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自然免疫 / サイトカイン研究用レポーター細胞 InvivoGen 社は、TLR、C 型レクチン受容体、細胞質 DNA センサーなどのパターン認識受容体(PRR)のシグナル パスウェイの研究やリガンドスクリーニングに使用できるレポーター細胞を用意しています。また、サンプル中 のサイトカインの検出を行う細胞も用意しています。今回はレポーター細胞の中から主な製品を紹介します。 特 長 約 100 種類の細胞をラインアップ 迅速・簡便にアッセイ可能 製品ラインアップ PRR レポーター細胞 ・TLR レポーター細胞 ・NOD レポーター細胞 ・CLR レポーター細胞 ・インフラマソーム試験細胞 サイトカインレポーター細胞 ・IFN-α/β/γレポーター細胞 ・IL & TNF レポーター細胞 転写因子レポーター細胞 ・IRF レポーター細胞 ・NFAT レポーター細胞 ・NF-κB レポーター細胞 ・NF-κB & IRF レポーター細胞 ノックアウトレポーター細胞 ノックアウトのターゲットは核酸、CDN刺激によるインターフェロン応答に関与する因子です。 ・STING 遺伝子ノックアウト細胞  ・cGAS 遺伝子ノックアウト細胞  ・RIG-I 遺伝子ノックアウト細胞 など 原 理 ■ 例:NF-κB経路の活性化検出(SEAPレポーター) レポーター細胞は、レポーター遺伝子として SEAP(分泌 性胎盤アルカリホスファターゼ)とLucia(分泌型ルシフェ ラーゼ)を採用しています。NF-κB や IFN などに応答する エレメントの下流に SEAP や Lucia 遺伝子が組み込まれて います。シグナルパスウェイの活性化に応じて、これら のレポーター遺伝子が培地中に分泌発現されることから、 簡単にアッセイすることが可能です。 使用例 1 ■ THP1-Dual™ 細胞 THP1-Dual™ 細胞は、TLR を含む多くのパターン認識受容体を元来発現しているヒト免疫細胞の THP-1 細胞から作製されています。本製品は NF-κB 経路の活性化を SEAP、IRF 経路の活性化を Lucia により 評価できることから、これらの経路の活性化を同時に評価できます。 ● NF-κB / IRF 経路の活性化 PMA で処理 / 未処理の細胞に図中の物質を加えた。24 時間インキュベーション後、NF-κB経路の活性化を SEAP 検 出 試 薬 QUANTI-Blue™ で、IRF 経 路 の 活 性 化 を Lucia 検出試薬 QUANTI-Luc™ でそれぞれ測定した。 478

自然免疫/サイトカイン研究用レポーター細胞本製品のシグナル伝達経路 NF-κBの活性化 本製品は、Lucia(ルシフェラーゼ)とSEAP(アルカリホス

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Page 1: 自然免疫/サイトカイン研究用レポーター細胞本製品のシグナル伝達経路 NF-κBの活性化 本製品は、Lucia(ルシフェラーゼ)とSEAP(アルカリホス

自然免疫 /サイトカイン研究用レポーター細胞InvivoGen 社は、TLR、C 型レクチン受容体、細胞質 DNAセンサーなどのパターン認識受容体(PRR)のシグナルパスウェイの研究やリガンドスクリーニングに使用できるレポーター細胞を用意しています。また、サンプル中のサイトカインの検出を行う細胞も用意しています。今回はレポーター細胞の中から主な製品を紹介します。

特 長 ●約 100 種類の細胞をラインアップ●迅速・簡便にアッセイ可能

製品ラインアップ PRR レポーター細胞 ・TLR レポーター細胞 ・NODレポーター細胞・CLR レポーター細胞 ・インフラマソーム試験細胞

サイトカインレポーター細胞 ・IFN-α/β/γレポーター細胞 ・IL&TNF レポーター細胞

転写因子レポーター細胞 ・IRF レポーター細胞 ・NFAT レポーター細胞・NF-κBレポーター細胞 ・NF-κB&IRF レポーター細胞

ノックアウトレポーター細胞ノックアウトのターゲットは核酸、CDN刺激によるインターフェロン応答に関与する因子です。・STING 遺伝子ノックアウト細胞  ・cGAS 遺伝子ノックアウト細胞 ・RIG-I 遺伝子ノックアウト細胞 など

