore l’aspect du stratum corneum (morphologie) et favorise la formation des enveloppes cornées (involucrine). Ces activités montrent que le produit améliore le stratum corneum et sa fonction barrière, réduisant ses besoins en eau et donc pourrait expliquer la diminution de l’AQP3 qui régule les flux hydriques à travers l’épiderme. L’eau ionique produite grâce au dispositif SUBLIO IONIC WATERBOX
présente un bon effet hydratant notable.
Mise en évidence de l’activité hydratante et de l’action sur la réparation de la barrière cutanée et sur la différenciation cutanée d’une eau à partir d’explants de peau ex vivo.
Etude 19E4523 SUBLIO page 20 sur 56
FE-H-153-03 du 13/11/2015 selon la procédure PR-Q-003
ANNEXES
1. Viabilité cellulaire
50 µm T0_1-1
19E4523 TCM
Lot témoin à J0 (T0)
50 µm T0_3-3 19E4523 TCM
Mise en évidence de l’activité hydratante et de l’action sur la réparation de la barrière cutanée et sur la différenciation cutanée d’une eau à partir d’explants de peau ex vivo.
Etude 19E4523 SUBLIO page 21 sur 56
FE-H-153-03 du 13/11/2015 selon la procédure PR-Q-003
50 µm D0_7-13
Viabilité cellulaire
19E4523 TCM
Lot D à J0 (D0)
50 µm D0_10-15 19E4523 TCM
Mise en évidence de l’activité hydratante et de l’action sur la réparation de la barrière cutanée et sur la différenciation cutanée d’une eau à partir d’explants de peau ex vivo.
Etude 19E4523 SUBLIO page 22 sur 56
FE-H-153-03 du 13/11/2015 selon la procédure PR-Q-003
50 µm P3h_13-24
Viabilité cellulaire
19E4523 TCM
Lot P à 3h (P3h)
50 µm P3h_17-25 19E4523 TCM
Mise en évidence de l’activité hydratante et de l’action sur la réparation de la barrière cutanée et sur la différenciation cutanée d’une eau à partir d’explants de peau ex vivo.
Etude 19E4523 SUBLIO page 23 sur 56
FE-H-153-03 du 13/11/2015 selon la procédure PR-Q-003
50 µm D3h_14-35
Viabilité cellulaire
19E4523 TCM
Lot D à 3h (D3h)
50 µm D3h_15-36 19E4523 TCM
Mise en évidence de l’activité hydratante et de l’action sur la réparation de la barrière cutanée et sur la différenciation cutanée d’une eau à partir d’explants de peau ex vivo.
Etude 19E4523 SUBLIO page 24 sur 56
FE-H-153-03 du 13/11/2015 selon la procédure PR-Q-003
50 µm DP3h_6-39
Viabilité cellulaire
19E4523 TCM
Lot DP à 3h (DP3h)
50 µm DP3h_17-45 19E4523 TCM
Mise en évidence de l’activité hydratante et de l’action sur la réparation de la barrière cutanée et sur la différenciation cutanée d’une eau à partir d’explants de peau ex vivo.
Etude 19E4523 SUBLIO page 25 sur 56
FE-H-153-03 du 13/11/2015 selon la procédure PR-Q-003
50 µm T24h_4-47
Viabilité cellulaire
19E4523 TCM
Lot témoin à 24h (T24h)
50 µm T24h_5-48 19E4523 TCM
Mise en évidence de l’activité hydratante et de l’action sur la réparation de la barrière cutanée et sur la différenciation cutanée d’une eau à partir d’explants de peau ex vivo.
Etude 19E4523 SUBLIO page 26 sur 56
FE-H-153-03 du 13/11/2015 selon la procédure PR-Q-003
50 µm P24h_4-57
Viabilité cellulaire
19E4523 TCM
Lot P à 24h (P24h)
50 µm P24h_7-58 19E4523 TCM
Mise en évidence de l’activité hydratante et de l’action sur la réparation de la barrière cutanée et sur la différenciation cutanée d’une eau à partir d’explants de peau ex vivo.
Etude 19E4523 SUBLIO page 27 sur 56
FE-H-153-03 du 13/11/2015 selon la procédure PR-Q-003
50 µm D24h_2-64
Viabilité cellulaire
19E4523 TCM
Lot D à 24h (D24h)
50 µm D24h_9-69 19E4523 TCM
Mise en évidence de l’activité hydratante et de l’action sur la réparation de la barrière cutanée et sur la différenciation cutanée d’une eau à partir d’explants de peau ex vivo.
Etude 19E4523 SUBLIO page 28 sur 56
FE-H-153-03 du 13/11/2015 selon la procédure PR-Q-003
50 µm DP24h_4-74
Viabilité cellulaire
19E4523 TCM
Lot DP à 24h (DP24h)
50 µm DP24h_15-80 19E4523 TCM
Mise en évidence de l’activité hydratante et de l’action sur la réparation de la barrière cutanée et sur la différenciation cutanée d’une eau à partir d’explants de peau ex vivo.
Etude 19E4523 SUBLIO page 29 sur 56
FE-H-153-03 du 13/11/2015 selon la procédure PR-Q-003
50 µm TJ6_10-89
Viabilité cellulaire
19E4523 TCM
Lot témoin à J6 (TJ6)
50 µm TJ6_11-90 19E4523 TCM
Mise en évidence de l’activité hydratante et de l’action sur la réparation de la barrière cutanée et sur la différenciation cutanée d’une eau à partir d’explants de peau ex vivo.
Etude 19E4523 SUBLIO page 30 sur 56
FE-H-153-03 du 13/11/2015 selon la procédure PR-Q-003
50 µm PJ6_24-101
Viabilité cellulaire
19E4523 TCM
Lot P à J6 (PJ6)
50 µm PJ6_26-102 19E4523 TCM
Mise en évidence de l’activité hydratante et de l’action sur la réparation de la barrière cutanée et sur la différenciation cutanée d’une eau à partir d’explants de peau ex vivo.
Etude 19E4523 SUBLIO page 31 sur 56
FE-H-153-03 du 13/11/2015 selon la procédure PR-Q-003
50 µm TJ11_10-108
Viabilité cellulaire
19E4523 TCM
Lot témoin à J11 (TJ11)
50 µm TJ11_16-111 19E4523 TCM
Mise en évidence de l’activité hydratante et de l’action sur la réparation de la barrière cutanée et sur la différenciation cutanée d’une eau à partir d’explants de peau ex vivo.
Etude 19E4523 SUBLIO page 32 sur 56
FE-H-153-03 du 13/11/2015 selon la procédure PR-Q-003
50 µm PJ11_2-113
Viabilité cellulaire
19E4523 TCM
Lot P à J11 (PJ11)
50 µm PJ11_4-114 19E4523 TCM
Mise en évidence de l’activité hydratante et de l’action sur la réparation de la barrière cutanée et sur la différenciation cutanée d’une eau à partir d’explants de peau ex vivo.
Etude 19E4523 SUBLIO page 33 sur 56
FE-H-153-03 du 13/11/2015 selon la procédure PR-Q-003
2. Filaggrine
50 µm Tm_2-92
19E4523 Filaggrine
Contrôle négatif sans anticorps primaire (Tm)
Mise en évidence de l’activité hydratante et de l’action sur la réparation de la barrière cutanée et sur la différenciation cutanée d’une eau à partir d’explants de peau ex vivo.
Etude 19E4523 SUBLIO page 34 sur 56
FE-H-153-03 du 13/11/2015 selon la procédure PR-Q-003
50 µm T0_5-5
Filaggrine
19E4523 Filaggrine
Lot témoin à J0 (T0)
50 µm T0_8-8 19E4523 Filaggrine
Mise en évidence de l’activité hydratante et de l’action sur la réparation de la barrière cutanée et sur la différenciation cutanée d’une eau à partir d’explants de peau ex vivo.
Etude 19E4523 SUBLIO page 35 sur 56
FE-H-153-03 du 13/11/2015 selon la procédure PR-Q-003
50 µm D0_2-11
Filaggrine
19E4523 Filaggrine
Lot D à J0 (D0)
50 µm D0_6-15 19E4523 Filaggrine
Mise en évidence de l’activité hydratante et de l’action sur la réparation de la barrière cutanée et sur la différenciation cutanée d’une eau à partir d’explants de peau ex vivo.