原 理 ■ 例:NF-κB経路の活性化検出(SEAP レポーター)

レポーター細胞は、レポーター遺伝子として SEAP(分泌性胎盤アルカリホスファターゼ)と Lucia(分泌型ルシフェラーゼ)を採用しています。NF-κB や IFN などに応答するエレメントの下流に SEAP や Lucia 遺伝子が組み込まれています。シグナルパスウェイの活性化に応じて、これらのレポーター遺伝子が培地中に分泌発現されることから、簡単にアッセイすることが可能です。

使用例 1 ■ THP1-Dual™細胞THP1-Dual™細胞は、TLR を含む多くのパターン認識受容体を元来発現しているヒト免疫細胞の THP-1細胞から作製されています。本製品はNF-κB 経路の活性化を SEAP、IRF 経路の活性化を Lucia により評価できることから、これらの経路の活性化を同時に評価できます。

● NF-κB/IRF 経路の活性化

PMA で処理 / 未処理の細胞に図中の物質を加えた。24時間インキュベーション後、NF-κB 経路の活性化をSEAP 検出試薬 QUANTI-Blue™ で、IRF 経路の活性化をLucia 検出試薬QUANTI-Luc™ でそれぞれ測定した。

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Page 2: 自然免疫/サイトカイン研究用レポーター細胞本製品のシグナル伝達経路 NF-κBの活性化 本製品は、Lucia(ルシフェラーゼ)とSEAP(アルカリホス

使用例 2 ■ THP1-Dual™KO-MyD 細胞本細胞は、ヒト THP1細胞を改変したレポーター細胞です。デュアルレポーター遺伝子の採用で、IRF 経路と NF-κB経路の活性化を同時にアッセイできます。

● 本製品のシグナル伝達経路 ● NF-κBの活性化

本製品は、Lucia(ルシフェラーゼ)と SEAP(アルカリホスファターゼ)の 2種類の分泌型レポーター遺伝子を発現します。Luciaは、5個のインターフェロン応答配列と連結されている ISG54最小プロモーターにより、SEAPは 5個の NF-κB 応答配列と 3個の c-Rel結合部位に連結されている IFN-β最小プロモーターによりコントロールされています。これにより、IRF 経路と NF-κB 経路による活性化の有無について、容易に確認することができます。また、本製品は、MyD88遺伝子がノックアウトされており、MyD88を介するシグナル伝達の有無を確認できます。

本製品およびその親株である THP1-Dual™ 細胞に図中の物質を加えた。24 時間のインキュベーション後、NF-κBの活性化を SEAP 検出試薬QUANTI-Blue™ で検出した。

価格表

細胞株 毒劇物 概要 レポーター メーカー

製品番号 容量 価格

PRR レポーター細胞

CLR レポーター細胞

HEK-Blue™hDectin-1b - HumanDectin-1b/NF-κB-reportercells SEAP hkb-hdect1b 3-7×106cells 294,000

HEK-Blue™mDectin-2 劇 MouseDectin-2/NF-κB-reportercells SEAP hkb-mdect2 3-7×106cells 294,000

HEK-Blue™mMincle 劇 MouseMincle/NF-κB-reportercells SEAP hkb-mmcl 3-7×106cells 294,000

NODレポーター細胞

HEK-Blue™hNOD1 劇 HumanNOD1/NF-κB-reportercells SEAP hkb-hnod1 3-7×106cells 294,000

HEK-Blue™hNOD2 劇 HumanNOD2/NF-κB-reportercells SEAP hkb-hnod2 3-7×106cells 294,000

HEK-Blue™mNOD1 劇 MouseNOD1/NF-κB-reportercells SEAP hkb-mnod1 3-7×106cells 294,000

HEK-Blue™mNOD2 劇 MouseNOD2/NF-κB-reportercells SEAP hkb-mnod2 3-7×106cells 294,000