Etude 19E4523 SUBLIO page 36 sur 56
FE-H-153-03 du 13/11/2015 selon la procédure PR-Q-003
50 µm D3h_4-31
Filaggrine
19E4523 Filaggrine
Lot D à 3h (D3h)
50 µm D3h_5-32 19E4523 Filaggrine
Mise en évidence de l’activité hydratante et de l’action sur la réparation de la barrière cutanée et sur la différenciation cutanée d’une eau à partir d’explants de peau ex vivo.
Etude 19E4523 SUBLIO page 37 sur 56
FE-H-153-03 du 13/11/2015 selon la procédure PR-Q-003
50 µm DP3h_1-55
Filaggrine
19E4523 Filaggrine
Lot DP à 3h (DP3h)
50 µm DP3h_6-60 19E4523 Filaggrine
Mise en évidence de l’activité hydratante et de l’action sur la réparation de la barrière cutanée et sur la différenciation cutanée d’une eau à partir d’explants de peau ex vivo.
Etude 19E4523 SUBLIO page 38 sur 56
FE-H-153-03 du 13/11/2015 selon la procédure PR-Q-003
50 µm T24h_1-46
Filaggrine
19E4523 Filaggrine
Lot témoin à 24h (T24h)
50 µm T24h_6-51 19E4523 Filaggrine
Mise en évidence de l’activité hydratante et de l’action sur la réparation de la barrière cutanée et sur la différenciation cutanée d’une eau à partir d’explants de peau ex vivo.
Etude 19E4523 SUBLIO page 39 sur 56
FE-H-153-03 du 13/11/2015 selon la procédure PR-Q-003
50 µm P24h_4-67
Filaggrine
19E4523 Filaggrine
Lot P à 24h (P24h)
50 µm P24h_7-70 19E4523 Filaggrine
Mise en évidence de l’activité hydratante et de l’action sur la réparation de la barrière cutanée et sur la différenciation cutanée d’une eau à partir d’explants de peau ex vivo.
Etude 19E4523 SUBLIO page 40 sur 56
FE-H-153-03 du 13/11/2015 selon la procédure PR-Q-003
50 µm D24h_5-77
Filaggrine
19E4523 Filaggrine
Lot D à 24h (D24h)
50 µm D24h_6-78 19E4523 Filaggrine
Mise en évidence de l’activité hydratante et de l’action sur la réparation de la barrière cutanée et sur la différenciation cutanée d’une eau à partir d’explants de peau ex vivo.
Etude 19E4523 SUBLIO page 41 sur 56
FE-H-153-03 du 13/11/2015 selon la procédure PR-Q-003
50 µm DP24h_6-87
Filaggrine
19E4523 Filaggrine
Lot DP à 24h (DP24h)
50 µm DP24h_8-89 19E4523 Filaggrine
Mise en évidence de l’activité hydratante et de l’action sur la réparation de la barrière cutanée et sur la différenciation cutanée d’une eau à partir d’explants de peau ex vivo.
Etude 19E4523 SUBLIO page 42 sur 56
FE-H-153-03 du 13/11/2015 selon la procédure PR-Q-003
3. Involucrine
50 µm Tem_3-30
19E4523 Involucrine
Contrôle négatif sans anticorps primaire
Mise en évidence de l’activité hydratante et de l’action sur la réparation de la barrière cutanée et sur la différenciation cutanée d’une eau à partir d’explants de peau ex vivo.
Etude 19E4523 SUBLIO page 43 sur 56
FE-H-153-03 du 13/11/2015 selon la procédure PR-Q-003
50 µm T0_7-4
Involucrine
19E4523 Involucrine
Lot témoin à J0 (T0)
50 µm T0_8-5 19E4523 Involucrine
Mise en évidence de l’activité hydratante et de l’action sur la réparation de la barrière cutanée et sur la différenciation cutanée d’une eau à partir d’explants de peau ex vivo.
Etude 19E4523 SUBLIO page 44 sur 56
FE-H-153-03 du 13/11/2015 selon la procédure PR-Q-003
50 µm TJ6_2-10
Involucrine
19E4523 Involucrine
Lot témoin à J6 (TJ6)
50 µm TJ6_8-15 19E4523 Involucrine
Mise en évidence de l’activité hydratante et de l’action sur la réparation de la barrière cutanée et sur la différenciation cutanée d’une eau à partir d’explants de peau ex vivo.
Etude 19E4523 SUBLIO page 45 sur 56
FE-H-153-03 du 13/11/2015 selon la procédure PR-Q-003
50 µm PJ6_2-20
Involucrine
19E4523 Involucrine
Lot P à J6 (PJ6)
50 µm PJ6_7-23 19E4523 Involucrine
Mise en évidence de l’activité hydratante et de l’action sur la réparation de la barrière cutanée et sur la différenciation cutanée d’une eau à partir d’explants de peau ex vivo.
Etude 19E4523 SUBLIO page 46 sur 56
FE-H-153-03 du 13/11/2015 selon la procédure PR-Q-003
4. AQP3
50 µm Tem_3-48
19E4523 AQP3
Contrôle négatif sans anticorps primaire
Mise en évidence de l’activité hydratante et de l’action sur la réparation de la barrière cutanée et sur la différenciation cutanée d’une eau à partir d’explants de peau ex vivo.
Etude 19E4523 SUBLIO page 47 sur 56
FE-H-153-03 du 13/11/2015 selon la procédure PR-Q-003
50 µm T0_12-6
AQP3
19E4523 AQP3
Lot témoin à J0 (T0)
50 µm T0_15-9 19E4523 AQP3
Mise en évidence de l’activité hydratante et de l’action sur la réparation de la barrière cutanée et sur la différenciation cutanée d’une eau à partir d’explants de peau ex vivo.
Etude 19E4523 SUBLIO page 48 sur 56
FE-H-153-03 du 13/11/2015 selon la procédure PR-Q-003
50 µm TJ6_2-10
AQP3
19E4523 AQP3
Lot témoin à J6 (TJ6)
50 µm TJ6_3-11 19E4523 AQP3
Mise en évidence de l’activité hydratante et de l’action sur la réparation de la barrière cutanée et sur la différenciation cutanée d’une eau à partir d’explants de peau ex vivo.
Etude 19E4523 SUBLIO page 49 sur 56
FE-H-153-03 du 13/11/2015 selon la procédure PR-Q-003
50 µm PJ6_7-23
AQP3
19E4523 AQP3
Lot P à J6 (PJ6)
50 µm PJ6_8-24 19E4523 AQP3
Mise en évidence de l’activité hydratante et de l’action sur la réparation de la barrière cutanée et sur la différenciation cutanée d’une eau à partir d’explants de peau ex vivo.
Etude 19E4523 SUBLIO page 50 sur 56
FE-H-153-03 du 13/11/2015 selon la procédure PR-Q-003
50 µm TJ11_2-29
AQP3
19E4523 AQP3
Lot témoin à J11 (TJ11)
50 µm TJ11_3-30 19E4523 AQP3
Mise en évidence de l’activité hydratante et de l’action sur la réparation de la barrière cutanée et sur la différenciation cutanée d’une eau à partir d’explants de peau ex vivo.
Etude 19E4523 SUBLIO page 51 sur 56
FE-H-153-03 du 13/11/2015 selon la procédure PR-Q-003
50 µm PJ11_3-39
AQP3
19E4523 AQP3
Lot P à J11 (PJ11)
50 µm PJ11_6-40 19E4523 AQP3
Mise en évidence de l’activité hydratante et de l’action sur la réparation de la barrière cutanée et sur la différenciation cutanée d’une eau à partir d’explants de peau ex vivo.
Etude 19E4523 SUBLIO page 52 sur 56
FE-H-153-03 du 13/11/2015 selon la procédure PR-Q-003
DEVIATIONS
Aucune.