TLRレポーター細胞

HEK-Blue™hTLR2 劇 HumanTLR2/NF-κB-reportercells SEAP hkb-htlr2 3-7×106cells 294,000

HEK-Blue™hTLR3 劇 HumanTLR3/NF-κB-reportercells SEAP hkb-htlr3 3-7×106cells 294,000

HEK-Blue™hTLR4 劇 HumanTLR4-MD2-CD14/NF-κB-reportercells SEAP hkb-htlr4 3-7×106cells 294,000

HEK-Blue™hTLR5 劇 HumanTLR5/NF-κB-reportercells SEAP hkb-htlr5 3-7×106cells 294,000

HEK-Blue™hTLR7 劇 HumanTLR7/NF-κB-reportercells SEAP hkb-htlr7 3-7×106cells 294,000

HEK-Blue™hTLR8 劇 HumanTLR8/NF-κB-reportercells SEAP hkb-htlr8 3-7×106cells 294,000

HEK-Blue™hTLR9 劇 HumanTLR9/NF-κB-reportercells SEAP hkb-htlr9 3-7×106cells 294,000

HEK-Blue™mTLR2 劇 MouseTLR2/NF-κB-reportercells SEAP hkb-mtlr2 3-7×106cells 294,000

HEK-Blue™mTLR3 劇 MouseTLR3/NF-κB-reportercells SEAP hkb-mtlr3 3-7×106cells 294,000

HEK-Blue™mTLR4 劇 MouseTLR4-MD2-CD14/NF-κB-reportercells SEAP hkb-mtlr4 3-7×106cells 294,000

HEK-Blue™mTLR5 劇 MouseTLR5/NF-κB-reportercells SEAP hkb-mtlr5 3-7×106cells 294,000

HEK-Blue™mTLR7 劇 MouseTLR7/NF-κB-reportercells SEAP hkb-mtlr7 3-7×106cells 294,000

HEK-Blue™mTLR8 劇 MouseTLR8/NF-κB-reportercells SEAP hkb-mtlr8 3-7×106cells 294,000

HEK-Blue™mTLR9 劇 MouseTLR9/NF-κB-reportercells SEAP hkb-mtlr9 3-7×106cells 294,000

HEK-Blue™mTLR13 劇 MouseTLR13/NF-κB-reportercells SEAP hkb-mtlr13 3-7×106cells 294,000

インフラマソーム試験細胞

THP1-defASC - ASCknockdowncells None thp-dasc 3-7×106cells 294,000

THP1-defCASP1 - Caspase-1knockdowncells None thp-dcasp1 3-7×106cells 294,000

Page 3: 自然免疫/サイトカイン研究用レポーター細胞本製品のシグナル伝達経路 NF-κBの活性化 本製品は、Lucia(ルシフェラーゼ)とSEAP(アルカリホス

細胞株 毒劇物 概要 レポーター メーカー

製品番号 容量 価格

インフラマソーム試験細胞(つづき)

THP1-defNLRP3 - NLRP3knockdowncells None thp-dnlp 3-7×106cells 294,000

THP1-Null - Controlcells None thp-null 3-7×106cells 247,000

サイトカインレポーター細胞

インターフェロンレポーター細胞

B16-Blue™IFN-α/β - TypeIIFNsreportercells SEAP bb-ifnt1 3-7×106cells 294,000

HEK-Blue™IFN-α/β 劇 HumanIFN-α/β/ISGF3reportercells SEAP hkb-ifnab 3-7×106cells 294,000

HEK-Blue™IFN-γ 劇 HumanIFN-γ/STAT1reportercells SEAP hkb-ifng 3-7×106cells 294,000

インターロイキンレポーター細胞-NF-κB/AP-1経路

HEK-Blue™IL-1β - HumanIL-1/NF-κB/AP-1reportercells SEAP hkb-il1b 3-7×106cells 294,000

HEK-Blue™IL-1R - Human-mouseIL-1/NF-κB-AP-1reportercells SEAP hkb-il1r 3-7×106cells 294,000