ATTESTATIONS QUALITE
L’étude qui fait l’objet de ce présent rapport a été réalisée dans l’esprit des Bonnes Pratiques du Laboratoire (Arrêté du 10 Aout 2004), ainsi qu’en respectant les procédures et modes opératoires validés par le Laboratoire BIO-EC. Les audits réalisés permettent de s’assurer que toutes les étapes de l’étude sont contrôlées. Les dates et les phases inspectées lors de nos différents audits sont indiquées dans le tableau ci-dessous :
Type d’audit
Date Etape contrôlée
Date de diffusion du rapport au Directeur d’Etude
Date de diffusion du rapport au
Directeur de l’installation
d’essai
Interne 11/04/2017 Ressources humaines 20/04/2017 20/04/2017
Interne 15/05/2017 Réception, conservation et
destruction des éléments d’essai 24/05/2017 24/05/2017
Interne 16/05/2017 Réception, conservation et
destruction des systèmes d’essai 24/05/2017 24/05/2017
Interne 19/05/2017 Réception, conservation et
destruction des réactifs et anticorps 31/05/2017 31/05/2017
Interne 07/06/2017 Environnement de l’étude et gestion
des déchets 16/06/2017 16/06/2017
Interne 19/07/2017 Documentation Qualité 28/07/2017 28/07/2017
Interne 11/09/2017 Equipement 15/09/2017 15/09/2017
Interne 10/11/2017 Archive 16/11/2017 16/11/2017
Interne 04/04/2018 Ressources humaines 09/04/2018 09/04/2018
Interne 03/05/2018 Réception, conservation et
destruction des éléments d’essai 16/05/2018 16/05/2018
Interne 04/05/2018 Réception, conservation et
destruction des systèmes d’essai 16/05/2018 16/05/2018
Interne 07/06/2018 Réception, conservation et
destruction des réactifs et anticorps 18/06/2018 18/06/2018
Interne 22/06/2018 Environnement de l’étude et gestion
des déchets 26/06/2018 26/06/2018
Mise en évidence de l’activité hydratante et de l’action sur la réparation de la barrière cutanée et sur la différenciation cutanée d’une eau à partir d’explants de peau ex vivo.
Etude 19E4523 SUBLIO page 53 sur 56
FE-H-153-03 du 13/11/2015 selon la procédure PR-Q-003
Ce rapport a été examiné par le Responsable Qualité qui atteste que les méthodes et les modes opératoires ont été entièrement respectés. Ce rapport a été examiné par le Directeur d’étude qui atteste que les observations et les résultats obtenus sont fidèlement indiqués et reflètent avec exactitude les données brutes de l’étude. Le directeur de l’installation d’essai a vérifié que la responsabilité de l’assurance de la qualité est assumée conformément à l’esprit des bonnes pratiques de laboratoire.
Directeur d’étude
Date et signa ture
Responsable Assurance Qualité
Date et signature :
Directeur de l’installation d’essai Date et signature :
L. Peno-Mazzarino M. Daniel E. Lati
23.09.2019
23.09.2019
23.09.2019
Mise en évidence de l’activité hydratante et de l’action sur la réparation de la barrière cutanée et sur la différenciation cutanée d’une eau à partir d’explants de peau ex vivo.
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FE-H-153-03 du 13/11/2015 selon la procédure PR-Q-003
ARCHIVAGE DE L’ETUDE
Archivage des données brutes Les données brutes obtenues sont :
- Observations microscopiques - Résultats d’analyses d’images - Résultats de dosages - Résultats à l’aide d’appareils biométrologiques
Toutes ces données brutes sont conservées dans le dossier papier de l’étude, et une sauvegarde informatique est faite lorsque cela est possible (suivant les appareils).
Archivage des produits ; échantillons ; blocs et lames Les produits confiés au Laboratoire BIO-EC sont conservés pendant 1 an après la fin d’utilisation du produit. Les blocs en paraffine, les lames colorées et les immunomarquages révélés en peroxydase et phosphatase alcaline seront conservés 15 ans dans les locaux de BIO-EC. Les blocs congelés resteront en possession du laboratoire 2 ans à -80°C. Si les milieux de culture sont prélevés durant l’étude, ils seront conservés 2 ans à -80°C. Par la suite ils seront tous éliminés, sauf avis contraire dûment stipulé par le client.
Archivage du rapport final Le dossier d’étude papier est archivé et conservé pendant 20 ans. Le dossier d’étude informatique (données brutes, images, rapports préliminaires et rapport final) ainsi que toutes les données informatiques sont sauvegardées en local par duplication (KERTEL BOX2CLOUD en RAID 1) et font l’objet d’une sauvegarde externe journalière avec le service BackUpia (KERTEL Group). Notre système informatique est protégé par les services antivirus Microsoft Security Essential, F-Secure.
Mise en évidence de l’activité hydratante et de l’action sur la réparation de la barrière cutanée et sur la différenciation cutanée d’une eau à partir d’explants de peau ex vivo.
Etude 19E4523 SUBLIO page 55 sur 56
FE-H-153-03 du 13/11/2015 selon la procédure PR-Q-003
RESUME DE L’ETUDE
Produit P : Eau ionique produite grâce au dispositif SUBLIO IONIC WATERBOX Modèle Explants de peau humaine ex vivo. Délipidation des lots D (éther/acétone) à J0. Application topique du produit P à raison de 2mg/cm2 à J0 (après la délipidation), J1, J4, J6 et J8. Arrêt des explants à J0, 3h, et 24h après délipidation, J6 et J11. Paramètres analysés : viabilité cellulaire et immunomarquages de la filaggrine, l’involucrine, et AQP3. Conclusion Selon les conditions expérimentales décrites ci-dessus et comparé au lot témoin T ou au lot délipidé D à J0, 3h, J1, J6 ou J11:
Variation vs T ou D Produit P
Viabilité cellulaire
Vs T0, après 3h viabilité
Epaisseur SC
Vs D3h viabilité SC
Vs T24h viabilité SC
Vs D24h viabilité SC
Vs TJ6 viabilité
Epaisseur SC Aspect feuilleté SC
Vs TJ11 viabilité
Epaisseur SC
Filaggrine
Vs D3h
Vs T24h
Vs D24h
Involucrine Vs TJ6
AQP3 Vs TJ6
Vs TJ11
Diminution Augmentation Aucune variation
Légère
Moderée
Assez nette
Nette
Très nette
Forte SC Stratum corneum
Mise en évidence de l’activité hydratante et de l’action sur la réparation de la barrière cutanée et sur la différenciation cutanée d’une eau à partir d’explants de peau ex vivo.
Etude 19E4523 SUBLIO page 56 sur 56
FE-H-153-03 du 13/11/2015 selon la procédure PR-Q-003
Restauration de la barrière cutanée
La délipidation de la surface cutanée entraine une altération de la fonction barrière. En réponse, la peau tente de restaurer la fonction barrière, notamment, en dégradant la filaggrine pour augmenter les NMF (natural moisturizing factors) qui sont capables de fixer une grande quantité d’eau et assurer une bonne hydratation du stratum corneum. Lorsque le produit « eau ionique produite grâce au dispositif SUBLIO IONIC WATERBOX » (P) est appliqué après la délipidation, la filaggrine n’est pas dégradée. Donc, le produit « eau ionique produite grâce au dispositif SUBLIO IONIC WATERBOX » (P) a compensé ou restauré rapidement la fonction barrière, rendant inutile la dégradation de la filaggrine. L’eau ionique produite grâce au dispositif SUBLIO IONIC WATERBOX a un
excellent effet réparateur de la barrière cutanée.
Activité sur la différenciation Après 6 jours d’application, le produit « eau ionique produite grâce au dispositif SUBLIO IONIC WATERBOX » (P) induit une augmentation de l’involucrine. Il améliore la formation des enveloppes cornées nécessaire au cours de la différenciation et la formation du stratum corneum. L’eau ionique produite grâce au dispositif SUBLIO IONIC WATERBOX a un
effet notable et positif sur la formation et le renforcement du stratum corneum.
Activité hydratante Après 6 et 11 jours de traitement, le produit « eau ionique produite grâce au dispositif SUBLIO IONIC WATERBOX » (P) améliore notablement l’épaisseur et l’aspect feuilleté du stratum corneum, traduisant un meilleur état d’hydratation du stratum corneum. Après 6 et 11 jours d’application, le produit « eau ionique produite grâce au dispositif SUBLIO IONIC WATERBOX » (P) réduit l’AQP3. Cependant, il favorise la réparation de la fonction barrière (filaggrine après délipidation), améliore l’aspect du stratum corneum (morphologie) et favorise la formation des enveloppes cornées (involucrine). Ces activités montrent que le produit améliore le stratum corneum et sa fonction barrière, réduisant ses besoins en eau et donc pourrait expliquer la diminution de l’AQP3 qui régule les flux hydriques à travers l’épiderme. L’eau ionique produite grâce au dispositif SUBLIO IONIC WATERBOX
présente un bon effet hydratant notable.