HEK-Blue™IL-17 劇 Human-mouseIL-17/NF-κB-AP-1reportercells SEAP hkb-il17 3-7×106cells 294,000

HEK-Blue™IL-18 劇 Human-mouseIL-18/NF-κB-AP-1reportercells SEAP hkb-hmil18 3-7×106cells 294,000

HEK-Blue™IL-33 劇 HumanIL-33/NF-κB-AP-1reportercells SEAP hkb-hil33 3-7×106cells 294,000

インターロイキンレポーター細胞- JAK/STAT経路

HEK-Blue™IL-4/IL-13 劇 Human IL-4&human-mouse IL-13 / STAT6reportercells SEAP hkb-il413 3-7×106cells 294,000

HEK-Blue™IL-6 劇 HumanIL-6/STAT3reportercells SEAP hkb-hil6 3-7×106cells 294,000

HEK-Blue™IL-12 劇 Human-mouseIL-12/STAT4reportercells SEAP hkb-il12 3-7×106cells 294,000

腫瘍懐死因子レポーター細胞

HEK-Blue™CD40L 劇 HumanCD40/NF-κB-reportercells SEAP hkb-cd40 3-7×106cells 294,000

HEK-Blue™TNF-α - HumanTNF-α/NF-κB-AP-1reportercells SEAP hkb-tnfdmyd 3-7×106cells 294,000

転写因子レポーター細胞

IRF レポーター細胞

B16-Blue™ISG - IRF-reportercells SEAP bb-ifnabg 3-7×106cells 266,000

HEK-Blue™ISG - IRF-reportercells SEAP hkb-isg 3-7×106cells 266,000

RAW-Lucia™ISG - IRF-reportercells Lucialuciferase rawl-isg 3-7×106cells 266,000

THP1-Blue™ISG - IRF-reportercells SEAP thp-isg 3-7×106cells 266,000

NFATレポーター細胞

Jurkat-Lucia™NFAT - NFAT-reportercells Lucialuciferase jktl-nfat 3-7×106cells 266,000

NF-κBレポーター細胞

Ramos-Blue™ - NF-κB/AP-1reportercells SEAP rms-sp 3-7×106cells 266,000

Ramos-Blue™KD-MyD - MyD88-KDNF-κB/AP-1reportercells SEAP rms-kdmyd 3-7×106cells 320,000

RAW-Blue™ - NF-κB/AP-1reportercells SEAP raw-sp 3-7×106cells 266,000

THP1-Lucia™NF-κB - NF-κB-reportercells Lucialuciferase thpl-nfkb 3-7×106cells 266,000

NF-κB&IRFレポーター細胞

A549-Dual™ 劇 NF-κB&IRF-reportercells SEAP-Lucia a549d-nfis 3-7×106cells 294,000

HCT116-Dual™ 劇 NF-κB&IRF-reportercells SEAP-Lucia hctd-nfis 3-7×106cells 294,000

J774-Dual™ 劇 NF-κB&IRF-reportercells SEAP-Lucia j774d-nfis 3-7×106cells 294,000

Jurkat-Dual™ 劇 NF-κB&IRF-reportercells SEAP-Lucia jktd-isnf 3-7×106cells 294,000

THP1-Dual™ 劇 NF-κB&IRF-reportercells SEAP-Lucia thpd-nfis 3-7×106cells 294,000

ノックアウトレポーター細胞

B16-Blue™ISG-KO-STING - STINGknockoutIRF-reportercells SEAP bb-kostg 3-7×106cells 320,000

HEK-Blue™ISG-KO-STING - STINGknockoutIRF-reportercells SEAP hkb-kostg 3-7×106cells 320,000

RAW-Lucia™ISG-KO-cGAS - cGASknockoutIRF-reportercells Lucialuciferase rawl-kocgas 3-7×106cells 320,000

RAW-Lucia™ISG-KO-IFI16 - IFI16knockoutIRF-reportercells Lucialuciferase rawl-koif16 3-7×106cells 320,000

RAW-Lucia™ISG-KO-IRF3 - IRF3knockoutIRF-reportercells Lucialuciferase rawl-koirf3 3-7×106cells 320,000

RAW-Lucia™ISG-KO-IRF7 - IRF7knockoutIRF-reportercells Lucialuciferase rawl-koirf7 3-7×106cells 320,000

RAW-Lucia™ISG-KO-MAVS - MAVS(IPS-1)knockoutIRF-reportercells Lucialuciferase rawl-komavs 3-7×106cells 320,000

Page 4: 自然免疫/サイトカイン研究用レポーター細胞本製品のシグナル伝達経路 NF-κBの活性化 本製品は、Lucia(ルシフェラーゼ)とSEAP(アルカリホス

ご注意 試験・研究用以外には使用しないでください。※記載の内容は、'17 年 3 月現在の情報に基づいております。※価格に消費税は含まれておりません。

ナカライテスク株式会社〒 604-0855 京都市中京区二条通烏丸西入東玉屋町 498

■販売取扱店

1703T

Web site http://www.nacalai.co.jp

0 1 2 0 - 4 8 9 - 5 5 2価格 ・ 納期のご照会製品に関する技術的なご照会 E-mail:[email protected]

TEL:075-211-2703 FAX:075-211-2673

試  薬 は こ こ に

細胞株 毒劇物 概要 レポーター メーカー

製品番号 容量 価格

ノックアウトレポーター細胞(つづき)

RAW-Lucia™ISG-KO-MDA-5 - MDA-5knockoutIRF-reportercells Lucialuciferase rawl-komda5 3-7×106cells 320,000

RAW-Lucia™ISG-KO-RIG-I - RIG-IknockoutIRF-reportercells Lucialuciferase rawl-korigi 3-7×106cells 320,000

RAW-Lucia™ISG-KO-STING - STINGknockoutIRF-reportercells Lucialuciferase rawl-kostg 3-7×106cells 320,000

RAW-Lucia™ISG-KO-TBK1 - TBK1knockoutIRF-reportercells Lucialuciferase rawl-kotbk 3-7×106cells 320,000

RAW-Lucia™ISG-KO-TREX1 - TREX1knockoutIRF-reportercells Lucialuciferase rawl-kotrex 3-7×106cells 320,000

RAW-Lucia™ISG-KO-TRIF - TRIFknockoutIRF-reportercells Lucialuciferase rawl-kotrif 3-7×106cells 320,000

THP1-Dual™KO-cGAS 劇 cGASknockoutNF-κB&IRF-reportercells SEAP-Lucia thpd-kocgas 3-7×106cells 353,000

THP1-Dual™KO-IFI16 劇 IFI16knockoutNF-κB&IRF-reportercells SEAP-Lucia thpd-koifi16 3-7×106cells 353,000

THP1-Dual™KO-MyD 劇 MyD88knockoutNF-κB&IRF-reportercells SEAP-Lucia thpd-komyd 3-7×106cells 353,000

THP1-Dual™KO-STING 劇 STINGknockoutNF-κB&IRF-reportercells SEAP-Lucia thpd-kostg 3-7×106cells 353,000

THP1-Dual™KO-TREX1 劇 TREX1knockoutNF-κB&IRF-reportercells SEAP-Lucia thpd-kotrex 3-7×106cells 353,000

参考情報:PRR リガンドスクリーニングサービス

InvivoGen 社は、PRR 関連遺伝子とNF-κB 誘導性の SEAP 遺伝子を安定的に共発現するHEK293 細胞を保有しており、そのHEK293 細胞を利用し各種化合物に対する TLR、NOD、RLR、CLR、STING の認識の有無、アゴニスト・アンタゴニストとしての作用をスクリーニングするサービスを提供してます。

特 長 ●短い納期:スクリーニングにかかる時間はわずか 3週間●低コスト:サンプル数により、大幅ディスカウントを適用

サービス内容 ・Level1:対象のリガンドがどの受容体と反応するかを試験・Level2:対象のリガンドが特定のどの受容体と反応するかを試験

■ Level1サービスの例 ■ Level2サービスの例2種類のサンプルをヒト TLR2、3、4、5、7、8、9に作用 2 種類のサンプルについてヒト TLR7 に対する、4点の

濃度で測定